Radicales libres vs Tagetes Lucida

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Resumen La planta Tagetes lucida es originaria de nuestro país, gracias a sus usos medicinales, principalmente en dolores de estómago. Se compró dicha planta en el mercado de Sonora (México CDMX) el dia 24 de septiembre del 2015, posteriormente se puso a secar durante dos semanas. Ya seca la planta, se pesaron 8.1 gramos, después dicha cantidad se pusó en un matraz Erlenmeyer el cual pesó 163.4 gramos y se colocó alcohol. En conjunto pesó 546 gramos, se tapó el matraz con papel aluminio para que así se macere la planta. El 26 de Octubre se filtró el pericón con alcohol, depositando la sustancia final en un frasco de Gerber, al cual se le colocó una tapa de papel aluminio y se dejó evaporar para así obtener el extracto de la planta. Una vez obtenido el extracto de la planta, en FES Iztacala con ayuda del radical libre 2,2­difenil­1picrilhidracilo se observó si la planta contiene antioxidantes.

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Introducción

México es un país con una gran biodiversidad, dentro de la cual existen plantas medicinales y nos interesamos en la Tagetes lucida mejor conocida como Pericón. El Pericón fue descubierto en el siglo XVI por un Códice Florentino en donde se comenta que sirve "para los que tienen cámaras (diarrea), los que escupen sangre y para la fiebre". 1En la actualidad, se usa esta planta para trastornos digestivos. También se le emplea en cólico estomacal, diarrea, disentería, empacho, tifoidea y vómito. Se prescribe para dolores en general, tales como los de espalda, de abdomen, cerebro, cuerpo, huesos, muelas , rabadilla, riñones, dolores internos y de "aire" (producidos por un cambio brusco de temperatura), enfriamiento localizado en cintura, oídos, cabeza y pecho (frialdad); dolor y tos de naturaleza reumática, al igual que para cólicos abdominales y cólico de hombres. Además es útil en problemas de reumatismo, inflamación, várices, nubes de los ojos, insomnio, resfriado, asma y en menor proporción para el susto y aire. Otras propiedades que se le atribuyen son como abortivo, carminativo, digestivo, emenagogo y contra áscaris y el mal aliento. En el tratamiento de estos padecimientos, T. lucida se emplea, en general, toda la planta, en cocimiento por vía oral y para algunas molestias gástricas. Como en todas las plantas, el Pericón contiene antioxidantes que ayudan a neutralizar los radicales libres. 2

En este trabajo se pretende mostrar que en el extracto del pericón existan antioxidantes por medio de la reducción del radical libre 2,2­difenil­1picrilhidracilo. Así mismo hemos oído hablar de los antioxidantes y los radicales libres, pero poco sabemos de ellos. Los radicales libres son moléculas inestables y muy reactivas, que se forman dentro de la mitocondria mediante el transporte de electrones. El flujo de los electrones en el metabolismo es un proceso complejo, los electrones se mueven a partir de varios metabolitos intermedios a acarreadores de electrones especializados en las reacciones catalizadas por enzimas. Posteriormente, los acarreadores donan los electrones a aceptores con elevadas afinidades por los electrones, este último proceso, genera energía. Las células contienen una variedad de transductores de energía, los cuales convierten la energía del flujo de electrones en trabajo. El oxígeno es el último aceptor de electrones, de hecho cuando logra reducirse, ganando uno de ellos aumenta a su afinidad por los mismos y se

1 Medicina tradicional mexicana.Recuperado el 19 de diciembre de 2015, de http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/monografia.php?l=3&t=peric%C3%B3n&id=8002 2 Jeremy M. Berg y John L. Tymoczko, Lubert stryer. (2008). Bioquímica . barcelona: ed Reverté.Pág 630

