“PREVENCIÓN DEL RIESGO BIOLÓGICO EN LABORATORIOS DE INVESTIGACIÓN”

SERVICIO DE PREVENCION DE RIESGOS LABORALES DE MADRID

14 de abril de 2010

INSTITUTO DE BIOLOGÍA Y GENÉTICA MOLECULAR

• Agentes biológicos - RD 664 / 97

“Microorganismos, con inclusión de los genéticamente modificados (OMG), cultivos celulares y endoparásitos humanos, susceptibles de originar cualquier tipo de infección, alergia o toxicidad”

CONTAMINANTES BIOLÓGICOS

• ORGANISMOS VIVOS: - Agentes biológicos (Virus, Bacterias,

Protozoos, Hongos, Endoparásitos, etc) - organismos modificados genéticamente- y cultivos celulares.

• SUBPRODUCTOS: Productos derivados de estos organismos, p.ej. Esporas, escamas de piel, pelo, heces, micotoxinas, etc.

FUENTES DE CONTAMINACIFUENTES DE CONTAMINACIÓÓNN

Personas o animales infectados.Personas o animales infectados.Fluidos y muestras biolFluidos y muestras biolóógicas gicas contaminadas.contaminadas.El suelo, agua, El suelo, agua, etcetcContaminantes de alimentos y derivados.Contaminantes de alimentos y derivados.ContaminaciContaminacióón de desechos y residuos.n de desechos y residuos.ContaminaciContaminacióón de los climatizadores de n de los climatizadores de aire, etc.aire, etc.

Catarro

Zoonosis (Hidatidosis)

Muestras animales, Muestras de origen clínico (sangre, orina, heces...)

Tétanos Botulismo

Brucelosis

Salmonella

Oportunistas

(Control plagas)

Legionella, ácaros del polvo, etc

(Manipuladores de alimentos)

Tipos de exposiciTipos de exposicióónn aaCONTAMINANTES CONTAMINANTES

BIOLBIOLÓÓGICOSGICOS

ExposiciExposicióón con intencin con intencióón deliberadan deliberadaExposiciExposicióón incidentaln incidentalExposiciExposicióón no derivada de la actividad n no derivada de la actividad laborallaboral

Investigación

Gestión residuos

Gripe, Legionelosis,

Ácaros del polvo, etc“CALIDAD DE AMBIENTE”

Personal investigador, auxiliar, de limpieza, de mantenimiento, etc

•• InhalaciInhalacióón de aerosolesn de aerosoles•• AbsorciAbsorcióón n a trava travéés de la piel o mucosass de la piel o mucosas por:por:

salpicaduras o produccisalpicaduras o produccióón de aerosolesn de aerosolescontacto con material contaminado y vcontacto con material contaminado y vííscerassceras

••AbsorciAbsorcióón n a trava travéés des de heridas heridas preexistentespreexistentes••AbsorciAbsorcióón n a trava travéés de las heridas s de las heridas causadas porcausadas por::

abrasiabrasióónnCortesCortesAraAraññazosazosMordedurasMordeduras

••Picaduras de insectosPicaduras de insectos••AutoinoculaciAutoinoculacióónn o pinchazoso pinchazos•• IngestiIngestióón por:n por:

salpicadurassalpicadurasderramesderramespipeteopipeteo bucalbucal

VÍAS DE ENTRADA DEL MATERIAL INFECCIOSO

micoplasmas

RabiaBrucelosis

tuberculosis, gripe, etc

Botulismo

Brucelosis

Salmonella

Hepatits A

Hábitos higiénicas inadecuados, onicofagia, fumadores, etc

-RESPIRATORIA

-DÉRMICA

(PARENTERAL)

-DIGESTIVAfloragangrena

Fiebre Q (garrapata)

Sida, Hepatitis B y C

Control de la formación de aerosoles

Utilización de EPI´s

RIESGOS DERIVADOS DE LA EXPOSICIRIESGOS DERIVADOS DE LA EXPOSICIÓÓN N A AGENTES BIOLA AGENTES BIOLÓÓGICOSGICOS

1.1. IInflamacinflamacióónn (inflamaciones locales y cr(inflamaciones locales y cróónicas).nicas).

2.2. IInfeccinfeccióónn (infecciones agudas y enfermedades (infecciones agudas y enfermedades crcróónicas).nicas).

3.3. SSensibilizaciensibilizacióónn y posterior desarrollo de y posterior desarrollo de alergiasalergias..

4.4. PPortadoresortadores sanossanos..

5.5. IIntoxicacionesntoxicaciones o envenenamientos.o envenenamientos.

6.6. EEfectosfectos sobre la reproduccisobre la reproduccióón.n. Toxoplasmosis, citomegalovirus

EFECTOS TERATOGÉNICOS

Tétanos, botulismo

Estaphilococus aureus – gastroenteritis; Salmonelosis

Paperas

Hepatitis C y B; Tuberculosis

Acaros,

“cualquier cosa”

Paperas

CONTAMINANTES CONTAMINANTES BIOLBIOLÓÓGICOSGICOS

Para que se produzca enfermedad han de Para que se produzca enfermedad han de darse darse simultsimultááneamenteneamente::Presencia de Agente infecciosoPresencia de Agente infecciosoVVíía de transmisia de transmisióón apropiadan apropiadaPresencia de huPresencia de huéésped susceptiblesped susceptibleConcentraciConcentracióón suficiente del agente n suficiente del agente infecciosoinfeccioso

OPERACIONES EN LABORATORIOS QUE OPERACIONES EN LABORATORIOS QUE PRODUCEN AUMENTO DEL RIESGO BIOLPRODUCEN AUMENTO DEL RIESGO BIOLÓÓGICOGICO

TRANSPORTE DE MATERIAL BIOLÓGICOINTERNO: Caída y rotura de contenedores, frascos, viales y jaulas

Vertidos Salpicaduras

Aerosoles Escape de animales

EXTERNO: Inexistencia de sistemas de contención.

Implicación de terceras personas y medioambiente

INFECCIÓN EXPERIMENTAL: Recogida de muestras clínicas, sacrificio de animales, biopsias y necropsias

• Toma de muestras de fluídos, excretas y tejidos corporales.• Operaciones que implican utilización de material cortante y punzante.• Proximidad al individuo enfermo (exposición a aerosoles, contacto cutáneo directo y con fluídos corporales y vísceras)

OPERACIONES EN LAS QUE SE PRODUCE OPERACIONES EN LAS QUE SE PRODUCE AUMENTO DEL RIESGO BIOLAUMENTO DEL RIESGO BIOLÓÓGICO (Cont.)GICO (Cont.)

TÉCNICAS DE SUBCULTIVO Y CARACTERIZACIÓN

TÉCNICAS DE FRACCIONAMIENTO

Trasvase de medios de cultivoMezclado y agitaciónInoculacionesPipeteos repetitivos y rápidos

Derrames y salpicadurasProducción de aerosolesAutoinoculaciónCorte y abrasión

TrituraciónHomogenizaciónSonicaciónCentrifugación

Derrames y salpicadurasProducción de aerosoles

Factores personales- las condiciones del trabajador (sexo, edad, raza, peso,...)- factores hereditarios- enfermedades padecidas y crónicas - inmunocomprometidos- alergias a agentes y/o medicamentos- tratamientos médicos, vacunaciones, estados especiales (embarazo, lactancia, etc).

Factores laborales -la experiencia y conocimientos de los trabajadores- Tipo de laboratorios / actividades (infraestructura y equipamiento)- frecuencia de la exposición- procedimientos de trabajo- comodidad e impacto estético de los equipos de protección individual; ergonomía; estado general de los equipos y máquinas, condiciones medioambientales, etc.

OTROS FACTORES ADICIONALES QUE OTROS FACTORES ADICIONALES QUE

MODIFICAN O AUMENTAN EL RIESGOMODIFICAN O AUMENTAN EL RIESGO

TIPO DE LABORATORIO

TIPO OPERACIONES

FACTORES ADICIONALES QUE MODIFICAN O AUMENTAN EL RIESGOFACTORES ADICIONALES QUE MODIFICAN O AUMENTAN EL RIESGO

•Factores psicológicos y de la organización del trabajo- penosidad o dificultad del trabajo - condiciones del contrato de trabajo (precariedad, contratos basura, etc)- carga de trabajo (nivel de exigencia, intensidad, monotonía) - nivel de responsabilidad del trabajador sobre su propio puesto- grado de motivación- características de los lugares de trabajo, etc.

•Factores medioambientales- humedad, - temperatura,- iluminación, - renovaciones del aire (ventilación), - sinergismo de contaminantes, etc

CLASIFICACIÓN A.BIOLÓGICOS

A.B. del Grupo de Riesgo 1 GR 1A.B. del Grupo de Riesgo 2 GR 2A.B. del Grupo de Riesgo 3 GR 3A.B. del Grupo de Riesgo 4 GR 4

Anexo II del RD 664/97: Lista de agentes biológicos(modificada por la Orden de 25 de marzo de 1998)

A: posibles efectos alérgicos, D: conservar lista de personal más de 10 años después de la última Exposición, T: producción de toxinas, V: si existe vacuna eficaz disponible, (*): normalmente no infeccioso a través del aire, “spp”: otras especies del género, además de las indicadas, pueden constituir riesgo para la salud

Mayor peligrosidad

Menor peligrosidad

Notificación de primer uso (art.10 RD 664/97) P1, P2, P3 y P4

CLASIFICACIÓN (Art.3, RD 664/97)

No conocido en la actualidad

ElevadoProvocan enf.grave grave y constituir serio ppeligro para trabajadores

4

Posible generalmente

ProbablePuede causar enf.Grave y

constituir serio problema para trabajadores

3

Posiblegeneralmente

Poco probablePuede causar enf. y constituirpeligro para

trabajadores

2

InnecesarioNoPoco probable1

Profilaxis o tratamiento

eficaz

Riesgo de propagación a la colectividad

Riesgo infeccioso

Agente biológico del grupo de riesgo

Se establece en función de:Capacidad patógena del microorganismoModo de transmisiónDisponibilidad de medidas de prevención eficaces: Profilaxis por administración de vacunas o sueros, lucha contra los reservorios animales o artrópodos vectores…Disponibilidad de tratamiento eficaz

+

-

LABORATORIOS DE BIOSEGURIDAD EN EL IC: • 1 LABORATORIOS P-2 / CSB II

Ejemplos A.B. nivel II:

¡¡ NUNCA SANGRE PROPIA!!

Cultivos celulares de origen humano o simioMuestras de origen humano (sangre, tejidos, líquido cefalorraquídeo, etc)Tejidos de origen animal, procedentes de mataderos

VIRUS HUMANOS

• Vaccinia virus 2• Herpes simplex 2• Virus Sindbis 2• Virus de la estomatitis vesicular 2• Adenovirus 2• Virus de la gripe 2• Poliovirus 2• Encefalovirus 2• Citomegalovirus humano 2• Retrovirus: anfotrópicos, ecotrópicos,

xenotrópicos 2• Reovirus tipo 3 2• Virus Epstein Barr 2• Baculovirus 1

PARASITOSLeishmania infantum 2Leishmania major 2

BACTERIASLegionella pneumophila 2Salmonella ssp. 2Pseudomonas aeruginosa 2Escherichia coli (EPEC) 2Enterococcus faecium 2

HONGOSSaccharomyces cerevisiae 1Saccharomyces pombe 1Schizosaccharomyces pombe 1

LINEAS CELULARES ESTABLECIDAS 2HeLa /HMy2-C1r (humanas)/ Daudi (humana)/143B (humana)/ Hibridomas /T2 (humana) HEK293 (humana)/CV-1/Cos (simio)/U-937 (humana)/RMA y RMA/s (ratón)/T2 (humana)Células COS7/ Jurkat(humana)

MUESTRAS HUMANAS 2Timo Liquido cefaloraquideo (Corea Huntington)Células endoteliales humanas de cordón umbilical (HUVECs) Linfocitos humanos de sangre periférica (PBLs)

EL TERMINO CONTENCIÓN EN BIOSEGURIDAD

CONTENCIÓN PRIMARIA

CONTENCIÓN SECUNDARIAELIMINACIÓN O REDUCCIÓN DEL RIESGO

”Se utiliza para describir los métodos de seguridad necesarios para la correcta gestión de la utilización y almacenamiento en los laboratorios de agentes biológicos infecciosos y organismos modificados genéticamente”.

