penetapan kadar steroid pada daun tanaman …repository.unair.ac.id/10084/2/binder1.pdf · pada...
TRANSCRIPT
SK R IPS I :
M IMRON
PENETAPAN KADAR STEROID PADA DAUN TANAMAN SOLANUM WRIGHTII BENTH
DALAM BERBAGAI INTERVAL WAKTU
M l L l kPFkKl s r *k • •
UNIVERS1TAS AIRLANGGA’
S U R A \
FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS AIRLANGGA
S U R A B A Y A1991
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
PENETAPAN KADAR STEROID
PADA DAUN TANAMAN SOLANUM WRIGHTII BENTH
DALAM BERBAGAI INTERVAL WAKTU
SKRIPSI
DIBUAT UNTUK MEMENUHI SYARAT MENCAPAI GELAR
SARJANA FARMASI PADA FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS AIRLANGGA
1991
ol eh
M. IMRON05851075?
Disetujui oleh pembimbing
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
KATA P*^ GAN TAR
Dengan memanjatkan puji syukur kehadirat Allah SWT
atas rahmat.dan hidayahNya yang telah dianugerahkan se-
hingga penelitian dan penulisan naskah skripsi in i , seba-
gai syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fa-
kultas Farmasi universitas Airlangga dapat kami se lesa i-
kan.
Penelitian yang kami lakukan masih sangat terbatas
mengingat kemampuan kami sendiri dan fa s il ita s yang ada.
Namun harapan kami semoga dari penelitian yang sangat se-
derhana in i , membawa manfaat bagi kepentingan masyarakat
luas pada umumnya dan Ilmu Kefarmasian di Indonesia pada
khususnya.
Untuk itu pada kesempatan in i kami sampaikan terima
kasih yang setulus-tulusnya kepada ;
- Bapak DR. Noor Cholies Z. dan Bapak DR. Gunawan Indra-
yanto yang telah meluangkan waktunya untuk membimbing
dengan penuh kesabaran dan kesungguhan hati serta membe
rikan saran, pengarahan dan bantuan moril maupun mate-
r i i l sehingga dapat tereelesaikan tugas akhir in i .
- Ketua jurusan B iologi Farmasi dan Kepala Laboratorium
Fitokomia, yang telah memberikan fa s il ita s untuk keper-
luan penelitian .
- Kepala Kebun Raya Cabang purwodadi Pasuruan yang telah
memberikan bantuan tanaman solanum w righ tii Benth seba-
gai bahan penelitian .
i
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
- Bapak DR. M. Zainuadin, Kepala Laboratoriurn Instrumen
yang telah menyediakan fa s il ita s selarna penelitian .
- Ayah, ibu serta saudaraku, yang telah memberikan dukun£
an moril maupun m ateriil selama menyelesaikan pendidik-
an.
- Rekan-rekan mahasiswa serta semua pihak yang tidak da-
pat saya sebutkan eatu persatu, yang telah memberikan
bantuan dan dorongan eehingga tugas akhir saya in i da-
pat terselesaikan.
Semoga amal balk yang telah diberikan kepada kami
akan mendapatkan balasan yang berlipat dari Allah SWT.
Aniien.
Surabaya, Desember 1990
Penyusun
i i
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
DAFTAR ISI
KATA PENGANTAR ................................................................. i
DAFTAR ISI ........................................................................ i i i
DAFTAR GAMBAR .................................................................. v i i
DAFTAR TABEL.................................................................... xi
DAFTAR LAMP I RAN ...............................................................x i i i
BAB I . PENDAHULUAN . . . . . .............................................. 1
BAB I I . TINJAUAN PUSTAKA .............................................. 6
1. Tinjauan umum tanaman Solanum . ............... 6
2. Solanum w rightii Benth .............................. 6
3. Steroid ......................................................... 7
3*1• Tinjauan tentang steroid ............. . 7
3*2* Biosintesa s t e r o id ......... •••••••••• 8
3*3. Cara penetapan kadar steroid ......... 9
Solasodina • . . . . ........................................ 10
if.1. S ifa t fis ik a - kimia solasodina . . . 10
4*2. Biosintesa so lasod in a ............... .. 11
5. 'Tinjauan tentang stero l ............................ 11
6. K lo ro fil ....................................................... 15
6. 1 . Ti-njauan tentang k lo ro fil .•••••••• 15
6.2. Cara penetapan kadar k lo ro f i l ........ 16
7. Kromatografi Lapisan Tipis ...................... 17
8. Tinjauan tentang Densitometri . . . . . . . . . . 19
8.1. Analisa k u a lita tif dengan Densitometri ................................... 21
Hal am an
i i i
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
8.2. Analisa kuantitatif dengan Densi -tometri .............................................. 21
BAB I I I . BAHAN, ALAT DAN METODE KERJA ...................... .....23
1 . Banan ..................................................... ...
1.1. Bahan penelitian ............................ .....23
1.2. Banan kiuiia . . . . . ...............23
2. A la t-a la t ...............* .............. , ............. 23
3. Cara kerja ...................... . . . . . .................. 24
3.1. Penyiapan bahan penelitian 24
3.2. Cara ekstraksi ......................................24
3.3 . Penetapan susut pengei*ingan ...............25
3 .4 . penetapan kadar k lo ro fil ............... .....26
3.5# U ji K u a lita tif dengan KromatografiLapisan H pis ...................... 26
3.6 . Cara penetapan kadar stero l totaldengan Densitometri . * .................. , 2?
3 *6 . 1 . pembuatan larutan baku koles te ro l 1000 ppm........... 27
3.6*2. Penyiapan larutan sampel ..
3.b.5. Penentuan panjang gelombang maksimum Kolesterol dengan Densitometri ........................ 28
3.6.4. Penetapan kadar stero l tota l dengan Densitometri . . . 28
3*7. Cara penetapan K a d a r solasodinadengan Densitometri ...................... . 28
Halaman
iv
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
3 *7 *1 • pembuatan larutan baku solasodina 1000 ppn 28
3 *7 *2 . penyiapan larutan sampel 29
3 *7 *3 * penentuan panjang gelombang maksimum solasodina dengan Densitometri ................. . 29
3*7*4* penetapan kadar . solasodinadengan Densitometri ............ 29
3*8* Analisa data .........................• * * . . * . 29
BAB XV. HASIL PiSNELITIAN....................* ......................... 32
1• Hasil penyiapan bahan penelitian (penimbangan dan penetapan susut pengeringan ) daun tanaman solanum w righ tii Benth dalam berbagai in terva l waktu ..................... 32
2. Hasil pemeriksaan fase . petroleum eterdengan . Kromatografi .Lapisan T ip is ........... . 33
3* Haeil pemeriksaan fase kloroform denganKromatografi Lapisan Tipis ...................... 3*f
Hasil penetapan kadar s te ro l to ta l dengan Densitometri ....................................... 35
Jf«1 . penentuan panjang gelombang maksi-mum .................................. 35
4*2. Ha6i l penetapan kadar stero l tota l sampel fase petroleum eter daun tua Solanum w rightii Benth, pengambi - lan I .................................................... 36
4*3* Hasil penetapan kadar stero l total sampel fase petroleum eter daun muda Solanum w righ tii Benth, pengam bilan I ................................................
Halaman
v
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
4«4* Hasil penetapan kadar s tero l tota l sampel fase petroleum eter daun tua Solanum w righ tii Benth, pengambilan XI .................................................. 53
4.5* Hasil penetapan kadar stero l tota l sampel fase petroleum eter daun muda Solanum w righ tii Benth, Pengam bilan I I .............................................. 60
5. Hasil penetapan kadar k lo ro f i l to ta l daun Solanum w rightii Benth dalam in terval waktu yang berbeda secara spektrofoto - metri ........................................................... 67
6. Pengolahan data . . . . . ...................... ................69
BAB V. PSMBAHASAN............................................................ 78
BAB VI. K£SIMPULAN ....................................................... .....8a
BAB V II. SARAH-SARAN......................................................... 83
EINGKASAN .......................................................................... .... 84
DAPTAR PUSTAKA ..................................................................... 67
LAHPIRAH ....................................... '........................................ 91
Halaman
Vi
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
DAFTAR GAMBAR
Gambar ; Halaman
\• Daun dan Bunga dari tanaman Solanum w righ tiiBenth ........... . 30
2. Tanaman Solanum w righ tii Benth ............................ 31
3* Hasil u ji Kromatografi Lapisan Tipis fase petro leum eter daun solanum wrightii Benth dengan pembanding kolesterol ....................................... 33
if. Hasil u ji Kromatografi Lapisan Tipis fase kloro form daun Solanum wrightii Benth dengan pembanding solasodina ....................................................... j>L+
5* Hasil penentuan panjang gelombang maksimum stan dart kolesterol yang diukur pada panjang gelombang 370 nm sampai 700 nm secara Densitometri.. >5
6* Kurva kromatogram dan luas area kromatogram has i l pengukuran sampel fase petroleum eter daun tua Solanum wrightii Benth, pengambilan I , pe- ngusuran 1 ...................................................... . 37
7. Kurva baku larutan stanaart kolestero l (ug) ter hadap luas area pada pengukuran I penetapan kadar sampel fase petroleum eter daun tua Solanum w righ tii B en th ...................... .................................. 36
8. Kurva kromatogram dan luas area kromatogram has i l pengukuran sampel fase petroleum eter daun tua Solanum w righ tii Benth, Pengambilan I, pengukuran XI ............................................................. ifO
9* Kurva baku larutan standart kolesterol (ug) ter hadap luas area pada pengukuran II penetapan ka dar sampel fase petroleum eter daun tua Solanum w righ tii B en th ......... .............................................. if!
v i i
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
Hal am an
10. Kurva kromatogram dan luas area kromatogram has i l pengukuran sampel fase petroleum eter daun tua Solanum w rightii Benth, Pengambilan I , Pengukuran i l l ............. . ..................... >». ........... •. • 43
11. Kurva baku larutan standart kolesterol (ug) ter hadap luas area pada pengukuran I I I ■ penetapan kadar sampel fase petroleum eter daun tua Solanum w righ tii Benth .............................................. . 44
!£• Kurva kromatogram dan luas area krouatograra has i l pengukuran sampel fase petroleum eter daun muda Solanum wrightii Benth, Pengambilan I , pengukuran I ............................... .......................... 47
13* Kurva baku larutan standart kolesterol (ug) ter hadap luas area pada pengukuran I penetapan kadar sampel fase petroleum eter daun muda Sola - num w righ tii B en th .......................................... . 48
14* Kurva kromatogram dan luas area kroiaatogram has i l pengukuran sampel fase petroleum eter daun muda solanum w righ tii Benth, PengamDilan I , pengukuran I I .................... ......................................... 50
15* Kurva baku larutan standart kolesterol (ug) ter hadap luas area pada Pengukuran I I penetapan ka dar sampel fase petroleum, eter daun muda sola- flfrm wrightii Henth .............................................. , . 31
16. Kurva kromatogram dan luas area kromatogram has i l pengukuran sampel fase petroleum eter daun tua Solanum wrightii Benth, Pengambilan I I , pengukuran I ................................................................ 3^
17. Kurva baku larutan standart kolesterol (ug) ter hadap luas area pada pengukuran I penetapan kadar sampel fase petroleum eter daun tua Solanum wrightii Benth ......................................................... 55
v i i i
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
1 8 . K u r v a k r o m a t o g r a m d a n l u a s a r e a k r o m a t o g r a m h a * -
e i l p e n g u k u r a n s a m p e l f a s e p e t r o l e u m e t e r d a u n
t u a S o l a n u m w r i g h t i i B e n t h , P e n g a m b i l a n I I , P e
n g u k u r a n I I ...................................................................................................................... 3 7
1 9 - K u r v a b a k u l a r u t a n s t a n d a r t K o l e s t e r o l ( u ^ ) t e r
h a d a p l u a s a r e a p a d a P e n g u k u r a n I I p e n e t a p a n k a
d a r s a m p e l f a s e p e t r o l e u m e t e r d a u n t u a S o l a n u m
w r i K h t i i B e n t h ............................................................................................................ .
2 0 . K u r v a k r o m a t o g r a m d a n l u a s a r e a k r o m a t o g r a m h a -
s i l p e n g u k u r a n s a m p e l f a s e p e t r o l e u m e t e r d a u n
m u d a S o l a n u m w r i a h t i i B e n t h , p e n g a m b i l a n I I , p e
n g u k u r a n I ..................................................................................................... 6 1
2 1 . K u r v a b a k u l a r u t a n s t a n d a r t k o l e s t e r o l ( u g ) t e r
h a d a p l u a s a r e a p a d a P e n g u k u r a n I p e n e t a p a n k a -
d a r s a m p e l f a s e p e t r o l e u m e t e r d a u n m u d a S o l a
n u m w r i g h t i i B e n t h ................................... . . . . . . . .................... . . . . 6 2
2 2 . K u r v a k r o a i a t o g r a m d a n l u a s a r e a k r o m a t o g r a m h a -
s i l p e n g u k u r a n s a m p e l f a s e p e t r o l e u m e t e r d a u n
m u d a S o l a n u m w r i K h t i i B e n t h , P e n g a m o i l a n I I , P e ,
n g u k u r a n I I .................................................................. * ................................................ S k
2 3 . K u r v a b a k u l a r u t a n s t a n d a r t k o l e s t e r o l ( u g ) t e r
h a d a p l u a s a r e a p a d a P e n g u k u r a n I I p e n e t a p a n k a
d a r s a m p e l f a s e p e t r o l e u m e t e r d a u n m u d a s o l a
n u m w r i R h t i i B e n t h .............................................., , , .................... ......... • , 6 5
Z k * K u r v a w a k t u p e n g a m b i l a n ( p u k u l ) t e r h a d a p k a d a r
r a t a - r a t a s t e r o l t o t a l ( m g / g ) d a r i s a m p e l d a u n
t u a t a n a m a n s o l a n u m w r i g h t i i B e n t h , p e n g a m b i l a n
I 7 0
2 5 . K u r v a w a k t u p e n g a m b i l a n ( p u k u l ) t e r h a d a p k a d a r
r a t a - r a t a s t e r o l t o t a l ( m g / g ) d a r i s a m p e l d a u n
t u a t a n a m a n S o l a n u m w r i g h t i i B e n t h , p e n g a m b i l a n
I I .......................... 71
Hal am an
ix
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
26. Kurva waktu pengambilan (pukul) terhadap kadar rata-rata stero l tota l (mg/g) dari sampel daun muda tanamc . solanum w rightii Benth, pengambilan X .......................................................................... 72
27. Kurva waktu pengambilan (pukul) terhadap kadar rata-rata stero l tota l (mg/g) dari sampel daun muda tanaman Solanum w rightii Benth, Pengambilan I I ........................................................................ 73
28. Histogram kadar rata-rata stero l tota l dan. kadar rata-rata k lo ro f i l tota l dalam berbagai interval waktu dari sampel daun tua tanaman Sola-
nua wriKhtil Benth, Pengambilan I ..................* 74
29• Histogram kadar rata-rata stero l to ta l dan kadar rata-rata k lo ro f i l to ta l dalam berbagai in terval waktu dari sampel daun tua tanaman Solanum wriahtii Benth, Pengamoilan I I ..................... 75
30. Histogram kadar rata-rata stero l to ta l dan kadar rata-rata k lo ro f i l tota l dalam berbagai in terval waktu dari sampel daun muda tanaman Solanum w righ tii Benth, Pengambilan I ................... 76
31• Histogram kadar rata-rata stero l total dan kadar rata-rata k lo ro f i l tota l dalam oeroagai in terval waktu dari sampel daun muda tanaman So- 1 an urn w righ tii Benth, Pengambilan I I ................. 77
Halanan
x.