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transforma en radical O2, y este es muy reactivo, por lo que acepta tres electrones más que pueden ser de cualquier molécula. 3El daño en los tejidos causado por el oxígeno suele llamarse daño oxidativo , y los factores que protegen contra daño por radical libre de oxígeno se les llama antioxidantes . Esto conlleva al estrés oxidativo, que en términos químicos, es un gran aumento en la reducción del potencial celular o una gran disminución en la capacidad reductora de los pares redox celulares. El estrés oxidativo severo puede causar la muerte celular y aún una oxidación moderada puede desencadenar la apoptosis, mientras que si es muy intensa puede provocar la necrosis. Un aspecto particularmente destructivo del estrés oxidativo es la producción de especies reactivas del oxígeno (ROS por sus siglas en inglés), que incluyen los radicales libres y los peróxidos. La fuente más importante de oxígeno reactivo en condiciones normales en organismos aeróbicos es probablemente la pérdida de oxígeno activado de las mitocondrias durante el funcionamiento normal de la respiración oxidativa. Las especies reactivas de oxígeno se forman a partir del último paso en el transporte electrónico es la reducción de cuatro electrones del O2 a agua. La citocromo oxidasa como la mayoría de las oxidasas, transfiere electrones al oxígeno desde los iones metálicos que cambian sus estados de valencia con un electrón cada vez, como el hierro del hemo y el cobre en el citocromo oxidasa. Debido a que las interacciones de los transportadores de un electrón con los transportadores de dos electrones, no suelen tener una eficacia del 100%, las oxidasas generan a menudo especies de oxígeno reducidas de una forma incompleta como lo son: superóxido (O2.­) que se forma a partir de una reducción de un electrón del O2; peróxido de hidrógeno (H2O2), que se forma partir de la reducción de dos electrones, yradical hidroxilo (.OH), que se forma a partir de una reducción de tres electrones. El superóxido, el peróxido y el radical hidroxilo son todos más reactivos que el O2 y se denominan de forma colectiva especies de oxígeno reactivas (ROS), las cuales son compuestos que se derivan de la molécula de oxígeno (O2) por reducción química parcial. Algunas de ellas poseen electrones no apareados y se denominan radicales libres, aunque otras no; de ahí que se prefiera usar el término de ROS. Su gran reactividad se debe a que poseen electrones desapareados que les hace reaccionar con otras moléculas orgánicas en procesos de oxido­reducción. 4 Algunas de las menos reactivas de estas especies (como el superóxido) pueden ser convertidas por una reacción redox con metales de transición en quinonas, especie radical más agresiva que puede causar extenso daño celular. Las quinonas pueden hacer un ciclo redox con sus conjugados semi quinonas e hidroquinonas, en algunos casos, catalizando la producción de superóxido desde peróxido de hidrógeno. Metales tales como hierro, cobre, cromo, vanadio y cobalto son capaces de hacer ciclos redox en los que un solo electrón puede ser aceptado o donado por el metal. Esta acción cataliza reacciones que producen radicales y puede producir ROS.

3 Ibidem. 4 Christopher Mathews. (2002).Bioquímica. Madrid: Pearson Education. Pág 268

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Este desequilibrio y predominio de los radicales libres se debe a múltiples causas: las endógenas (producidas por el propio organismo en su funcionamiento); otras causas, las exógenas, se deben a factores externos: contaminación ambiental; obesidad, sedentarismo, hábitos tóxicos; estrés prolongado; desconocimiento nutricional; exposición indebida al sol o a diversas enfermedades. Un claro ejemplo de como afectan las macromoléculas son los lípidos, es allí en donde se produce el daño mayor en un proceso que se conoce como peroxidación lipídica o enranciamiento oxidativo, que representa una forma de daño hístico que puede ser desencadenado por el oxígeno, el oxígeno singlete, el peróxido de hidrógeno y el radical hidroxilo. 5 Las distintas especies reactivas de oxígeno pueden participar en distintos tipos de reacciones en las que pueden sufrir procesos de oxidación o reducción. De menor a mayor grado de reducción son especies reactivas de oxígeno: •El anión superóxido O2­ que es un potente agente oxidante muy reactivo con el agua •El peróxido de hidrógeno H2O2 •El radical hidroxilo .OH que es el más reactivo. •También pertenecen a las ROS el óxido nítrico (NO) y el HONO2­. Al ser especies reactivas las ROS pueden producir efectos dañinos sobre las células como: •Daños en el ADN •Daños producidos por oxidación de ácidos grasos poliinsaturados y de aminoácidos •Daños producidos por reacciones con metales como el hierro y el cobre. En los peroxisomas del hígado el peróxido de hidrógeno participa con la catalasa en funciones de detoxificación realizando la oxidación de ciertas sustancias como alcoholes, ácido fórmico o fenoles. El radical hidroxilo daña a las proteínas de varias formas y daña a las membranas iniciando la oxidación de los ácidos grasos en los lípidos de la membrana en un proceso denominado “peroxidación lipídica”, esta, es una reacción en cadena, ya que cada rastro de ácido graso sufre una la peroxidación genera un radical que puede iniciar otra reacción de peroxidación. El radical hidroxilo también daña a los ácidos nucleicos, produciendo la ruptura de la cadena de polinucleótidos (la ruptura de la doble cadena del DNA son letales) y cambiando las bases de la estructura del DNA. 6El metabolismo celular normal produce ROS en cantidades muy elevadas, se calcula que la producción de superóxido en el ser humano es de unos 0.002 picomoles en una célula por día, o 0.15 moles en todo el cuerpo.

