plant phenolic analysis
DESCRIPTION
TRANSCRIPT
![Page 1: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/1.jpg)
10/20/2012 1Minaleshewa Atlabachew
![Page 2: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/2.jpg)
������������������
• ���������
• � ���������
• ��� �������������� �����
� ����������� ������ ����������� �����
� ������������� �����
• �������
• ������ �������������
• ��������
10/20/2012 2Minaleshewa Atlabachew
![Page 3: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/3.jpg)
�� ���������• �� � ���������������������������������� �! ��
���������� ����"����
• #��� ������� ���� ������������������������
������� ������ ����������������
• $�� � ���������%are biosynthetically derived from primary metabolites. They are more limited in primary metabolites. They are more limited in distribution being found usually in specific families. They are not necessary for growth and development, but may serve as pollination attractants, environmental adaptations, or protection.
10/20/2012 3Minaleshewa Atlabachew
![Page 4: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/4.jpg)
• & ������������� ����������� ����������� � ������'������������������(�! ��������������#�����������������������(����������������������
• � ������ ��������)���� ������ ����������������(�� ������������� �������(�� ������������� �������
• � �������������� �������'�����������������������������*#+�,(�� �������������������'�! �(��������������
10/20/2012 4Minaleshewa Atlabachew
![Page 5: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/5.jpg)
� -�'������ ���������'����������������������� ���� ����
����(���� ���������*�������,�� �������
� #��������� #�������������� ���������� ���(.�����
���������������������������*�. +",�
• #��������(�����������(�� ����������������������
��/�! �����������������
� ��������� ��������
� $�� � ���������
� ���� ����� ������� �! ������� ������)�� ����
� "������������������������������'�! �
10/20/2012 5Minaleshewa Atlabachew
![Page 6: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/6.jpg)
�����������
��������
������������� ��
������� ��
����� ������ � � ��������� ������������� ���
10/20/2012 6
����� ������ � � ���������
� ��������� �� ��������
������� ��� ��������
� �� � �� �� ���������� �
������ ������
������������� ���
������ � ����� ����������
������� ����������������
������������ ���� ��������
�������� ��� ��� �� �����
�
Minaleshewa Atlabachew
![Page 7: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/7.jpg)
• �������
�������������������
�(�� �� ���)��! ������������������
��((��������� ��������
� �((�����������/����(����� ������� �������� �((�����������/����(����� ������� �������
���������������
� ������������������ �����(�������������! ���
10/20/2012 7Minaleshewa Atlabachew
![Page 8: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/8.jpg)
• ��������
• (�������� ����������������������� �� ����������
��,
• ������ ��*�����((��������! ������,
�& ����� �� ����������(��
����� ����! ������������� ������������ �����
��������� ����������������������������
10/20/2012 8Minaleshewa Atlabachew
![Page 9: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/9.jpg)
�� �����������(�������
10/20/2012 9Minaleshewa Atlabachew
![Page 10: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/10.jpg)
�����������
MiscellaneousSimple phenolsPolyphenols
0��������1����Tannins �������
����$�����
LiganasCumarinsLignins ResveratrolFlavones
10/20/2012 10
ResveratrolFlavonesFlavonolsFlavan-3-olIsoflavonesFlavanolsAnthocyanins
Minaleshewa Atlabachew
![Page 11: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/11.jpg)
• ���� ���( ��������������� ��������
• ���� ���(���� ����������������� ��������
• ���� ���((�����������������(����������
�#��(�����! ���������������/����������
#���������
�#��(�����! ���������������/����������
! ������������������������������
�������
10/20/2012 11Minaleshewa Atlabachew
![Page 12: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/12.jpg)
#������������(������
����������� ������
������� ������ ������ ��� ������� ����10/20/2012 12Minaleshewa Atlabachew
![Page 13: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/13.jpg)
���� �����������
• ������� ���(����������������� ����
• ������������������� ������������
• ����������������������� �������������������
� ����������������
� #� �'�(���(�� �����(���� � ����)
� �������������((�������(���������������
���� �������������(��! �� �������������
10/20/2012 13Minaleshewa Atlabachew
