Partes del microscopio ptico y sus funciones1 * Ocular: lente situada cerca del ojo del observador. Capta y ampla la imagen formada en los objetivos. 2 * Objetivo: lente situada cerca del revolver. Ampla la imagen, es un elemento vital que permite ver a travs de los oculares 3 * Condensador: lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparacin. 4 * Diafragma: regula la cantidad de luz que llega al condensador. 5 * Foco: dirige los rayos luminosos hacia el condensador. 6 * Tubo: es una cmara oscura unida al brazo mediante una cremallera. 7 * Revlver: Es un sistema que agarra los objetivos, y que rota para utilizar un objetivo u otro 8 * Tornillos macro y micromtrico: Son tornillos de enfoque, mueven la platina hacia arriba y hacia abajo. El macromtrico lo hace de forma rpida y el micromtrico de forma lenta. Llevan incorporado un mando de bloqueo que fija la platina a una determinada altura. 9 * Platina: Es una plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que se coloca la preparacin, que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminacin situada por debajo. Dos pinzas sirven para retener el portaobjetos sobre la platina y un sistema de cremallera guiado por dos tornillos de desplazamiento permite mover la preparacin de delante hacia atrs o de izquierda a derecha y viceversa. 10 * Base: Es la parte inferior del microscopio que permite el sostn del mismo. Parte mecnica: o o o o

Sistema de soporte o estativo: Pie Brazo Tubo Platina Microscopios Todos los fabricantes de Microscopios www.medicalexpo.esEnlaces patrocinados Revolver Sistema de ajuste:

o -

o o

Tornillo macromtrico Tornillo micromtrico

Parte ptica: Fuente de iluminacin Condensador y diafragma Lentes: oculares (10x y 12x) y objetivos (4x, 10x, 40x y 100x).

* PIE: Sirve como base del microscopio y tiene un peso suficiente para dar estabilidad al aparato. En los microscopios antiguos tena forma de herradura o de trpode pero en la actualidad suele ser una plataforma rectangular. En l se integra la fuente luminosa. * BRAZO: Es una columna perpendicular al pie. Puede ser arqueado o vertical y une al pie con el tubo. * TUBO: Es una cmara oscura unida al brazo mediante una cremallera. Tiene el revolver con los objetivos en su parte inferior y los oculares en el extremo superior. * PLATINA: Es una plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que se coloca la preparacin, que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminacin situada por debajo. Dos pinzas sirven para retener el portaobjetos sobre la platina y un sistema de cremallera guiado por dos tornillos de desplazamiento permite mover la preparacin de delante hacia atrs o de izquierda a derecha y viceversa. En la parte posterior de uno de los laterales se encuentra un nonius que permite fijar las coordenadas de cualquier campo ptico; de esta forma se puede acudir a el cuando interesa. * REVOLVER: Es un sistema que coge los objetivos, y que rueda para utilizar un objetivo u otro. * TORNILLOS MACRO Y MICROMTRICO: Son tornillos de enfoque, mueven la platina hacia arriba y hacia abajo. El macromtrico lo hace de forma rpida y el micromtrico de forma lenta. Llevan incorporado un mando de bloqueo que fija la platina a una determinada altura. * FUENTE DE ILUMINACIN: Se trata de una lmpara halgena de intensidad graduable. Esta situada en el pie del microscopio. Se enciende y se apaga con un interruptor y en su superficie externa puede tener una especie de anillo para colocar filtros que facilitan la visualizacin. * CONDENSADOR Y DIAFRAGMA: El condensador es un sistema de lentes situadas bajo la platina su funcin es la de concentrar la luz generada por la fuente de iluminacin hacia la preparacin. En el interior del condensador existe un diafragma (iris) cuya funcin es limitar el haz de rayos que atraviesa el sistema de lentes eliminando los rayos demasiado desviados (regula la cantidad de luz y ajusta la Apertura Numrica).

* OCULARES: Estn colocados en la parte superior del tubo. Se denominan as, porque estn muy cercanos al ojo. Su funcin es la de captar y ampliar la imagen formada en en los objetivos. En los modernos microscopios hay dos oculares (microscopios binoculares) que estn unidos mediante un mecanismo que permite ajustar la distancia interpupilar. En general los mas utilizados son los de 10X ( producen un aumento de 10 veces ). * OBJETIVOS: Estn colocados en la parte inferior del tubo insertados en una pieza metlica, denominada revolver, que permite cambiarlos fcilmente. Generan una imagen real, invertida y aumentada. Los mas frecuentes son los de 4, 10, 40, y 100 aumentos. Este ltimo se llama de inmersin ya que para su utilizacin se necesita utilizar aceite de cedro sobre la preparacin. En la superficie de cada objetivo se indican sus caractersticas principales, aumento, apertura numrica, y llevan dibujado un anillo coloreado que indica el nmero de aumentos (rojo 4X, amarillo 10X, azul 40X y blanco 100X).