5 Christopher Mathews. (2002).Bioquímica. Madrid: Pearson Education. Pág 269 6 Ibidem

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MARCO TEÓRICO

Antioxidantes Un antioxidante es una molécula capaz de retardar o prevenir la oxidación de otras moléculas. La oxidación es una reacción química de transferencia de electrones de una sustancia a un agente oxidante. Las reacciones de oxidación pueden producir radicales libres que comienzan reacciones en cadena que dañan las células. Los antioxidantes evitan estas reacciones, al oxidarse ellos mismos y de esta manera protegen a las células. Debido a esto es que los antioxidantes son a menudo agentes reductores. Aunque las reacciones de oxidación son cruciales para la vida, también pueden ser perjudiciales; por lo tanto las plantas y los animales mantienen complejos sistemas de múltiples tipos de antioxidantes. Los niveles bajos de antioxidantes o la inhibición de las enzimas antioxidantes causan estrés oxidativo y pueden dañar o matar las células. Por esta razón la farmacología estudia de forma intensiva el uso de antioxidantes, particularmente como tratamiento para accidentes cerebrovasculares y enfermedades neurodegenerativas. 7

Además de estas aplicaciones en la medicina, los antioxidantes tienen muchas aplicaciones industriales, tales como conservantes de alimentos y cosméticos, la prevención de la degradación del caucho y la gasolina. La mayoría de los antioxidantes se encuentra en alimentos vegetales, lo que explica que incluir frutas, legumbres, verduras y hortalizas o cereales integrales en nuestra dieta sea tan beneficioso. Por eso las plantas son una fuente ideal para la obtención de antioxidantes. Por lo tanto, los organismos poseen una compleja red de metabolitos y enzimas antioxidantes que trabajan juntos para prevenir el daño oxidativo de los componentes celulares tales como el ADN, proteínas y lípidos. Los antioxidantes celulares mejor estudiados son las enzimas superóxido dismutasa (SOD), catalasa y glutatión peroxidasa. Antioxidantes enzimáticos menos estudiados (pero probablemente muy importantes) son la peroxirredoxina y la sulfadoxina. Otros enzimas que tienen propiedades antioxidantes (aunque esta no es su función primordial) incluyen la paraoxonasa, la glutatión S­transferasa, y la aldehído deshidrogenasa. 8

7 Portal antioxidantes (s.f.). Recuperado el 22 de octubre de 2015 http://www.portalantioxidantes.com/antioxidantes/ 8 Ibidem

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Radicales libres Como ya se mencionó, los radicales libres se forman en la mitocondria, también poseen una estructura birradicalar, son muy reactivos, en general tienen una vida corta, por lo que actúan muy cerca al sitio en que se forman y son difíciles de dosificar. Todas las formas de vida mantienen un entorno reductor dentro de sus células, el cual es preservado por las enzimas que mantienen el estado reducido a través de un constante aporte de energía metabólica. Desbalances en este estado normal redox pueden causar efectos tóxicos a través de la producción de peróxidos y radicales libres que dañan a todos los componentes de la célula, incluyendo las proteínas, los lípidos y el ADN. Los radicales libres tienen una configuración electrónica de capas abiertas por lo que llevan al menos un electrón desapareado que es muy susceptible de crear un enlace con otro átomo o molécula. 9

Para conseguir la estabilidad, los radicales libres modifican a moléculas de su alrededor provocando la aparición de nuevos radicales, por lo que se crea una reacción en cadena que daña a muchas células y puede ser indefinida si los antioxidantes no intervienen. Los radicales libres producen daño a diferentes niveles en la célula:

Altera a los lípidos y proteínas de la membrana celular por lo que la célula no puede realizar sus funciones vitales (transporte de nutrientes, eliminación de deshechos, división celular...).

