Pengaruh Logam Berat pada Malondialdehyde dan Konsentrasi Produk Protein Oksidasi Lanjutan: Fokus pada Arsenik, Kadmium, dan Merkuri

Iwan AflanieDepartemen Forensik, Fakultas Kedokteran, Lambung Mangkurat

Eko SuhartonoDepartemen Biokimia dan Kimia Kedokteran, Fakultas Kedokteran, Universitas Lambung Mangkurat, Banjarmasin, Indonesia. Email: ekoantioxidant@gmail.com

Abstrak Logam berat dan garamnya dianggap sebagai kelompok polutan lingkungan yang sangat penting, yang dalam jumlah kecil mungkin merupakan nutrisi penting yang dapat melindungi kesehatan Anda, namun dalam jumlah yang lebih besar menjadi beracun dan berbahaya bagi manusia. Salah satu mekanisme utama di balik toksisitas logam berat telah dikaitkan dengan stres oksidatif. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh Arsen (As), Kadmium (Cd), dan Merkuri (Hg) dari Malondialdehyde (MDA) dan Produk Protein Oksidasi Lanjutan (AOPP) konsentrasi in vitro. MDA dan tingkat AOPP meningkat selama paparan As, Cd, dan Hg. Selanjutnya tingkat MDA berkorelasi positif dengan tingkat AOPP. Dapat disimpulkan dari penelitian yang dipresentasikan bahwa Arsenik, Kadmium dan Merkuri menyebabkan peningkatan kadar MDA dan AOPP. Penelitian ini juga menunjukkan bahwa paparan Arsenik, Kadmium dan Merkuri dapat menyebabkan stres oksidatif dan peradangan.