![Page 14: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/14.jpg)
��� ���
Sample pre-treatment
!��� ��
Extraction
Freeze-drying, Air drying, Oven drying,Grinding, Homogenization
Solid-liquid extraction Conventional ModernPercolation UAE, MAE, SFE, PLE, Maceration PHWE , Soxhlet, Refluxing, Infusion
10/20/2012 14UV , Electo.Chem., FLU, MS, MS/MS, NMR
Instrumental analysis
Clean- up -Isolation
Soxhlet, Refluxing, Infusion
CC-fractionation, Filtration, Evaporation, LLE, SPE, SPME, SDME
LCLC GC FID, ECD MS, MS/MS
UV, EC, FLU, TLC MS
� �����
Minaleshewa Atlabachew
![Page 15: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/15.jpg)
2)�������� ����
• �������)�������*��3��)�������,
• �4�����������! ����������������� �(
��������������5& ��������������������
��������� ��������������� ������
• �4�����������������������(�#������
• 6 �����4�������������� ���������
����������������
10/20/2012 15Minaleshewa Atlabachew
![Page 16: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/16.jpg)
-����������
• ��'�� ! ���������
• ���������������! ���
�����(�! ����
1-50 g
������
• ��������������� 3
• ��� �����/���.�
• #�� ����7����
• -���������8���������
10/20/2012 16
Percolator
1-50 g
�������Minaleshewa Atlabachew
![Page 17: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/17.jpg)
9�& ��������
"��� � ������� #���� �� � �������
FiltrationSolvent
Up to 72 hr
½ h -24 h
Pooled
Solvent renewed
10/20/2012 17
Sample
Sample
Up to 72 hr Solvent renewedtwo-three
ShackenStirred
UniversalProlonged ext. time improves efficiency but
Solvent
Solvent
Minaleshewa Atlabachew
![Page 18: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/18.jpg)
���)����
• -������������ ��
• 0������������� ���������������
• �4����� ��������������������������
• #�� �8���$:�
• ;��� �8����.��� 3• ;��� �8����.��� 3
• -������� ���������������� ����
• �����((������������ �(�)�������
• ����� ������������ �����*#������,� ��������/������ ���������������(����
• �������������������
10/20/2012 18Heat Minaleshewa Atlabachew
![Page 19: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/19.jpg)
5�+�! ������(����
• -������ ��(! ����
• & ���((������
• ��4������ ���� ��������� �
• #��< �((��(��������)�������Heat • #��< �((��(��������)�������
• 3�� ������
& ����������� ���������������������
��������((����������������
10/20/2012 19
Heat
Minaleshewa Atlabachew
![Page 20: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/20.jpg)
��� ����������� �����• =����� ������ ���� ��������������� �������((��(��
� ������ ������
� 3�� ���� �����/�������� �(� ����������
� ���� ���)���������� �
� 0�� ����(����(����
� 3�� ���(�����
� >���������������� ��������/�����������(����������� >���������������� ��������/�����������(����������
� �����
� ! ������������)���������� �
� ������������������ �����
� ����������������������������������! ��������������(�
����� ������������������
� -��� ����
� >�������������10/20/2012 20Minaleshewa Atlabachew
![Page 21: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/21.jpg)
-�? �����������������)�������*?-2,
• ? ������������
�����������������
US irradiation
�����������������
• ������� (���������
� >�������� �2
� >�������������! ���
10/20/2012 21
Recently , UAE is widely used for all types of phenolic cpds
Minaleshewa Atlabachew
![Page 22: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/22.jpg)
���@�
• 2((�������(�)���������������
• ��������#�� �8*�.�1�� ��,
• #�� ��������8*7��A���,
• ?��! ��*9���! ����� ��! ��,
• �)�������������8�4������������(��������• �)�������������8�4������������(��������
� 9�������������� ��������������������$�����
�������������������� �������
� >������������ �������������
� ��)��� �(����������)����
10/20/2012 22Minaleshewa Atlabachew
![Page 23: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/23.jpg)
$% & ����� �� ������ '�������• & -2�������������� ������ �������������
�� �����(& ���! ���>�������*$:.� & +/
(��4�����,
� �����������
� 5����������
Heating � 5����������
10/20/2012 23
�Only polar solvents are used for MAE
�expansion and rupture of cell walls
�Weakening van der Waals forces between solute & matrix
� liberation of phenolics
Minaleshewa Atlabachew
![Page 24: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/24.jpg)
-������ ��������������� ��(& -2
� >�������(
� �)���������� �*�������B$�� ��,
� ���������� �
� � ������)������������*(���������� ����)���
��������,���������,�
• +! ����
� 3����((������(�� ������)��������������
� ����� ���� �������� ����������������
��� ��������*"���.��,