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
DAFTAR TAB2I
Tabel : Halaman
1, Hasil penimbangan serbuk. dan penetapan susut pengeringan daun tanaman Solanum w rightii 3enth dalam berbagai in terval waktu pengambilan ............. 32
2. Hasil penetapan kadar stero l to ta l sampel fase petroleum eter daun tua Solanum wriKhtii Benth, Pengambilan X pengukuran I dalam in terva l waktu yang berbeda secara Densitometri .......................... 39
3* Hasil penetapan kadar stero l to ta l sampel fase petroleum eter daun tua Solanum w rightii Benth, pengambilan X pengukuran IX dalam in terva l waktu yang berbeda secara Densitometri .................... ^2
if. Hasil penetapan kadar stero l to ta l sampel fase petroleum eter daun tua Solanum wriKhtii Benth, Pengambilan I pengukuran m dalam.interval waktu yang oerbeda secara Densi tometri ..................... 1+5
5. Hasil penetapan kadar stero l tota l sampel fase petroleum eter daun muda Solanum wriKhtii Benth, Pengambilan I pengukuran I dalam in terva l waktu yang berbeda secara Densitometri .......................... i+y
6. Hasil penetapan kadar stero l to ta l sampel fase petroleum eter daun muda Solanum w righ tii Benth, Pengambilan I pengukuran XX dalam in terva l waktu yang berbeda secara Densitometri .......................... 52
7. Hasil penetapan kadar stero l tota l sampel fase petroleum eter daun tua Solanum w rightii Benth, Pengambilan I I pengukuran I dalam in terva l waktu yang berbeda secara Densitometri .......................... %
3. Hasil penetapan kadar stero l tota l sampel fase petroleum eter daun tua Solanum w righ tii Benth, pengambilan I I pengukuran I I dalara in terva l wak tu yang berbeda secara Dentitometri ............... . 59
x i
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
Halanaa
9. Hasil penetapan kadar stero l to ta l sampel fase petroleum eter daun muda Solanum w righ tii Benth Pengambilan I I pengukuran I dalam in terva l wak tu yang berbeda secara Densitometri ................. . 63
10'. Easil penetapan kadar stero l tota l sampel fase petroleum eter daun muda Solanum w rightii Benth Pengambilan I I pengukuran I I dalam in terva l wak tu yang berbeda secara Densitometri ................... 66
11. Hasil penetapan kadar k lo ro f i l tota l daun Sola- nura... w rixhtii Benth dalam berbagai in terval wak tu yang berbeda secara spektrofotometri, pengam bilan I ....................................... .......................... 6?
12. Hasil penetapan kadar k lo r o f i l tota l daun Sola- num w righ tii Benth dalam berbagai in terva l wak tu yang berbeda secara spektrofotometri, Pengam bilan I I ............................ ................................... 68
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiraa : Halaman
1. Skema biosintesa steroida ...................... . ............ . 91
2. Skema biosintesa so lasod ina ....................... . . . . . . 92.
3* Skema ekstraksi ............................................ ..' 93
if. Contoh perbitungan kadar stero l ............. . . . . . . . . 9k
5 . Harga koerisien korelasi ( r ) pada derajat keper-cayaan 5% dan 1 % .............................. . 93
x i i i
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
PlttiDAHULUAN
BAB. I
1 • Latar belakang masalah.
penggunaan Mormon steroid yang terus menerus me-
ningkat tahun demi tahun terutama untuk penggunaan kon
trasepsi oral dalam rangka program nasional keluarga be
rencana yang ditetapkan pemerintah sejak tahun 1^70 d i-
rasakan perlu usaha swasembada bahan dasar yang diperlu
kan sehingga dapat ikut serta mensukseskan program ke
luarga berencana. ( 1 )
Bahan-bahan baku untuk kontrasepsi oral yang ber-
bentuk senyawa steroid dapat berasal dari hewan maupun
tumbuhan. Senyawa steroid yeing berasal dari tumbuhan da
pat berupa diosgenin, solasodina, sterol d ll* Sedangkan
senyawa steroid yang berasal dari hewan adalah koleste
ro l, *sam eapedu. Sebagian produk-produk obat steroid
sekarang tergantung pada diosgenin yang d iiso la s i dari
tanaman Dioscorea s p . (2 ,3 )
Kebanyakan tanaman sebagai sumber bahan baku un
tuk kontrasepsi oral tumbuh di daerah tropik, hal in i
merupakan sesuatu yang menarik bagi Indonesia yang ter-
letak di daerah iklim tropik, untuk dapat melihat pros-
pek bahan dasar hormon steroid yang tnungkin ada dan ba-
nyak tumbuh di negara in i, (**)
Telah diketahui bahwa alkaloida yang terdapat pa-'
da tanaman solanum species mempunyai struktur molekul
dengan in t i steroid sama halnya dengan diosgenin, misal
1
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
nya solaniarina, tomatidina, solasodina. (4) Demikian
pula stero l yang terdapat pada tanaman mempunyai in t i
steroid dan diharapkan pula dapat memenuhi penyediaan
bahan dasar pembuatan hormon steroid . ( 5 )
Berdasarkan strukturnya steroid dapat dioagi men
jad i dua golongan yaitu steroid dengan atom karbon t i
dak lebih dari 21 yang diseout steroid sederhana dan
steroid yang memiliki atom karbon lebin dari 2 1 , misal-
nya stero l, sapogenin, steroid a lkaloid . (6 )
Telah dilakukan beberapa penelitian terhadap tana
man Solanum species dalam upaya untuk mengetahui kandu-
ngan solasodina. Penelitian itu antara la in : Telek
dkk. menyatakan oahwa kadar solasodina zertin gg i pada
saat buah fiolanum mammofium l menjelang berwarna kuning
dan akan menurun dengan cepat setelah ouah berwarna ku
ning. (2 ) Tarigan P. telah berhasil membuat analisa
kandungan alkaloida to ta l yang diperhicungkan sebagi so
lasodina pada buah Solanum khasianum Clark ternyata men
capai maksimum pada umur 10 minggu dan sesudahnya menu-
run pada umur 11 dan 12 minggu. (7 ) Wahjudi pada buah
Solanum wri&htii Benth yang terdapat di Kebun Haya Ca-
bang purwodadi terdapat kandungan solasodina yang ting-
g i pada buah dengan diameter 4»00 - 4,99 cm dan selan-
jutnya akan menurun pada diameter yang leb ih besar, d i
mana sebelumnya selama 12 minggu telah dilakukan penga-
matan terhadap bertambahnya diameter buah. ( 8)
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
3
Penelitian yang la in dari Handayani R. dan s u lfi
ah A* tentang percobaan induksi pembentukan solasodina
dengan meningkatkan kadar k lo ro f i l pada kalus Solanum
w righ tii Benth didapatkan kadar k lo ro f i l sebanyak 0,3 -
0,5 mg/g berat kering dan kalus Solanum indicum L dida
patkan kadar k lo ro f i l 0,16 + 0,003 “ g/g berat kering di
laporkan tidak terdeteksi adanya solasodina. (9,10) Se
dangkan penelitian lainnya terhadap kalus Solanum dulca
mara yang mengandung k lo ro ii l sebanyak 0,1 + 0,002 ;
0,3B + 0,05 ; 1,0 2 + 0,1 mg/g berat kering mengandung
solasodina 56 + 12 ; 130 + 30 ; 220 + *f0 ug/g berat ke
ring dan kalus Solanum eleagnifolium Cav. terdapat kan-
dungan solasodina sebanyak 1,00 - 2 ,1 5 mg/g berat ke
ring. ( 1 1 , 1 2 )
Berdasarkan laporan basil penelitian selanjutnya
pada daun Solanum species ternyata juga mengandung alka
lo id solasodina. (7) Sedangkan dari penelitian Chowdhu
ry, Prasad dan Aminuddin dilaporkan bahwa biosintesa
alkaloid solasodina pada tanaman Solanum species ber-
langsung di daun, selanjutnya solasodina yang d ihas il-
kan dipindah ke tempat penyimpanannya yaitu pada buah
atau tuber. (13)
Hasil penelitian Bake A. dan E ile r t U. pada kul-
tur kalus Solanum dulcamara menyatakan dalam proses bio
sintesa solasodina ternyata ada hubungan antara kadar
solasodina dengan d iferensiasi sel dan kadar k lo r o f i l .
Semakin banyak kadar k lo ro f i l semakin meningkat solaso
dina yang didapatkan. ( 1 1 )
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
4
Dan dari hasil penelitian Elsadig a .B. dan James
OUR. terhadap biosintesa tomatin dilaporkan bahwa bio
sintesa tomatin berlangsung baik pada daun, akar maupun
buah. Dan berdasarkan hasil penelitian dengan mengguna-
kan radiotracer ternyata dari daun ditransport s tero l
untuk selanjutnya dibiosintesa menjadi tomatin pada bu
ah. (14)
2. Permasalahan.
Dari hasil penelitian pada kultur kalus Solanum
eleagnifolium Cav. dan kultur kalus Solanum dulcamara
dilaporkan dapat terbentuk solasodina. Akan tetapi pada
penelitian yang dilakukan Handayani R. pada kultur ka-
lus solanum w righ tii Benth. yang berhasil aealngkatkan
kandungan k loro filnya tetap tidak mampu membentuk sola
sodina. Ketidak mampuan kultur kalus Solanum w righ tii
Benth dalam membentuk solasodina diduga karena tidak
adanya se l-s e l khusus tempat akumulasi sehingga solaso
dina yang terbentuk segera terurai.
Sedangkan menurut Chowdhury, Prasad dan Aminuddin
alkaloid solasodina pada tanaman Solanum species dibio
sintesa di daun, dan hasil biosintesa solasodina dipin-
dahkan ke buah sebagai tempat akumulasinya. Dan pada ta
naman solanum yang la in seperti Solanum laciniatum. So
lanum nigrum solasodina yang dihasilkan juga diakumula-
s i pada daun. ( 7 ) Maka diduga mekanisme akumulasi sola
sodina pada tanaman solanum w righ tii Benth berbeda de
ngan jen is Solanum yang la in .
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
Hal in i menarik untuk d i t e l i t i leb ih lanjut ten-
tang aekanisme akumulasi pada tanaman Solanum w rightii
Benth yaitu hasil biosintesa solasodina tersebut lang-
sung dipindahkan ks buah atau diakuuulasikan dahulu pa
da daun dan apakah akumulasi solasodina pada tanaman
ae-abutuhkan se l-se l dengan fungsi khusus seperti pada
s e l-s e l buah. In i penting diketahui dalam rangka usaha
solasodina secara bioteknologi tanaman.
Untuk memecahkan masalah tersebut diatas dicoba
melakukan penetapan kadar senyawa steroid pada daun ta
naman Solanum w righ tii Benth dalam berbagai in terva l
waktu tertentu yang dihubungkan dengan waktu sebelum
terjadinya fotosintesa, mulainya fotosintesa, saat ber-
langsungnya fotosintesa dan setelah proses fotosintesa.
Disamping itu ditetapkan pula kadar k lo ro f i l pada daun
untuk mengetahui kemungkinan pengaruh k lo ro fi l terhadap
kadar solasodina pada daun tanaman Solanum w righ tii
Benth..
3 . Tu.iuan penelitian .
penelitian- in i bertujuan untuk mengetahui kadar
senyawa steroid pada daun. tanaman solanum w righ tii
Benth dalam in terva l waktu pengambilan pukul 06.00, 09.
00, 1 2 .00, 1 5 .00, 18.00 dan 2 1 . 00.
5
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
BAB I I
TINJAUAN PUSTAKA
1 . Tin.iauan umum tanaman Solanum.
Solanum merupakan suatu marga tanaman yang besar,
jenisnya diperkirakan lebih dari 1500 yang tersebar di-
daerah tropik, sub tropik dari pantai sampai dataraaa
tinggi pada ketinggian 2000 sampai 3000 m diatas permuka
an lau t, Indonesia sebagai negara tropik mempunyai ba-
nyak jen is solanum yang diperkirakan mencapai 71 jen is,.
sedangkan di Pulau Jawa diperkirakan terdapat 27 jen is .
Jenis solanum in i banyak yang berguna dan mempunyai
n ila i ekonomi sebagai tanaman pangan atau tanaman hias,
tetapi sebagian besar jenis solanum dikenal sebagai tana
man l ia r yang mengandun racun yang dusebabkan oleh a l-
kaloidnya. Aikaloid yang terkandung dalam jen is solanum
tersebut terdapat dalam bentuk glikoalkaloid , misalnya
solasodina, solamargina, solanina, solamarin dan lainnya
yang aglikonnya mempunyai in t i steroida. (15>l6)
2. Solanum w righ tii Benth.
Solanum w rightii Benth merupakan pohon, daunnya
tunggal tersebar berbentuk jorong sampai bulat telur,
berlekuk menyirip sampai bercangap menyirip dengan bulu-
bulu seperti sikat pada permukaan daun. Lebar daun 5 -
52 cm, panjang 9-35 cm.
Tanaman Solanum w rightii Benth banyak terdapat duri
dan berbunga sepanjang tahun, mempunyai bunga majemuk
yang letaknya la te ra l dan berbentuk terompet.