El Microscopio ptico compuestoPARTES DE UN MICROSCOPIO PTICO

Sistema ptico o OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador. Ampla la imagen del objetivo. o OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparacin. Ampla la imagen de sta. o CONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparacin. o DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador. o FOCO: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador. Sistema mecnico o SOPORTE: Mantiene la parte ptica. Tiene dos partes: el pie o base y el brazo. o PLATINA: Lugar donde se deposita la preparacin. o CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular, binocular, .. o REVLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar los objetivos.

o

TORNILLOS DE ENFOQUE: Macromtrico que aproxima el enfoque y micromtrico que consigue el enfoque correcto.

MANEJO Y USO DEL MICROSCOPIO PTICO 1. Colocar el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y bajar la platina completamente. Si el microscopio se recogi correctamente en el uso anterior, ya debera estar en esas condiciones. 2. Colocar la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas metlicas. 3. Comenzar la observacin con el objetivo de 4x (ya est en posicin) o colocar el de 10 aumentos (10x) si la preparacin es de bacterias. 4. Para realizar el enfoque: a. Acercar al mximo la lente del objetivo a la preparacin, empleando el tornillo macromtrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a travs del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparacin pudindose daar alguno de ellos o ambos. b. Mirando, ahora s, a travs de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparacin con el macromtrico y, cuando se observe algo ntida la muestra, girar el micromtrico hasta obtener un enfoque fino. 2. Pasar al siguiente objetivo. La imagen debera estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el micromtrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdi por completo la imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior y repetir la operacin desde el paso 3. El objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de la preparacin y por ello es fcil que ocurran dos tipos de percances: incrustarlo en la preparacin si se descuidan las precauciones anteriores y mancharlo con aceite de inmersin si se observa una preparacin que ya se enfoc con el objetivo de inmersin. 3. Empleo del objetivo de inmersin: a. Bajar totalmente la platina. b. Subir totalmente el condensador para ver claramente el crculo de luz que nos indica la zona que se va a visualizar y donde habr que echar el aceite. c. Girar el revlver hacia el objetivo de inmersin dejndolo a medio camino entre ste y el de x40. d. Colocar una gota mnima de aceite de inmersin sobre el crculo de luz. e. Terminar de girar suavemente el revlver hasta la posicin del objetivo de inmersin. f. Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que la lente toca la gota de aceite. En ese momento se nota como si la gota ascendiera y se adosara a la lente. g. Enfocar cuidadosamente con el micromtrico. La distancia de trabajo entre el objetivo de inmersin y la preparacin es mnima, aun menor que con el de 40x por lo que el riesgo de accidente es muy grande. h. Una vez se haya puesto aceite de inmersin sobre la preparacin, ya no se puede volver a usar el objetivo 40x sobre esa zona, pues se manchara de aceite. Por tanto, si desea enfocar otro campo, hay que bajar la platina y repetir la operacin desde el paso 3. i. Una vez finalizada la observacin de la preparacin se baja la platina y se coloca el objetivo de menor aumento girando el revlver. En este

momento ya se puede retirar la preparacin de la platina. Nunca se debe retirar con el objetivo de inmersin en posicin de observacin. j. Limpiar el objetivo de inmersin con cuidado empleando un papel especial para ptica. Comprobar tambin que el objetivo 40x est perfectamente limpio. MANTENIMIENTO Y PRECAUCIONES 1. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posicin de observacin, asegurarse de que la parte mecnica de la platina no sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda. 2. Cuando no se est utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar que se ensucien y daen las lentes. Si no se va a usar de forma prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un armario para protegerlo del polvo. 3. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente con un papel de filtro o, mejor, con un papel de ptica. 4. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se est utilizando el microscopio. 5. Despus de utilizar el objetivo de inmersin, hay que limpiar el aceite que queda en el objetivo con pauelos especiales para ptica o con papel de filtro (menos recomendable). En cualquier caso se pasar el papel por la lente en un solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona (7:3) o xilol. No hay que abusar de este tipo de limpieza, porque si se aplican estos disolventes en exceso se pueden daar las lentes y su sujecin. 6. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macromtrico, micromtrico, platina, revlver y condensador). 7. El cambio de objetivo se hace girando el revlver y dirigiendo siempre la mirada a la preparacin para prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar nunca de objetivo agarrndolo por el tubo del mismo ni hacerlo mientras se est observando a travs del ocular. 8. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algn lquido, secarlo con un pao. Si se mancha de aceite, limpiarla con un pao humedecido en xilol. 9. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la sesin prctica y, al acabar el curso, encargar a un tcnico un ajuste y revisin general de los mismos. . Principales normas de cuidado y utilizacin del microscopio ptico El microscopio es un instrumento de precisin que debe tratarse con cuidado y debe manejarse correctamente para evitar errores, cansancio y prdida de tiempo. Tenga en cuenta las siguientes consideraciones: 1. Debe mantenerse en un lugar estable. El observador debe colocarse de espaldas a los focos de luz, prefirindose la luminosidad amortiguada, lejos de las ventanas y sobre una mesa negra para eliminar luces parsitas y evitar una fatiga innecesaria.

2. Debe colocarse lejos del extremo del mesn, para evitar que se vuelque. La mayora de los desperfectos se producen por golpes. 3. El microscopio se transporta verticalmente, sujeto por la empuadura con una mano y por la base con la palma de la otra. El transporte incorrecto puede descansar todo el peso sobre el control de enfoque micromtrico, erosionando sus muescas. 4. Debe estar cubierto mientras no se usa y no debe sacrsele el ocular. El polvo desgasta los componentes y se deposita en las lentes. 5. No deben tocarse los lentes oculares, objetivos ni condensador con los dedos. Las manchas de grasa y sudor los dada. 6. Las lentes deben soplarse enrgicamente con una pera de goma, no deben limpiarse con un pao seco (las partculas de polvo pueden rayarlas), ni soplando con la boca (una pelcula lquida es muy difcil de eliminar), ni con los dedos. Si queda polvo debe emplearse papel especial o pincel que se carga electrostticamente acercndolo a una ampolleta encendida, lo cual permite recoger las partculas. 7. Para observar hay que sentarse cmodo, en posicin descansada. Las malas posiciones causan cansancio y dolores musculares. 8. Debe observarse con ambos ojos abiertos. Al estar un ojo cerrado prolongadamente, la contraccin muscular y la presin sobre el globo ocular causan cansancio y a veces dolor ocular o de cabeza. 9. Debe mirarse a travs del microscopio, no "en" el microscopio. Si el observador mira como si la imagen estuviese junto al ojo, la vista se cansa innecesariamente y puede producirse dolor ocular. 10. Debe haber una distancia adecuada entre el ojo y el ocular. Acrquese desde algunos centmetros poco a poco hasta observar el campo visual grande y definido. 11. Toda observacin comienza con lupa y pasa ordenadamente a mayores aumentos. Esto facilita centrar y enfocar, da un campo visual inicial amplio que proporciona visin de conjunto, facilita la interpretacin y permite ubicar fcil y rpidamente las estructuras. La zona de la preparacin que desea observarse debe quedar en el centro del campo antes de pasar al siguiente aumento. 12. El condensador est regulado cuando se encuentra en su posicin ms alta o un poco ms bajo. Para aumentar el contraste no conviene descenderlo excesivamente ni cerrar el diafragma, es preferible regular la iluminacin con el control deslizable. 13. No debe colocarse ni retirarse una preparacin estando el objetivo mayor o el objetivo a inmersin en posicin de trabajo, porque pueden rayarse las lentes frontales. 14. Los movimientos de los mandos de enfoque deben ser lentos y suaves. El control macromtrico se acciona con precaucin para no chocar el objetivo con la preparacin, lo cual estropea la lente frontal del objetivo y rompe la preparacin. No debe utilizarse el control macromtrico con inmersin. El control micromtrico debe mantenerse en

posicin central y accionarse un poco hacia un lado u otro. Se llega al extremo de su recorrido y se insiste, se pueden romper sus muescas, lo cual obligarla a cambiarlo. 15. La preparaciones se colocan con el cubreobjetos hacia arriba. Si la preparacin est al revs, al tratar de enfocar choca el objetivo con la preparacin y se daa. Antes de colocar la preparacin sobre la platina compruebe la posicin del cubreobjetos con la ua. 16. Si la preparacin carece de cubreobjetos no debe observarse con un objetivo mayor a 10X, de lo contrario el objetivo puede chocar con la preparacin y se puede rayar. 17. No debe colocarse aceite de inmersin sobre objetivos secos (lupa, menor, mayor) ni utilizarse el objetivo a inmersin como objetivo seco, porque se puede rayar. 18. Para sacar de los lentes el aceite de inmersin debe utilizarse un pao humedecido ligeramente con ter o xilol, no debe usarse alcohol, que disuelve el adhesivo de las lentes, ni algodn, que deja fibrillas pegadas al vidrio dificultando la visin. 19. No deben derramarse lquidos sobre el microscopio, si esto sucediera accidentalmente debe secarse de inmediato. No debe manejarse el microscopio con los dedos hmedos. 20. No debe dejarse el microscopio junto a un mechero encendido, por razones obvias. 21. El microscopio no debe estar encendido mientras no se usa, debe evitarse as su calentamiento excesivo. Recuerde adems que su ampolleta es de alto costo y tiene una vida til limitada. 22. Las lentes estn montadas en forma muy precisa, slo se deben limpiar externamente, sin desmontarlas. Slo un tcnico especializado puede hacerlo para una limpieza completa. 23. No se debe invertir ni ladear el microscopio sin quitar previamente el ocular, que entra por deslizamiento. 24. Cada vez que el microscopio se deja de usar debe guardarse en forma adecuada: a) ubicacin lejos del borde del mesn, b) lmpara apagada, c) cable de la lmpara desenchufado, d) platina limpia y ubicada al tope superior, e) objetivo lupa en posicin de trabajo, f) carro en posicin central, g) condensador en su posicin ms alta, h) diafragma abierto. 5. Partes del microscopio ptico Los microscopios pticos constan de dos tipos de componentes, la parte mecnica y la parte ptica. A los componentes bsicos se agregan accesorios opcionales. A) Componentes mecnicos ("Montura"): Piezas fijas, que sirven como soporte para el sistema ptico (estativo), y piezas mviles, que intervienen en la ubicacin adecuada de la preparacin (enfoque y centrado).

1. Base o Pie: pieza horizontal maciza, de forma variable, pesada, situada en la parte inferior del microscopio, al que sirve de apoyo y da estabilidad. Generalmente lleva asociada la fuente luminosa. 2. Empuadura o Brazo: pieza vertical ms o menos curva que se une al tubo, a la platina y a la base. Sirve para tomar al microscopio durante su traslado y lleva los controles de enfoque. En algunos modelos corresponde a dos piezas independientes: el brazo, en la parte superior, y la columna, inferior, que se unen mediante una charnela, articulacin que permite inclinar al microscopio en mayor o menor grado y adaptarlo a la altura de la vista. 3. Cabezal: pieza hueca, tpicamente cilndrica (cuando es as se le denomina "tubo") en la que se insertan los tubos portaoculares y el portaobjetivos. A travs del cabezal se observa la imagen microscpica, sirviendo para sostener a los componentes pticos y mantenerlos a la distancia correcta. Puede ser monocular o binocular. En los modelos binoculares cada montura de los tubos portaoculares est rodeada por anillos que permiten ajustar la longitud del tubo, y los tubos portaoculares pueden desplazarse horizontalmente, lo que permite graduar su distancia. 4. Portaobjetivos mltiple (revlver): pieza giratoria que sostiene a los tubos portaobjetivos de diferente aumento. Se desplaza horizontalmente para colocar en posicin de observacin a cualquiera de ellos. 5. Platina lisa o fija: pieza plana horizontal ubicada entre el objetivo y el condensador, con un orificio central circular que permite el paso de los rayos luminosos provenientes del condensador, y sobre el cual se coloca la preparacin para ser observada. 6. Platina mecnica o mvil (Carro): dispositivo acoplado a la platina lisa que sujeta al portaobjetos y permite su desplazamiento. Es un sistema de piones que actan sobre cremalleras ubicadas perpendicularmente entre s, produciendo desplazamiento horizontal en sentido lateral y anteroposterior, lo cual permite ubicar y fijar la zona de la preparacin que desea observarse. lleva incorporadas dos pinzas que entran a presin y sujetan la preparacin y escalas graduadas para medir sus desplazamientos. 7. Subplatina: Conjunto de piezas situadas bajo la platina y que soportan al aparato de iluminacin. Su composicin vara segn el modelo, pero en general consiste en un aro que sostiene al condensador, el que se mueve de arriba-abajo mediante un tornillo, y tambin contiene anillos portafiltros, que alojan cristales que mantienen la luz adecuada constante, y un diafragma-iris, que regula la entrada de la luz y se controla con una palanca lateral, lo que permite obtener distintos tamaos del cono luminoso que entra en el condensador. 8. Controles de enfoque: dos o cuatro botones ubicados en la empuadura o columna que desplazan a la platina fija o al cabezal, segn el modelo, lo cual permite enfocar con precisin. Corresponden a uno o dos botones macromtricos, o de enfoque aproximado, y uno o dos botones micromtricos, de enfoque fino. Los botones o mandos macromtricos son ms grandes y de avance rpido, sirven para buscar rpidamente un punto aproximado al del enfoque. Si hay dos botones macromtricos se enfrentan a ambos lados del brazo y estn sincronizados, basta mover a uno de ellos. Los botones o mandos micromtricos producen movimientos lentos y permiten obtener un enfoque exacto. Si son dos, tambin estn sincronizados. En algunos modelos de microscopios existe un solo botn que

cumple funciones de macromtrico y micromtrico: a igual velocidad de giro el movimiento de la platina es ms rpido cuanto ms lejos se halla la preparacin del plano de enfoque. B) Componentes pticos ("Tren ptico"): Piezas implicadas en la formacin de la imagen. Incluye tres sistemas de lentes que funcionan armnicamente entre s y una fuente de iluminacin. 1. Condensador: Sistema de lentes convergentes de gran abertura que concentra la luz visible y la proyecta uniformemente sobre una muestra de tejido convenientemente preparada. Se encuentra montado en un armazn metlico sujeto a la parte inferior de la platina fija y puede subirse y bajarse a voluntad accionando un control ubicado lateralmente. 2. Sistema de objetivos: Complejo sistema de lentes (a veces hasta 10) ubicados prximos al objeto, que acta como una sola lente convergente que recoge las longitudes heterocromticas de la luz visible, entregando mayores aumentos que los del ocular y produciendo inversin de la imagen. Los objetivos participan en la primera etapa de ampliacin: producen una imagen ampliada del objeto y la proyectan sobre un plano ubicado en el interior del cabezal. Cada objetivo, ubicado en el interior de un tubo (tubo portaobjetivo), puede estar formado por una lente o por un complejo sistema de lentes convergentes. Los modelos actuales presentan tres o cuatro objetivos ubicados en sendos tubos, cuya longitud se relaciona con su poder de aumento. Existen objetivos en seco y de inmersin. Los objetivos en seco ("lupa", "aumento menor", "aumento mayor") se utilizan dejando aire entre ellos y la preparacin, en cambio el objetivo de inmersin se emplea colocando una gota de lquido ("aceite de inmersin"), cuyo ndice de refraccin es superior al del aire. 3. Sistema ocular: Formado por dos lentes plano-convexas centradas y empotradas en un tubo metlico ms o menos corto (tubo portaocular), al que se acerca el ojo del observador, en cuya retina proyecta la segunda imagen aumentada. La lente superior se denomina propiamente lente ocular y la inferior lente de campo o frontal. Lentes adicionales corrigen las aberraciones cromticas y esfricas. Los oculares son intercambiables y pueden tener diferentes aumentos. Permiten observar varias veces ms amplificada la imagen que forma el objetivo. 4. Fuente luminosa: Antiguamente era un espejo, en la actualidad se utiliza mucho ms una lmpara con filamento de tungsteno incandescente enrollado, de 6 a 12 V, montada sobre un portalmparas especial ubicado en la base del microscopio. La intensidad luminosa se regula en forma continua girando un botn o moviendo una palanca de control deslizante. C) Accesorios Se fabrican accesorios opcionales para colocar en los modelos modernos de microscopios compuestos, los que pueden colocarse temporalmente en los microscopios compuestos para desarrollar funciones especiales, otorgndole mayor flexibilidad al aparato. Entre ellos se cuentan accesorios para la observacin simultnea de dos personas, condensadores de campo obscuro, obturador central para campo obscuro, accesorio de

polarizacin, iluminador vertical, ocular graduado, accesorios para dibujo, accesorios para fotomicrografa. 6. Problemas frecuentes en el manejo del microscopio Defectos de Iluminacin: a) Campo obscuro, sin imagen. Causas probables: l) Falta de luz. Correccin: Accione el interruptor, enchufe el cable, verifique si hay energa elctrica o si la lmpara esta quemada. 2) Objetivo fuera de lugar. Correccin: Gire el objetivo a su posicin de enfoque. b) Campo ovalado, iluminado parcialmente. Causa probable: Objetivo fuera de lugar. Correccin: Gire el objetivo a su posicin de enfoque. c) Imagen muy obscura. Causas probables: l) Diafragma cerrado. Correccin: Desplace la palanca lateral del diafragma. 2) Condensador muy bajo. Correccin: Accione el control que sube el condensador. 3) Condensador defectuoso. Correccin: Avise para que lo repare un tcnico. d) Imagen muy clara. Causas probables: l) Diafragma muy abierto. Correccin: Desplace la palanca lateral del diafragma. 2) Condensador muy alto. Correccin: Accione el control que baja el condensador. Defectos de Enfoque: a) Falta de imagen. Causas probables: l) Preparacin mal centrada. Correccin: Accione los controles del carro. 2) Preparacin mal enfocada. Correccin: Accione el mando macromtrico. b) Imagen borrosa. Causas probables: l) Preparacin mal enfocada. Correccin: Accione el mando micromtrico. 2) Preparacin al revs. Correccin: Coloque la preparacin hacia arriba. 3) Suciedad en la preparacin, ocular u objetivo. Correccin: Lmpielos. Imgenes extraas: a) Manchas o enturbiamientos irregulares, que se desplazan al mover la preparacin. Causa probable: Suciedad en el cubreobjetos. Correccin: Limpie la preparacin. b) Manchas o enturbiamientos irregulares que se desplazan al mover el ocular. Causa probable: Suciedades en el ocular. Correccin: Limpie la lente ocular. c) Manchas o enturbiamientos que desaparecen al cambiar el objetivo. Causa probable: objetivo sucio o con aceite. Correccin: Limpie el objetivo. d) Manchas o enturbiamientos que no se desplazan ni desaparecen al mover el ocular, objetivo o preparacin. Causa probable: Suciedad en la lente superior del condensador. Correccin: Limpie el condensador.

e) Lneas finas brillantes. Causa probable: Rayaduras en las lentes o trizaduras en la preparacin. Correccin: De cuenta al profesor. f) Otras alteraciones de la imagen (espacios blancos, espacios finos y rectos, grumos intensamente tenidos, bandas obscuras, crculos con bordes obscuros, etc.). Causa probable: defectos en las preparaciones (retraccin del tejido, muescas en el cuchillo del micrtomo, fijador o colorante precipitado, tejido plegado, burbujas de aire, etc.). Correccin: Examine un sector de la preparacin no alterado o solicite otra preparacin. PRCTICA DE BIOLOGA N 1 El Microscopio Introduccin Objetivos Recursos Procedimientos Marco Terico Observaciones en la Prctica Autoevaluacin

Introduccin OBSERVANDO LO INVISIBLE. Gracias al Microscopio ptico es posible conocer lo ms pequeo del mundo que nos rodea. Desde el descubrimiento del Microscopio por parte de Zacaras Jansen, la ciencia, particularmente la biolgica, ha venido dcada tras dcada aportando nuevos conocimientos, desde la observacin de la clula y su descubrimiento, el de las bacterias, hasta la situacin actual con la visualizacin de la ultraestructura celular. Y nosotros en nuestra formacin como entes promotores y forjadores de salud, es de gran importancia el conocimiento y desarrollo de destrezas en este instrumento, que en un futuro no muy lejano, ser un medio auxiliar de la carrera. Objetivos

Reconocer al microscopio y sus elementos. Identificar los diferentes tipos de microscopios.

Aprender la forma de manejo y el cuidado de un microscopio. Asimilar la tcnica adecuada para el enfoque.

Recursos Humanos

Grupo de estudiantes Ayudante de ctedra

Materiales

Microscopio Simple de Luz Laminas cubreobjetos y portaobjetos Objetos para la observacin (Papel cuadriculado, Cabello)

Procedimientos

Exposicin terica: brevemente se hablar y abordara temas como los objetivos de la prctica, materiales necesarios, los procedimientos, definicin del microscopio, historia, estructura, manejo y cuidado, recomendaciones. Reconocimiento del Microscopio y sus elementos con la colaboracin del ayudante de ctedra. Visualizacin de objetos e identificacin de la tcnica correcta para enfocarlos. El papel cuadriculado y el cabello los colocamos en portaobjetos, cubrimos con el cubreobjetos y observamos con los objetivos de 4x, 10x y 40x.

Marco Terico Definicin Etimolgicamente microscopio viene del griego: "mikro" = pequeo y "scope" = mirar (para mirar cosas pequeas) En definitiva un microscopio es cualquier instrumento que se utiliza para obtener una imagen aumentada de objetos minsculos o detalles muy pequeos de los mismos. En su afn de llegan siempre ms lejos en la investigacin de la naturaleza, de lo que los lmites de sus rganos sensoriales le imponen, el hombre ha construido mltiples instrumentos que le han permitido acceder all donde los sentidos no podan penetrar. As como el telescopio abri a la humanidad las puertas de lo infinitamente grande, el microscopio hizo posible conocer los mundos de dimensiones nfimas, entre ellos la

clula, base de la vida. Se contaban as las bases de las modernas ciencias biolgicas que hasta bien entrada la edad moderna se haban fundado en las observaciones directas. El tipo ms comn de microscopio y el primero que se invent es el microscopio ptico. Se trata de un instrumento ptico que contiene una o varias lentes que permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refraccin. La ciencia que investiga los objetos pequeos utilizando este instrumento se llama microscopa. Historia La curiosidad innata al hombre ha hecho que este haya intentado saber ms acerca de los objetos ms lejanos, pero tambin de los ms prximos; desde la antigedad se conoce algunos datos de observaciones hechas por diversas personas, sobre la propiedad de ciertos materiales (los vidrios) de modificar la imagen de lo que observamos, pero yndonos a datos precisos, este es un resumen con fechas y nombres de hechos importantes relacionados con el microscopio: Estructura El microscopio ptico comn est conformado por dos sistemas:

El sistema mecnico est constituido por una serie de piezas en las que van instaladas las lentes que permiten el movimiento para el enfoque. El sistema ptico comprende un conjunto de lentes dispuestas de tal manera que produce el aumento de las imgenes que se observan a travs de ellas.

La parte mecnica del Microscopio La parte mecnica del microscopio comprende: el pie, el cabezal, el revlver, la platina, el tornillo micromtrico y el tornillo micromtrico. Estos elementos sostienen la parte ptica y de iluminacin, adems permite los desplazamientos necesarios para el enfoque del objeto.

El pie. Constituye la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo general forma de Y o bien es rectangular El cabezal o tubo ptico. Tiene forma cilndrica y est ennegrecido internamente para evitar las molestias que ocasionan los reflejos de la luz. En su extremidad superior se colocan los oculares. El revlver. Es una pieza giratoria provista de orificios en los cuales se enroscan los objetivos. Al girar el revlver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en posicin de trabajo, la cual se nota por el ruido de un pin que lo fija. La columna, llamada tambin asa o brazo, es una pieza colocada en la parte posterior del aparato. Sostiene el tubo en su porcin superior y por el extremo inferior se adapta al pie.

La platina. Es una pieza metlica plana en la que se coloca la preparacin u objeto que se va a observar. Presenta un orificio en el eje ptico del tubo que permite el paso de los rayos luminosos a la preparacin. La platina puede ser fija, en cuyo caso permanece inmvil; en otros casos puede ser giratoria, es decir, mediante tornillos laterales puede centrarse o producir movimientos circulares. El tornillo macromtrico. Girando este tornillo, asciende o desciende el tubo ptico o la platina del microscopio, deslizndose en sentido vertical gracias a una cremallera. Estos movimientos largos permiten el enfoque rpido de la preparacin. El tornillo micromtrico. Mediante el movimiento casi imperceptible que produce al deslizar el tubo o la platina, se logra el enfoque exacto y ntido de la preparacin. Lleva acoplado un tambor graduado en divisiones de 0,001 mm que se utiliza para precisar sus movimientos y puede medir el espesor de los objetos.

Sistema ptico El sistema ptico es el encargado de reproducir y aumentar las imgenes mediante el conjunto de lentes que lo componen. Est formado por los lentes oculares, los objetivos, la fuente de luz, el condensador y el diafragma.

Los oculares. Los oculares estn constituidos generalmente por dos lentes, dispuestas sobre un tubo corto. Los oculares generalmente ms utilizados son los de: 8X, 1OX, 12.5X, 15X. La X se utiliza para expresar en forma abreviada los aumentos. Los objetivos. Los objetivos producen aumento de las imgenes de los objetos y organismos y, por tanto, se hallan cerca de la preparacin que se examina. Los objetivos utilizados corrientemente son de dos tipos: objetivos secos y objetivos de inmersin. Se disponen en una pieza giratoria denominada revlver.

Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre ellos y la preparacin. En la cara externa llevan una serie de ndices que indican el aumento que producen, la abertura numrica y otros datos. El nmero de objetivos vara con el tipo de microscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los objetivos secos ms frecuentemente utilizados son: 6X, 1OX, 20X, 45X y 60X. El objetivo de inmersin est compuesto por un complicado sistema de lentes. Para observar a travs de este objetivo es necesario colocar una gota de aceite de cedro entre el objetivo y la preparacin, de manera que la lente frontal entre en contacto con el aceite de cedro. Generalmente, estos objetivos son de 100X y se distingue por uno o dos crculos o anillos de color negro que rodea su extremo inferior. La Fuente de Luz: Que puede ser natural (a travs de un espejo) o artificial (una lmpara conectado a una fuente de energa elctrica). Condensador. El condensador est formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la preparacin. El condensador se halla debajo de la platina. El condensador puede deslizarse sobre un sistema de cremallera mediante un tornillo que determina su movimiento ascendente o descendente. Diafragma. Generalmente, el condensador est provisto de un diafragma o iris, que regula su abertura y controla la calidad de luz que debe pasar a travs del condensador.

Tipos de Microscopios La bsqueda de imgenes de mejor calidad y contraste, ha llevado al descubrimiento de nuevas y mejoradas clases de microscopios. Las principales clases de microscopios se resumen en el siguiente cuadro: Los microscopios pticos utilizan la propiedad de los lentes de aumentar la imagen de los objetos y de esa manera visualizarlos con el uso de la luz visible (espectro de luz). Los microscopios pticos especiales en cambio utilizan otros tipos de luz o modificaciones a la luz visible para obtener imgenes que de otra manera no se pueden visualizar. El microscopio electrnico dej a un lado la utilizacin de fotones (partculas que componen la luz) y de los lentes, y pas al uso de electrones para la visualizacin y campos magnticos que hacen las veces de lentes obtenindose as imgenes de mejor calidad y de un mayor aumento. Propiedades del Microscopio Poder separador. Tambin llamado a veces poder de resolucin, es una cualidad del microscopio, y se define como la distancia mnima entre dos puntos prximos que pueden verse separados. El ojo normal no puede ver separados dos puntos cuando su distancia es menor a una dcima de milmetro.

En el microscopio ptico, el poder separador mximo conseguido es de 0,2 dcimas de micra, y en el microscopio electrnico, el poder separador llega hasta 10 ngstrom. Poder de definicin. Se refiere a la nitidez de las imgenes obtenidas, sobre todo respecto a sus contornos. Esta propiedad depende de la calidad y de la correccin de las aberraciones de las lentes utilizadas. Poder de aumento. En trminos generales se define como la relacin entre el dimetro aparente de la imagen y el dimetro o longitud del objeto. Manejo y Enfoque En forma sistemtica se debe seguir el siguiente modelo para un adecuado manejo y la tcnica del enfoque:

Encender la fuente de luz o colocarlo en un lugar iluminado en el caso de microscopio con fuente natural. Colocar el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y bajar la platina completamente. Si el microscopio se recogi correctamente en el uso anterior, ya debera estar en esas condiciones. Colocar la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas metlicas. Comenzar la observacin con el objetivo de 4x (ya est en posicin) o colocar el de 10 aumentos (10x) si la preparacin es de bacterias. Para realizar el enfoque:o

Acercar al mximo la lente del objetivo a la preparacin, empleando el tornillo macromtrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a travs del ocular. Mirando, ahora s, a travs de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparacin con el macromtrico y, cuando se observe algo ntida la muestra, girar el micromtrico hasta obtener un enfoque fino.

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Al pasar al siguiente objetivo la imagen debera estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el micromtrico para lograr el enfoque fino. Empleo del objetivo de inmersin:o o

Bajar totalmente la platina. Subir totalmente el condensador para ver claramente el crculo de luz que nos indica la zona que se va a visualizar y donde habr que echar el aceite. Girar el revlver hacia el objetivo de inmersin dejndolo a medio camino entre ste y el de 40X.

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Colocar una gota mnima de aceite de inmersin sobre el crculo de luz. Terminar de girar suavemente el revlver hasta la posicin del objetivo de inmersin. Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que la lente toca la gota de aceite. Enfocar cuidadosamente con el micromtrico.

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Recomendaciones

Levantar y transportar el microscopio por el brazo. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al inicio y final de la sesin prctica. Cuando no se est utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar que se ensucien y daen las lentes. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se est utilizando el microscopio. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posicin de observacin. La cantidad de luz que ingresa por el condensador va ha depender del objetivo que estemos utilizando, a mayor aumento mayor cantidad de luz. Despus de utilizar el objetivo de inmersin, hay que limpiar el aceite que queda en el objetivo con pauelos especiales para ptica o con papel de filtro (menos recomendable). En nuestro caso podemos hacer uso de pauelos que no dejen pelusa. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio. El cambio de objetivo se hace girando el revlver y dirigiendo siempre la mirada a la preparacin para prevenir el roce de la lente con la muestra. Mantener seca y limpia la platina del microscopio.

Observaciones de la Prctica Ponga el nombre de cada una de las partes del Microscopio ptico Compuesto:

Grafique lo observado en el microscopio: Autoevaluacin Son componentes del sistema mecnico del microscopio. Excepto: El tubo ptico. El brazo. La platina. El diafragma. Los tornillos macro y micromtrico. Todos. Ninguno. Sobre el manejo y cuidado del microscopio. Seale lo correcto: Se debe levantar y transportar el microscopio por el brazo. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al inicio y final de la sesin prctica. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se est utilizando el microscopio. Todos. Ninguno.

Seale 2 diferencias entre el microscopio ptico y el microscopio electrnico: ________________________________________________________________________ ________________________ ________________________________________________________________________ ________________________ ________________________________________________________________________ ________________________ Qu entiende por poder de definicin del microscopio? ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ Cmo explica usted observar la imagen impresa en el papel milimetrado ( < ) de modo inverso en el microscopio? ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ 4x 4x 10x 10x 40x 40x Objeto: _____________________ Objeto: _____________________ Microscopios pticoso o

microscopio simple microscopio compuesto

Microscopios pticos especiales

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microscopio de luz ultravioleta microscopio en campo oscuro microscopio de fase

Microscopios electrnicoso o

microscopio electrnico de transmisin microscopio electrnico de barrido

Tornillo Micromtrico Tornillo Micromtrico Oculares Interruptor Pie Platina Brazo Tubo ptico Objetivos Fuente de Luz Revolver Condensador Diafragma

1608 Zacaras Jansen construye un microscopio con dos lentes convergentes. 1665 Hooke utiliza un microscopio compuesto para estudiar cortes de corcho y describe los pequeos poros en forma de caja a los que l llam "clulas". Publica su libro Micrographia 1674 Leeuwenhoek informa su descubrimiento de protozoarios. Observar bacterias por primera vez 9 aos despus.

1838 Schleiden y Schwann proponen la teora de la clula y declaran que la clula nucleada es la unidad estructural y funcional en plantas y animales. 1876 Abb analiza los efectos de la difraccin en la formacin de la imagen en el microscopio y muestra cmo perfeccionar el diseo del microscopio. 1881 Retzius describe gran nmero de tejidos animales con un detalle que no ha sido superado por ningn otro microscopista de luz. En las siguientes dos dcadas l, Cajal y otros histlogos desarrollan nuevos mtodos de tincin y ponen los fundamentos de la anatoma microscpica. 1882 Koch usa tinte de anilina para teir microorganismos e identifica las bacterias que causan la tuberculosis y el clera. En las siguientes dos dcadas, otros bacterilogos, como Klebs y Pasteur identificarn a los agentes causativos de muchas otras enfermedades examinando preparaciones teidas bajo el microscopio. 1937 Ernst Ruska y Max Knoll, fsicos alemanes, construyen el primer microscopio electrnico.