plagiat merupakan tindakan tidak terpuji · bab iv. hasil dan pembahasan..... 30 a. preparasi...
TRANSCRIPT
OPTIMASI FORMULA GEL SUNSCREEN EKSTRAK KERING POLIFENOL TEH HIJAU (Camellia sinensis L.) DENGAN CARBOPOL SEBAGAI GELLING AGENT DAN SORBITOL SEBAGAI HUMEKTAN
DENGAN METODE DESAIN FAKTORIAL
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.) Program Studi Ilmu Farmasi
Oleh :
Francine Dona Paramita
NIM: 048114107
FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA 2008
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ii
OPTIMASI FORMULA GEL SUNSCREEN EKSTRAK KERING POLIFENOL TEH HIJAU (Camellia sinensis L.) DENGAN CARBOPOL SEBAGAI GELLING AGENT DAN SORBITOL SEBAGAI HUMEKTAN
DENGAN METODE DESAIN FAKTORIAL
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.) Program Studi Ilmu Farmasi
Oleh :
Francine Dona Paramita
NIM: 048114107
FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA 2008
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iv
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
v
HALAMAN PERSEMBAHAN
Skripsi ini kupersembahkan untuk :
Papa, Mama, mas Rully, Merry, dan Rico
Teman-teman Farmasi Sains Teknologi 2004
Almamaterku
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vii
PRAKATA
Puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa atas berkat dan karunia-Nya
sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul: “Optimasi Formula
Gel Sunscreen Ekstrak Kering Polifenol Teh Hijau (Camellia sinensis L.) dengan
Carbopol sebagai Gelling Agent dan Sorbitol sebagai Humektan dengan Metode
Desain Faktorial”, sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana
Strata Satu Program Studi Ilmu Farmasi (S.Farm).
Dalam menyusun skripsi ini penulis banyak mendapat bantuan berupa
bimbingan, dorongan, sarana, maupun finansial dari berbagai pihak. Untuk itu
penulis mengucapkan banyak terima kasih kepada :
1. Rita Suhadi, M.Si., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi, Universitas Sanata
Dharma, Yogyakarta.
2. Ratna Rini Nastiti, S.Si., Apt., selaku Dosen Pembimbing atas bimbingan,
pengarahan, dan dukungannya selama penelitian sampai penyusunan skripsi
ini.
3. Sri Hartati Yuliani, M.Si., Apt., selaku Dosen Penguji yang telah memberikan
masukan, kritik, dan saran untuk skripsi ini.
4. Agatha Budi Susiana Lestari, M.Si., Apt., selaku Dosen Penguji yang telah
memberikan masukan, kritik, dan saran untuk skripsi ini.
5. Keluarga : papa, mama, mas Rully, Merry, dan Rico yang telah memberikan
doa dan dukungannya.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
viii
6. Teman-teman team teh : Yoyo, Agung, Ika, Dian, Selvi, Fhery, Tere, Resty,
dan Rinta atas kerjasama, diskusi, dan kebersamaannya selama penelitian ini.
7. Segenap laboran fakultas Farmasi yang telah membantu terlaksananya
penelitian ini.
8. Teman-teman team wortel, team Curcuma mangga, dan team alga atas
kebersamaannya selama penelitian ini.
9. Teman-teman kost : Mayang, Ana, Helena, Tika, Ria, dan Eva atas dukungan
dan kebersamaannya.
10. Teman-teman Farmasi Sains dan Teknologi (FST) angkatan 2004.
11. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu per satu yang telah membantu
penyelesaian skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa penelitian yang telah dilakukan untuk
penyusunan skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan. Walaupun demikian
penulis berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi masyarakat dan
perkembangan ilmu pengetahuan.
Penulis
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ix
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
x
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL.................................................................................................. ii
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING........................................................ iii
HALAMAN PENGESAHAN.................................................................................... iv
HALAMAN PERSEMBAHAN................................................................................ v
PRAKATA................................................................................................................. vi
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA.................................................................... viii
DAFTAR ISI.............................................................................................................. ix
DAFTAR TABEL...................................................................................................... xii
DAFTAR GAMBAR................................................................................................. xiii
DAFTAR LAMPIRAN.............................................................................................. xv
INTISARI................................................................................................................... xvi
ABSTRACT............................................................................................................... xvii
BAB I. PENDAHULUAN......................................................................................... 1
A. Latar Belakang Penelitian.................................................................................... 1
B. Rumusan Masalah................................................................................................ 4
C. Keaslian Penelitian............................................................................................... 4
D. Manfaat Penelitian............................................................................................... 5
E. Tujuan Penelitian................................................................................................. 5
BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA....................................................................... 6
A. Polifenol Teh........................................................................................................ 6
B. Maserasi............................................................................................................... 7
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xi
C. Ekstrak.................................................................................................................. 7
D. Gel....................................................................................................................... 8
E. Carbopol.............................................................................................................. 9
F. Sorbitol................................................................................................................. 10
G. Sunscreen............................................................................................................ 11
H. Metode Desain Faktorial...................................................................................... 12
I. Spektrofotometri Ultraviolet (UV)....................................................................... 15
J. Landasan Teori..................................................................................................... 16
K. Hipotesis............................................................................................................... 17
BAB III. METODOLOGI PENELITIAN.................................................................. 18
A. Jenis dan Rancangan Penelitian........................................................................... 18
B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional...................................................... 18
1. Variabel penelitian......................................................................................... 18
2. Definisi operasional....................................................................................... 18
C. Alat dan Bahan Penelitian.................................................................................... 20
1. Alat................................................................................................................. 20
2. Bahan............................................................................................................. 20
D. Tata Cara Penelitian............................................................................................. 20
1. Preparasi ekstrak kering polifenol dari teh hijau............................................ 20
2. Penetapan kadar polifenol total dalam ekstrak kering polifenol teh hijau
secara kolorimetri (metode Folin-Ciocalteau)...............................................
21
3. Penentuan nilai SPF secara in vitro................................................................ 23
4. Pemilihan eksipien dan optimasi formula...................................................... 25
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xii
5. Uji sifat fisik dan stabilitas gel sunscreen ekstrak kering polifenol teh hijau 27
6. Subjective assessment..................................................................................... 27
7. Optimasi formula gel sunscreen ekstrak kering polifenol teh hijau.............. 27
E. Analisis Data dan Optimasi.................................................................................. 28
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN.................................................................. 30
A. Preparasi Ekstrak Kering Polifenol dari Teh Hijau.............................................. 30
B. Penetapan Kadar Polifenol Total dalam Ekstrak Kering Polifenol Teh Hijau
secara Kolorimetri (Metode Folin Ciocalteau)....................................................
32
C. Penentuan nilai SPF secara in vitro...................................................................... 35
D. Uji Sifat Fisik dan Stabilitas Gel Sunscreen Ekstrak Kering Polifenol Teh
Hijau.....................................................................................................................
38
1. Daya sebar..................................................................................................... 41
2. Viskositas....................................................................................................... 44
3. Pergeseran viskositas..................................................................................... 46
E. Optimasi Formula................................................................................................ 49
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN.................................................................... 55
A. Kesimpulan.......................................................................................................... 55
B. Saran..................................................................................................................... 55
DAFTAR PUSTAKA................................................................................................ 56
LAMPIRAN............................................................................................................... 59
BIOGRAFI PENULIS............................................................................................... 89
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiii
DAFTAR TABEL
Tabel I Rancangan percobaan desain faktorial dengan dua faktor dan dua
level......................................................................................................
14
Tabel II Formula desain faktorial....................................................................... 26
Tabel III Kurva baku kuersetin........................................................................... 34
Tabel IV Hasil penetapan kadar polifenol dalam ekstrak kering polifenol teh
hijau .....................................................................................................
35
Tabel V Hasil pengukuran sifat fisik gel sunscreen…………………............... 39
Tabel VI Efek larutan carbopol 3% b/v, efek sorbitol, dan efek interaksi
antara keduanya dalam menentukan sifat fisik gel
sunscreen..............................................................................................
40
Tabel VII Analisis Yate’s treatment untuk respon daya sebar gel
sunscreen..............................................................................................
42
Tabel VIII Analisis Yate’s treatment untuk respon viskositas gel
sunscreen..............................................................................................
45
Tabel IX Analisis Yate’s treatment untuk respon pergeseran viskositas gel
sunscreen..............................................................................................
48
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiv
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1 Struktur monomer asam akrilat dalam carbopol..................................... 9
Gambar 2 Rumus bangun sorbitol…........................................................................ 10
Gambar 3 Struktur kuersetin.................................................................................... 32
Gambar 4 Hasil scanning operating time................................................................. 33
Gambar 5 Hasil scanning panjang gelombang maksimum...................................... 34
Gambar 6 Struktur epikatekin, epikatekin-3-galat, epigalokatekin, dan
epigalokatekin-3-galat dengan sistem kromofor dan gugus
auksokrom...............................................................................................
36
Gambar 7 Hasil scanning panjang gelombang (λ) UV ekstrak kering polifenol
teh hijau...................................................................................................
37
Gambar 8 Grafik hubungan antara larutan carbopol 3% b/v (g) dan respon daya
sebar gel (cm) (8a); grafik hubungan antara sorbitol (g) dan respon
daya sebar gel (cm) (8b)..........................................................................
41
Gambar 9 Grafik hubungan antara larutan carbopol 3% b/v (g) dan respon
viskositas gel (d.Pa.s) (9a); grafik hubungan antara sorbitol (g) dan
respon viskositas gel (d.Pa.s) (9b)...........................................................
44
Gambar 10 Grafik hubungan antara larutan carbopol 3% b/v (g) dan respon
pergeseran viskositas gel (%) (10a); grafik hubungan antara sorbitol
(g) dan respon pergeseran viskositas gel (%) (10b)................................
46
Gambar 11 Contour plot daya sebar gel sunscreen ekstrak kering polifenol teh
hijau.........................................................................................................
50
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xv
Gambar 12 Contour plot viskositas gel sunscreen ekstrak kering polifenol teh
hijau.........................................................................................................
51
Gambar 13 Contour plot pergeseran viskositas gel sunscreen ekstrak kering
polifenol teh hijau....................................................................................
52
Gambar 14 Contour plot superimposed gel sunscreen ekstrak kering polifenol teh
hijau.........................................................................................................
53
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xvi
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1 Data penetapan kadar air serbuk teh hijau dengan Metode Karl
Fischer..................................................................................................
59
Lampiran 2 Penetapan kadar polifenol dalam ekstrak kering polifenol teh
hijau......................................................................................................
61
Lampiran 3 Penetapan nilai SPF.............................................................................. 64
Lampiran 4 Hasil scanning operating time.............................................................. 66
Lampiran 5 Hasil scanning panjang gelombang maksimum................................... 67
Lampiran 6 Data penimbangan dan notasi............................................................... 68
Lampiran 7 Data pengukuran pH pada formula...................................................... 69
Lampiran 8 Data sifat fisik: daya sebar, viskositas, dan pergeseran
viskositas..............................................................................................
70
Lampiran 9 Perhitungan efek sifat fisik................................................................... 71
Lampiran 10 Persamaan regresi................................................................................. 73
Lampiran 11 Data analysis of variance (ANOVA) Yate’s treatment........................ 78
Lampiran 12 Contoh kuesioner subjective assessment.............................................. 84
Lampiran 13 Hasil kuesioner subjective assessment................................................. 85
Lampiran 14 Dokumentasi......................................................................................... 87
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xvii
INTISARI
Penelitian ini merupakan optimasi formula gel sunscreen ekstrak kering polifenol teh hijau (Camelia sinensis L.) dengan larutan carbopol 3% b/v sebagai gelling agent dan sorbitol sebagai humektan dengan metode desain faktorial. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui faktor yang dominan diantara larutan carbopol 3% b/v, sorbitol, atau interaksi antara keduanya dalam menentukan sifat fisik gel, dan untuk memperoleh area komposisi optimum dari gelling agent dan humektan yang diteliti.
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental murni dengan aplikasi desain faktorial. Untuk optimasi formula digunakan desain faktorial dengan kombinasi formula 1, a, b, dan ab, dengan kombinasi larutan carbopol 3% b/v dan sorbitol yang berbeda-beda untuk tiap formula. Optimasi dilakukan terhadap parameter sifat fisik yang meliputi daya sebar, viskositas, dan stabilitas gel selama penyimpanan satu bulan. Analisis statistik yang digunakan dalam penelitian ini adalah Yate’s treatment dengan taraf kepercayaan 95%.
Diperoleh hasil larutan carbopol 3% b/v memberikan efek yang dominan dalam menentukan daya sebar dan viskositas gel. Interaksi antara larutan carbopol 3% b/v dengan sorbitol memberikan efek yang dominan dalam menentukan pergeseran viskositas gel. Berdasarkan contour plot superimposed didapatkan area optimum yang diprediksi sebagai formula optimum gel. Daya sebar optimal pada penyebaran 6,3-7 cm. Viskositas optimal pada 50-65 d.Pa.s. Stabilitas formula optimal pada pergeseran viskositas 0-8 %. Kata kunci: ekstrak kering polifenol teh hijau, larutan carbopol 3% b/v, sorbitol, desain faktorial
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xviii
ABSTRACT
This study was about formula optimization of green tea (Camellia sinensis L.) polyphenol dry extract sunscreen gel with carbopol as gelling agent and sorbitol as humectant with the application of factorial design. The aims of the research were to observe the dominant effect among carbopol 3% b/v solution, sorbitol, and the interaction of both on the gel physical properties, and to obtain the optimum composition area of gelling agent and humectant.
This research was a pure experimental study based on factorial design application. This formula optimization used factorial design with combination of formula 1, a, b, and ab, with different combination of carbopol 3% b/v solution and sorbitol in each formula. Optimization was evaluated for physical properties parameter, i. e. spreadibility, viscosity, and stability of the gels over one month storage. Statistic analysis used in this research is Yate’s treatment with 95% level of confidence.
The result showed that carbopol 3% b/v solution dominant in determining gel spreadibility and gel viscosity. Interaction between carbopol 3% b/v solution and sorbitol dominant in determining the alteration of gel viscosity. Based on superimposed contour plot, the optimum area was obtained, it was predicted as optimum gel formula. Optimum spreadibility is 6,3 cm until 7 cm. Optimum viscosity lies between 50 d.Pa.s until 65 d.Pa.s. Optimum formula stability lies between 0-8%.
Key words : polyphenol dry extract of green tea, carbopol 3% b/v solution, sorbitol, factorial design
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
1
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang Penelitian
Sinar ultraviolet (UV) merupakan salah satu sumber energi yang
dibutuhkan oleh makhluk hidup. Pada manusia, sinar UV bermanfaat untuk
meningkatkan aliran darah, membantu perubahan provitamin D menjadi vitamin
D, dan membantu mengaktifkan vitamin, hormon, dan enzim (Jellinek, 1970).
Sinar UV terdiri dari tiga tipe, yaitu UV A dengan panjang gelombang (λ)
320-400 nm, UV B dengan λ 290-320 nm, dan UV C dengan λ 200-290 nm. Sinar
UV C tidak mencapai permukaan bumi karena diserap oleh lapisan ozon di
atmosfer. Sinar UV B yang diserap oleh lapisan ozon di atmosfer sebanyak 90%
atau lebih dan sisanya dapat mencapai permukaan bumi. Sinar UV A sendiri dapat
mencapai permukaan bumi (Lucas, McMichael, Smith, Armstrong, 2006).
Paparan UV A berlebihan mempunyai efek awal yaitu pigmen semakin
gelap (pigment darkening) dan diikuti dengan kerusakan struktur kulit yang
menyebabkan premature photoaging pada kulit. Paparan UV B lebih berperan
dalam menyebabkan sunburn dibandingkan dengan UV A. Penetrasi UV B ke
dalam kulit dapat menyebabkan respon biologi, termasuk kerusakan fotokimia
DNA seluler, pembentukan radikal bebas, photoaging, penurunan sistem imun
pada kulit, dan kanker kulit (Svobodova, Psotova, Walterova, 2003).
Salah satu cara untuk melindungi kulit dari bahaya yang ditimbulkan oleh
sinar UV adalah dengan penggunaan sunscreen. Sunscreen adalah senyawa kimia
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
2
yang dapat mengabsorbsi dan atau memantulkan sinar UV. Produk sunscreen
diharapkan mampu mengabsorbsi energi UV pada spektrum yang luas (Stanfield,
2003).
Pemilihan bahan aktif sebagai sunscreen didasarkan pada adanya ikatan
rangkap terkonjugasi (kromofor) dan gugus pada ikatan rangkap terkonjugasi
(auksokrom). Pada struktur molekul bahan aktif tersebut yang berperan dalam
penyerapan radiasi sinar UV adalah cincin aromatik yang terkonjugasi oleh gugus
karbonil (Walters, Keeney, Wigal, Johnston, Cornelius, 2007).
Produk sunscreen yang beredar di pasaran umumnya mengandung bahan
aktif berupa senyawa sintetik. Senyawa sintetik jika masuk ke dalam jaringan
tubuh dapat menimbulkan reaksi alergi pada kulit yang sensitif. Penggunaan
bahan alam lebih menguntungkan daripada senyawa sintetik karena sebagian
besar bahan alam dapat memberikan toleransi yang baik pada kulit dan tidak
menimbulkan iritasi berat yang disebabkan alergi pada kulit yang sensitif
(Hutapea, 1993).
Salah satu bahan alam yang berfungsi sebagai UV absorber adalah
senyawa fenolik dengan struktur fenol, yaitu cincin aromatik yang berikatan
sedikitnya dengan satu gugus hidroksil. Polifenol teh merupakan salah satu
senyawa fenolik. Ikatan rangkap terkonjugasi (kromofor) dan cincin aromatik
yang terkonjugasi oleh gugus karbonil dan gugus hidroksi dalam polifenol teh
bertanggung jawab dalam penyerapan radiasi sinar UV. Dalam penelitian ini
dipilih bahan alam, yaitu teh hijau yang telah diketahui mengandung senyawa-
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
3
senyawa fenolik seperti epikatekin, epikatekin-3-galat, epigalokatekin, dan
epigalokatekin-3-galat (Svobodova et al., 2003).