6
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
7
Warna bunga ungu dan setelah 3 sampai k hari berubah men
jad i'pu tih kemudian gugur. Jumlah bunga pada tiap karang.
an bunga 7-10 kuntum. Bunga berkelamin dua dengan pan
jang tangkai bunga 1 -2 cm. Kelopak bunga tingginya 1 ,5 -
2 cm, mahkota bunga mempunyai tinggi 5-7 cm terbagi sam
pai dekat pangkal, kepala sari berwarna kuning.
Buahnya merupakan buah buni berbentuk bulat dengan
penampang 5-7 cm, warna buah hijau sedangkan b ijinya ber
bentuk pipih dan berwarna coklat. Kedudukan sistematika
tanaman in i adalah : ( 16 )
ULvisi : Spermatophyta
Anak d iv is i : Angiospermae
Kelas : dcotyledonae
Bangsa : Solanales
Suku ; Solanaceae
Marga ; Solanum
Jenis ; Solanum w righ tii Benth
3. Steroid.
3 . 1 , Tin.iauan tentang stero id .
Steroid mencakup sejumlah besar kelompok senyawa
yang sangat penting peranannya dalam biokimia. Senyawa
steroid merupakan turunan dari perhidro-1 ,2-siklopenta
nofenantrena, suatu molekul yang merupakan gabungan da
r i empat cincin, 3 dari sikloheksana dan satu dari s i-
klopentana. Keempat cincin tersebut diberi notasi de
ngan huruf A, B, C dan D. Atom karbon dari sistem se
nyawa steroid diberi nomor dari 1 sampai 17. Molekul-
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
8
induk jenuh dari senyawa steroid disebut gonan.
Strukturnya adalah sebagai berikut : (I/ )
Struktur molekul in t i steroid
3.2. Biosintesa stero id .
Steroid alam dapat diperoleh melalui . rangkaian
transformasi kimia dari triterpen lanosterol dan sik lo
artenol. Tahap awal biosintesa steroid alam pada umum-
nya berasal dari asam asetat ke lanosterol atau ke s i-
kloartenol melalui asam mevalonat dan squalen. (18)
Biosintesa steroid dan derivatnya dapat diketahui
dengan mempelajari produksi ko lestero l. pembentukan ko
le s te ro l dianggap sebagai mekanisme umum dari biosinte
sa steroid,
Pada ion karbonium, mempunyai muatan p o s it if pada
atom C20 yang stab il oleh karena hilangnya dua hidrida
(17 20 ; 13 17) dan hilangnya metil (14 13 ; 8 14). Se
bagai hasil migrasi muatan p o s it if ke atom Cg dan le -
pasnya sebuah proton dari atom mungkin terbentuk sa
lah satu cincin siklopropan 9» 10, 19 dari sik loarte -
nol atau terbentuk ikatan rangkap 8, 9 dari lanoste
ro l. Perubahan pada senyawa lanosterol yaitu dari atom
C q ke steroid dengan atom (k o les tero l) melibatkan
lepasnya 3 gugus,metil dan hilangnya ikatan rangkap.
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
9
Serangkaian reaksi in i dapat berlangsung tergantung pa
da organisme, akibatnya sejumlah hasil antara teraasuk
zimosterol telah d iiso las i sehingga dapat mewakili ber
macam-macam transformasi. Adapun ja lu r biosintesa ste
roid yang dimulai dari asam asetat kemudian terbentuk
senyawa antara squalen dapat d ilih a t Lampiran I . (19)
3.3. Cara penetapan kadar s tero id .
penetapan kadar steroid dapat dilakukan dengan
berbagai cara, antara la in berdasarkan adanya gugus
yflhidroksi pada atom Cj dan adanya ikatan rangkap. pada
atom C dan C . Cara-cara tersebut antara la in :
. - Reaksi Liebermann-Burchard.
Metode in i berdasarkan terbentuknya warna hijau ha
s i l penambahan pereaksi asam asetat anhidrat dan
asam su lfa t.
- Kolorim etri.
Pada metode in i didasarkan atas hasil reaksi dari
penambahan pereaksi asam asetat, a s e t il klorida dan
seng klorida yang menghasilkan warna yang ditentukan
pada 328 mu.
- Ferri klorida kolorim etri.
Etigunakan campuran fe r r i klorida dan asam su lfat ter
bentuk warna purple dengan larutan asam asetat.
- Tekhnik pemisahan.
- Metode la in .
Dapat digunakan Gravimetri. (20)
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
10
4. Solasodina.
4 .K S ifa t fis ik a - kimia solasodina.
Dalam tanaman jenis solanum, solasodina terikat
dalam bentuk glikosidanya dengan gula, gugus gula da
pat berupa glukosa, galaktosa dan rhamnosa. Solasodi
na sebagai aglikon dari solasonin, soladamin, solara-
dixin dan lainnya. Solasodina mempunyai rumus molekul
C27*^3^2N’ dengan bobot molekul ^13 >62. (21 )
Struktur molekul solasodina
Solasodina mempunyai nama la in : (17)
- Solankarpidina
- Solanidina-s
- purapuridina
- Spirosol-5-e^-3 yS-ol
- Solasod -5-en- -o l
Pengkristalan dengan alkohol encer atau dioksan
mempunyai jarak lebur 197° - 198° C. Larutan solasodi.
na dalam alkohol bereaksi a lka lis terhadap kertas lak
mus, harga PKb 6 ,30. Solasodina mempunyai kelarutan
yang berbeda. Larut bebas dalam bensena dan kloro-
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
11
form. Larut dalam alKOhd dan aseton, sed ik it larut
dalam a ir dan praktis tidak laru t dalam eter. (2 1 )
4«2. Biosintesa solasodina.t
Jalur biosintesa solasodina yang merupakan ke
lanjutan dari proses biosintesa steroid ( Lampiran-
I ) , dimana setelah terbentuk Kolesterol kemudian
dilanjutkan pembentukan solasodina dapat d ilih a t pa
da Lampiran IX. (22)
5 * Ttn.iauan ten tang s te ro l.
S terol adalah senyawa steroid yang mempunyai
rantai camping yang cukup panjang, yang terikat pada
Ci^# Senyawa in i biasanya mengandung 27 6ampai 29 a-
tom karbon*
Sterol masih merupakan bahan yang diperoleh da
r i binatang (sebagai hormon seks, asam empedu) tetapi
akhir-akhir in i sejumlah besar senyawa stero l telah
dideteksi dari jaringan tanaman, yang dapat dijumpai
dalam bentuk bebas, eter atau glikosidanya. (20 )
Sterol atas dasar asalnya dapat digolongkan ya i
tu ;
- Zoosterol, s tero l yang berasal dari hewan, misalnya
kolesterol*
- f ito s te ro l, s tero l yang berasal dari tanaman, mieal
nya. stigmasterol, beta s ito s te ro l.
- Mikosterol, stero l yang berasal dari jamur, misal -
nya ergosterol, zymosterol, asam eburicoat*
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
12
Kolesterol adalah senyawa stero l dengan atom
karbon sebanyak 27 yang merupakan steroid hewani,yang
terdapat paling banyak dan dijumpai dalam setiap ja -
ringan hewan, yang merupakan bahan antara yang diper-
lukan dalam biosintesa hormon steroid . Adapun s ifa t
kelarutannya adalah tidak larut dalam a ir tetapi la -
rut dalam kloroform dan metanol. Sedangkan rumus ba-
ngunnya adalah sebagai berikut : (20,23 )
Kampesterol adalah senyawa s tero l dengan atom
karbon sebanyak 28, banyak terdapat pada minyak gan-
dum, minyak kacang merah dan la in -la in . Adapun s ifa t
kelarutannya adalah tidak larut dalam a ir tetap i la
rut dalam kloroform dan metanol. SedangKan rumus ba-
ngunnya adalah sebagai berikut : (23 , 2*0
M i i &-pLRfUS'lAKAAN
-UN1VERS1TAS AIRLANGGA"
s U R A B A Y A
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
Stigmasterol adalah stero l dengan atom karbon
sebanyak 29, pertama ka li d iiso la s i dari kacang bun -
c is , juga terdapat dalam kacang Kedelai yang diguna -
kan untuk tujuan komersiil yang penting. (20,24).
Adapun s ifa t kelarutannya adalah tidak laru t dalam
a ir tetapi laru t dalam kloroform dan metanol. Sedang-
kan rumus bangunnya adalah sebagai berikut : (23 ,24 )
S itostero l adalah senyawa stero l dengan atom
karbon sebanyak 29* banyak terdapat dalam tanaman mi-
salnya gandum, jagung, kapas, tetapi paling banyak di
jumpai dalam tanaman adalah beta s ito s te ro l. Dalam ba
nyak obat diketahui bahwa s itos te ro l adalah campuran
dari - s ito s te ro l (stigmast 5-en-3 ^ 0 1 ) (c29h50o)
dan beberapa stero l jenuh. Campuran tersebut te rd ir i
dari 95# to ta l s tero l dan tidak kurang dari Q95% ste
ro l tak jenuh dihitung sebagai - s t is te ro l. Senyawa
in i merupakan zat warna putih, tidak berbau, tidak be
rasa dan praktis tidak larut dalam a ir tetapi larut
dalam kloroform dan metanol. Sedangkan rumus bangun -
nya adalah sebagai berikut : ( 17 ,23 , 24)
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
14
Dari perbedaan rumus bangun senyawa-senyawa ste
ro l tersebut aiatas, maka dapat diketahui tingkat ke-
larutan dari masing-masing senyawa* Kolesterol mempu-
nyai atom karbon berjumlah paling sed ik it, sehingga
ko lestero l mempunyai kelarutan yang lebih tin gg i. Un
tuk kampesterol walaupun jumlah atom karbonnya lebih
sed ik it daripada 6tigmasterol, akan tetapi pada s t ig
mas tero l ada ikatan rangKap pada CpP dimana ikatan
tersebut mudah patah membentuk tipe pregnan yang mem
punyai s i fa t kelarutan dalam senyawa semi polar leb ih
tingg i daripada kampesterol. Sedangkan untuk s ito s te
ro l s i fa t kelarutanny^ paling kec il dibanding ketiga
s te ro l tersebut diatas, hal in i disebabkan karena s i
tostero l mempunyai atom karbon yang lebih panjang.
Melihat hal tersebut diatas, maka stero l mempu
nyai kegunaan yang luas dalam dunia pengobatan teru-
tama untuk bahan pembuatan hormon seks yang digunakan
sebagai obat kontrasepsi. Kegunaan la in misalnya un
tuk anti inflamasi, anti aler& i, rhematoid arth ith is
dan asma.
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
15
b• K lo r o f i l .
6.V. Hn.iauan ten tang k lo r o f i l .
K lo ro fil merupakan kata lis penting dalam foto
aintesa dan pada umumnya terdapat sebagai pigmen hi
jau dalam jaringan tanaman yang mengalami iotosinte
sa. K lo ro fil terdapat dalam kloroplast dalam jumlah
agak besar, sering berikatan kuat dengan protein te
tapi cepat terekstraksi dari cairan lemak dengan a-
ceton atau eter.
Secara kimia, k lo ro f i l te rd ir i dari in t i por
phyrin (te tra p y rr ile ) yang membentuk khelat dengan
magnesium pada pusat dan ikatan hidrokarbon panjang
(phytyl) sebagai rantai samping yang melekat mela
lu i asam carbon l i e group.
Paling sed ik it ada lima macam k lo ro f i l pada
tanaman, dimana semuanya mempunyai struktur dasar
yang sama tetapi menunjukkan varias i dalam pelekat-
an a l i fa t is sebagai rantai samping pada in t i porph£
rin . K lo ro fil a dan b paling banyak terdapat pada
tanaman tingkat tinggi, paku, lumut sedangkan kloro
f i l c sampai e hanya didapatkan pada algae. ( 25 )
Karbohidrat merupakan hasil dari fotosintesa,
sebuah proses b io log i yang mengubah energi elektro-
magnetik menjadi energi kimia. Dalam tanaman hijau
fotosintesa te rd ir i dari dua reaksi. Reaksi pertama
disebut juga reaksi cahaya, yang mengubah energi e-
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
lektromagnetik menjadi energi kimia. Reaksi yang
la in adalah reaksi enzimatik yang mempergunakan e -
nergi dari reaksi cahaya yang mengubah karbondioksi,
da menjadi gula. In i stoma disebut sebagai reaksi'
gelap. Hasil dari kedua tipe reaksi diatas biasanya
disimpulkan secara sederhana dalam persamaan seba
gai berikut : (26)
2H20 + C02 + caiiaya-~2E2lii— (CH20) + H^O + 0a
6*2. Cara penetapan kadar k lo r o f i l .
Ada beberapa cara penetapan kadar k lo ro f i l an
tara la in :
- Dua gram bahan diekstraksi dua ka li dengan aceton
60% (volume akhir 10 ml), gunakan homogeniser (Ul
tra -tu rrax ). Konsentrasi diUKur pada panjang ge
lombang 645 nm dan 663 nm dengan menggunakan per
samaan Arnon Cited in Jacobi (1974). (11)
- Bahan segar ditumbuk dalam mortir atau dimasukkan
kedalam maaerator dengan menambahkan aceton atau
metanol berlebih sampai semua warna pada jaringan
terlepas. Tambahkan kalsium karbonat untuk rnenja-
ga terbentuknya pheophytin dan saring ekstrak pa
da penyaring Buchner, b ilas dengan aceton yang ba
ru sampai tak berwarna* Ekstrak dan hasil pembila
san ukur volumenya dan simpan di re fr iga to r . Ten-
tukan sadarnya dengan spektrofotometri. Kadar klo
16
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
17
r o f i l dapat oihitun& dengan persamaan :
Total k lo ro f i l (mg/1) =20 ,2 + 8,02 A ^
dimana :
A645 *Ab63 adalah a*>sorban pada panjang gelom
bang 645 nm dan 663 nm.