CONTENCIÓN TERCIARIA

• Equipos de protección colectivo - CSB

• Diseño de la instalación

• Protección sobre el individuo

BARRERAS PRIMARIASBARRERAS PRIMARIASEquipos de protección colectiva

Cabinas de Seguridad Biológica (NTP 233)

Objetivo: confinamiento del agente biológico

Clase IClase II

Clase III

Clase I Clase II Clase III

Utilizarlas en aquellas operaciones que:

- puedan producir aerosoles,

- trituración,

- manipulación de material susceptible de estar contaminado

IIA, recircula el 70 %

IIB, recircula el 30 %

BARRERAS SECUNDARIASBARRERAS SECUNDARIASObjetivo: prevenir fallos en barreras primarias

Materiales de suelos y paredes

Puertas de cierre automático y exclusas

Tomas de aire y presiones negativas

Depuración del aire expulsado

BARRERAS TERCIARIASBARRERAS TERCIARIASObjetivo: actuar directamente sobre el trabajador

EPI´s

Vigilancia médica, inmunización

Higiene personal

Buenas prácticas de laboratorio - BPL (NTP 376)

Buenas prácticas de laboratorio BPL (NTP 376)

Prohibir comer, beber y fumar (almacenar alimentos)

Orden y limpieza escrupuloso en el lugar de trabajo

Cuartos de aseo apropiados que dispongan de productos antisépticos para ojos y piel (10 min)

Almacenamiento y mantenimiento de EPI´s

Utilizar ropa de protección adecuada y evitar ir con ella a zonas comunes u otros servicios

Después del trabajo lavar escrupulosamente las manos

Prohibir la limpieza de ropa de trabajo

en el domicilio particular

Evitar materiales punzantes, ¡no reencapsular agujas!

Procedimientos de trabajo seguros

CONTROL DE CONTAMINANTESCONTROL DE CONTAMINANTESProtecciProteccióón individual n individual ((EPIEPI´́ss))

- Marcado CE, certificados según legislación vigente

- Instrucciones de uso y mantenimiento

- Caducidad

MANTENIMIENTO EPI´s DE ACUERDO A

LAS INSTRUCCIONES DEL FABRICANTE

Protección respiratoria

P1 P 2 P 3

¡ Sustitución periódica !

¡ Desechables ! ¡Látex!

No tocar cara, ojos, etc

BATA

¡¡ Lavado de manos !!

NORMAS ESCRITAS DE NORMAS ESCRITAS DE ACTUACIACTUACIÓÓN N ANTE UNA EMERGENCIAANTE UNA EMERGENCIA

• Tener previsto un Plan de emergencia para cada AB• Organización de recursos humanos (identificados) y sus

responsabilidades• Localización de zonas de riesgo elevado. Señalización.• Vigilancia médica de las personas expuestas• Lista de las instalaciones donde puedan recibir asistencia

las personas expuestas• Transporte de personas expuestas

ACTUACIACTUACIÓÓN ANTE UNA N ANTE UNA EMERGENCIAEMERGENCIA

• Tratamiento médico de emergencia para las personas expuestas y lesionadas

• Lista de depositarios de suero inmune, vacunas, medicamentos necesarios, material y suministros especiales

• Provisión y ubicación del material de emergencia: ropa de protección, desinfectantes, equipos de desinfección…

• Normas y procedimientos de descontaminación

¿alguna pregunta?

Riesgo biológico prácticamente nulo

Características de diseño básicas

Los sistemas especiales de contención no son necesarios

Aplicación de las buenas prácticas del laboratorio

LABORATORIOS DE NIVEL 1

Riesgo biológico moderado para el personal expuestoRiesgo biológico muy bajo para el público y el medio

ambiente

AB GR2

Sangre, tejidos y cultivos de origen humano

OMG en ACT2

LABORATORIOS DE NIVEL 2

“Es necesario establecer barreras entre el material biológico y el personal expuesto, manteniendo ciertas medidas de contención que impidan escapes significativos de material biológico al medio ambiente externo”

Aspectos a tener en cuanta en la CONCEPCIÓN GENERAL•Confinar el riesgo biológico•Control de acceso•Cambio de ropa de trabajo•Gestión de residuos biosanitarios•Procedimientos de trabajo seguros

Sectorización del laboratorioEsclusa de accesoCabinas de bioseguridadAutoclave

LABORATORIOS DE NIVEL 2

•Construcción:uniones suelo-pared en escociaventanas herméticascontrol de acceso, enclavamiento

•Tratamiento de aire:unidad de tratamiento independiente sin recirculación o con ésta y filtración HEPAdepresión en determinados casos

•Aparataje de seguridad:cabinas de bioseguridad clase IIautoclave de bioseguridadSAS

•Descontaminación:pila, ducha y lavaojos de emergencia en zona

•Sistema contraincendios:detección, telefonía y extintores

CARACTERÍSTICAS ESPECIFICAS:

LABORATORIOS DE NIVEL 2