Indeks - Arsen, AOPP, Kadmium, Malondialdehyde, Merkuri

I. PENDAHULUANToksikologi forensik adalah salah satu cabang dari ilmu forensik. Ilmu toksikologi adalah ilmu yang meneliti kerja dan efek berbahaya dari bahan kimia atau racun bagi mekanisme biologis dari organisme termasuk logam berat [1]. Logam berat termasuk arsenik, timbal, tembaga dan merkuri adalah racun tertua yang dikenal manusia, yang telah digunakan selama ribuan tahun [2,3].Arsenik adalah substansi nomor satu terbaru dalam Komprehensif, Lingkungan, Respon, Kompensasi dan Kewajiban Undang-Undang (CERCLA) Daftar Prioritas Zat Berbahaya yang diterbitkan oleh Badan Zat Beracun dan Registrasi Penyakit (ATSDR) (MF Hughes, 2011). Pada Abad Pertengahan, arsenik menjadi terkenal sebagai agen pembunuh dan bunuh diri yang efektif, baik karena frekuensi penggunaannya dan karena keterlibatannya dalam banyak pembunuhan terhadap orang-orang terkenal [4]. Bahkan, arsenik sering disebut sebagai '' raja racun '' dan '' racun para raja '' karena potensinya, dimana itu bisa diberikan, terutama dengan maksud menghapus anggota penguasa selama Abad Pertengahan dan Renaissance [5]. Sebagai contoh, tercatat bahwa arsenik merupakan salah satu racun penyebab kematian Napoleon Bonaparte pada tahun 1851, yang beberapa teori konspirasi mengklaim bahwa yang terjadi adalah pembunuhan politik [6]. Di Indonesia keracunan arsenik terjadi pada kematian munir pada tahun 2004 [4]. Arsenik, sebuah metaloid yang terbentuk secara alami, menjadi dua puluh unsur paling melimpah di kerak bumi dan merupakan komponen dari lebih dari 245 mineral. Bentuk anorganik sebagian besar terdiri dari arsenit dan arsenat yang merupakan senyawa beracun bagi kesehatan manusia. Manusia terpapar arsenik terutama dari udara, makanan dan air. Minum air yang mungkin terkontaminasi oleh arsenik, pestisida arsenik, deposit mineral alami atau bahan kimia arsenik yang dijual secara tidak benar. Namun, kadar arsenik tinggi dalam air minum adalah penyebab utama keracunan arsenik di dunia [7].Selain arsenik, logam berat lain yang bersifat racun bagi manusia adalah kadmium dan merkuri [8]. Kadmium merupakan salah satu zat yang paling beracun di lingkungan, yang dapat menyebabkan efek toksik pada beberapa sistem organ dan memiliki paruh-waktu yang panjang. Logam ini digunakan dalam banyak pekerjaan, termasuk manufaktur semikonduktor, pengelasan, solder, keramik dan lukisan [9]. Setelah diserap, Cd secara ireversibel terakumulasi dalam tubuh manusia, terutama di dalam ginjal dan organ vital lainnya seperti paru-paru atau hati [10]. Mercury (Hg) merupakan logam yang sangat beracun yang menghasilkan berbagai efek merugikan pada neurologis, ginjal, pernapasan, kekebalan tubuh, dermatologis, reproduksi dan gangguan perkembangan [11]. Efek industri yang luas terkait pada manusia dan hewan biosistem telah didokumentasikan dengan baik dan eksposur umum untuk bahan kimia ini akitof secara biologis telah terbukti diperburuk melalui air dan makanan yang terkontaminasi [12].Toksisitas dari ketiga logam ini sangat banyak dilaporkan dalam literatur. Salah satu mekanisme utama di balik toksisitas logam berat telah dikaitkan dengan stres oksidatif. Dalam studi yang mendalam dalam beberapa dekade terakhir telah menunjukkan logam seperti besi, tembaga, kadmium, merkuri, nikel, timah dan arsenik memiliki kemampuan untuk reaktivasi spesies oksigen (ROS), yang mengakibatkan kerusakan sel seperti penipisan aktivitas enzim, kerusakan lipid bilayer dan DNA [13]. Banyak penelitian menegaskan generasi berbagai jenis ROS selama metabolisme arsenik dalam sel [14]. Stres oksidatif telah dikaitkan dengan perkembangan penyakit terkait arsenik termasuk kanker [8]. Dalam studi terbaru oleh E. Suhartono et al, itu menunjukkan kadmium yang menyebabkan stres oksidatif pada ginjal [15]. Beberapa in vivo dan in vitro menunjukkan bahwa paparan hewan percobaan untuk bentuk anorganik atau organik merkuri disertai dengan induksi stres oksidatif [14].Produksi ROS selama keracunan logam berat dapat bereaksi dengan lipid, protein, pigmen dan asam nukleat, yang menyebabkan peroksidasi lipid. MDA, produk sekunder terkenal dari peroksidasi lipid setelah terpapar ROS [16]. Selain MDA, ROS terlibat dalam produksi produk protein oksidasi lanjutan (AOPP) [9]. AOPP adalah dityrosine yang mengandung produk silang dari protein terkait, definisi yang penting karena melibatkan protein agregat yang terbentuk oleh ikatan disulfida sebagai akibat dari stres oksidatif [15]. Penelitian sebelumnya oleh H.V. Patel et al dalam arsenik terkena tikus, AOPP dan PCO meningkat signifikan di kedua jaringan pada penelitian dibandingkan dengan kontrol [17]. Penelitian lain menunjukkan peningkatan dosis tergantung produksi MDA pada payudara dan karsinoma paru, dengan peningkatan dosis arsenik trioksida [18]. Paparan Cd menyebabkan peningkatan tingkat AOPP pada ginjal tikus dan meningkatkan kadar MDA pada ovarium tikus [15,16]. Namun ada beberapa penelitian tentang mekanisme stres oksidatif dalam darah yang terkena logam berat seperti arsen, kadmium dan merkuri.Karena produk protein oksidasi lanjutan tidak hanya sebagai penanda stres oksidatif, tetapi juga bertindak sebagai mediator inflamasi, dan MDA bertindak sebagai penanda untuk kerusakan sel. Dengan demikian penelitian kami bertujuan untuk mengetahui pengaruh arsen, kadmium dan merkuri in vitro oleh menentukan tingkat AOPP dan MDA.

II. BAHAN DAN METODE

A. Persiapan Sampel DarahSampel darah dikumpulkan dalam kondisi aseptik untuk analisis MDA dan AOPP tingkat setelah paparan logam berat. Darah dikumpulkan tanpa antikoagulan apapun dan dibiarkan menggumpal selama 1 jam. Sampel bergumpal disentrifugasi pada 3500 rpm 30 menit pada suhu 4C (dalam centrifuge dingin). Serum dipisahkan dan disimpan pada 20C untuk analisis lebih lanjut.Kemudian darah dipersiapkan untuk paparan arsenik, kadmium dan merkuri. Sampel dibagi menjadi tiga kelompok perlakuan dengan konsentrasi logam yang berbeda. Untuk arsen dan merkuri konsentrasi adalah 0, 0,001, dan 0,002 mg / l, sedangkan untuk kadmium pada konsentrasi 0, 0,003 dan 0,006 mg / l.

B. Penetapan Malondialdehyde (MDA)MDA diukur dengan metode Buege dan Aust [19]. Pertama, serum diambil dari sampel darah. Kemudian tambahkan 1 mL aquadest kemudian masukkan ke dalam pendorf. Setelah itu tambahkan 100% TCA 100 uL, 1% Na-Thio 100 uL dan 250 uL dari 1 N HCl. Larutan dipanaskan pada suhu 1000C selama 20 menit. Kemudian disentrifugasi 3500 rpm selama 10 menit. Supernatan diambil. Setelah itu, tambahkan air suling sampai 3500 uL. Hasilnya dibaca oleh spektrofotometer dengan panjang gelombang maksimum 500-600 nm, pada hari 0, 2, 4, dan 6.

C. Penetapan Produk Protein Oksidasi Lanjutan (AOPP)Pengukuran AOPP Serum dibuat dengan metode spektrofotometri seperti tersebut oleh Witko-SARSAT et al [20].D. Analisis StatistikData MDA dan tingkat AOPP ditampilkan dalam grafik linear. Selanjutnya untuk menganalisis hubungan antara kadar AOPP dan MDA di setiap paparan logam, menggunakan korelasi linear. Untuk menganalisis data dan menggambar grafik, menggunakan Microsoft Excell 2007.

III. HASIL

Konsentrasi MDA dalam serum, dalam kaitannya dengan logam berat (As, Cd, dan Hg) konsentrasi dan waktu disajikan dalam tiga angka (Angka 1 (a), (b), dan (c)).

Gambar 1. Kadar MDA setelah paparan dengan konsentrasi dan waktu yang berbeda (a) As (b) Cd (c) Hg

Gambar 1 (a), (b), dan (c) menunjukkan bahwa paparan logam berat dapat meningkatkan kadar MDA. Gambar 1 (a), (b), dan (c) juga menunjukkan bahwa peningkatan konsentrasi logam berat dapat meningkatkan kadar MDA. Gambar 2 (a), (b), dan (c) menunjukkan kadar AOPP dalam kaitannya dengan konsentrasi dan waktu dari logam berat (As, Cd, dan Hg).

Gambar 2. Kadar AOPP setelah paparan dengan konstentrasi dan waktu yang berbeda (a) As (b) Cd (c) Hg

Mirip dengan MDA, kadar AOPP meningkat seiring dengan meningkatnya waktu dan konsentrasi logam berat (As, Cd, dan Hg).Korelasi antara kadar MDA dan AOPP selama paparan logam berat (As, Cd, dan Hg) dalam konsentrasi yang berbeda disajikan dalam tabel 1.

TABEL I: HUBUNGAN MDA DAN AOPP SELAMA PAPARAN OLEH ARSEN, KADMIUM DAN MERKURI

Logam BeratR2

Arsen (As)0,87

Kadmium (Cd)Merkuri (Hg)0,810,79

Pada tabel 1 dapat dilihat bahwa, ada korelasi positif antara kadar MDA dan AOPP selama paparan As, Cd, dan Hg. Hal ini berarti peningkatan kadar MDA diikuti dengan meningkatnya kadar AOPP.