Sediaan sunscreen dalam penelitian ini dibuat dalam bentuk gel yang
berbasis hidrofilik, yaitu carbopol dan sorbitol. Carbopol memiliki karakter
fisiologis netral dan tidak menimbulkan iritasi, baik pada uji iritasi primer maupun
uji sensitisasi (Alfonso, 2000). Sorbitol relatif inert dan kompatibel dengan
sebagian besar eksipien. Bentuk sediaan gel yang berbasis senyawa hidrofilik
relatif tidak berminyak dan memberikan rasa dingin pada kulit. Hal ini sesuai
dengan salah satu kriteria yang diinginkan, yaitu nyaman saat diaplikasikan.
Gelling agent dan humektan merupakan faktor yang dapat mempengaruhi
kualitas fisik sediaan gel. Carbopol sebagai gelling agent akan membentuk
jaringan struktural yang merupakan faktor yang penting dalam sistem gel.
Penambahan jumlah gelling agent akan memperkuat jaringan struktural gel
sehingga menyebabkan kenaikan viskositas gel. Sorbitol sebagai humektan dapat
berfungsi untuk menarik air dari lingkungan sehingga dapat menjaga kestabilan
sediaan dan mempertahankan kelembaban kulit.
Metode desain faktorial digunakan untuk melihat faktor yang dominan
dalam menentukan respon sifat fisik dan stabilitas gel sunscreen. Desain faktorial
juga dapat digunakan untuk memprediksi area komposisi antara carbopol dan
sorbitol. Dengan komposisi carbopol dan sorbitol yang optimum maka diharapkan
akan diperoleh sediaan gel sunscreen yang memenuhi kualitas fisik gel yang
meliputi daya sebar, viskositas, dan stabilitas gel.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
4
Metode desain faktorial merupakan aplikasi persamaan regresi yang
menggambarkan hubungan antara variabel respon dengan variabel bebas. Dengan
desain faktorial dapat diketahui faktor dominan yang berpengaruh secara
signifikan terhadap suatu respon, yaitu sifat fisik dan stabilitas gel. Metode ini
juga dapat digunakan untuk mendapatkan formula yang optimum sebatas level
gelling agent dan humektan yang diteliti.
B. Rumusan Masalah
Permasalahan yang akan diteliti adalah:
1. Berapa konsentrasi polifenol teh hijau yang dapat memberikan SPF dengan
nilai yang dapat diterima sebagai sunscreen dalam penelitian ini?
2. Diantara larutan carbopol 3% b/v, sorbitol, dan interaksi antara larutan carbopol
3% b/v dan sorbitol, faktor manakah yang dominan dalam menentukan sifat fisik
dan stabilitas gel sunscreen?
3. Apakah dapat ditemukan area komposisi optimum pada contour plot
superimposed yang diprediksi sebagai formula optimum gel sunscreen?
C. Keaslian Penelitian
Sejauh penelusuran pustaka yang dilakukan penulis, penelitian tentang
optimasi formula gel sunscreen ekstrak kering polifenol teh hijau (Camellia
sinensis L.) dengan carbopol sebagai gelling agent dan sorbitol sebagai humektan
dengan metode desain faktorial belum pernah dilakukan.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
5
D. Manfaat Penelitian
1. Manfaat Teoritis
Menambah khasanah ilmu pengetahuan mengenai bentuk sediaan sunscreen
yang berasal dari bahan alam dan untuk pengembangan dan aplikasi metode
desain faktorial.
2. Manfaat Praktis
Mengetahui efek yang dominan dalam menentukkan sifat fisik dan stabilitas
gel sunscreen dan formula yang optimum sehingga diperoleh gel sunscreen
yang memiliki sifat fisik dan stabilitas yang memenuhi persyaratan.
E.Tujuan Penelitian
1. Tujuan umum
Mendapatkan formula gel sunscreen ekstrak kering polifenol teh hijau yang
memenuhi persyaratan sifat fisik dan stabilitas yang baik.
2. Tujuan khusus
a. Mengetahui konsentrasi polifenol teh hijau yang dapat memberikan SPF
dengan nilai yang dapat diterima sebagai sunscreen dalam penelitian ini.
b. Mengetahui faktor yang dominan dalam menentukan sifat fisik dan stabilitas
gel sunscreen.
c. Mengetahui area komposisi optimum pada contour plot superimposed yang
diprediksi sebagai formula optimum gel sunscreen.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
6
BAB II
PENELAAHAN PUSTAKA
A. Polifenol Teh
Teh hijau berasal dari pucuk daun tanaman teh (Camellia sinensis L.)
melalui proses pengolahan tertentu. Secara umum berdasarkan proses
pengolahannya, teh diklasifikasikan menjadi 3 jenis, yaitu teh hijau, teh oolong,
dan teh hitam. Teh hijau dibuat dengan cara pemanasan dan penguapan untuk
menginaktifkan enzim polifenol oksidase / fenolase sehingga oksidase enzimatik
terhadap katekin dapat dicegah (Hartoyo, 2003).
Zat bioaktif dalam teh terutama merupakan polifenol golongan flavonoid,
yaitu flavanol tipe katekin seperti epikatekin (EC), epikatekin-3-galat (ECG),
epigalokatekin (EGC), dan epigalokatekin-3-galat (EGCG); serta flavonol seperti
kuersetin. Keempat tipe katekin tersebut merupakan antioksidan utama dalam teh
hijau (Rohdiana, 2001; Svobodova et al., 2003). Katekin teh memiliki sifat tidak
berwarna, larut air, serta membawa sifat pahit dan sepat pada seduhan teh. Hampir
semua sifat produk teh termasuk di dalamnya rasa, warna, dan aroma, secara
langsung maupun tidak, dihubungkan dengan modifikasi pada katekin ini
(Hartoyo, 2003).
Aktivitas biologi katekin yang pernah diteliti adalah sebagai
kemopreventif terhadap senyawa promotor tumor, inflamasi kulit yang diinduksi
radiasi UV, tumorigenesis pada uji kultur sel, uji hewan di laboratorium, studi
epidemiologik, dan uji klinik (Mukhtar dan Ahmad, 1999; Katiyar, Afaq, Perez,
Mukhtar, 2001) lewat beberapa mekanisme seperti menghambat kerusakan DNA
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
7
yang diinduksi oleh radiasi UV, menurunkan pembentukan cyclobutane
pyrimidine dimers (CPDs) seperti thymine dimer pada epidermis dan dermis,
menginduksi apoptosis pada sel human epidermal carcinoma dan human
carcinoma keratinocyte, mengeblok infiltrasi leukosit yang diinduksi UV, dan
menghambat pertumbuhan tumor pada siklus sel fase G0-G1 (Katiyar et al., 2001;
Svobodova et al., 2003).
B. Maserasi
Maserasi merupakan cara ekstraksi zat aktif menggunakan solven dengan
penggojogan atau pengadukan pada suhu ruangan. Maserasi kinetik merupakan
metode maserasi yang dilakukan pada suhu ruangan dan mengalami pengadukan
secara konstan. Maserasi merupakan metode yang paling banyak digunakan dalam
proses ekstraksi. Metode ini mempunyai keuntungan bila dibandingkan dengan
perkolasi, yaitu dapat dilakukan dengan cara yang sama seperti teknik dan
produksi batch (Anonim, 1986).
C. Ekstrak
Ekstrak adalah sediaan kering, kental, atau cair dibuat dengan menyari
nabati atau hewani menurut cara yang cocok, diluar pengaruh cahaya matahari
langsung. Cairan penyari yang biasa digunakan adalah air, eter, atau campuran
etanol-air. Penyarian simplisia dengan air dapat dilakukan dengan infundasi,
dekok, atau destilasi, sedangkan penyarian simplisia dengan pelarut organik dapat
dilakukan dengan maserasi, perkolasi, dan sokhletasi (Anonim, 1979).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
8
D. Gel
Menurut definisinya gel merupakan bentuk sediaan semisolid yang
mengandung larutan bahan aktif tunggal maupun campuran dengan pembawa
senyawa hidrofilik atau hidrofobik (Anonim, 1995). Alexander and Johnson
(1983) mendefinisikan gel sebagai sistem dua komponen sediaan semi padat yang
kaya akan cairan.
Beberapa pengarang memberikan definisi yang berbeda tentang gel tetapi
satu karakteristik umum gel adalah adanya beberapa bentuk struktur
berkesinambungan yang memberikan sifat seperti sediaan padat. Pada gel yang
bersifat polar, polimer sintetik atau alamiah pada kosentrasi yang relatif rendah
(10%) membentuk matrik tiga dimensi. Gel yang terbentuk tampak jernih atau
keruh, karena gelling agent tidak larut sempurna atau karena terbentuknya agregat
yang terdispersi. Polimer-polimer yang dapat digunakan antara lain; dari bahan
alam yaitu gum, tragacan; dari bahan semisintetik yaitu metil selulosa, CMC; dan
polimer sintetik seperti Carbopol (Barry, 1983).
Dalam penelitian ini dipilih bentuk sediaan gel yang berbasis senyawa
hidrofilik. Gel ini mengandung komponen bahan pembentuk gel, penahan lembab,
dan bahan pengawet. Penahan lembab yang ditambahkan membuat sediaan ini
menjadi lunak, memberikan kelembutan, daya sebar yang cukup, dan menghindari
kemungkinan terjadinya pengeringan. Sebagai bahan pelembab digunakan
sorbitol. Keuntungan lain gel ini adalah tidak berlemak, membentuk lapisan film
tembus pandang elastis setelah kering dengan daya lekat yang tinggi, tidak
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
9
menyumbat pori kulit, dan dapat mudah dicuci dengan air. Gel ini selanjutnya bisa
sebagai pendingin dan pelindung kulit (Voigt, 1994).
E. Carbopol
Carbopol (Carbomer) (Gambar 1) dari gugus carboksivinilpolimer yang
telah disilangkan dengan sukrosa alil, merupakan material koloid hidrofilik yang
mengental lebih baik daripada natural gums. Carbomer yang terdispersi di dalam
air membentuk larutan asam keruh, kemudian dinetralkan dengan basa kuat
seperti sodium hidroksida, dengan amina (contohnya, trietanolamine), atau
dengan basa anorganik lemah seperti ammonium hidroksida, sehingga dapat
meningkatkan konsistensi dan mengurangi kekeruhannya (Barry, 1983).
Gambar 1. Struktur monomer asam akrilat dalam carbopol
Fungsi carbopol adalah sebagai suspending agent dan atau agen peningkat
viskositas. Carbopol 1% mempunyai pH 3. Carbopol larut dalam air, alkohol, dan
gliserin. Gel dengan carbopol akan lebih kental pada pH 6-11 dan viskositasnya
berkurang bila pH kurang dari 3 atau lebih dari 12. Carbopol bersifat higroskopis
(Barry, 1983). Carbopol memiliki karakter fisiologis netral dan tidak
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
10
menimbulkan iritasi, baik pada uji iritasi primer maupun uji sensitisasi (Alfonso,
2000).
Pada kondisi asam, sebagian gugus karboksil pada rantai polimer akan
membentuk gulungan. Penambahan basa akan memutuskan gugus karboksil dan
akan meningkatkan muatan negatif sehingga timbul gaya tolak-menolak
elektrostatis yang akan membuatnya menjadi gel yang rigid (kaku) dan
mengembang. Penambahan basa yang berlebihan membuat gel menjadi encer
karena kation-kation melindungi gugus-gugus karboksil dan juga mengurangi
gaya tolak-menolak elektrostatis. Jika ditambahkan amina yang berlebih pada
sistem dispersi carbopol, konsistensinya tidak berkurang, kemungkinan karena
efek sterik mencegah pelindung karboksil yang diserang (Barry, 1983).
F. Sorbitol
Sorbitol (Gambar 2) mengandung tidak kurang dari 91,0% dan tidak lebih
dari 100,5% C6H14O6, dihitung terhadap zat anhidrat. Sorbitol dapat mengandung
sejumlah kecil alkohol polihidrik lain. Pemerian : serbuk, granul, atau lempengan;
higroskopis; warna putih; rasa manis. Kelarutan : sangat mudah larut dalam air;
sukar larut dalam etanol, dalam metanol, dan dalam asam asetat. (Anonim, 1995).
HO C
H
C
OH
H
C
H
C
H OH
OH
C
H
C
H
OH H
OH
H
Gambar 2. Rumus bangun sorbitol (Anonim, 1995)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
11
Sorbitol relatif inert secara kimia dan kompatibel dengan sebagian besar
eksipien. Sorbitol stabil di udara dan tidak mengalami perubahan warna pada
penyimpanan. Sorbitol tidak mudah terbakar, tidak korosif, dan tidak mudah
menguap. Sorbitol merupakan bahan yang higroskopis sehingga harus disimpan
pada wadah yang tertutup. Sorbitol sebagai humektan dapat menarik air dari
lingkungan dan mempertahankan kelembaban kulit. Sorbitol sebagai humektan
digunakan pada konsentrasi 3-15% (Anonim, 1983).
G. Sunscreen
Sunscreen adalah senyawa kimia yang mengabsorbsi dan atau
memantulkan sinar UV sebelum berhasil mencapai kulit. Biasanya sunscreen
merupakan kombinasi dua atau lebih zat aktif. Jika hanya digunakan satu zat aktif,
sunscreen tersebut hanya mampu mengabsorbsi energi UV pada spektrum yang
terbatas (Stanfield, 2003).
Kandungan penting dalam sunscreen biasanya berupa molekul aromatik
terkonjugasi dengan gugus karbonil. Struktur seperti itulah yang membuat
molekul dapat mengabsorbsi radiasi UV berenergi tinggi dan melepaskannya
sebagai radiasi dengan energi yang lebih rendah. Dengan demikian radiasi UV
yang dapat menyebabkan kerusakan kulit dapat dicegah agar tidak mencapai kulit.
Saat terpapar sinar UV, zat aktif tersebut tidak mengalami perubahan kimia
sehingga tetap mempunyai potensi sebagai UV absorber tanpa mengalami
fotodegradasi (Jellinek, 1970). Sunscreen bekerja dengan 2 cara, yaitu:
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
12
1. Physical sunscreen : memantulkan sinar (light scattering). Mekanisme tersebut
menyebabkan radiasi UV dipantulkan ke segala arah oleh permukaan kecil
kristal dari beberapa pigmen. Prinsipnya adalah membentuk lapisan tipis buram
pada permukaan kulit.
2. Chemical sunscreen : mengabsorbsi panjang gelombang pada range UVA dan
UVB oleh suatu senyawa. Radiasi yang diabsorbsi kemudian dikeluarkan
kembali sebagai panas oleh getaran pada keadaan eksitasi (Calder, 2005).
Sunscreen mengabsorbsi radiasi UV dan mengalami eksitasi, kemudian secara
cepat kembali ke keadaan dasar (ground state). Kemampuan molekul
mengabsorbsi energi radiasi UV tergantung dari sistem konjugasinya
(kromofor) serta jumlah dan jenis gugus fungsional yang ada (auksokrom).
Kromofor merupakan molekul atau bagian dari molekul yang dapat
mengabsorbsi energi UV kemudian mengubahnya menjadi energi panas
(inframerah).
Beberapa produk sunscreen yang beredar di pasaran mengandung bahan
aktif seperti ethylhexyl p-methoxycinnamate (Octinoxate), p-amino benzoic acid
(PABA), octyl methoxycinnamate, octyl salicylate yang memberikan serapan pada
range panjang gelombang UVB. Avobenzone, benzophenone, memberikan serapan
pada range panjang gelombang UVA (Stanfield, 2003).
H. Metode Desain Faktorial
Desain faktorial biasanya digunakan pada percobaan-percobaan yang
dapat menjelaskan efek berbagai faktor atau kondisi pada hasil percobaan. Desain
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
13
faktorial merupakan desain yang dipilih untuk mendeterminasi efek masing-
masing faktor, maupun interaksi antar efek tersebut. Dengan demikian, metode ini
merupakan metode yang sesuai untuk menentukan formula yang optimum dalam
gel, dengan kombinasi dua gelling agent yang digunakan dalam berbagai
konsentrasi. Dengan metode ini akan dapat dilihat efek konsentrasi tiap-tiap
gelling agent dan dapat pula terlihat bagaimana hasil interaksi kedua gelling agent
tersebut. Metode ini lebih ekonomis karena dapat mengurangi jumlah penelitian
jika dibandingkan dengan meneliti dua efek faktor secara terpisah (Bolton, 1997).
Desain faktorial merupakan aplikasi persamaan regresi yaitu teknik untuk
memberikan model hubungan antara variabel respon dengan satu atau lebih
variabel bebas. Model yang diperoleh dari analisis tersebut berupa persamaan
matematika (Bolton, 1997). Desain faktorial dua level berarti ada dua faktor
(misal A dan B) yang masing-masing faktor diuji pada dua level yang berbeda,
yaitu level rendah dan level tinggi. Dengan desain faktorial dapat didesain suatu
percobaan untuk mengetahui faktor yang dominan berpengaruh secara signifikan
terhadap suatu respon (Bolton, 1997).
Optimasi campuran dua bahan (berarti ada dua faktor) dengan desain
faktorial (dua level pada desain faktorial) dilakukan berdasarkan rumus:
Y = b0 + b1X1 + b2X2 + b12 X1X2.....................................................................(1)
Y = respon hasil atau sifat yang diamati, misalnya waktu alir
X1, X2 = level bagian A, bagian B
b0, b1, b2, b12 = koefisien, dapat dihitung dari hasil percobaan
b0 = Rata- rata hasil semua percobaan (intersep)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
14
Pada desain faktorial dua level dan dua faktor diperlukan empat percobaan (2n =4,
dengan 2 menunjukkan level dan n menunjukkan jumlah faktor). Penamaan untuk
4 formula percobaan tersebut adalah formula 1 untuk percobaan I, formula a
untuk percobaan II, formula b untuk percobaan III, dan formula ab untuk
percobaan IV (Bolton, 1997). Respon yang ingin diukur harus dapat
dikuantitatifkan. Rancangan percobaan desain faktorial disajikan dalam Tabel I.