10/20/2012 24Minaleshewa Atlabachew
![Page 25: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/25.jpg)
���@�C �� ������! ������������
10/20/2012 25
D���� � Plant flavonoids-4����������
24 20 6 0.5 0.1 h
Minaleshewa Atlabachew
![Page 26: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/26.jpg)
!% "���� !������ (���� '������� �"(')*+%��
• ������������������(����������)������� ������
• �� $ ������ ���� � �������������! ����02����� �! ����������� ��������*7���AE�,�����������*F7��� ,
� ������� �����������
� ����! �)�����
� >������������ >�����������
• 3! ��������� 5 �((����
• +� ��������� ������� �! ��
• #�������
• & ��(������������������G��������/����
10/20/2012 26
SF
Minaleshewa Atlabachew
![Page 27: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/27.jpg)
2)����������������
• 3! ��� ����
���� � �����
• #�� ��:��A��
• ��������8$.�:. & ��
• #�� �*$���:�� ��,
• #������ ���"
• ������$�.� �
• �.�A�� 3
10/20/2012 27& ��(���
�������(���
Liquid solvent
Minaleshewa Atlabachew
![Page 28: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/28.jpg)
-������ ��������������� ��• ���������
• 9����� ������ ���)�����������
• 0���������)�������
• >�������)���������� �
• >������(�� $
• ��������(���(� � ��������• ��������(���(� � ��������
• 3����� ������������ �� ��� ������
• -��� �����.����
• & ���� �/��� �������*)������< ��� ���/����,
• +� ����������� �����)�������
• 2)�������
10/20/2012 28
DisadvantageMinaleshewa Atlabachew
![Page 29: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/29.jpg)
#% ,������-� .�/��� '������� ,.'01"'
• �! �'������������������� ��������! �����������
��
• #*.�� $����,����*��� �.& ��,
� #�� ������������������((����������6 ��'���� ���� #�� ������������������((����������6 ��'���� ���
���6 ����(����� ���������������
� ��������(���� ���������������< ��(������
10/20/2012 29Minaleshewa Atlabachew
![Page 30: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/30.jpg)
2)����������������
�100 atm to 200 atm
10/20/2012 30
5���� ��G������� ��
�Multiple extraction ( for static)Minaleshewa Atlabachew
![Page 31: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/31.jpg)
���@�
�+� ���� ���((����)�������
�A�������
�9������ �)�����+$� *>�+���������+7�� ,
�#������� �)�����*+$� H>�+H5& �� G�+7�� ,
�5& �� ����4����5& �� ���������)��������5& �� ����4����5& �� ���������)�������
����������
�#�� �8���7�� ��I������� �
�+� ���#�� ������ ����
10/20/2012 31Minaleshewa Atlabachew
![Page 32: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/32.jpg)
2������������+�6 ����2)��*�+6 2,G*�+6 2,
• ������� �������������������4��
• �����/����������/��! ����������������� ��������
���������������������������
• #�� �8����7F:J�< ��������8��������
� #���������������� �����-�2� #���������������� �����-�2�$����
� �������(! ������������������������4�����
� 5���������������������� �������*"��$:,
� (�! ������������������������(������
��������)�������
� 0���� ��������������*����$��J�,�A����
10/20/2012 32Minaleshewa Atlabachew
![Page 33: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/33.jpg)
�������• ������(���������� ����������(���������������
��4�����
• ������(� ����0������������������������
• ����������� ��
• 3���������� ������������������������������
��������� ����������������������)������� �������
•• 2��������� >����������
10/20/2012 33Minaleshewa Atlabachew
![Page 34: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/34.jpg)
���@�• 332 ���� � �������������'��+$��$ ����������
� #��� ���������������
• ��2 *�"���"����� �������������������)���� �,
� ���� ������������� �����
• & ����������� ����������� ��������� ��& ����������� ����������� ��������� ��
�K ��������G��������������������� �����
����������� ����)�������*��& 2,
���� ������ ����)�������*�5& 2,
10/20/2012 34Minaleshewa Atlabachew
![Page 35: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/35.jpg)
& ����������� ����������� ���
10/20/2012 35Minaleshewa Atlabachew
![Page 36: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/36.jpg)
��& 2
• ��& 2�D��& �
• 5�������/����
• ��� ���������������
- Hexyl acetate
SDME-in syringe derivatizationSDME-GC-MS
10/20/2012 36
SDME-in syringe derivatization
GC/MS Minaleshewa Atlabachew
![Page 37: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/37.jpg)
• �����(��& 2�������������������(������������/��! ���
����������������/�� � ������'���������� �����
����(�� �����������/�� � �������4����� ������$.�:���(�7��A�� ��
• ����������(������������������������������������
��������������� �)�������
