Grupo 2Equipo 7

Morón Vázquez Felipe de Jesús.Sánchez Nexpanco Jonathan.

Tizo Canseco Ángel

P4. ANÁLISIS DE SUPERFICES INERTES Y VIVAS. BIOLUMINISCENCIA Y MEDIO AMBIENTE.

Objetivo

-Realizar la determinación de mesófilos aerobios, coliformes totales, hongos y levaduras presentes en el estacionamiento de la facultad mediante un muestreo por sedimentación.

-Realizar una evaluación de higiene de un volante de automóvil mediante la determinación de unidades relativas de luz (RLU).

Técnica analítica

Determinación de mesófilos aerobios, coliformes totales, hongos y levaduras

Evaluación de higiene de volante de automóvil.

Agar Mac Conkey, agar PDA y agar cuenta estándar.

Colocar las cajas abiertas durante 15min en el estacionamiento.

Incubar: Agar Mac Conkey a 24hrs/37°C, Agar PDA 28°C/3 días (levaduras) 5-7 días (hongos) y Agar cuenta estándar 48hrs/37°C.

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Resultados

Realizar el muestro, sin agregar desinfectante, con el hisopo mediante 10 movimientos verticales y 10 movimientos horizontales sobre el volante. Guardar hisopo en su estuche.

Realizar el mismo procedimiento de muestreo pero ahora con el volante “desinfectado”. Guardar hisopo en su estuche.

Ambos hisopos siguen la misma metodología.

Con el hisopo en su estuche, presionar hacia abajo para liberar la solución de reactivos.

Agitar lateralmente 5 veces. Una vez activado el hisopo, la lectura debe hacerse en 1 min.

Introducir el hisopo al luminómetro, cerrar la tapa, presionar el botón de lectura y registrar el dato.

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Tabla 1. Conteo de microorganismos (estacionamiento)

Microorganismo UFC/m3

Mesófilos aerobios 16Coliformes totales 0

Hongos 10Levaduras 19

Tabla 2. LIMITES PERMISIBLES DE ACUERDO A LA NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-093-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS. PRACTICAS DE HIGIENE Y SANIDAD EN LA PREPARACION DE ALIMENTOS QUE SE OFRECEN EN ESTABLECIMIENTOS FIJOS

SUPERFICIES VIVAS (manos). Cuenta de mesofilos aerobios. < 3000 UFC/manos

< 1500 UFC/mano

Coliformes totales <10 UFC/manos

<5 UFC/mano

SUPERFICIES INERTES (volante) Mesofilos aerobios <400 UFC/cm2 o unidad.

Coliformes totales < 200 UFC/cm2o unidad.

MEDIO AMBIENTE (estacionamiento). Mesofilos aerobios ≤15 UFC/cm3

Coliformes totales 0 UFC/cm3

Hongos y levaduras ≤15 UFC/cm3

Tabla 3.

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Superficie Superficie sucia Superficie desinfectada

Reducción de la población bacteriana en %

1.-mano 9914 542 94.532.-volante de carro (lysol) 628 258 58.923.-bebederos (lysol) 9786 550 94.384.-mesa de laboratorio (Bref)

222 20 91.00

5.-inodoro (lysol) 719 565 21.416.-8-Anexo 946 40 95.777.-cafeteria (lysol) 200 782 o_O8.-Lab. 1-B (lysol) 461 455 1.309.-Iphone (lysol) 788 264 66.5010.-Tabla para picar 27991 17764 36.54ESCALA DE LUMINOMETRO< 150 ACEPTABLE151-299 PRECAUCION> 300 NO ACEPTABLESUPERFICIE ANALIZADA

EQUIPO LECTURA SIN DESINFECTANTE

DE ACUERDO A LA ESCALA DE BIOLUMINISCENCIA

Mano 1 9914 No aceptableVolante del carro 2 628 No aceptableBebederos 3 9786 No aceptableMesa de laboratorio 4 222 AceptableInodoro 5 719 No aceptable8-anexo 6 946 No aceptableCafetería 7 200 AceptableLab.1B 8 461 No aceptableIphone 9 788 No aceptableTabla para picar 10 27991 No aceptableSUPERFICIE ANALIZADA

EQUIPO LECTURA CON DESINFECTANTE

DE ACUERDO A LA ESCALA DE BIOLUMINISCENCIA

Mano 1 542 No aceptableVolante del carro 2 258 aceptableBebederos 3 550 No aceptableMesa de laboratorio 4 20 AceptableInodoro 5 565 No aceptable8-anexo 6 40 aceptableCafetería 7 782 No aceptableLab.1B 8 455 No aceptableIphone 9 264 aceptableTabla para picar 10 17764 No aceptable

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En nuestra muestra se reporta como 258 URL/pieza de volante.