Tabel I. Rancangan percobaan desain faktorial dengan dua faktor dan dua
level
Formula A (faktor I) B (faktor II) 1 - - a + - b - + ab + +
Keterangan:
(-) = level rendah
(+) = level tinggi
Formula 1 = faktor I level rendah, faktor II rendah
Formula a = faktor I level tinggi, faktor II rendah
Formula b = faktor I level rendah, faktor II tinggi
Formula ab = faktor I level tinggi, faktor II tinggi
Berdasarkan persamaan di atas, dengan subsitusi secara matematis, dapat dihitung
besarnya efek masing-masing faktor, maupun interaksinya. Besarnya efek dapat
dicari dengan menghitung selisih antara rata-rata respon pada level tinggi dan
rata-rata respon pada level rendah. Konsep perhitungannya sebagai berikut:
Efek faktor I = ((a-(1))+(ab-b))/ 2
Efek faktor II = ((b-(1))+(ab-a))/ 2
Efek faktor III = ((ab-b)+(a-(1))/ 2 (Bolton, 1997).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
15
I. Spektrofotometri Ultraviolet (UV)
Spektrofotometri UV adalah anggota analisis spektroskopik yang memakai
sumber radiasi elektromagnetik ultraviolet dekat (190-380 nm) dengan instrumen
spektrofotometer. Spektrofotometri UV digunakan untuk menganalisis suatu
senyawa dengan struktur terkonjugasi (Mulja dan Suharman, 1995).
Prinsip kerja spektrofotometri adalah berdasarkan atas interaksi antara
radiasi elektromagnetik dengan materi. Materi dapat berupa atom, ion atau
molekul, sedang radiasi elektromagnetik merupakan salah satu jenis energi yang
ditransmisikan dalam ruang dengan kecepatan tinggi (Khopkar, 1990).
Interaksi antara molekul yang mempunyai gugus kromofor dan radiasi
elektromagnetik pada daerah sinar ultraviolet dan sinar tampak (200-800 nm)
akan menghasilkan spektra serapan elektronik. Spektra serapan ini dapat
digunakan untuk analisis kuntitatif karena jumlah radiasi elektromagnetik yang
diserap ada hubungannya dengan jumlah molekul penyerap (Skoog, 1985).
Pada umumnya semua molekul dapat menyerap radiasi elektromagnetik di
daerah UV dan visibel karena mereka memiliki elektron, baik berkelompok
maupun menyendiri yang dapat dieksitasikan ke tingkat energi yang lebih tinggi.
Panjang gelombang yang menunjukkan terjadinya serapan tergantung pada
kekuatan ikatan elektron dalam molekul tersebut (Day and Underwood, 1986).
Distribusi elektron dalam suatu senyawa organik secara umum ada tiga
macam, yaitu orbital elektron pi (π), sigma (σ) dan elektron tidak berpasangan (n).
Apabila radiasi elektromagnetik mengenai molekul, maka akan terjadi eksitasi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
16
elektron ke tingkat energi yang lebih tinggi yang dikenal sebagai orbital elektron
anti bonding (Mulja dan Suharman, 1995).
Panjang gelombang dimana terjadi eksitasi elektronik yang memberikan
serapan maksimum disebut sebagai panjang gelombang serapan maksimum.
Penentuan panjang gelombang pada saat serapan maksimum dapat digunakan
untuk mengidentifikasi molekul (Mulja dan Suharman, 1995). Pada analisis
kuantitatif pengukuran serapan dilakukan pada panjang gelombang saat serapan
maksimum, disebabkan oleh dua alasan:
a. Sensitivitas maksimum diperoleh dengan melakukan pengukuran pada
panjang gelombang maksimum karena konsentrasi yang diukur pada
panjang gelombang tersebut memberikan respon yang paling kuat.
b. Pada panjang gelombang maksimum, perubahan yang kecil akan
memberikan perubahan serapan yang minimal (kecuali jika pita absorpsi
sangat tajam). Dengan demikian, kesalahan kecil dalam meletakkan tanda
pemilih panjang gelombang pada instrumen tidak akan mengakibatkan
kesalahan besar pada pengukuran serapan (Fatah, 1989).
J. Landasan Teori
Sunscreen merupakan salah satu pilihan untuk melindungi kulit dari
bahaya radiasi sinar UV. Adanya gugus kromofor dan auksokrom pada polifenol
yang terkandung dalam teh hijau bertanggung jawab dalam penyerapan radiasi
sinar UV sehingga polifenol dalam teh hijau dapat digunakan sebagai sunscreen.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
17
Bentuk sediaan sunscreen yang akan diteliti adalah bentuk gel yang
mengandung basis senyawa hidrofilik. Alasan pemilihan bentuk sediaan gel
berbasis senyawa hidrofilik adalah karena bentuk sediaan tersebut memiliki
konsistensi lembut, tidak berminyak, dan memberikan rasa dingin pada kulit. Hal
ini sesuai dengan salah satu kriteria yang diharapkan dari sunscreen, yaitu nyaman
saat diaplikasikan.
Optimasi formula gel sunscreen ekstrak kering polifenol teh hijau dalam
penelitian ini menggunakan carbopol sebagai gelling agent dan sorbitol sebagai
humektan. Gelling agent dan humektan merupakan faktor yang dapat
mempengaruhi kualitas fisik sediaan gel. Carbopol sebagai gelling agent akan
membentuk jaringan struktural yang merupakan faktor yang penting dalam sistem
gel. Penambahan jumlah gelling agent akan memperkuat jaringan struktural gel
sehingga menyebabkan kenaikan viskositas gel. Sorbitol sebagai humektan dapat
berfungsi untuk menarik air dari lingkungan sehingga dapat menjaga kestabilan
sediaan dan mempertahankan kelembaban kulit. Dengan adanya carbopol dan
sorbitol diharapkan dapat diperoleh gel dengan sifat fisik dan stabilitas yang
memenuhi persyaratan.
K. Hipotesis
Ada hubungan (regresi) antara faktor (larutan carbopol 3% b/v, sorbitol, dan
interaksinya) dengan respon daya sebar, viskositas, dan stabilitas gel. Hipotesis
ditarik berdasarkan penggunaan Yate’s treatment dalam analisis.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
18
BAB III
METODOLOGI PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian ini merupakan rancangan penelitian eksperimental murni
dengan desain penelitian secara desain faktorial dan bersifat eksploratif, yaitu
mencari formula optimum gel sunscreen ekstra kering polifenol teh hijau yang
memenuhi syarat sediaan gel.
B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional
1. Variabel penelitian
a. Variabel Bebas dalam penelitian ini adalah level rendah dan level tinggi
larutan carbopol 3% b/v dan sorbitol yang digunakan.
b. Variabel Tergantung dalam penelitian ini adalah sifat fisik gel yang
meliputi daya sebar gel, viskositas gel, dan stabilitas gel.
c. Variabel Pengacau Terkendali dalam penelitian ini adalah suhu
penyimpanan, wadah penyimpanan, dan intensitas cahaya penyimpanan.
d. Variabel Pengacau Tak Terkendali dalam penelitian ini adalah suhu dan
kelembaban ruangan saat penelitian.
2. Definisi operasional
a. Ekstrak kering polifenol teh hijau adalah bahan yang didapatkan dari
ekstraksi terhadap polifenol teh hijau menggunakan etil asetat dan hasilnya
berupa serbuk kering.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
19
b. Gelling agent adalah bahan pembentuk sediaan gel yang akan membentuk
sebuah matriks tiga dimensi. Pada penelitian ini digunakan larutan
carbopol 3% b/v.
c. Humektan adalah bahan yang membantu mempertahankan kelembaban
pada permukaan kulit dengan cara menarik lembab dari lingkungan. Pada
penelitian ini digunakan sorbitol.
d. Faktor adalah besaran yang mempengaruhi respon, yaitu larutan carbopol
3% sebagai faktor A dan sorbitol sebagai faktor B.
e. Level adalah nilai atau tetapan untuk faktor yang digunakan, yaitu larutan
carbopol 3% b/v (25 g dan 35 g) dan sorbitol (5 g dan 15 g).
f. Respon adalah sifat atau hasil percobaan yang diamati, yaitu sifat fisik gel
yang meliputi daya sebar gel, viskositas gel, dan stabilitas gel yang
digambarkan oleh pergeseran viskositas yang terjadi.
g. Efek adalah perubahan respon yang disebabkan oleh variasi faktor dan
level. Besarnya efek dapat dicari dengan menghitung selisih antara rata-
rata respon pada level rendah dan rata-rata respon pada level tinggi.
h. Contour plot adalah garis-garis respon sifat fisik yang dibuat melalui
persamaan desain faktorial.
i. Contour plot superimposed adalah penggabungan garis-garis pada daerah
optimum yang telah dipilih pada uji daya sebar gel, viskositas gel, dan
stabilitas gel.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
20
j. Formula gel sunscreen optimum adalah formula yang menghasilkan gel
dengan daya sebar 6,3-7 cm, viskositas 50-65 d.Pa.s, dan persen
pergeseran viskositas 0-8%.
C. Alat dan Bahan Penelitian
1. Alat
Peralatan yang digunakan dalam penelitian ini antara lain sebagai berikut
Glasswares (PYREX-GERMANY), timbangan elektrik, shaker, vakum
evaporator, Spetrofotometer UV-Vis, mikser (modifikasi, Farmasi USD),
viscometer seri VT 04 (RION JAPAN), dan alat pengukur daya sebar (modifikasi,
Farmasi USD).
2. Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah serbuk teh hijau, etanol
90% kualitas teknis (E. merck), aseton p.a., metanol kualitas teknis, kloroform
kualitas teknis, etil asetat kualitas teknis, carbopol (E. merck), sorbitol (E. merck),
aquades, trietanolamin (Brataco), dan asam sitrat.
D. Tata Cara Penelitian
1. Preparasi ekstrak kering polifenol dari teh hijau
a. Penetapan kadar air serbuk teh hijau. Penetapan kadar air serbuk teh
hijau dilakukan dengan menggunakan metode Karl Fischer. Serbuk teh hijau
ditimbang 1 gram, ditambah 10 mL metanol, lalu didiamkan selama 1 hari pada
suhu kamar. Selanjutnya dilakukan pre-titrasi pada alat dan uji kebocoran alat,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
21
hingga didapat angka drift 10-50. Standarisasi dilakukan dengan cara menimbang
spuit berisi air, kemudian dimasukkan 1 tetes air ke dalam alat. Spuit ditimbang
kembali untuk menentukan berat air yang dimasukkan. Kesetaraan air dihitung.
Metanol dimasukkan sebanyak 1 mL dan dititrasi dengan alat (blanko). Kadar air
dihitung. Sampel dimasukkan 1 mL, dititrasi dengan alat, dan dihitung kadar air
dalam sampel. Kadar air dalam sampel dihitung dengan menggunakan rumus:
Kadar air = %100×−
ditimbangyangberatblankox ..............................................(2)
x = angka yang muncul pada alat (mg)
b. Ekstraksi polifenol dari teh hijau. Serbuk teh hijau (100 g, kadar air
kurang dari 10%) dengan derajat halus 12/20 diekstraksi dengan metode maserasi
menggunakan pelarut metanol (500 mL) dengan bantuan shaker (150 rpm) selama
48 jam. Ekstrak metanol yang diperoleh diuapkan dengan vacuum rotary
evaporator sampai volume 100 mL. Selanjutnya ditambahkan 100 mL kloroform
dan 100 mL aquades. Lapisan atas dan lapisan bawah dipisahkan. Selanjutnya
lapisan atas diekstraksi dengan etil asetat dua kali, masing-masing dengan volume
150 mL. Ekstrak kering polifenol yang ada di bagian atas dikumpulkan,
selanjutnya diuapkan hingga kering (Nagayama, Iwamura, Shibata, Hirayama,
Nakamura, 2002).
2. Penetapan kadar polifenol total dalam ekstrak kering polifenol teh hijau
secara kolorimetri (metode Folin Ciocalteau)
a. Penentuan operating time. Sebanyak 0,05 g kuersetin standar dilarutkan
dengan 75% aseton sampai volume 50,0 mL. Dibuat konsentasi 0,4 mg/mL
menggunakan aseton 75%. Diambil 0,5 mL larutan tersebut dan dimasukkan ke
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
22
dalam labu ukur 50 mL. Ditambahkan pereaksi Folin-Ciocalteau sebanyak 2,5 mL
dan dibiarkan selama 2 menit. Ditambahkan 7,5 mL larutan Na2CO3 kemudian
diencerkan dengan aquades hingga tanda. Larutan divortex selama 30 detik
kemudian diinkubasi selama 40 menit. Kemudian disentrifus dengan kecepatan
4000 rpm selama 5 menit. Absorbansi larutan diukur pada panjang gelombang
726,0 nm. Dicari operating time yang memberikan serapan yang stabil.
b. Penentuan panjang gelombang (λ) maksimum. Sebanyak 0,05 g
kuersetin standar dilarutkan dengan 75% aseton sampai volume 50,0 mL. Dibuat
konsentasi 0,4 mg/mL menggunakan aseton 75%. Diambil 0,5 mL larutan tersebut
dan dimasukkan ke dalam labu ukur 50 mL. Ditambahkan pereaksi Folin-
Ciocalteau sebanyak 2,5 mL dan dibiarkan selama 2 menit. Ditambahkan 7,5 mL
larutan Na2CO3 kemudian diencerkan dengan aquades hingga tanda. Larutan
divortex selama 30 detik kemudian diinkubasi selama 40 menit. Kemudian
disentrifus dengan kecepatan 4000 rpm selama 5 menit. Absorbansi larutan diukur
pada panjang gelombang 600-800 nm. Kemudian dapat ditentukan panjang
gelombang yang memberikan serapan maksimum.
c. Penetapan kurva baku. Sebanyak 0,05 g kuersetin standar dilarutkan
dengan 75% aseton sampai volume 50,0 mL. Dibuat seri konsentasi 0,2; 0,3; 0,4;
0,5; 0,6; dan 0,7 mg/mL menggunakan aseton 75%. Diambil 0,5 mL larutan
tersebut dan dimasukkan ke dalam labu ukur 50 mL. Ditambahkan pereaksi Folin-
Ciocalteau sebanyak 2,5 mL dan dibiarkan selama 2 menit. Ditambahkan 7,5 mL
larutan Na2CO3 kemudian diencerkan dengan aquades hingga tanda. Larutan
divortex selama 30 detik kemudian diinkubasi selama 40 menit. Kemudian
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
23
disentrifus dengan kecepatan 4000 rpm selama 5 menit. Absorbansi larutan diukur
pada panjang gelombang maksimum. Replikasi dilakukan sebanyak 3 kali.
d. Penetapan kadar polifenol ekstrak kering polifenol teh hijau. Sebanyak
kurang lebih seksama 500 mg ekstrak kering polifenol teh hijau dimasukkan ke
dalam labu ukur 25 mL, kemudian dilarutkan dengan aseton 75% dan diencerkan
hingga tanda. Sebanyak 1 mL larutan tersebut diambil kemudian dimasukkan
dalam labu ukur 50 mL dan diencerkan dengan aquades hingga tanda. Diambil 0,5
mL larutan tersebut dan dimasukkan ke dalam labu ukur 50 mL. Ditambahkan
pereaksi Folin-Ciocalteau sebanyak 2,5 mL dan dibiarkan selama 2 menit.
Ditambahkan 7,5 mL larutan Na2CO3 kemudian diencerkan dengan aquades
hingga tanda. Larutan divortex selama 30 detik kemudian diinkubasi selama 40
menit. Kemudian disentrifus dengan kecepatan 4000 rpm selama 5 menit.
Absorbansi larutan diukur pada panjang gelombang maksimum. Replikasi
dilakukan sebanyak 6 kali. Kadar polifenol dalam sampel dihitung menggunakan
persamaan kurva baku sehingga diperoleh konsentrasi polifenol total terhitung
ekuivalen terhadap kuersetin.
3. Penentuan nilai SPF secara in vitro
a. Pembuatan larutan stok polifenol teh hijau. Ekstrak kering polifenol teh
hijau ditimbang setara dengan 30 mg polifenol teh hijau dan dilarutkan dengan
etanol 90% dalam labu ukur 100 mL. Larutan diencerkan hingga tanda sehingga
diperoleh larutan stok polifenol teh hijau dengan konsentrasi 30 mg% b/v.
b. Penentuan spektra absorpsi UV polifenol teh hijau. Larutan stok diambil
sebanyak 2 mL dan diencerkan dengan etanol 90% dalam labu ukur 10 mL
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
24
sehingga diperoleh konsentrasi 6 mg% b/v. Spektra UV larutan diperoleh dengan
scanning absorbansi larutan pada panjang gelombang 250-400 nm.
c. Penentuan nilai SPF. Larutan stok diambil sebanyak 2, 4, dan 6 mL dan
diencerkan dengan etanol 90% dalam labu ukur 10 mL sehingga diperoleh
konsentrasi 6, 12, dan 18 mg% b/v. Replikasi dilakukan sebanyak 3 kali untuk
tiap konsentrasi.
Absorbansi masing-masing konsentrasi diukur tiap 5 nm pada rentang
panjang gelombang 290 nm hingga panjang gelombang tertentu di atas 290 nm
yang mempunyai nilai serapan 0,050. Dibuat kurva antara nilai absorbansi
terhadap panjang gelombang. Luas daerah di bawah kurva (AUC) antara dua
panjang gelombang yang berurutan dihitung dengan rumus :
AUC = )]([2)(
appApapA
−−+−
λλ ........................................................(3)
Keterangan rumus di atas adalah:
A(p-a) = absorbansi pada panjang gelombang yang lebih rendah diantara dua
panjang gelombang yang berurutan.
Ap = absorbansi pada panjang gelombang yang lebih tinggi diantara dua
panjang gelombang yang berurutan.
λ(p-a) = panjang gelombang yang lebih rendah diantara dua panjang
gelombang berurutan.
λp = panjang gelombang yang lebih tinggi diantara dua panjang gelombang
berurutan.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
25
Seluruh luas daerah di bawah kurva absorbansi dapat dihitung dengan
menjumlahkan semua harga AUC. Harga Sun Protection Factor (SPF) dapat
dihitung dengan rumus :
Log SPF = 1λλ −n
AUC ....................................................................................(4)
Keterangan rumus di atas adalah:
λn = panjang gelombang terbesar diantara panjang gelombang 290 nm
hingga di atas 290 nm yang mempunyai nilai absorbansi 0,050.
