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IL LABORATORIO DI AUTOIMMUNITA’Automazione nelle indagini specialistiche
Torino 8 Febbraio 2018
RavennaForlì
Cesena
Algoritmi diagnostici ed AutomazioneIntegrazione tra Immunofluorescenza indiretta
e metodi in fase solida
Rimini
Cesena
Centro Servizi AUSL RomagnaUO Patologia clinica
Settore Allergologia e AutoimmunitàDott, Conti Carlo
[email protected]@gmail.com
• Popolazione 1.125.415Posti letto 2872, Day Hospital 141, Day Service 51• Punti prelievo 125• 765 140 • 765Medici di Medicina Generale, PLS 140
La nostra Sezione
• 2 Dirigenti (1 medico ed 1 biologo, 1 biologo in formazione )
4.2TSLB (tecnici sanitari di laboratorio biomedico)
• Autoimmunità 135635 esami eseguiti nel 2017• Allergologia 126657esami eseguiti nel 2017
Vediamoli in dettaglio Anno 2017
43020Esami di Fluorescenza
28329ANA su Hep2 refertati più le diluizioni
2707 anti Mitocondrio
2065 ANCA
77808 Esami IMMUNOCAP 250
10539 anti ENA Screen10539 anti ENA Screen
9773 anti CITRULLINA
5426 anti PR3 e anti MPO
23338 anti TRANSGLUTAMINASI IgA
11157 Esami in micropiastra
500 determinazioni con IMMUNO-BLOT
SEZIONE AUTOIMMUNITA’ ED ALLERGOLOGIA
FOTO
ANTI NUCLEO su Hep2
Esame fondamentale nella diagnosticadelle patologie autoimmuni sistemiche,ormai utilizzato come uno screening.
Circa il 20% in totale delle determinazioniautoanticorpali.
Prevalenza relativa delle patologie autoimmuni sistemiche ed org spec.
• LES 0,2% del totale
Individui apparentemente saniANA Positivi:
• 5% alla diluizione 1:160• 10% alla diluizione 1:80
Il follow-up del paziente con datoautoanticorpale inattesoM. Bagnascoa, L. Grassiab, G. PesceaaDipartimento di Patologie Immunoendocrinologiche, Laboratorio di Autoimmunità, Azienda Ospedale-Università San Martino, GenovabDipartimento di Emato-oncologia, Laboratorio di Immunopatologia, Azienda Ospedale-Università San Martino, Genova
• LES 0,2% del totale• S. Sjögren 2.0%
• Tutte le altre circa in cui puòverificarsi positività degli ANA
(connettivite mista, sclerodermia, epatite autoimmune, ecc)
Circa lo 0.5%
1. La maggior parte degli Ana sono negativi2. Alta probabilità di falsi positivi3. Valore Predittivo positivo molto basso
Sensibilità especificità degli ANA
1:160
1:80
Positivo1:320
1:80
1:40
Negativo
DFS70 ed altre frazioni proteiche
• I pattern IFA sono prodotti da autoanticorpi specifici ma anche da moltianticorpi NON correlati con malattie Autoimmuni Sistemiche, fra cuiil DFS70 (e MeCP2)……10-15% (falsi positivi)
• Un falso positivo può creare problemi al clinico, al paziente ed anche• Un falso positivo può creare problemi al clinico, al paziente ed ancheal laboratorio stesso.
• E’ ormai accettato che la positività isolata al DFS70 non ha correlazionesignificativa con le malattie autoimmuni sistemiche.
• Molte patologie non autoimmuni possono produrre una positività delDFS70: dermatite atopica, asma, cistite interstiziale…………
Quale potrebbe essere la percentuale di Ana positivinon riferibile a patologie Autoimmuni Sistemiche?
Forse il 20%Forse il 20%
Anche se non assoluta,esiste una correlazione tra il pattern ANA e la
presenza di autoanticorpi anti-ENAe la patologia.
Il pattern condiziona la scelta del tipo di specificità per la ricerca degli anti-ENA
o di altre frazioni proteiche
DIFFUSE (dcSSc) LIMITED (lcSSc)
Anti-Th/To
Anti-Fibril.
Anti-U1RNP
PM-scl
OVERLAP
• dott.ssa Gabriella Morozzi (Siena)• dott.ssa Marilina Tampoia (Bari)• dott.ssa Claudia Alpini (Pavia)• dott. Ignazio Brusca (Palermo)• dott. Nicola Bizzaro (Tolmezzo)
Quantizzazione degli ENA
• Gli ENA QUANTITATIVI sono test diagnostici.
• Non devono essere utilizzati per monitorare
la malattia.la malattia.
• Non esistono standard internazionali.
• Al momento attuale potrebbero avere solo un certo valore a livello Prognostico???????????????????
ANA-Reflex: una nuovaprestazione disponibileprestazione disponibile
ANA REFLEX
NUCLEO
Con titolo = 1:80
NUCLEO
Con titolo ≥ 1:160
CITOPLASMA
Con titolo ≥ 1:320
positivo basso titolo STOP
indicazione eventuale controllo dopo 3-6 mesi
positivo
pattern e titolo
ds-DNA (ELISA)
e ENA??????
AMAENA
(SSA e Jo-1)
Se positivoCrithidia
Se positivoConfermaImmuno-blot
CONSIDERAZIONICosa perdiamo e cosa guadagnamo con l’introduzione
dell’ANA-Reflex
Guadagni:1. Per la prima volta siamo stati autorizzati dalla
Regione ad eseguire esami a cascata con una certa libertà di manovralibertà di manovra
2. Maggiore Appropiatezza e questo è un salto di qualità.3. Un piccolo risparmio.
Perdite:1. Possiamo perdere qualche Polimiosite ANA negativa difficilmente
identificabili alla fluorescenza (quindi maggiore attenzione).2. Possiamo perdere qualche SSA citoplasmatico (sempre maggiore
attenzione).
% IFA
% POS % NEG
•Abbiamo dedicato il sabato allemanutenzioni strumentali
ORGANIZZAZIONE
•Magazzino in conto deposito
UNA GRANDE SPERANZA
Avremo, speriamo entro Giugno2018,la possibilità di consultare
le cartelle cliniche
CONCLUSIONI
• Notizie cliniche almeno dai reparti interni via telematica ??
• Studiare la possibilità di applicare protocolli a cascata • Studiare la possibilità di applicare protocolli a cascata per sigola patologia concordati con i alcuni clinici ??????
• Studiare l’Efficacia dei referti di Autoimmunità ?????????
GRAZIE PER L’ATTENZIONE
Centro Servizi AUSL RomagnaUO Patologia clinica
Settore Allergologia e AutoimmunitàDott, Conti Carlo
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