• ���������'�*��� ��������� ��������)����������������
����)��G������ ��������)������������ ��������)���G����)��G������ ��������)������������ ��������)���G
����������/���,
• �����(�5& 2����� �����(� ������������'�*��)��
�������, ������������������(�� �������� �������
���(������ ���������! ����������� �
• �+(�������������������������������! ���������
����������� ��� �������������� ����������������
�4���������
10/20/2012 37Minaleshewa Atlabachew
![Page 38: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/38.jpg)
K ����(������
D�
2������������
�����
Derivatization
Individual Determination
+�3�
� �����
10/20/2012 38
�����
2)�����
Minaleshewa Atlabachew
![Page 39: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/39.jpg)
-��� �� ���
• 9�������������(����������)�������
• & ���������� ����������� ���(���2
• ���������� �����)�������*������������
�������� �������& 2,
��� ��������������� �����)�������• ��� ��������������� �����)�������
10/20/2012 39Minaleshewa Atlabachew
![Page 40: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/40.jpg)
D��������� ������
#����������
L 1��% � 234 �� ����� �� �� � �� /������ � 51')
L 6����� � �� (���� #���0!������� 784 ��
#���(�����
L 6����� � �� 1�!� ������ ���
L 1944 ��� ������ �� ������ /������ �!')(�������
L 1944 ��� ������ �� ������ /������ �!')
#����������
L ������ ��� � �� �����
L 1���,������� 1��������� �� ������� � �� ��� ��� � �� (������� ��� � ���� 1���% 1 9*4 ��
L �1'*7%��
10/20/2012 40Minaleshewa Atlabachew
![Page 41: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/41.jpg)
• #������������ ���������� ������
• #��������! ! ���(������ ���� ������������� �����
• ����� ������� ������������(����)�����������$"�
�� ����)�������������������� �(�4��������(��
��������� �����? ������ ���������4��������
• $�#��(�����!������ ���� *0�>,�(����:� ����� ����• $�#��(�����!������ ���� *0�>,�(����:� ����� ����
�(�����#��� ���� ���� �)����(������ ������� ���
�������� �����
•• �������������������� ������������� �� ����� ���������
������������ ��� ����� ���� ����������������������� ����
�������������� �������������������� ���������������
����������������������������������������������
10/20/2012 41Minaleshewa Atlabachew
![Page 42: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/42.jpg)
#��������������� ������
• ?��� ���� �������������'��;���! M
• ?��� ���������'� �������9�-�� ����� ��
�! M
10/20/2012 42Minaleshewa Atlabachew
![Page 43: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/43.jpg)
-���)����������• ; �� �� ���������� <• �����������(�����)��������'������ ��������� ��2�
���������������������������������������� �������
������� ��/��������� ����������������������������'
• #��� �����������������(������)����������������������
(�����������(�����������
• +� �����������(��������������)� ���������������������
��� ���������� �(�� �! ����������(������
• #����(������������ ��)���/����������������������������
�5�-���������������� �����������������
10/20/2012 43Minaleshewa Atlabachew
![Page 44: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/44.jpg)
• -���)������� �������'��������������������������
(������������� �(��������������������)����
�������)������������)�������������������)�������
� �������� ������������ ������������������
• #����������� ���(����������������� ����� �������
����)��������(�������� �����������������! ���������
� ���(�����(������������((�����(�����(����
������� ������������(���������������������� �����
������������ �������������������� ��������
10/20/2012 44DPPH (2, 2 -diphenyl-1-pycryl-hydrazyl)Minaleshewa Atlabachew
![Page 45: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/45.jpg)
& 2#+� 5�� �� 52>-# � ��
• ;���������)�������������� ������������������
� ��������� �����������)�������������((��
10/20/2012 45Minaleshewa Atlabachew
![Page 46: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/46.jpg)
���������#�����������3�)�������� �������4�������� �
4�������(��������������� ������ �� �
� ���������������������� ����������� �
��������������� �����((���� ������� ��! ���
��������
� �)���������� ��� �)���������� ��
� ����������� ����
� �)�������������
�#���������� ����������������)�������������4��
�������������������(��������� ������
� ����� �������� �/�������������4����������
���������10/20/2012 46Minaleshewa Atlabachew
![Page 47: Plant phenolic analysis](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022042601/547a3c22b479597c098b49a7/html5/thumbnails/47.jpg)
10/20/2012 47Minaleshewa Atlabachew