λ1 = panjang gelombang terkecil (290 nm). (Petro, 1980)
4. Pemilihan eksipien dan optimasi formula
a. Desain fomula. Formula untuk sediaan gel mengacu pada formula gel
sunscreen menurut A Formulary of Cosmetic Preparation (1977) dengan
penyusunan formula sebagai berikut:
Ethanol (SD-40) 48,0
Carbopol 940 1,0
Escalol 106 b(Glyceryl-p-amino benzoate) 3,0
Monoisopropilamine 0,09
Aquadest 47,91
Parfume 9,5
Komposisi formula baru setelah dimodifikasi (untuk 100 gram) adalah sebagai
berikut:
Ethanol 96% 10 mL
Carbopol 3% b/v 25-35 gram
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
26
Sorbitol 5-15 gram
Trietanolamine 1 gram
Aquades 35 mL
Asam sitrat 0,125 gram
Ekstrak kering polifenol teh hijau 0,022% b/b
Tabel II. Formula Desain Faktorial
Formula 1 a b ab Etanol 96% (mL) 10 10 10 10
Carbopol 3% b/v (g) 25 35 25 35
Sorbitol (g) 5 5 15 15
Aquades (mL) 35 35 35 35
TEA (g) 1 1 1 1
Asam sitrat (g) 0,125 0,125 0,125 0,125
Ekstrak polifenol (mg) 16,55 18,76 18,76 19,86
b. Pembuatan formula. Larutan carbopol 3% b/v dan sorbitol dicampur
menggunakan mikser dengan kecepatan 400 rpm selama 5 menit. Campuran
ditambahkan etanol dan kemudian dimikser kembali selama 5 menit. Lalu
ditambahkan aquades sedikit demi sedikit hingga homogen. Kemudian
ditambahkan TEA sedikit demi sedikit hingga gel mengental, dilanjutkan dengan
penambahan asam sitrat yang telah dilarutkan dalam aquades sambil tetap
dimikser. pH dicek hingga mencapai pH 4-6. Kemudian ditambahkan ekstrak
kering polifenol teh hijau yang telah dilarutkan dalam etanol dan dimikser hingga
homogen.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
27
5. Uji sifat fisik dan stabilitas gel sunscreen ekstrak kering polifenol teh hijau
a. Uji daya sebar. Uji daya sebar sediaan gel sunscreen fraksi polifenol teh
hijau dilakukan 48 jam setelah pembuatan dan setelah penyimpanan 1 bulan
(Garg, Aggarwal, Singla, 2002). Cara: Gel ditimbang seberat 1,0 gram, diletakkan
di tengah kaca bulat berskala. Di atas gel diletakkan kaca bulat lain dan pemberat
sehingga berat kaca bulat dan pemberat 125 gram, didiamkan selama 1 menit,
kemudian dicatat penyebarannya (Garg et al, 2002). Replikasi dilakukan 6 kali.
b. Uji viskositas. Pengukuran viskositas dilakukan dengan menggunakan
alat Viscometer Rion seri VT 04. Cara: Gel dimasukkan dalam wadah dan
dipasang pada portable viscotester. Viskositas gel diketahui dengan mengamati
gerakan jarum penunjuk viskositas (Instruction Manual Viscotester VT-03E/VT-
04E). Uji ini dilakukan dua kali, yaitu 48 jam setelah gel selesai dibuat dan setelah
mengalami penyimpanan selama 1 bulan untuk melihat stabilitas gel. Replikasi
dilakukan sebanyak 6 kali.
6. Subjective assessment
Subjective assessment dilakukan dengan cara memberikan kuesioner
kepada 30 responden. Ketigapuluh responden tersebut diminta untuk memberikan
jawaban atas pertanyaan seputar kenyamanan pemakaian gel formula 1, a, b, dan
ab saat diaplikasikan ke kulit. Hasil subjective assessment dipakai sebagai
pertimbangan untuk menentukan parameter stabilitas gel.
7. Optimasi formula gel sunscreen ekstrak kering polifenol teh hijau
Optimasi dilakukan dengan menggunakan metode optimasi desain
faktorial untuk memperoleh formula yang optimal ditinjau dari beberapa
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
28
parameter sifat fisik sediaan. Dari desain ini dapat dipilih sediaan yang
mempunyai sifat fisik yang optimal.
E. Analisis Data dan Optimasi
Data yang terkumpul dari uji sifat fisik dianalisis sesuai dengan metode
desain faktorial dan Yate’s treatment. Dari data yang diperoleh dilakukan
perhitungan desain faktorial untuk melihat besarnya efek larutan carbopol 3% b/v,
efek sorbitol, dan efek interaksi antara keduanya sehingga dapat diketahui efek
yang dominan dalam menentukan sifat fisik gel. Selanjutnya, dibuat contour plot
dari masing-masing sifat fisik gel. Contour plot tersebut kemudian digabungkan
dalam contour plot superimposed untuk mencari area komposisi optimum dan
prediksi formula optimum gel sunscreen pada komposisi yang diteliti.
Analisis data secara Yate’s Treatment dilakukan untuk menegaskan faktor
dominan dalam menentukan respon sediaan gel. Hipotesis alternatif (H1)
ditentukan untuk melihat apakah respon yang dihasilkan benar-benar disebabkan
oleh faktor (larutan carbopol 3% b/v, sorbitol, dan interaksi antara keduanya). H1
menyatakan adanya regresi (hubungan) antara faktor dengan respon, sedangkan
H0 merupakan negasi H1
yang menyatakan tidak adanya regresi (hubungan) antara
faktor dengan respon. Jika ada regresi (hubungan) antara faktor dengan respon,
maka faktor dapat memberikan pengaruh terhadap respon. Nilai F yang diperoleh
(F hitung) dari perhitungan dengan analisis Yate’s Treatment dibandingkan
dengan nilai F tabel. H1 diterima dan H0
ditolak apabila nilai F hitung lebih besar
daripada nilai F tabel (F0,05( 1, 15) = 4,5431), yang berarti bahwa faktor tersebut
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
29
memberikan pengaruh yang bermakna dalam menentukan suatu respon. Dipilih
nilai F tabel dengan derajat kepercayaan 95%. F tabel diperoleh dari Fα
(numerator, denominator). Sebagai numerator (v1) adalah derajat bebas faktor dan
interaksi (experiment) yaitu 1, dan sebagai denominator (v2) adalah derajat bebas
experimental error yaitu 15.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
30
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Preparasi Ekstrak Kering Polifenol dari Teh Hijau
Dalam penelitian ini digunakan bahan yang berupa teh hijau. Mula-mula
dilakukan uji organoleptis terhadap teh hijau yang digunakan. Hasil uji
organoleptis terhadap teh hijau adalah: warna hijau, bau khas, dan rasa pahit.
Kemudian dilakukan penetapan kadar air dalam serbuk teh hijau. Serbuk teh hijau
yang akan digunakan dalam penelitian ini harus mengandung kadar air kurang
dari 10% untuk keperluan standarisasi bahan. Pengukuran kadar air dalam serbuk
teh hijau dilakukan dengan metode Karl Fischer. Kadar air rata-rata dalam serbuk
teh hijau pada penelitian ini adalah 7,973% sehingga memenuhi persyaratan untuk
standarisasi bahan.
Untuk mengisolasi polifenol dari teh hijau mula-mula dilakukan maserasi
serbuk teh hijau. Bahan yang dipakai adalah serbuk karena serbuk dapat
memperluas area kontak bahan dengan cairan penyari sehingga akan diperoleh
hasil yang optimal. Agar diperoleh derajat halus serbuk yang seragam, maka
serbuk diayak dengan ayakan nomor 12/20.
Maserasi dilakukan menggunakan pelarut metanol dengan perbandingan
1:5 selama 48 jam. Metanol adalah pelarut yang umum dipakai untuk ekstraksi
flavonoid. Polifenol sendiri termasuk dalam golongan flavonoid. Maserasi
dilakukan dengan bantuan shaker dengan kecepatan 150 rpm agar cairan penyari
dapat masuk ke dalam seluruh pori-pori serbuk sehingga memudahkan penyarian
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
31
selanjutnya. Maserasi merupakan salah satu metode ekstraksi dengan cara dingin
yang mempunyai reprodusibilitas yang baik karena dapat mempertahankan jumlah
zat yang terekstraksi dengan cairan penyari yang tetap.
Selanjutnya ekstrak yang didapat disaring dan diuapkan dengan vacuum
rotary evaporator hingga 100 mL dan dilakukan fraksinasi untuk mengisolasi
polifenol dalam teh hijau. Ekstrak tersebut ditambahkan 100 mL kloroform dan
100 mL aquades. Kloroform digunakan untuk menghilangkan senyawa non polar
yang terdapat dalam ekstrak, seperti protein, lemak, klorofil, pigmen, dan amilum.
Kemudian terbentuk dua lapisan, yaitu lapisan atas dan lapisan bawah. Lapisan
atas adalah aquades dengan berat jenis 0,997 dan lapisan bawah adalah kloroform
dengan berat jenis 1,484. Keduanya dipisahkan dengan corong pisah. Lapisan
bawah yang mengandung pigmen tidak digunakan.
Lapisan atas diekstraksi dengan etil asetat sebanyak dua kali, masing-
masing dengan volume 150 mL. Ekstraksi berulang ini bertujuan agar dapat
mengekstraksi zat aktif lebih banyak. Etil asetat ini digunakan untuk menarik
polifenol yang terdapat dalam ekstrak teh hijau. Ekstrak kental polifenol teh hijau
yang didapatkan kemudian dikumpulkan dan diuapkan hingga kering untuk
standarisasi bahan dan untuk menjaga kestabilan dalam penyimpanan. Kemudian
dilakukan uji organoleptis terhadap ekstrak kering polifenol teh hijau. Hasil uji
organoleptis terhadap ekstrak kering polifenol teh hijau adalah: warna coklat
muda, bau khas, dan rasa agak pahit.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
32
B. Penetapan Kadar Polifenol Total dalam Ekstrak Kering Polifenol Teh
Hijau secara Kolorimetri (Metode Folin Ciocalteau)
Penetapan kadar polifenol total dalam ekstrak kering polifenol teh hijau
dilakukan dengan metode Folin-Ciocalteau secara kolorimetri. Reaksinya adalah
dengan oksidasi fenolik dalam suasana basa sehingga terbentuk kompleks warna
molibdenum blue. Senyawa tersebut mempunyai gugus kromofor dan auksokrom
sehingga dapat memberikan warna. Senyawa standar yang digunakan untuk
penetapan kadar polifenol total dalam ekstrak kering polifenol teh hijau adalah
kuersetin. Struktur kuersetin seperti pada Gambar 3.
OH
OOH
HO O
OH
OH
Gambar 3. Struktur kuersetin
Mula-mula dilakukan penentuan operating time. Operating time
merupakan waktu yang dibutuhkan larutan untuk bereaksi sempurna sehingga
dapat memberikan serapan yang stabil. Untuk operating time digunakan
konsentrasi kuersetin 0,4 mg/mL yang diukur pada panjang gelombang 726,0 nm.
Pengukuran dilakukan sampai larutan tersebut memberikan serapan yang stabil.
Pada penelitian ini operating time diukur pada 0-120 menit dan didapatkan hasil
bahwa larutan memberikan serapan yang stabil pada menit ke-40 terhitung sejak
larutan direaksikan. Hasil scanning operating time disajikan dalam Gambar 4.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
33
Gambar 4. Hasil scanning operating time
Setelah didapatkan operating time kemudian dilakukan penentuan panjang
gelombang maksimum. Larutan dapat memberikan serapan maksimum pada
panjang gelombang maksimum. Pada penentuan panjang gelombang maksimum
digunakan kuersetin dengan konsentrasi 0,4 mg/mL. Penentuan panjang
gelombang serapan maksimum dilakukan pada panjang gelombang 600-800 nm
dengan asumsi bahwa serapan maksimum kuersetin berada dalam rentang panjang
gelombang tersebut. Pada penelitian ini serapan maksimum kuersetin diperoleh
pada panjang gelombang 733,7 nm. Hasil scanning panjang gelombang
maksimum disajikan dalam Gambar 5.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
34
Gambar 5. Hasil scanning panjang gelombang maksimum
Operating time dan panjang gelombang maksimum yang telah diperoleh
digunakan untuk penetapan kurva baku kuersetin. Dari penetapan kurva baku
kuersetin akan didapatkan persamaan kurva baku yang dapat digunakan untuk
penetapan kadar polifenol dalam ekstrak kering polifenol teh hijau. Penetapan
kadar dilakukan pada panjang gelombang maksimum, yaitu 733,7 nm. Hasil
penetapan kadar kurva baku kuersetin disajikan dalam Tabel III.
Tabel III. Kurva baku kuersetin Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3
Kadar (mg % ) Absorbansi Kadar
(mg % ) Absorbansi Kadar (mg % ) Absorbansi
0,198 0,305 0,205 0,316 0,201 0,2950,298 0,405 0,308 0,425 0,302 0,4280,397 0,584 0,410 0,521 0,402 0,5390,496 0,713 0,513 0,669 0,503 0,6500,595 0,817 0,615 0,737 0,604 0,8130,694 0,875 0,718 0,821 0,704 0,896
r 0,989 r 0,995 r 0,998A 0,075 A 0,118 A 0,055B 1,214 B 1,005 B 1,212
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
35
Harga r (koefisien korelasi) ketiga kurva baku tersebut lebih besar
daripada harga r tabel dengan taraf kepercayaan 99%, yaitu 0,917 sehingga ketiga
kurva baku tersebut dapat menunjukkan hubungan regresi. Persamaan kurva baku
yang dipilih untuk penetapan kadar polifenol dalam ekstrak kering polifenol teh
hijau adalah persamaan yang ketiga karena mempunyai harga r (koefisien
korelasi) yang paling mendekati ± 1, yaitu 0,998. Maka persamaan kurva baku
yang digunakan adalah y = 1,212 x + 0,055. Hasil penetapan kadar polifenol
dalam ekstrak kering polifenol teh hijau disajikan dalam Tabel IV.
Tabel IV. Hasil penetapan kadar polifenol dalam ekstrak kering polifenol teh hijau
Replikasi Absorbansi Kadar polifenol dalam ekstrak (% b/b)
1 0,342 59,998 2 0,348 60,104 3 0,348 58,991 4 0,347 59,440 5 0,349 59,926 6 0,358 62,052
Rata-rata 59,926 SD 1,142
Dari tabel tersebut didapatkan bahwa kadar polifenol yang terdapat dalam ekstrak
kering polifenol teh hijau adalah 59,926 % (b/b) terhitung ekuivalen terhadap
kuersetin.
C. Penentuan Nilai SPF secara In Vitro
Uji SPF bertujuan untuk mengetahui kemampuan ekstrak sebagai
sunscreen. SPF merupakan parameter efektifitas suatu sediaan sunscreen.
Semakin besar SPF, semakin besar pula perlindungan yang diberikan. Nilai SPF
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
36
juga menyatakan banyaknya radiasi UVB yang dapat mencapai kulit (Stanfield,
2003).
Ekstrak kering polifenol teh hijau mengandung senyawa polifenol yang
dapat menyerap radiasi sinar UV. Yang bertanggungjawab dalam penyerapan
radiasi sinar UV dalam polifenol teh hijau adalah sistem kromofor dan gugus
auksokrom yang terikat pada sistem kromofor. Gugus dalam polifenol
ditunjukkan dalam Gambar 6.
Epikatekin Epikatekin-3-galat
Epigalokatekin Epigalokatekin-3-galat
Keterangan : : sistem kromofor : gugus auksokrom
Gambar 6. Struktur epikatekin, epikatekin-3-galat, epigalokatekin, dan epigalokatekin-3-galat dengan sistem kromofor dan gugus auksokrom
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
37
Untuk melakukan uji SPF pertama-tama harus dilakukan scanning panjang
gelombang untuk melihat apakah ekstrak kering polifenol teh hijau memberikan
serapan pada range panjang gelombang UV. Scanning dilakukan pada panjang
gelombang UV, yaitu antara 250-400 nm. Hasil scanning disajikan pada Gambar
7. Dari hasil scanning dapat diketahui bahwa ekstrak kering polifenol teh hijau
memberikan serapan pada range panjang gelombang UV. Panjang gelombang
maksimum yang diperoleh adalah 277,4 nm.
Gambar 7. Hasil scanning panjang gelombang (λ) UV ekstrak kering polifenol teh hijau
Kemudian dilakukan penetapan konsentrasi polifenol teh hijau pada
panjang gelombang maksimum yang akan memberikan nilai SPF. Dari
pengukuran absorbansi ekstrak kering polifenol teh hijau diketahui bahwa
konsentrasi polifenol teh hijau yang dibutuhkan adalah 18,1 mg% b/v.
Nilai SPF dalam sediaan ditentukan secara in vitro. Metode yang
digunakan untuk menentukan nilai SPF adalah metode menurut Petro (1980)
karena menggunakan sinar polikromatis sehingga dapat digunakan pada range
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
38
panjang gelombang yang lebih luas. Dengan metode ini didapatkan jumlah luas
daerah di bawah kurva (AUC) yang dapat digunakan untuk menentukan nilai SPF.
Nilai SPF ekstrak kering polifenol teh hijau yang didapatkan dalam penelitian ini
adalah 5,874. Sediaan sunscreen dengan nilai SPF 5 mampu mengabsorbsi radiasi
UVB sebesar 80% (Nole, 2004). Nilai SPF yang terlalu tinggi membuat sinar UV
tidak dapat masuk ke dalam kulit. Dengan tidak adanya sinar UV yang masuk ke
dalam kulit, maka aktivasi tyrosinase menjadi terhambat atau tidak terjadi sama
sekali sehingga menyebabkan terhambatnya pembentukan melanin. Tyrosinase
adalah enzim yang berperan dalam pembentukan pigmen kulit (melanogenesis).
Jika pembentukan melanin terhambat, maka fungsi perlindungan melanin juga
akan berkurang. Hal ini akan memperbesar kemungkinan munculnya kanker kulit.
