This article was downloaded by: [University of California Santa Cruz]On: 08 October 2014, At: 17:10Publisher: Taylor & FrancisInforma Ltd Registered in England and Wales Registered Number: 1072954Registered office: Mortimer House, 37-41 Mortimer Street, London W1T 3JH, UK

Bolletino di zoologiaPublication details, including instructions for authors andsubscription information:http://www.tandfonline.com/loi/tizo19

Osservazioni Preliminari sulControllo Neurale della Prolattina inun Anfibio Urodelo. Esperienze inVitro a Breve TermineCamillo Vellano a , Alberto Peyrot a , Giovanni Lodi a ,Silvana Longo a & Valdo Mazzi aa Istituto di Anatomia Comparata dell'Università di TorinoPublished online: 14 Sep 2009.

To cite this article: Camillo Vellano , Alberto Peyrot , Giovanni Lodi , Silvana Longo & ValdoMazzi (1968) Osservazioni Preliminari sul Controllo Neurale della Prolattina in un AnfibioUrodelo. Esperienze in Vitro a Breve Termine, Bolletino di zoologia, 35:3, 177-188, DOI:10.1080/11250006809436899

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Boll. ZOO.?., 36: 177-188, 10G8

OSSERVAZIONI PRELIJIINARI SUL COXTROLLO NEURALE DEL- LA PROLrYFTINA IN UN ANFIBIO URODET,O. ESPERIEXZE IAr 171~x0 A BREVE T E R J I I N E ~ )

CAJIILLO VELLANO, ALI3ER’I’O PEYROT, GIOVANKI LODI, SIL- VAXiI LOSGO c VALDO JIAZZI Istituto di Anatomia Comparnta dcll’Univcrsith di Torino

( in redazione il 27 maggio 19G8)

IXTRODUZIOSE

JIcntrc 6 accertato clic la secrczionc c la biosiiitesi dclln prolattina si trovano nei Jfammiferi sotto un controllo ipotalarnico negativo (cfr. le rassegnc di EVERETT, l O G G ; J~EITES e NICOLL, 10GG) e negli uccclli sotto un controllo ipotalamico positivo (NICOLL c XEITES, 10G2 ; ASSES~IACIIER e TIMER VIDAL, 10G-L; ICRAGT c XEITES, 1935; 10G5), molto scarse c per lo piii indirettc sono lc prove riguardnnti il tipo di controllo clic I’ipotalamo cscrcita sulla prolattina ncgli animali pccilotcrmi. A con- clusionc di iina rccentc rassegna sull’argomcnto ~ I E I T C S c NICOLL (1933) sono propensi a ritcnere che tanto negli Attinotterigi clic negli Anfibi il controllo sia di tipo ncgativo. Lc prove addottc in favore di questa con- clusione sono rclntiramentc convincenti iicgli Attinottcrigi, nei quali il trapianto ipofisario - ove lc ccllule eritrosinofile si niantcngono attivc (BALL el nl., 1DG;S) - 6 suficicntc ad assicurare, cosi come la somniini- strazionc di prolattina (cfr. le rassegne di J~EITES e NICOLL, l 0 G G c di BERS, lDGT), la sopravvircnza dcgh anirnali ipofiscctolnizzati in a q u a dolcc. Assai piii circonstanziali, ed in parte contradditoric, appaiono lc prove addotte per gli Anfibi. k bensi vero clic iicllc larve di Anfibi anuri l’autotrapianto ipofisario (ETKIS e LmInEn, 10GO) e il mancato contatto fra adcno- e neuroipofisi, in seguito a un trattainento con saccarosio allo

(*) Ricerclic escguitc e pubblicate con il contributo dcl C.X.11. Irnpresn di En- docrinologia (Gruppo di Endocrinologin Comparata). La prolnttina E statn cortcsc- mcntc mcssa a disposizione dai National Institutes of IIealtli, Endocrinology Study Section, c dal dr. A. E. W’ILIIELJII, che ringraziamo sentitamcnte.