Nota: los números que se encuentran a lado del nombre de superficie fue como se graficó para ver la comparación de los resultados obtenidos.

Gráfica.1

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Series1 9914 628 9786 222 719 946 200 461 788 27991

Series2 542 258 550 20 565 40 782 455 264 17764

6670tán16a5667

6800tán27a5680

6940tán6a5694

7080tán16a5708

7210tán25a5721

7350tán5a5735

URL vs Superficie

URL

Serie 1: superficie sucia Serie 2: superficie limpia

En la gráfica se puede apreciar la diferencia que existe entre las superficies sin desinfectar y superficies desinfectadas dichas diferencias van desde 1% hasta el 95%. Las barras azules representan la cantidad de URL en las superficies sucias y las barras rojas la cantidad de URL después de aplicar el desinfectante. Sin embargo hay comparaciones en las que la diferencia es muy pequeña como en el caso del inodoro, una de las mesas del laboratorio 1B y en la tabla para picar.

Dentro de los resultados reportados hay un dato incongruente que corresponde a la cafetería y es que la cantidad de URL reportado para la zona desinfectada es mayor que la cantidad de URL reportado para la misma superficie sin desinfectar cuando debería ser al revés, tal como la tendencia de la gráfica lo muestra, los demás análisis fue reducir la

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cantidad de URL en las superficies. Debería haber una disminución en la población bacteriana. La discrepancia entre los datos quizá se deba a los siguientes errores, a una dislexia al momento de registrar los datos, al confundir los tubos de reactivos, o la técnica de limpieza.

En el análisis de microorganismos en el estacionamiento los resultados no fueron aceptables ya que difiere por mucho en las UFC/m3 en hongos y levaduras permitidos, para mesofilos aerobios el límite permitido era de 15 UFC/m3 y en el análisis salió de 16 UFC/m3 por lo tanto, esto es aceptable, para coliformes totales fue aceptable porque el límite es de 0 UFC/m3 y ese fue el resultado que se obtuvo en el análisis, para hongos y levaduras el límite es de 15 UFC/m3, en hongos obtuvimos 10 UFC/m3 mientras que en levaduras se obtuvo 19 UFC/m3, por esta razón no es aceptable el valor en cuanto a levaduras y hongos. Se puede concluir que el medio en donde se realizó el muestreo no cumple con las normas sanitarias.

En el análisis del volante de carro se puede ver que el desinfectante que se utilizó (Lysol) redujo la cantidad de URL, ya que al hacer el análisis con la superficie sucia la cantidad era de 628 URL y después de desinfectar se redujo a 258 URL por lo que este valor entra en el límite de la norma que es de 151 a 299 URL es precaución, esto quiere decir que este producto si cumple con la función de desinfectar al igual que el Bref.

La cantidad reportada para la mano sin lavar fue de 9914 y al momento de lavar adecuadamente las manos se reportó 142 URL, una reducción considerable, lo cual demuestra la importancia de lavado de manos.

Conclusiones

Con el equipo empleado y en las condiciones de ensayo señaladas, la bioluminiscencia resultó ser muy sensible para determinar materia orgánica de origen animado, pero es poco sensible para un microorganismo en particular. En superficies estériles, evidentemente no perfectamente limpias, se detectaron valores de 200 hasta 28.000 URL.

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Tizo Canseco Ángel

El uso de desinfectantes es muy recomendable para mantener una higiene adecuada

Hay superficies inertes en los cuales los desinfectantes no funcionan, es decir, que no afectan a la población de microorganismos que pueden alterar la calidad de los alimentos como el caso de la tabla para picar alimentos.

Es necesario la capacitación en buenas prácticas de manufactura y supervisión continua de la elaboración de alimentos, principalmente en el manejo de instrumentos para manipular los alimentos limpieza de las superficies vivas e inertes.

Es de suma importancia llevar a cabo acciones correctivas que nos ayuden a evitar contaminación cruzada en el momento de la manipulación de alimentos, el lavado de manos es muy importante pero hay que saber lavarlas adecuadamente.

Suponiendo que las superficies desinfectadas y analizadas, son parte de un restaurante, o una industria alimenticia, las manos del cocinero, los bebederos, el inodoro, la cafetería y el lab.1B serían evidencias suficientes para clausurar el restaurante o la dicha industria.

Bibliografía

Norma Oficial Mexicana NOM-093-ssa1-1994, bienes y servicios. Prácticas de higiene y sanidad en la preparación de alimentos que se ofrecen en establecimientos fijos

http://www.axonas.com.ar/backoffice/publicaciones/5_Bioluminiscencia.pdf

jornades.uab.cat/workshopmrama/.../BC_Aplicaciones_Analiticas.pdf

Catherine M. C. et al. 2008; Micriobiological Analysis of Food Contact Surfaces in Child Care Centers; Appl. Environ. Micriobiol 74(22); 6918-6922