D. Uji Sifat Fisik dan Stabilitas Gel Sunscreen Ekstrak Kering Polifenol
Teh Hijau
Pada penelitian ini dilakukan uji sifat fisik dan stabilitas gel. Uji sifat fisik
meliputi uji daya sebar dan uji viskositas, sedangkan stabilitas sediaan dapat
dilihat dari pergeseran viskositas yang terjadi setelah gel disimpan selama satu
bulan. Stabilitas sediaan dikatakan baik jika persen pergeseran viskositasnya kecil.
Pengujian sifat fisik dan stabilitas sediaan ini dilakukan untuk menjamin kualitas
farmasetis suatu sediaan sehingga memenuhi syarat sediaan gel yang baik.
Pengukuran daya sebar dilakukan untuk mengetahui pemerataan gel saat
diaplikasikan pada kulit. Daya sebar yang baik akan menjamin pemerataan yang
baik pula saat sediaan diaplikasikan pada kulit. Pengukuran daya sebar ini dapat
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
39
pula menggambarkan viskositas masing-masing formula yang telah dibuat.
Umumnya daya sebar berbanding terbalik dengan viskositas sediaan semipadat,
semakin besar daya sebar sediaan semipadat, maka viskositas akan semakin kecil.
Nilai daya sebar untuk sediaan semifluid adalah 5-7 cm (Garg et al., 2002).
Pengukuran viskositas gel dilakukan sebanyak dua kali, yaitu 48 jam
setelah pembuatan gel dan setelah penyimpanan selama satu bulan. Pengukuran
viskositas 48 jam setelah pembuatan gel bertujuan untuk melihat profil kekentalan
gel. Pengukuran tidak dilakukan segera setelah pembuatan karena setelah
pembuatan molekul-molekul penyusun gel belum menempati posisi masing-
masing sehingga belum terbentuk dimensi gel yang baik. Pengukuran viskositas
setelah penyimpanan selama satu bulan bertujuan untuk melihat perubahan profil
kekentalan gel yang merupakan indikator stabilitas sediaan dalam penyimpanan.
Apabila viskositas gel 48 jam setelah pembuatan dan setelah penyimpanan selama
satu bulan berbeda tidak bermakna, maka sediaan tersebut dikatakan stabil.
Dengan viskositas yang stabil maka kemampuan gelling agent dalam menjerat
ekstrak kering polifenol teh hijau akan tetap baik. Pengukuran viskositas gel
dilakukan dengan membaca skala pada viscometer Rion seri VT 04. Hasil
pengukuran sifat fisik gel sunscreen disajikan pada Tabel V.
Tabel V. Hasil pengukuran sifat fisik gel sunscreen
Formula Daya sebar (cm) Viskositas (d.Pa.s) Pergeseran Viskositas (%) 1 7,05 ± 0,06 50,67 ± 0,82 7,24 ± 1,02 a 6,46 ± 0,07 61,67 ± 0,52 8,11 ± 0,84 b 7,65 ± 0,08 42,83 ± 0,41 8,56 ± 1,28 ab 6,00 ± 0,07 85,50 ± 0,55 1,94 ± 0,88
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
40
Analisis data dilakukan dengan mempertimbangkan 3 hal sebagai berikut:
1. Perhitungan efek rata-rata tiap-tiap faktor maupun interaksinya untuk melihat
pengaruh tiap faktor dan interaksinya terhadap besarnya respon. Perhitungan
ini juga memuat arah perubahan respon.
2. Interpretasi grafik hubungan respon-larutan carbopol 3% b/v dan grafik
hubungan respon-sorbitol.
3. Yate’s treatment menganalisis secara statistik untuk menilai secara obyektif
signifikansi pengaruh relatif berbagai faktor dan interaksi terhadap respon.
Perhitungan Yate’s treatment tidak memuat arah respon.
Keempat formula gel sunscreen dibuat berdasarkan metode desain
faktorial dengan kombinasi level rendah dan level tinggi pada larutan carbopol 3%
b/v dan sorbitol. Dengan menggunakan metode tersebut dapat dilakukan
perhitungan efek rata-rata tiap-tiap faktor maupun interaksinya untuk mengetahui
faktor mana yang dominan antara larutan carbopol 3% b/v, sorbitol, atau interaksi
antara keduanya dalam menentukan viskositas, daya sebar, dan pergeseran
viskositas dari sediaan gel. Hasil pengukuran efek disajikan pada Tabel VI.
Tabel VI. Efek larutan carbopol 3% b/v, efek sorbitol, dan efek interaksi antara keduanya dalam menentukan sifat fisik gel sunscreen
Efek Daya sebar
(cm) Viskositas
(d.Pa.s) Pergeseran
viskositas (%) Larutan carbopol 3% b/v |-1,12| 26,83 |-2,87|
Sorbitol 0,07 8,00 |-2,42| Interaksi |-0,53| 15,83 |-3,74|
Dari perhitungan efek larutan carbopol 3% b/v, sorbitol, dan interaksi
antara keduanya dapat dilihat efek yang dominan pengaruhnya terhadap daya
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
41
sebar, viskositas, dan persen pergeseran viskositas gel. Semakin besar nilai efek
yang diperoleh, maka faktor tersebut dominan dalam menentukan sifat fisik dan
stabilitas gel. Dalam menentukan efek yang dominan tidak memperhatikan tanda
positif dan negatif, tetapi hanya memperhatikan nilainya. Bila efek yang diperoleh
bernilai positif, maka efek tersebut berpengaruh pada kenaikan sifat fisik dan
stabilitas gel. Sebaliknya bila efek yang diperoleh bernilai negatif, maka efek
tersebut berpengaruh pada penurunan sifat fisik dan stabilitas gel.
1. Daya sebar
Pengaruh peningkatan level larutan carbopol 3% b/v dan sorbitol terhadap
daya sebar gel dapat diamati pada Gambar 8.
5
5,5
6
6,5
7
7,5
8
25 35
Larutan carbopol 3% b/v (g)
Res
pon
daya
seb
ar (c
m)
Level rendah sorbitolLevel tinggi sorbitol
5
5,5
6
6,5
7
7,5
8
5 15
Sorbitol (g)
Res
pon
daya
seb
ar (c
m)
Level rendah carbopol 3% b/vLevel tinggi carbopol 3% b/v
Gambar 8a Gambar 8b
Gambar 8. Grafik hubungan antara larutan carbopol 3% b/v (g) dan respon daya sebar gel (cm) (8a); grafik hubungan antara sorbitol (g) dan respon
daya sebar gel (cm) (8b)
Semakin banyak larutan carbopol 3% b/v yang digunakan dalam formula,
maka akan menurunkan daya sebar gel pada penggunaan sorbitol level rendah
maupun level tinggi. Penurunan daya sebar gel pada level tinggi sorbitol lebih
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
42
besar daripada level rendah sorbitol (Gambar 8a). Semakin banyak sorbitol yang
digunakan dalam formula, maka daya sebar gel semakin besar pada penggunaan
larutan carbopol 3% b/v level rendah dan daya sebar gel semakin kecil pada
penggunaan larutan carbopol 3% b/v level tinggi (Gambar 8b).
Larutan carbopol 3% b/v dominan dalam menentukan daya sebar gel jika
dibandingkan dengan penggunaan sorbitol maupun interaksi antara larutan
carbopol 3% b/v dan sorbitol. Hal ini dapat dilihat dari lebih besarnya nilai efek
larutan carbopol 3% b/v hasil perhitungan desain faktorial dibandingkan dengan
nilai efek sorbitol maupun interaksi antara larutan carbopol 3% b/v dan sorbitol
(Tabel VI). Efek larutan carbopol 3% b/v bernilai negatif sehingga dominan
dalam menurunkan daya sebar. Efek sorbitol bernilai positif sehingga dapat
menaikkan daya sebar, sedangkan efek interaksi antara larutan carbopol 3% b/v
dan sorbitol bernilai negatif sehingga dapat menurunkan daya sebar.
Analisis dengan perhitungan Yate’s treatment dengan taraf kepercayaan
95% untuk respon daya sebar disajikan pada Tabel VII.
Tabel VII. Analisis Yate’s treatment untuk respon daya sebar gel sunscreen
Source of variation
Degrees of
freedom
Sum of squares Mean squares F
Replicates 5 0,0405 0,0081 Treatment 3 9,2478 3,0826 a (Carbopol) 1 7,5376 7,5376 1713,0909 b (Sorbitol) 1 0,0301 0,0301 6,8409 ab (Interaksi) 1 1,6801 1,6801 381,8409Experimental error 15 0,0666 0,0044 Total 23 9,3549
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
43
Dengan analisis Yate’s treatment dapat ditentukan H0 dan H1 untuk
melihat apakah respon yang dihasilkan benar-benar disebabkan oleh faktor
(larutan carbopol 3% b/v, sorbitol, dan interaksi antara keduanya). H1 menyatakan
adanya regresi (hubungan) antara faktor dengan respon, sedangkan H0 menyatakan
tidak adanya regresi (hubungan) antara faktor dengan respon. H1 diterima dan H0
ditolak apabila nilai F hitung lebih besar daripada nilai F tabel (F0,05(1,15) =4,5431),
sehingga faktor memberikan pengaruh yang bermakna dalam menentukan respon.
Dalam penelitian ini H1 diterima dan H0
ditolak karena nilai F hitung untuk
efek larutan carbopol 3% b/v, efek sorbitol, dan efek interaksi antara larutan
carbopol 3% b/v dan sorbitol lebih besar daripada nilai F tabel. Maka dapat
dikatakan ada regresi (hubungan) antara faktor dengan respon daya sebar dan
faktor tersebut memberikan pengaruh yang bermakna secara statistik dalam
menentukan respon daya sebar. Nilai F larutan carbopol 3% b/v paling besar
menegaskan bahwa larutan carbopol 3% b/v merupakan faktor yang dominan
dalam menentukan respon daya sebar gel.
Larutan carbopol 3% b/v menjadi faktor dominan dalam menentukan
respon daya sebar gel karena carbopol sebagai gelling agent akan membentuk
jaringan struktural dalam sistem gel. Penambahan jumlah gelling agent akan
memperkuat jaringan struktural gel sehingga menyebabkan kenaikan viskositas
gel. Viskositas berbanding terbalik dengan daya sebar sediaan semipadat.
Semakin banyak carbopol yang digunakan, viskositas gel akan semakin besar dan
daya sebar gel akan semakin kecil. Sorbitol tidak dapat membentuk jaringan
struktural dalam sistem gel sehingga lebih kecil mempengaruhi viskositas gel.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
44
2. Viskositas
Pengaruh peningkatan level larutan carbopol 3% b/v dan sorbitol terhadap
viskositas gel dapat diamati pada Gambar 9.
40
50
60
70
80
90
25 35
Larutan carbopol 3% b/v (g)
Res
pon
visk
osita
s (d
.Pa.
s)
Level rendah sorbitol
Level tinggi sorbitol
40
50
60
70
80
90
5 15
Sorbitol (g)R
espo
n vi
skos
itas
(d.P
a.s)
Level rendah carbopol 3% b/VLevel tinggi carbopol 3% b/v
Gambar 9a Gambar 9b
Gambar 9. Grafik hubungan antara larutan carbopol 3% b/v (g) dan respon viskositas gel (d.Pa.s) (9a); grafik hubungan antara sorbitol (g) dan respon
viskositas gel (d.Pa.s) (9b)
Semakin banyak larutan carbopol 3% b/v yang digunakan dalam formula,
maka akan meningkatkan viskositas gel pada penggunaan sorbitol level rendah
maupun level tinggi. Peningkatan viskositas gel pada level tinggi sorbitol lebih
besar daripada level rendah sorbitol (Gambar 9a). Semakin banyak sorbitol yang
digunakan dalam formula, maka viskositas gel semakin besar pada penggunaan
larutan carbopol 3% b/v level tinggi dan viskositas gel semakin kecil pada
penggunaan larutan carbopol 3% b/v level rendah (Gambar 9b).
Larutan carbopol 3% b/v dominan dalam menentukan viskositas gel jika
dibandingkan dengan penggunaan sorbitol maupun interaksi antara larutan
carbopol 3% b/v dan sorbitol. Hal ini dapat dilihat dari lebih besarnya nilai efek
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
45
larutan carbopol 3% b/v hasil perhitungan desain faktorial dibandingkan dengan
nilai efek sorbitol maupun interaksi antara larutan carbopol 3% b/v dan sorbitol
(Tabel VI). Efek larutan carbopol 3% b/v bernilai positif sehingga larutan
carbopol 3% b/v dominan dalam meningkatkan viskositas. Carbopol merupakan
agen peningkat viskositas. Dispersi carbopol di dalam air akan menjadi larutan
yang mengental (Barry, 1983) sehingga penggunaan larutan carbopol 3% b/v
dapat meningkatkan viskositas gel sunscreen. Efek sorbitol tunggal maupun
interaksi antara larutan carbopol 3% b/v dan sorbitol bernilai positif sehingga
keduanya dapat meningkatkan viskositas.
Analisis dengan perhitungan Yate’s treatment dengan taraf kepercayaan
95% untuk respon viskositas disajikan pada Tabel VIII.
Tabel VIII. Analisis Yate’s treatment untuk respon viskositas gel sunscreen
Source of variation
Degrees of
freedom
Sum of squares Mean squares F
Replicates 5 1,8333 0,3667 Treatment 3 6208,3333 2069,4444 a (Carbopol) 1 4320,1666 4320,1666 12544,0377 b (Sorbitol) 1 384,0000 384,0000 1114,9826 ab (Interaksi) 1 1504,1667 1504,1667 4367,4991Experimental error 15 5,1667 0,3444 Total 23 6215,3333
Dari analisis Yate’s treatment untuk respon viskositas didapatkan bahwa
H1 diterima dan H0
ditolak karena nilai F hitung untuk efek larutan carbopol 3%
b/v, efek sorbitol, dan efek interaksi antara larutan carbopol 3% b/v dan sorbitol
lebih besar daripada nilai F tabel (1,15) yaitu 4,5431. Maka dapat dikatakan ada
regresi (hubungan) antara faktor dengan respon viskositas dan faktor tersebut
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
46
memberikan pengaruh yang bermakna secara statistik dalam menentukan respon
viskositas. Nilai F larutan carbopol 3% b/v paling besar menegaskan bahwa
larutan carbopol 3% b/v merupakan faktor yang dominan dalam menentukan
respon viskositas gel.
Larutan carbopol 3% b/v menjadi faktor dominan dalam menentukan
respon viskositas gel karena carbopol sebagai gelling agent akan membentuk
jaringan struktural dalam sistem gel yang menyebabkan kenaikan viskositas gel.
Dengan demikian semakin banyak carbopol yang digunakan, maka viskositas gel
juga akan semakin meningkat. Sorbitol tidak dapat membentuk jaringan struktural
dalam sistem gel sehingga lebih kecil mempengaruhi viskositas gel.
3. Pergeseran viskositas
Pengaruh peningkatan level larutan carbopol 3% b/v dan sorbitol terhadap
pergeseran viskositas gel dapat diamati pada Gambar 10.
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
25 35
Larutan carbopol 3% b/v (g)
Res
pon
perg
eser
an v
isko
sita
s (%
)
Level rendah sorbitol
Level tinggi sorbitol
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
5 15
Sorbitol (g)
Res
pon
perg
eser
an v
isko
sita
s (%
)
Level rendah carbopol 3% b/vLevel tinggi carbopol 3% b/v
Gambar 10a Gambar 10b
Gambar 10. Grafik hubungan antara larutan carbopol 3% b/v (g) dan respon pergeseran viskositas gel (%) (10a); grafik hubungan antara sorbitol
(g) dan respon pergeseran viskositas gel (%) (10b)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
47
Semakin banyak larutan carbopol 3% b/v yang digunakan dalam formula,
maka pergeseran viskositas gel akan semakin besar pada level rendah sorbitol dan
semakin kecil pada level tinggi sorbitol. Pergeseran viskositas pada level rendah
sorbitol lebih kecil daripada level tinggi sorbitol. Maka dapat dikatakan
penggunaan sorbitol level rendah lebih stabil dibanding penggunaan sorbitol level
tinggi (Gambar 10a).
Semakin banyak sorbitol yang digunakan dalam formula, maka pergeseran
viskositas gel akan semakin besar pada level rendah larutan carbopol 3% b/v dan
semakin kecil pada level tinggi larutan carbopol 3% b/v. Pergeseran viskositas
pada level rendah larutan carbopol 3% b/v lebih kecil daripada level tinggi larutan
carbopol 3% b/v. Maka dapat dikatakan penggunaan larutan carbopol 3% b/v
level rendah dapat meningkatkan kestabilan gel dibanding penggunaan larutan
carbopol 3% b/v level tinggi (Gambar 10b).
Interaksi antara larutan carbopol 3% b/v dan sorbitol dominan dalam
menentukan pergeseran viskositas gel jika dibandingkan dengan penggunaan
larutan carbopol 3% b/v maupun sorbitol tunggal. Hal ini dapat dilihat dari lebih
besarnya nilai efek interaksi antara larutan carbopol 3% b/v dan sorbitol hasil
perhitungan desain faktorial dibandingkan dengan nilai efek larutan carbopol 3%
b/v maupun efek sorbitol (Tabel VI). Efek interaksi antara larutan carbopol 3%
b/v dan sorbitol bernilai negatif sehingga interaksi antara larutan carbopol 3% b/v
dan sorbitol dominan dalam menurunkan pergeseran viskositas. Efek larutan
carbopol 3% b/v dan sorbitol bernilai negatif sehingga keduanya dapat
menurunkan pergeseran viskositas.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
48
Analisis dengan perhitungan Yate’s treatment dengan taraf kepercayaan
95% untuk respon pergeseran viskositas disajikan dalam Tabel IX.