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stntlio tli gnstriiln (DI~ISCOLL c EAKIS, 1955 ; JIazzr c GUARDAIIASSI, 195r), possoiio provocnrc gigniitisiiio, cosi coiiic In soiiiiiiiiiistrnzioiic tli prolnt- tiiin (UERJIAS et nl., 1964 ; KTKIS, l9G3 ; I<EJIT c I~OUSIIIOL, 1963) (*), c clic I’nntotrnpianto (Jlasuic, I W X ) provoca Q wntcr drivc )) in Trihrris uirirliscr/is cosi coiiic In soiiiiiiiiiistrnzioiic di prolnttilin (cfr. pcr In biblio- grnfin \‘I:I,I,.\SO et d., 19GT). Pcrb 6 nnclic rc ro chc 1’;iLdnzione dcll’ipotn- Inino 1 1 0 1 1 provocn 116 gigantismo n C pnrticolnri iiiodificnzioni n cnrico dcllc ccllulc ncitlofilc ( ( ~ U A I ~ ~ ) . ~ L M S S I , 19G1) iicllc h v c di dyenopzis lncuis. La. il)otnlniiicctonii:i postcriorc ritnrtla In inctnmorfosi dcllc Iarvc di I:ann pipicns clic iicl giro di 1 iiicsc rnggiriiigoiio tliniciisioiii gigantcsclic ; ilia

qiicsto yiyaiitisiiio (( was evidciitly due to tlic continnation of growth (luring tlic pcriotl of dclaycd iiictniiiorpliosis and not to csccssivc growth tlrrriiig iiictnniorpliosis stngc B ( ~ I A S A O K A , L O G T a ) . 11 voliiiiic d c h pnrtc distnlc tlcll’ipofisi si ritliicc tli circa il -10 yo in scguito nll’iiitcrvciito (11.1-

Kcll’ipofisi dcl ‘l’ritonc crcstnto portntorc tli Icsioni ipot:hnichc cronicizzntc o di :iiitotrnpiniito ctcrotopico lc ccllrilc ncitlofilc ipofisnric vniiiio scmprc iiicoiitro a iiinrcntn iiivolrizioiic ( J h z z i , 1958 ; J l a z z ~ c I’EYIIOT, 1!)6O ; JIMZI c PJ:YIIOT, 1933). Tottnvin 1’:iiiiiiinle portntorc pcr 5 riicsi di nutotrapinnto mnnifcsta 1111 sigiiificntivo niiiiiciito dcl pcso cor- porco rispctto ni controlli ( I’ETI~OT, 196G).

Ln capncith tlcll’ndciioipofisi tlcgli Anfibi iirodcli di biosiiitctizznrc prolnttiiirt iu ziifro i: stntn diriiostrntn sin pcr Ncctro.us ?/inczdosz~s (XICOLI,, 19G.5 ; NICOI.~, c I ~ E I ~ s , 19G1) sin pcr 7‘rifriru.Y o.istrrfrt.7 cnrnyc.r ( J h z z i el ol., 19GG ; I’I:TROT ct nl., 19GG). SICOLL ]in osscrvnto in .A‘ccfrmt,?, con il si- stcriin dclln coltiirn proloiignta, clic l’nttivith biosiritcticn progrcssivn- mcntc dccliiin 11e1 tciiipo ; i i i Trifurus 6 stato soltniito gcncricnnicntc nc- ccrtato (PETROT rl cr l , 1966) clic tlopo 8 giorni i tlivcrsi tipi ccllulnri del- l’ntlciioipofisi sono cliinrnniciitc ricoiioscibili c clic tniito ncl iiiczzo di col- trirn clic iicll’oiiiogciinto dclln ipofisi coltivntn, i: rilevnbilc nttivith pro- 1nttiiiic:i.

tl nostra coiiosccnzn 11011 sono state condottc fino ad oggi, ncgli Anfibi, cspcricnzc di coltivnzionc iw uifro di ipofisi nssociatc con ipotnlniiio oiiiologo o con cstrntti ipotnlnmici. Espcricnzc sifTnttc sembrnrniio pnr- tico1:irniciitc iiitcrcssniiti iicl Tritonc crcstnto iicl qiinlc r i soiio prow tli iiiin divcrsa attivith prolnttinicn iicl corso dcl ciclo a11111io (I’ELLISO el nl. ,

SAOK.l, 1967J).

