Quebracho Vol.18(1,2):120-125

Primera cita de Sphaeropsis sapinea en Pinus ponderosa en Neuquén, Argentina

First record of Sphaeropsis sapinea on Pinus ponderosa in Neuquén, Argentina.

Mattes Fernández, H.1; V. Fontana1; H. Álvarez Mansilla1 y G. Soto1

Recibido el 26 de marzo de 2010

RESUMEN

Sphaeropsis sapinea es un hongo imperfecto que causa la enfermedad denominada “muerte apical” o ”muerte regresiva” en coníferas, siendo Pinus el género más afectado. Con condiciones ambientales favorables, S. sapinea puede provocar serias epifitias y por esta razón es recomendable aplicar un plan de manejo adecuado para mitigar sus efectos. La detección temprana es una condición básica para lograr los mejores resultados en su control. En la primavera de 2009, durante la realización de una prospección fitosanitaria en un campo forestal del sur de Neuquén se encontraron ejemplares de Pinus ponderosa con síntomas de muerte apical. Se recolectaron muestras de los árboles afectados y mediante la observación macro y microscópica del material vegetal y el estudio de las colonias aisladas in vitro se determinó que S. sapinea era el agente causal de la enfermedad. Esta es la primera cita de la asociación de esta especie fúngica con el pino ponderosa en la Argentina. Palabras clave: Muerte regresiva; Muerte apical; Cancrosis; Diagnosis; Enfermedad fúngica.

ABSTRACT

Sphaeropsis sapinea is an imperfect fungus that causes in Conifers a disease called dieback. Pinus is the most affected genus. Under favorable weather conditions S. sapinea can produce serious epidemics. For this reason it is very important to apply a management plan to mitigate its effects. Early detection is a basic condition to achieve the best results for its control. In spring 2009 while surveying a forest plantation in the south of Neuquén, various Pinus ponderosa trees with dieback symptoms were found. Samples of affected trees were collected. Through macroscopic and microscopic observation of the plant material and the study of the fungal colonies isolated in vitro, it was determined S. sapinea as a causal agent of the disease. This is the first record of S. sapinea on ponderosa pine in Argentina. Keywords: Dieback; Tip blight; Canker; Diagnosis; Fungal disease.

1. INTRODUCCION

Sphaeropsis sapinea (Fr.) Dyko y Sutton (Orden Sphaeropsidales, Subclase Coelomycetes, Subdivisión Deuteromycotina) causa la grave enfermedad fúngica denominada muerte apical o muerte regresiva (“dieback”) en varios géneros de Coníferas y principalmente en Pinus spp (Hansen y Lewis, 1997). S. sapinea se encuentra presente prácticamente en todas las regiones donde crecen los pinos y su gravedad e intensidad de ataque varían de acuerdo a la especie afectada, a la región y a las condiciones ambientales de la primavera y el verano. El patógeno puede afectar tanto a árboles jóvenes como a adultos. Con condiciones del ambiente favorables, si no se lleva a cabo un plan de manejo para mitigar sus efectos negativos, este hongo puede provocar importantes epifitias (Wijnand y Wingfield, 1991). En Chile, ataques severos en Pinus 1 Asentamiento Universitario de San Martín de los Andes, Universidad Nacional del Comahue. Pasaje de la Paz 235 8370 San Martín de los Andes, Neuquén, Argentina. E-mail: hernanmattes@yahoo.com.ar

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radiata se han asociado a veranos calurosos y secos (Jorquera, 1997; Morales Ramírez, 2007). Por otra parte, el tiempo húmedo y lluvioso durante la primavera favorece la liberación y dispersión de los conidios (Peterson, 1982). También han sido citados como factores predisponentes el exceso de nitrógeno y las deficiencias de boro y potasio (Hansen y Lewis, 1997). Los árboles con heridas o sometidos a podas excesivas son más susceptibles a la enfermedad. Además, se ha demostrado que existe variación inter e intraespecífica de la susceptibilidad del hospedante a S. sapinea (Hansen y Lewis, 1997). Las epifitias más graves se han reportado en P. radiata cultivado fuera de su lugar de origen. También son afectados gravemente P. sylvestris, P. resinosa, P. ponderosa, P. banksiana y P. mugo (Wijnand y Wingfield, 1991). En Argentina, el hongo se ha localizado en plantaciones de pináceas en las provincias de Corrientes y Misiones (Agostini et al., 2005; Vizcarra Sanchez, 2004) y recientemente se ha encontrado en La Pampa en frutos de alpataco (Prosopis flexuosa var. depressa) (Canafoglia et al., 2006). En Patagonia, Greslebin y Rajchenberg (2005) describieron algunos síntomas típicos de S. sapinea en P. ponderosa pero no encontraron signos ni aislaron al patógeno. La sintomatología que presenta la enfermedad incluye muerte de brotes apicales y laterales, ramas multiflecha, ápices encorvados, amarronamiento de acículas, exudado de resina en exceso, cancrosis y muerte del árbol. Los conos pueden sufrir una reducción del tamaño normal y necrosis total o parcial. Los signos, puntos oscuros de 2 a 3 mm que pueden aparecer en acículas y corteza de ramas, corresponden a picnidios que generan conidios muy típicos. Como medidas de protección se recomiendan, entre otras, la aplicación de fungicidas durante las primeras dos semanas a partir de la brotación de primavera y las cortas sanitarias. En el presente trabajo se describe la primera detección de Sphaeropsis sapinea sobre plantaciones de Pinus ponderosa en Argentina.