Tabel IX. Analisis Yate’s treatment untuk respon pergeseran viskositas gel sunscreen
Source of variation
Degrees of
freedom
Sum of squares Mean squares F
Replicates 5 7,2589 1,4518 Treatment 3 168,7254 56,2418 a (Carbopol) 1 49,4501 49,4501 54,9140 b (Sorbitol) 1 35,1626 35,1626 39,0479 ab (Interaksi) 1 84,1127 84,1127 93,4067Experimental error 15 13,5068 0,9005 Total 23 189,4911
Dari analisis Yate’s treatment untuk respon pergeseran viskositas
didapatkan bahwa H1 diterima dan H0
ditolak karena nilai F hitung untuk efek
larutan carbopol 3% b/v, efek sorbitol, dan efek interaksi antara larutan carbopol
3% b/v dan sorbitol lebih besar daripada nilai F tabel (1,15) yaitu 4,5431. Maka
dapat dikatakan ada regresi (hubungan) antara faktor dengan respon pergeseran
viskositas dan faktor tersebut memberikan pengaruh yang bermakna secara
statistik dalam menentukan respon pergeseran viskositas. Nilai F interaksi antara
larutan carbopol 3% b/v dan sorbitol paling besar menegaskan bahwa interaksi
antara larutan carbopol 3% b/v dan sorbitol merupakan faktor yang dominan
dalam menentukan respon pergeseran viskositas gel.
Carbopol berfungsi sebagai agen peningkat viskositas, sedangkan sorbitol
berfungsi sebagai humektan untuk menarik lembab dari lingkungan. Interaksi
antara larutan carbopol 3% b/v dan sorbitol dominan dalam menentukan respon
pergeseran viskositas gel karena sorbitol sebagai humektan dapat menarik uap air
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
49
dari lingkungan dan uap air tersebut akan mempengaruhi carbopol dalam
menentukan viskositas gel.
E. Optimasi Formula
Optimasi formula perlu dilakukan untuk mendapatkan formula yang
optimum. Formula yang optimum merupakan formula yang memiliki sifat
maupun karakterisitik bentuk sediaan yang baik sesuai dengan yang dikehendaki.
Optimasi terhadap formula gel sunscreen meliputi sifat fisik, yaitu daya sebar dan
viskositas, serta stabilitas gel yang dilihat dari pergeseran viskositas setelah
penyimpanan gel selama satu bulan. Pergeseran viskositas berhubungan dengan
kestabilan sediaan. Oleh karena itu dalam optimasi formula gel sunscreen
diharapkan hanya terjadi sedikit pergeseran viskositas.
Dari hasil pengukuran sifat fisik gel yang meliputi daya sebar, viskositas,
dan pergeseran viskositas dapat dibuat contour plot. Contour plot dibuat
berdasarkan hasil perhitungan persamaan desain faktorial. Dari contour plot
masing-masing uji sifat fisik tersebut dapat ditentukan area optimum untuk
memperoleh respon yang dikehendaki. Area pada contour plot tersebut kemudian
digabungkan dalam contour plot superimposed dan ditentukan area komposisi
optimum gel dalam batas level larutan carbopol 3% b/v dan sorbitol yang diteliti.
Persamaan desain faktorial untuk daya sebar gel adalah y = 6,9064 –
0,0063 X1 + 0,3246 X2 – 0,0106 X1X2. Melalui persamaan ini dapat dibuat
contour plot sebagai berikut:
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
50
Gambar 11. Contour plot daya sebar gel sunscreen ekstrak kering polifenol teh hijau
Dengan contour plot daya sebar gel (Gambar 11), dapat ditentukan area
komposisi optimum gel untuk memperoleh respon daya sebar seperti yang
dikehendaki, terbatas pada jumlah bahan yang diteliti. Daya sebar yang optimal
adalah daya sebar yang diharapkan dapat menjamin pemerataan gel saat
diaplikasikan pada kulit. Nilai respon daya sebar yang didapatkan dari hasil
penelitian ini dan digunakan untuk optimasi daya sebar adalah 6,3-7 cm. Nilai
respon daya sebar tersebut diharapkan memiliki area daya sebar formula yang
optimum sesuai nilai daya sebar yang direkomendasikan untuk sediaan semifluid
yaitu 5-7 cm (Garg et al., 2002).
Persamaan desain faktorial untuk viskositas gel adalah y = 66,6668 –
0,4833 X1 – 8,7000 X2 + 0,3167 X1X2. Melalui persamaan ini dapat dibuat
contour plot sebagai berikut:
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
51
Gambar 12. Contour plot viskositas gel sunscreen ekstrak kering polifenol teh hijau
Dengan contour plot viskositas gel (Gambar 12), dapat ditentukan area
komposisi optimum gel untuk memperoleh respon viskositas seperti yang
dikehendaki, terbatas pada level yang diteliti. Viskositas suatu formula diharapkan
optimal sehingga dapat menjamin kualitas saat pengemasan maupun aplikasinya.
Viskositas yang terlalu besar (kental) akan menyebabkan gel sulit dikeluarkan dari
pengemasnya, sedangkan viskositas yang terlalu kecil (encer) akan menyebabkan
gel sulit diaplikasikan pada kulit. Nilai respon yang digunakan untuk optimasi
viskositas dalam penelitian ini adalah 50-65 d.Pa.s. Viskositas tersebut diharapkan
cukup optimum sehingga akan mempermudah pengemasan dan aplikasi gel pada
kulit.
Persamaan desain faktorial yang diperoleh untuk pergeseran viskositas gel
adalah y = -4,9686 + 0,4617 X1 + 2,0044 X2 – 0,0749 X1X2. Melalui persamaan
ini dapat dibuat contour plot sebagai berikut:
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
52
Gambar 13. Contour plot pergeseran viskositas gel sunscreen ekstrak kering polifenol teh hijau
Dengan contour plot pergeseran viskositas gel (Gambar 13), dapat
ditentukan area komposisi optimum gel untuk memperoleh respon pergeseran
viskositas seperti yang dikehendaki, terbatas pada jumlah bahan yang diteliti.
Setelah penyimpanan selama satu bulan diharapkan tidak terjadi pergeseran
viskositas, atau hanya terjadi pergeseran viskositas seminimal mungkin. Dengan
adanya pergeseran viskositas yang merupakan pergeseran profil kekentalan
setelah satu bulan memperlihatkan adanya ketidakstabilan sediaan selama
penyimpanan. Nilai respon yang digunakan untuk optimasi pergeseran viskositas
dalam penelitian ini adalah 0-8 %. Melalui subjective assessment yang telah
dilakukan terhadap formula 1, a, b, dan ab didapatkan bahwa formula dengan nilai
pergeseran viskositas 0-8 % memiliki konsistensi yang masih dapat diterima oleh
konsumen. Pada respon tersebut diharapkan pergeseran viskositas yang terjadi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
53
minimal sehingga dihasilkan formula yang optimum. Contoh dan hasil kuesioner
subjective assessment disajikan dalam lampiran.
Optimasi terhadap formula gel dilakukan untuk mendapatkan formula
optimum pada level yang diteliti. Formula optimum gel sunscreen dapat
diperkirakan dengan cara menggabungkan area komposisi optimum dari masing-
masing uji sifat fisik dan stabilitas gel yang telah dilakukan. Grafik pada area
optimum masing-masing uji yang telah dipilih digabungkan menjadi satu dalam
contour plot superimposed sebagai berikut:
Gambar 14. Contour plot superimposed gel sunscreen ekstrak kering polifenol teh hijau
Melalui contour plot superimposed sifat fisik gel (Gambar 14), dapat
diperkirakan area komposisi optimum gel sunscreen untuk mendapatkan formula
gel sunscreen dengan respon sifat fisik dan stabilitas gel yang dikehendaki dalam
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
54
batas level yang diteliti. Respon yang dipilih meliputi daya sebar antara 6,3-7 cm,
viskositas antara 50-65 d.Pa.s, dan pergeseran viskositas antara 0-8 %. Area
tersebut diprediksi sebagai formula optimum gel dalam batas level dan faktor
yang diteliti.
Pada jumlah bahan yang diteliti didapat area optimum yang cukup, dan
penggunaan larutan carbopol 3% b/v dan sorbitol harus diperhatikan agar
diperoleh formula yang optimum. Pada area komposisi optimum memperlihatkan
penggunaan larutan carbopol 3% b/v tidak boleh terlalu rendah, sedangkan
sorbitol dapat digunakan baik pada level rendah maupun level tinggi. Besar
kecilnya jumlah penggunaan larutan carbopol 3% b/v dan sorbitol dapat
mempengaruhi sifat fisik dan stabilitas gel.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
55
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
1. Konsentrasi polifenol teh hijau yang dapat memberikan SPF dengan nilai yang
dapat diterima sebagai sunscreen dalam penelitian ini adalah 18,1 mg% b/v.
2. Larutan carbopol 3% b/v dominan dalam menentukan respon daya sebar dan
viskositas gel, sedangkan interaksi antara larutan carbopol 3% b/v dan sorbitol
dominan dalam menentukan stabilitas gel.
3. Diperoleh area formula yang optimum berdasarkan contour plot superimposed
yang meliputi daya sebar, viskositas, dan stabilitas gel sunscreen pada level
dan faktor yang diteliti.
B. Saran
1. Perlu dilakukan optimasi proses pembuatan gel sunscreen ekstrak kering
polifenol teh hijau karena proses pembuatan dapat mempengaruhi sifat fisik
sediaan gel.
2. Perlu dilakukan optimasi konsentrasi polifenol teh hijau dengan metode lain
karena adanya keterbatasan dari metode Petro (1980) yang digunakan, yaitu
membutuhan spesifikasi alat yang dapat mendeteksi absorbansi lebih dari
3,00.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
56
DAFTAR PUSTAKA Alexander and Johnson, 1983, in Barry, B. W., (Ed.), Dermatological
Formulation, 300-304, Marcel Dekker Inc., New York Alfonso R. G., 2000, Remington’s The Science and Practice of Pharmacy, 20th
edition, 848, 1031, Mack Publishing Company, Easton Pennsylvania Anief, M., 2000, Ilmu Meracik Obat, Teori dan Praktik, 168-169, Gadjah Mada
University Press, Yogyakarta Anonim, 1979, Materia Medika Indonesia, Jilid III, 4, Departemen Kesehatan RI,
Jakarta --------, 1983, Hand Book of Pharmaceutical Excipient, 284-287, American
Pharmaceutical Association, Washington DC --------, 1986, Sediaan Galenik, 8-25, Departemen Kesehatan Republik Indonesia,
Jakarta --------, 1995, Farmakope Indonesia, Edisi IV, 756, Departemen Kesehatan
Republik Indonesia, Jakarta Ash, I., dan Michael, 1977, A Formulary of Cosmetic Preparations, Chemical
Publishing Co., New York Barry, B. W., 1983, Dermatological Formulation, 300-304, Marcel Dekker Inc.,
New York Bolton, S., 1997, Pharmaceutical Statistics Practical and Clinical Applications,
3th Ed., 326-337, Marcel Dekker Inc., New York Calder, Vince, Ph.D., 2005, How Does Sunblock Blockout UV A and UV B Rays,
www.PhysLink.com. Day, R. A. and Underwood, A. L., 1986, Quantitative Analysis, diterjemahkan
oleh Aloysius Hadyana P., 388-390, Erlangga, Jakarta Fatah, A. M., 1989, Spektroskopi, 1, 45-46, Fakultas Farmasi Universitas Gadjah
Mada, Yogyakarta Garg, A., Aggarwal, D., Garg, S., Singla, A.K., 2002, Spreading of Semisolid
Formulation : An Update, Pharmaceutical Technology, September 2002, 84-102, www.pharmtech.com
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
57
Hartoyo, A., 2003, Teh dan khasiatnya bagi kesehatan sebuah tinjauan ilmiah, 15, Kanisius, Yogyakarta
Hutapea, Johnny Ria DR., 1993, Inventaris Tanaman Obat Indonesia (II), 165,
Badan Penelitian dan Pengembangan, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta
James, E. D. M., 1999, Basic Statistic and Pharmaceutical Statistical Aplications,
265-269, Marcel Dekker inc., New York Jellinek, J Stephan DR., 1970, Formulation and Function of Cosmetics, translated
by G.L.Fenton, 323-325, John Wiley & Sons Inc., USA Katiyar, S.K., Afaq, F., Perez, A., and Mukhtar, H., 2001, Green tea polyphenol
(-)-epigallocatechin-3-gallate treatment of human skin inhibits ultraviolet radiation- induced oxidative stress, Carcinogenesis, 22(2), 287-294
Khopkar, S.M., 1990, Basic Concepts of Analytical Chemistry, alih bahasa oleh
Saptoraharjo, A., 193, 204, Universitas Indonesia Press, Jakarta Lucas, R., McMichael, T., Smith, W., & Armstrong, B., 2006, Solar Ultraviolet
Radiation: Global Burden of Disease From Solar Ultraviolet Radiation. Environmental Burden of Disease [Serial Online], 4, 8, 88 (No. 13): (258 screens), Available from URL: http// www.who.int
Mukhtar, H. and Ahmad, N., 1999, Green tea in chemoprevention of cancer,
Toxicol. Sci., 52, 111-117 Mulja, Muhammad, Drs., dan Suharman, Drs., 1995, Analisis Instrumental, 26-31,
Airlangga University Press, Surabaya Muller, Alban, 1996, Herbal Complexes with Proven Efficacy, in Fridd, Petrina
(Ed.), Natural Ingredients in Cosmetics-II, 156-157, Micelle Press, Wayemouth, England
Nagayama, K., Iwamura, Y., Shibata,T., Hirayama , I., and Nakamura, T., 2002,
Bactericidal activity of phlorotannins from the brown alga Ecklonia kurome, JAC, 50, 889-893
Nole, G., Johnson, A. W., 2004, An analysis of cumulative lifetime solar
ultraviolet radiation exposure and the benefits of daily sun protection. Diakses pada 25 September 2007
Petro, A. J., 1980, Correlation of Spectrophotometric Data with Sunscreen
Protection Factor, International Journal of Cosmetic Science , 3, 185-196
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
58
Rohdiana, D., 2001, Aktivitas daya tangkap radikal polifenol dalam daun teh, Majalah Farmasi Indonesia, 12(1), 53-58
Skoog, D. A., 1985, Principles of Instrumental Analysis, 3rd Ed., 22, 164-165,
329-351, Saunders College Publishing, Philadelphia Stanfield, Joseph W., 2003, Sun Protectans: Enhancing Product Functionality
with Sunscreens, in Schueller, R., Romanowski, P., (Eds.), Multifunctional Cosmetics, 145-148, Marcel Dekker Inc., New York
Svobodova, A., Psotova, J., and Walterova, D., 2003, Natural phenolics in
prevention of UV-Induced Skin Damage (A review), Biomed. Papers, 147(2), 137-145
Voigt, R., 1994, Lehrbuch Der Pharmazeutischen Technologie, 316-343, Gadjah
Mada University Press, Yogyakarta Walters, C., Keeney, A., Wigl, C.T., Johnston, C.R., and Cornelius, R.D., 1997,
The Spectrophotometric Analysis and Modeling of Sunscreen. Journal of Chemical Education, 74, 1, 99-101
Weiner, M., Bernstein, I. L., 1989, Adverse Reactions to Drug Formulation
Agents : A Handbook of Exipients, 125, Marcel Dekker Inc., New York
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
