Mtodos de Precipitacin y Filtracin

Adriana Estefana Hernndez Pedraza Maestra en Ciencias con Orientacin en Farmacia Dr. Jorge Luis Guzmn Mar Separaciones Analticas

Antidiabetic and hypolipidemic effects of Collybia confluens mycelia produced by submerged culture in streptozotocindiabetic rats

IntroduccinDesde hace siglos, los hongos se utilizan en la medicina tradicional oriental para la prevencin y cura de diversas enfermedades. Los hongos comestibles son ideales para la prevencin de la diabetes e hiperglicemia, debido a su contenido de fibra, protenas y bajo contenido de grasas. Algunas fibras dietticas de stos han demostrado tener efecto hipoglucmico en ratas y ratones diabticos.

Materiales y MtodosSe utiliz:

El micelio del hongo Collybia confluens.

Ratas macho SpragueDawley, de 180 a 220 g de peso, diabetizadas por medio del uso de estrepzotocina.

Caldo de Cultivo

Filtracin

Micelio de Collybia confluens

Incubar en shaker (150 rpm) / 25C / aprox. 4 das

Homogenizar 100 mL de micelio en mezclador (3 mins/bao de agua c/hielo)

Cultivo, crece en matraces de 250 mL con caldo de dextrosa papa

Ajustar a pH 6.0

Inocular en medio lquido a 2% (v/v) para cultivo sumergido

Medio completo del hongo (MCM)

Colocar en shaker (150 rpm /pH 6 /25C/9 das)

Precipitar por centrifugacin el caldo de cultivo (10,000 x g/20 min)

Filtrar el MCM del cultivo lquido para recuperar micelio producido

Cultivo micelar se saca a matraz de 500 mL, com 200 mL de medio

Lavar precipitado 3 veces con DW

Composicin de MCM es: glucosa, extracto de levadura, peptona, KH2PO4, K2HPO4, MgSO4.7H2O

Ajustar pH a 6.0

Liofilizar y homogenizar para obtener CCMP

Anlisis BioqumicoGlucosa Colesterol Total en Plasma Triglicridos Fosfolpidos Colesterol HDL Niveles Enzimticos de: ATL y AST Grasa Protenas Carbohidratos Fibra Ceniza

Anlisis Estadstico

Test de Rango Mltiple de Duncan

Resultados y DiscusinDao heptico: ALT: alanin-amino transferasa AST: aspartato-amino tranferasa

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PrecipitacinLa forma precipitada es el compuesto insoluble que se forma en la reaccin entre la sustancia de inters y la del reactivo precipitante. La forma ponderable es el compuesto que se pesa para obtener el resultado del anlisis. Ambas, pueden ser iguales o diferentes. Se puede utilizar un compuesto insoluble si se cumple con:-

Solubilidad: precipitado insoluble para que parte soluble no afecte resultado final. Pureza: propiedades fsicas del precipitado deben facilitar eliminacin de contaminantes. Filtrabilidad: debe ser posible aislar cuantitativamente el precipitado slido de la fase lquida por mtodos simples de filtracin.

PrecipitacinLa precipitacin consiste en aadir a la disolucin que contiene el elemento a determinar, otra del reactivo precipitante, de manera que ste quede en exceso para desplazar el equilibrio hacia la formacin del compuesto insoluble. Se considera que la precipitacin es completa, si la cantidad del compuesto a determinar que permanece en la disolucin est fuera de los lmites de la precisin de la pesada, es decir, no supera los 0.0001 g.

PrecipitacinLa precisin de resultados depende de reactivo precipitante, qu cantidad se ha agregado de este y las condiciones en que se ha efectuado la precipitacin. Se ha demostrado que durante la separacin del precipitado a partir de la solucin, ste arrastra diversas sustancias extraas o iones, entre los cuales estn los iones del precipitante, que se deben eliminar del precipitado por lavado. El precipitante debe ser de fcil eliminacin de su exceso, preferentemente, debe ser voltil, porque el lavado puede resultar insuficiente.

FiltracinConsiste en retener partculas slidas por medio de una barrera, la cual puede consistir de mallas, fibras, material poroso o un relleno slido. La filtracin y el lavado de los precipitados son operaciones importantes, ya que los resultados analticos dependen considerablemente del cuidado con que se hayan llevado a cabo. En anlisis gravimtrico se usa el papel de filtro cuantitativo, hechos de acuerdo al tamao de las partculas del precipitado, para velocidad de filtracin lenta, media y rpida.

Para lavar un precipitado se deben tener en cuenta lo siguiente: Posibles contaminantes: deben ser solubles en la solucin que se toma para realizar el lavado y el precipitado debe ser insoluble en ella. Puede usarse una solucin que contenga un in comn para disminuir la solubilidad del precipitado. Solucin de lavado: debe volatilizarse completamente en las condiciones del procedimiento a seguir, de modo que no queden residuos que contaminen el precipitado. Si las caractersticas del precipitado en cuanto a solubilidad lo permiten, el lquido de lavado debe usarse caliente, pues los lquidos calientes filtran mucho ms rpido y la mayora de las impurezas son ms solubles a altas temperaturas.

Gracias por su atencin !!!

ReferenciaFiltracin y Precipitacin: http://platea.pntic.mec.es/pmarti1/educacion/3_eso_materiales/prof/blo que_ii/metodos_separacion.pdf http://www.uam.es/personal_pdi/ciencias/manchi/alim/TEMAIV.pdf http://www.ecured.cu/index.php/M%C3%A9todo_gravim%C3%A9trico_p or_precipitaci%C3%B3n Artculo utilizado: ByungKeun Yang, SangChul Jeong, HyunJi Lee, DongHwan Sohn, Chi Hyun Song. (2006). Antidiabetic and hypolipidemic effects of Collybia confluens mycelia produced by submerged culture in streptozotocin diabetic rats. Archives of Pharmacal Research. 29, 1, 7379.