IV. DISKUSIToksisitas yang diinduksi logam sudah sangat banyak dijelaskan pada berbagai literatur. Salah satu mekanisme utama di balik toksisitas logam berat adalah berkaitan dengan stres oksidatif [13]. Stres oksidatif merupakan aspek yang tidak dapat dihindari dari kehidupan aerobik. Stres oksidatif adalah hasil dari ketidakseimbangan antara produksi reaktif oksigen species (ROS) dan pertahanan terhadap antioksidan pada organisme hidup [21].Dalam penelitian ini ada tiga logam berat yang digunakan untuk menentukan kadar MDA sebagai penanda untuk stres oksidatif yang disebabkan oleh logam berat. Tiga logam berat tersebut adalah arsen (As), Cadmium (Cd) dan merkuri (Hg).Arsenik merupakan kontaminan penting yang terdapat dalam media lingkungan (udara, tanah, air) yang bersumber dari sumber alami dan dari aktivitas antropogenik. Utamanya manusia terpapar dengan spesies arsenik anorganik (arsenit, AsO33-, dan arsenat, AsO43-) [22]. Konsumsi air minum yang tercemar dengan emisi industri adalah rute utama paparan arsenik. Kebanyakan arsenik yang tertelan dan terinhalasi diabsorpsi dengan baik melalui saluran pencernaan dan paru-paru menuju ke dalam aliran darah. Kemudian, didistribusikan dan dimetabolisme pada banyak organ diantaranya hati, ginjal, darah, kulit, jaringan adiposa, hati, otot rangka dan pankreas [17].Banyak penelitian mengkonfirmasi pembentukan berbagai jenis ROS selama metabolisme arsenik dalam sel [14]. Stres oksidatif terkait dengan perkembangan penyakit yang terkait arsenik, contohnya kanker. Selain ROS, reaktif nitrogen species (RNS) juga diduga terlibat langsung dalam kerusakan oksidatif lipid, protein dan DNA dalam sel yang terpapar arsenik. Banyak studi terkini telah memberikan bukti eksperimental bahwa proses pembentukan radikal bebas yang diinduksi arsenik ini dapat menyebabkan kerusakan dan kematian sel melalui aktivasi jalur sinyal yang sensitif terhadap oksidatif [23]. Arsenik memediasi pembentukan anion radikal superoksida (O2-), oksigen singlet (1O2), radikal peroxyl (ROO ), nitrat oksida (NO ), hidrogen peroksida (H2O2), radikal peroksil dimethylarsinic ([(CH3) 2AsOO]) dan juga radikal dimethylarsinic [(CH3) 2As ]. Mekanisme sebenarnya yang bertanggung jawab untuk pembentukan dari semua reaktif spesies ini belum jelas, namun beberapa penelitian menduga adalah terjadi pembentukan intermediary Arsine spesies [8].Logam berat kedua yang digunakan pada penelitian ini adalah Cd. Pajanan Cd telah dikaitkan dengan terjadinya peningkatan stres oksidatif. Ada mekanisme menarik yang menjelaskan peran tidak langsung dari Cd pada pembentukan radikal bebas yang pernah diterbitkan beberapa tahun yang lalu [13]. Cd itu sendiri tidak dapat menghasilkan radikal bebas secara langsung, namun proses pembentukan langsung ROS dan RNS melibatkan radikal superoksida, radikal hidroksil dan nitrat oksida sudah pernah dilaporkan [24].Beberapa percobaan juga mengkonfirmasi pembentukan hidrogen peroksida non-radikal yang dengan sendirinya pada gilirannya mungkin sumber signifikan dari radikal melalui proses Fenton chemistry. Cd dapat mengaktifkan protein kinase seluler (protein kinase C) yang mengakibatkan peningkatan fosforilasi berbagai faktor transkripsi yang pada gilirannya akan menyebabkan aktivasi ekspresi gen target [25,26]. Dalam mekanisme ini diduga bahwa Cd dapat menggantikan besi dan tembaga pada berbagai protein sitoplasma dan membran (misalnya feritin, apoferritin), sehingga meningkatkan jumlah ion tembaga dan besi bebas atau chelated berperan dalam stres oksidatif. Pergantian dari tembaga dan besi dengan Cd dapat menjelaskan peningkatan toksisitas yang diinduksi Cd, karena tembaga yang terlepas dari tempat berikatannya, mampu mengkatalisis pemecahan peroksida hidrogen melalui reaksi Fenton. Hasil ini didukung oleh temuan terbaru oleh Watjen dan Beyersmann (2004). Pergantian dari tembaga dan besi dengan Cd dapat menjelaskan peningkatan toksisitas yang diinduksi kadmium dikarenakan tembaga yang terlepas dari tempat berikatannya, mampu mengkatalisis pemecahan peroksida hidrogen melalui reaksi Fenton [27].Logam berat ketiga yang digunakan pada penelitian ini adalah merkuri (Hg). Merkuri merupakan logam transisi umum yang diberi julukan quicksilver (raksa) karena karakteristik cairan dan peraknya. Logam ini diberi simbol Hg, yang berasal dari istilah Latin, hydrargyrum yang berarti ''perak cair. Logam ini terdapat dalam lingkungan bersumber dari faktor alam (penguapan permukaan bumi dan letusan gunung berapi) dan juga sumber antropogenik (emisi dari pembangkit listrik batu bara dan insinerator) [28]. Beberapa penelitian in vivo dan in vitro menunjukkan bahwa paparan hewan percobaan terhadap bentuk merkuri anorganik atau organik akan diikuti dengan induksi stres oksidatif. Afinitas yang tinggi dari ion merkuri untuk mengikat tiol secara alami dimana didapatkan bukti sirkumstasial setelah terjadi berkurangnya tiol intraseluler (terutama glutathione) baik secara langsung maupun tidak langsung akan menyebabkan, atau paling tidak menjadi predisposisi terjadinya stres oksidatif pada sel tubulus proksimal. Lund et al. telah menunjukkan bahwa pemberian merkuri yaitu Hg (II) pada tikus dapat menyebabkan deplesi glutation dan peningkatan pembentukan H2O2 dan peroksidasi lipid pada mitokondria ginjal [14].Berdasarkan penjelasan di atas, tiga logam berat yang penulis gunakan dalam penelitian ini diketahui dapat menyebabkan pembentukan ROS, yang menghasilkan stres oksidatif. Akumulasi ROS seperti radikal hidroksil (HO), hidrogen peroksida (H2O2) dan singlet oksigen (1O2) dapat mengganggu keseimbangan oksidan-antioksidan . spesies-spesies oksigen aktif ini bereaksi dengan bio-molekul diantaranya lipid, protein dan DNA selanjutnya merusak sifat fungsional mereka yang pada gilirannya akan merubah aktivitas normal sel, jaringan, organ dan akhirnya organisme yang bermanifestasi sebagai gejala penyakit, dan kondisi patologis lainnya [29]. Jika ROS bereaksi dengan bio-molekul seperti lipid, protein, asam nukleat, ROS dapat menyebabkan peroksidasi lipid, denaturasi protein dan mutasi DNA [30]. Jika ROS bereaksi dengan lipid, maka proses ini disebut sebagai peroksidasi lipid. Peroksidasi lipid adalah mekanisme yang sudah banyak dikenal sebagai mekanisme cedera seluler pada hewan dan digunakan sebagai indikator untuk stres oksidatif pada sel dan jaringan. Peroksidasi lipid mendegradasi asam lemak polysaturated dari membran sel yang berakibat pada gangguan membran. Penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa kadmium dapat menyebabkan perubahan histopatologi dan peroksidasi lipid di hati dan ginjal tikus. Paparan unsur merkuri menyebabkan peningkatan peroksidasi lipid pada eritrosit manusia [31]. Flora et al. (2002) melaporkan bahwa GaAs menginduksi peroksidasi lipid dalam darah, hati dan ginjal tikus [32].Keseluruhan proses peroksidasi lipid terdiri dari tiga tahap yaitu: inisiasi, propagasi dan terminasi. Inisiasi, merupakan tahap pertama, melibatkan serangan dari ROS yang mampu mengabstraksi/merusak atom hidrogen dari gugus metilen pada lipid. Adanya ikatan rangkap yang menguatkan kelompok metilen akan melemahkan ikatan antara karbon dan hidrogen sehingga hidrogen dapat lebih mudah dilepas dari molekul asam lemak. Asam lemak tanpa ikatan rangkap atau hanya dengan satu ikatan rangkap dapat mengalami oksidasi tetapi bukan rangkaian proses peroksidasi lipid [15]. Proses abstraksi hidrogen menyebabkan asam lemak