K lo ro fil dapat aibedakan dengan pembentukan
kompleks dengan UV dan kurva absorpsinya dapat di
amati. K lo ro fil menunjukkan puncak mayor diatas
625 nm, puncak minor antara 500 nm dan 600 nm. Un
tuk k lo ro t il a dan b, puncak panjang gelombangnya
663 nm dan 645 nm, sedangkan untuk k lo r o f i l c dan
d pada 630 nm dan 668 nm. (2 5 )
7. Kromatografi Lapisan T ip is *
Kromatografi lapisan t ip is merupakan suatu cara
yang dapat digunakan untuk memisahkan komponen zat da
r i campurannya* Mekanisme proses pemisahan pada kroma
togra fi lapisan tip is ada beberapa macam yaitu :
- secara adsorpsi
- secara p a rtis i
- secara pertukaran ion
- f i l t r a s i
Dari berbagai mekanisme tersebut yang paling sering
digunakan adalah mekanisme proses pemisahan secara ad
sorpsi, mekanismenya dapat dijelaskan sebagai berikut.
Apabila campuran zat diteteskan pada lempeng %
se diam, maka mula-mula semua zat akan diadsorpsi o-
leh fase diam* Oleh karena kekuatan adsorpsi antara
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
18
molekul zat berbeda-beda maka apabila dilakukan elua-
s i dengan fase gerak akan terjad i pemisahan dari cam-
puran tersebut. Molekul-molekul zat yang diadsorpsi
paling lemah oleh fase diam akan terbawa oleh fase ge
rak ke atas sehingga memberikan noda paling atas* Se
dangkan molekul-molekul zat yang diadsorpsi paling ku
at oleh fase diam akan memberikan noda yang paling ba
wah.
Fase diam yang digunakan bermacam-macam. Salah
satu cara pembuatan fase diam adalah :
Mula-mula fase diam dibuat suspensi, kemudian dirata-
kan di atas lempeng kaca, p lastik ataupun a lum inium,
Selanjutnya fase diam diaktifkan dalam oven dengan su
hu 100° - 200° C selama 30 sampai 60 menit.
Sebagai fase gerak dapat digunakan pelarut tung
gal atau campuran, beberapa macam pelarut disesuaikan
dengan campuran zat yang dipisahkan. Fase gerak mempu
nyai fungsi membawa molekul-molekul zat sehingga da
pat terjad i pemisahan sempurna.
Untuk menunjukkan komponen zat yang dipisahkan
tersebut, dapat digunakan lampu UV atau menggunakan
pereaksi penampak noda yang sesuai. Dari kromatogram
hasil pemisahan yang diperoleh, dapat diketahui warna
yang terjad i, kemudian dihitung harga fif nya. Harga
Rf yaitu perbandingan jarak yang ditempuh oleh noda
dan jarak yang ditempuh oleh fase gerak.
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
19
of - n2d§-= 3 a r a E “y a 5 g " H r i e m p u H *’o I e E " T a i e ™ g e r a E’’
Setiap zat dengan fase gerak dan fase diam tertentu
mempunyai harga Rf tertentu pula. (2 7 ,29)
8. Tln.lauan ten tang Densitometri.
Densitometri merupakan metode optik yang dapat
digunakan untuk analisa k u a lita t if dan kuantitatif
zat atau campuran zat setelah dipisahkan terleb ih da-
hulu, antara la in dengan tekhnik kromatografi lapisan
t ip is . Metode in i didasarkan pada pengukuran cahaya
yang diserap atau diemisikan oleh molekul senyawa da
lam noda kromatogram.
Pengukuran konsentrasi dapat dilakukan dengan
cara sebagai berikut ;
1. Membandin&kan transmisi sinar tampak yang melewati
noda sampel dengan noda pembanding pada kromato -
gram. Cara in i hanya untuk noda-noda yang berwarna
atau diwarnai dan lapisan t ip is dibuat dari lem -
peng kaca yang tembus cahaya dan harus benar-benar
homogen.
2* Membandingkan serapan sinar lembayung u ltra atau
sinar tampak yang dipantulkan dalam noda bahan a-
tau sampel dengan noda pembanding pada kromatogram.
Untuk mendapatkan hasil yang paling baik, maka la
pisan yang dipakai. adalah s ilik a gel tanpa kalsium
su lfat sebagai pengikat dan tanpa bahan yang ber-
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
20
fluoresensi*
3* Membandingkan absorpei fluoresensi sinar yang di -
pantulkan oleh noda dan noda pembanding (untuk ba
han yang berfluorosensi).
Metode Densitometri in i berbeda dengan metode
spektrofotometri, dimana medium yang dipakai pada me
tode Densitometri b ers ifa t tidak homogen dimaksudkan
yang selain menyerap juga menghamburkan cahaya (scat
te r in g ), sehingga hubungan antara serapan dengan kon-
sentrasi tidak menunjukkan hubungan yang l in ie r seper
t i yang ditunjukkan oleh hukum Lambert-Beer pada me tg,
de spektrofotometri. (28,30 ,3 1 )
Teori yang banyak digunakan dalam metode Densi
tometri adalah teo ri Kubelka-Munk. (29,31,32,33)
Adapun hukum Kubelka-Munk :
- - g ji- - = (S + K) j + Si
- f z ~ " = (S + K) i + Sj
Keterangan hukum Kubelka-Munk ;
i : intensitas cahaya dengan arah tegak lurus
meninggalkan permukaan lapisan t ip is ,
j : intensitas cahaya dengan arah tegak lurus
menuju permukaan lapisan t ip is .
K : faktor penyerapan untuk tiap satu-satuan
tebal lapisan t ip is .
S : faktor penghamburan untuk tiap satu-satuan
tebal lapisan t ip is .
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
21
Untuk harga X = 0, maka perbandingan intensitas caha
ya yang dipantulkan ( l R) dengan intensitas cahaya
yang datang ( t ) disebut reflektan (AD) . SedangkanO Kharga X = x, maka perbandingan intensitas cahaya yang
meninggalkan lapisan t ip is ( I^ ) dengan in tensitas ca
haya yang datang ( I Q) disebut transmitan (A ^ ). Secara
matematik hubungan tersebut dapat dinyatakan sebagai
berikut :
= ar
/ *o = AT
8.1. Analisa k u a lita t if dengan Densitometri.
Ada dua cara analisa k u a lita t if dengan Densi
tometri yaitu :
- Atas dasar harga "distance11 (jarak ) noda kromato
gram sampel dibandingkan dengan noda kromatogram
pembanding,
- Atas dasar panjang gelombang maksimum, yaitu pan
jang gelombang pada saat harga serapannya maksi -
mum.
Apabila zat yang dianalisa mempunyai panjang
gelombang maksimum sama dengan panjang gelombang
maksimum pembanding, maka kemungkinan zat tersebut
sama dengan zat pembanding. (33 )
8.2. Analisa kuantitatif dengan Densitometri,
pengguaaan Densitometri untuk tujuan analisa
kuantitatif didasarkan atas pengukuran kerapatan
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
22
optik noda kromatogram. Kerapatan opcik tersebut di
nyatakan dengan luas area noda kromatogram. perhi -
tungan kadar suatu zat yang dianalisa dilakukan de
ngan cara membandingkan luas area sampel dengan lu -
as area pembanding, dengan catatan oahwa huoungan
antara luas area dengan konsentrasi telah d ilin ie r -
kan dengan perkalian suatu faktor yang telah diatur
oleh sistem didalam a la t Densitometer. (30,31)
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
BAHAN, ALAT DAN MKTODE KjSRJA
BAB I I I
1 • Bahan.
1.1. Bahan Penelitian .
Bahan penelitian yang digunakan adalah daun ta
naman Solanum w righ tii Benth yang diperoleh dari Ke-
bun Raya Cabang Purwodadi pasuruan.
1.2. Bahan Kimia.
- petroleum eter p.a
- Aseton
- Klorororm p.a
- Metanol p.a
- A3am su lfat pekat
- Asam klorida 2 N
- Natrium hiaroksida 10%
- Heksana p.a
- i£til asetat
- Kalsium karoonat
pereaksi Dragendorf Spray
- Kiesel Gel 60 F
2. A la t-a la t.
- Satu set a lat refluks
- TLC Scanner Shimadzu CS-930
- Bejana kromatografi ____ -
- Botol timbang
Oven
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
24
3* Cara ker.ia*
3 .1 . penyiapan bahan penelitian .
- pengumpulan daun : d ip ilih daun dengan C riteria :
- Daun muda : 4 sampai 5 daun dari daun pa
lin g ujung.
- Daun tua : 6 sampai 10 daun dari daun pa
lin g ujung.
- Waktu pengambilan : Daun diambil secara acak dari
dua tanaman pada in terva l waktu sbb. ;
- Sampel pertama diambil pukul 06*00
- Sampel keaua diambil pukul 09.00
- Sampel ketiga diambil pukul 12.00
- Sampel keempat diambil pukul 15*00
- Sampel keliina diambil pukul 13.00
- Sampel keenam diambil pukul 21*00
Bahan-bahan yang telah dikurapulkan kemudian di
keringkan dengan sinar matahari, kemudian d ig ilin g
atau diserbuk dan diayak.
3*2. Cara ekstraksi.
Ditimbang dengan t e l i t i 3,000 gram serbuk ke-
ring, kemudian dimasukkan kedalam labu d estila s i >0
ml. Direfluks dengan 23 ail petroleum eter selama dua
jam. Setelah itu disaring dengan corong Buchner, U l
tra t yang didapatkan dikumpulkan sedangkan residu d i
refluks kembali dengan 25 oil petroleum eter. Ekstrak-
diulang masing-aasing tiga ka li selama dua jam#
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
25
E lltra t yang didapatkan ( rase petroleum eter )
dilakukan u ji k u a lita tif dan dilanjutkan u ji kuanti-
t a t i f , sedangkan residunya direfluks kembali dengan
25 ml aseton. Ekstraksi diulang masing-masing selama
dua jam.
P ilt r a t yang didapatkan ( fase aseton ) dipisah
kan sedangkan residunya dih idrolisa dengan asam klori.
da 2 N, didihkan dan selanjutnya dinetralkan dengan
natrium hiaroksida 10%. Setelah netral disaring de
ngan corong Buchner dan f i l t r a t yang didapatkan dieks
traksi dengan kloroform menggunakan corong pisah. j ks
traksi dengan kloroform dilakukan pula terhadap re s i
du hasil h idro lisa . Residu hasil h idrolisa in i ditarn-
bah sejumlah tertentu kloroform sehingga residu ter
sebut terendam. Setelah die^straksi selama dua jam ma
ka disaring melalui corong Bucnner. J jlltrat yang dida
patkan dicampur dengan f i l t r a t hasil h idrolisa dan
akhirnya campuran f i l t r a t in i ( fase kloroform ) d ila
kukan u ji k u a lita t if dan selanjutnya u ji kuan tita tif.
Untuk lebih jelasnya ekstraksi tersebut dapat d ilih a t
pada Lampiran H I . (33)
3.3^ Penetapan susut pengeringan.
Bi timbang 0,500 gram serbuk daun, kemudian dirna
sukkan kedalam krus porselin yang sudah ditimbang
konstan. Setelah itu dipanaskan di lemari pengering
pada suhu 105° C sampai bobot konstan. (34)
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
26
3*4« Penetapan kadar k lo r o f i l *
Ditimbang 0,100 gram serbuk daun dan dimasukkan
kedalam beker glas 100 ml, kemudian tambahkan aseton
kedalamnya sampai semua warna pada jaringan terlepas.
Tambahkan kalsium karbonat, saring ekstrak dengan co
rong Buchner, masukkan kedalam labu ukur 100 ml* Bi-
las dengan aseton sampai tak be'rwarna dan tambahkan
aseton sampai garis tanda. Kemudian diukur absorpsi-
nya pada panjang gelombang 663 nm dan 645 nm dengan
sel satu cm. Kadar k lo ro f i l dapat dihitung dengan per
samaan :
Total k lo ro fi l (mg/1) = 20,2 + 8,02
dimana :
' Lan ^645 adalah absorpsi pada panjang gelombang
663 nm dan 645 nm* (26 )
3«5» U.ii k u a lita t if dengan Kromatografi Lapisan T ip is .
Larutan fase gerak dimasukkan kedalam bejana
kromatografi yang dindingnya telah d ilap is i dengan
kertas saring, bejana ditutup dan dioiarkan sampai je
nuh.
F lit ra t hasil ekstraksi ditotolkan pada lempeng
Kiesel Gel 60 F 254 dengan menggunakan mikropipet, ke
muoian lempeng dimasukkan bejana kromatografi, d ielu-
asi dengan fase gerak yang telah dijenuhkan. Setelah
fase gerak mencapai batas yang telah ditentukan lem
peng diangkat kemudian dikeringkan pada suhu kamar
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
27
agar fase geraknya menguap. Setelah itu disemprot de
ngan penampak noda. Untuk penampak noda b ila yang d i
gunakan asam su lfat pekat ; metanol, setelah disem-
protkan lempeng dipanaskan pada suhu 105° C selama le
bih kurang 10 menit. Biamati warna noda yang . tarnpak
dan dihitung harga Hf nya. Untuk mengetahui jen is se
nyawa steroida digunakan pembanding. Uji kromatografi
lapisan t ip is dilakukan terhadap :
- Fase petroleum eter, fase gerak yang digunakan ;
heksana : e t i l asetat = 7:3
penampak noda = Asam su lfat pekat : metanol = 1:1
- Fase kloroform, fase gerak yang digunakan ;
Kloroform ; metanol = 19:1
penampak noda = pereaksi Dragendorf Spray
3.6. Cara penetapan kadar stero l to ta l dengan Densitome -
t r i .
3 .6 .1 . Pembuatan larutan baku kolesterol 1000 ppm.
Ditimbang dengan seksama 0,100 gram koleste
ro l, kemudian dilarutkan dengan kloroform dalam be-
ker glass, larutan dipindahkan kedalam labu ukur
100 ml la lu ditambah kloroform sampai garis tanda.
3.6.2. Penyiapan larutan sampel.
Ekstrak kering dari sampel dilarutkan dengan
Kloroform secukupnya kemudian dipindahkan kedalam
labu ukur 5 secara kuantita tif, selanjutnya d i
tambah kloroform sampai garis tanda.
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
28
3*6.3» Penentuan pan.iang gelombang maksimum kolesterol de
ngan Densitometri,
Noda dari standart kolesterol y«tng dihasilkan
dari penyiapan kromatografi lapisan t ip is seperti
3 «5 * tersebut diatas dilakukan pengukuran harga ab-
sorpsinya pada panjang gelombang 370 nm sampai 700
nm. Panjang gelombang maksimum cJi tun jukkan oleh har
ga absorpsi tertinggi atau puncak kromatogram yang
paling tinggi.
3.6.4* Penetapan kadar stero l to ta l dengan Densitometri,
Pada setiap lempeng ditotolkan larutan pemban
ding kolesterol seoanyak empat t i t ik dan larutan
sampel sebanyak enam t i t ik . Setelah dieluasi dengan
eluen heksan : e t i l asetat = 7 :3 , aikeringkan pada
suhu kamar dan disemprot dengan penampak noda asam
su lfat pekat ; metanol = 1:1. Selanjutnya dikering-
kan dalam lemari pengering, kemudian diamati luas
area dari masing-masing noda kromatogram pada pan
jang gelombang maksimum dengan koefisien (SX) = 3
dimana merupakan hasil penelitian 11 posisi l in ia r i-
zer " untuk mendapatkan hubungan yang l in ie r antara
konsentrasi dengan luas area kurva.
3.7. Cara penetapan kadar solasodina dengan Densitometri.
3*7.1. Pembuatan larutan baku solasodina 1000 ppm.
Ditimbang dengan seksama 0,100 gram solasodi
na, kemudian selanjutnya dilakukan seperti 3 *6. 1 .
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
3.7 .2 . Penyiapan larutan sampel.
Dilakukan seperti 3*6.2.
3 .7 .3 . Penentuan pan.lang gelombang maksimum solasodina de
ngan Densitometri.
Digunakan standart solasodina, selanjutnya di
lakukan seperti 3 «6 .3 »
3 . 7 .4 . penetapan kadar solasodina dengan Densitometri.
Pada setiap lempeng ditotolkan larutan pemban
ding solasodina sebanyak empat t i t ik dan larutan
sampel enam t i t ik . Setelah dieluasi dengan eluen
kloroform ; metanol = 19:1, dikeringkan pada suhu
kamar dan disemprot dengan penampak noda Dragenaorf
Spray. Kemudian diamati luas area dari masing-ma
sing noda kromatogram pada panjang gelombang maksi
mum.
3*8* Analisa data.
Dari data luas arae Kromatogram larutan baku
yang didapat, ditentukan persamaan garisnya dimana
x = jumlah (ug) larutan baku dan y a luas area kroma
togram. persamaan garis yang didapat y = Bx + A. Jum
lah (ug) larutan sampel dapat d icari setelah dimasuk
kan kedalam persamaan garis in i, dimana y = luas area
larutan sampel sehingga didapatkan jumlah (ug) laru
tan sampel sebagai x.
29ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
Gambar 1. Daun dan Bunga dari tanaman Solanum w rightii Benth.
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
31
Gambar 2. Tanaman solanum w righ tii Benth.
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
/
BAB IV
HASIL PENELITXAN
1. HaslX penyiapan bahan penelitian ( penimbangan serbuk.
penetapan susut pengeringan ) daun tanaman Solanum wrieh.
t i i Benth dalam berbagal in terva l waktu.
Hasil penimbangan serbuk dan penetapan susut pengeringan
daun tanaman Solanum wriKhtii Benth dalam berbagai in ter
val waktu pengambilan dapat d ilih a t pada Tabel 1 ,
Tabel 1
Hasil penimbangan serbuk dan penetapan susut pengeringan daun tanaman Solanum w righ tii Benth d^lam berbagai in ter val waktu pengambilan.
VSTP(pukul)
pengambilan I Pengambilan I IKD BSB
(gram)SP
(#)BSK
(gram)BSB.
(gram)SP(#)
BSK(gram)
06.00 tua 3,001 9,581 2,7153 3,001 10,421 2,6883muda 3,002 10,339 2,6910 3,000 10,020 2,6994
09.00 tua 3,002 9,960 2,7030 3,001 10,379 2,6895muda 3,001 9,419 2,7183 3,001 10,379 2,6895
12.00 tua 2,999 10,040 2,6979 3,001 10,579 2,6635muda 3,001 10,978 2,6716 3,001 9,960 2,7021
15.00 tua 3,001 9,381 2,7135 3,002 10 ,442 2,6885muda 3,002 9,820 2,7072 3,002 9,960 2,7030
18.00 tua 3,002 10,178 2,6965 3,000 10,220 2,6934muda 3,001 9,381 2,7117 3,002 9,562 2,7150
21 .00 tua 3,001 10,359 2,6901 3,001 10,241 2,6937
| muda 3,000 9,780 2,7066 3,001 9,381 2,7195
Keterangan ;WP = tfaktu pengambilan ; KD = K riteria daun ; BSB = Berat serbuk basah; SP = Susut pengeringan ; BSK = Berat serbuk kering.
32
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
/
33
2. Hasil pemeriksaan fase petroleum eter dengan Kromatogra
i i Laplsan 2i.pis.
Hasil pemeriksaan fase petroleum eter dengan Kromatogra
f i Lapioan H p is dapat d ilih a t pada Garabar 3«
o4.o© os-oo w o o ie.oo iJoc ak.oo ia-» u-oo<
i
Gambar 3* Hasil u ji Kromatografi Lapiean Ttpis fase petroleum eter daun Solanum w rlgh tii Benth dengan pem banding kolesterol«Fase gerak = Eekean : e t i l asetat (7 :3 ) penampak noda = Asam su lfat pekat ; metanol
(1:1 )St = Kolesterol ( warna noda = ungu merah,
Rf = 0,71 )S = Sampel ( warna noda = ungu merah ,
Rf = 0,71 )
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
3* Hasil pemeriksaan fase kloroform dengan Kromatografi
Lapisan 21 p is♦
Hasil pemeriksaan fase kloroform dengan Kromatografi
Lapisan Tipis dapat d illh a t pada Gambar 4 .
3*+
Gambar i*. Hasil h ji Kromatografi Lapisan ELpis fase kloro form daun Solanum w righ tii Benth dengan pemban- ding solasodina,Fase gerak = Kloroform : metanol (1-9:1)penampak noda = Dragendorf SpraySt = Solasodina ( warna noda = ungu merah )S = Sampel
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
35
i+. Hasil penetapan kadar s tero l to ta l dengan Densitometri.
i f . l . Penentuan pan.iang gelombang maksimum.
Dari hasil penentuan panjang gelombang maksimum de
ngan menngunakan pembanding kolestero l didapatkan pan
jang gelombang maksimum yaitu 393 nm. Hasil dapat d i-
lih a t pada Gambar 5*
Gambar 3
Hasil penentuan panjang gelombang maksimum standart kolesterol yang diukur pada panjang gelombang 370 nm sampai 700 nm secara. Densitometri*
t?* **¥
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
36
4.2. Hasil penetapan. kadar stero l to ta l sain pel fase petro
leum eter daun tua Solanum. wri^htii Reath- Penaambi-
lan_X.
Hasil penetapan kadar s te ro l to ta l sampel fase petro
leum eter daun tua Solanua vjri.ghtii Benth, pengaznbi-
lan I yang dilakukan pengukuran tiga ka li dengan men
gunakan standart kolesterol ( jumlah penotolan seki-
tar 2 ug, 4 ug, 6 ug, 10 ug, 12 ug dan 14 ug ) dapat
d ilih a t pada Garnbar 6, 7, a, 9, 10 dan 11 serta Tabel
2 , 3 dan 4»
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
37
Gambar b
Kurva kromatogram dan luas area krotnatogram hasil pen^uku- ran sampel fase petroleum eter daun tua Solanum wri;,htii Benth ( pengambilan I , putcul 06.00, 09.00, 12.00, 15-00,18.00 dan 21.00 pada Pengukuran I .
54 A
t 7i Jl
3I i ' ■2 i| I ! f |
A I i| '1 I M ! !A. /\ M ! M . ‘
10K
8* * 11V l\» ! r' : 1 I!
I\II
r f r M • -I'U KJ W
U ' - »i0NO.
10
i o7, r-i
.! ' - I
' A
li i 2 \ -i iO
13
Keterangan :1, Z 9 3> 5 = Standart ko lestero l.
7, 8, 9> 10 = Sampel (pukul 06.00, 09.00, 12.00, 15.00 dan 18.00)
M I L I Kf e r p u s t a k a a w
•UNIVERSLTAS A1RLANGGA" S U R A B A Y A
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
33
Gambar 7
Kurva baku larutan standart kolesterol (ug) terhadap luas area pada pengukuran I penetapan kadar sampel fase petroleum eter daun tua solanum w righ tii Benth.
Kurva baku in i didapatkan dari data luas area kroma-
togram Gambar 6 dari a lat Densitometer dengan persamaan ga
r is regresi sbb. ;
y = 2697,1129x + 21b5,bl02
r = 0 ,99^
r tabel = 0,tt78 <* = 5%
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
/
39
Tabel 2
Hasil penetapan kadar stero l tota l sampel fase petroleum eter daun tua Solanum w rightii Benth, Pengambilan X pengukuran I dalam in terva l iwaktu yang berbeda secara Densitome t r i .
Waktupengambilan
(pukul)
Juwlah sterol to ta l
(ug) *
Kadar stero l tota l dalam sampel
(mg/g)
06,00 12 , 000^ 1,474209.00 14,2899 1,057312.00 8,8923 0,624015.00 7,7122 0,947418.00 12,5918 1 ,5566
Catatan :* Didapatkan dari persatnaan garis regresi pada Gambar 7
( contoh perhitungan lih a t lampiran 4 )
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
Gambar 6
Kurva kromatogram dan luas area kromatogram hasil pengUKU-
ran sampel fase petroleum eter daun tua Solanum w rightli Benth ( Pengambilan I , pukul 06.00, 09-00, 12.00, 15.00,18.00 dan 21.00 ) pada pengukuran I I .
Al l
i !
t
\J \J y - " ' J \J \Jj
V— 0...
.-c>. ;oo i i
! aHE MO, 1
NO. V Pus,
n . i?'ri, £41. t
1 j , ?•> 116,6 131.8 i >•-; f, t h
HKf-H
i , 92
■. 1 ? 45?40r 673*43.3, 63
MSfiK
! G7&L
i» 2 . 3 , k 5, 6, 7, 8, 9, 10 =
Keterangan :Standart ko lestero l.Sampel (pukul 06.00, 09.00, 12.00, 15.00, 18.00 dan 21.00)
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
Gambar 9
Kurva baku larutan standart Kolesterol (ug) terhadap luasarea pada Pengukuran I I penetapan kadar sampel fase petroleum eter daun tua solanum wriahtii Bentlu
Kurva baku in i didapatkan dari data luas area kroma-
togram Gambar 8 dari a lat Densitometer dengan persamaan ga
r ie regresi sbb. :
y = 2309,b908x + 2746,3815
r = 0,9903
r tabel = 0.»50
<b= 5*
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
Hasil penetapan kadar stero l to ta l sarapol fase petroleum eter daun tua Solanua wriKhtii Benth, pengambilan I pengukuran I I dalam in terva l waktu yang berbeda secara Densitc- a e tr i.
Tabel 3
Waktupengambilan
(pukul)
Jumlah sterol to ta l (ug)*
Kadar stero l tota l dalam sampel
(mg/S)
06.00 8,1614 1,507509.00 11,2521 1,040712.00 18,6572 0,8b4415.00 9,7803 1,201418.00 12,8785 1,592021.00 7,7087 1,4328
Catatan :* ddap&tkan dari persamaan garis regresi pada Gambar 9
(. contoh perhitungan lih a t lampiran 4 )
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
/
Gambar 10
Kurva kromatogram dan luas area krornato^ram hasil penguku- ran sampel fase petroleum eter daun tua Solanum wriKhtii Benth ( Pengambilan I , pukul 06.00, 09.00, 12*00, 15.00,18.00 dan 21.00 ) pada pengukuran I I I .
I.CQ—j
j
7A2 r| m iM I n a If n |K
, A i w U U - J l I! !\ n ! \jp .
1.-:
L_ *.««>*
1, 2, 3i 4 = Standart kolestero l.5, 6, 7, 8, 9, 10 =s Sampel (pukul 06.00, 09.00, 12.00,
15.00, 18.00 dan 21.00)
Keterangan :
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
Gambar 11
Kurva baku larutan standart kolestero l (ug) terhadap luasarea pada Pengukuran I I I penetapan kadar sampel fase petroleum eter daun tua solanum w righ tii Benth*
.1I I ) /ill --------
Kurva baku in i didapatkan dari data luas area kroma
togram Gambar 10 dari alat Densitometer dengan persamaan
garis regresi sbb. :
y = 2l63,1Mt5x - 335,7^1
r = 0,9952
r tabel = °>950
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
45
Hasil penetapan Kadar s tero l tota l sampel t'ase petroleum eter daun tua Solanum w rightii Renth, Pengambilan I pengu- kuran I I I dalam in terva l waktu yang berbeda secara Densito metri*
Tabel 4
Waktupengambilan
(pukul)
Jumlah sterol to ta l (Ug)*
Kadar s tero l tota l dalam sampel
(mg/S)
06.00 6,6059 1,217209.00 6,3806 1,180312.00 10,9185 0,809415.00 6,6406 1,223613.00 8,6442 1,602921 .00 5,2419 1,9486
Catatan :
* Didapatkan dari persamaan garis regresi pada Gambar 11 ( contoh perhitungan lih a t lampiran 4 )
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
t
46
4«3* Hasil penetapan kadar stero l tota l sampel fase petro
leum eter daun muda Solanum w rightii Benth. Pengambi-
lan I .
Hasil penetapan kadar stero l tota l sampel fase petro
leum eter daun muda Solanum w righ tii Benth, Pengambi
lan I yang dilakukan pengukuran dua k a li dengan rneng-
gunakan standart kolestero l ( jumlah penotolan seki-
tar 2 ug, 6 ug, 10 ug dan 14 ug ) dapat d ilih a t pada
Gambar 12, 13, 14 dan 15 serta Tabel 5 dan 6.
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
k7
Kurva kromatogram dan luas area kromatogram hasil pengukuran sampel fase petroleum eter daun mud Solanum wri^htii Benth ( Pengambilan X, Pukul Ob.00, 09.00, 12.00, 15.00,18.00 dan. 21.00 ) pada Pengukuran I .
Gambar 12
_r-.o-ar*
_ I , Oi'O
J \
: ^ - l A 1 ..-V"7 .1! i ,V - U •" 1
. - 0.
t
Lf\Ht NO, 1
HO.
Cl10
i1 PCS.