El radical superóxido, O2, que se encuentra normalmente en el metabolismo provoca una reacción en cadena de la lipoperoxidación de los ácidos grasos de los fosfolípidos de la membrana celular.

Alteran al DNA impidiendo que tenga lugar la replicación celular y contribuyendo al envejecimiento celular.

Los radicales hidroxilos pueden dar lugar a modificaciones de los aminoácidos (e.n. la formación de meta­tirosina y orto­tirosina a partir de fenilalanina), hidratos de carbono, iniciar la peroxidación de lípidos, y oxidar nucleobases. Sin embargo, las especies reactivas de oxígeno pueden resultar beneficiosas ya que son utilizadas por el sistema inmunitario como un medio para atacar y matar a los patógenos, a través de la fagocitosis. 10

9 Mazur Abraham, Harrow Benjamin.(1980) Bioquímica básica.México:Nueva editorial interamericana. Pág 167 10 Zona diet(s.f) recuperado el 14 de enero de 2016, de,http://www.zonadiet.com/alimentacion/antioxidantes­naturales.htm

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Compuestos fenólicos

Este tipo de compuestos engloba a todas aquellas sustancias que poseen varias funciones fenol, unido a estructuras aromáticas o alifáticas. Los fenoles se encuentran casi en todos los alimentos de origen vegetal. Estas sustancias influyen en la calidad, aceptabilidad y estabilidad de los alimentos, ya que actúan como colorantes,antioxidantes y proporcionan sabor. Los fenoles en la plantas son sintetizados por muchas vías distintas y por lo tanto también son un grupo heterogéneo desde el punto de vista metabólico, pero dos vías básicas están involucradas: la vía del ácido shikímico y la vía del ácido malónico.

Propiedades del Fenol:

Es un sólido que cristaliza como agujas incoloras de olor particular. Su temperatura de fusión es de 38°C y su punto de ebullición de 181°C. es higroscópico, es decir, absorbe mucha agua. Se puede oxidar ante la luz adquiriendo una coloración rosada. Es cáustico. Es poco soluble en agua. Muy soluble en éter y alcohol. Químicamente se comporta como ácido débil. Produce por lo tanto iones hidrógeno al disociarse.

Con respecto a las reacciones, hay de dos tipos en las que intervienen los fenoles:. Las que se relacionan con el grupo OH y aquellas en las que participa el anillo. 11

Formación de sales: El fenol al ser un ácido débil, reacciona con facilidad con una base fuerte como la del sodio, litio o potasio.

Esta reacción si bien las presentan los alcoholes alifáticos, es más débil en estos. En el caso del fenol se da con mayor tendencia.

Formación de éteres: Los fenatos de sodio se tratan con halogenuros de alquilo. En este caso particular con cloruro de metilo, obteniendo el éter feniletílico.

Formación de ésteres: El fenol reacciona con cloruros derivados de ácidos orgánicos formando ésteres.

Entre las reacciones del anillo aromático, es decir, de sustitución, podemos nombrar las principales.

Halogenación:

Haciendo reaccionar al fenol con cloro, por ejemplo, se obtiene una mezcla de o­clorofenol y p­clorofenol.

Sulfonación:

11 Quiminet (s.f), recuperado el 02 de febrero de 2016, de: http://www.quiminet.com/articulos/todo­sobre­el­fenol­22466.htm

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El fenol se puede combinar con el ácido sulfúrico en caliente, dando una mezcla de

dos isómeros de ácido o­fenol sulfónico y p­fenol sulfónico.

Nitración:

En este caso también se obtiene una mezcla de dos isómeros, o­nitro fenol y p­nitro

fenol.

Si el ácido nítrico fuera más concentrado, obtendremos el 2,4,6,­trinitrofenol también

llamado ácido pícrico.

Usos del Fenol: Se usa para la fabricación de resinas sintéticas, ácido pícrico

(usado a su vez para explosivos), ácido salicílico (materia prima para las aspirinas),

colorantes, etc. Se ha usado mucho tiempo como agente antiséptico.