59
LAMPIRAN
Lampiran 1. Data penetapan kadar air serbuk teh hijau dengan Metode Karl Fischer
Replikasi Bobot yang
ditimbang (mg)
Hasil / angka
pada alat (mg)
Kadar air
(%)
Kadar air
rata-rata (%)
1 1005,36 29,14 8,206
2 1004,69 28,55 7,624
3 1005,13 29,02 8,089
7,973
Drift = 25
Blanko
Berat spuit awal = 7,7436 g
Berat spuit akhir = 7,7329 g
Air = 0,0107 g
Konsentrasi = 25,960 mg/ 5 mL titran
Angka pada alat = 0,2089 % dari 10 g
Kadar air = mg100001002089,0
×
= 20,89 mg
Replikasi I
Penimbangan = 1005,36 mg
Kadar air = 29,14 mg – 20,89 mg
= 8,25 mg dalam 1 mL sampel
= 82,5 mg dalam 10 mL sampel
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
60
Persentase kadar air = %10036,10055,82
×mg
mg = 8,206%
Replikasi II
Penimbangan = 1004,69 mg
Kadar air = 28,55 mg – 20,89 mg
= 7,66 mg dalam 1 mL sampel
= 76,6 mg dalam 10 mL sampel
Persentase kadar air = %10069,10046,76
×mg
mg = 7,624%
Replikasi III
Penimbangan = 1005,13 mg
Kadar air = 29,02 mg – 20,89 mg
= 8,13 mg dalam 1 mL sampel
= 81,3 mg dalam 10 mL sampel
Persentase kadar air = %10013,10053,81
×mg
mg = 8,089%
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
61
Lampiran 2. Penetapan kadar polifenol dalam ekstrak kering polifenol teh hijau
1. Penimbangan baku kuersetin untuk stok 50 mg/mL (1 mg/mL)
1. Operating time, panjang gelombang maksimum, kurva baku replikasi I Kertas = 0,1944 g Kertas + zat = 0,24490 g Kertas + sisa = 0,19530 g Berat zat = 0,04960 g = 49,60 mg
2. Kurva baku replikasi II Kertas = 0,1947 g Kertas + zat = 0,24525 g Kertas + sisa = 0,19396 g Berat zat = 0,05129 g = 51,29 mg
3. Kurva baku replikasi III Kertas = 0,1999 g Kertas + zat = 0,25096 g Kertas + sisa = 0,20065 g Berat zat = 0,05031 g = 50,31 mg
2. Kurva baku
REPLIKASI I REPLIKASI II REPLIKASI III
Kadar (mg % ) Absorbansi
Kadar (mg % ) Absorbansi
Kadar (mg % ) Absorbansi
0,198 0,305 0,205 0,316 0,201 0,2950,298 0,405 0,308 0,425 0,302 0,4280,397 0,584 0,410 0,521 0,402 0,5390,496 0,713 0,513 0,669 0,503 0,6500,595 0,817 0,615 0,737 0,604 0,8130,694 0,875 0,718 0,821 0,704 0,896
r 0,989 r 0,995 r 0,998A 0,075 A 0,118 A 0,055B 1,214 B 1,005 B 1,212
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
62
3. Pengukuran dan perhitungan kadar polifenol dalam ekstrak kering polifenol teh hijau Penimbangan ekstrak kering polifenol teh hijau: 1. Replikasi I
Kertas = 0,2247 g Kertas + zat = 0,72732 g Kertas + sisa = 0,22519 g Berat zat = 0,50213 g = 502,13 mg
2. Replikasi II Kertas = 0,2091 g Kertas + zat = 0,72207 g Kertas + sisa = 0,20928 g Berat zat = 0,51279 g = 512,79 mg
3. Replikasi III Kertas = 0,2206 g Kertas + zat = 0,72539 g Kertas + sisa = 0,22210 g Berat zat = 0,50329 g
= 503,29 mg 4. Replikasi IV
Kertas = 0,2277 g Kertas + zat = 0,73597 g Kertas + sisa = 0,22916 g Berat zat = 0,50681 g = 506,81 mg
5. Replikasi V Kertas = 0,2161 g Kertas + zat = 0,72277 g Kertas + sisa = 0,21628 g Berat zat = 0,50649 g = 506,49 mg
6. Replikasi VI Kertas = 0,2248 g Kertas + zat = 0,73002 g Kertas + sisa = 0,22641 g Berat zat = 0,50361 g
= 503,61 mg
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
63
Kurva baku yang digunakan :
Kadar (mg % ) absorbansi 0,201 0,2950,302 0,4280,402 0,5390,503 0,6500,604 0,8130,704 0,896
r 0,998A 0,055B 1,212
Hasil perhitungan kadar polifenol dalam ekstrak kering polifenol teh hijau :
Polifenol Teh Hijau
Replikasi Absorbansi Harga X (mg/100mL)
Sebelum Pengenceran
Jumlah dalam 25 mL
aseton
Kadar dalam ekstrak (%)
1 0,342 0,237167568 1185,83784 296,4594601 59,9982 0,348 0,242114932 1210,574661 302,6436653 60,1043 0,348 0,242114932 1210,574661 302,6436653 58,9914 0,347 0,241290372 1206,451858 301,6129644 59,4405 0,349 0,242939493 1214,697465 303,6743661 59,9266 0,358 0,250360539 1251,802696 312,950674 62,052
Rata-rata 59,926Standar Deviasi 1,142
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
64
Lampiran 3. Penetapan nilai SPF
1. Penimbangan ekstrak Berat kertas = 0,1921 g Berat kertas + zat = 0,24260 g Berat kertas + sisa zat = 0,19225 g Berat zat = 0,05035 g = 50,35 mg Berat polifenol = 50,35 mg x 59,926% = 30,17 mg Konsentrasi stok polifenol = 30,17 mg/ 100 ml = 30,17 mg %
2. Konversi konsentrasi polifenol 18,1 mg% (b/v) menjadi % b/b
Replikasi Berat labu kosong (g)
Berat labu dan
larutan (g)
Berat larutan
(g)
Berat pelarut
(g) 1 12,4391 20,6576 8,2185 8,2155 2 15,0474 23,3390 8,2916 8,2886 3 13,1732 21,2565 8,0833 8,0803
Rata-rata 8,1978 8,1948
Konsentrasi polifenol 18,1 mg% = 1,81 mg/10mL 1,81 mg/10mL = 1,81 mg/8,1978 g 22,08 mg/100g = 22,08 mg% (b/b) Untuk 3,017 mg ekstrak (mengandung 1,81 mg polifenol) diperlukan 8,1948 g pelarut.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
65 3. Penetapan SPF
Teh Hijau 6 mg% b/v 12,1 mg% b/v 18,1 mg% b/v I AUC II AUC III AUC I AUC II AUC III AUC I AUC II AUC III AUC 290 1,479 6,648 1,495 6,723 1,508 6,778 2,783 12,8 2,76 12,69 2,774 12,78 3 15 3 15 3 15 295 1,18 5,353 1,194 5,425 1,203 5,47 2,338 10,69 2,316 10,59 2,339 10,69 3 14,46 3 14,39 3 14,48 300 0,961 4,238 0,976 4,308 0,985 4,353 1,936 8,545 1,92 8,468 1,937 8,553 2,784 12,46 2,757 12,33 2,79 12,46 305 0,734 3,138 0,747 3,2 0,756 3,243 1,482 6,338 1,467 6,275 1,484 6,355 2,2 9,468 2,176 9,37 2,195 9,443 310 0,521 2,185 0,533 2,248 0,541 2,285 1,053 4,425 1,043 4,375 1,058 4,445 1,587 6,683 1,572 6,628 1,582 6,663 315 0,353 1,46 0,366 1,523 0,373 1,558 0,717 2,97 0,707 2,925 0,72 2,988 1,086 4,515 1,079 4,495 1,083 4,498 320 0,231 1,005 0,243 1,033 0,25 1,103 0,471 2,03 0,463 2,03 0,475 2,063 0,72 3,11 0,719 3,155 0,716 3,118 325 0,171 0,803 0,17 0,8 0,191 0,9 0,341 1,6 0,349 1,643 0,35 1,643 0,524 2,463 0,543 2,553 0,531 2,498 330 0,15 0,733 0,15 0,73 0,169 0,823 0,299 1,458 0,308 1,498 0,307 1,498 0,461 2,243 0,478 2,31 0,468 2,278 335 0,143 0,71 0,142 0,705 0,16 0,79 0,284 1,413 0,291 1,445 0,292 1,453 0,436 2,16 0,446 2,193 0,443 2,198 340 0,141 0,703 0,14 0,698 0,156 0,775 0,281 1,398 0,287 1,428 0,289 1,438 0,428 2,135 0,431 2,138 0,436 2,178 345 0,14 0,703 0,139 0,695 0,154 0,765 0,278 1,395 0,284 1,423 0,286 1,433 0,426 2,128 0,424 2,118 0,435 2,173 350 0,141 0,713 0,139 0,705 0,152 0,745 0,28 1,39 0,285 1,4 0,287 1,423 0,425 2,108 0,423 2,095 0,434 2,15 355 0,144 0,708 0,143 0,703 0,146 0,718 0,276 1,358 0,275 1,353 0,282 1,39 0,418 2,055 0,415 2,04 0,426 2,095 360 0,139 0,68 0,138 0,675 0,141 0,69 0,267 1,303 0,266 1,3 0,274 1,335 0,404 1,973 0,401 1,955 0,412 2,01 365 0,133 0,638 0,132 0,633 0,135 0,648 0,254 1,215 0,254 1,23 0,26 1,245 0,385 1,848 0,381 1,823 0,392 1,878 370 0,122 0,573 0,121 0,568 0,124 0,583 0,232 1,09 0,238 1,103 0,238 1,12 0,354 1,655 0,348 1,633 0,359 1,683 375 0,107 0,5 0,106 0,495 0,109 0,51 0,204 0,948 0,203 0,945 0,21 0,978 0,308 1,435 0,305 1,42 0,314 1,46 380 0,093 0,425 0,092 0,42 0,095 0,435 0,175 0,795 0,175 0,793 0,181 0,825 0,266 1,205 0,263 1,195 0,27 1,225 385 0,077 0,348 0,076 0,34 0,079 0,358 0,143 0,64 0,142 0,633 0,149 0,668 0,216 0,968 0,215 0,96 0,22 0,985 390 0,062 0,275 0,06 0,268 0,064 0,288 0,113 0,498 0,111 0,488 0,118 0,523 0,171 0,75 0,169 0,743 0,174 0,763 395 0,048 0,21 0,047 0,205 0,051 0,223 0,086 0,37 0,084 0,363 0,091 0,395 0,129 0,558 0,128 0,553 0,131 0,565 400 0,036 0,16 0,035 0,155 0,038 0,173 0,062 0,273 0,061 0,265 0,067 0,298 0,094 0,408 0,093 0,408 0,095 0,415 405 0,028 0,07 0,027 0,068 0,031 0,078 0,047 0,118 0,045 0,113 0,052 0,13 0,069 0,303 0,07 0,305 0,071 0,31 410 0,052 0,13 0,052 0,13 0,053 0,133 AUC total 32,53 32,89 34,04 64,94 64,66 65,67 92,22 91,94 92,65 Log SPF 0,325 0,329 0,324 0,59 0,588 0,597 0,768 0,766 0,772
SPF 2,115 2,133 2 3,679 3,658 3,724 5,868 5,837 5,917
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
66
Lampiran 4. Hasil scanning operating time
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
67
Lampiran 5. Hasil scanning panjang gelombang maksimum
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
68
Lampiran 6. Data penimbangan dan notasi Data Penimbangan
Formula 1 a b ab Etanol 96% (mL) 10 10 10 10
Carbopol 3% b/v (g) 25 35 25 35
Sorbitol (g) 5 5 15 15
Aquades (mL) 35 35 35 35
TEA (g) 1 1 1 1
Asam sitrat (g) 0,125 0,125 0,125 0,125
Ekstrak polifenol (mg) 16,55 18,76 18,76 19,86
Contoh perhitungan ekstrak polifenol yang digunakan :
Formula 1
Berat formula = 75,025 g = 75.025 mg
Kadar polifenol dalam teh hijau = 59,926%
Kesetaraan berat ekstrak dalam 10 mL etanol 90% = 3,017 mg ~ 8,1948 g
Berat ekstrak dalam formula = gxg
mg 025,751948,8017,3 = 27,6212 mg
Berat polifenol dalam formula = 59,926% x 27,6212 mg = 16,55 mg
Kadar polifenol dalam formula = mgmg
mg025.7555,16
55,16+
= 0,022% b/b
Notasi Level tinggi : + Level rendah : - Faktor A : Larutan Carbopol 3% Faktor B : Sorbitol
FORMULA FAKTOR A FAKTOR B INTERAKSI 1 - - + a + - - b - + - ab + + +
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
69
Lampiran 7. Data pengukuran pH pada formula
Formula 1 a b ab 1 5,4 4,9 4,9 5,3
2 5,2 5,0 4,8 5,2
3 5,1 5,0 5,0 5,2
4 5,1 4,8 4,9 5,5
5 5,3 5,0 5,0 5,4
6 5,1 4,8 4,8 5,2
X 5,20 4,92 4,90 5,30
SD 0,126 0,098 0,089 0,126
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
70
Lampiran 8. Data sifat fisik: daya sebar, viskositas, dan pergeseran viskositas Data Daya Sebar Satuan: cm
Formula 1 a b ab 1 7,00 6,55 7,60 5,90
2 7,00 6,50 7,80 6,05
3 7,05 6,35 7,60 6,00
4 7,00 6,40 7,60 5,95
5 7,10 6,45 7,70 6,10
6 7,15 6,50 7,60 6,00
X 7,0500 6,4583 7,6500 6,0000
SD 0,0632 0,0736 0,0837 0,0707
Data Viskositas satuan: d.Pa.s
Formula 1 2 3 4 5 6 X SD Setelah dibuat (48 jam) 52 50 51 50 50 51 50,6667 0,81651 bulan 54 55 54 55 54 54 54,3333 0,5164
1
Pergeseran viskositas 6,58 8,55 6,58 8,55 6,58 6,58 7,2367 1,0173Setelah dibuat (48 jam) 62 62 62 61 61 62 61,6667 0,51641 bulan 67 66 67 67 66 67 66,6667 0,5164
a
Pergeseran viskositas 8,65 7,03 8,65 8,65 7,03 8,65 8,1100 0,8366Setelah dibuat (48 jam) 43 43 42 43 43 43 42,8333 0,40821 bulan 46 47 46 47 47 46 46,5000 0,5477
b
Pergeseran viskositas 7,39 9,73 7,39 9,73 9,73 7,39 8,5600 1,2817Setelah dibuat (48 jam) 85 85 86 86 85 86 85,5000 0,54771 bulan 86 87 87 88 88 87 87,1667 0,7528
ab
Pergeseran viskositas 0,58 1,75 1,75 2,92 2,92 1,75 1,9450 0,8807
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
71
Lampiran 9. Perhitungan efek sifat fisik NOTASI Level tinggi : + Level rendah : - Interaksi : Carbopol 3% x sorbitol
1. Daya Sebar Formula Carbopol 3% Sorbitol Interaksi Respon
1 - - + 7,0500 a + - - 6,4583 b - + - 7,6500 ab + + + 6,0000
a. Efek Carbopol 3%
1208,12
6,00007,6500-6,45837,0500-−=
++=
b. Efek Sorbitol
0708,02
0000,66500,74583,67,0500-=
++−=
c. Interaksi
0,52912
0000,67,6500-4583,67,0500−=
+−=
2. Viskositas Viskositas Setelah Dibuat Formula Carbopol 3% Sorbitol Interaksi Respon
1 - - + 50,6667 a + - - 61,6667 b - + - 42,8333 ab + + + 85,5000
a. Efek Carbopol 3%
8333,262
5000,858333,426667,6150,6667-=
+−+=
b. Efek Sorbitol
9999,72
5000,858333,426667,6150,6667-=
++−=
c. Interaksi
8333,152
5000,858333,426667,6150,6667=
+−−=
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
72
3. Pergeseran Viskositas Formula Carbopol 3% Sorbitol Interaksi Respon
1 - - + 7,2367 a + - - 8,1100 b - + - 8,5600 ab + + + 1,9450
a. Efek Carbopol 3%
8708,22
9450,15600,81100,87,2367-−=
+−+=
b. Efek Sorbitol
4208,22
9450,15600,81100,8-7,2367-−=
++=
c. Interaksi
7441,32
9450,15600,81100,8-7,2367−=
+−=
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
73
Lampiran 10. Persamaan regresi PLOT Persamaan Umum:
y = b0 + b1X1 + b2X2 + b12X1X2 Keterangan: y = respon hasil atau sifat yang diamati X1, X2 = level bagian X1, bagian X2 b0, b1, b2, b12 = koefisien, dapat dihitung dari hasil percobaan b0 = rata- rata hasil semua percobaan 1. Daya Sebar
(1) 7,0500 = b0 + 25 b1 + 5 b2 + b12 (25) (5) = b0 + 25 b1 + 5 b2 + 125 b12 (a) 6,4583 = b0 + 35 b1 + 5 b2 + b12 (35)(5) = b0 + 35 b1 + 5 b2 + 175 b12 (b) 7,6500 = b0 + 25 b1 + 15 b2 + b12 (25)(15) = b0 + 25 b1 + 15 b2 + 375 b12 (ab)6,0000 = b0 + 35 b1 + 15 b2 + b12 (35)(15) = b0 + 35 b1 + 15 b2 + 525 b12
Eliminasi (1) dan (a) (1) 7,0500 = b0 + 25 b1 + 5 b2 + 125 b12 (a) 6,4583 = b0 + 35 b1 + 5 b2 + 175 b12 0,5917 = -10 b1 – 50 b12 …………………………( I ) Eliminasi (b) dan (ab) (b) 7,6500 = b0 + 25 b1 + 15 b2 + 375 b12 (ab) 6,0000 = b0 + 35 b1 + 15 b2 + 525 b12 1,6500 = - 10 b1 – 150 b12 ………………………(II) Eliminasi ( I ) dan ( II ) ( I ) 0,5917 = -10 b1 – 50 b12 ( II ) 1,6500 = -10 b1 – 150 b12 -1,0583 = 100 b12
b12 = - 0,010583 Subtitusi b12 ke ( I ) ( I ) 0, 5917 = -10 b1– 50 b12
0, 5917 = -10 b1– 50 (-0,010583) b1 = -0,006255
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
74
Masukkan b1 dan b12 dalam persamaan (1) dan (b) (1) 7,0500 = b0 + 25 b1 + 5 b2 + 125 b12
7,0500 = b0 + 25 (-0,006255) + 5 b2 + 125 (-0,010583) 7,0500 = b0 – 0,156375 + 5 b2 – 1,322875
8,52925 = b0 + 5 b2 ………………………...(III) (b) 7,6500 = b0 + 25 b1 + 15 b2 + 375 b12 7,6500 = b0 + 25 (-0,006255) + 15 b2 + 375 (- 0,010583) 7,6500 = b0 – 0,156375 + 15 b2 – 3,968625
11,775 = b0 + 15 b2 …………………………(IV) Eliminasi persamaan (III) dan (IV) (III) 8,52925 = b0 + 5 b2 (IV) 11,775 = b0 + 15 b2 -3,24575 = -10 b2 b2 = 0,324575 subsitusi ke persamaan (III) (III) 8,52925 = b0 + 5 b2 8,52925 = b0 + 5 (0,324575) 8,52925 = b0 + 1,622875
b0 = 6,906375 2. Viskositas
(1) 50,6667= b0 + 25 b1 + 5 b2 + b12 (25) (5) = b0 + 25 b1 + 5 b2 + 125 b12
(a) 61,6667= b0 + 35 b1 + 5 b2 + b12 (35)(5) = b0 + 35 b1 + 5 b2 + 175 b12 (b) 42,8333= b0 + 25 b1 + 15 b2 + b12 (25)(15) = b0 + 25 b1 + 15 b2 + 375 b12 (ab)85,5000= b0 + 35 b1 + 15 b2 + b12 (35)(15) = b0 + 35 b1 + 15 b2 + 525 b12
Eliminasi (1) dan (a) (1) 50,6667 = b0 + 25 b1 + 5 b2 + 125 b12 (a) 61,6667 = b0 + 35 b1 + 5 b2 + 175 b12 -11 = -10 b1 – 50 b12 …………( I )