yang memiliki satu elektron yang tidak berpasangan. Ketika oksigen hadir pada jaringan sekitarnya, asam lemak radikal dapat bereaksi dengan oksigen tersebut dan akan terjadi pembentukan radikal lipo-peroxyl (ROO ). Setelah terbentuk, radikal lipo-peroxyl (ROO ) dapat disusun kembali melalui reaksi siklik untuk endoperoxides (prekursor malondialdehid) dimana produk akhir dari proses peroksidasi ini akan menjadi MDA [30].MDA adalah molekul polar dengan massa molekul kecil. MDA dapat diukur pada sampel biologis yang berbeda dan, meskipun bukan satu-satunya indikator stres oksidatif, sering digunakan karena prosedur yang sederhana [33]. Dalam penelitian ini, penulis meneliti efek stres oksidatif dalam serum in vitro yang dipaparkan dengan As, Cd, Hg dengan mengukur kadar MDA dan mndapatkan hasil kadar MDA meningkat tergantung dosis dan waktu di dalam serum. Hasil ini menunjukkan bahwa As, Cd, dan Hg dapat memicu stres oksidatif dalam serum in vitro [33]. Stres oksidatif menyebabkan pembentukan produk glycoxidation, diantaranya advanced glycation endproducts (AGEs - di antaranya adalah N- (karboksimetil) lisin (CML) adalah yang paling dikenal), dan advanced oxidation protein products (AOPPs). AOPPs dapat dibentuk secara in vitro memlalui memaparkan asam hipoklorit ke albumin serum. Secara in vivo, AOPPs plasma terutama dibawa oleh albumin dan konsentrasi mereka sangat terkait dengan kadar dityrosine [34]. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa tiga logam berat yaitu As, Cd, dan Hg menginduksi pembentukan AOPPs. Selain itu ada korelasi positif antara kadar MDA dan AOPP terhadap paparan As, Cd, dan Hg. Artinya, selama terjadi paparan As, Cd, dan Hg akan meningkatkan kadar MDA dan AOPP.AOPP adalah dityrosine yang mengandung produk protein cross linked, definisi ini penting karena akan mengeklsusi sebagai protein agregat yang terbentuk oleh ikatan disulfida sebagai akibat dari stres oksidatif. Oleh karena itu, AOPP adalah penanda stres oksidatif yang baik, yang dihasilkan di bawah keadaan stres oksidatif dan karbonil dan meningkatkan aktivitas inflamasi secara keseluruhan [15].Pengukuran AOPPs dapat mencerminkan pembentukan reaktif spesies dan tingkat oksidasi protein [35]. Pernah dilaporkan bahwa AOPPs sebenarnya dihasilkan oleh pola oksidasi yang berbeda yang menyebabkan produksi hidrogen peroksida atau nitrat oksida [36]. Nitrat oksida dapat berinteraksi dengan radikal anion superoksida membentuk reaktif nitrogen spesies seperti peroxynitrite. reaktif nitrogen species ini secara sekunder memicu reaksi penting lain seperti nitrosasi, oksidasi atau nitrasi, yang menyebabkan fungsi sel terganggu dan meningkatnya reaksi inflamasi [37,38]. AOPPs dianggap sebagai penanda stres oksidatif serta penanda aktivasi neutrofil pada penyakit kronis [39]. Hal tersebut dibuktikan bahwa oksidan dari neutrofil yang diklorinasi dapat menyebabkan stres oksidatif, terutama oksidasi protein. Selain peningkatan pembentukan AOPPs, berkurangnya removal / detoksifikasi AOPPs juga berperan menyebabkan stres [34].AOPPs diyakini lebih erat terkait dengan proses peradangan. Menurut penelitian sebelumnya AOPP mungkin merepresentasikan sebuah mediator proinflamasi kelas baru yang bertindak sebagai mediator stres oksidatif dan monosit respiratory burst. Walaupun begitu monosit, pada saat yang bersamaan, merupakan target seluler elektif dari AOPP dan berpotensi sebagai sumber oksidan yang memicu AOPP [20]. Didapatkan korelasi kuat antara AOPP dan neopterin, penanda aktivasi monosit. Hubungan selektif antara AOPP dan aktivasi monosit ini selanjutnya terbentuk dengan korelasi positif antara AOPP dan TNF- dan reseptor larutnya dan, pada tingkat yang lebih rendah, dengan IL-1Ra [39].

V. KESIMPULANDapat disimpulkan dari penelitian yang telah dipresentasikan di atas bahwa Arsenik, Kadmium dan Mercury menyebabkan peningkatan kadar MDA dan AOPP. Penelitian ini juga menunjukkan bahwa paparan Arsenik, Kadmium dan Mercury dapat menyebabkan stres oksidatif dan proses peradangan.

UCAPAN TERIMA KASIHPenulis berterimakasih kepada Fakultas Kedokteran Universitas Lambung Mangkurat Banjarmasin, Indonesia atas dukungan finansialnya dalam proses penelitian ini.

DAFTAR PUSTAKAM.A.G. Wirasuta, Analisis toksikologi forensik dan interpretasi temuan analisis, Indonesian Journal of Legal and Forensic Sciences, vol. 1, no. 1, pp. 47-55, 2008.A. Mishra, and Shukla SK, Heavy metal toxicity: a blind evil, J Forensic Res, vol.5, no. 2, 2014.K. Neeti, and T. Prakash, Effects of heavy metal poisoning during pregnancy, Int. Res. J. Environment Sci, Vol. 2, no. 1, pp. 88-92, January 2013.M.F. Hughes, B.D. Beck, Yu Chen, A.S. Lewis, and D.J. Thomas, Arsenic exposure and toxicology: a historical perspective, Toxicological Sciences, vol. 123, no. 2, pp. 305332, 2011.Vahidnia A, Van der Voet G.B, and De Wolff, F.A, Arsenic neurotoxicitya review, Hum. Exp. Toxicol, vol. 26, pp. 823832, 2007.Cullen, W. R, Is Arsenic an Aphrodisiac? The Sociochemistry of an Element, Royal Society of Chemistry, Cambridge, U.K, 2008.D.N. Guha Mazumder, Chronic arsenic toxicity & human health, Indian J Med Res, vol. 128, pp 436-447, October 2008.K. Jornova, and M. Valko, Advances in metal-induced oxidative stress and human disease, Toxicology, vol. 283, pp. 65-87, 2011.A. H. Husna, E. A. Ramadhani, Eva D. T., A. F. Yulita, and E. Suhartono, The role formation of methylglyoxal, carbonyl compound, hydrogen peroxide and advance oxidation protein product induced cadmium in ovarian rat, International Journal of Chemical Engineering and Applications, Vol. 5, No. 4, August 2014.E. Suhartono, Triawanti, A.S. Leksono, M.S. Djati, The role of cadmium in protein glycation by glucose: formation of methylglyoxal and hydrogen peroxide in vitro, JOMB, vol. 3, no. 1, pp. 59-62, March 2014. Risher, J.F. and S.N. Amler, Mercury exposure: Evaluation and intervention, the inappropriate use of chelating agents in diagnosis and treatment of putative mercury poisoning, Neurotoxicol, vol. 26, no. 24, pp. 691-699, 2005.H.F. Al-azzawie, A. Umran, and N.H. Hyader, Oxidative stress, antioxidant status and DNA damage in a mercury exposure workers, Br. J. Pharmacol. Toxicol, vol. 4, no. 3, pp.80-88, 2013.S.J.S. Flora, M. Mittal and A. Mehta, Heavy metal induced oxidative stress and its possible reversal by chelation therapy, Indian J Med Res, vol. 128, pp. 501-523, October 2008. M. Valko, H. Morris, and M.T.D Cronin,Metals, toxicity and oxidative damage, Current Medicinal Chemistry, vol. 12, no. 10, 2005. Eko Suhartono, Triawanti, Amin Setyo Leksono, and M. Sasmito Djati, Oxidative Stress and Kidney Glycation in Rats Exposed Cadmium, International Journal of Chemical Engineering and Applications, Vol. 5, No. 6, December 2014.J. A. Tribowo, M. H. Arizal, M. Nashrullah, A. R. Aditama, and D. G. Utama, Oxidative stress of cadmium-induced ovarian rat toxicity, IJCEA, vol. 5, no. 3, June 2014.H.V. Patel, and K. Kalia, Role of hepatic and pancreatic oxidative stress in arsenic induced diabetic conditions in wistar rats, Journal of Environmental Biology, vol. 34, pp. 231-236, March 2013.G.Evans B, Tchounwou P.B, Cohly H.H.P, Cytotoxicity and proliferation studies with arsenic in established human cell lines: Keratinocytes, melanocytes, dendritic cells, dermal fibroblasts, microvascular endothethial cells, monocytes and T-cells, Int. J. Mol. Sci, vol. 4, pp. 13-21, 2003.E. Suhartono, Triawanti, A. Yunanto, R. T. Firdaus, and Iskandar, Chronic cadmium hepatooxidative in rats: Treatment with Haruan fish (Channa striata) extract. APCBEE Procedia, vol. 5, pp. 441-445, 2013.V. W. Sarsat, M. Friedlander, T. N. Khoa, C. C. Blandin, A. T. Nguyen, et al, Advanced oxidation protein products as novel mediators on inflammation and monocyte activation in chronic renal failure, J Immunol, vol. 161, pp. 2524-2532, 1998.M. Sevcikova, H. Modra, and A. Slaninova Z, Svobodova Metals as a cause of oxidative stress in fish: a review, Veterinarni Medicina, vol. 56, no. 11, pp. 537546, 2011.U.S. Wolz, H.H. Dieter, D. Klein, and K. Schneider, Oral exposure to inorganic arsenic: evaluation of its carcinogenic and non-carcinogenic effects, Critical Reviews in Toxicology, vol. 39, no. 4, pp. 271298, 2009.Roy A, Manna P, Sil P.C, Prophylactic role of taurine on arsenic mediated oxidative renal dysfunction via MAPKs/NF-B and mitochondria dependent pathways, Free Radic. Res, vol. 43, pp. 9951007, 2009.M. Valko, D. Leibfritz, J. Moncol, M. T. D. Cronin, M. Mazur, and J. Telser, Free radicals and antioxidants in normal physiological function and human disease, IJBCB, vol. 39, pp. 44-84, 2007.R. D. Kini, Y. Tripathi, C. V. Raghuveer, S. A. R. Pai, C. Ramaswamy, and P. Kamath, Role of vitamin C as an antioxidant in cadmium chloride induced testicular damage, IJABPT, vol. 2, no. 3, pp. 484-488, July-Sept 2011.S. Vestena, J. Cambraia, C. Ribeiro, J. A. Oliveira, and M. A. Oliva, Cadmium-induced oxidative stress and antioxidative response in water hyacinth and salvinia, Braz. J. Plant Physiol, vol. 23, no. 2, pp. 131-139, 2011.K. Tremellen, Oxidative stress and male infertility-a clinical perspective, Human Reproduction Update, vol. 14, no. 3, pp. 243258, 2008.M. Farina, D.S. Avila, J.B. Teixeira da Rocha, and M. Aschner, Metals, oxidative stress and neurodegeneration: A focus on iron, manganese and mercury, Neurochemistry International, December 2012.Manoj K, and Padhy P.K, Oxidative stress and heavy metals: an appraisal with reference to environmental biology, Int. Res. J. Biological Sci, Vol. 2, no. 10, pp. 91-101, October 2013.A.A. Morsy, K.H.A. Salama, H.A. Kamel, and M.M.F. Mansour, Effect of heavy metals on plasma membrane lipids and antioxidant enzymes of Zygophyllum species, Eurasia J Biosci, vol. 6, pp. 1-10, 2012.S. Faix, Z. Faixova, K. Boldizarova, and P. Javorsky, The effect of long-term high heavy metal intake on lipid peroxidation of gastrointestinal tissue in sheep, Vet. Med.Czech, vol. 50, no. 9, pp. 401405, 2005.L. Wang, Z.R. Xu, X.Y. Jia, J.F. Jiang and X.Y. Han, Effects of arsenic (AsIII) on lipid peroxidation, glutathione content and antioxidant enzymes in growing pigs, J. Biol. Chem, December 2005. J. Suran, M. Prisc, D. Rasic, E. Srebocan, and A.P. Crnic, Malondialdehyde and heavy metal concentrations in tissues of wild boar (Sus scrofa L.) from central Croatia, Journal of Environmental Science and Health, Part B, vol. 48, pp. 147152, 2013.J.Z. Jagiello, M.P. Simon, K. Simon, and M. Warwas, Advanced oxidation protein products and inflammatory markers in liver cirrhosis: a comparison between alcohol-related and HCV-related cirrhosis, ABP, vol. 58, no. 1, 2011.Witko-Sarsat V, Friedlander M, Capelliere-Blandin C, Nguyen-Khoa T, Nguyen AT, et al, Advanced oxidation protein products as a novel marker of oxidative stress in uremia. Kidney Int vol. 49, pp. 13041313, 1996.Servettaz, A, Guilpain, P, Goulvestre C, Chreau C, Hercend C, et al, Radical oxygen species production induced by advanced oxidation protein products predicts clinical evolution and response to treatment in systemic sclerosis. Annals of The Rheumatic Diseases, Vol.66, No.9, September 2007.Friedman, S.L, Mechanisms of hepatic fibrogenesis, Gastroenterology, Vol.134, No.6, pp. 1655-1669, May 2008.Iwakiri, Y, and Groszmann, R.J, Vascular endothelial dysfunction in cirrhosis, Journal of Hepatology, Vol.46, No.5, pp. 927-934, May 2007.Witko-Sarsat, V, Gausson V, Nguyen A, Touam M, Dreke T, et al, AOPP-induced activation of human neutrophil and monocyte oxidative metabolism, a potential target for N-acetylcysteine treatment in dialysis patients. Kidney International, Vol.64, No.1, pp. 82-91, July 2003.

Iwan Aflanie lahir di Banjarmasin, Kalimantan Selatan, Indonesia, pada bulan September 1973, menerima gelar dokter pada tahun 1999 dari Universitas Lambung Mangkurat, Banjarbaru, Indonesia, menerima gelar master dan spesialis forensik pada tahun 2007 dan 2008 dari Universitas Gadjah Mada pada tahun 2007, juga menerima gelar sarjana hukum dari STIHSA Banjarmasin pada tahun 2014 Saat ini ia adalah bekerja sebagai dokter forensik di Rumah Sakit Umum Ulin banjarmasin. Eko Suhartono lahir di Surabaya, Indonesia, pada bulan September 1968 ,menerima Drs. dan gelar M.Sc pada tahun 1991 dan 1998 dari Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta, Indonesia. Saat ini sedang menjalani pendidikan program pascasarjana ilmu lingkungan dan teknologi di Universitas Brawijaya, Malang, Indonesia. Penelitiannya terutama difokuskan pada radikal bebas dan produk antioksidan alami, Ekotoksikologi.