(*) In Ilrtfo Liifo 1’cntit.i tlcgli cfktti ottcnuti dipciidc dnllo stndio tli svilrippo in cui 1:1 soniriiiriistrnzionc di prolnttinn Iin nvuto inizio (cfr. OLIVEI~O ef a!., 1967 ; CAJI- PASTICO cf al., 1968).

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10G7 ; SCALESGIIE et d., 10G8). Pertanto furono istituitc cspcricnzc nelle qiinli rcnirnno coltivntc pcr brcvc tempo (3 ore) ipofisi provcnicnti dn animali invcrnnli in prescnzn di cstrntti ipotnlninici ricnvnti (la animnli inr-ernnli o dn animnli cstivi ; c ipofisi di niiimali cstiri in prcsciiza cli cstrntti ipotnlnmici ricavnti (la nnininli cstiri o dn nnininli inrcrnnli.

JIATERIALE E JIETODI

a) Xcitcrinle.

Furono utilizznti i scgucnti tipi di nnimali : n ) ninsclii rcsi cstitmiti dn in soggiorno di 4.3 giorni in scrrn cnldn n 220 C (fotopcriodo di 12 11) ; 0) masclii normnli invcrnnli. Di cssi nbbinnio prclevnto stcrilmcntc l’ipofisi, la rcgione ipotalainica dcl dicnccfnlo c iinn qiinntitii di tcssiito ncrroso tclcnccfnlico prcss’n poco pari n quclla nsportatn dnl tlicnccfnlo. Dcllc rcgioni ipotnlnmicn e tclcnccfnlicn fii immcclintnnicntc cscgiiita In cstrn- zionc ncidn.

b) Tipi di ciilture.

Furono nllcstiti i scgiicnti 8 tipi di coltrrrc, ciasciinn contcnentc dire ipofisi : 1) ipofisi cstirn con cstrntto di ipotnlnnio cstiro, 2 ) ipofisi cstirn con estratto di ipotalniiio invcrnnlc, 3) ipofisi cs t iw con estrntto cli tclcn- ccfnlo cstiro, i) ipofisi cstivn con liquido di cstrazionc, 5 ) ipofisi invcrnnlc con cstrntto di ipotalnmo invcrnnlc, G ) ipofisi invernnlc con cstrntto di ipotalniiio cstivo, 7) ipofisi invcrnnle con cstrntto di tclcnccfnlo inrcr- iinlc, 8 ) ipofisi invcrnnlc con liquido tli estmzionc.

L)i cinscrin tip0 fiirono cscguitc G coltiirc a tcmpcrntura niiibicntc (20-220 C), in rngionc di due a1 giorno per trc giorni consccutivi.

c) ;IIezzo e tcrripo di colturn.

Pcr cinscunn eoltiirc?, si utilizzarono 3 nil di uiia solnzione cosi com- posts: EE 50 (Difco) sciolto iiclln soluzionc di Tyrodc, 3 pnrti; solu- zionc tli Tyrode diliiita ?/l con ncqiin bidistillatn, 3 pnrti ; acqiia bidistil- lntn, i parti ; soluzione di Gray, 3 pnrti. Le ipofisi, rapidnmcntc prclc- r a t e c lnvntc in iina piccoln qiinntith dcl liquido di colturn, rcnirnno in- troclottc in iin tub0 di Ligliton contcnentc 8 nil di brotlo. Subito dopo vc- iiivn nggiiuito l’cstrntto ncido delln rcgione ipotalnniicn (0 di quclln tc- lcnccfnlicn) di dric nnininli oppurc iinn corrispondcntc qiinntitii dcl li- quido di cstrazionc (IICI X portnto n pII ‘i,i con S n O I I O , 1 S). La dii-

rntn dclln colturn fu di trc ore.