Flavonoides

Los flavonoides se biosintetizan en todas las plantas terrestres embriofitas, y también en algunas algas Chlorophyta, y aunque todas las especies comparten la vía biosintética central, poseen una gran variabilidad en la composición química de sus productos finales y en los mecanismos de regulación de su biosíntesis, por lo que la composición y concentración de flavonoides es muy variable entre especies y en respuesta al medio ambiente. Los flavonoides consumidos por el hombre lo protegen del daño de los oxidantes como los rayos UV, la polución ambiental y algunas sustancias químicas presentes en los alimentos como colorantes, conservadores etc. 12

Como el organismo humano no tiene la capacidad de sintetizar estas sustancias químicas, la obtiene enteramente de alimentos que ingiere.

12 Jeremy M. Berg y John L. Tymoczko, Lubert stryer. (2008). Bioquímica . barcelona: ed Reverté. Pág. 184

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Los flavonoides reducen el riesgo de cáncer, mejoran los síntomas alérgicos y de artritis, aumentan la actividad de la vitamina C, bloquean la agresión e las cataratas y la degeneración macular, evitan las tufaradas de calor en la menopausia y combaten otros síntomas.

Taxonomía planta: Tagetes lucida (Pericón)

El pericón es parte típica del paisaje en las regiones templadas; se utiliza en varias ceremonias agrícolas, y como medicinal y ornamental. 13

1 Nombres

Sinónimos Tagetes florida Sweet Otros nombres comunes usados en español Hierbanís, jericón, pericón vomol y Santa María (Márquez et al., 1999). En el Bajío se conoce como cuchrucumín, falso hipericón, flor de Santa María, hierba añil, pericón, periquillo y yerbanís; fuera de ésta zona se conoce como tzitziqui y yiauhtli. Nombres comunes en idiomas indígenas de México Ichka (Márquez et al., 1999); Linares et al. (1999) mencionan que se le conoce en náhuatl como cuahuyauhtli, yahuhtli, que significa hierba de las nubes. Naná uarhi (lengua purépecha)

Categorías taxonómicas superiores Reino: Plantae; Subreino: Traqueobionta (plantas vasculares); Superdivisión: Spermatophyta (plantas con semillas); División: Magnoliophyta (plantas con flor); Clase: Magnoliopsida (dicotiledóneas); Subclase: Asteridae; Orden: Asterales; Familia: Asteraceae; Tribu: Tageteae; Género: Tagetes; Especie: T. lucida. 14

2 Origen y distribución geográfica

Área de origen

México y Guatemala.

Distribución en México Se conoce de Aguascalientes, Chiapas, Chihuahua, Coahuila, Colima, Distrito Federal, Durango, Guanajuato, Guerrero, Hidalgo, Jalisco, Estado de México,

13 Tagetes lucida cav.(s.f.) Recuperado el 12 de febrero de 2016, de http://www.conabio.gob.mx/malezasdemexico/asteraceae/tagetes­lucida/fichas/ficha.htm 14 Tagetes lucida cav.(s.f.) Recuperado el 12 de febrero de 2016, de http://www.conabio.gob.mx/malezasdemexico/asteraceae/tagetes­lucida/fichas/ficha.htm

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Michoacán, Morelos, Nayarit, Nuevo León, Oaxaca, Puebla, Querétaro, San Luís Potosí, Sinaloa, Sonora, Tabasco, Tamaulipas, Tlaxcala, Veracruz, Zacatecas (Villaseñor y Espinosa, 1998).

Identificación y descripción

Descripción técnica Basada en Rzedowski y Rzedowski, 2001. Hábito y forma de vida: Planta herbácea perenne, erecta. Tamaño: De hasta 80 cm de alto. Tallo: Generalmente varios o muchos partiendo de la base, más o menos ramificados, glabros. Hojas: Simples, opuestas, indivisas, sésiles, lineares a oblongas, elípticas a oblanceoladas, de 2 a 10 cm de largo, de 0.5 a 2 cm de ancho, agudas a redondeadas en el ápice, márgenes aserrados. Inflorescencia: Cabezuelas dispuestas en corimbos, sobre pedúnculos bracteados de hasta 1 cm de largo; involucro cilíndrico, de 4 a 12 mm de alto, sus brácteas 5 a 7, con los ápices subulados. Cabezuela/Flores: Flores liguladas 3 ó 4, amarillas, sus láminas flaveladas o suborbiculares, de 3 a 6 mm de largo; flores del disco 5 a 8, sus corolas amarillas, de 4 a 6 mm de largo. Frutos y semillas: Aquenios linear­claviformes, 5 a 8 mm de largo, negruzcos, glabros o algo hispídulos, vilano de 2 escamas aristiformes, de 3 a 5 mm de largo y 4 ó 5 escamas romas de 1 a 2 mm de largo. Características especiales: Con olor a anís al estrujarse. Hábitat Ruderal y en pastizales. Distribución por tipo de zonas bioclimáticas Pastizales y bosques de Quercus y coníferas, selva baja caducifolia. Distribución altitudinal En el Valle de México se conoce hasta los 2900 m, pero es más bien esparcida. En el Bajío se registra de los 800 a 2700 m. Distribución por tipo de clima Crece en lugares de clima templado. Biología y ecología Propagación, dispersión y germinación Por semilla. Ciclo de vida Perenne, de vida muy larga (no especifica). 6 Impacto e importancia Cultivos afectados y efectos sobre los cultivos Solo se reporta en maíz y nopal.

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Usos

El pericón es usada en té como tónico, se recomienda contra diarrea, disentería, empacho, vomito, reumatismo, asma, tifoidea, varices y resfriado; se usa también como antihelmíntico, abortivo, emenagogo y carminativo; el humo de la planta al quemarse se usa para ahuyentar mosquitos (Linares et al., 1999; Márquez et al., 1999). Sus flores y hojas se utilizan para condimentar elotes y chayotes (Linares et al., 1999). Se utiliza y se cultiva como ornamental, también afuera de su área de origen. Además se utiliza como insecticida, para fines ceremoniales y religiosos y para condimentar bebidas y licores. 15

Problema Los antioxidantes están presentes en Tagetes lucida (pericón) mismos que liberan electrones en la sangre para que sean captados por radicales libres y se conviertan en moléculas estables. Cabe mencionar que enfermedades como el cáncer, cataratas, cuadros inflamatorios, arteriosclerosis y envejecimiento, son causadas por el exceso de radicales libres en la sangre, no obstante, los antioxidantes son moléculas cuya función es neutralizar radicales libres. Aportando de esta manera, nuevas soluciones a las enfermedades antes mencionadas.

Objetivo Determinar la presencia de antioxidantes en la planta medicinal llamada Tagetes lucida (pericón) mediante la observación de reacciones químicas, utilizando al radical 2,2­difenil­1picrilhidracilo, un compuesto químico orgánico.

Hipótesis En estudios epidemiológicos y de laboratorio se han identificado varios nutrientes antioxidantes protectores: selenio, vitaminas C y E, carotenoides, y varios compuestos polifenólicos derivados de alimentos de origen vegetal. Entonces si los antioxidantes están presentes en alimentos de origen vegetal, porque no buscar en plantas medicinales como laTagetes lucida y encontrar antioxidantes con el extracto de dicha planta.

15 Tagetes lucida cav.(s.f.) Recuperado el 12 de febrero de 2016, de http://www.conabio.gob.mx/malezasdemexico/asteraceae/tagetes­lucida/fichas/ficha.htm

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Desarrollo

Materiales: Sustancias: •120g de pericón seco •DPPH •Un periódico •½ litro de alcohol •Tijeras •2 frascos de gerber •Papel aluminio •Papel filtro •Gotero •Matraz •Rejilla •Frascos de 10ml •Espátula •Guantes

NO. de pasos

Paso: Con los materiales anteriores iremos siguiendo un orden metodológico donde se tendrá lo siguiente.

Ilustración

1. Se debe tomar la planta y extenderla en el periódico para dejarla secando durante aproximadamente dos semanas. A partir del día 25 de septiembre del año 2015 se puso a secar la planta.

2. Ya que la planta se encontró completamente seca, con las tijeras se recortó en trozos pequeños. El dia 16 de octubre del año 2015 se realizó un peso promedio con la plantas ya cortadas.

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3. Posteriormente se colocaron 8.1 gramos de la planta en medio litro de alcohol en un matraz, y lo sellamos con papel aluminio.

4. Luego dejamos reposar 250 ml de alcohol con la planta, durante aproximadamente dos semanas para que se macera la planta y así se extraigan los metabolitos secundarios.

5. Una vez hecho esto, el día 26 de octubre, fueron colocados aproximadamente 100ml de nuestra planta con alcohol que estaba en el matraz en dos frascos de gerber, estos fueron sellados con papel aluminio y se le realizaron agujeros para que el alcohol se evaporara y así obtener el extracto de la planta.

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6. Se llevaron las muestras a la Facultad de Estudios Superiores (FES) Iztacala para trabajar con ellas.

7. En el laboratorio, ya con el extracto listo, se analizó si la plantaTagetes lucida tiene antioxidantes.

8. Al hacer el procedimiento fue necesario usar guantes de látex para no tocar ninguna sustancia.

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9. Con la espátula se retira el extracto de la planta y lo colocamos en un frasco de 5ml y se disolvió con etanol.

10. Con ayuda de una rejilla, se colocaron 5 gotas de DPPH y una gota del extracto.

El DPPH es una sustancia de color morado y al colocarle el extracto cambia de color si es que hay antioxidantes porque se reduce.

11. En el salón de clase se hizo el mismo procedimiento pero en vez de agregarle una gota de extracto, se colocaron en cada rejilla distintas cantidades.

Observaciones: Con 5 gotas de extracto de Pericón en DPPH, cambia de color a amarillo rápidamente, por lo tanto, Tagetes lucida contiene sustancias antioxidantes. Con una gota de extracto de la planta en DPPH, también reacciona rápido pero, en cambio, este tarda aproximadamente 4 minutos. Por lo tanto, la actividad antioxidante del pericón depende de la concentración que se emplee.

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Técnicas empleas: Metodos de extraccion:

1. Maceración: El material crudo previamente triturado se pone en contacto duradero con cantidad suficiente de solvente, en un tanque cerrado a temperatura ambiente durante 2­14 días. 16

2. La separación de líquido­sólido: Se realiza con el objetivo de retirar el residuo de la droga después de la extracción.

3. Concentración de extractos: Eliminar el solvente de la extracción para aumentar el contenido de sólidos en el extracto.

4. Secado: Estos pueden ser secados por atomización y lecho fluidizado fundamentalmente. Evaluar concentración de sólidos, temperatura de secado, humedad, presión, flujo y velocidad del trabajo.

Clasificación de los extractos vegetales Dependiendo del grado de concentración de los extractivos, los extractos pueden clasificarse en: •Extractos fluidos o líquidos. •Extractos semisólidos o blandos. •Extractos secos.

16 Maceraciones.(s.f.) Recuperado el 15 de febrero de 2016, de http://www.botanical­online.com/maceraciones.htm

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Cronograma de actividades

Resultados

N° de rejilla N° de gotas de extracto Tiempo de reacción

1 1 4 min y 9 segundos

2 2 1 min y 56 segundos

3 3 20 segundos

4 4 17 segundos

5 5 10 segundos

Gráficas

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Análisis de los resultados

Como se observa en la tabla anterior, con una gota de extracto de Tagetes lucida en el radical libre 2,2­difenil­1picrilhidracilo tarda cuatro minutos y nueve segundos en reaccionar, en cambio al agregarle dos gotas del extracto de la planta a dicho radical libre solo tarda un minuto y cincuenta y seis segundos. Al aumentar el número de gotas de extracto al radical libre 2,2­difenil­1picrilhidracilo, en segundos cambia de color morado a amarillo claro. No hay variante en el tiempo en que tarda en reaccionar el extracto en el radical libre, esto nos indica que nuestra hipótesis se confirma, al haber presencia de antioxidantes en la Tagetes lucida, siendo una planta medicinal.

Conclusiones La planta Tagetes lucida sí tiene antioxidantes. Con ayuda del radical 2,2­difenil­1picrilhidracilo pudimos determinar la presencia de antioxidantes, ya que al colocarle el extracto, este cambio de color morado a amarillo en cuestión de segundos. La planta posee una gran cantidad de antioxidantes ya que con una sola gota de extracto en cinco gotas de DPPH, reacciona en pocos minutos. La planta Tagetes lucida, aparte de ayudar a dolores estomacales, vómito, asma, etc, también sirve como antioxidante y puede ayudar a prevenir enfermedades causadas por los radicales libres, ya que tiene una rápida reacción en presencia de radicales libres.

Bibliografía Jeremy M. Berg y John L. Tymoczko, Lubert stryer. (2008). Bioquímica .

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Artículos

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