2. MATERIALES Y MÉTODOS

Toma de muestras: Las muestras vegetales (acículas y ramas) fueron recolectadas durante los meses de septiembre y diciembre de 2009 en una plantación de Pinus ponderosa de un Campo Forestal del Sur de la provincia de Neuquén ubicado en las coordenadas 40º 29´ Lat. S y 70º Long. O. Cada árbol muestreado fue individualizado con una etiqueta. Los análisis del material recolectado fueron realizados en el Laboratorio del Asentamiento Universitario de San Martín de los Andes de la Universidad Nacional del Comahue. Los mismos se efectuaron con lupa estereoscópica, y microscopio óptico. Para la identificación se recurrió a bibliografía relacionada (Alexopoulus y Mims, 1985; Barnett y Hunter, 1972; Butin, 1989; Fernández Valiela, 1975; Hansen y Lewis, 1997; Smith et al. 1992, Sutton, 1980).

Aislamientos: En cámara de flujo laminar y bajo lupa estereoscópica se extrajeron con una aguja histológica estéril pequeñas porciones de los picnidios detectados sobre las acículas Las mismas fueron transferidas a un medio de cultivo agar papa con el agregado de malta en una proporción de 20 g/L. Una vez obtenidos los cultivos puros se subcultivaron a tubos de ensayo y placas de Petri con el mismo medio. Estos últimos se realizaron con el objetivo de observar las características de las colonias. Las estructuras fúngicas se estudiaron utilizando microscopio óptico y ocular micrométrico. Se realizaron 50 mediciones para cada estructura fúngica significativa.

Identificación: Con la bibliografía correspondiente, para determinar la ubicación taxonómica del agente, se consideraron los síntomas y signos y las características macro y micromorfológicas de las fructificaciones.

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3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Durante una prospección fitosanitaria en un Campo Forestal del Sur de la Provincia de Neuquén se detectaron ejemplares de pino ponderosa de unos 8 a 10 años con muerte apical (Figura 1). A través de una observación más detallada se determinaron a campo los siguientes síntomas: resinosis en fuste, rama y acículas; clorosis en bandas sobre las acículas; acículas de color castaño claro; microfilia; caída de acículas; manchas oscuras de 1 a 2 mm sobre acículas y ramas; restitución de crecimiento vertical por las yemas laterales, presentando las copas en algunos casos, aspecto de candelabro. En otros casos, la totalidad de la copa toma un color castaño claro Se estimó que aproximadamente un 30 % del rodal presentaba síntomas de muerte apical. Posteriormente se tomaron muestras de ramas apicales y acículas de un total de diez árboles afectados. Un ejemplar fue apeado y se tomaron de su fuste tortas a diferentes alturas a fin de analizarlas en laboratorio. Macroscópicamente se detectaron en acículas la presencia de fructificaciones de origen fúngico de color negro. Se observaron fructificaciones errumpentes y otras desarrolladas en una depresión de un tamaño de alrededor de 1 a 2 mm, distribuídas en forma longitudinal, o circunscriptas a la base de las acículas (Figura 2). Al inicio se detectaron como lesiones acuosas. En la madera se observaron manchas castañas dispuestas en forma radial y sectores de la médula con crecimiento irregular (Figura 3).Mediante el análisis microscópico de las fructificaciones y de los cortes transversales de acículas infectadas, se observaron picnidios oscuros y esporas hialinas, amarillentas, castañas y castaño oscuras con y sin tabique central, de pared gruesa, de forma ovoide y con la base truncada. Tras varias mediciones (50) se determinó un tamaño medio de los picnidios entre 250 a 300 micrones y para las esporas se comprobó un tamaño medio de 18 x 30 micrones. (Figura 4).

Figura 1. Detalle de un ápice de P. ponderosa afectado por muerte apical.

Se efectuaron aislamientos a partir de los signos, de los cuales se obtuvieron cultivos puros del hongo, mostrando las colonias la macromorfología típica de S. sapinea. In vitro, el patógeno es de crecimiento rápido (3 cm en una semana), produce un abundante micelio aéreo, al inicio de color blanquecino y luego se torna verde oliva grisáceo a verde oliva muy oscuro. Al mes, se

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observa sobre la colonia de color oliváceo oscuro, un micelio aéreo de color amarillo verdoso ubicado en forma equidistante entre el inóculo y la pared de la placa de Petri. Este micelio se hace mas claro y crece en forma más atenuada al acercarse al límite de la placa (Figura 5).

Considerando las características descriptas se concluye que las fructificaciones corresponden a Sphaeropsis sapinea, agente causal de la “muerte apical de los pinos”.

Figura 2. Picnidio de S. sapinea en formación en zona basal de la acícula.

Figura 3. Corte transversal de una rama de P. ponderosa afectada por S. sapinea.

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Figura 4. Picnidio y conidios de S. sapinea. Aumento 400 x - Bar = 30 µm.

Figura 5. Cultivo de S. sapinea al mes de la inoculación.

Dada la gravedad de la enfermedad “muerte regresiva de los pinos” y las posibles consecuencias negativas que puede generar en el futuro cercano en las plantaciones de pino ponderosa de Argentina, se recomienda tomar medidas urgentes para disminuir su incidencia y dispersión. En primer lugar es importante realizar una prospección fitosanitaria minuciosa en las áreas forestadas más cercanas al foco detectado y comunicar la aparición de esta enfermedad a las instituciones y organismos relacionados con la actividad forestal de la Región Patagónica.

4. CONCLUSIONES

Constituye esta la primera referencia acerca de la asociación de Sphaeropsis sapinea con Pinus ponderosa en la Argentina.

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AGRADECIMIENTOS

A la MA G. Tavella por su colaboración en la traducción al inglés, al MSc. S. Tiranti por su ayuda en la recolección y monitoreo a campo y a la Lic. A. Medina por su colaboración en los cortes xilológicos

5. REFERENCIAS

Agostini, J.; A. Stehr, R. Toloza y E. Eskiviski. 2005. “Problemas fitosanitarios en plantaciones de Pinus spp en el Norte de Corrientes y Misiones”. X Jornadas Técnicas Forestales y Ambientales. Facultad de Ciencias Forestales, UNAM. EEA-Montecarlo, INTA Eldorado, Misiones, Argentina

Alexopoulus, C. y C. Mims. 1985. “Introducción a la Micología”. Ed. Omega. Barcelona, España, 638 pp.

Barnett, H. y B. Hunter. 1972. “Illustrated Genera of Imperfect Fungi”. 3rd Edition. Ed. Burgess. Minnesota, USA. 244 pp.

Butin, H. 1989. “Krankheiten der Wald- und Parkbäume”. Diagnose - Biologie - Bekämpfung. Ed. Georg Thieme. Stuttgart, Deutschland. 216 pp.

Canafoglia, M.; R. Comerio; V. Fernández Pinto y G. Vaamonde. 2006. “Hongos toxicogénicos contaminantes de frutos de alpataco”. Revista Iberoamericana de Micologia, Vol.24. ISSN: 1130-1406

Fernandez Valiela, M. 1978. “Introducción a la Fitopatología”. Tomos 3 y 4. Colección Científica del INTA. Buenos Aires, Argentina.

Greslebin, A. y M. Rajchenberg. 2005. “Prospección fitosanitaria de las plantaciones de Pinus spp. de la Patagonia argentina: resultados preliminares”. Actas.XIII Congreso Latinoamericano de Fitopatología. Carlos Paz, Córdoba, Argentina

Hansen, E. y K. Lewis. 1997. “Compendium of conifer diseases”. Ed. APS. 92 pp.

Jorquera, P. 1997. “El hongo de la sequía”. Chile Forestal, Año XXII, Nº 253, Septiembre 1997. pp 20-21

Morales Ramírez, R. 2007. “Evaluación de la patogenicidad de Sphaeropsis sapinea (Fr.) Dyko y Sutton colectado en material de Pinus radiata D. Don. en Valdivia y la costa de Arauco”. Tesis Ingeniería Forestal. Universidad Austral de Chile. 26 p.

Peterson, G. 1982. “Control of Diplodia and Dothistroma blights of pines in the urban environment”. Journal of Arboriculture 7(1):1-5 pp.

Smith, J.; J. Dunez; D. Phillips; R. Lelliot; S. Archier. 1992. “Manual de las enfermedades de las plantas”. Ed. Mundi-Prensa. Madrid, España. 671 pp.

Sutton, B. 1980. “The Coelomycetes. Fungi Imperfecti with Acervuli and Stroma”. Commonwealth Mycological Institute. Kew, Surrey, England, 686 pp.

Vizcarra Sanchez, J. 2004. “Grave afección por muerte regresiva (die-back) en pinos subtropicales de Misiones, producida por Sphaeropsis sapinea (Fr.) Dyko y Sutton”. En: Plagas y enfermedades forestales en Misiones. Ed. Univ. Nac. de Misiones. Misiones, Argentina. pp. 178

Wijnand J. y J. Wingfield. 1991. “Biology and Control of Sphaeropsis sapinea. on Pinus Species in South Africa”. Plant Disease: 761-766