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d) Eslrnffi midi .

Sccondo In tccnidn di KRAGT c MEITES (1OGT) gli ipotnlnnii (0 i tc- lencefnli) di drrc nnininli furono oniogcnnti in 0,75 nil di HCIN a 4oC. Dopa ccntrifugnzione a 12.500 g/min per 30 min. a 40 C il surnatante fu portato a pII 7,4 circa medinnte l’nggiunta di NnOII 0,1 N, sterilizzato per filtrazione e nggiunto alle colture.

c ) Pigcoii crop-sac test.

I brotfi delk G colturc di cinscun tip0 furono man mano uniti e eon- scrrnti a - 200 C, poi dinlizznti contro ncqua distillata per 12 ore a 40 C c liofilizzati. I1 liofilizznto sciolto in 2,s nil di soluzioiie di NaCl 0,0 % fu inicttnto sottocute iicl cciitro gconietrico dclln tascn latcrnlc clestra dcl gozzo di 0 piccioni coniiirii di 4-0 settiinanc d’eth, in rngione di 4 iniezioni di 0,1 nil escgiiitc nlle ore 9 e nlle ore 1s di duc giorni consecutivi. Nclla t:isca sinistrn del gozzo fu inicttatn, sccondo le stcsse modnlith, uiia eguale qunntith di una soluzioiie contenelite il liofilizzato di una stcssa qunntit8 tli brodo identico a quello usato per le colture.

Lc coppic di ipofisi ricnvate dnllc 0 colturc di cinscun tip0 furono

m gr.

10 20 40 80 100 200 400 800 1000

mU.1. Pig. 1 - Rispostn dclla tnsca latcralc dcl gozzo di piccioni comuni nll’iniczionc sotto

cute di prolnttina, vnlutnta sccondo la tecnicn di NICOLL (10G7). In nscissc : logaritnio dclla qunntith di prolnttinn iniettata, espressa in rnilliunith inter- nnzionnli (rnU.1.) ; in ordinate : pcso secco in milligarnmi (rngr) dell’cpi- telio di unn supcrficie circolarc, di crn 4 di dinmctro, dclln tnscn latcralc del- I’ingluvic.

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man mano riunite, conservate a - 2 O O C e quindi omogenate in 2,4 ml di soluzione di NaCl 0,I) %. L’omogenato, opportunamcnte suddiviso, fu iniettato nella tasca laterale destra del gozzo di G piccioni. Dall’altro lato dcl gozzo fu iniettata una cguale quant i t j di NaCl 0,g %. Le iniczioni furono fattc secondo le stcsse modalitj seguite per i liofilizzati dei brodi.

Tutti i piccioni furono sacrificati 20 ore dopo l’ultima iniczione. La risposta dcl gozzo fu valutata sccondo il mctodo proposto da

XICOLL (1DG7) cd csprcssa in milliiinitj iiitcriiazionali (mU.1.) in base ad iina curra di attirith (fig. 1) allcstita, coiitcniporanearticiitc, sommini- strando a 4 gruppi tli 4 piccioni rispcttivanicntc 100, 200, f O O e 800 mU.1. di prohttina orina (XI11 - 1’ - SS, attivith media 2S,30 U.I.fmg).

I1 controllo istologico di tutte le tasclic latcrali fu cseguito dopo fissazionc ncl liquido di Bouin, inclusione in parollina c colorazione con cniallrinic di JIcycr-cosina di sczioni di 7 p.

Dall’csame dci risultnti riossunti nella tabella 1, nella quale l’atti- vith prolattinica i: csprcssa in mU.1. c confcrniati dall’osscrrazione isto- logica (cfr. tavola I, figg. 1-4)’ si rileva quanto segue:

1) I1 dato ncgatiro rclativo all’ipofisi cstiva isolata (coltirata in prcscnza dcl liquido di cstrazionc) probabilnicntc i: doruto a un difet- to tccnico giacclit. piii voltc i: stato acccrtato clic l’ipofisi dcll’animale cstiro contiene prolattina anclie in quant i t j maggiori dell’ipofisi dcl- l’animalc inrcrnale (VELLASO et nl., 10G7 ; SCALESGIIE et nl., 1I)G8), dato confermato dalla coltivazione in prcscnza di ipotalarno.

2) Tanto l’ipofisi cstiva quanto, ed ancor pih, I’ipofisi invernale, in prcscnza di estratto acido dclla rcgione tclcnccfalica comprcndente i bulbi olfattivi, contiene una elevata quaiitit& di prolattiiia c ne rilascia uiia notevole quantith nel mezzo di coltura. Dato questo clie corrobora la supposizione clie l’ipofisi invernale abbia maggiore capacitj di secernere di quella cstiva.

3) L’ipofisi dell’animale estivo emette tutto il suo coiitcnuto di prolattina nel brodo di coltura sia in presenza di ipotalamo estivo clie di ipotalamo invernale.

4) L’ipofisi dcll’animale iiivcrnalc in presenza di estratti ipotalamici omologlii tratticiic tu t ta la proIattina ; in prcscnza di ipotalanio esti- vo si comporta come I’ipofisi dell’animale invernalc coltivata isolata- mente.

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T A V O L A I

Tutte lc figure rapprcsentano sezioni della pnrctc della tasca lnteralc dcll’ingluvie di piccionc tesa sull’appareccliio richicsto da11a tccnica di NICOLL (10G7), fissata in Bouin, sczionata a 7 11, colorata con crnallurnc di Ncycr-cosina; 1G5 x ; filtro giallo. Fig. 1 - Tasca laterale di controllo. Fig. 2 - Tasca laterale inicttata con il brodo di una coltura di ipofisi di animalc esti-

Fig. 3 - Tasca laterale iniettata con I’omogenato di ipofisi di anininlc invcrnnlc eol-

Fig. 4 - Tasca laterale inicttata con I’omogcnato di ipofisi di animalc invernalc col-

vante in presenza di ipotnlamo invernale.

tivata in presenza di ipotalamo estivo.

tivata in presenza di telenccfnlo invernale.

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DISCUSSIONE

I dati sperimentali in precedenza raccolti (NAZZI et al., 1066 ; VEL- LAXO et nl., 10G7 ; SCALESGIIE el nl., 1968) facevano ritenerc verosiniile clle nel Tritone crestato : 1) la produzione di prolattina da parte dell’adenoipo- fisi abbia un aiidaniento ciclico, essendo pih alta nei mesi invernali, pih bassa in quelli estivi ; 2) la prolattina si accumuli nell’adenoipofisi durante i mesi estivi, l’abbassamento della temperatura all’inizio dell’autuniio rap- presentando lo stimolo clie provoca la sun liberazione nel circolo sanguigno e il conseguente (( water drive B.

Anche la produzione di prolattinn sembrerebbe, quindi, essere re- golata, cosi conic l’attivith gonadotropa (GALGASO, 10-1.4, 191$), dalle ra- riazioiii annuali cicliclie della temperaturn ambientale, esscndone il coor- dinamento e il a timing )) rcalizzato attraverso la niediazioiie del sistemn nervoso centrale.

In qua1 niodo si estrinseca In regolazione da parte del sistema ner- voso centrale (e per ~ S S O dell’ipotalanio) dell’attirith prolattinica adenoipo- fisaria dcl Tritone crestato ? La pih semplice ipotesi della produzione ci- clica di un fattore inibitore (PIF = prolactin inhibiting factor) o di un fattore attivatore (PRF = prolactin releasing factor) eon massima attivi- t j in estate o in inverno, rispettiraniente, non t r o w coiiferma iielle no- stre attuali esperienze. Infatti, in base a tali ipotesi, ci si sarcbbe dovuto attendere clie, in presenza di cstratto di ipotalamo estivo, l’ipofisi, sia estiva. chc invernde, trattenesse tutto i l contenuto in prolattina. Cii, non si verifica come non si verifica l’atteso aumcnto (in base all’ipotesi) di increazione di prolattina da parte dcll’ipofisi inrernale in presenza di estratto di ipotalaino invernale.

I fatti osservati possono inquadrarsi, iiirece, in una seeonda ipo- tesi - che qui proponiamo - la qualc prevcde che nell’ipotalamo risieda lion solo un’attivith inibitrice ma, anclie, un’attivith stimolatrice nei con- fronti delle cellule preipofisarie che producono la prolattina.

I presupposti per una siffatta ipotesi - particolarmente idonea a spiegarc l’attivith prolattinica ciclica dell’adenoipofisi in mancanza di un meccanismo di (( feedback o periferico - vanno ricercati nel fatto die, in ccrti mammiferi, la quantita di prolattina contenuta nell’ipofisi 6 ‘ bassa durante la gestazionc, aumenta dopo il parto (TURSER e GRIFFITII, 1962) e va crescendo in rapport0 eon la quantith di latte prodotto (GROWEXOR e TURXER, 105G ; REECE e TURSER, 1037).

La sommiiiistrazionc di estratti ipotalamici di animali allattanti ha un effetto somatotropico (WELLEX, 10G3) maggiorc di quello di estratti

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ipotalamici di fcmminc vcrgini, e provoca, del pari, un pih deciso incre- mento dell’attivith prolattinica dell’ipofisi omologa coltivata in vitro (RATXER c I\EEITEs, 10G4). dnche l’ipotalamo di piccioni che a h v a n 0 la prole, prelevato nel giorno della schiusa, stimola il rilascio della prolattina da partc dell’ipofisi omologa coltivata in vifro (KRAGT e ~IEITES, 1065).

Per spiegare il deciso aumento dell’attivith mammotropica dopo il pnrto TURSER e GRIFFITII (10G2) supposero che, durante la gestazione ve- nisse formato e ininiagazzinato, nell’ipotalamo un PRF, ncll’ipofisi pro- lattina : lo stimolo provocato dal succliiamcnto e la conseguentc produ- zione di ositocina provoclierebbe il discarico del P R F nel circolo portale, e stimolerebbe l’immissione in circolo della prolattina da parte dell’ade- noipofisi.

Dalle recentissime indagini intrapresc da AIISIIKIKSIW et al. (10G8) nel ratto l’ipotesi di TURSER ha ricevuto sostanziale conferma, fatta ec- cezione per il ruolo attribuito all’oxitocina ; sicchC gli AA. ritengono che (( the hypothalami of post pnrtum rat possess an in vivo [ed anche in vitro] prolactin releasing activity D.

I risultati da noi prcsentati possono trovare spiegazionc ammettendo una produzione ciclica e bilanciata, da parte dell’ipotalamo, di due fat- tori, l’uno inibitore (PIF) l’altro eccitatore (PRF).

Durantc i mesi cstivi l’ipotalamo produrrebbe e immetterebbe in circolo PIF, sintctizzando, ma ‘non immcttendo in circolo P R F : l’ipofisi biosintetizzcrebbe, a un ritmo modesto, condizionato dal PIF, prolattina clic gradualmente si accumulerebbe nclle cclIuIc preipofisarie competenti.

Quando la tcmpcratura ambientale dcclina, l’equilibrio fra PIE’ e P R F si rompe a favore del P R F : tut ta In prolattina immagazzinata si rivcrsa in circolo provocando (( water drive )) e, sccondnriamcnte, blocco della spermatogenesi. Durantc l’invcrno l’ipotalamo produrrebbe di con- tinuo il PRF, mentre nccumulcrcbbe il PIF, e le cellule preipofisarie pro- durrebbero di continuo ina non accumulerebbero prolattina. I fenomeni inversi si verifichcrcbbero a primavera quando, con l’aumento della tem- peratura esterna, aumentercbbc l’immissione in circolo di PIF, decresce- rebbe quclIa di PRF.