y = 6,906375 – 0,006255 X1 + 0,324575 X2 – 0,010583 X1X2
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
75
Eliminasi (b) dan (ab) (b) 42,8333 = b0 + 25 b1 + 15 b2 + 375 b12 (ab) 85,5000 = b0 + 35 b1 + 15 b2 + 525 b12 -42,6667 = -10 b1 – 150 b12 …………( II ) Eliminasi ( I ) dan ( II ) ( I ) -11 = -10 b1 – 50 b12 ( II )-42,6667 = -10 b1 – 150 b12 31,6667 = 100 b12
b12 = 0,316667 Subtitusi b12 ke (I) (I) -11 = -10 b1– 50 b12
-11 = -10 b1 – 50 (0,316667) b1 = -0,483335
Masukkan b1 dan b12 dalam persamaan (1) dan (b) (1) 50,6667 = b0 + 25 b1 + 5 b2 + 125 b12
50,6667 = b0 + 25 (-0,483335) + 5 b2 +125 (0,316667) 50,6667 = b0 –12,083375 + 5 b2 + 39,583375 23,1667 = b0 + 5 b2 ……………………………………..(III) (b) 42,8333 = b0 + 25 b1 + 15 b2 + 375 b12
42,8333 = b0 + 25 (-0,483335) + 15 b2 + 375 (0,316667) 42,8333 = b0 – 12,083375 + 15 b2 + 118,750125 -63, 83345 = b0 + 15 b2 …………………………….…….(IV) Eliminasi persamaan (III) dan (IV) 23,1667 = b0 + 5 b2 -63,83345 = b0 + 15 b2
87,00015 = -10 b2 b2 = -8,700015 subsitusi ke persamaan (III)
23,1667 = b0 + 5 b2 23,1667 = b0 + 5 (-8,700015) 23,1667 = b0 – 43,500075
b0 = 66,666775
y = 66,666775 – 0,483335 X1 – 8,700015 X2 + 0,316667 X1X2
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
76
3. Pergeseran Viskositas (1) 7,2367 = b0 + 25 b1 + 5 b2 + b12 (25) (5) = b0 + 25 b1 + 5 b2 + 125 b12 (a) 8,1100 = b0 + 35 b1 + 5 b2 + b12 (35)(5) = b0 + 35 b1 + 5 b2 + 175 b12 (b) 8,5600 = b0 + 25 b1 + 15 b2 + b12 (25)(15) = b0 + 25 b1 + 15 b2 + 375 b12 (ab)1,9450 = b0 + 35 b1 + 15 b2 + b12 (35)(15) = b0 + 35 b1 + 15 b2 + 525 b12 Eliminasi (1) dan (a) (1) 7,2367 = b0 + 25 b1 + 5 b2 + 125 b12 (a) 8,1100 = b0 + 35 b1 + 5 b2 + 175 b12
-0,8733 = -10 b1 – 50 b12 …………( I ) Eliminasi (b) dan (ab) (b) 8,5600 = b0 + 25 b1 + 15 b2 + 375 b12 (ab) 1,9450 = b0 + 35 b1 + 15 b2 + 525 b12 6,6150 = -10 b1 – 150 b12 …………( II ) Eliminasi ( I ) dan ( II ) ( I )-0,8733 = -10 b1 – 50 b12 ( II )6,6150 = -10 b1 – 150 b12
-7,4883 = 100 b12 b12 = -0,074883
Subtitusi b12 ke (I) (I) -0,8733= -10 b1 – 50 b12
-0,8733= -10 b1 – 50 (-0,074883) b1 = 0,461745
Masukkan b1 dan b12 dalam persamaan (1) dan (b) (1) 7,2367 = b0 + 25 b1 + 5 b2 + 125 b12 7,2367 = b0 + 25 (0,461745) + 5 b2 +125 (-0,074883) 7,2367 = b0 + 11,543625 + 5 b2 – 9,360375 5,05345= b0 + 5 b2 ……………………………………....(III) (b) 8,5600 = b0 + 25 b1 + 15 b2 + 375 b12
8,5600 = b0 + 25 (0,461745) + 15 b2 + 375 (-0,074883) 8,5600 = b0 + 11,543625 + 15 b2 – 28,081125 25,0975= b0 + 15 b2 …………………………………….(IV)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
77
Eliminasi persamaan (III) dan (IV) 5,05345 = b0 + 5 b2
25,0975 = b0 + 15 b2 -20,04405 = -10 b2 b2 = 2,004405
Subsitusi ke persamaan (III)
5,05345 = b0 + 5 b2 5,05345 = b0 + 5 (2,004405) 5,05345 = b0 + 10,022025
b0 = -4,968575
y = -4,968575 + 0,461745 X1 + 2,004405 X2 – 0,074883 X1X2
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
78
Lampiran 11. Data analysis of variance (ANOVA) Yate’s treatment a. Carbopol 3% b/v b. Sorbitol 1. Daya sebar
a1 a2 Replikasi
b1 b2 b1 b2
1 7,00 7,60 6,55 5,90 2 7,00 7,80 6,50 6,05 3 7,05 7,60 6,35 6,00 4 7,00 7,60 6,40 5,95 5 7,10 7,70 6,45 6,10 6 7,15 7,60 6,50 6,00
Σy2 = total sum of squares
= (7,00)2 + (7,60)2 + (6,55)2 + (5,90)2 + (7,00)2 + (7,80)2 + (6,50)2 + (6,05)2 + (7,05)2 + (7,60)2 + (6,35)2 + (6,00)2 + (7,00)2 + (7,60)2 + (6,40)2 + (5,95)2 + (7,10)2 + (7,70)2 + (6,45)2 + (6,10)2 + (7,15)2 + (7,60)2 +
(6,50)2 + (6,00)2 - 2
24)95,162(
= 1115,7175 – 1106,3626 = 9,3549 Ryy = replicate sum of squares
= 24
)95,162(4
)25,27()35,27()95,26()27()35,27()05,27( 2222222
−+++++
= 1106,4031 – 1106,3626 = 0,0405 Tyy = treatment sum of squares
= 24
)95,162(6
)00,36()75,38()90,45()30,42( 22222
−+++
= 1115,6104 – 1106,3626 = 9,2478 Eyy = experimental error sum of squares = Σy2 – Ryy – Tyy = 9,3549 – 0,0405 – 9,2478 = 0,0666
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
79
Ayy = sum of squares associated with the different levels of a
= 24
)95,162(12
)75,74()20,88( 222
−+
= 1113,9002 – 1106,3626 = 7,5376 Byy = sum of squares associated with the different levels of b
= 24
)95,162(12
)90,81()05,81( 222
−+
= 1106,3927 – 1106,3626 = 0,0301 AByy = Tyy – Ayy – Byy = 9,2478 – 7,5376 – 0,0301 = 1,6801
Source of variation Degrees
of
freedom
Sum of squares Mean squares F
Replicates 5 0,0405 0,0081 Treatment 3 9,2478 3,0826 a (Carbopol) 1 7,5376 7,5376 1713,0909 b (Sorbitol) 1 0,0301 0,0301 6,8409 ab (Interaksi) 1 1,6801 1,6801 381,8409Experimental error 15 0,0666 0,0044 Total 23 9,3549
Fa = errorerimentalforsquaresmean
effectaforsquaresmeanexp
= 0044,05376,7
= 1713,0909
Fb = errorerimentalforsquaresmean
effectbforsquaresmeanexp
= 0044,00301,0
= 6,8409
Fab = errorerimentalforsquaresmean
effectabforsquaresmeanexp
= 0044,06801,1
= 381,8409 F tabel (1,15) dengan tingkat kepercayaan 95% adalah 4,5431
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
80
2. Viskositas
a1 a2 Replikasi b1 b2 b1 b2
1 52 43 62 85 2 50 43 62 85 3 51 42 62 86 4 50 43 61 86 5 50 43 61 85 6 51 43 62 86
Σy2 = total sum of squares
= (52)2 + (43)2 + (62)2 + (85)2 + (50)2 + (43)2 + (62)2 + (85)2 + (51)2 + (42)2 + (62)2 + (86)2 + (50)2 + (43)2 + (61)2 + (86)2 + (50)2 + (43)2 + (61)2
+ (85)2 + (51)2 + (43)2 + (62)2 + (86)2 - 2
24)1444(
= 93096 – 86880,6667 = 6215,3333 Ryy = replicate sum of squares
= 24
)1444(4
)242()239()240()241()240()242( 2222222
−+++++
= 86882,5000 – 86880,6667 = 1,8333 Tyy = treatment sum of squares
= 24
)1444(6
)513()370()257()304( 22222
−+++
= 93089 – 86880,6667 = 6208,3333 Eyy = experimental error sum of squares = Σy2 – Ryy – Tyy = 6215,3333 – 1,8333 – 6208,3333 = 5,1667 Ayy = sum of squares associated with the different levels of a
= 24
)1444(12
)883()561( 222
−+
= 91200,8333 – 86880,6667 = 4320,1666
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
81
Byy = sum of squares associated with the different levels of b
= 24
)1444(12
)770()674( 222
−+
= 87264,6667 – 86880,6667 = 384,0000 AByy = Tyy – Ayy – Byy = 6208,3333 – 4320,1666 – 384,0000 = 1504,1667
Source of variation Degrees
of
freedom
Sum of squares Mean squares F
Replicates 5 1,8333 0,3667 Treatment 3 6208,3333 2069,4444 a (Carbopol) 1 4320,1666 4320,1666 12544,0377 b (Sorbitol) 1 384,0000 384,0000 1114,9826 ab (Interaksi) 1 1504,1667 1504,1667 4367,4991Experimental error 15 5,1667 0,3444 Total 23 6215,3333
Fa = errorerimentalforsquaresmean
effectaforsquaresmeanexp
= 3444,0
1666,4320
= 12544,0377
Fb = errorerimentalforsquaresmean
effectbforsquaresmeanexp
= 3444,00000,384
= 1114,9826
Fab = errorerimentalforsquaresmean
effectabforsquaresmeanexp
= 3444,0
1667,1504
= 4367,4991 F tabel (1,15) dengan tingkat kepercayaan 95% adalah 4,5431
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
82
3. Pergeseran viskositas
a1 a2 Replikasi
b1 b2 b1 b2
1 6,58 7,39 8,65 0,58 2 8,55 9,73 7,03 1,75 3 6,58 7,39 8,65 1,75 4 8,55 9,73 8,65 2,92 5 6,58 9,73 7,03 2,92 6 6,58 7,39 8,65 1,75
Σy2 = total sum of squares = (6,58)2 + (7,39)2 + (8,65)2 + (0,58)2 + (8,55)2 + (9,73)2 + (7,03)2 +
(1,75)2 + (6,58)2 + (7,39)2 + (8,65)2 + (1,75)2 + (8,55)2 + (9,73)2 + (8,65)2 + (2,92)2 + (6,58)2 + (9,73)2 + (7,03)2 + (2,92)2 + (6,58)2 + (7,39)2 +
(8,65)2 + (1,75)2 - 2
24)11,155(
= 1191,9541 – 1002,4630 = 189,4911 Ryy = replicate sum of squares
= 24
)11,155(4
)37,24()26,26()85,29()37,24()06,27()20,23( 2222222
−+++++
= 1009,7219 – 1002,4630 = 7,2589 Tyy = treatment sum of squares
= 24
)11,155(6
)67,11()66,48()36,51()42,43( 22222
−+++
= 1171,1884 – 1002,4630 = 168,7254 Eyy = experimental error sum of squares = Σy2 – Ryy – Tyy = 189,4911 – 7,2589 – 168,7254 = 13,5068 Ayy = sum of squares associated with the different levels of a
= 24
)11,155(12
)33,60()78,94( 222
−+
= 1051,9131 – 1002,4630 = 49,4501
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
83
Byy = sum of squares associated with the different levels of b
= 24
)11,155(12
)03,63()08,92( 222
−+
= 1037,6256 – 1002,4630 = 35,1626 AByy = Tyy – Ayy – Byy = 168,7254 – 49,4501 – 35,1626 = 84,1127
Source of variation Degrees
of
freedom
Sum of squares Mean squares F
Replicates 5 7,2589 1,4518 Treatment 3 168,7254 56,2418 a (Carbopol) 1 49,4501 49,4501 54,9140 b (Sorbitol) 1 35,1626 35,1626 39,0479 ab (Interaksi) 1 84,1127 84,1127 93,4067Experimental error 15 13,5068 0,9005 Total 23 189,4911
Fa = errorerimentalforsquaresmean
effectaforsquaresmeanexp
= 9005,04501,49
= 54,9140
Fb = errorerimentalforsquaresmean
effectbforsquaresmeanexp
= 9005,01626,35
= 39,0479
Fab = errorerimentalforsquaresmean
effectabforsquaresmeanexp
= 9005,01127,84
= 93,4067 F tabel (1,15) dengan tingkat kepercayaan 95% adalah 4,5431
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
84
Lampiran 12. Contoh kuesioner subjective assessment
SUBJECTIVE ASSESSMENT GEL SUNSCREEN TEH HIJAU
Nama :…………………. Usia :…………………. Hari, tanggal :…………………. No kemasan : Formula 1 Berilah tanda (v)pada kolom yang Anda anggap paling sesuai dengan pertanyaan di bawah ini! No Pertanyaan Ya Ragu-ragu Tidak 1. Apakah gel ini memiliki penampilan yang
menarik?
2. Apakah gel ini memiliki warna yang menarik? 3. Apakah gel ini mudah dituang dari kemasannya? 4. Apakah gel ini mudah dioleskan di kulit? 5. Apakah gel ini terlalu kental? 6. Apakah gel ini sudah cukup halus dan lembut
ketika dioleskan di kulit?
7. Apakah gel ini terasa lengket di kulit? 8. Secara umum, apakah sediaan ini cukup nyaman
digunakan di kulit sebagai gel sunscreen?
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
85
Lampiran 13. Hasil kuesioner subjective assessment Formula 1 No Pertanyaan Ya Ragu-ragu Tidak 1. Apakah gel ini memiliki penampilan yang
menarik? 76,67 % 23,33 % 0 %
2. Apakah gel ini memiliki warna yang menarik? 83,33 % 16,67 % 0 %3. Apakah gel ini mudah dituang dari kemasannya? 100 % 0 % 0 %4. Apakah gel ini mudah dioleskan di kulit? 100 % 0 % 0 %5. Apakah gel ini terlalu kental? 0 % 16,67 % 83,33 %6. Apakah gel ini sudah cukup halus dan lembut
ketika dioleskan di kulit? 93,33 % 6,67 % 0 %
7. Apakah gel ini terasa lengket di kulit? 20 % 10 % 70 %8. Secara umum, apakah sediaan ini cukup nyaman
digunakan di kulit sebagai gel sunscreen? 83,33 % 16,67 % 0 %
Formula a No Pertanyaan Ya Ragu-ragu Tidak 1. Apakah gel ini memiliki penampilan yang
menarik? 86,67 % 13,33 % 0 %
2. Apakah gel ini memiliki warna yang menarik? 90 % 10 % 0 %3. Apakah gel ini mudah dituang dari kemasannya? 100 % 0 % 0 %4. Apakah gel ini mudah dioleskan di kulit? 100 % 0 % 0 %5. Apakah gel ini terlalu kental? 0 % 10 % 90 %6. Apakah gel ini sudah cukup halus dan lembut
ketika dioleskan di kulit? 90 % 10 % 0 %
7. Apakah gel ini terasa lengket di kulit? 23,33 % 10 % 66,67 %8. Secara umum, apakah sediaan ini cukup nyaman
digunakan di kulit sebagai gel sunscreen? 86,67 % 13,33 % 0 %
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
86
Formula b No Pertanyaan Ya Ragu-ragu Tidak 1. Apakah gel ini memiliki penampilan yang
menarik? 83,33 % 16,67 % 0 %
2. Apakah gel ini memiliki warna yang menarik? 86,67 % 13,33 % 0 %3. Apakah gel ini mudah dituang dari kemasannya? 100 % 0 % 0 %4. Apakah gel ini mudah dioleskan di kulit? 100 % 0 % 0 %5. Apakah gel ini terlalu kental? 0 % 13,33 % 86,67 %6. Apakah gel ini sudah cukup halus dan lembut
ketika dioleskan di kulit? 90 % 10 % 0 %
7. Apakah gel ini terasa lengket di kulit? 23,33 % 13,33 % 63,33 %8. Secara umum, apakah sediaan ini cukup nyaman
digunakan di kulit sebagai gel sunscreen? 86,67 % 13,33 % 0 %
Formula ab No Pertanyaan Ya Ragu-ragu Tidak 1. Apakah gel ini memiliki penampilan yang
menarik? 83,33 % 16,67 % 0 %
2. Apakah gel ini memiliki warna yang menarik? 90 % 10 % 0 %3. Apakah gel ini mudah dituang dari kemasannya? 100 % 0 % 0 %4. Apakah gel ini mudah dioleskan di kulit? 100 % 0 % 0 %5. Apakah gel ini terlalu kental? 0 % 3,33 % 96,67 %6. Apakah gel ini sudah cukup halus dan lembut
ketika dioleskan di kulit? 93,33 % 6,67 % 0 %
7. Apakah gel ini terasa lengket di kulit? 16,67 % 10 % 73,33 %8. Secara umum, apakah sediaan ini cukup nyaman
digunakan di kulit sebagai gel sunscreen? 90 % 10 % 0 %
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
87
Lampiran 14. Dokumentasi
1. Serbuk teh hijau 2. Serbuk teh hitam
3. Proses maserasi serbuk teh hijau 4. Proses fraksinasi ekstrak teh hijau
5. Ekstrak kental polifenol teh hijau 6. Ekstrak kering polifenol teh hijau
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
88
7. Gel formula 1 8. Gel formula a
9. Gel Formula b 10. Gel formula ab
11. Uji daya sebar gel 12. Uji viskositas gel
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
89
BIOGRAFI PENULIS
Penulis yang mempunyai nama lengkap Francine Dona
Paramita dilahirkan di Semarang pada tanggal 03
Oktober 1986. Penulis terlahir dari pasangan Leonardus
Sudibyo dan Ambrosia Sri Yuli Praptiwi sebagai anak
kedua dari empat bersaudara.
Penulis telah menempuh pendidikan di TK Pedurungan
Semarang pada tahun 1990-1992, SDK Sang Timur
Semarang pada tahun 1992-1998, SLTP PL Domenico Savio Semarang pada
tahun 1998-2001, SMA Kolese Loyola Semarang pada tahun 2001-2004.
Kemudian penulis melanjutkan pendidikan sarjana di Fakultas Farmasi
Universitas Sanata Dharma Yogyakarta pada tahun 2004.
Semasa di bangku kuliah, penulis aktif dalam berbagai kegiatan
kemahasiswaan, antara lain Insadha (2005), Pekan Budaya (2006), Titrasi (2006),
BEMF Farmasi (2006), PPKM (2007), dan beberapa kegiatan kepanitiaan lainnya.
Penulis juga mempunyai pengalaman sebagai asisten praktikum Farmakognosi-
Fitokimia I (2007), Farmakognosi-Fitokimia II (2007), Formulasi Teknologi
Sediaan Solid (2007), dan Toksikologi Dasar (2007).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI