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Dr. Pablo A. Chacana Instituto de Patobiología CICVyA - INTA Tifosis aviar un viejo problema y nuevos enfoques

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Dr. Pablo A. Chacana

Instituto de Patobiología

CICVyA - INTA

Tifosis aviar

un viejo problema y nuevos

enfoques

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Salud publica: Intoxicación alimentaria

Salud veterinaria: tifosis aviar

Comercio internacional: restricciones en la

exportación

Salmonellas aviares

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Familia Enterobacteriaceae

Salmonella enterica - Salmonella bongori

la especie no es suficiente…

Serovariedades

Salmonella enterica subespecie enterica

la subespecie no es suficiente…

Casi 2.500

Serovariedades

Esquema de Kauffmann – White

O Somáticos

H Flagelares

K Capsulares (Vi)

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Salmonella enterica subsp. enterica (Somaticos O: Flagelares H)

Salmonella enterica subsp. enterica (9, 12: g,m:-)

Salmonella enterica subsp. enterica ser. Enteritidis

Salmonella Enteritidis

Ej:

Salmonella enterica subsp. enterica (4, 5, 12: i: 1,2)

Salmonella enterica subsp. enterica ser. Typhimurium

Salmonella Typhimurium

Formula

antigénica Nombre

completo Nombre

abreviado

Formula

antigénica Nombre

completo Nombre

abreviado

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Especificidad de las Salmonellas

Grupo 1: Específicas de especie (“tifoideas”)

Salmonella Typhi

Paratyphi A Salmonella Abortus-ovis

Salmonella Typhi-suis

Salmonella Abortus-equi

Salmonella Gallinarum

Muy adaptadas a determinados huéspedes.

Producen una infección sistémica en un número limitado de especies

animales filogenéticamente relacionadas.

No causan Zoonosis No producen

Intoxicación Alimentaria

Problema de salud veterinaria

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Especificidad de las Salmonellas

Grupo II: No específicas

Salmonella Enteritidis

Salmonella Typhimurium

Resto de las Salmonella enterica subsp. enterica

No adaptadas a ningún huésped específico.

Muy difundidas, colonizan animales, vegetales y medio ambiente.

Usualmente causan gastroenteritis en un amplio número de

especies animales.

Causan Zoonosis Producen Intoxicación

Alimentaria

Problema de salud Pública

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Especificidad de las Salmonellas

Grupo III: Especificas de especie + Zoonóticas

Salmonella Cholerasuis

Restingidas a determinados huéspedes a los que producen una infección

sistémica aunque que también pueden infectar a otras especies animales.

Causan Zoonosis Producen Intoxicación

Alimentaria

Problema de salud Pública y Veterinaria

Salmonella Dublin

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Diferentes enfermedades en las aves

Enfermedad tifoidea

S. Gallinarum

Distribución sistémica

por células del SRE

Hígado

Bazo

Ovario

Médula ósea

Alta mortalidad

Enfermedad paratifoidea

Otras salmonellas

Invasión por Placas de Peyer

Tonsilas cecales Pollitos menores

de 3 días

Colonización intestinal

Íleo – Ciego

Hígado

Bazo

Ovario

Muchas

salmonelas Pocas

salmonelas

Baja o nula mortalidad

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Salmonella Gallinarum

Tifosis & Pullorosis

Biotipos

Tifosis

Pullorosis

Salmonella enterica subsp. enterica ser. Gallinarum biovar. gallinarum

Salmonella gallinarum

Salmonella pullorum

Salmonella enterica subsp. enterica ser. Gallinarum biovar. pullorum

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Ingreso de Salmonella

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Lesiones

Hígado congestivo,

friable

Bazo agrandado,

nodulos Folículos ováricos

agrandados y

deformados

Miocarditis

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Ciclo de infección de Salmonella gallinarum

Vacunación Bioseguridad

Aditivos Bioseguridad

Bioseguridad

Bioseguridad

Bioseguridad

Aditivos

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Portadores de Salmonella Gallinarum

Activo

Excretan alta carga

bacteriana

Elimina en forma

intermitente

Latente

Agua, cama

de aves,

ambiente

Contaminación

del ambiente

Vida intracelular en

macrófagos

Transporte

Hacinamiento

Introducción de

nuevas aves

Alteraciones climáticas

Restricción alimenticia

Muda forzada

Cambios de

temperatura

Reproducción

Postura

Estrés

Brote de tifosis

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Diagnóstico

Bacteriológico clásico

Identificación:

Pruebas bioquímicas

Salmonella Gallinarum es la única serovariedad inmóvil, no es

imprescindible la serotipificación

Muestras ideal: Hígado

Aislamiento:

Preenriquecimiento no es necesario

Caldo selectivo no recomendable, SG crece menos

que otras salmonellas

Ideal: directo sobre Agar MacConkey, Verde

Brillante

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Días post

infección Aves muertas

Dosis de SG (UFC)

103 104 105 106 107 108

1

2

3

4

5 1 2

6 1

7 1 1 3 1 2

8 1 1 1

9 1 1

10 1 1 1

11

12 Muertas/Infectadas

(%) 2/5

(40%)

2/5

(40%)

3/5

(60%)

4/5

(80%)

5/5

(100%

)

5/5

(100%)

Modelo de infección

experimental Gallinas ponedoras marrones de 16 semanas de vida

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Vacunas

Tifosis: Infección principalmente

sistémica

S. gallinarum: bacteria

intracelular

Vacunas vivas más efectivas: estimulan mejor la inmunidad

celular

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Cepa Salmonella gallinarum 9R

William Smith, 1956.

Rugosa por LPS que tiene cadenas laterales repetitivas (antígeno “O”) defectuosas.

Mutación “sin sentido” en el cluster-gen raf.

Mantiene las SPI-1 y SPI-2 intactas: permite la invasión y colonización, simulando la infección natural

Vacuna

s

Produce muy buena respuesta inmune.

Se puede administrar por vía oral o inyectable.

Se recomienda vacunar desde las 6-8 semanas (algunos autores desde la 4° semana de vida).

Repetir vacunación cada 10-12 semanas.

Protege contra S. Enteritidis.

No interfieren con el antígeno Pullorum.

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Mediante Análisis de Restricción Enzimática (REA) del gen raf J se diferencia la cepa 9R de las cepas de campo.

Podría haber reversión al fenotipo salvaje (de rugosa a lisa)

M 1 2 3 4 5 6 7 8 M 10 11 12 13 14 15 16 17 C- M

1-Amplificación por PCR de rfaJ de las distintas cepas de Salmonella

-100pb

-200pb

-300pb

-400pb -500pb

M 1 2 3 4 5 6 7 8 M 10 11 12 13 14 15 16 17 M

2-Restricción de los productos de PCR con la enzima VspI

-100pb

-200pb

-300pb

-400pb

-500pb

1: Amplificación por PCR de

rfaJ de las distintas cepas de

Salmonella

9R Salvaj

e

Zumárraga et al, CICVyA, INTA

2: Digestión con enzima VspI

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S 6 S 16

Desafío

Semana 52

S 30

Desafíos con S. gallinarum

Vía

s/c

3-O

2-O + 1S

4-O

Día 1 Semana 6 Semana 16

Semana 30 Día 1 Semana 6 Semana 16

Día 1 Semana 6 Semana 16

Desafio

Semana 28 Desafio

Semana 52

Vacuna viva Salmonella Enteritidis

CHACANA, P.A.; TERZOLO H.R. Avian Diseases 50 (2): 280-283, 2006

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Mortalidad por tifosis aviar

5,9 0

94,1

0

50

100

1 3 Control

Grupos desafiados

% d

e g

allin

as

mu

ert

as

a a

b

Desafío Semana 28

La vacunación protegió eficientemente contra la

mortalidad causada por la tifosis aviar

3-O 2-O + 1S

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Gallinas ponedoras infectadas a las 16 semanas de vida con SG

Grupo A: 5 ppm de taninos hidrolizables 24 hs previo a la infección experimental con

SG y hasta el fin del ensayo.

Grupo B: 5 ppm de taninos hidrolizables el mismo día que se realizó la infección

experimental con SG y hasta el fin del ensayo. N= 14

Grupo C: Sin agregado de aditivo (grupo Control)

Aditivos alimentarios: extractos vegetales

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Lee et. al . J. Vet. Sci. 4:161 – 166. 2003

Desarrollo de Resistencia a Antibióticos para S. gallinarum

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Hacia una gestión racional de la salmonelosis en granjas

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Grupo Sanidad Avícola del Instituto de Patobiología

http://inta.gob.ar/unidades/233000

Patógenos y enfermedades

Salmonella

Clostridium perfringens

Escherichia coli

Coccidiosis

Micotoxinas

Patología aviar

Servicio especializado de diagnóstico de enfermedades

bacterianas entéricas y suscepibilidad a antibioticos y

promotores

Desarrollo y prueba de productos alternativos:

Aditivos alimentarios (extractos vegetales, anticuerpos)

Vacunas

Otros

Modelos de infección experimental: tifosis, paratifosis, enteritis

necrótica, coccidiosis, micotoxicosis

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Instalaciones

Laboratorios de microbiología,

histopatología

toxicología, parasitología

Bioterio NSB 2:

En Jaula: 80 pollos parrilleros hasta los 50

dias de vida / 100 gallinas ponedoras

En corrales: 60 pollos parrilleros hasta los

50 días de vida

Grupo Sanidad Avícola del Instituto de Patobiología http://inta.gob.ar/unidades/233000

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[email protected]

Muchas gracias