I dati sperimentali raccolti sono in buon accord0 con questa ipotesi. Infatti I’ipofisi cstiva lia una inerente minore capacitii di produrre prolat- tina (si Veda il comportamento nei confronti del fattore tclencefalico) in quanto condizionata dal PIF c riscnte solo del PRF, indipendentcmcnte dalla quantitii di csso contenuta nell’cstratto ipotalamico (ehe si suppone maggiorc nell’ipotalamo estiro). L’ipofisi invernale, condizionata dal PRF, ha una increntc maggiore capacith di produrre prolattina, che si estrinseca

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sin-in presenza del fnttore attivatore telcnccfalico clie in nssenza dcl con- trollo ipotalnmico. In presenzn di estrntto ipotnlnmieo omologo esso ri- spondc solo al PIF nccuniulnto nell’ipotnlamo ; in prcsenzn di estratto ipotnlnmico cstiro (ricco di PRF) mnritierie nell’omogennto e rivcrsn nelln coltura notevolc qunnt i t j di prolattinn.

Nuore csperienze, sin i t t vico clie i t t nitro, sono progettate per sng- giare la rnlidith dell’ipotesi sopra csposta e per trovnre unn spicgazionc dell’efTetto csercitnto dngli estrntti telencefnlici.

RIASSUXTO

Con il sistcnia dclle colture in vilro a brcvc tcrmine (3 11) di ipofisi di aniniali invcrnali ed estivanti in prcscnza di cstratti ipotalnmici e di cstratti telenccfalici 6 stata ciiiicntata l’ipotcsi dcl controllo inibitorc dcll’ipotalamo sulla secrczione di pro- lattina in un anfibio urodclo. I risriltati ottcnuti, riassiinti nclla tabclla 1, indicano : 1) clie I’ipofisi dcgli anirnali invcrnali b in grado di produrrc niaggiori quantitii di pro- lattina di quclla dcgli animnli cstivanti ; 2) clic gli cstratti telenccfalici si coinportnno conic un a rclcasing factor a ; 3) clic, ncllc condizioni dclla presentc cspcricnza, gli cstratti ipotalnniici cscrcitnno effctti die possono csserc spiegati aninicttcndo I’ipotcsi dclla produzionc contcmporancn c bilanciata di due fattori, uno inibitore (PIF) I’altro atti- vatorc (PRF), la cui imniissionc in circolo sarebbc rcgolatn dalla variazionc stagionale dclla tcmpcratura.

Sono progettatc nuow cspcricnze i n vivo e in vifro eon estratti ipotalamici pii- rificati cd ottcnuti da un numcro di animali pih clevato.

SUJIMARY

Short-tcrm in vitro ciiltures have been applied to the pituitary from both winter and estivating animals (Trifurtcs crislafiis carniJez Laur.), in the presencc of Ilypotlia- lamic and trlcnccplialic extracts, in order to chcck the Iiypothcsis of an inhibitory con- trol cscrtcd by tlic liypotlialarnus on prolactin secretion, in a iirodelc Amphibian. Tlic results summnriscd in table 1 suggest that : 1) the pituitary from winter animals can produce Iiiglicr levels of prolactin than that of estivating anirnals ; 2) tlic tclenccplialic estracts behave like rclcasing factors ; 3) undcr tlic present experimental conditions, the eflrcts csertcd by thc Iiypothalamic cstracts may be esplaincd by the liypotlicsis of a simriltancoiis and balanced production of an inhibiting (PIF) and a rclcasing factor (PRF), mliose rcleasc into tlic circulation woiild bc controlled by the temperature sca- sonal variations.

Furthcr cspcriments i n viro and i n vifro with purified hypothalamic cstracts obtaincd from a larger nrimbcr of specimens have been devised.

BIIILIOGRAFIX

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