11. S' . 1
40, 155 >;7 0. 3!-,S,
161. 111? . 6 < *1 i'*r l".1 •:! “ 1 C'1 44 » 3
H l*. —
3 U-;-'J ?0’.\ 4
"ii' ’ o'*1i5S9i:i1k*3;:-
9W4 j 0 fX;
r4 S. 0
1, h" ,
12. 16. 16. i 9, 11. 10,5 . 4
'■J 1 HL ii:..-il 1
U 2, 3, k
5» 6, 7, 8, 9, 10
Keterangan :Standart ko lestero l.Sampel (pukul 06.00, 09.00, 12.00,15.00, 18.00 dan 21.00)
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
48
32,0
30,0
A 2G,0• 26,0 iJ 2't,0! 23,0 i
"£> 20,0 ‘ 13,0
I 16,0W3 1£*»°
12, 0
1 0 ,0
6,0
6;.o
4.0
Gambar 13
Kurva baku larutan standart kolesterol (ug) terhadap luasarea pada Pengukuran I penetapan. kadar sampel fase petroleum eter daun muda Solanum w righ tii Benth.
,JumL-ih ( ) ------- ►
Kurva baku in i didapatkan dari data luas area kroma-
togram Gambar 12 dari a lat Densitometer dengan persamaan
garis regresi sbb. :
. y = 22I9,4502x - 2278,0236
r = 0,9976
r tabel = ° » 950</■= 5#
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
Easil penetapan kadar sterol total sampel fase petroleum
eter daun muda Solanum wriahtii Benth, Pengambilan I pengu
kuran I dalam interval waktu yang berbeda secara Densitome
tri.
Tab e l 5
Waktu
pengambilan
(pukul)
Jumlah sterol
total
(ug)*
Kadar sterol total
dalam sampel
(mg/s)
06.00 8,6524 0,803809.00 15,5297 0,7 H I12.00 9,9885 0,373915.00 8,6825 0,534518.00 5,1S56 0,6374oo•OJ 5,9819 0,7367
Catat&n :
* Didapatkan dari persamaan garis regresi pada Gambar 13( contoh perhitungan lin a t lampiran 4 )
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
50
Gambar H
Kurva kromatogram dan luas area kromatogram hasil pengukuran sampel fase .petroleum eter daun muda Solanum w righ til Benth ( pengambilan I , pukul 06.00, 09.00, 12.00, 15.00 ,18.00 dan 21.00 ) pada Pengukuran IX.
5i\
7 8
I I i
10
i n !\
!\
11
i'i
i A'.\
•l i. •'\JV — ' ■ - /
V|-i . t
HO, V . P O S .
n
v?i
i lb 131 1-i':i
i I'-:.4y
I?o£i
1 7343 u 2 i£
1.4 £. •? 1,1 J t f 1.1 C' p O
10,3 5,6 b - 7
U I hit 1 i"31 '<9. 6Keterangan :1, 2, 3, 4 = Standart ko lestero l.5> 6, 7, 8, 9> 10 = Sampel (pukul 06.00, 09.00, 12.00,
15.00, 18.00 dan 21.00).
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
51
Gambar 15
Kurva baku larutan standart kolesterol (ug) terhadap luasarea pada Pengukuran XI penetapan kadar sampel fase petroleum eter daun muda Solanum w righ tii Benth.
Kurva baku in i didapatkan dari data luas area kroma-
togram Gambar 14 dari a lat Densitometer dengan persamaan
garis regresi sbb. :
y = 2055,7094* - 1257,0021
r = 0,9993
r tabel =0.950
& = 3%
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
5a
Hasil penetapan kadar s tero l to ta l sampel fase petroleum eter daun muda Solanum w righ tii Benth, Pengambilan I pengu kuran IX dalam in terva l waktu yang berbeda secara Densitome t r i .
Tabel 6
Waktupengambilan
(pukul)
Juralah stero l to ta l (uiO*
Kadar s tero l to ta l dalam sampel
(mg/g)
06.00 10,0299 0,931809.00 16,3090 0,750012.00 10,9754 0,410815.00 9,3398 0,575018.00 5,3501 0,6576oo•<3 6,3341 0,7801
Catatan :* Didapatkan dari persamaan garis regresi pada Gambar 15
( contoh perhitungan lih a t lampiran 4 )
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
53
4.4. Hasil penetapan kadar stero l to ta l sampel fase petro-
leum eter daun tua;, solanum w righ tii Benthf Pengambi
lan I I .
Hasil penetapan kadar s tero l total- sampel fase petro
leum eter daun tua Solanum w righ tii Benth, Pengambi
lan I I yang dilakukan pengukuran dua k a li dengan m»n£
gunakan standart kolestero l ( jumlah penotolan seki-
tar 4 ug, 6 ug, 10 ug dan 14 ug ) dapat d ilih a t pada
Gambar 16, 17, 18 dan 19 serta Tabel 7 <ian 8.
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
Kurva kromatogram dan luas area kromatogram hasil pengukuran sampel fase petroleum eter daun tua Solanum w righ tii Benth ( pengambilan I I , pukul Ob.00, 09*00, 12.00, 15*00,18.00 dan 21.0 0 ) pada pengukuran I .
5**
Goubar. 16
r
a .
....1 2
>jJ- K
\
i \10
jO. j : o » S -1 . 7
L A N E f* 0 - t
N O . V P L -: - R R E N'lRf*. V
1 2 1 , 1 f " i ' ~ . • • «, h.f-'i 7.. t
z 1 . 35 4. 4.Jt 51. 1 . 15 (.4 **i [;• 1 O'? 11.5 i-jf' | 1 ?:iU33 . 4i'i 12.
•3-;. r, 1 *083 • 5 ? 11. ii l l . 1 31362 . 39 1?. "71 2 =:. 19228 . 1 i' 11. £
Q i n , 1 22440 . 7-1 • 13. i~i10 156. t. 6 6 4 ?. . 5? 4 , 0
TDK L 162023 '*
Keterangan :1, 2, 3, 4 = Standart kb l^stero l.
6, 7, 8, 9, 10 » Sampel (pukul 06.00, 09.00, 12.00,
15.00, 18.00 dan 2 1 .00)
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
Luas
ar
ea
55
Gambar 1?
Kurva baku larutan standart kolesterol (ug) terhadap luasarea pada Pengukuran I penetapan kadar sampel fase petroleum eter daun. tua Solanum w righ tii Banth.
Kurva baku in i didapatkan dari data luas area kroma
togram Gambar 16 dari a lat Densitometer dengan persamaan
garis regresi sbb. :
y = 1330,3935* - 538,5620
r = 0,9990
r tabel = 0,950 d-= 5%
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
56
Hasil penetapan kadar stero l to ta l sampel fase petroleum eter daun tua Solanum w righ tii Benth, pengambilan I I pengu kuran. I dalam in terva l waktu yang berbeda secara Densitome t r i .
Tabel 7
Waktu
pengambilan
(pukul)
Ju.*alah sterol to ta l(ug)*
Kadar stero l tota l dalam sampel
(mg/g)
06.00 15,5833 1,932209.00 H.7491 1,371012.00 23,9785 1,116915.00 14,8578 1,105318.00 17,2725 1,6032oo.c\i 5,3970 2,0036
Catatan ;* Didapatkan dari persamaan garis regresi pada Gambar 1?
( con.toh perhitungan lih a t lampiran 4 )
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
57
Kurva kromatogram dan luas area kromatogram hasil penguku- ran sampel fase petroleum eter daun tua Solanum w rightii Benth ( Pengambilan. IX, pukul 06.00, 09.00, 12,00, 15.00, 18*00 dan. 21*00 ). pada Pengukuran I I .
Gambar 18
5, 6, 7, 8, 9, 10 = Sampel (pukul 06.00, 09.00, 12.00,15*00, 18.00 dan 2 1 . 00)
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
58
Gambar 19
Kurva baku larutan standart kolestero l (us) terhadap luasarea pada Pengukuran I I penetapan kadar sampel fase petrgleum eter daun tua Solanum w righ tii Benth.
Kurva baku in i didapatkan dari data luas area kroma-
togram Gambar 18 dari a lat Densitometer dengan persamaan
garis regresi sbb. :
y s 749,6668x + 6^0,1238
r = 0,9838
r tabel = °*950
= 5%
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
59
Hasil penetapan kadar stero l to ta l sampel fase petroleum eter daun tua Solanum w righ tii Benth, Pengambilan I I pengu kuran I I dalam in terva l waktu yang berbeda secara Densitome t r i .
Tabel 8
Waktupengambilan
(pukul)
Jumlah sterol to ta l (ug)*
Kadar stero l tota l dalam sampel
(mg/s)
06.00 14,3914 1,784409.00 24,4706 1,5164ia.oo 12,8 142 0,955015.00 15,6588 1,456118.00 5,2496 1,9490oo.C\j 8,4495 3,1368
Cat a tan :* Didapatkan dari persamaan garis regresi pada Gambar 19
( contoh perhitungan lih a t lampiran 4 )
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
60
4.5. Hasil penetapan kadar s tero l to ta l sampel fase petro
leum eter daun muda Solanum w righ tii Benth. PeaKambi-
Hasil penetapan kadar s tero l to ta l sampel fase petro
leum eter daun muda Solanum w righ tii Benth, Pengambi
lan XX yang dilakukan pengutcuran dua ka li dengan men£
gunakan standart kolesterol ( jumlah penotolan seki-
tar 2 ug, 6 ug, 10 ug, 12 ug dan 14 ug ) dspat d i l i -
hat pada Gambar 20, 21, 22 dan 23 serta Tabel 9 dan
10.
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
61
Gambar 20
Kurva kromatogram dan luas area kromatogram hasil pen&uKu- ran sampel fase petroleum eter daun muda Solanum v/riahtii Benth ( pengambilan I I , pukul 06.00, 09.00, 12.00, 15*00,18.00 dan 21.00.) pada Pengukuran I .
... l A j y m m m m
> r: <•. 0 lOO. f> 'tTO.O 194.6
" n o . i
NO. V pi. 'r, hREr HhPK
1 i , -1 4?5 .12S 9 .55:>17.3C 6 . i
41 . 9 8 . 9"? 1 0 . 64 j i , 4 1 2859. 6 f:' 15,25 72 4 4 *?c c-t- 1.'. ■ 1 1 * 1 0 . 6
7 , f- 13335 .3 * ‘ 15 .71 ^ . 4 10574.32 12 .4l i t , 4 9432 .^5 1 1 . 2171.4 r' 3 7?. t*:3 8 . 7
1 0 145.5 ?229.^3 8 .5
lOTHL 244 * 1 . 6
Keterangan :1, 2, 3, 4 = Standart ko lestero l.5, 6, 7, 6, 9, 10 = Sampel (pukul 06.00, 09.00, 12.00,
15 .00, 18.00 dan 2 1 . 00) .
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
62
Gambar 21
Kurva baku larutan standart kolestero l (ug) terhadap luasarea pada Pengukuran I penetapan kadar sampel fase petroleum eter daun muda Solanum w righ tii Benth.
••a
cG0>U
W3.J
Kurva baku in i didapatkan dari data luas area kroma
togram Gambar 20 dari a lat Densitometer dengan persamaan
garis regresi sbb* :
y = 1021,6292x
r = 0,9986
r tabel = °>950
+ = 5*
- 1282,7637
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
63
label 9
Hasil penetapan. kadar stero l to ta l sampel fase petroleum eter daun muda Solanum. w righ tii Benth, pengambilan I I pe- ngukurazi I dalam in terva l waktu yang berbeda secara Densi- tometri.
Waktupengambilan
(pukul)
Jumlah stero l to ta l (ug)*
Kadar s tero l to ta l dalam sampel
(ms/g)
06.00 10,0412 1,859909.00 14,3086 1,330012.00 11,5669 1,070215.00 10,5373 1,299518.00 a ,4733 1,560521.00 8,3316 3,0636
Catatan :* Didapatkan dari persamaan garis regresi pada Gambar 21
( contoh perhitungan lih a t lampiran 4 )
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
Gambar 22
Kurva kromatograia dan luas area kromatogram hasil pengukuran sampel fase petroleum eter daun muda Solanum wriKhtii Benth ( pengambilan XI, pukul 06.00, 09.00, 12.00, 15.00,18.00 dan 21.00 ) pada pengukuran I I .
Keterangan :
1* 2, 3, 4 = Standart ko lestero l.5* 6, 7, 8, 9* 10 = Sampel (pukul 06.00, 09.00, 12.00,
15.00, 18.00 dan 21.00).
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
65
Gambar 23
Kurva baku larutan standart kolestero l (ug) terhadap luasarea -pada Pengukuran I I penatapan kadar sampel fase petrolsum eter daun muda solanum w righ tii Benth.
I
Kurva baku in i didapatkan dari data luas area kroma-
to^ram Gambar 22 dari a lat Densitometer dengan persamaan
garis regresi sbb. :
y = 1230,0605x - 23,334
r =0,9995
r tabel = ° » 9 5 0
= n
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
66
Hasil penetapan. kadar stero l to ta l sampel fase petroleum eter daun muda Solanum wr ig h t i i Benth, Pengambilan I I pengukuran I I dalam in terva l waktu yang berbeda secara Densi tometri.
Tabel 10
Waktupengambilan
(pukul)
Jumlah stero l to ta l (ug)*
Kadar s te ro l total dalam sampel
(mg/g)
06.00 9,8906 1,832009.00 13,4750 1,252612.00 10,8868 0,805815.00 9,6050 1,184518.00 7,1924 1,3246oo•rvj 6,6399 2,4416
Catatan ;* Didapatkan dari persamaan garis regresi pada Gambar 23
( contoh perhitungan lih a t lampiran if )
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
67
5. Hasil penetapan kadar k lo ro f i l to ta l daun Solanum wri
t i i Benth dalam in terva l waktu yang berbeda secara spek
trol'otom etri.
Hasil penetapan kadar k lo ro f i l tota l dari daun Solanum
w righ tii Benth secara spektrofotometri aalarn berbagai
in terva l waktu yang berbeda dapat d ilih a t pada 'label 11
untuk pengambilan sampel I dan Tabel 12 untuk pengambi
lan sampel I I .
Tabel 11
Hasil penetapan kadar k lo ro f i l tota l daun Solanum wriah t i i Benth dalam berbagai in terva l waktu yang berbeda se Cara spektrofotometri, pengambilan X.
Waktupengambilan
(pukul)
K r ite r iadaun
Kadar rata^rata . k lo r o f i l to ta l
(mg/g)
06.00 tua 1 ,3854muda 1 ,k7kd
09.00 tua 1,6526muda 1,8637
12.00 tua 1,3899muda 1,7747
15.00 tua 2,0398muda 2,1959
18.00 tua 1,7186muda 1,689Voo«c\j tua 1,9676muda 2,0258
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
68
Hasil penetapan kadar k lo ro f i l tota l daun Solanum wriKh t i i Benth dalam berbagai in terva l waktu yang berbeda se cara spektrofotometri, pengambilan I I .
