PRACTICA N° 6

Mesa A3

Lara Zanabria, Luis López Lapa, Liz Lu Wei Shou Luna Apaza, Rocío Machaca Victorio, Bryan

METABOLISMO MICROBIANO.

Metabolismo de carbohidratos

Azúcares ResultadoGlucosa ++Lactosa -Sacarosa +Manitol -

Galactosa -

Metabolismo de proteínas

Proteína ResultadoCaseína +++

Metabolismo de lípidos

Metabolismo de Ox/Ferm.

Presencia de coloración amarilla en la parte superior del tubo.

Medio ResultadoTSA + Margarina +++TSA + Yema de

huevo+++

Medio KIA

Medio Citrato

Crecimiento +

Degradación -

Color Anaranjado

Crecimiento -

Degradación -

Color Verde

DISCUSIÓN

En la prueba de carbohidratos se utilizó el cultivo agar rojo fenol con 1% de diferentes carbohidratos (glucosa, sacarosa, lactosa, manitol y galactosa), resultando que solo los tubos con el cultivo de glucosa y sacarosa tuvieron un poco decoloración, mientras que los demás tubos tuvieron casi ninguna decoloración, siendo esto contrariado a lo que nos dice la bibliografía sobre el manitol el cual es un medio de cultivo diferencial para Staphylococcus aureus1 , con lo cual debió cambiar de color rojo a uno amarillento, podría ser que en el tubo con manitol no hubiera una buena concentración de esto se necesitó más tiempo de incubación (24 a 48 horas).1

La caseína es la proteína predominante enlaleche la cual es muy grande para pasar porlamembrana pero algunas bacterias como staphylococcus aureus liberan caseinasa que degrada laproteína e incorporanlos aminoácidos queseliberan2

El Agar Leche Descremada presenta como sustrato Caseína (proteína) y el microorganismo empleado la Enzima: Caseinasa (Proteasa,exoenzima),obteniéndose los aminoácidos producto de la hidrólisis;estas estas proteasas son excretadas al medio para la degradación de proteínas, la caseína es la proteína de la leche que le confiere el color blanco, cuando la caseína es hidrolizada desaparece el color blanco alrededor del crecimiento microbiano microbiano3

Metabolismo de lípidos

BD Baird-Parker Agar o yema de huevo

Como observamos nuestra bacteria al ser sembrado en las placas se observó que alrededor de estas había zonas transparentes debido a que estas tienen la enzima lecitinasa. Se fundamenta en que el medio tiene yema de huevo que constituye el sustrato para determinar la producción de lecitinasa y, además, la actividad de lipasa. Los estafilococos producen colonias de color de gris oscuro a negro debido a la reducción del telurito; los estafilococos que producen lecitinasa descomponen la yema de huevo y crean zonas transparentes alrededor

de las colonias correspondientes. Es posible que se forme una zona de precipitación debido a la actividad de lipasa. Sin embargo solo se observó la transparencia mas no colonias gris pudiéndose deberse a la falta de telurito.

Medio de cultivo con aceite vegetal

Una de las aplicaciones más comunes de la biotecnología es la producción y utilización de enzimas. Entre estas enzimas se encuentran las lipasas (triacilglicerol éster hidrolasas EC. 3.1.1.3), que pertenecen a un grupo de enzimas hidrolíticas, cuya función biológica es catalizar la hidrólisis de triglicéridos para obtener como productos finales ácidos grasos libres y glicerol o sus productos intermedios como monoglicéridos y diglicéridos. Estas enzimas están presentes en

la bacteria debido a que al agregar CuSO4 las colonias se tornaron turqueza debido al medio que proporcionan.

Las bacterias utilizan hidratos de carbono para poder realizar su crecimiento mediante la fermentacion u oxidacion. La principal diferencia de estas vias es la necesidad de oxígeno atmosférico y una fosforilación inicial. En el experimento se sembro en dos tubos con solucion de azul de bromotimol la cual uno de ellos se sello con parafina para impedir la entrada de oxígeno lo cual se pudo demostrar que el Staphylococcus aureus realizo tanto la fermentación mediante la vía de la Glucólisis o Entner-Doudoroff y la oxidación de la glucosa produciendo ácido pirúvico generando en los dos casos un cambio de pH por la produccion del acido y como consecuencia la viracion de color azul a amarillo en los tubos, de esta manera demostrando la actividad tanto en esta anaerobico- aerobico facultativo4 del Staphylococcus aureus.

Bibliografía

1. Manitol agar salados, véase en [http://www.britanialab.com/productos/246_hoja_tecnica_es.pdf], revisado el 20 de setiembre del 2014.

2. VegaE. Caracteriasticas fisiológicas bacterianas. 2010.[on line].Disponible en: http://ezoraya.files.wordpress.com/2010/06/pruebas-bioquimicas.pdf .[se accedió el 19 septiembre 2014]

3. Martin R. Pruebas bioquímicas. 2011. [on line].Disponible en: http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/U3c_PruebasBioquimicas_17461.PDF.

[Se accedió el 19 septiembre 2014]4. Sheagren J. and Schaberg D. Staphylococci. En Infectious Diseases. Gorbach, Barlett and

Blacklow. Pag.1697-1703. 1998. Ed WB Saunders.