Possible pathway for heterochromatin formation in Drosophila.

Swaminathan J et al. Genes Dev. 2005;19:65-76

©2005 by Cold Spring Harbor Laboratory Press

(The endogenous siRNA pathway is involved in heterochromatin formation in Drosophila. Fagegaltier et al., 2009)

polII TF

RNA

(Octubre, 2012)(Nature Structural and Molecular Biology)

eyegone (eyg) y twin of eyegone (toe)• eyg y toe pertenecen a la familia de factores de transcripción Pax

• Miembros de la familia Pax gene existen también en vertebrados. Hay 9 genes Pax en humanos.

• Las proteinas PAX son factores de transcripción que unen ADN a través de sus dominios paired (PD) y homeodominio (HD).

eyegone (eyg) y twin of eyegone (toe)

eyg y toe son los únicos genes pax con un dominio paired truncado y estructuralmente son homólogos al Pax6(5a). Son represores transcripcionales.

June et al, 1998

Grewal and Elgin, 2007

Heterocromatina constitutiva: Centrómeros y telómeros

Heterocromatina facultativa: Regiones reguladoras

Represión por reclutamiento de factores remodeladores de la cromatina

Análisis de la estructura de la cromatina en la región reguladora de wg.

Ensayo de sensibiIidad a DNAsaI

eyg reprime a wg durante el desarrollo del ojo de Drosophila

Ensayo de sensibilidad a DNAse I

Extracción del ADN

+/- Tratamiento con DNAseI

Lisis celular (digestión con proteasa k)

Purification del ADN genómico

Ensayo de PCR-cuantitativa

Análisis de la estructura de la cromatina.

HETEROCHROMATIN

EUCHROMATIN

Ct

50UCt

0UDCt=Ct50U- Ct0U

Análisis de la estructura de la cromatina en la región reguladora de wg

wg1

Fenotipo embrionario de mutantes eyg