Tabel 12
Waktu
p e n g a m b i l a n
(pukul).
K r i t e r i a
d aun
K a d a r r a t a - r a t a
k l o r o f i l total
(mg/g)
06.00 tua 1,4438m u d a 1,6106
09.00 tua 1,6738m u d a 1,7328
12.00 tu a 1,1183m u d a 1,4618
15.00 tua 1,8270m u d a 1,9339
18.00 tua 1,4186mu d a 1,7219
oo•fvj t ua 1,8291muda. 1,9094
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
69
6. Pengolahan data.
Untuk mengetahui p ro l'il perbedaan kadar s tero l tota l
dari sampel fase petroleum eter daun tua maupun daun mu
da Solanum w righ tii Benth dalam berbagai in terva l waktu
maka dapat d ilih a t pada Gambar 24 , 25* 26 dan 27.
Sedangkan untuk melihat p ro f i l kadar k lo ro f i l tota l dan
kadar stero l to ta l dari sampel daun tua maupun daun mu
da Solanum w righ tii Benth dalam berbagai in terva l waktu
dapat d ilih a t pacta Gambar 28, 29, 30 dan 31.
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
Kadar
rata«rata
sterol
total
(mg/g)
70
Gambar Zk* Kurva waktu pengambilan (pukul) terhadap kadar rata-rata s te ro l to ta l (mg/g) dari sampel daun tua tanaman Solanum w righ tii Benth, pengambilan l «
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
Kada
r ra
ta-r
ata
ster
ol
tota
l £m
g/g)
71
2 ,8 -
2 , 6 -
2 ,4 ’
2 ,2 -
2 ,0 -
1,8 -
1 ,6 -
1,4 '
1,2 '
1,0 •
. 0,8 '
0,6 -
0,4 '
0,2 -
03.00 06.00 09.00 12.00 15.00 18.00 21.0 0Waktu pengambilan (pukul)
Gambar Z5 • Kurva waktu pengambilan (pukul) terhadap kadar rata-rata s te ro l to ta l (mg/g) dari sampel daun tua tanaman Solanum wrlKhtli Benth, Pengambilan X I•
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
Kada
r ra
ta-r
ata
ster
ol
tota
l (m
g/g)
7^
Waktu pengambilan (pukul)
Gambar z£> ♦ Kurva waktu pengambilan (pukul) terhadap kadar ra ta -ra ta s te r o l to ta l (mg/g) dari sampel daun muda tanaman Solanum w r ig h t i i Benth, Pengambilan I .
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
Kada
r ra
ta-r
ata
ster
ol
tota
l (m
g/g)
/73
Waktu pengambilan. (pukul)
Gambar 27* Kurva waktu pengambilan (pukul) terhadap kadar ra ta -ra ta s t e r o l to ta l (mg/g) dari sampel daun muda tanaman Solanum w r lK h tll Benth, Pengambilan I I .
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
?k
06.00 09.00 12,00 15.00
Waktu pengambilan18.00 21,00
(pukul)
Gambar 28. Histogram kadar rata-rata s te ro l to ta l (£222) dan kadar rata-rata k lo ro i'il tota l ( C I), dalam berbagai in terva l waktu dari sampel daun tua tanaman solnnnm w righ tii Benth, Pengambilan I .
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
Kadar
rata-rata
(mg/g)
75
3.0
2,8
2,6
2.4
2,2
2.0
1,8
1,6
1.4
1,2
1,0
0,8
0,6
0,4
0,2
0
Waktu pengambilan (pukul)
Gambar* 29. Histogram kadar rata-rata s tero l to ta l) dan kadar rat&*rata k lo r o f i l to
ta l ( 1 \\ dalam berbagai in terva l vak- tu dari sampel daun tua tanaman Solanum wriRhtil Benth, Pengambilan I I .
06.00 09.00 12.00 15.00 18.00 21.00
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
Kada
r ra
ta-r
ata
(mg/
g)
76
3.0
2,8
2,6
2.4
2,2
2.0
1,8
1,6
1.4
1 ,2
1,0
0,8
0,6
0,4
0,2
0
Gambar 30 . Histogram kadar rata-rata s te ro l to ta l) dan kadar rata-rata k lo r o f i l to
ta l ((_ .J) dalam berbagai in terva l waktu dari sampel daun muda tanaman Solanum w righ tii Benth, Pengambilan I .
Waktu pengambilan (pukul)
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
(S/Sm)
77
3.0
2,8
2,6
2.4
2,2
2.0
1,8
1,6
1.4
« 1,2 •33 i ,o
0,8
0,6
0,4
0,2
0
Gambar 3-1 • Histogram kadar ra ta -ra ta s t e r o l to ta l) dan kadar ra ta -ra ta k lo r o f i l to
ta l ( I n dalam berbagai in te r v a l waktu dari sampel daun muda tanaman so la num w r iK h tii Benth, Pengambilan I I .
Waktu pengambilan (pukul)
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
PiMBAHASAN
BAB V
Dalam penelitian in i digunakan bagian daun karena
berdasarkan hasil penelitian terdahulu terhadap tanaman
Solanum species dilaporkan bahwa biosintesa solasodina ber
langsung di daun dan hasil biosintesa solasodina tersebut
dipindah ke ouah sebagai tempat akumulasinya. (13) Dan ber
dasarkan penelitian selanjutnya dilaporkan pada daun Sola
num species juga mengandung alkaloida solasodina. (7 ) Se-
hingga dengan mengetahui kadar solasodina pada aaun diha -
rapkan dapat mengetahui waktu terjadinya biosintesa solaso
dina, akumulasinya serta ke«ndungan solasodina pada daun ta
naman Solanum w righ tii Benth* Dan dengan membedakan antara
daun tua dan daun muda dimaksudkan untuk mengetahui kemung
kinan pengaruh perbedaan kadar k lo r o f i l terhadap kandungan
solasodina.
Ekstraksi ternadap serbuk daun dilakukan tiga tahap.
Pada tahap pertama digunakan pelarut petroleum eter yang
diharapkan dapat menarik zat-zat yang dapat laru t dalam pe
troleum eter seperti s te ro l, leuiak dan l i l i n .
Tahapan selanjutnya adalah ekstraksi aengan aseton.
Setelah dilakukan ekstraksi dengan aseton untuk membebas -
kan solasodina dari ikatan dalam bentuk glikosidanya ( g l i
koalkaloida ) , dilakukan h ldro lisa dengan asam klorida 2 H
sehingga didapatkan solasodina dalam bentuk bebasnya dan
gula. Setelah itu dilakukan penetralan dengan penambahan
78
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
79
natrium hidroksida 10% sampai mendekati pH sepuluh untuk
mempertahankan solasodina dalam bentuk bebasnya sehingga
mempermudah penarikan solasodina selanjutnya dengan pela-
rut yang lebih polar yaitu kloroform.
Ekstraksi dengan kloroform dilakukan balk terhadap
f i l t r a t dari hasil h ioro lisa maupun residunya, oimana diha
rapkan akan aiaapatkan solasodina sebanyak-banyaknya (agar
eKstraksi sempurna).
Dari hasil u ji ku a lita tir dengan kromatografi lap i-
san t ip is terhadap fase kloroform ternyata tidak terdetek-
s i aaanya solasodina* Hal in i mungkin karena tidak adanya
se l-s e l knubus pada daun sebagai tempat akumulasi solasodi
na seperti pada s e l-s e l buah. Sedangkan dari hasil peneli-
tian Tarigan p. terhadap Solanum species yang la in dilapor
kan pada daun didapatkan kandungan solasodina. (7 ) Maka di
duga mekanisme akumulasi solasodina pada tanaman Solanum
w righ tii Benth berbeda dengan jen is tanaman Solanum yang
lainnya. Dan dari hasil penelitian Agus S. yang sedang ber
langsung terhadap ranting tanaman Solanum w rjgh til Benth
oilaporkan bahwa solasodina didapatkan pada pukul 12.00,
15*00, 18.00 dan 21*00. Berarti pada waictu tersebut solaso
dina yang dibiosintesa ui daun kemungkinan segera aipindah
kan ke buah sebagai tempat akumulasi melewati ranting.
Sedangkan dari hasil penetapan kadar k lo ro f i l dida
patkan peningkatan dan penurunan kadar k lo r o f i l pada in ter
val waktu pengambilan pukul 06.00, 09*00, 12*00, 15*00,
18.00 daa 21*00. Dan pada sampel daun yang mengandung klo-
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
50
r o f i l yang tinggi tetap tidak didapatkan kandungan solaso
dina. Hal in i tidak menunjukkaa hubungan antara kadar klo
r o f i l dengan. solasodina seperti penelitian Bnke a . dan
ELlert U. yang melaporkan pada kultur kalus Solanum dulca
mara dimana semakin. banyak kadar k lo ro f i l semakin mening-
kat kadar solasodina yang didapatkan. (11) Dan juga dari
hasil penetapan kadar stero l tidak didapatkan hubungan an
tara kadar stero l to ta l dengan kadar k lo ro f i l yang didapat
kan seperti te r lih a t pada histogram ( Gb. 28, 29, 30 dan
31 ) . Berarti kemungkinan k lo ro fi l hanya berpengaruh lang-
sung terhadap proses I'otosintesa, dimana dengan tingginya
kadar k lo r o f i l diharapkan proses fotosintesa akan ■ mening-
kat tetapi belum tentu d iiku ti proses biosintesa senyawa
metaboli't sekunder yang meningkat pula.
Hasil u ji k u a lita tif dengan kromatografi lapisan t i
pis terhadap fase petroleum eter didapatkan bercak noda da
r l sampel daun yang berwarna ungu merah setelah disemprot
dengan penampak noda asam su lfat pekat : metanol ( 1;t ) .
Dan senyawa yang berhasil d iid en tifik as i adalah senyawa go
longan stero l, sebab warna dan harga Rf dari noda sampel
sama dengan pembanding ko lestero l. Setelah dilakukan pengu
kuran kadar stero l to ta l dengan Densitometer didapatkan ha
s i l yang berbeda dari berbagai in terva l waktu pengambilan.
Kadar stero l total terendah didapatkan pada sampel dengan
pengambilan pukul 12.00 dan kadar stero l tota l tertingg i
didapatkan pada-sampel dengan pengambilan pukul 21.00, hal
in i te r jad i baik terhadap sampel daun tua maupun.-. sajnpel
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
81
daun. muda. Terjadinya penurunan kadar s tero l to ta l . pada
sampel dengan pengambilan pukul 12,00 kemungkinan disebab-
kan karena adanya proses biosintesa senyawa la in seperti
diosgenin, solasodina yang merabutuhkan . _senyaw^. go^Longan
s tero l untuk proses biosintesanya yang kemungkinan berlang
sung setelah proses fotosintesa sekitar pukul 12.00. Dan
terjadinya peningkatatt kadar stero l to ta l pada sampel de
ngan pengambilan pukul 21.00 kemungkinan disebabkan telah
berakhirnya proses biosintesa senyawa la in tersebut yang
memerlukan senyawa golongan stero l untuk proses -biosintesa
nya seningga terjad i peningkatan kadar stero l to ta l. K«.-
mungkinan la in adanya perbedaan kadar stero l to ta l tcarena
adanya mekanisme transport senyawa stero l dari daun ke ba-
gian la in dari tanaman untuk dibiosintesa menjadi senyawa
yang la in misalnya solasodina pada berbagai in terva l wak
tu yang berbeda.
■ Maka dugaan la in tidak terdeteksinya solasodina pada
daun tanaman Solanum w rightii Benth karena kemungkinan iada
nya transport senyawa stero l dari daun ke bagian la in dari
tanaman seperti buah, akar, ranting maupun batang yang se-
lanjutnya senyawa stero l tersebut dibiosintesa menjadi so
lasodina. Hekanisme in i serupa dengan mekanisme biosintesa
tomatin dimana dari daun ditransport s tero l yang selanjut-
nya dibiosintesa menjadi tomatin pada buah. (14)
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
BAB VI
KESIMPULAtf
Dari h a s il p en e lit ia n yang telah ailakukan dapat d±-
simpulkan ;
- pada daun tanaman Solanum w r ig h t li Benth. tidak terdetek -
e i adanya solasodina dengan u j i Kromatografi Lapisan £L-
p is .
- pada daun tanaman Solanum w r ig h t ii Benth didapatkan ka
dar ra ta -ra ta s te r o l to ta l terendah sebesar 0,3924 mg/g
pada sampel dengan pengambilan pukul 12.00 dan kadar ra
ta -ra ta s te r o l to ta l te r t in g g i sebesar 2,7526 mg/g pada
sampel dengan pengambilan pukul 21*00.
82
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
BAB V II
SABAN. - SARAN.
Dari h a s il.p e n e lit ia n yang te lah dilakukan dapat d i-
ajukan saran sebagai beriku t ;
- Perlu dilakukan p en e lit ia n le b ih la n ju t tentang kandung-
an senyawa s te ro id pada daun tanaman, Solanum w r ig h t ii
Benth untuk mempelajari b ios in tesa solasod ina le b ih lan
ju t .
83
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
RINGKASAH
Telah dilakukan penelitian terhadap daun tanaman
Solanum w righ tii Benth yang dilakukan pengambilan pada bu
lan Maret dan April 1990 dari Kebun Raya Cabang Purwodadi
Kabupaten Pasuruan, Jawa Timur.
Daun diambil dengan berbagai in terva l waktu pengambi
lan yaitu pukul 06.00, 09.00, 12.00, 15.00, 15.00 dan pu
kul 21.00. pengambilan daun dibedakan antara daun yang mu
da dan daun tua. Daun yang diperoleh dibersihkan dari koto
ran, dikeringkan dengan sinar matahari, ditumbuk dijadikan
serbuk kemudian diayak dan dilanjutkan ekstraksi.
Ekstraksi dilakukan dengan tiga pelarut, yaitu petro
leum eter, aseton dan kloroform. DLtimbang 3,000 gram ser-
buk daun Solanum w righ tii Benth, kemudian dimasukkan keda-
lam labu d ee tila s i 30 ml. Direfluks dengan 25 ml petroleum
eter selama dua Jam. setelah itu disaring dengan corong
Buchner, f i l t r a t yang didapatkan dikumpulkan sedangkan re-
s i du direflukfi kembali dengan 25 ml petroleum eter. Eks-
traksi diulang tiga ka li masing-masing selama dua jam.
FLltrat yang didapatkan (fase petroleum eter) dilaku
kan u ji k u a lita t if dan dilanjutkan dengan u ji kuan tita tif.
Residu direfluks kembali dengan 25 ml aseton selama dua
jam kemudian disaring melalui Corong Buchner, f i l t r a t di-
tampung, residu direfluks kembali dengan 25 ml aseton. Eks
traksi dengan aseton in i diulang tiga ka li masing-masing
selama dua jam.
84
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
85
Resiau hasil ekstraksi dengan aseton dihdrolisa de -
ngan asam klorida 2 N, dididihkan dan selanjutnya dinetral
kan dengan natrium hidroksida 10%. setelah netral disaring
dengan corong Buchner dan f i l t r a t yang didapatkan dieks -
traksi dengan kloroform menggunakan corong pisah. Ekstrak
s i dengan kloroform dilakukan pula terhadap residu hasil
h id ro lisa . Residu hasil h idrolisa in i ditambah sejumlah
tertentu kloroform sehingga residu tersebut terendam. Sete
lah diekstraksi selama dua jam make*. disaring melalui co -
rong Buchner. F ilt r a t yang didapat dicampur dengan f i l t r a t
hasil h idrolisa dan akhimya campuran f i l t r a t (fase kloro
form in i dilakukan u ji k u a lita t if.
Dilakukan penetapan susut pengeringan. bertujuanuntuk
memperhitungkan senyawa steroid yang d is e lid ik i dengan per
nyataan prosentase dari bobot kering bahan. BLtimbang ser
buk daun 0,500 gram kemudian dimasukkan kedalam krus porse
l in yang sudah ditimbang konstan. Kemudian dipanaskan di
lemari pengering pada suhu 105° C sampai bobot konstan.
Dilakukan pula penetapan kadar k lo ro f i l dengan menim
bang 0,100 gram serbuk daun dan dimasukkan kedalam beaker
glass 100 ml, tambahkan aseton kedalamnya sampai warna pa
da jaringan terlepas. Tambahkan kalsium karbonat, saring
ekstrak, masukkan labu ukur 100 ml. Bilas dengan aseton
sampai tidak berwarna dan tambahkan aseton sampai garis
tanda. BLukur absorpsinya pada panjang gelombang 66> nm
dan 645
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
86
Dari hasil u ji k u a lita t if dengan Kromatografi Lapis
an El.pis terhadap fas© kloroform, ternyata tidak terdetek-
s i adanya solasodina. Eluen yang digunakan adalah kloro -
form : metanol <19 : 1) dengan penampak noda Dragendorf
spray.
Pada u ji k u a lita t if dengan Kromatografi Lapisan Ti
pis terhadap fase petroleum eter digunakan eluen heksan :
e t i l asetat ( 7 : 3 ) dan penampak noda asam su lfat pekat :
metanol (1 : 1 ), didapatkan noda kromatogram yang berwarna
ungu merah seperti ditunjukkan standart ko lestero l. Sete -
lah dilakukan pengukuran harga Bf nya, kemudian dilan jut -
kan penetapan kadar stero l totalnya dengan Densitometri.
Hasil pengukuran fase petroleum eter secara kuantita
t i f dengan Densitometri menunjukkan hasil dimana terjad i
penurunan kadar s te ro l to ta l dari pengambilan pukul 06.00
sampai pukul 12.00, kemudian terjad i penlngkatan kadar ste
ro l to ta l la g i sampai pukul 21.00.
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
DAFTAR PUSTAKA
1. Sutarjadi, (1986), Usaha Eksplorasi Sumber Steroid dari
Tumhuhan, Simposium Penelitian Tumbuhan Obat V dan Ex p o
Jamu 1986, Surabaya, hal. 1-8.
2. Telek, K .L ., (1977), Economic Botany 51. pp. 120-128.
3* Anonim, (1982), Sinopsis seminar Nasional Produksi Ba-
han Baku Kontrasepsi Oral, BKKBN, Jakrta, hal. 1-3*
if. Hakim, A. Tatang., (1973), Prospek Alkaloid Sebagai Sum
bar Bahan Baku Hormon Steroid di Indonesia, Simposium
Penelitian Tanaman Obat I . Bagian Farmakologi Departe-
men F is io lo g i dan Farmakologi FKH IPB, hal, 103-109.
5. Berndt, (1982), S itostero l and Stigmastorol as Precur
sor fo r production of Contraceptives, Sinopsis Seminar
Nasional Produksi Bahan Baku Kontrasepsi Oral, rkkbn ,
Jakarta, p. 77.
6. Isnaeni, (1986), Optimasi Pertumbuhan Kalus dan Iden ti-
fikas i Steroid dari Solanum mammosum L ., Thesis. Univer
sitas Airlangga Surabaya, hal. 1-9, 37-39, 99.
7. Tarigan P ., (.1980), Beberapa Aspek Kimia Sapogenin d i-
Indonesia ( Dalam Ranska Mencari Bahan Baku S taro ld ) , penerbit Alumni Bandung.
8. Wahjudi, (1983), Pengaruh Diameter Buah solanum wrigh -
t i i Benth Terhadap Kadar Solasodina, Skripsi. Fakultas
Farmasi, Dniversitas Airlangga Surabaya.
87
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
9* Handayani R ., (1990), Percobaan Induksi Pembentukan So
lasodina pada Kultur Kalus Solanum _w righ tii Benth ,
Skripsi. Fakultas Farmasi, Universitas Airlangga Sura
baya.
10. Sulfiah A., 0989)> Ueaha percobaan Induksi pembentu-
kan Solasodina pada Kalus Solanum indicum L ., Skripsi.
Fakultas Farmasi, Universitas Airlangga Surabaya.
11. Emke A*, E ile rt U., (1986), Steroidal Alkaloids'an TLs
sue Cultures and Regenerated Plants o f Solanum dulca
mara. Plant Cell Reports 5. pp. 31-34.
12. N igra , H.M., et a l . , (1987), Production o f solasodina
by C a lli from D iffe ren t Parts o f Solanum e leagn ifo lium
Cav., P lan t C e ll Reports 6. pp. 135-137.
13* Chowdhury A .R ., Prasad R.N. and Aminuddin., (1979) ,
Quart J . Crude Drugs R es ., 17, (3 -4 ), PP. 137-138.
14. E lsad ig A .E ., and James G .R ., (1983), Biosynthesis and
Degradation o f -Tomatihe in Developing Tomato F ru its ,
Phytochem istry. V o l. 24, No.2, Great B r ita in , pp. 253-
257.
15. Backer C .A ., and Bakhuizen Van Den Brink R.C ., (1963),
Flora o f Java. Vol. 2, Angiospermae, N.V.P. Noordhoof-
Groningen-The Netherlands, pp. 472, 474*
16. Lawrence G.H.M., (1951), Taxonomy o f Vascular P lan ts .
The Macmillan Company, pp. 676, 693-694.
17. Xkan R ., (1969), Natural Products. Academic press, Lon
don, New York and San Fransisco, pp. 103-112.
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
18* Manitto P ., (1981), B iosintesis o f Natural Products,
E ll is Horwood Limited, England, p« 314*
19 . Tyler V.E., Brady L .R ., Robbers J .E ., (1976), Pharma
cognosy. seventh ed ition , Lea and Febiger, philadel -
phia, pp. 197-212.
20* Higuchi, Hanssen B., (1961), Pharmaceutical Analysis ,
Interscience Publishers, John Wiley & Sons, Mew York -
London - Sydney, pp. 119-125.
21. Windholz M., e t a l . , (197b), The Merck Index. An Ency
clopedia o f Chemical and Drugs, nine ed ition , Merck
and Co in c. Rahway New York USA.f &*+83»
22. Indrayanto G., (1983), Steroide und Triterpene in Ze ll
Kulturen, Fakultat Fur Chemie und pharmazie, der Eber
hard- Karls-Universitat zu Tubingen, p. , DLsserta-
tion .
23. Fessenden R .J ., Fessenden J .S ., (198*0, Klmla Q-rganik
J i l id dua. Edisi Kedua, Penerbit Erlangga, Jakarta ,
hal. W - « 0 .
2i*. Anonym, (1968), Merck index. An Encyclopedia of Chemi
cal Drugs, eight ed ition , Merck and Co inc. Rahway New
York USA.
25« Harborne J.B ., (1982), Phytochemical Methods , Chapman
and Hall, London, Toppan Company, Limited, Tokyo Japan
pp. 20if-208.
26. Claus E .P., Tyler V.E., Brady L .R ., (1970), Pharmacog
nosy. sixth ed ition , Lea and Febiger, Philadelphia ,
PP.
89
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
90
27* Heftman E., (1975)» Chromatography, third ed ition , Van
Nostrand Reinhold Company, New York, Cincinati Toron
to, London , Melbourne, pp. 81-82, 638-648*
28. Stahl E ., (1969)* Thin Layer Chromatography. Springer
International Student, second ed ition , Springer, Ver-
lag, Berlin , Heidelberg, New York.
29* Tauchstone, J . f sherma, J. (ED) , (1979), Densi tome try
in Thin Layer Chromatography, John W illey and. Sons ,
New York, pp. 18-22.
30. Shimadzu Corporation, Instrumental Manual, shimadzu Du
al Wavelength Thin Layer Chromato Scanner, Japan.
31. Mulya Muhammad, (1981), Pemakaian 11 Thin Layer Chroma
to-Scanner " Untuk Analisa Kuantitatif, Buie tin ISFI ,
Jatim, Tahun ke XV, 1, 2, hal. 8-12.
32. Bambang Soekarjo, Siswandono, (1980), Analisa Kuantita
t i f Dengan Kromatografi Lapisan H p is , Buietin ISFI ,
Jatim, Tahun ;ke X II, 1, 2, hal. 8-12.
33* Indrayanto G., Voelter and E. Reinhard., (1983), Stero
id Und Triterpen in Ze ll Kulturen, Chemiker Zaitung ,
107, 7/8 , pp. 238-239.
34. Farmakope Indonesia. (1979)> Edisi I I I , Departemen Ke-
sehatan Republik Indonesia, hal, 807.
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
Lampiran 1 •
Asaa asetat — ^ A s e t i l Ko A ----------^-Asetoasetil ko A
Asam mevalonat ^-------Hidroksi metil g lu ta r il Ko A
4/Asam-5 phosphomevalonat-------^Asam pirophobpho-3 Phospho
mevalonat
1•3 iso pentenil pirophosphat
3 ,3 d im e til a l i i pirophosphat
vv'•Geranil pirophosphat
Farson il pirophosphat — ^Squalen
nLOksido squalen
ion karbonium intermediat
S ik loa rten o l
vVLanosterol -^ K o le s te ro l
B ios in tesa s te ro ida
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
92
Lampiran 2«
Squalen------^ Squalen ,-----^C yc loarten o l2,3-Sxpoxid
O b tu s ifo lio l
Lophenol^----- 24-Me thylenlophenol
Ni/Cholesterin Zk-Me thylen
26-Hydroxy-ck o les te r in
ch o les ter in
nkCampesterin
N /B rass icasterin
^24-M ethylen cyc loa rten o l
ICycloeucalenol
24-Xthylidenlophenol
Xis o fu co s te r in
nUS ito s te r in
Stigm a6terin
26 Amino-,}6^-,20/- 26-, 16^8-,20^-
dihydroxycholesterin Trihydroxycholesterin
Solasodinasi/
Dlosgenin
B ios in tesa solasodina
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
93
Serbuk kering daun Solanum w righ tii Benth
+ petroleum eter d irefluke Z jam (3 k a li)
Fase petroleum eter
u ji kuali- t a t i f
'VSterol
Fase aseton__________ l _ - _
u ji kual i t a t i f
Glikosidasterin
hidrolisa HC1 Z N, Ekstraksi kloroform
Fase kloroform
u ji kual i t a t i f
Sterol
Fase a ir
Residu
+ aseton direfluks Z jam O k a li)
VkResidu
hidrolisaHC1 Z N,Ekstraksikloroform
Fase kloroform
u ji kuali- t a t i f
Steroid alkaloid
Skema ekstraksi
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
94
Lampiran 4*
Contoh perhitungan kadar s te ro l.
Sesuai dengan Gambar 14, sampel serbuk daun pengam-
btlan pukul 06.00 muda, Pengambilan I dan pengukuran I I di
dapatkan data ebb. :
Luas area ; 19361,62
Dengan persamaan garis regresi :
y = 2055,709*** - 1257,0021
maka didapatkan jumlah stero l to ta l = 10,0299 ug.
jumlaJa penotolan dari sampel daun muda = 20 ul.
Jaai dalam 5 ^1 ekstrak :
5000 ul- x 10,0299 ug
15 ul
= 2507,^75 ug.
Kadar s tero l to ta l dalam 2,6910 gram serouk daun kering ;
2507,475 . 10-3 mg
2,6910 g
= 0,9318 mg/g.
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron
9.5
Lam pi ran 5.
HARGA KOiiFISIEN KORELASI ( r ) PADA. DJ3RAJAT KKPERCAYAAN
5# DAN \%
DFGREES O f 5 1 DECREES Or 5 1Ffttl&OM (Of) PERCENT PERCENT F REE DO M (Df) rCRCEHT W t C S N l
1 .997 1 COO 24 .368 .*952 .950 .990 25 .391 .4873 .878 -T59 26 .374 .4784 .811 .917 27 .367 .4705 .754 .874 28 .361 .4636 .707 .634 29 ,355 .4567 .666 .798 30 .349 .4498 .622 .765 35 .525 .4189 .602 .735 40 .304 .393JO .576 .708 48 .288 .37211 .553 .684 50 .273 .35412 .532 .661 60 .250 .325 '13 -5M .641 70 .232 .30214 .497 .623 eo .217 .28315 .4*2 .606 90 .205 .26716 .466 .590 100 .195 .25417 .456 .575 125 .174 .228is .444 .561 150 .159 .20819 .433 .549 200 .138 .18120 .423 .537 300 .113 .14831 .413 .526 400 .098 .12822 .404 .515 50 0 .088 .11523 .396 .505 >000 .062 .081
HLkutip d ari : R itech e l WA. Handbook o f Basic
Pharm acokinetic. 2n<* Ed, 1980.
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron