ПРАКТИКУМ ПО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ · 2020. 9. 30. ·...

МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РФ ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ

БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ

«ВОРОНЕЖСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ»

ПРАКТИКУМ ПО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ ХИМИИ

Учебное пособие

Воронеж Издательский дом ВГУ

2017

2

Утверждено научно-методическим советом фармацевтического факультета

10 июня 2016 г., протокол № 1500-08-06

Авторы: А.И. Сливкин, П.М. Карлов, А.С. Чистякова, Е.Е. Логвинова,

О.В. Тринеева

Рецензент – доктор фарм. наук, профессор, заведующий кафедрой фарма-

цевтической химии и фармакогнозии Белгородского национального иссле-

довательского университета О.О. Новиков

Учебное пособие разработано на кафедре фармацевтической химии и фар-

мацевтической технологии Воронежского государственного университета.

Рекомендуется для студентов 3-го курса фармацевтического факультета оч-

ной формы обучения.

Для специальности 33.05.01 – Фармация

3

Содержание

Предисловие .......................................................................................................... 5

Тема №1 «Общие методы исследования степени чистоты (доброкачествен-

ности) лекарственных средств, эталонные растворы, их приготовление» .... 6

Тема № 2 «Титрованные растворы. Приготовление. Установление титра» 29

Тема № 3 «Фармакопейный анализ лекарственных веществ – соединений

элементов VI группы периодической системы Д.И. Менделеева. Анализ не-

стойких лекарственных средств» ..................................................................... 34


элементов VII группы периодической системы Д.И. Менделеева» ............. 43


элементов III, IV и V группы периодической системы Д.И. Менделеева»….45


элементов II группы периодической системы Д.И. Менделеева» ................ 49

Тема № 7 «Функциональный анализ органических соединений» ................ 52

Тема № 8 «Галогенопроизводные ациклических алканов.

Спирты и эфиры» ................................................................................................ 56

Тема № 9 «Альдегиды и их производные. Углеводы».................................... 60

Тема № 10 «Карбоновые кислоты и их производные.

Лактоны ненасыщенных олигидроксикарбоновых кислот» .......................... 65

Тема № 11 «Аминокислоты и их производные» ............................................ 72

Тема № 12 «Терпены» ....................................................................................... 74

Тема № 13 «Производные β-лактамидов. Пенициллины

и цефалоспорины» .............................................................................................. 77

Тема № 14 «Производные циклопентанпергидрофенантрена

(стероидные соединения)» ................................................................................. 83

Тема № 15 «Фенолы и их производные»........................................................ 107

4

Тема № 16 «Ароматические кислоты и их производные. Производные

пара-аминофенола»........................................................................................... 111

Тема № 17 «Лекарственные средства производные ароматических

аминокислот. Диэтиламиноацетанилиды» .................................................... 118

Тема № 18 «Фенилалкиламины и их производные» .................................... 126

Тема № 19 «Лекарственные средства, производные гидроксифенилалифати-

ческих аминокислот, нитрофенилалкиламинов и аминодибромфенилалки-

ламинов» ...........................................................................................................130

Тема № 20 «Лекарственные средства из группы сульфаниламидов» ........ 140

Тема № 21 «Лекарственные средства, производные сульфонилмочевины и

бигуанидов» ......................................................................................................145

Тема № 22 «Производные бензолсульфохлорамида и амида хлорбензол-

сульфоновой кислоты и бензотиадиазина» ................................................... 147

Тема № 23 «Практические навыки» ............................................................... 154

Литература ........................................................................................................ 159

Приложения ...................................................................................................... 161

5

Предисловие

Студенты фармацевтических факультетов с третьего курса начинают

изучать фармацевтическую химию, самую трудоемкую дисциплину специ-

альности, при освоении которой основное внимание уделяется практиче-

ской части программы. В ходе лабораторных работ, студенты должны овла-

деть практическими умениями и навыками по осуществлению контроля ка-

чества лекарственных средств аптечного и промышленного изготовления.

Настоящее пособие содержит методики проведения контроля качества

лекарственных средств неорганической природы и органических лекарст-

венных средств, имеющих алифатическую и ароматическую структуру.

6

Тема 1.

ОБЩИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ СТЕПЕНИ ЧИСТОТЫ (ДОБ-

РОКАЧЕСТВЕННОСТИ) ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ, ЭТАЛОН-

НЫЕ РАСТВОРЫ, ИХ ПРИГОТОВЛЕНИЕ

И ИСПОЛЬЗОВАНИЕ

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА №1

Перечень веществ для исследования:

Калия хлорид, Натрия гидрокарбонат, Калия йодид, Кальция глюконат, Са-

лициловая кислота, Магния сульфат, Натрия хлорид, Кислота борная, На-

трия тетраборат.

Задание 1. Определение растворимости – ОФС.1.2.1.0005.15 ГФ XIII

Методика определения растворимости. К навеске растертого в

тонкий порошок вещества прибавляют отмеренное количество растворите-

ля и непрерывно встряхивают в течение 10 мин при (20 ± 2) ºC.

Для медленно растворимых веществ, требующих для своего раство-

рения более 10 мин, допускается нагревание на водяной бане до 30 ºC. На-

блюдение производят после охлаждения раствора до комнатной температу-

ры и энергичного встряхивания в течение 1 – 2 мин.

Условия растворения медленно растворимых веществ указывают в

фармакопейных статьях.

Задание 2. Испытание на допустимые пределы примесей.

1. Примесь Алюминия

Для определения примеси алюминия в лекарственных средствах ис-

пользуют метод флуориметрии (метод 1) и метод атомно-абсорбционной

спектрометрии (метод 2).

Метод 1

Испытуемый раствор. Раствор испытуемого образца, приготовлен-

ный, как указано в фармакопейной статье.

7

Эталонный раствор. Используют стандартный раствор алюминий-

иона, указанный в фармакопейной статье.

Контрольный раствор. Используют растворитель, указанный в фар-

макопейной статье.

Испытуемый раствор помещают в делительную воронку, встряхивают

с двумя порциями, по 20 мл каждая, раствора 5 г/л гидроксихинолина в

хлороформе, затем с 10 мл этого же раствора. После прибавления каждой

порции хлороформные слои отделяют, собирая в мерную колбу вместимо-

стью 50 мл, доводят объем раствора хлороформом до метки и перемешива-

ют. Эталонный и контрольный растворы обрабатывают аналогично.

Измеряют интенсивность флуоресценции испытуемого (I1), эталонно-

го (I2) и контрольного растворов (I3) при длине волны возбуждения 392 нм и

длине волны флуоресценции 518 нм. Флуоресценция испытуемого раствора

(I1 – I3) не должна превышать флуоресценцию эталонного раствора (I2 – I3).

Стандартные растворы алюминий-иона – ОФС.1.2.2.2.0001.15 ГФ XIII

Метод 2

Применяют для субстанций, предназначенных для использования в

гемодиализе.

2. Примесь аммония

Определение примеси ионов аммония в лекарственных средствах ос-

новано на образовании в зависимости от их концентрации желто-бурого

осадка или желтого окрашивания со щелочным раствором калия тетрайо-

домеркурата (реактивом Несслера). Предельная чувствительность реакции

0,3 мкг/мл аммоний-иона. При концентрации аммоний-иона 2 мкг/мл на-

блюдается выраженное желтое окрашивание.

Испытуемый раствор. 10 мл раствора, приготовленного, как указано

в фармакопейной статье.

8

Эталонный раствор. 10 мл стандартного раствора аммоний-иона

(2 мкг/мл).

К испытуемому и эталонному растворам прибавляют по 0,15 мл реак-

тива Несслера и перемешивают. Через 5 мин сравнивают окраску раство-

ров.

Окраска, появившаяся в испытуемом растворе, не должна превышать

окраску эталонного раствора.

Определение NH4+в лекарственных средствах, содержащих

щелочноземельные и тяжелые металлы

Испытуемый раствор. Навеску испытуемого образца, указанную в

фармакопейной статье, растворяют в возможно меньшем количестве воды,

прибавляют при охлаждении 2 мл натрия гидроксида раствора 10 % и

2 мл 10 % раствора натрия карбоната. Раствор разбавляют водой до требуе-

мой концентрации, взбалтывают и фильтруют. Отбирают 10 мл полученно-

го фильтрата.

Эталонный раствор. 10 мл стандартного раствора аммоний-иона

(2 мкг/мл).



ров.

Определение NH4+ в лекарственных средствах, содержащих

более 0,03 % примеси железа

Испытуемый раствор. К 10 мл раствора, приготовленного, как указа-

но в фармакопейной статье, прибавляют две капли натрия гидроксида рас-

твора 10 % и 3 мл калия-натрия тартрата раствора 20 %, перемешивают.

Эталонный раствор. К 10 мл стандартного раствора аммоний-иона

(2 мкг/мл аммоний-иона) прибавляют две капли натрия гидроксида раство-

ра 10 % и 3 мл калия-натрия тартрата раствора 20 %.

9



ров.

Стандартные растворы аммоний-иона – ОФС.1.2.2.2.0002.15 ГФ XIII

3. Примесь железа

Химические методы определения примеси железа в лекарственных

средствах основаны на образовании окрашенных растворов при взаимодей-

ствии ионов железа с различными реагентами.

С сульфосалициловой кислотой соли двух- и трехвалентного железа в

зависимости от концентрации образуют в аммиачной среде желтые или ко-

ричнево-красные растворы сульфосалицилатных комплексов (метод 1); в

зависимости от природы испытуемого образца используются различные

модификации этого метода.

С тиогликолевой кислотой в аммиачной среде (метод 2) или с аммо-

ния тиоцианатом в кислой среде (метод 3) соли трехвалентного железа в за-

висимости от концентрации образуют розовые или красные растворы соот-

ветствующих соединений. При использовании этих методов двухвалентное

железо переходит в трехвалентное под действием тиогликолевой кислоты

или аммония персульфата.

После добавления соответствующих реактивов (с учетом используе-

мого метода) сравнивают интенсивность окраски испытуемого раствора с

окраской эталонного раствора. Окраска, появившаяся в испытуемом рас-

творе, не должна превышать окраску эталонного раствора.

Предельно допустимое содержание солей железа, метод испытания,

условия подготовки испытуемого образца и концентрация стандартного

раствора железа должны быть указаны в фармакопейной статье.

10

Определение железа в растворах лекарственных средств

Метод 1

Испытуемый раствор. 10 мл раствора испытуемого образца, приго-

товленного, как указано в фармакопейной статье.

Эталонный раствор. 10 мл стандартного раствора 3 мкг/мл желе-

зо(III)-иона.

К испытуемому и эталонному растворам прибавляют по 2 мл сульфо-

салициловой кислоты раствора 10 %, 1 мл аммиака раствора 10 %, переме-

шивают и через 5 мин сравнивают окраску растворов.

Определение солей железа в соединениях магния




зо(III)-иона.


салициловой кислоты раствора 10 %, 0,5 мл аммония хлорида раствора 10,7

%, 1 мл аммиака раствора 10 % и через 5 мин сравнивают окраску раство-

ров.

Определение солей железа в соединениях алюминия




зо(III)-иона.


салициловой кислоты раствора 10 %, 2 мл натрия гидроксида раствора 10 %

и через 5 мин сравнивают окраску растворов.

11

Метод 2




зо(III)-иона.

К испытуемому и эталонному растворам прибавляют по 2 мл лимон-

ной кислоты раствора 20 % и 0,1 мл тиогликолевой кислоты, перемешива-

ют, добавляют аммиака раствор 10 % до щелочной реакции по универсаль-

ной индикаторной бумаге, доводят объем раствора водой до 20 мл, переме-


Метод 3



Эталонный раствор. К 3 мл стандартного раствора 1 мкг/мл

железо(III)-иона прибавляют 7 мл воды.

К испытуемому и эталонному растворам прибавляют по 0,5 мл хлоро-

водородной кислоты концентрированной, 10 мг аммония персульфата и

1,5 мл аммония тиоцианата раствора 15 %, перемешивают и через 5 мин

сравнивают окраску растворов.

Стандартные растворы железо(III)-иона – ОФС. 1.2.2.2.0011.15 ГФ XIII

4. Примесь кальция

Растворы солей кальция в зависимости от их концентрации дают с

раствором аммония оксалата помутнение раствора или белый мелкокри-

сталлический осадок, не исчезающие при прибавления уксусной кислоты,

но легко растворимые при прибавлении хлористоводородной или азотной

кислоты. Предельная чувствительность реакции 3,5 мкг/мл кальций-иона.

При концентрации кальций-иона 30 мкг/мл наблюдается помутнение рас-

твора.

12

Метод 1



Эталонный раствор. 10 мл стандартного раствора кальций-иона

(30 мкг/мл).

К испытуемому и эталонному растворам прибавляют по 1 мл 10 %

раствора аммония хлорида, 1 мл 10 % раствора аммиака и 1 мл 4 % раствора

аммония оксалата, перемешивают.

Через 10 мин сравнивают мутность растворов. Мутность, появившая-

ся в испытуемом растворе, не должна превышать мутность эталонного рас-

твора.

Метод 2

При приготовлении всех растворов, применяемых в данном испыта-

нии, должна использоваться вода очищенная, полученная методом дистил-

ляции.

В каждую из двух пробирок помещают по 0,2 мл стандартного рас-

твора кальций-иона спиртового (100 мкг/мл) и 1 мл 4 % раствора аммония

оксалата.

Испытуемый раствор. Через 1 мин в одну из пробирок прибавляют

смесь 1 мл уксусной кислоты разведенной 12 % и 15 мл раствора, содержа-

щего указанное в фармакопейной статье количество испытуемого вещества,

и встряхивают.

Эталонный раствор. Во вторую пробирку также через 1 мин прибав-

ляют смесь 10 мл стандартного раствора кальций-иона (10 мкг/мл), 1 мл ук-

сусной кислоты разведенной 12 % и 5 мл воды.

Через 15 мин сравнивают мутность растворов. Мутность, появившая-

ся в испытуемом растворе, не должна превышать мутность эталонного рас-

твора.

13

Стандартные растворы кальций-иона – ОФС.1.2.2.2.0003.15 ГФ XIII

5. Примесь мышьяка

Методы определения предельного содержания мышьяка в лекарст-

венных средствах основаны на восстановлении соединений мышьяка до

мышьяковистого водорода с последующим получением желто-бурого про-

дукта реакции (метод 1) или до металлического мышьяка (метод 2).

Могут быть использованы другие валидированные методы.

6. Примесь ртути

Описанные ниже методы определения примеси ртути в лекарствен-

ных средствах основаны на экстракционно-фотометрическом определении

ртуть(II)-иона с дитизоном (метод 1) и определении методом атомно-

абсорбционной спектрометрии с беспламенной атомизацией – методом

«холодного пара» (метод 2).

Метод 1

Испытуемый раствор. В делительную воронку объемом 100 мл по-

мещают 15 мл водного раствора испытуемого образца, приготовленного,

как указано в фармакопейной статье, и прибавляют 5 мл серной кислоты

раствора 1 М.

Эталонный раствор. В делительную воронку объемом 100 мл поме-

щают 10 мл воды, 5 мл стандартного раствора ртуть(II)-иона Hg2+ (1 мкг/мл)

и 5 мл серной кислоты раствора 1 М.

Контрольный раствор. В делительную воронку объемом 100 мл по-

мещают 15 мл воды и 5 мл серной кислоты раствора 1 М.

В каждую из воронок прибавляют по 5 мл уксусной кислоты раствора

6 М и перемешивают. Затем добавляют по 10 мл дитизона раствора 0,00125

% в хлороформе, взбалтывают в течение 2 мин, дают отстояться и фильт-

руют органическую фазу через бумажный фильтр.

14

Измеряют оптическую плотность фильтратов испытуемого и эталон-

ного растворов относительно фильтрата контрольного раствора в максиму-

ме поглощения при длине волны 498 нм.

Оптическая плотность испытуемого раствора не должна превышать

оптической плотности эталонного раствора.

Стандартные растворы ртуть(II)-иона – ОФС.1.2.2.2.0005.15 ГФ XIII

Метод 2

Метод беспламенной атомизации (метод «холодного пара») заключа-

ется в восстановлении ионов ртути до металлической ртути, получении с

помощью генератора атомного пара паров ртути, последующей их отгонке

потоком воздуха или инертного газа в абсорбционную ячейку атомно-

абсорбционного спектрометра и измерении поглощения монохроматическо-

го излучения на резонансной длине волны 253,7 нм от ртутной лампы.

7. Примесь селена

Испытание на предельное содержание селена в лекарственных сред-

ствах проводят спектрофотометрическим методом, основанным на прове-

дении реакции с 2,3-диаминонафталином после предварительного сжигания

вещества в колбе с кислородом (ОФС.1.2.3.0010.15 «Метод сжигания в кол-

бе с кислородом»).

8. Примесь сульфатов

Определение содержания сульфат-ионов основано на их способности

образовывать с растворами солей бария помутнение раствора или белый

осадок, нерастворимые в кислотах. Предельная чувствительность реакции

3 мкг/мл сульфат-иона. При концентрации 10 мкг/мл сульфат-иона через

10 мин наблюдают помутнение раствора.

Метод 1



15

Эталонный раствор 10 мл стандартного раствора сульфат-иона

(10 мкг/мл).

К испытуемому и эталонному растворам прибавляют по 0,5 мл хлори-

стоводородной кислоты разведенной 8,3 % и 1 мл бария хлорида раствора

5 %, перемешивают.

Через 10 мин сравнивают мутность испытуемого и эталонного рас-

творов. Мутность, появившаяся в испытуемом растворе, не должна превы-

шать мутность эталонного раствора.

Метод 2

К 4,5 мл стандартного раствора сульфат-иона спиртового (10 мкг/мл)

прибавляют 3 мл бария хлорида раствора 25 %, встряхивают и выдержива-

ют в течение 1 мин.

Испытуемый раствор. К 2,5 мл описанного выше раствора прибав-

ляют 15 мл раствора испытуемого образца, приготовленного, как указано в

фармакопейной статье, и 0,5 мл уксусной кислоты разведенной 30 %.

Эталонный раствор готовят с теми же количествами реактивов и в

тех же условиях, используя вместо раствора испытуемого образца 15 мл

стандартного раствора сульфат-иона (10 мкг/мл).

Через 5 мин сравнивают мутность испытуемого и эталонного раство-

ров. Мутность, появившаяся в испытуемом растворе, не должна превышать

мутность эталонного раствора.

Стандартные растворы сульфат-иона – ОФС.1.2.2.2.0007.15 ГФ XIII

9. Примесь фосфатов

Определение фосфатов основано на их способности образовывать с

молибдат-ионами в присутствии восстановителя соединения синего цвета –

молибденовую синь.

Испытуемый раствор. 100 мл испытуемого раствора, имеющего ней-

тральную реакцию, приготовленного, как указано в фармакопейной статье.

16

Эталонный раствор. К 2 мл стандартного раствора фосфат-иона

(5 мкг/мл) прибавляют 98 мл воды.

К 20 мл испытуемого и 20 мл эталонного растворов прибавляют по

4 мл сульфомолибденового реактива 2,5 %, встряхивают, прибавляют по

0,1 мл раствора олова(II) хлорида, перемешивают и через 10 мин сравнива-

ют окраски.

Синяя окраска, появившаяся в испытуемом растворе, не должна пре-

вышать окраску эталонного раствора.

Стандартный раствор фосфат-иона – ОФС.1.2.2.2.0008.15 ГФ XIII

10. Примесь хлоридов

Растворы хлоридов в зависимости от их концентрации взаимодейст-

вуют с раствором серебра нитрата с образованием белого творожистого

осадка, с появлением белого помутнения или опалесценции, не исчезающих

при прибавлении азотной кислоты и легко исчезающих при прибавлении

раствора аммиака. Предел чувствительности реакции 0,1 мкг/мл хлорид-

иона. При концентрации хлорид-иона 2 мкг/мл получают хорошо заметную

опалесценцию.



Эталонный раствор. 10 мл стандартного раствора хлорид-иона

(2 мкг/мл).

К испытуемому и эталонному растворам прибавляют по 0,5 мл азот-

ной кислоты и 0,5 мл серебра нитрата раствора 2 %. Перемешивают и по-

мещают пробирки в темное место. Через 5 мин сравнивают опалесценцию

растворов.

Опалесценция, появившаяся в испытуемом растворе, не должна пре-

вышать опалесценцию эталонного раствора.

Стандартные растворы хлорид-иона – ОФС.1.2.2.2.0009.15 ГФ XIII

17

11. Примесь цинка

Определение примесей солей цинка в лекарственных средствах осно-

вано на образовании с раствором калия ферроцианида, в зависимости от

концентрации ионов цинка, белого помутнения раствора или белого осадка,

не растворимых в разведенных кислотах. Предельная чувствительность ре-

акции 1 мкг/мл цинк-иона. При концентрации цинк-иона 5 мкг/мл наблю-

дают помутнение раствора.



Эталонный раствор. 10 мл стандартного раствора цинк-иона

(5 мкг/мл).

К испытуемому и эталонному растворам прибавляют по 2 мл хлори-

стоводородной кислоты 25 % и по 0,2 мл калия ферроцианида раствора 5 %.

Через 10 мин сравнивают мутность растворов. Мутность, появившаяся в

испытуемом растворе, не должна превышать мутность эталонного раствора.

Примечание. В случае появления в испытуемом растворе синего ок-

рашивания, следует предварительно отделить ионы железа. Для этого к ис-

пытуемому раствору, нагретому до кипения, прибавляют аммиака раствор

10 % до отчетливого запаха, смесь фильтруют и проводят определение

цинк-ионов в фильтрате.

Стандартные растворы цинк-иона – ОФС.1.2.2.2.0010.15 ГФ XIII

12. Примесь тяжелых металлов

Описанные ниже методы определения содержания примесей тяжелых

металлов (свинец, ртуть, висмут, сурьма, олово, кадмий, серебро, медь, мо-

либден, ванадий, рутений, платина, палладий) в лекарственных средствах

основаны на образовании окрашенных сульфидов. Кроме указанных эле-

ментов окрашенные сульфиды образуют железо в количестве более 0,05 %

и мышьяк.

18

В качестве источника сульфидов используют раствор натрия сульфи-

да (метод 1) или тиоацетамидный реактив (метод 2).

После проведения реакции интенсивность окраски испытуемого рас-

твора сравнивают с окраской эталонного раствора. Окраска, появившаяся в

испытуемом растворе, не должна превышать окраску эталонного раствора.

Определение считается достоверным, если в эталонном растворе на-

блюдается слабое коричневое окрашивание по сравнению с контрольным

раствором.

Определение тяжелых металлов в растворах лекарственных средств

возможно для субстанций, образующих прозрачные, бесцветные растворы и

не влияющих на взаимодействие ионов металлов с сульфид-ионом вследст-

вие наличия комплексообразующих свойств. В остальных случаях опреде-

ление проводят из сульфатной золы или после другого способа минерали-

зации испытуемого лекарственного средства.

Предельно допустимое содержание тяжелых металлов, метод испыта-

ния и условия подготовки испытуемого образца должны быть указаны в

фармакопейной статье.

Определение тяжелых металлов в растворах лекарственных средств



Эталонный раствор. К 2 мл стандартного раствора свинец-иона

(5 мкг/мл) прибавляют 8 мл воды.

Контрольный раствор. 10 мл воды.

Примечание. Если при приготовлении испытуемого раствора исполь-

зуется органический растворитель, то эталонный, контрольный и стандарт-

ный раствор свинец-иона готовят с использованием того же растворителя.

19

Метод 1. К полученным растворам прибавляют по 1 мл уксусной ки-

слоты разведенной 30 %, 2 капли 2 % раствора натрия сульфида, переме-


В сравниваемых растворах допустима слабая опалесценция от выде-

лившейся серы.

Метод 2. К полученным растворам прибавляют по 2 мл ацетатного

буферного раствора рН 3,5, перемешивают, прибавляют по 1 мл тиоацета-

мидного реактива, перемешивают и через 2 мин сравнивают окраску рас-

творов.

Определение тяжелых металлов в зольном остатке органических ле-

карственных средств

Испытуемый раствор. Зольный остаток, полученный после сжигания

1,0 г (если не указано иначе в фармакопейной статье) испытуемого образца

в присутствии серной кислоты концентрированной, обрабатывают при на-

гревании на сетке 2 мл насыщенного раствора аммония ацетата, нейтрали-

зованного раствором натрия гидроксида, прибавляют 3 мл воды и фильтру-

ют в пробирку через беззольный фильтр, предварительно промытый 1 %

раствором уксусной кислоты, а затем горячей водой. Тигель и фильтр про-

мывают 5 мл воды, пропуская её через тот же фильтр в ту же пробирку.

Эталонный раствор. В тигель помещают серную кислоту концентри-

рованную в количестве, взятом для сжигания испытуемого образца, и далее

поступают как с испытуемым образцом, но промывание тигля и фильтра

производят лишь 3 мл воды, после чего к фильтрату прибавляют 2 мл стан-

дартного раствора свинец-иона (5 мкг/мл).

Контрольный раствор. Готовят так же, как и испытуемый раствор, но

без испытуемого образца.

Далее определение проводят любым из описанных выше методов оп-

ределения тяжелых металлов в растворах лекарственных средств.

20

Примечание. Определению тяжелых металлов из зольного остатка на-

личие солей железа в препаратах не мешает.

Стандартные растворы свинец-иона – ОФС.1.2.2.2.0012.15 ГФ XIII

Задание 3. Определение прозрачности и степени мутности жидко-

стей – ОФС.1.2.1.0007.15

Прозрачность и степень мутности жидкостей определяют путем срав-

нения испытуемой жидкости с растворителем или эталонами визуально или

инструментальным методом.

Испытание проводят в пробирках с притертой пробкой из прозрачно-

го бесцветного стекла с внутренним диаметром около 15 мм. Для сравнения

берут равные объемы эталона и испытуемой жидкости (5 или 10 мл). Испы-

тание проводят при освещении электрической лампой матового стекла

мощностью 40 Вт, расположенной над образцом, просматривая растворы

перпендикулярно вертикальной оси пробирок на черном фоне через 5 мин.

после приготовления эталона.

Испытуемую жидкость считают прозрачной, если она по прозрачно-

сти не отличается от воды или растворителя, используемого при приготов-

лении испытуемой жидкости, или выдерживает сравнение с эталоном I, т.е.

ее опалесценция (мутность) не превышает опалесценцию (мутность) этало-

на I при просмотре в описанных выше условиях.

Эталонами служат взвеси из гидразина сульфата и гексаметилентет-

рамина.

Приготовление раствора гидразина сульфата. 0,50 г гидразина суль-

фата помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 40 мл

воды, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Раствор

выдерживают в течение 4-6 ч.

Приготовление раствора гексаметилентетрамина. 3,00 г гексамети-

лентетрамина растворяют в 30,0 мл воды.

21

Приготовление исходного эталона. К 25,0 мл раствора гидразина

сульфата прибавляют 25,0 мл раствора гексаметилентетрамина, перемеши-

вают и оставляют на 24 ч.

Исходный эталон стабилен в течение 2 мес. при хранении в стеклян-

ной посуде, не имеющей дефектов поверхности (взвесь не должна прили-

пать к стеклу), с притертой пробкой.

Приготовление основного эталона. 15,0 мл исходного эталона поме-

щают в мерную колбу вместимостью 1 л, доводят объем жидкости водой до

метки и перемешивают.

Срок годности основного эталона - 24 ч.

Приготовление эталонов сравнения. Отмеренное количество основно-

го эталона, указанное в приведенной ниже таблице 1, помещают в мерную

колбу вместимостью 100 мл, доводят объем жидкости водой до метки и пе-

ремешивают.

Таблица 1. Состав эталонов сравнения

Эталоны сравнения I II III IV

Основной эталон, мл 5,0 10,0 30,0 50,0 Вода, мл 95,0 90,0 70,0 50,0

Примечание. Перед применением исходный, основной и эталоны

сравнения перемешивают и встряхивают в течение 3 мин.

Эталоны сравнения I, II, III и IV должны быть свежеприготовлен-

ными.

Для оценки прозрачности и степени мутности жидкостей допускается

использование специальных приборов типа турбидиметров или эквивалент-

ных, если это предусмотрено частной фармакопейной статьей.

22

Задание 4. Определение окраски жидкостей – ОФС.1.2.1.0006.15 ГФ

XIII

Окраску жидкостей определяют визуально одним из методов, приве-

денных ниже, путем сравнения с соответствующими эталонами. В статью

включены методы контроля качества лекарственных средств по показате-

лям "цветность" и "цветность раствора". Цветность является условно при-

нятой количественной характеристикой для жидкостей, имеющих незначи-

тельную окраску.

Цвет - это восприятие или субъективная реакция наблюдателя на объ-

ективный раздражитель в виде энергии, излучаемой в видимой части спек-

тра и охватывающей диапазон длин волн от 400 до 700 нм. Окраска двух

растворов совпадает (при определенном источнике света), если их спектры

поглощения и отражения идентичны и наблюдатель не замечает разницы

между ними.

Ахроматизм или отсутствие окраски означает отсутствие у испытуе-

мого раствора абсорбции в видимой области спектра.

Для визуальной оценки окраски жидкостей в зависимости от интен-

сивности в области коричневых, желтых и красных цветов используют один

из двух методов, описанных в статье. Бесцветными считаются жидкости,

если их окраска не отличается от воды (в случае растворов - от соответст-

вующего растворителя) или выдерживают сравнение с эталоном B9, т.е.

должны быть окрашены не более интенсивно, чем эталон B9.

Метод 1

Испытания проводят в одинаковых пробирках из бесцветного, про-

зрачного, нейтрального стекла с внутренним диаметром около 12 мм, ис-

пользуя равные объемы - 2,0 мл испытуемой жидкости и воды, или раство-

рителя, или эталона сравнения, описанного в статье. Сравнивают окраску в

23

дневном отраженном свете, горизонтально (перпендикулярно оси проби-

рок) на матово-белом фоне (эталоны 1-3).

Метод 2

Испытания проводят в одинаковых пробирках из бесцветного, про-

зрачного, нейтрального стекла с внутренним диаметром от 15 до 25 мм, ис-

пользуя равные слои высотой 40 мм испытуемой жидкости и воды, или рас-

творителя, или эталона сравнения, описанного в статье. Сравнивают окра-

ску в дневном отраженном свете сверху вдоль вертикальной оси пробирок

на матово-белом фоне (эталоны 4-9).

Приготовление исходных растворов

Желтый раствор. 46 г (точная навеска) железа(III) хлорида (FeCl3 x

6 H2O; М.м. 270,30) растворяют в 900 мл смеси, приготовленной из 25 мл

концентрированной хлористоводородной кислоты и 975 мл воды, в мерной

колбе вместимостью 1000 мл, перемешивают и доводят объем раствора в

колбе этой же смесью до метки. Определяют количественное содержание

железа хлорида в 1 мл раствора. Объем раствора железа хлорида разбавля-

ют этой же смесью таким образом, чтобы содержание железа хлорида в

1 мл составляло 45,0 мг.

Раствор хранят в защищенном от света месте.

Количественное определение: 10,0 мл раствора железа хлорида по-

мещают в коническую колбу с притертой пробкой вместимостью 250 мл,

прибавляют 15 мл воды, 5 мл концентрированной хлороводородной кисло-

ты и 4 г калия йодида, перемешивают, закрывают пробкой и оставляют на

15 мин. в темном месте, затем прибавляют 100 мл воды. Титруют выделив-

шийся йод раствором 0,1 М натрия тиосульфата, прибавляя 0,5 мл раствора

крахмала в конце титрования в качестве индикатора.

24

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 27,03 мг желе-

за(III) хлорида (FeCl3 x 6 H2O).

Красный раствор. 60 г (точная навеска) растертого кобальта(II) хло-

рида (CoCl2 x 6 H2O; М.м. 237,93) растворяют в 900 мл смеси, приготовлен-

ной из 25 мл концентрированной хлороводородной кислоты и 975 мл воды,

в мерной колбе вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора в колбе

этой же смесью до метки. Определяют количественное содержание кобаль-

та хлорида в 1 мл раствора. Объем раствора кобальта хлорида разбавляют

этой же смесью таким образом, чтобы содержание кобальта хлорида в 1 мл

раствора составляло 59,5 мг.

Количественное определение. 5,0 мл раствора кобальта хлорида поме-

щают в коническую колбу с притертой стеклянной пробкой вместимостью

250 мл, прибавляют 5 мл 3% раствора перекиси водорода и 30 мл 10% рас-

твора натрия гидроксида. Смесь кипятят с обратным холодильником в тече-

ние 10 мин., затем охлаждают до комнатной температуры и прибавляют

60 мл 1 М раствора серной кислоты и 2 г калия йодида. Закрывают колбу и

растворяют осадок, осторожно помешивая. Выделившийся йод титруют

0,1 М раствором натрия тиосульфата до бледно-розового окрашивания, ис-

пользуя в качестве индикатора 0,5 мл раствора крахмала в конце титрования.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 23,79 мг ко-

бальта (II) хлорида (CoCl2 x 6 H2O).

Голубой раствор. 63 г (точная навеска) меди(II) сульфата (CuSO4 x

5 H2O; М.м. 249,68) растворяют в 900 мл смеси, приготовленной из 25 мл

концентрированной хлороводородной кислоты и 975 мл воды, в мерной

колбе вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора в колбе этой же

смесью до метки. Определяют количественное содержание меди сульфата в

1 мл раствора. Объем раствора меди сульфата разбавляют этой же смесью

25

таким образом, чтобы содержание меди сульфата в 1 мл раствора составля-

ло 62,4 мг.

Количественное определение. 10,0 мл раствора меди сульфата поме-

щают в коническую колбу с притертой стеклянной пробкой вместимостью

250 мл, прибавляют 50 мл воды, 12 мл 2 М раствора уксусной кислоты и 3 г

калия йодида. Смесь перемешивают и выделившийся йод титруют 0,1 М

раствором натрия тиосульфата до бледно-коричневого окрашивания, ис-

пользуя 0,5 мл раствора крахмала в качестве индикатора в конце титрова-

ния.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 24,97 мг ме-

ди(II) сульфата (CuSO4 x 5 H2O).

Приготовленные исходные и стандартные растворы помещают в су-

хие склянки с притертыми пробками и хранят при температуре (20 ± 3)

град. C в защищенном от попадания прямых солнечных лучей месте.

Срок годности исходных и стандартных растворов - 1 год.

При хранении исходных и стандартных растворов следует перед

употреблением убедиться в отсутствии в них мути, осадка и хлопьев. При

наличии таковых растворы заменяют свежеприготовленными.

Приготовление стандартных растворов

Стандартные растворы, получаемые смешением исходных растворов

железа хлорида, кобальта хлорида и меди сульфата с 1% раствором хлори-

стоводородной кислоты, представлены в табл. 2

26

Таблица 2. Стандартные растворы

Стандартные растворы Желтый исходный раствор, мл

Красный исходный раствор, мл

Голубой исходный раствор, мл

1% раствор хлористоводо-родной кислоты, мл

B (коричневый) 30 30 24 16 BY (коричневато-желтый)

24 10 4 62

Y (желтый) 24 6 0 70 GY (зеленовато-желтый)

96 2 2 0

R (красный) 10 20 0 70

Приготовление эталонов

Эталоны готовят из пяти стандартных растворов путем разбавления

их 1% раствором хлороводородной кислоты.

Отмеривание исходных и стандартных растворов для приготовления

шкал производят при помощи калиброванной пипетки или бюретки с точ-

ностью до 0,02 мл.

Эталоны для определения степени окраски жидкостей по методу I

хранят в ампулах из бесцветного прозрачного нейтрального стекла с на-

ружным диаметром 12 мм, в защищенном от света месте в течение 1 года.

Эталоны, используемые для определения степени окраски жидкостей

по методу II, готовят из соответствующих стандартных растворов непо-

средственно перед использованием.

Количества компонентов для приготовления эталонов цветности при-

ведены в табл. 3 – 7.

27

Таблица 3. Эталоны коричневых оттенков (шкала B)

Эталоны шкалы B Стандартный раствор B, мл

1% раствор хлороводородной

кислоты, мл B1 75,0 25,0 B2 50,0 50,0 B3 37,5 62,5 B4 25,0 75,0 B5 12,5 87,5 B6 5,0 95,0 B7 2,5 97,5 B8 1,5 98,5 B9 1,0 99,0

Таблица 4.

Эталоны коричневато-желтых оттенков (шкала BY) Эталоны шкалы BY Стандартный

раствор BY, мл 1% раствор

хлороводородной кислоты, мл

BY1 100,0 0,0 BY2 75,0 25,0 BY3 50,0 50,0 BY4 25,0 75,0 BY5 12,5 87,5 BY6 5,0 95,0 BY7 2,5 97,5

Таблица 5.

Эталоны желтых оттенков (шкала Y) Эталоны шкалы Y Стандартный

раствор Y, мл 1% раствор


Y1 100,0 0,0 Y2 75,0 25,0 Y3 50,0 50,0 Y4 25,0 75,0 Y5 12,5 87,5 Y6 5,0 95,0 Y7 2,5 97,5

28

Таблица 6. Эталоны зеленовато-желтых оттенков (шкала GY)

Эталоны шкалы GY Стандартный раствор GY, мл

1% раствор хлороводородной

кислоты, мл GY1 25,0 75,0 GY2 15,0 85,0 GY3 8,5 91,5 GY4 5,0 95,0 GY5 3,0 97,0 GY6 1,5 98,5 GY7 0,75 99,25

Таблица 7.

Эталоны красных оттенков (шкала R) Эталоны шкалы R Стандартный

раствор R, мл 1% раствор


R1 100,0 0,0 R2 75,0 25,0 R3 50,0 50,0 R4 37,5 62,5 R5 25,0 75,0 R6 12,5 87,5 R7 5,0 95,0

Сравнение степени окраски жидкости с эталонами (B, BY, Y, GY, R)

обычно проводят по методу I; в случае использования эталонов B4-9, (BY,

Y, GY, R)4-7 применяют метод II.

Степень окраски испытуемого раствора не должна превышать сте-

пень окраски соответствующего эталона. Цвет испытуемого образца дол-

жен быть максимально приближен к цвету соответствующего эталона.

При сравнении окраски испытуемого раствора с эталонами указыва-

ют, кроме номера эталона, букву шкалы. Например, окраска раствора не

должна превышать эталон B7.

29

При необходимости могут быть использованы другие эталоны, приго-

товленные путем смешения стандартных растворов разных цветовых шкал с

точным указанием их объемов для достижения нужной окраски, прибли-

женной к окраске испытуемого раствора, если это предусмотрено частной

фармакопейной статьей.

Для оценки окраски жидкостей возможно использование спектрофо-

тометрического метода, при этом должны быть указаны: длина волны, при

которой наблюдается максимум поглощения в видимой области спектра,

толщина кюветы и значение оптической плотности с допустимыми откло-

нениями, если это предусмотрено частной фармакопейной статьей.

Тема 2.

ТИТРОВАННЫЕ РАСТВОРЫ. ПРИГОТОВЛЕНИЕ.

УСТАНОВЛЕНИЕ ТИТРА


Задание 1. Приготовление титрованных растворов

1. Приготовление 1 л раствора натрия гидроксида (натра едкого)

(0,1 моль/л).

Проводят расчет навески натрия гидроксида, необходимой для приго-

товления раствора:

NaCl + HCl → NaCl + H2O

fэкв = 1 ; М.м. (NaOH) = 40,00

ТNaOH=M.м.(NaOH) С(NaOH)

1000

=

0,140,00

1000

= 0,00400 г/моль

аNaOH = ТNaOH ×VNaOH = 0,00400×1000 = 4,0 г.

30

Для приготовления раствора берут навеску несколько большую вы-

численной, т.к. натрия гидроксид при хранении поглощает углекислоту

воздуха и частично переходит в карбонат.

Методика. 4,5 г натрия гидроксида растворяют в 5 мл воды, колбу

плотно закрывают пробкой и оставляют до следующего дня. Жидкость сли-

вают с осадка и мерную колбу вместимостью 1л и доводят свежеприготов-

ленной и охлажденной водой до метки.

Для приготовления используют исходный более концентрированный

раствор (160 г натрия гидроксида в 300 мл воды), 8мл этого раствора поме-

щают в мерную колбу вместимостью 1л и доводят объем раствора водой до

метки.

К раствора натрия гидроксида по ГФ 13 устанавливают титрованием

по калия гидрофталату (КГФ). В основе определения лежит реакция ней-

трализации:

fэкв = 1; М.м.(КГФ) = 204,23

ТКГФ/NaOH=M.м.(КГФ) С(NaOH)

1000

= 0,1

204,231000

= 0,02042 г/мл

Рассчитывают навеску калия гидрофталата, на титрование которой

израсходовалось бы 20 мл раствора натрия гидроксида (моль/л):

а (КГФ) = Т(КГФ)×V(NaOH) = 0,02042×20 = 0,4083 г.

Таким образом, для определения К берут навеску около 0,41 г.

Методика. Около 0,41 г (точная навеска) калия гидрофталата, пред-

варительно тонко измельченного и высушенного при температуре 120°С в

течение 2 ч, растворяют в 30 мл воды и титруют приготовленным раство-

31

ром натрия гидроксида (моль/л) (индикатор - фенолфталеин). Сэкв вычисля-

ют по первому способу.

2. Приготовление 1 л раствора кислоты хлороводородной (0,1

моль/л).

Раствор готовят из кислоты хлороводородной концентрированной

(35-38%, плотность растворов 1,17-1,19).

При использовании 37% растворов (плотность 1,19) расчет необходи-

мого для приготовления количества кислоты проводят следующим образом:

HCl + NaOH → NaCl

fэкв= 1 ; М.м.(HCl)= 36,46

Т (НCl) =(М.м.(НСl)×С(НСl))/1000 = 36,46 0,1

1000

= 0,003646 г/мл

a(HCl)= Т (НСl)×V(HCl) = 0,003646×1000 = 3,646 г.

Необходимо рассчитать количество мл 37% раствора НCl, требуемое

для приготовления раствора.

В 100 г 37 % раствора -37 г HCl

В x г 37% раствора - 3,646 г HCl

Х= 3,646 100

37

= 9,85 г 37% раствора HCl

Раствор HCl отмеряют в мл, поэтому, учитывая плотность раствора:

p= m

V , V=

m

p =

9,85

1,19 = 8,27 мл 37% HCl

Методика. 8,5 мл 37 % раствора кислоты хлороводородной отмеряют

цилиндром, вносят в мерную колбу вместимостью 1л, доводят объем рас-

твора до метки.

32

По ГФ 13 К устанавливают по натрия карбонату, полученному из на-

трия гидрокарбоната нагреванием при температуре 280-300 °С.

В основе определения лежит реакция нейтрализации:

Na2CO3 + 2HCl → 2NaCl + CO2 + H2O

f экв (Na2CO3) = 1/2 ; М.м. (Na2CO3) = 105,99

Т (Na2CO3/HCl)= 105,99 0,1

2 1000

= 0,005300 г/мл

Рассчитывают навеску натрия карбоната, на титрование которой из-

расходовалось бы 20 мл раствора кислоты хлороводородной (0,1 моль/л).

а (Na2CO3) = Т (Na2CO3) ×V (Na2CO3) = 0,005300×20 = 0,106 г.

Для определения К нужно взять точную навеску натрия карбоната

около 0,1г.

Методика. Около 0,1 г (точная навеска) натрия карбоната растворяют

в 20 мл воды и титруют приготовленным раствором кислоты хлороводо-

родной (0,1 моль/л) до появления розовато-оранжевого окрашивания (инди-

катор - метиловый оранжевый). Сэкв вычисляют по первому способу.

3. Приготовление 500мл раствора натрия тиосульфата (0,1

моль/л).

Натрия тиосульфат используют для титрования йода.

Рассчитывают навеску, необходимую для приготовления раствора:

2Na2S2O3 + I2 → 2NaI + Na2S4O6

2 молекулы отдают 2 электрона, 1 молекула отдает 1 электрон, поэтому

fэкв = 1 ; М.м.(Na2S2O3) = 248,18

Т(Na2S2O3) = 248,18 0,1

1000

= 0,02482 г/мл

а(Na2S2O3) = Т(Na2S2O3) ×V(Na2S2O3) = 0,02482×500 = 12,41 г

33

Методика. 13,0 г натрия тиосульфата и 0,05 г натрия карбоната без-

водного (для стабилизации раствора) растворяют в воде в мерной колбе

вместимостью 500 мл и доводят объем раствора водой до метки.

К устанавливают по навеске калия дихромата, перекристаллизованно-

го из горячей воды, мелкорастертого, высушенного при температуре от

130°С до 150°С до постоянной массы. Проводят реакцию, в результате ко-

торой выделяется эквивалентное взятому калия дихромату количество йода.

Выделившийся йод оттитровывают натрия тиосульфатом:

K2Cr2O7 + 6KI + 14HCl → 3I2 + 2CrCl3 + 8KCl + 7H2O

I2 + 2Na2S2O3 → 2NaI + Na2S4O6

2Cr6+ → 2Cr3+

fэкв = 1/6 ; М.м.( K2Cr2O7) = 294,19

Т (K2Cr2O7/Na2S2O3) = 294,19 0,1

6 1000

= 0,004904 г/мл

Рассчитывают навеску калия дихромата, на титрование которой из-

расходовалось бы 20 мл раствора натрия тиосульфата (0,1 моль/л).

a (K2Cr2O7) = Т (K2Cr2O7)×V (K2Cr2O7) = 0,004904×20 = 0,1 г.

Методика. Около 0,1 г (точная навеска) калия дихромата помещают

колбу с притертой пробкой, растворяют в 30 мл воды, прибавляют 1,5 г ка-

лия йодида, 5 мл кислоты хлороводородной (25%), закрывают пробкой,

смоченной, раствором калия йодида, и оставляют в защищенном от света

месте на 10 мин. Прибавляют 50 мл воды, обмывая пробку водой, и титру-

ют приготовленный раствором натрия тиосульфата до зеленовато-желтого

окрашивания. Затем прибавляют 2 мл раствора крахмала и продолжают

титровать до перехода синей окраски в светло-зеленую. Сэкв вычисляют по

первому способу.

34

Тема 3.

ФАРМАКОПЕЙНЫЙ АНАЛИЗ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ВЕЩЕСТВ-

СОЕДИНЕНИЙ ЭЛЕМЕНТОВ VI ГРУППЫ ПЕРИОДИЧЕСКОЙ

СИСТЕМЫ Д.И.МЕНДЕЛЕЕВА. АНАЛИЗ НЕСТОЙКИХ

ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ

ЛЕКАРСТВЕННЫЕ СРЕДСТВА, ПРЕДЛАГАЕМЫЕ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ:

Соединения кислорода: вода очищенная, вода для инъекций, кисло-

род, растворы водорода пероксида, магния пероксид, гидроперит;

Соединения серы: натрия тиосульфат.


Задание 1. Провести анализ воды очищенной и воды для инъекций

ВОДА ОЧИЩЕННАЯ

Для приготовления лекарственных средств, изготовляемых в асепти-

ческих условиях, воду очищенную необходимо подвергать стерилизации.

Вода очищенная не должна содержать антимикробных консервантов

или других добавок.

Описание. Бесцветная прозрачная жидкость без запаха.

рН. От 5,0 до 7,0. Определение проводят потенциометрически в соот-

ветствии с требованиями ОФС «Ионометрия». К 100 мл воды очищенной

прибавляют 0,3 мл насыщенного раствора калия хлорида.

Кислотность или щелочность. К 20 мл воды очищенной прибавляют

0,05 мл 0,1 % раствора фенолового красного. При появлении желтого окра-

шивания оно должно измениться на красное при прибавлении не более 0,1

мл 0,01 М раствора натрия гидроксида. При появлении красного окрашива-

ния оно должно измениться на желтое при прибавлении не более 0,15 мл

0,01 М раствора хлороводородной кислоты.

35

Сухой остаток. Не более 0,001 %. 100 мл воды очищенной выпари-

вают досуха и сушат при температуре от 100 до 105 ºС до постоянной мас-

сы.

Восстанавливающие вещества. 100 мл воды очищенной доводят до

кипения, прибавляют 0,1 мл 0,02 М раствора калия перманганата и 2 мл

серной кислоты разведенной 16 %, кипятят 10 мин; розовое окрашивание

должно сохраниться.

Углерода диоксид. При взбалтывании воды очищенной с равным

объемом раствора кальция гидроксида (известковой воды) в наполненном

доверху и хорошо закрытом сосуде не должно быть помутнения в течение

1 ч.

Нитраты и нитриты. К 5 мл воды очищенной осторожно прибавля-

ют 1 мл свежеприготовленного раствора дифениламина; не должно появ-

ляться голубое окрашивание.

Аммоний. Не более 0,00002 %. Определение проводят в соответствии

с требованиями ОФС «Аммоний» с использованием эталонного раствора,

содержащего 1 мл стандартного раствора аммоний-иона (2 мкг/мл) и 9 мл

воды, свободной от аммиака. Для определения отбирают 10 мл испытуемой

пробы (см. тема 1.).

Примечание. Стандартный раствор аммоний-иона (2 мкг/мл) готовят

разбавлением стандартного раствора аммоний-иона (200 мкг/мл) водой,

свободной от аммиака.

Хлориды. К 10 мл воды очищенной прибавляют 0,5 мл азотной ки-

слоты, 0,5 мл 2 % раствора серебра нитрата, перемешивают и оставляют на

5 мин. Не должно быть опалесценции.

Сульфаты. К 10 мл воды очищенной прибавляют 0,5 мл хлористово-

дородной кислоты разведенной 8,3 % и 1 мл 5 % раствора бария хлорида,

перемешивают и оставляют на 10 мин. Не должно быть помутнения.

36

Кальций и магний. К 100 мл воды очищенной прибавляют 2 мл бу-

ферного раствора аммония хлорида, рН 10,0 50 мг индикаторной смеси про-

травного черного 11 и 0,5 мл 0,01 М раствора натрия ЭДТА; должно на-

блюдаться чисто синее окрашивание раствора (без фиолетового оттенка).

Алюминий. Не более 0,000001 %. Испытание проводят для воды

очищенной, предназначенной для использования в производстве растворов

для диализа, в соответствии с требованиями ОФС «Алюминий», метод 1

(см. тема 1).

Испытуемый раствор. К 400 мл воды очищенной прибавляют 10 мл

ацетатного буферного раствора, рН 6,0 и 100 мл воды дистиллированной,

перемешивают.

Эталонный раствор. К 2 мл стандартного раствора алюминий-иона

(2 мкг/мл) прибавляют 10 мл ацетатного буферного раствора, рН 6,0 и 98 мл

воды дистиллированной, перемешивают.

Контрольный раствор. К 10 мл ацетатного буферного раствора,

рН 6,0 прибавляют 100 мл воды дистиллированной и перемешивают.

Тяжелые металлы. Не более 0,00001 %.

Определение проводят одним из приведенных методов.

Метод 1. В пробирку диаметром около 1,5 см помещают 10 мл испы-

туемой воды очищенной, прибавляют 1 мл уксусной кислоты разведенной

30 %, 2 капли 2 % раствора натрия сульфида и перемешивают. Через 1 мин

производят наблюдение за изменением окраски раствора по оси пробирки,

помещенной на белую поверхность. Не должно быть окрашивания.

Метод 2. 120 мл воды очищенной упаривают до объёма 20 мл. Ос-

тавшаяся после упаривания вода в объеме 10 мл должна выдерживать ис-

пытание на тяжёлые металлы (ОФС «Тяжелые металлы») с использованием

эталонного раствора, содержащего 1 мл стандартного раствора свинец-иона

(5мкг/мл) и 9 мл испытуемой воды очищенной (см. тема 1).

37

Примечание. Стандартный раствор свинец-иона (5мкг/мл) готовят

разведением стандартного раствора свинец-иона (100мкг/мл) испытуемой

водой очищенной.

Микробиологическая чистота

Общее число аэробных микроорганизмов (бактерий и грибов) не бо-

лее 100 КОЕ в 1 мл. Не допускается наличие Еscherichia coli, Staphylococcus

aureus, Pseudomonas aeruginosa в 100 мл.

Для анализа микробиологической чистоты воды очищенной отбирают

образец в объеме не менее 1000 мл.

Исследование проводят методом мембранной фильтрации в асептиче-

ских условиях в соответствии с методами ГФ XIII ОФС «Микробиологиче-

ская чистота», п.12.

Бактериальные эндотоксины. Менее 0,25 ЕЭ/мл. Определение про-

водят в соответствии с требованиями ОФС «Бактериальные эндотоксины».

Испытание проводят для воды очищенной, предназначенной для ис-

пользования в производстве растворов для диализа.

Хранение и распределение. Вода очищенная хранится и распределя-

ется в условиях, предотвращающих рост микроорганизмов и исключающих

возможность любой другой контаминации.

Хранение воды очищенной осуществляют в специальных сборниках,

не должно превышать 3 сут.

ВОДА ДЛЯ ИНЪЕКЦИЙ

Вода для инъекций должна быть апирогенной и не должна содержать

антимикробных консервантов или других добавок.

Описание. Бесцветная прозрачная жидкость без запаха.

38

рН. От 5,0 до 7,0. Определение проводят потенциометрически в соот-

ветствии с требованиями ГФ XIII ОФС «Ионометрия». К 100 мл воды очи-

щенной прибавляют 0,3 мл насыщенного раствора калия хлорида.

Кислотность или щелочность. К 20 мл воды для инъекций прибав-

ляют 0,05 мл 0,1 % раствора фенолового красного. При появлении желтого

окрашивания оно должно измениться на красное от прибавления не более

0,1 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида. При появлении красного окра-

шивания оно должно измениться на желтое от прибавления не более 0,15 мл

0,01 М раствора хлористоводородной кислоты.

Сухой остаток. Не более 0,001 %. 100 мл воды для инъекций выпа-

ривают досуха и сушат при температуре от 100 до 105 ºС до постоянной

массы.

Восстанавливающие вещества. 100 мл воды для инъекций доводят

до кипения, прибавляют 0,1 мл 0,02 М раствора калия перманганата и 2 мл

серной кислоты разведенной 16 %, кипятят 10 мин; розовое окрашивание

должно сохраниться.

Углерода диоксид. При взбалтывании воды для инъекций с равным

объемом раствора кальция гидроксида (известковой воды) в наполненном

доверху и хорошо закрытом сосуде не должно быть помутнения в течение

1 ч.

Нитраты и нитриты. К 5 мл воды для инъекций осторожно прибав-

ляют 0,1 мл свежеприготовленного раствора дифениламина; не должно по-

являться голубое окрашивание.

Аммоний. Не более 0,00002 %. Определение проводят в соответствии

с требованиями ОФС «Аммоний» с использованием эталонного раствора,

содержащего 1 мл стандартного раствора аммоний-иона (2 мкг/мл) и 9 мл

воды, свободной от аммиака. Для определения отбирают 10 мл испытуемой

пробы.

39

Примечание. Стандартный раствор аммоний-иона (2 мкг/мл) готовят

разбавлением стандартного раствора аммоний-иона (200 мкг/мл) водой,

свободной от аммиака.

Хлориды. К 10 мл воды для инъекций прибавляют 0,5 мл азотной ки-

слоты, 0,5 мл 2 % раствора серебра нитрата, перемешивают и оставляют на

5 мин. Не должно быть опалесценции.

Сульфаты. К 10 мл воды для инъекций прибавляют 0,5 мл хлорово-

дородной кислоты разведенной 8,3 % и 0,1 мл 5 % раствора бария хлорида,

перемешивают и оставляют на 10 мин. Не должно быть помутнения.

Кальций и магний. К 100 мл воды для инъекций прибавляют 2 мл

буферного раствора аммония хлорида, рН 10,0, 50 мг индикаторной смеси

протравного черного 11 и 0,5 мл 0,01 М раствора натрия ЭДТА; должно на-

блюдаться чисто синее окрашивание раствора (без фиолетового оттенка).

Алюминий. Не более 0,000001 %. Испытание проводят в соответст-

вии с требованиями ОФС «Алюминий», метод 1 (см. тема 1.).

Испытуемый раствор. К 400 мл воды очищенной прибавляют 10 мл

ацетатного буферного раствора, рН 6,0 и 100 мл воды дистиллированной,

перемешивают.

Эталонный раствор. К 2 мл стандартного раствора алюминий-иона

(2 мкг/мл) прибавляют 10 мл ацетатного буферного раствора, рН 6,0 и 98 мл

воды дистиллированной, перемешивают.

Контрольный раствор. К 10 мл ацетатного буферного раствора, рН

6,0 прибавляют 100 мл воды дистиллированной и перемешивают.

Тяжелые металлы. Не более 0,00001 %.

Определение проводят одним из приведенных методов.

Метод 1. В пробирку диаметром около 1,5 см помещают 10 мл испы-

туемой воды для инъекций, прибавляют 1 мл уксусной кислоты разведен-

ной 30 %, 2 капли 2 % раствора натрия сульфида и перемешивают. Через

40

1 мин производят наблюдение окраски раствора по оси пробирки, поме-

щенной на белую поверхность. Не должно быть окрашивания.

Метод 2. 120 мл воды для инъекций упаривают до объёма 20 мл. Ос-

тавшаяся после упаривания вода в объеме 10 мл должна выдерживать ис-

пытание на тяжёлые металлы (ОФС «Тяжелые металлы») с использованием

эталонного раствора, содержащего 1 мл стандартного раствора свинец-иона

(5 мкг/мл) и 9 мл испытуемой воды для инъекций (см. тема 1.).

Примечание. Стандартный раствор свинец-иона (5 мкг/мл) готовят

разбавлением стандартного раствора свинец-иона (100 мкг/мл) испытуемой

водой для инъекций.

Микробиологическая чистота. Общее число аэробных микроорга-

низмов (бактерий и грибов) не более 10 КОЕ в 100 мл. Не допускается на-

личие Еscherichia coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa в

100 мл.

Для анализа микробиологической чистоты воды для инъекций отби-

рают образец в объеме не менее 1000 мл.

Исследование проводят методом мембранной фильтрации в асептиче-

ских условиях в соответствии с методами ГФ XIII ОФС «Микробиологиче-

ская чистота», п.12.

Бактериальные эндотоксины. Менее 0,25 ЕЭ/мл. Определение про-

водят в соответствии с требованиями ГФ XIII ОФС «Бактериальные эндо-

токсины».

Хранение и распределение. Воду для инъекций хранят и распреде-

ляют в условиях, предотвращающих рост микроорганизмов и исключаю-

щих возможность любой другой контаминации.

Хранение воды для инъекций осуществляют в специальных сборни-

ках при условии постоянной циркуляции при температуре не ниже 85 ºС, в

течение не более 1 сут.

41

Задание 2. Выполнить качественный и количественный анализ ле-

карственного препарата. Оформить протокол результатов анализа.

Раствор водорода пероксида 3 %

Solutio Hydrogenii peroxydi diluta 3 %

Состав: Водорода пероксида от 7,5 до 11 г (в зависимости от фактиче-

ского содержания Н202 в исходном препарате)

Натрия бензоата 0,05 г

Воды очищенной до 100 мл

Подлинность (качественные реакции)

К 1 мл препарата прибавляют 0,2мл кислоты серной разведенной, 2мл

эфира, 0,2 мл раствора калия дихромата и взбалтывают. Эфирный слой ок-

рашивается в синий цвет.

Количественное определение

Водорода пероксид. 1мл препарата помещают в колбу для титрования,

прибавляют 5 мл кислоты серной разведенной и титруют 0,1 М раствором

калия перманганата (УЧ 1/5 КМnО4) до слабо-розового окрашивания.

Натрия бензоат (стабилизатор). 10 мл препарата помещают в колбу

для титрования, прибавляют 5 мл эфира, 2 капли раствора метилового

оранжевого, 1 каплю раствора метиленового синего и титруют 0,02 М рас-

твором кислоты хлороводородной до фиолетового окрашивания водного

слоя.

Согласно требованиям ФС содержание водорода пероксида в препа-

рате должно быть 2,7-3,3 %, натрия бензоата - 0,0424-0,0575 %.

Задание 3. Провести качественный и количественный анализ суб-

станции. Оформить протокол результатов анализа.

Натрия тиосульфат

Natrii thiosulfas

42


1. Катион натрия. 1 мл раствора соли натрия (0,01 - 0,03 г иона на-

трия подкисляют разведенной уксусной кислотой, если необходимо фильт-

руют, затем прибавляют 0,5 мл раствора цинк-уранил-ацетата; образуется

желтый кристаллический осадок.

2. Катион натрия. Соль натрия, смоченная хлороводородной кисло-

той и внесенная в бесцветное пламя, окрашивает его в желтый цвет.

3. Тиосульфат-ион. К раствору 0,1 г натрия тиосульфата в 2 мл воды

прибавляют 0,1 мл кислоты хлороводородной. Через некоторое время рас-

твор мутнеет вследствие выделения серы (отличие от солей сернистой ки-

слоты) с одновременным образованием диоксида серы, обнаруживаемого

по запаху.

4. Тиосульфат-ион. 0,1 г натрия тиосульфата растворяют в 2 мл воды,

прибавляют 4мл 0,1 М раствора серебра нитрата, образуется белый осадок,

быстро переходящий в желтый, бурый и черный цвет.

5. Тиосульфат-ион. 0,1 г натрия тиосульфата растворяют в 2 мл воды,

прибавляют 4 мл 0,1 М раствора йода, реактив обесцвечивается.


Около 0,5г вещества (точная навеска) растворяют в 25 мл воды и тит-

руют 0,1 М раствором йода (индикатор - крахмал) до синего окрашивания.

Содержание натрия тиосульфата в препарате рассчитывают по фор-

муле:

Х% = 100

Т V Ka

В соответствии с требованиями ФС натрия тиосульфата должно быть

не менее 99,0% и не более 102,0 %.

43

Тема 4.

ФАРМАКОПЕЙНЫЙ АНАЛИЗ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ВЕЩЕСТВ -

СОЕДИНЕНИЙ ЭЛЕМЕНТОВ VII ГРУППЫ ПЕРИОДИЧЕСКОЙ

СИСТЕМЫ Д.И. МЕНДЕЛЕЕВА


Галогениды щелочных металлов: натрия хлорид, калия хлорид, на-

трия бромид, калия бромид, натрия йодид, калия йодид, натрия фторид,

раствор йода спиртовой, кислота хлороводородная.


Задание 1. Провести анализ лекарственного препарата аптечного из-

готовления. Оформить протокол результатов анализа.

Раствор натрия хлорида изотопический 0,9 % для инъекций

Solutio Natrii chloridi isotonici 0,9 % pro injectionibus

Состав: Натрия хлорида 9г

Воды для инъекций до 1л


Хлорид-ион. К 2 мл препарата прибавляют 0,5 мл азотной кислоты

разведенной 16 % и 0,5 мл серебра нитрата раствора 2 %; образуется белый

творожистый осадок, нерастворимый в азотной кислоте разведенной 16 % и

растворимый в аммиака растворе 10 %. Для солей органических оснований

испытание растворимости образовавшегося осадка проводят после от-

фильтровывания и промывания осадка водой.


К 1мл раствора прибавляют 2 мл воды, 1-4 капли раствора хромата

калия и титрируют 0,1 М раствором нитрата серебра до оранжево-желтого

окрашивания.

Согласно требованиям ФС содержание натрия хлорида в 1 мл препа-

рата должно быть 0,0087-0,0093г.

44

Задание 2. Выполнить качественный и количественный анализ лекар-

ственного препарата заводского изготовления. Оформить протокол резуль-

татов анализа.

Раствор йода спиртовой 5 %

Solutio lodi spirituosa 5 %

Состав: Йода 50 г

Калия йодида 20 г

Воды и спирта 95 % поровну до 1 л


0,05 мл препарата разводят 10 мл воды и прибавляют 1 мл раствора

крахмала, появляется сине-голубое окрашивание.


Йод. 1 мл препарата помещают в колбу для титрования с притертой

пробкой и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата до обесцвечивания

(без индикатора).

Калия йодид. К раствору, полученному после определения йода, при-

бавляют 25 мл воды, 2 мл кислоты уксусной разведенной, 5 капель раствора

натрия эозината и титруют 0,1 М раствором серебра нитрата до перехода

окраски осадка от желтой к розовой.

Содержание калия йодида рассчитывают по разности между количе-

ством мл 0,1 М раствора серебра нитрата, пошедшего на титрование калия

йодида, и количеством мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата, пошедшего

на титрование йода в первом определении.

Согласно требованиям ФС содержание йода в препарате должно быть

4,9-5,2%; калия йодида 1,9-2,1%.

45

Тема 5.


СОЕДИНЕНИЙ ЭЛЕМЕНТОВ III, IV и V ГРУПП ПЕРИОДИЧЕСКОЙ

СИСТЕМЫ Д.И.МЕНДЕЛЕЕВА


Соединении бора: кислота борная, натрия тетраборат.

Соединения углерода (неорганические соединения): натрия гидро-

карбонат, лития карбонат.

Соединения азота: натрия нитрит.


Анализ соединений бора и углерода

Задание 1. Провести реакции на подлинность соединений бора

Натрия тетраборат

1. К 5 мл раствора, приготовленного в испытании на «Прозрачность

раствора», прибавляют 0,1 мл 0,1 % раствора фенолфталеина; раствор ок-

рашивается в красный цвет. При прибавлении 5 мл глицерина

85 % раствор должен обесцветиться.

2. К 0,2 г субстанции прибавляют 1 мл серной кислоты концентриро-

ванной, 3 мл спирта 96 % и перемешивают. При зажигании смесь горит

пламенем, окаймлённым зеленым цветом.

3. Раствор, полученный в испытании на «Прозрачность раствора», да-

ёт характерную реакцию на натрий. Определение проводят в соответствии с

ОФС «Общие реакции на подлинность».

Кислота борная

1. К 10 мл раствора, приготовленного в испытании на «Прозрачность»

водного раствора, прибавляют 0,1 мл 0,05 % раствора метилового красного;

появляется красно-оранжевое окрашивание.

46

2. 1,0 г субстанции растворяют в 10 мл кипящего спирта 96 %. К 3 мл

полученного раствора прибавляют 1 мл серной кислоты концентрированной

и перемешивают. При зажигании смесь горит пламенем, окаймленным зе-

леным цветом.

Прозрачность водного раствора. 3,3 г субстанции растворяют в 80

мл кипящей воды. Раствор охлаждают и доводят объем до 100 мл водой,

свободной от углерода диоксида. Полученный раствор должен быть про-

зрачным.


ственной формы аптечного изготовления. Оформить протокол результатов

анализа.

Раствор кислоты борной 2% - 10 мл

Solutio Acidi borici 2% - 10 мл


Куркумовую бумагу смачивают препаратом и несколькими каплями

кислоты хлороводородной разведенной. При высушивании бумага окраши-

вается в розовый или буровато-красный цвет, переходящий от смачивания

раствором аммиака в черно-зеленый.


0,5 мл препарата помещают в колбу для титрования, прибавляют 3 мл

глицерина, нейтрализованного по фенолфталеину, 5 капель раствора фе-

нолфталеина и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до появления

устойчивой в течение 30 сек розовой окраски. Затем прибавляют еще 2-3 мл

глицерина, если окрашивание исчезает, снова титруют до розовой окраски.



анализа.

47

Натрия гидрокарбоната 0,2

Натрия тетрабората 0,1

Воды 10 мл


1. Гидрокарбонат-ион. К 3-5 каплям препарата прибавляют 2-3 капли

кислоты хлороводородной разведенной; выделяются пузырьки диоксида

углерода.

2. Борат-ион. 1 мл препарата помещают в фарфоровую чашку и вы-

паривают. К сухому остатку прибавляют 5-6 капель кислоты серной кон-

центрированной, 1-2 мл 96 % этанола и поджигают. Спиртовый раствор го-

рит пламенем зеленой каймой.


Определение суммы натрия гидрокарбоната и натрия тетрабората.

1 мл препарата помещают в колбу для титрования, прибавляют 2-3 мл

воды 1 каплю раствора метилового оранжевого и титруют 0,1 М раствором

кислоты хлороводородной до розового окрашивания.

NaHCO3 + HCl → NaCl + CO2 + H2O

Na2B4O7 + 2HCl + 5H2O → 2NaCl + 4H3BO3

f экв (натрия гидрокарбоната) = 1

f экв (натрия тетрабората) = 1/2

Определение натрия тетрабората (по выделившейся кислоте бор-

ной). Оттитрованную жидкость кипятят в течение 1 мин для удаления ди-

оксида углерода (долго кипятить нельзя, т.к. частично может улетучиться

кислота борная). Затем жидкость охлаждают под струей холодной воды,

прибавляют 3 мл глицерина, нейтрализованного по фенолфталеину, 5-7 ка-

пель раствора фенолфталеина и титруют 0,1 М раствором натрия гидрокси-

да (0,1 моль/л) до появления устойчивой в течение 30 сек розовой окраски.

48

Прибавляют еще 2-3 мл глицерина если окрашивание исчезает, снова тит-

руют до розовой окраски.

М.м.(натрия тетрабората) = 381,37

fэкв = 1/4

Предварительный расчет ожидаемых объема объемов титрантов:

1) Раствора кислоты хлороводородной (0,1 моль/л)

а)

Т (NaHCO3/HCl) = 84,01 0,1

1000

= 0,008401 г/мл

T (Na2B4O7/HCl) = 381,37 0,1

2 1000

= 0,01907 г/мл

б)

VHCl(NaHCO3)=0,2 1

2,38 мл10 0,008401 10

X a

T

VHCl(Na2B4O7)=0,1 1

0,52 мл10 0,01907 10

X a

T

∑ V = 2,38 + 0,52 = 2,90 мл

2) Раствор натрия гидроксида (0,1 моль/л)

А) Т(Na2B4O7/HCl)=

1381,37 1

41000

= 0,009534 г/мл

Б) V(NaOH)= 0,1 1

1,04 мл10 0,009534

X a

T

Формулы расчета содержания лекарственных веществ в лекарст-

венной форме:

Х,г(Na2B4O7)=Т(Na2B4O7/NaOH)×V(NaOH) ×К×Р)/а

49

X,г(NaHCO3)= Т(NaHCO3/HCl)×V(HCl)×К(HCl)-1/2V(NaOH)×К(NaOH))×Р)/а

Берется 1/2 объема натрия гидроксида, т.к. на титрование кислоты

борной натрия гидроксида (0,1 моль/л) расходуется в 2 раза больше, чем

кислоты хлороводородной (0,1 моль/л) на натрия тетраборат.

Тема 6.


СОЕДИНЕНИЙ ЭЛЕМЕНТОВ II ГРУППЫ ПЕРИОДИЧЕСКОЙ

СИСТЕМЫ Д.И.МЕНДЕЛЕЕВА


Соединения кальция: кальция хлорид, кальция сульфат.

Соединения магния: магния оксид, магния сульфат.

Соединения бария: бария сульфат для рентгеноскопии.

ЛАБОРА ТОРНАЯ РАБОТА №6

Фармакопейный анализ лекарственных веществ элементов II группы

периодической системы Д.И. Менделеева

Задание 1. Провести фармакопейный анализ субстанций магния сульфата

MgSO4 . 7H2O, М.м. 246,48

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % магния сульфата MgSO4.

. 7H2O.

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или

бесцветные призматические кристаллы.

Растворимость. Очень легко растворим в кипящей воде, легко рас-

творим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

Подлинность. Препарат дает характерные реакции на магний и суль-

фаты.

Прозрачность раствора. 2 г субстанции растворяют в воде и разбав-

ляют водой до 20 мл; полученный раствор должен быть прозрачным.

50

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании на «Про-

зрачность раствора», должен быть бесцветным.

Кислотность или щелочность. К 5 мл раствора, полученного в ис-

пытании на «Прозрачность раствора», прибавляют 5 мл воды и 0,05 мл 1 %

раствора фенолфталеина; раствор должен быть бесцветным. Розовое окра-

шивание должно появляться от прибавления не более 0,1 мл 0,01 М раство-

ра натрия гидроксида.

Хлориды. Не более 0,004 %. Определение проводят в соответствии с

требованиями ОФС «Хлориды». К 5 мл раствора, полученного в испытании

на «Прозрачность раствора», прибавляют 5 мл воды.

Тяжелые металлы. Не более 0,0005 %. Определение проводят в со-

ответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» в 10 мл раствора, по-

лученного в испытании «Прозрачность раствора».

Железо. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с

требованиями ОФС «Железо». 1,5 г субстанции растворяют в воде и дово-

дят водой до 10 мл.

Марганец. 1,25 г субстанции растворяют в 5 мл воды, прибавляют

0,5 мл серной кислоты концентрированной, 0,2 мл 0,1 М раствора серебра

нитрата и нагревают до кипения. Прибавляют 2 мл 20 % раствора аммония

персульфата и снова нагревают до кипения.

Проводят контрольный опыт с 5 мл воды и теми же реактивами.

Оба раствора охлаждают и переносят в одинаковые пробирки. В про-

бирку с контрольным опытом прибавляют из микробюретки 0,01 М раствор

калия перманганата до тех пор, пока окраска не сравняется с окраской ис-

пытуемого раствора. Сравнение окрасок проводят на белом фоне по оси

пробирок.

1 мл 0,01 М раствора калия перманганата соответствует 0,11 мг мар-

ганца, которого в субстанции должно быть не более 0,004 %.

51

Если субстанция предназначена для производства лекарственных

препаратов для парентерального применения, используют раствор сравне-

ния без добавления 0,01 М раствора калия перманганата; в такой субстан-

ции марганца не должно быть.

Мышьяк. Не более 0,0002 %. Определение проводят в соответствии с

требованиями ОФС «Мышьяк» с использованием 0,25 г субстанции.

Потеря в массе при прокаливании. От 48,0 до 52,0 %. Около 1,0 г

(точная навеска) субстанции сушат в течение 2,5 ч при температуре от 100

до 105ºС, а затем прокаливают при температуре красного каления до посто-

янной массы.

Количественное определение. Около 0,15 г субстанции (точная на-

веска) растворяют в 50 мл воды, прибавляют 5 мл аммиачного буферного

раствора и титруют при энергичном перемешивании 0,05 М раствором три-

лона Б до появления синего окрашивания (индикатор – кислотный хром

черный специальный).


1 мл 0,05 М раствора трилона Б соответствует 12,32 мг MgSO4 . 7H2O.

Задание 2. Провести анализ лекарственного препарата аптечного из-

готовления по разделам: «Описание», «Подлинность», «Количественное

определение». Результаты испытаний оформить в виде протокола.

Раствор кальция хлорида 5% — 200 мл

Solutio Calcii chloridi 5% 200 мл


1. Катион кальция.

А. К 1 мл раствора соли кальция прибавляют 1 мл аммония оксалата

раствора 4 %; образуется белый осадок, нерастворимый в уксусной кислоте

разведенной 30 % и аммиака растворе 10 %, растворимый в разведенных

минеральных кислотах.

52

Б. Соль кальция, смоченная хлороводородной кислотой 25 % и вне-

сенная в бесцветное пламя, окрашивает его в кирпично-красный цвет.

2. Хлорид-ион.

К 2 мл раствора хлорида (2 – 10 мг хлорид-иона) прибавляют 0,5 мл

азотной кислоты разведенной 16 % и 0,5 мл серебра нитрата раствора 2 %;

образуется белый творожистый осадок, нерастворимый в азотной кислоте

разведенной 16 % и растворимый в аммиака растворе 10 %. Для солей орга-

нических оснований испытание растворимости образовавшегося осадка

проводят после отфильтровывания и промывания осадка водой.


К 1 мл препарата прибавляют 5 мл воды, 3-5 мл аммиачного буферно-

го раствора, 0,05 г индикаторной смеси хромового темно-синего и титруют

раствором трилона Б (0,05 моль/л) до сине-фиолетового окрашивания.

1 мл 0,05 М раствора трилона Б соответствует 0,01095 г кальция хло-

рида, которого в лекарственном веществе должно быть не менее 98,0%.

Тема 7.

ФУНКЦИОНАЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ОРГАНИЧЕСКИХ ЛЕКАРСТВЕН-

НЫХ СОЕДИНЕНИЙ


1. Определение спиртового гидроксила (этиловый спирт)

а) реакция образования эфиров: к 2 мл этанола прибавляют 0,5 мл ле-

дяной уксусной кислоты, 1 мл концентрированной серной кислоты и на-

гревают до кипения - ощущается характерный запах этилацетата.

б) йдоформная проба: 0,5 мл этанола смешивают с 5 мл раствора гид-

роксида натрия, прибавляют 2 мл 0,1 н раствора йода - постепенно выпада-

ет желтый осадок йодоформа и ощущается характерный запах.

53

2. Реакция на многоатомные спирты (глицерин)

а) к 5 мл 5% раствора сульфата меди прибавляют 1-2 мл раствора гид-

роксида натрия до образования осадка гидроксида меди, затем прибавляют

раствор глицерина до растворения осадка. Получается раствор интенсивно-

го синего цвета.

3. Определение фенольного гидроксила (фенол)

а) реакция с хлоридом железа (III): к 1 мл водного раствора препара-

та прибавляют 1-5 кап. Раствора хлорида железа. Появляется характерное

сине-фиолетовое окрашивание.

б) индофеноловая проба: 0,05 г препарата растворяют в 0,5 мл рас-

твора аммиака и добавляют 3-4 капли раствора хлорамина. Нагревают на

кипящей водяной бане. Через несколько мин. появляется сине-зеленая окра-

ска, при последующем прибавлении кислоты изменяющаяся на красную.

в) нитрозореакция Либермана: крупинку препарата помечают на ча-

совое стекло, смачивают 2-3 каплями 1% раствора натрия нитрита в кон-

центрированной серной кислоте - наблюдается темно-зеленое окрашивание.

При добавлении раствора гидроксида натрия окраска изменяется.

г) реакция образования азокрасителя: к водному раствору препарата

прибавляют 2 мл раствора аммиака и 1 мл диазореактива - появляется жел-

тое окрашивание.

4. Определение альдегидной группы (формальдегид)

а) реакция образования серебряного зеркала: к 0,1 мл аммиачного

раствора нитрата серебра прибавляют 2-3 капли раствора препарата и на-

гревают до кипения - восстановленное серебро осаждается на стенках про-

бирки в виде зеркала (или выпадает в виде черно-серого осадка).

б) реакция с реактивом Фелинга: к 2 мл раствора препарата прибав-

ляют по каплям фелинговую жидкость, нагревают. Образуется желтый, а

затем красный осадок.

54

в) реакция с гидроксиламином: к 1 мл гидроксиламина солянокислого

прибавляют 1-2 капли бромфенолового синего (желтая окраска) и по кап-

лям раствор 0,1 н гидроксида натрия до появления сине-фиолетовой окра-

ски. Затем прибавляют 0,5-1 мл раствора формальдегида и наблюдают из-

менение окраски индикатора (желтая - выделяется НС1).

г) реакция конденсации с фенолами: к 0,03 г салициловой кислоты

прибавляют 5 мл концентрированной серной кислоты и 2 кап формалина –

появляется красное окрашивание.

5. Определение карбоксильной группы (салициловая кислота)

а) реакция с солями тяжелых металлов: небольшое количество ис-

следуемого препарата нейтрализуют 0,1 н раствором гидроксида натрия (по

фенол-фталеину до слабо-розового окрашивания). Полученный раствор

разливают на 3 пробирки, в одну прибавляют раствор хлорида железа, в

другую — раствор сульфата меди, в третью - раствор нитрата кобальта. На-

блюдают появление окрашенных осадков или окрашенных растворов.

6. Определение простой эфирной связи (димедрол)

а) на часовое стекло наносят 3-4 капли концентрированной серной

кислоты и прибавляют 0,02 г димедрола - появляется ярко-желтое окраши-

вание, постепенно переходящее в кирпично-красное.

7. Определение сложно-эфирной связи (ацетилсалициловая кислота)

а) щелочной гидролиз: 0,1 г препарата кипятят в течение 3 мин с 1 мл

раствора гидроксида натрия, затем охлаждают и подкисляют разведенной

серной кислотой - выпадает белый кристаллический осадок (салициловая

кислота) и запах уксусной кислоты.

8. Обнаружение первичной ароматической аминогруппы (анесте-

зин)

а) реакция образования азокрасителя: 0,05 - 0,1 г препарата раство-

ряют в 1 мл разведенной соляной кислоты и прибавляют 2-3 капли 5% рас-

55

твора нитрита натрия. Полученный раствор прибавляют по каплям в ще-

лочной раствор бета-нафтола до получения вишнево-красного раствора.

б) реакция образования оснований Шиффа (лигниновая проба): на ку-

сочек газетной бумаги, смоченной раствором соляной кислоты помещают

несколько капель раствора препарата - появляется желто-оранжевое окра-

шивание.

в) реакция окисления: 0,05 г препарата растворяют в 2 мл воды, при-

бавляют 5 капель разведенной хлороводородной кислоты и 2 мл раствора

хлорамина. Через 3 мин. Прибавляют 1-2 мл эфира и взбалтывают – эфир-

ный слой окрашивается в оранжевый цвет.

9. Обнаружение ароматической нитрогруппы (левомицетин)

а) образование аценитросоли: к 0,5 мл раствора препарата прибавля-

ют 5-6 капель раствора гидроксида натрия и нагревают - появляется желтое

окрашивание, переходящее при дальнейшем нагревании в красно-

оранжевое.

б) восстановление ароматической нитрогруппы: к 1 мл раствора препа-

рата прибавляют 8-10 капель концентрированной хлороводоройной кислоты и

0,1 г цинковой пыли и нагревают на водянойбане 2-3 мин. После охлаждения

раствор фильтруют. К фильтрату прибавляют 1-2 капли 1 % раствора нитрита

натрия и через 1 мин 1 мл полученной смеси вливают в 1-2 мл щелочного рас-

твора бета-нафтола - появляется розовое окрашивание.

10. Обнаружение гидразидной группы (изониазид)

а) 0,1 г препарата растворяют в 5 мл воды и прибавляют 4-6 капли

раствора сульфата меди - выделяется голубой осадок, при встряхивании

раствор также окрашивается в голубой цвет. При нагревании раствор и оса-

док становятся светло-зеленого, а затем желто-зеленого цвета, выделяются

пузырьки газа.

56

11. Обнаружение сульфимидной группы (норсульфазол)

а) 0,1 г препарата взбалтывают с 3 мл 0,1 н раствора гидроксида на-

трия, фильтруют. К фильтрату прибавляют 1 мл раствора сульфата меди –

образуется осадок грязно-фиолетового цвета.

Тема 8.

ГАЛОГЕНОПРОИЗВОДНЫЕ АЦИКЛИЧЕСКИХ АЛКАНОВ. СПИР-

ТЫ И ЭФИРЫ


Галогенопроизводные ациклических алканов: хлорэтил, галотан (фторотан);

Спирты: спирт этиловый (этанол), глицерол (глицерин);

Эфиры: диэтиловый эфир (эфир медицинский и эфир для наркоза), нитро-

глицерин, дифенгидрамина гидрохлорид (димедрол)


Контроль качества лекарственных средств, содержащих спирты и эфиры

Цель работы: Освоить методы оценки качества лекарственных средств, со-

держащих спирты и эфиры.

Задание 1. Написать формулы, латинские и химические названия

ароматических кислот и их производных, предложенных для изучения, опи-

сать их внешний вид, физические свойства и применение. Ответ оформить в

виде таблицы.

Задание 2.

а) Изучить и провести качественные реакции на лекарственные сред-

ства группы, результаты занести в протокол

1. 2 мл субстанции смешивают с 0,5 мл уксусной кислоты ледяной и 1

мл серной кислоты концентрированной и нагревают до кипения; должен

появиться характерный запах этилацетата.

57

2. 0,5 мл субстанции смешивают с 5 мл 10 % раствора натрия гидро-

ксида, прибавляют 2 мл 0,05 М раствора йода; должен появиться запах йо-

доформа и постепенно образоваться желтый осадок.

б) Провести реакции подлинности на глицерин.

1. 0,5 мл субстанции нагревают под тягой с 1 г калия гидросульфата.

Выделяющийся акролеин обнаруживают по почернению фильтровальной

бумаги, пропитанной щелочным раствором калия тетрайодомеркурата(II).

2. К 1 мл субстанции прибавляют 0,5 мл азотной кислоты концентри-

рованной и перемешивают; прибавляют 0,5 мл 10,6 % раствора калия ди-

хромата. На границе раздела жидкостей образуется кольцо синего цвета;

синяя окраска не должна диффундировать в нижний слой в течение 10 мин.

в) Провести реакции подлинности на нитроглицерин.

Методики.

1. Реакция окисления. 10 мл 1 % спиртового раствора нитроглицерина

смешивают с 1 мл раствора натрия гидроксида и выпаривают на водяной

бане до полного удаления спирта, остаток смешивают с 1,5 г измельченного

гидросульфата калия и нагревают до вспенивания и начинающегося обуг-

ливания – появляется характерный острый запах акролеина.

2. Реакция на нитрат-ион.

А. К лекарственному средству (около 1 мг нитрат-иона) прибавляют

две капли раствора дифениламина; появляется синее окрашивание.

Б. К лекарственному средству (2 – 5 мг нитрат-иона) прибавляют по

2 – 3 капли воды и серной кислоты концентрированной, 0,05 – 0,10 г метал-

лической меди и нагревают; выделяются пары бурого цвета.

В. Нитраты (около 2 мг нитрат-иона) не обесцвечивают раствор калия

перманганата 0,1 %, подкисленный серной кислотой разведенной 16 % (от-

личие от нитритов).

58


ственного средства

Спирт этиловый: 4 %,70,95 %

Spiritus aethylicus 40,70,95 %


1. 2 мл субстанции смешивают с 0,5 мл уксусной кислоты ледяной и

1 мл серной кислоты концентрированной и нагревают до кипения; должен

появиться характерный запах этилацетата.

2. 0,5 мл субстанции смешивают с 5 мл 10% раствора натрия гидро-

ксида, прибавляют 2 мл 0,05 М раствора йода; должен появиться запах йо-

доформа и постепенно образоваться желтый осадок.

Количественное определение методом рефрактометрии.

При определении показателя преломления спиртоводных растворов

следует на призму рефрактометра наносить не менее 5-7 капель и измерять

величину n немедленно во избежание ошибки, связанной с летучестью

спирта. Исследование необходимо проводить при температуре 20°С. Если

оно осуществляется при другой температуре, следует вносить поправку на

температуру. Величины поправок показателя преломления на 1°С представ-

лены в табл. 11.

Если определение проводится при температуре выше 20 °С, то по-

правку прибавляют к найденной величине показателя преломления; если

анализ проводится при температуре ниже 20°С, поправку вычитают. По

табл. 1 определяют соответствующую данному показателю преломления

концентрацию спирта. Найденной величины показателя преломления

(1,35482) в таблице нет; близкому по величине показателю преломления

1,35500 соответствует 40% спирта. Необходимо определить, какая концен-

трация спирта соответствует разности показателей преломления: 1,35500 -

1,35482 = 0,00018. Поправка на 1% спирта равна 4,0·10-4. Следовательно,

59

0,00018/0,0004=0,45%. Таким образом, истинное содержание спирта в ис-

следуемом растворе 39,55% (40-0,45).

Таблица 11.

Показатели преломления спиртоводных растворов, концентрация ко-торых выражена в об. %

Концентрация

спирта

n при

20° С

Поправка на

1 %

спирта

Температурный

коэффициент

Концентрация

спирта

n при

20° С

Поправка на

1 %

спирта

Температурный

коэффициент

0 1,33300 1·10-4 18 1,34270 6,1·10-4 1,5·10-4 1 1,33345 4,5·10-4 1·10-4 19 1,34330 6,0·10-4 1,5·10-4 2 1,33400 5,5·10-4 1·10-4 20 1,34390 6,0·10-4 1,6·10-4 3 1,33444 4,4·10-4 1,1·10-4 21 1,34452 6,2·10-4 1,6·10-4 4 1,33493 4,9·10-4 1,1·10-4 22 1,34512 6,0·10-4 1,7·10-4 5 1.33535 4,2·10-4 1,2·10-4 23 1,34573 6,1·10-4 1,8·10-4 6 1,33587 5,2·10-4 1,2·10-4 24 1,34635 6,2·10-4 1,9·10-4 7 1,33541 5,4·10-4 1,3·10-4 25 1,34697 6,2·10-4 2,0·10-4 8 1,33700 5,9·10-4 1,3·10-4 30 1,35000 6,0·10-4 2,0·10-4 9 1,33760 6,0·10-4 1,3·10-4 35 1,35320 6,4·10-4 2,1·10-4 10 1.33808 4,8·10-4 1,4·10-4 40 1,35500 4,0·10-4 2,4·10-4 11 1,33870 6,2·10-4 1,4·10-4 45 1,35700 4,0·10-4 2,4·10-4 12 1,33924 5,4·10-4 1,4·10-4 50 1,35900 4,0·10-4 2,6·10-4 13 1,33977 5,3·10-4 1,4·10-4 55 1,36060 3,2·10-4 2,6·10-4 14 1,34043 6,6·10-4 1,4·10-4 60 1,36180 2,4·10-4 3,4·10-4 15 1,34096 5,3·10-4 1,5·10-4 65 1,36300 2,4·10-4 3,6·10-4 16 1,34158 6,2·10-4 1,5·10-4 70 1,36380 1,6·10-4 3,8·10-4 17 1,34204 5,1·10-4 1,5·10-4 75 1,36450 1,4·10-4 4,0·10-4

Для определения концентрации этилового спирта в 70%-ных спирто-

вых растворах разведение проводят обычно 1:2, а в 95%-ном спирте – 1:3.

При этом необходимо учитывать, что при смешивании спирта с водой объ-

ем раствора несколько уменьшается, в связи с чем следует вносить поправ-

60

ку к фактору разведения: при смешивании 1 мл спирта с 2 мл воды – на 2,98

(вместо 3); при смешивании 1 мл спирта с 3 мл воды – на 3,93 (вместо 4).

После соответствующего разведения определяют показатель преломления

полученного раствора. Если необходимо, вносят поправку на температуру и

находят концентрацию спирта в приготовленном растворе. Для установле-

ния крепости спирта в 70 и 95 % растворе найденное значение концентра-

ции умножают на коэффициент разведения.

Тема 9.

АЛЬДЕГИДЫ И ИХ ПРОИЗВОДНЫЕ. УГЛЕВОДЫ


Альдегиды и их производные: раствор формальдегида (формалин), метена-

мин (гексаметилентетрамин, уротропин), хлоралгидрат;

Углеводы: глюкоза, сахароза, лактоза, галактоза, крахмал.


Контроль качества лекарственных средств, содержащих альдегиды и уг-

леводы

Цель работы: Освоить методы оценки качества лекарственных

средств, содержащих альдегиды и углеводы


альдегидов и их производных, а также углеводов, предложенных для изуче-

ния, описать их внешний вид, физические свойства и применение. Ответ

оформить в виде таблицы.

Задание 2. Изучить и провести качественные реакции на лекарствен-

ные средства группы, результаты занести в протокол.

а) Провести реакции подлинности на формальдегид

61

1. К 2 мл субстанции прибавляют 10 мл воды, 1 мл 5 % аммиачного

раствора серебра нитрата; выделяется металлическое серебро в виде зеркала

или серого осадка.

2. 20 мг салициловой кислоты растворяют в 5 мл серной кислоты кон-

центрированной. К полученному раствору прибавляют 2 капли субстанции

и осторожно нагревают, появляется неисчезающее ярко-красное окрашива-

ние.

б) Провести реакции подлинности на гексаметилентетрамин.

Методики. 1. Реакция гидролиза. 2 мл раствора препарата (1:10) на-

гревают с 2 мл разведенной серной кислоты, появляется запах формальде-

гида. Затем прибавляют 2 мл 30 % раствора натрия гидроксида и снова на-

гревают – появляется запах аммиака.

2. Реакция образования ауринового красителя. К 2-3 каплям раствора

препарата (1:10) прибавляют 0,01 г кислоты салициловой или натрия сали-

цилата и 2-3 капли концентрированной серной кислоты; появляется розовое

окрашивание.

в) Провести реакции подлинности на глюкозу.

Методики определения глюкозы основаны на ее свойствах как альде-

гида (реакции окисления) и как многоатомного спирта (реакция образова-

ния комплексных солей с тяжелыми металлами). В качестве реактивов-

окислителей обычно используют реактив Фелинга или реактив Толленса.

Реакцию проводят в слабощелочной среде, глюкоза в этих условиях окисля-

ется до глюконовой кислоты, чтобы ускорить процесс – реакционную смесь

нагревают. При действии концентрированных серной или хлороводородной

кислоты глюкоза преобразуется в оксиметилфурфурол, который одновре-

менно взаимодействует с каким-либо фенолом или ароматическим амином

(резорцином, тимолом, нафтолами, нафтиламином и др.) с образованием

62

окрашенных продуктов конденсации (имеющих синий или красный цвет в

зависимости от структуры фенола или амина).

Методики.

1. Реакция окисления реактивом Фелинга. К раствору 0,2 г препарата при-

бавляют 10 мл реактива Фелинга и нагревают до кипения – выпадает кир-

пично-красный осадок меди (I) оксида.

2. К нескольким кристалликам глюкозы прибавляют кристаллик резорцина

и смачивают концентрированной кислотой (серной или хлороводородной),

образуется красно-фиолетовое окрашивание.

3. Реакция образования комплексных солей. К 5 мл 5 % раствора меди (11)

сульфата прибавляют 1-2 мл раствора натрия гидроксида до образования

осадка меди гидроксида, затем прибавляют раствор глюкозы до растворе-

ния осадка. Получается раствор интенсивно синего цвета.

в) Провести реакции подлинности на хлоралгидрат.

Методика. К 0,5 мл 10 % раствора препарата прибавляют 1 мл раствора на-

трия гидроксида и взбалтывают. Выделяется хлороформ, обнаруживаемый

по запаху. Затем добавляют несколько кристалликов резорцина и нагрева-

ют. Появляется розовое окрашивание.


ственного средства. Результаты испытаний оформить в виде протокола.

Раствор формальдегида (формалин)

Solutio Formaldehydi (formalinum)


1. К 2 мл субстанции прибавляют 10 мл воды, 1 мл 5 % аммиачного

раствора серебра нитрата; выделяется металлическое серебро в виде зеркала

или серого осадка.

2. 20 мг салициловой кислоты растворяют в 5 мл серной кислоты кон-

центрированной. К полученному раствору прибавляют 2 капли субстанции

63

и осторожно нагревают, появляется неисчезающее ярко-красное окрашива-

ние.


Около 1,0 г (точная навеска) субстанции помещают в мерную колбу

вместимостью 100 мл и доводят водой до метки. 5 мл полученного раствора

переносят в колбу с притертой пробкой, прибавляют 20 мл 0,05 М раствора

йода и 10 мл 1 М раствора натрия гидроксида, взбалтывают и оставляют в

темном месте на 10 мин. Затем прибавляют 11 мл 0,5 М раствора серной ки-

слоты и выделившийся йод титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата

до получения слабо-желтой окраски. Прибавляют 2 мл раствора крахмала и

титруют до обесцвечивания раствора.

1 мл 0,05 М раствора йода соответствует 1,501 мг CH2O.

Содержит не менее 34,5 % и не более 38,0 % формальдегида CH2O.


ственных форм. Результаты испытаний оформить в виде протокола.

Растворы гексаметилентетрамина 10, 2 % - 50 мл

Solutio Hexamethylentetramini 10, 2 % - 50 ml


К 2-3 каплям раствора прибавляют 0,01 г (для 10 %) или 0,02-0,03 г

(для 2 %) салициловой кислоты или натрия салицилата и 2 - 3 капли кон-

центрированной серной кислоты, появляется розовое окрашивание.


5 мл 10 % раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и

доводят объем раствора водой до метки. К 2 мл разведенного раствора при-

бавляют 2 мл воды, 2 капли раствора метилового оранжевого, 1 каплю рас-

твора метиленового синего и титруют 0,1 н. раствором хлороводородной

кислоты до фиолетового окрашивания.

64

1 мл 0,1 н. раствора хлороводородной кислоты соответствует 0,0140 г

гексаметилентетрамина.

Для анализа 2 % раствора берут 1 мл раствора гексаметилентетрами-

на, прибавляют 2 капли раствора метилового оранжевого, 1 каплю раствора

метиленового синего и титруют 0,1 н. раствором хлороводородной кислоты

до фиолетового окрашивания.


ственной формы. Результаты испытаний оформить в виде протокола.

Раствор глюкозы 5 % - 100 мл

Solutio glucosi 5 % - 100 ml


1. К 2-4 каплям раствора прибавляют 0,5 мл реактива Фелинга и на-

гревают;

образуется кирпично-красный осадок.

2. 3-5 капель раствора выпаривают в фарфоровой чашке на водяной

бане досуха. После охлаждения к остатку прибавляют 0,01 г тимола, 5-6 ка-

пель концентрированной кислоты серной и 1-2 капли воды; появляется

фиолетовое окрашивание.


1 мл раствора разводят дистиллированной водой до объема 10 мл. К

2 мл полученного раствора, помещенного в пробирку, прибавляют 2 мл

0,1 н. раствора йода, 4 капли 10 % раствора натрия гидроксида, закрывают

пробирку пробкой и реакционную смесь оставляют стоять в темном месте

5 мин. Далее прибавляют 0,5 мл разведенной кислоты хлороводородной и

титруют выделившийся йод 0,1 н. раствором натрия тиосульфата. Парал-

лельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 н. раствора йода соответствует 0,009906 г (водной) глюкозы или

0,009006 г (безводной) глюкозы.

65

Тема 10.

КАРБОНОВЫЕ КИСЛОТЫ И ИХ ПРОИЗВОДНЫЕ.

ЛАКТОНЫ НЕНАСЫЩЕННЫХ ОЛИГИДРОКСИКАРБОНОВЫХ

КИСЛОТ


Соли карбоновых кислот: калия ацетат, кальция лактат, кальция глюконат,

натрия цитрат, натрия вальпроат;

Лактоны ненасыщенных полигидроксикарбоновых кислот: кислота аскор-

биновая


Контроль качества экстемпоральных лекарственных форм, содер-

жащих соли карбоновых кислот и производные лактонов


средств, содержащих соли карбоновых кислот и производные лактонов.

Задание 1. Написать формулы, латинские и химические названия со-

лей карбоновых кислот и аскорбиновой кислоты, предложенных для изуче-

ния, описать их внешний вид, физические свойства и применение. Ответ




а) Провести реакции подлинности на кальция глюконат.

1. 1 г субстанции растворяют в 50 мл воды, прибавляют 0,3 мл 3 %

раствора железа(III) хлорида; появляется светло-зеленое окрашивание.

2. Субстанция дает характерные реакции на кальций. Определение

проводят в соответствии с требованиями ОФС «Общие реакции на подлин-

ность».

А. К 1 мл раствора соли кальция (2 –20 мг кальций-иона) прибавляют

1 мл аммония оксалата раствора 4 %; образуется белый осадок, нераствори-

66

мый в уксусной кислоте разведенной 30 % и аммиака растворе 10 %, рас-

творимый в разведенных минеральных кислотах.

Б. Соль кальция, смоченная хлороводородной кислотой 25 % и вне-


б) Провести реакции подлинности на калия ацетат.

Методики. 1. Реакция образования сложных эфиров (на ацетат-

анион). 2 мл калия ацетата (1:10) нагревают с 2 мл концентрированной сер-

ной кислоты и 0,5 мл 95 % спирта. Ощущается запах этилацетата.

2. Раствор препарата дает характерные реакции на ион калия.

в) Провести реакции подлинности на кальция лактат.

Методика: На лактат-анион. 0,25 г препарата растворяют в 5 мл воды,

подкисляют 16 % кислотой серной, прибавляют раствор калия перманганата

до красно-фиолетового окрашивания и нагревают – появляется запах аце-

тальдегида.

На ион кальция.

А. К 1 мл раствора соли кальция (2 –20 мг кальций-иона) прибавляют

1 мл аммония оксалата раствора 4%; образуется белый осадок, нераствори-

мый в уксусной кислоте разведенной 30% и аммиака растворе 10%, раство-

римый в разведенных минеральных кислотах.

Б. Соль кальция, смоченная хлороводородной кислотой 25% и вне-


г) Провести реакции подлинности на натрия цитрат.

Методики. На цитрат-анион. 0,25 г препарата растворяют в 3 мл воды

и прибавляют 1 мл раствора кальция хлорида. Образующийся цитрат каль-

ция растворим при комнатной температуре, но выпадает в осадок при кипя-

чении раствора. Осадок растворим в кислоте хлороводоролной

2. На ион натрия. Раствор препарата дает характерные реакции на ион

натрия.

67

А. К 2 мл раствора натриевой соли (7 – 10 мг натрий-иона) прибавля-

ют 2 мл калия карбоната раствора 15 % и нагревают до кипения; осадок не

образуется. К раствору прибавляют 4 мл раствора калия пироантимоната и

нагревают до кипения. Охлаждают в ледяной воде и при необходимости по-

тирают внутренние стенки пробирки стеклянной палочкой; образуется

плотный осадок белого цвета.

Б. Соль натрия, смоченная хлороводородной кислотой 25 % и внесен-

ная в бесцветное пламя, окрашивает его в желтый цвет.

д) Провести реакции подлинности на кислоту аскорбиновую.

По ФС 42 – 2668 – 95

0,05 г препарата растворяют в 2 мл воды и прибавляют 0,5 мл раство-

ра серебра нитрата; выпадает темный осадок.

При прибавлении к раствору препарата (1:1000) по каплям раствора

2,6- дихлорфенолиндофенолята, синяя окраска последнего исчезает.

УФ спектр 0,001% раствора препарата в буферном растворе рН 7,0 в

области от 230 нм до 300 нм имеет максимум поглощения при 265 нм ±

± 2 нм.

В основе качественного и количественного анализа кислоты аскоби-

новой лежат ее кислотные и восстановительные свойства.

Методики. Реакции кислотного типа

1. Реакция солеобразования. К раствору 0,05 г препарата в 2 мл воды

прибавляют 0,1 г гидрокарбоната натрия и около 0,02 г железа (11) сульфа-

та, встряхивают и оставляют стоять. Появляется темно-фиолетовое окраши-

вание, исчезающее при добавлении 5 мл 16 % серной кислоты.

Реакции окисления:

2. При добавлении к 5 мл 2 % раствора кислоты аскорбиновой 4 мл

раствора Фелинга образуется оранжево-желтый осадок оксида меди (1).

68

3. При добавлении к 5 мл водного раствора препарата по каплям

0,05М раствора йода происходит обесцвечивание последнего.

4. При добавлении к 2 мл 2 % водного раствора препарата 2-3 капель

разведенной хлороводородной кислоты, 1 мл 5 % раствора гексацианофер-

рата (111) калия и 2 мл раствора хлорида железа (111) – образуется синее


5. При добавлении к 5 мл раствора лекарственного вещества по кап-

лям раствора калия перманганата происходит обесцвечивание последнего.

Задание 3. Выполнить качественный и количественный анализ мно-

гокомпонентной лекарственной формы аптечного производства, содержа-

щей соли карбоновых кислот. Результаты испытаний оформить в виде про-

токола.

Пропись № 1

Димедрола 0,001 Dimedroli 0,001

Кальция глюконата 0,01 Calcii gluconatis 0,01

Сахара 0,1 Sacchari 0,1

Подлинность лекарственных веществ

А. Димедрол. К 0,01 г лекарственной формы, помещенной на часовое

стекло, прибавляют 2-3 капли концентрированной серной кислоты. Появля-

ется желтое окрашивание, исчезающее при добавлении 2-3 капель воды.

Б. Кальция глюконат. К 0,05 г лекарственной формы прибавляют 1 мл

разведенной уксусной кислоты, нагревают до кипения, охлаждают и добав-

ляют 3-5 капель оксалата аммония. Образуется белый осадок, нераствори-

мый в растворе гидроксида аммония и растворимый в разведенных мине-

ральных кислотах.

69

В. Сахар. К 0,005 г лекарственной формы прибавляют 1-2 мл разве-

денной хлороводородной кислоты и несколько кристаллов резорцина. При

кипячении смеси в течение 1 мин появляется красное окрашивание.


2.А. Димедрол. К 0,5 г лекарственной формы прибавляют 5 мл воды,

2 мл разведенной азотной кислоты, 3 мл 0,02 н. раствора нитрата серебра, 1 мл

раствора железоаммонийных квасцов. Избыток нитрата серебра оттитровы-

вают 0,02 н. раствором тиоцианата аммония до розового окрашивания 1 мл

0,02 н. раствора нитрата серебра соответствует 0,005836 г. димедрола.

2.Б. Кальция глюконат. К 0,2 г лекарственной формы добавляют 10 мл

воды при нагревании. После охлаждения прибавляют 10 мл аммиачного

буферного раствора, 0,02 г индикаторной смеси кислотного хром темно-

синего и титруют 0,05 М раствором трилона Б до сине-фиолетового окра-

шивания. 1 мл 0,05 М раствора трилона Б соответствует 0,02242 г кальция

глюконата.

2. В. Сахар. Определяют рефрактометрическим методом. Для этого к

0,2 г лекарственной формы добавляют 10 мл воды при нагревании; 1 каплю

полученного раствора лекарственной формы наносят на призму рефракто-

метра и определяют показатель преломления.

Содержание сахара (Х3, г ) в граммах вычисляют по формуле:

X3=((n-n0)×F2×C2×b×Vp)/(F3×a×100)

где:

n - показатель преломления анализируемого раствора;

n0 - показатель преломления воды;

F2 - фактор показателя преломления раствора кальция глюконата;

(F2=0,00216 - справочное данное);

F3 - фактор показателя преломления раствора сахарозы;


70

a - масса навески порошка, взятой для анализа (0,2 г);

b - средняя масса порошка, г;

Vp - общий объем разведения (10 мл);

C2 - концентрация кальция глюконата в анализируемом растворе, выражен-

ная в процентах и вычисляемая по формуле:

C2=(a×X2×100)/(b×Vp),

где:

а - масса навески порошка, взятой для анализа (0,2 г);



X2 - количество кальция глюконата в порошке, определенное химическим

методом, г.


ственной формы. Результаты испытаний оформить в виде протокола


Кислоты аскорбиновой 0,1 Acidi ascorbinici 0,1

Глюкозы 0,5 Glucosi 0,5


Кислота аскорбиновая.

1. К 0,01 г порошка прибавляют 2-3 капли воды, по 1-2 капли гекса-

цианоферрата (III) калия и железа (III) хлорида. Появляется синее окраши-

вание.

2. К 0,01 г порошка прибавляют 3-5 капель воды и 2-3 капли раствора

серебра нитрата. Выделяется металлическое серебро в виде серого осадка.

Глюкоза.

3. К 0,01 г порошка прибавляют 0,01 г тимола, 5-6 капель концентри-

рованной кислоты серной и 1-2 капли воды. Появляется фиолетово-красное


71


Кислота аскорбиновая. 0,05 г порошка растворяют в 1-2 мл воды и

титруют 0,1 н. раствором натрия гидроксида до розового окрашивания (ин-

дикатор — фенолфталеин). 1 мл 0,1 н. раствора натрия гидроксида соответ-

ствует 0,0176 г кислоты аскорбиновой.

Глюкоза. Растворяют 0,3 г порошка в 1-1,5 мл воды, объем доводят

водой до 2 мл и определяют показатели преломления раствора (n) и воды

(n0) при 20oС.

Расчет содержания глюкозы (X2, г) в граммах в лекарственной форме

проводят по формуле:

X2=((n-n0-F1×C1)×b×Vp×1,11)/(F2×a×100),

где:

n - показатель преломления анализируемого раствора;

n0 - показатель преломления воды;

F1 - фактор показателя преломления раствора кислоты аскорбиновой


F2 - фактор показателя преломления раствора глюкозы безводной





1,11- коэффициент пересчета на водную глюкозу при содержании 11 % вла-

ги в препарате;

C1 - концентрация кислоты аскорбиновой в анализируемом растворе, выра-

женная в процентах и вычисляемая по формуле:

С1=(a×X1×100)/(b×Vp),

где:


72



X1 - количество аскорбиновой кислоты в порошке, определенное химиче-

ским методом, г.

Тема 11.

АМИНОКИСЛОТЫ И ИХ ПРОИЗВОДНЫЕ


Аминокислоты: кислота глутаминовая, кислота аминокапроновая, кислота

гамма-аминомасляная (аминалон), цистеин, ацетилцистеин, метионин, пе-

ницилламин, тетацин-кальций; Пирацетам (ноотропил);

Производные пролина: каптоприл, эналаприл;

Производное фенилаланина: мелфалан


Контроль качества лекарственных средств, содержащих аминокислоты и

их производные.


средств, содержащих аминокислоты и их производные.


аминокислот и их производных, предложенных для изучения, описать их

внешний вид, физические свойства и применение. Ответ оформить в виде

таблицы.

Задание 2. Изучить и провести качественные реакции на лекарст-

венные средства группы, результаты занести в протокол.

а) Реакция с нингидрином (общегрупповая)

Характерной качественной реакцией на аминокислоты является ре-

акция с нингидрином.

73

Первичные алифатические амины окисляются нингидрином при на-

гревании до альдегидов. Нингидрин восстанавливается на первой стадии до

дикетооксигидриндена. Выделившийся аммиак конденсируется с нингид-

рином и его восстановленной формой с образованием красителя синефио-

летового цвета (фиолетовый Руэмана)

Методика. 0,02 г препарата (кислота глутаминовая, кислота амино-

капрновая и др.) растворяют в 1 мл воды, прибавляют 5-6 капель раствора

нингидрина и нагревают до кипения – образуется краситель сине-

фиолетового цвета.

б) Провести реакцию подлинности на глутаминовую кислоту.

Методика: Крупинку препарата нагревают в пробирке с кристалликом

резорцина и 5 каплями концентрированной серной кислоты до появления

зелено-коричневого окрашивания. После охлаждения прибавляют по 5 мл

воды и раствора аммиака – появляется красно-фиолетовое окрашивание с

зеленой флуоресценцией.

в) Провести реакции подлинности на метионин.

М е т о д и к и. 1. К крупинке препарата прибавляют 3-4 капли воды, 1

каплю 10 % раствора ацетата натрия и 2 капли 2,5 % раствора ацетата меди

– образуется сиренево-синий осадок.

2. В пробирке с 3-4 каплями 30 % раствора натрия гидроксида в тече-

ние 1 – 2 минут нагревают 0,01 г метионина. После охлаждения 1 каплю

полученной смеси наносят на фильтровальную бумагу, смоченную 5 % рас-

твором нитропруссида натрия. Появляется малиново-красное окрашивание.

в) Провести реакции подлинности на цистеин.

Методики: 1. 0,05 г препарата растворяют в 1 мл воды и добавляют 1-

2 капли раствора железа (III) хлорида – появляется быстро исчезающее си-

нефиолетовое окрашивание

74

2. К 0,5-1 мл раствора цистеина прибавляют 2-3 капли раствора на-

трия гидроксида и 1-2 капли 1 % раствора нитропруссида натрия – появля-

ется красно-фиолетовое окрашивание.


ственной формы, результаты оформить в виде протокола.

Пропись №2

Кислоты глутаминовой Acidi glutaminici

Сахара по 0,2 Sacchari ana 0,2


Глутаминовая кислота. 1. 0,03 г порошка растворяют при нагревании

в 1 мл воды, прибавляют 3-5 капель 0,25 % раствора нингидрина и нагрева-

ют; появляется сине-фиолетовое окрашивание.

2. К 0,01 г порошка прибавляют 1-2 мл разведенной кислоты хлоро-

водородной, несколько кристаллов резорцина и кипятят в течение 1 мин;



0,05 г порошка растворяют при нагревании в 1-2 мл воды. К охлаж-

денному раствору прибавляют 1-2 капли бромтимолового синего и титруют

0,1 н. раствором натрия гидроксида до голубовато-зеленого окрашивания.

1 мл 0,1 н. раствора натрия гидроксида соответствует 0,01471 г кисло-

ты глутаминовой.

Тема 12.

ТЕРПЕНЫ

ЛЕКАРСТВЕННЫЕ СРЕДСТВА, ПРЕДЛОЖЕННЫЕ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ:

Моноциклические терпены: ментол, валидол, терпингидрат.

Бициклические терпены: камфора, бромкамфора, кислота сульфокамфор-

ная, сульфокамфокаин.

Ретинолы и их производные (витамины группы А).

75


Контроль качества лекарственных средств из группы терпенов

Цель работы. Освоить методы контроля качества лекарственных

средств, производных терпенов.


производных терпенов, предложенных для изучения, описать их внешний

вид, физические свойства и применение. Результаты занести в таблицу.

Задание 2. Подтвердить подлинность препаратов группы при помощи

обще-групповой реакции терпенов. Результат оформить в виде таблицы.

Общегрупповая реакция терпенов – взаимодействие с альдегида-

ми в присутствии концентрированной кислоты серной с образованием

различно окрашенных продуктов.

Методика. 0,01 г препарата (для валидола на испытание отбирают не-

сколько капель препарата) растворяют в 1 мл концентрированной кислоты

серной и прибавляют 1% раствор ванилина или п-диметиламинобен-

зальдегида в концентрированной кислоте серной. Наблюдают появившееся

окрашивание, добавляют 1 мл воды и отмечают изменение окрашивания.

Сравнивают полученные результаты с приведенными в табл. 12, де-

лают вывод о соответствии.

Таблица 12.

Окраска продуктов реакции терпенов с ароматическими альдегида

Лекарствен-ное вещество

Реагент Окрашивание под действием

реагента

Изменение ок-рашивания при добавлении воды

ментол ванилин жёлтое Малиново-красное

валидол ванилин Красно-оранжевое

Малиново-красное

камфора n-диметиламино-бензальдегид

красное бесцветный

76

Задание 3. Подтвердить подлинность и провести количественный анализ

сульфокамфокаина (10% раствор для инъекций). Результаты занести в про-

токол


Испытание подлинности сульфокамфокаина проводят по реакции

образования гидразона (реакция на кетогруппу), реакции на сульфат-

анион, образующийся после минерализации (реакция на сульфогруппу) и

реакции выделения новокаина-основания (далее может быть проведена ре-

акция образования азокрасителя (реакция на первичную ароматическую

аминогруппу).

а) Реакция на кето-группу. Методика: 0,05 г сульфокамфокаина рас-

творяют в пробирке в 1 мл воды (0,5 мл раствора для инъекций разбавляют

водой до 1 мл), прибавляют 5 мл раствора 2,4-динитрофенилгидразина в ки-

слоте хлороводородной и нагревают до кипения, через 5 мин образуется

желто-оранжевый осадок фенилгидразона.

б) Реакция на сульфогруппу. Методика: 2 мл препарата помещают в

выпарительную чашку, прибавляют 0,05 г натрия нитрита и 2 г натрия кар-

боната. Смесь выпаривают на водяной бане досуха и прокаливают. После

охлаждения к остатку прибавляют концентрированную кислоту хлороводо-

родную до конца вспенивания и выпаривают досуха. К остатку прибавляют

20 мл воды, перемешивают и отфильтровывают нерастворившуюся часть. К

фильтрату прибавляют 5 мл концентрированной кислоты хлороводородной

и нагревают до кипения. К кипящему раствору при перемешивании прибав-

ляют 5 мл 5 % горячего раствора бария хлорида – выпадает белый осадок.

в) Реакция на новокаин. Методика: К 2 мл раствора препарата при-

бавляют 1 мл 1М раствора гидроксида натрия – образуются бесцветные

маслянистые капли новокаина-основания.

77

Количественное определение.

а) Новокаин. Методика: К 2 мл сульфокамфокаина прибавляют 5 мл

разведенной соляной кислоты и воды дистиллированной до общего объема

40 мл, 0,5 г калия бромида и при постоянном перемешивании титруют

0,05М раствором нитрита натрия (индикатор – тропеолин 00 в смеси с ме-

тиленовым синим) до перехода красно-фиолетового окрашивания в голу-

бое. Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05М раствора нитрита натрия соответствует 0,001182 г ново-

каина-основания, которого в 1 мл препарата должно быть 0,0479-0,0529.

б) Кислота сульфокамфорная. Методика: К 2 мл препарата прибавля-

ют 2,5 мл дистиллированной воды и смесь из 10 мл спирта и 5 мл хлоро-

форма, предварительно нейтрализованного по фенолфталеину, титруют при

слабом взбалтывании 0,1н. раствором гидроксида натрия до слабо-розового

окрашивания водного слоя. В конце титрования при расслоении смеси при-

бавляют еще 1 каплю индикатора. 1 мл 0,1н. раствора гидроксида натрия

соответствует 0,02323 г кислоты сульфокамфорной, которой в 1 мл препа-

рата должно быть 0,0471-0,0521.

Тема 13.

ПРОИЗВОДНЫЕ β-ЛАКТАМИДОВ.

ПЕНИЦИЛЛИНЫ И ЦЕФАЛОСПОРИНЫ


Пенициллины: бензилпенициллин, его натриевая, калиевая и новокаиновая

соли, бензатин-бензилпенициллин (бициллин-1), феноксиметилпенициллин,

оксациллина натриевая соль, ампициллин, карбенициллина динатриевая

соль, амоксициллин;

Цефалоспорины: цефалексин, цефалоридин, цефазолин, цефтриаксон, це-

фалотин, цефапирин, цефуроксим, цефотаксим;

78

Ингибиторы β-лактамаз: сульбактам, кислота клавулановая;


Контроль качества лекарственных средств, производных β-лактамидов


средств, производных β-лактамидов

Задание 1. Написать формулы, латинские и химические названия β–

лактамидов и их производных, предложенных для изучения, описать их

внешний вид, физические свойства и применение. Ответ оформить в виде

таблицы.



Гидроксамовая реакция (общегрупповая)

Методики. а) около 0,005 г препарата растворяют в 3 мл воды, при-

бавляют 0,1 г гидроксиламина гидрохлорида и 1 мл 1 М раствора натрия

гидроксида, оставляют стоять 5 минут. К полученному раствору прибавля-

ют 1,1 мл 1 М раствора кислоты хлороводородной и 3 капли железа (111)

хлорида, появляется грязное красно-фиолетовое окрашивание.

б) несколько кристалликов препарата помещают на предметное стек-

ло или в фарфоровую чашку, прибавляют 1 каплю раствора, состоящего из

1 мл 1 М раствора гидроксиламина гидрохлорида и 0,3 мл 1 М раствора на-

трия гидроксида. Через 2-3 мин к смеси прибавляют 1 каплю 1 М раствора

кислоты уксусной, тщательно перемешивают, затем прибавляют 1 каплю

раствора меди нитрата, выпадает осадок зеленого цвета.

Реакции на феноксиметилпенициллин

Методики:

а) Реакция с реактивом Марки. К 0,005 – 0,01 г препарата добавля-

ют 2 мл свежеприготовленного реактива Марки (2 капли раствора формаль-

дегида в 2 мл концентрированной кислоты серной). Наблюдают красное ок-

79

рашивание. Нагревают на кипящей водяной бане в течение 2-3 минут, на-

блюдают углубление окраски.

б) Реакция с кислотой хромотроповой. К 2 мг препарата прибавля-

ют 2 мг динатриевой соли кислоты хромотроповой, 2 мл концентрирован-

ной серной кислоты и нагревают на бане при температуре 150 ºС. Через 2-3

мин появляется фиолетовое окрашивание.

Другие пенициллины образуют продукты реакции желто-зеленого

или желтого цвета.

Реакции натриевых и калиевых солей пенициллина с кислотой

хлороводородной

При взаимодействии натриевых и калиевых солей пенициллина с

25 % кислотой хлороводородной выделяется белый осадок кислотной фор-

мы пенициллина, растворимый в избытке кислоты хлороводородной.

Методика. К 2 % раствору натриевой (калиевой) соли бензил-

пенициллина прибавляют по каплям 25 % раствор кислоты хлороводород-

ной; выпадает белый осадок, растворимый в избытке кислоты.

Реакции на катионы солей пенициллина: а) Натриевая и калиевая

соли пенициллина дают реакции на натрий и калий (ГФ ХIII);

б) Реакции на новокаин в новокаиновой соли бензилпенициллина.

Методики .

1. К 5 мл насыщенного раствора бензилпенициллина новокаиновой

соли прибавляют 3 капли разведенной кислоты хлороводородной и 1 каплю

10 % раствора натрия нитрита. Полученный раствор добавляют к 5 мл ще-

лочного раствора β-нафтола. Выпадает красный осадок азокрасителя (реак-

ция на первичную ароматическую аминогруппу).

2. Насыщенный раствор препарата (2-3 мл) с раствором йода образует

коричневый осадок, а с реактивом Майера – белый осадок (определение

азотистого основания).

80

Реакции на ампициллин

За счет остатка алифатической аминокислоты (фениламиноуксусной)

ампициллин реагирует с нингидрином и вступает в реакцию комплексооб-

разования с меди (11) сульфатом. В последнем случае в качестве реактива

применяется реактив Фелинга.

М е т о д и к и.

а) 0,02 г ампициллина натриевой соли растворяют в 2 мл воды, при-

бавляют 2 мл свежеприготовленного 0,25 % раствора нингидрина и кипятят

в течение 2– 3 минут; появляется вишневое окрашивание;

б) 0,01 г препарата растворяют в 1 мл воды и прибавляют 2 – 3 капли

реактива Фелинга, сразу появляется фиолетовое окрашивание.

Задание 3. Выполнить количественное определение суммы пеницил-

линов в препаратах пенициллина. Результаты оформить в виде протокола.


Точную навеску препарата (0,06 - 0,1 г) растворяют в воде в мерной

колбе емкостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и переме-

шивают. 5 мл раствора переносят в коническую колбу с притертой пробкой

емкостью 250 мл, прибавляют 2 мл 1 М раствора натрия гидроксида и ос-

тавляют на 20 минут.

После этого к смеси прибавляют 2 мл 1М раствора кислоты хлорово-

дородной, 5 мл 0,3 М раствора ацетатного буфера (рН 4,50 + 0,05), 20 мл

0,01 М (у.ч.= 1/2) раствора йода и оставляют на 20 минут в темном месте.

Избыток йода оттитровывают 0,01 М раствором тиосульфата натрия до сла-

бо-желтого цвета, затем прибавляют раствор крахмала и титруют до обес-

цвечивания.

В контрольную колбу переносят 5 мл раствора пенициллина, прибав-

ляют 5 мл 0,3 М раствора ацетатного буфера (рН 4,50±0,05), 20 мл 0,01 М

(у.ч.= 1/2) раствора йода и оставляют на 20 минут в темном месте. Избыток

81

йода оттитровывают 0,01 М раствором тиосульфата натрия до слабо-

желтого цвета, затем прибавляют раствор крахмала и титруют до обесцве-

чивания.

Разность в объемах между титрованиями соответствует содержанию

суммы пенициллинов в препарате.

Проводят иодометрическое определение (как описано выше) стан-

дартного образца натриевой соли бензилпенициллина или стандартного об-

разца феноксиметилпенициллина в том случае, когда анализируют препара-

ты феноксиметилпенициллина (2-3 параллельные навески) и рассчитывают

эквивалент (Э) анализируемого пенициллина, соответствующий 1 мл 0,01 М

(у.ч.= 1/2) раствора йода. Величину Э можно найти по таблице 13, учитывая

температуру, при которой проводились йодометрические определения сум-

мы пенициллинов в препарате.

Расчет содержания суммы пенициллинов в препарате (X, %) проводят

по формуле:

X=(V×K×Э×V1×100)/(a×V2),

где:

X - содержание суммы пенициллинов в препарате, %;

а - исходная навеска препарата, г;

V1 - объем раствора препарата первого разведения, мл (100 мл);

V2 - объем аликвотной части разведения, взятой для определения, мл (5 мл);

V - разность в объемах стандартного 0,01 М раствора натрия тиосульфата,

пошедшего на титрование в контроле и опыте, мл;

К - поправочный коэффициент к титру стандартного 0,01 М раствора на-

трия тиосульфата;

Э - величина эквивалента 1 мл 0,01 М (у.ч.= 1/2) раствора йода в граммах

стандартного образца натриевой соли бензилпенициллина или в граммах

82

стандартного образца феноксиметилпенициллина (с пересчетом на химиче-

ски чистое вещество).

С - коэффициент пересчета стандартного образца натриевой соли бензилпе-

нициллина на исследуемый пенициллин, указанный в соответствующей ча-

стной статье

Примечание. Приготовление 0,3 М раствора ацетатного буфера с рН 4,50 ±

± 0,05. 17,5 г натрия ацетата и 10,3 г ледяной кислоты уксусной растворяют

в воде в мерной колбе емкостью 1 литр, доводят объем раствора водой до

метки и перемешивают. рН определяют потенциометрически одновременно

со стандартным буфером с рН в пределах 4,0-5,0.

Таблица 13.

Величины эквивалентов (Э) 1 мл 0,01 М (у.ч.= 1/2) раствора йода в граммах стандартного образца натриевой соли бензилпенициллина или в граммах стандартного образца феноксиметилпенициллина (с пере-счетом на химически чистое вещество)

Величина эквивалента (Э) в граммах стандартного образ-ца бензилпенициллина

Темпе-ратура, ° С

Величина эквивалента (Э) в грам-мах стандартного образца фенок-симетилпенициллина

1 2 3

0,0004763 10 0,0005118

0,0004673 11 0,0005015

0,0004587 12 0,0004912

0,0004521 13 0,0004831

0,0004445 14 0,0004726

0,0004374 15 0,0004630

0,0004310 16 0,0004533

0,0004241 17 0,0004445

0,0004177 18 0,0004367

0,0004119 19 0,0004281

0,0004055 20 0,0004209

0,0004000 21 0,0004146

83

Окончание табл. 13.

1 2 3

0,0003965 22 0,0004100

0,0003934 23 0,0004052

0,0003906 24 0,0004010

0,0003876 25 0,0003962

Тема 14.

ПРОИЗВОДНЫЕ ЦИКЛОПЕНТАНПЕРГИДРОФЕНАНТРЕНА

(СТЕРОИДНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ)


Кальциферолы (витамины группы D): эргокальциферол (витамин D2)

и холе-кальциферол (витамин D3);

Карденолиды (сердечные гликозиды): лекарственные вещества ряда

дигитосигенина (дигитоксин, ацетилдигитоксин, дигоксин) и ряда строфан-

тидина (строфантин К), гликозиды ландыша (коргликон);

Кортикостероиды: дезоксикортона (дезоксикортикостерона) ацетат,

кортзона ацетат, гидрокортизон, преднизолон, дексаметазон;

Андрогены, анаболические стероиды, антиандрогены, миорелаксанты:

тестостерона пропионат, метилтестостерон, метандиенон (метандростенолон),

метандриол (метиландростендиол), нандролона фенилпропионат (феноболин),

нандролона деканоат (ретаболил), ципротерона ацетат (андрокур);

Эстрогены: эстрон, эстрадиол и его эфиры, этинилэстрадиол.

Гестагены и их синтетические аналоги: прогестерон, норэтистерон

(норколут), медроксипрогестерона ацетат (депо-провера).


Определение подлинности лекарственных средств, производных циклопен-

танпергидрофенантрена.

84

Цель работы: Освоить методы оценки подлинности лекарственных

средств производных циклопентанпергидрофенантрена.


производных циклопентанпергидрофенантрена, предложенных для изуче-

ния, описать их внешний вид и физические свойства. Ответ оформить в ви-

де таблицы.

Задание 2. Подтвердить подлинность эргокальциферола. Результат


Методика. 0,1 мл масляного раствора препарата растворяют в 1 мл

хлороформа, прибавляют 6 мл раствора хлорида сурьмы в хлороформе –

образуется оранжево-желтое окрашивание.

Задание 3. Изучить и провести общие реакции определения подлин-

ности карденолидов и стероидных гормонов.

Общим внутригрупповым реактивом, подтверждающим наличие сте-

роидного цикла в структуре производных циклопентанпергидрофенантрена,

является концентрированная кислота серная.

3.1. Реакция с концентрированной кислотой серной

По окраске продуктов реакции кристаллических лекарственных ве-

ществ группы с концентрированной кислотой серной, наличию или отсут-

ствию флюоресценции в УФ-области спектра, изменению окраски после

разбавления водой (а в некоторых случаях хлороформом) можно отличить

лекарственные средства в данной группе.

Реакция используется для качественного анализа и определения при-

месей родственных соединений в лекарственных препаратах (например, фо-

токолориметрическое определение примеси гитоксина в дигитоксине).

а) Методика. 2 мг препарата (строфантин К, кортизона ацетат, гидро-

кортизон, преднизон, преднизолон, метилтестостерон, тестостерона про-

пионат, метиландростендиол, метандростенолон, этинилэстрадиол, местра-

85

нол) растворяют в 2 мл концентрированной кислоты серной. Наблюдают

окраску, а через 20 минут флюоресценцию в УФ-свете. Прибавляют воды

5 мл, встряхивают. Определяют окраску и флюоресценцию (табл. 14.).

б) Методика. 2 мг препарата (дезоксикортикостерона ацетат, прогес-

терон, прегнин) растворяют в 2 мл концентрированной кислоты серной.

Прибавляют 3 мл воды, встряхивают. Наблюдают окраску и флюоресцен-

цию. После охлаждения раствора прибавляют 3 мл хлороформа, встряхива-

ют. Определяют окраску нижнего и верхнего слоев.

3.2. Реакция Либермана-Бурхардта

Второй общегрупповой реакцией подлинности на лекарственные

средства, производные циклопентанпергидрофенантрена, является реакция

с уксусным ангидридом в среде концентрированной кислоты серной

Таблица 14.

Окраска продуктов реакции стероидов с концентрированной кислотой

серной

Лекарственное ве-

щество

После добавления кон-

центрированной кислоты

серной

После добавления воды

1 2 3 4 5

Окраска

Флюорес-

ценция в

УФ -свете

Окраска

Флюо-

ресцен-

ция в УФ

-свет

Строфантин К

Зелёная, пе-

реходящая в

коричневую

Зеленая Светло-

жёлтая

-----

86

Окончание табл. 14

1 2 3 4 5 Кортизона ацетат Жёлтая Жёлтая Светло-

жёлтая

----

Гидрокортизон Интенсивно-

жёлтая с зе-

лёной

Зелёная ---- Зелёная

Преднизолон Красная ----- Серый хло-

пье-видный

осадок

-------

Метилтестостерон Жёлтая Зелёная Желтовато-

оранжевая

------

Тестостерона про-

пионат

Слабо-жёлтая Слабо-

зелёная

Зеленовато-

жёлтая

Зелёная

Метиландростен-

диол

Желтовато-

оранжевая

Зелёная Желтовато-

оранжевая

Слабо-

зелёная

Преднизон Зеленовато-

жёлтая

Зеленова-

то-жёлтая

Светло-

коричневая

Слабо-

жёлтая

Метандростенолон Красная

-----

Опалесцен-

ция красная

-----

Этинилэстрадиол Оранжево-

красная с зелё-

ной флюорес-

ценцией в

оранжевом

свете

Красная Осадок крас-

ный

--------

87

Таблица 15.

Окраска продуктов реакции стероидов с концентрированной кислотой

серной в хлороформе

Лекарственное

вещество

После добавления воды После добавления хлоро-

форма

окраска флюорес-

ценция

В УФ-свете

окраска флюоресцен-

ция

В УФ-свете

Дезоксикортико-

стерона ацетат

Фиолетово-

красная с

флюоресцен-

цией

голубая жёлтая зелёная

Прогестерон жёлтая зелёная бесцветная бесцветная

Прегнин малиновая ---- Светло-

оранжевая

Почти бес-

цветная

Методика. 2 мг препарата растворяют в 1 мл уксусного ангидрида.

Раствор осторожно вливают в пробирку с 1 мл концентрированной кислоты

серной. Слой уксусного ангидрида приобретает желтовато-зеленое окраши-

вание.

Задание 4. Изучить и провести реакции определения подлинности

карденолидов. Результат оформить в виде таблицы.

Карденолиды (гликозиды сердечного действия) по своему химиче-

скому строению являются полными ацеталями, образованными при взаимо-

действии спиртового гидроксила С-3 агликона с полуацетальным гидрокси-

лом углевода.

В анализе используются физико-химические свойства гликозидов: по-

глощение в УФ-области спектра (спектрофотометрия), способность к вра-

щению плоскости поляризации (поляриметрия).

88

Показатель удельного вращения регламентируется для:

1 % раствора дигитоксина в хлороформе 16-18°;

10 % раствора дигоксина 13,6-14,2°;

2 % раствора целанида 32-35°.

Для установления подлинности лекарственных веществ этой группы

используются реакции, обусловленные наличием агликона и углеводного

остатка.

4.1. Качественные реакции на агликон

Реакции на агликон можно подразделить на 2 группы:

1. Реакции на стероидную часть (с концентрированной кислотой сер-

ной, а также реакция Либермана-Бурхардта) (методику см. выше);

2. Реакции на ненасыщенное пятичленное лактонное кольцо: реакция

Легаля (натрия нитропруссид в щелочной среде); реакции с нитропроизвод-

ными ароматического ряда; реакция Бальета (щелочной раствор кислоты

пикриновой); реакция Раймонда (щелочной раствор м-динитробензола); ре-

акция Кедде (щелочной раствор 3,5-динитробензойной кислоты).

Таблица 16.

Реакции на α-β- ненасыщенное пятичленное лактонное кольцо

Реактив и название реакции

Концентрация гликозида, под-чиняющаяся за-кону Бугера-Ламберта-Бера, мкг/мл

Окраска продук-тов реак-ции

Время по-явления интенсив-ной окра-ски, мин

Темпе-ратура реак-ции, 0С

λmax погло-щения продук-тов ре-акции

1 2 3 4 5 6 Щелочной раствор пикриновой кислоты (реакция Бальета)

1-5 Оранже-вокрас-ная

20 20 490

89


1 2 3 4 5 6 Щелочной раствор м-динитро-бензолом 50% спирте (реакция Раймонда)

1-10 Фиоле-товая

10 0 620

Щелочной раствор Нитропрус-сида натрия в пиридине (реакция Легаля)

1-10 Тёмно-красная

10 20 610

а) Реакция Бальета. Методика. К раствору или суспензии 2 мл препа-

рата (дигитоксин, дигоксин) в 1 мл 95 % спирта прибавляют 1 мл 2 % спир-

тового раствора кислоты пикриновой и 2 капли раствора натрия гидрокси-

да. Образуется оранжевый осадок. Реакция используется для качественного

и количественного анализа дигитоксина, дигоксина.

б) Реакция Раймонда. Методика. К раствору 2 мг препарата (дигиток-

син, дигоксин) в 1 мл 95 % спирта прибавляют 1 мл 2 % раствора м-

динитробензола в 50 % спирте и 2 капли раствора натрия гидроксида. Появ-

ляется фиолетовое окрашивание, которое со временем исчезает.

в) Реакция Легаля. Методика. К 1-2 мг препарата в 1 мл 95 % спирта

прибавляют 1 мл нитропруссида натрия и 1-2 капли раствора натрия гидро-

ксида. Появляется красное окрашивание, которое затем исчезает.

4.2. Качественные реакции на углеводы

1. Идентификацию сахарного компонента можно провести с помощью

известных окислительно-восстановительных реакций («серебряного зерка-

ла», с реактивом Фелинга). Необходимым условием в этом случае является

90

проведение кислотного гидролиза молекулы гликозида с высвобождением

полуацетального гидроксила сахара.

Реакция с реактивом Фелинга. Методика. 0,05 г строфантина К рас-

творяют в 1 мл 95 % спирта, добавляют 0,1 мл 8 % кислоты хлороводород-

ной, нагревают на пламени горелки в течение 30 с. Добавляют 0,2 мл 10 %

раствора натрия гидроксида и 0,5 мл реактива Фелинга. Нагревают в тече-

ние 30 сек, через 2 мин образуется оранжевый осадок.

2. Обнаружение дезоксисахаров.

Реакция Келлера-Килиани. Методика. 0,002 г препарата (строфан-

тин К, дигитоксин, дигоксин, ацетилдигитоксин) растворяют в 2 мл раство-

ра ледяной кислоты уксусной при нагревании. После охлаждения добавля-

ют 1 каплю раствора железа (III) хлорида и по стенке осторожно вливают в

пробирку 2 мл концентрированной кислоты серной. На границе двух слоев

появляется бурое окрашивание. Верхний слой постепенно окрашивается в

желто-зеленый или синий цвет.

Реакция Пезеца. Методика. При действии концентрированных ки-

слот на углеводы образуются фурфурол или его производные, которые с

ксантгидроловым реактивом образуют продукты конденсации светло-

зеленого или сине-зеленого цвета (max – 512 нм).

Задание 5. Изучить и провести реакции определения подлинности

стероидных гормонов. Результат оформить в виде таблицы.

5.1. Реакции присоединения (элиминирования)

Методика. К 2 мл 1 % спиртового раствора препарата прибавляют

4 мл 0,2 % спиртового раствора изониазида. Через 10 мин желтая окраска

усиливается.

Приготовление раствора изониазида. 0,2 г гидразида изоникотиновой

кислоты растворяют в 100 мл 95 % спирта, добавляют 0,25 мл концентриро-

91

ванной кислоты хлороводородной, перемешивают и доводят объем раство-

ра 95 % спиртом до 200 мл.

Эта реакция используется и в фотоколориметрических методах опре-

деления препаратов группы.

5.2. Реакции, связанные с наличием α-кетольной группы

(20-кето-21-гидрокси)

а) реакция с раствором Несслера.

Методика. К 0,1 г субстанции или к 0,5 г растертых таблеток дезокси-

кортико-стерона ацетата, кортизона ацетата, преднизона ацетата или пред-

низолона прибавляют 3 мл реактива Несслера – наблюдается желтое окра-

шивание, переходящее в желто-оранжевое, через 2-3 мин выпадает осадок

металлической ртути;

б) реакция с реактивом Фелинга. Методика. К 1 мл 1 % спиртового

раствора препарата прибавляют 1 мл реактива Фелинга и нагревают на ки-

пящей водяной бане. Образуется красно-оранжевый осадок;

в) реакция с аммиачным раствором серебра нитрата (реактив Толлен-

са).

Методика. К 1 мл 1 % спиртового раствора препарата прибавляют

2 мл аммиачного раствора серебра нитрата. Нагревают на кипящей водяной

бане в течение 4-5 мин. Образуется «серебряное зеркало»;

г) реакция с 2,3,5-трифенилтетразолия хлоридом (специфичная реак-

ция Герега).

Методика. К 5 мл 0,05 % спиртового раствора препарата прибавляют

2 мл свежеприготовленного 0,5 % спиртового раствора 2, 3, 5-трифенил-

тетразолия хлорида и 0,5 мл 0,5 н. спиртового раствора натрия гидроксида.

Появляется красное окрашивание (красный формазан):

Фотоколориметрический метод количественного определения лекар-

ственных препаратов основан на этих вышеперечисленных реакциях.

92

5.3. Реакция, обусловленная сложноэфирной группой (гидрокса-

мовая реакция)

Реакцию дают: кортизона, дезоксикортикостерона и преднизона аце-

таты, тестостерона пропионат; ципротерона ацетат (андрокур); нандролона

фенил-пропионат (феноболин); медроксипрогестерона ацетат (депо-

провера).

Методика. К 2 мл 0,5 % спиртового раствора препарата прибавляют

2 мл щелочного раствора гидроксиламина. Встряхивают в течение 5 мин,

прибавляют 2 мл разведенной кислоты хлороводородной и 0,5 мл 10 % рас-

твора железа (III) хлорида в 0,1 н. кислоте хлороводородной. Появляется

темно-вишневое окрашивание.

5.4. Реакции, обусловленные фенольным гидроксилом в структу-

ре молекул эстрогенов и их аналогов.

Для идентификации данных соединений используют реакции элек-

трофильного замещения в бензольном ядре (бромирование, нитрование, об-

разование азокрасителя); реакции солеобразования с солями тяжелых ме-

таллов, образования простых (местранол) и сложных эфиров (получение

этинилэстрадиола бензоата и определение его температуры плавления).

Реакция образования азокрасителя.

Методика. 5 мг этинилэстрадиола (или 0,5 г порошка растертых таб-

леток) растворяют в смеси из 3 мл 10 % раствора натрия гидроксида и 2 мл

воды (в случае анализа таблеток раствор фильтруют), добавляют 2-3 мл

свежеприготовленного диазореактива. Образуется красное окрашивание.

Физико-химические методы в фармакопейном анализе производ-

ных циклопентанпергидрофенантрена.

Физико-химические методы широко используются на всех этапах

фармакопейного анализа лекарственных веществ группы, в частности, для

подтверждения подлинности производных циклопентанпергидрофенантре-

93

на. Современная НД широко использует метод ИК-спектроскопии, позво-

ляющий дать объективную оценку подлинности сложных по химической

структуре лекарственных веществ группы. Полученный ИК-спектр препа-

рата, снятый в вазелиновом масле или после прессования в таблетках с

бромидом калия сравнивают с ИК-спектром ГСО, полученным в тех же ус-

ловиях, или с рисунком ИК-спектра, прилагаемым к ФС. Таким образом

подтверждают подлинность индивидуальных сердечных гликозидов, каль-

циферолов, большинства стероидных гормонов.

Помимо ИК-спектроскопии для установления подлинности и прове-

дения испытаний на посторонние примеси ФС рекомендуют метод ТСХ и

ВЭЖХ.

С помощью хроматографии в тонком слое определяют подлинность и

доброкачественность лекарственных средств в случае присутствия в них

близких по структуре посторонних примесей, являющихся полупродуктами

или побочными продуктами синтеза.

Так, метод ТСХ рекомендован фармакопеей 13 издания для испыта-

ния подлинности тестостерона пропионата путем сравнения с ГСО. Мето-

дом ТСХ подтверждают подлинность ретаболила, дексаметазона, прогесте-

рона, медроксипрогестерона ацетата в их лекарственных формах – иденти-

фикацию проводят по величине Rf в сравнении со стандартным образцом.

Методом ТСХ на пластинах Силуфол, Сорбфил, Кизельгель и других

устанавливают во всех лекарственных веществах наличие примесей посто-

ронних стероидов. При проведении подобных испытаний на пластину по-

мимо исследуемого раствора наносят стандартные образцы, содержащие

различные количества стероидов, примеси которых подлежат определению.

Состав элюента нормируется частными ФС на препараты. Обнаружение зон

примесей обычно проводят в УФ-свете с длиной волны 254 и 365 нм. В не-

которых случаях зоны обнаруживают специальными реагентами: фосфор-

94

номолибденовой кислотой (при определении примесей в кортикостероидах,

феноболине); толуолсульфоновой кислотой (примеси в андрокуре) и т.д.

При проведении подобных определений стандарты примесей наносят коли-

чественно, чтобы было возможно сделать заключение о наличии примесей в

испытуемом препарате и об их содержании. Суммарное содержание приме-

сей в каждом конкретном препарате нормируется частной ФС, но, как пра-

вило, оно не должно превышать 2-4 %.

Для качественного и количественного определения большинства

сердечных гликозидов и стероидных гормонов ФС рекомендуют метод

УФ-спектрофотометрии. Для сердечных гликозидов метод оказался при-

меним благодаря избирательному поглощению при 215-220 нм, обуслов-

ленному наличием в агликонах – ненасыщенного лактонного цикла. Все

изучаемые природные гормоны и их синтетические аналоги из группы

кортикостероидов, гестагенных и андрогенных гормонов обладают свой-

ством селективного поглощения УФ-излучения при 238-2422 нм, обу-

словленного наличием в структуре их молекул 4-3-оксогруппы. Макси-

мум поглощения эстрогенных гормонов за счет ароматического кольца

наблюдается при 280 нм. В качестве растворителей для стероидных гор-

монов чаще всего применяют 95 % этиловый или метиловый спирт, для

эстрогенов – раствор натрия гидроксида.

Подлинность лекарственных средств группы устанавливают по нали-

чию характерного максимума поглощения в УФ-спектре при указанной в

ФС длине волны. Метод неспецифичен и его обычно сочетают с ТСХ-

определениями.

Расчет количественного содержания лекарственного вещества выпол-

няют по удельному показателю поглощения или сравнением с оптической

плотностью ГСО.

95

Условия спектрофотометрического определения некоторых лекарст-

венных веществ из группы стероидных гормонов приведены в таблице 17.

Определение количественного содержания стероидных соединений

может быть также выполнено фотоколориметрически. Предварительно на

определяемое вещество действуют одним из реагентов, используемых в ка-

чественном анализе и позволяющих получить растворимый продукт взаи-

модействия с устойчивой окраской.

Таблица 17.

Спектральные характеристики лекарственных веществ

Лекарственное веще-ство

Растворитель Максимум поглощения λмах

Удельный по-казатель по-глощения, Е

Дезоксикортикостерона ацетат

Этанол 241 430-450

Кортизона ацетат Этанол 238 390 Гидрокортизона ацетат Этанол 241 395 Преднизолон Метанол 242 400-430 Дексаметазон 0,1М р-р NaОН 241 383 Метилтестостерон Этанол 241 540 Метандростенолон Этанол 245 516 Феноболин Этанол 240 430 Андрокур Метанол 282 414 Этинилэстрадиол Этанол 280 65-69 Местранол Этанол 279 59-64

Так, для определения сердечных гликозидов используют реакцию их

взаимодействия с нитропроизводными ароматического ряда, чаще всего с

пикриновой кислотой. Для определения некоторых гестагенных препаратов

(прегнин, медроксипрогестерона ацетат), а также андрогенов (метилтесто-

стерон), анаболиков (ретаболил) и кортикостероидов (кортизона ацетат) ис-

пользуют реакцию образования гидразонов (присоединение по оксогруппе в

положении С-3) с последующим колориметрическим определением окра-

шенных продуктов. На восстановительных свойствах -кетольной группы в

96

молекулах кортикостероидов основаны реакции с солями теразолия, обра-

зующийся растворимый краситель красный формазан легко определяется

колориметрически с λmax=485 нм.

Методы ТСХ, УФ-спектрофотометрии и фотоколориметрии в

фармакопейном анализе лекарственных средств, производных цикло-

пентанпергидрофенантрена.

Цель работы. Освоить физико-химические методы оценки качества

лекарственных средств, производных циклопентанпергидрофенантрена.

Задание 1. Определить подлинность и доброкачественность лекарст-

венных средств группы кортикостероидов и андрогенов методом ТСХ.

1.1. Провести идентификацию метилтестостерона и метандросте-

налона

в смеси методом ТСХ (обучающее задание)

Методика. На линию старта хроматографической пластинки марки

Сорбфил-УФ-254 размером 510 см наносят 0,01 мл 0,1 % стандартных рас-

творов препаратов в этаноле и смесь веществ. Хроматографируют восходя-

щим методом в системе растворителей гексан-ацетон 7:3. Когда фронт рас-

творителя поднимется на 8 см, пластину вынимают и сушат на воздухе. Де-

текцию пятен проводят в УФ-свете или опрыскиванием пластины 10 %-ным

раствором фосфорно-молибденовой кислоты в ацетоне. После обработки

пластину нагревают в сушильном шкафу при 110-1200С в течение 1-2 мин.

Идентификацию индивидуальных веществ в смеси проводят, рассчитывая и

сравнивая величину Rf зон метилтестостерона и метандростенолона в смеси

и стандартах.

1.2. Определить примесь посторонних стероидов в гидрокортизо-

на ацетате методом ТСХ.

Методика. На линию старта пластинки «Сорбфил-УФ-254» размером

815 см наносят 0,01 мл 0,01 % раствора (100 мкг) субстанции гидрокорти-

97

зона ацетата в смеси 95 % спирт-хлороформ (1:1); 0,005 мл (0,5 мкг);

0,01 мл (1 мкг); 0,015мл (1,5кг) и 0,02мл (2мкг) растворов стандартных об-

разцов веществ-свидетелей (СОВС) гидрокортизона и гидрокортизона аце-

тата.

Хроматографируют восходящим методом в камере со смесью раство-

рителей хлороформ – метиловый спирт – вода (95:5:0,2). Длина пробега

растворителя – 13 см. Высушенную на воздухе пластинку просматривают в

УФ-свете при 254 нм.

Пятна посторонних примесей на хроматограмме испытуемого препа-

рата сравнивают по величине и интенсивности окраски с пятнами СОВС:

пятно примеси гидрокортизона сравнивают с пятном СОВС гидрокортизо-

на, пятна других возможных примесей сравнивают с пятнами СОВС гидро-

кортизона ацетата. Суммарное содержание примесей не должно превышать

4 %.

Приготовление растворов СОВС. 0,01 г гидрокортизона (стандарт) и

0,01 г гидрокортизона ацетата растворяют в 70 мл смеси 95 % спирт-

хлороформ (1:1) в мерной колбе вместимостью 100 мл, доводят объем рас-

твора той же смесью растворителей до метки и перемешивают.

1.3. Подтвердить подлинность дексаметазона в лекарственной

форме «Раствор дексаметазона 0,1 % (глазные капли)» методом ТСХ

Состав:

Дексаметазона натрия фосфата в пересчете на дексаметазон 0,1 г

Вспомогательные вещества

Воды для инъекций до 100 мл

Методика. 0,005 мл препарата (5 мкг в пересчете на дексаметазон) на-

носят на линию старта пластинки Сорбфил UV-254 размером 510 см. Рядом

наносят 0,005 мл 0,13 % раствора свидетеля – дексаметазона натрия фосфа-

та (5 мкг в пересчете на дексаметазон). Пластинку высушивают на воздухе

98

10 мин. Хроматографируют в системе: н-пропиловый спирт (ТУ 6-09-4344-

77, х.ч.) – аммиака раствор концентрированный (7:3). Когда фронт подвиж-

ной фазы дойдет до конца пластинки, ее вынимают из камеры, подсушива-

ют на воздухе в течение 10 мин и просматривают в УФ-свете при длине

волны 254 нм. Основное пятно на хроматограмме испытуемого препарата

должно находиться на уровне основного пятна на хроматограмме раствора

свидетеля – дексаметазона натрия фосфата.

Задание 2. Подтвердить подлинность и провести количественный

анализ лекарственных средств на основе стероидных гормонов методом

УФ- спектрофотометрии. Результат оформить в виде таблицы.

2.1. Подтвердить подлинность и определить количественное со-

держание дексаметазона в глазных каплях.

Состав:

Дексаметазона натрия фосфата в пересчете на дексаметазон 0,1 г

Вспомогательные вещества

Воды для инъекций до 100 мл

Подлинность. Ультрафиолетовый спектр поглощения раствора пре-

парата, приготовленного для количественного определения, снятый в об-

ласти от 220 до 330 нм, должен иметь максимум при 241 нм 2 нм и пологое

плечо в интервале длин волн от 260 до 270 нм.

Количественное определение. 0,5 мл препарата помещают в мерную

колбу вместимостью 25 мл. Доводят объем раствора до метки 0,1М раство-

ром натра едкого, перемешивают. Измеряют оптическую плотность полу-

ченного раствора на спектрофотометре при длине волны 241 нм в кювете с

толщиной слоя 10 мм.

В качестве раствора сравнения используют 0,1М раствор натра едко-

го. Содержание дексаметазона натрия фосфата в пересчете на дексаметазон

в 1 мл препарата вычисляют по формуле:

99

X = 50

0,0013055383 1 100

AА

где: А – оптическая плотность спектрофотометрируемого раствора препара-

та, см-1.

383 – удельный показатель поглощения дексаметазона при длине волны

241 нм.

Содержание С22Н28FNа2О8Р (дексаметазона натрия фосфата) в пересчете на

дексаметазон в 1 мл препарата должно быть от 0,0009 до 0,0011 г.

2.2. Определить количественное содержание преднизолона в таблетках

по 0,001 г и 0,005 г

Методика. Точную навеску растертых в порошок таблеток, содержа-

щую около 0,001 г преднизолона, помещают в мерную колбу вместимостью

50 мл, прибавляют 25-30 мл 95 % спирта, встряхивают в течение 5-6 мин,

доводят до метки 95 % спиртом и снова перемешивают, фильтруют в сухую

колбу, отбрасывая первые 10-15 мл фильтрата; 25 мл фильтрата вносят пи-

петкой в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят 95 % этанолом до

метки, перемешивают и измеряют оптическую плотность полученного рас-

твора при длине волны 242 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, применяя в

качестве контрольного раствора 95 % этанол. Повторяют такое же измере-

ние с 0,001 % раствором РСО преднизолона.

Содержание преднизолона должно быть 0,0009-0,0011 г или 0,0045-

0,0055 г в пересчете на среднюю массу одной таблетки.

2.3. Определить количественное содержание преднизолона и

преднизолона ацетата в мази.

Методика. К точной навеске мази, которая содержит около 0,0025 г

преднизолона (или преднизолона ацетата), приливают 10 мл горячего 95 %

этанола, перемешивают и фильтруют в мерную колбу вместимостью 50 мл.

Экстракцию повторяют тремя порциями по 10 мл горячего этанола. После

100

охлаждения до комнатной температуры фильтрат доводят до метки 95 %

этанолом и перемешивают. 10 мл полученного раствора вносят пипеткой в

мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят до метки 95 % этанолом, пере-

мешивают и измеряют оптическую плотность в кювете с толщиной слоя 1

см при длине волны 242 нм, применяя в качестве нулевого раствора 95 %

этанол.

Повторяют такое же измерение с 0,001 % раствором РСО преднизо-

лона (или преднизолона ацетата) в 95 % спирте.

2.4. Определить количественное содержание метилтестостерона в

таблетках по 0,005 г.

Методика. Около 0,05 г растертых в порошок таблеток (точная навес-

ка) помещают в мерную колбу с притертой пробкой вместимостью 50 мл,

доводят объем раствора до метки 95 % этанолом и встряхивают в течение 5

мин. Фильтруют в сухую колбу через беззольный фильтр, отбрасывая пер-

вые 10-15 мл фильтрата. Вносят пипеткой 5 мл фильтрата в мерную колбу

вместимостью 25 мл, доводят объем до метки 95 % этанолом и измеряют

оптическую плотность полученного раствора при длине волны 241 нм в кю-

вете с толщиной слоя 1 см; нулевой раствор – 95 % этанол.

Значение удельного показателя поглощения метилтестостерона,

Е=540.

Содержание метилтестостерона должно быть 0,0045-0,0055 г в пере-

счете на среднюю массу одной таблетки.

Задание 3. Определить количественное содержание веществ в лекар-

ственных формах, содержащих стероидные гормоны, методом фотоколори-

метрии или спектрофотометрии в видимой области спектра. Результат


101

3.1. Определить количественное содержание метилтестостерона,

прегнина или кортизона ацетата в таблетках, соответственно по 0,005

г; 0,01 г и 0,025 г

Определение основано на реакции 4-3-кетогруппы исследуемых ле-

карственных средств с гидразидом кислоты изоникотиновой с образовани-

ем желтого цвета изоникотиноилгидразонов.

В качестве растворителей для лекарственных средств и реактивов

применяют 95 % этанол. Максимум поглощения растворов изоникотиноил-

гидразонов наблюдается при 370 нм, удельный показатель поглощения –

150.

При фотоколориметрическом определении для расчета используют

калибровочный график или проводят измерение оптической плотности рас-

твора, полученного из рабочего стандартного образца (РСО).

Методика. 0,05 г порошка растертых таблеток (точная навеска) поме-

щают в мерную колбу вместимостью 25 мл и при легком взбалтывании рас-

творяют в 10 мл 95 % этанола в течение 5-6 мин при легком нагревании.

После охлаждения доводят этанолом до метки, перемешивают и фильтруют

через складчатый фильтр, отбрасывая первые 5 мл фильтрата. К 5 мл

фильтрата прибавляют 5 мл изониазида и через 50 мин определяют оптиче-

скую плотность раствора на фотоэлектроколориметре при длине волны 400

нм в кювете с толщиной рабочего слоя 1 см. Параллельно проводят реак-

цию с 5 мл стандартного раствора препарата. В качестве раствора сравне-

ния используют 95 % этанол.

В качестве стандартных используют растворы препаратов, отвечаю-

щих требованиям ГФ, с концентрацией метилтестостерона – 0,01 %; пре-

гнина – 0,02 %; кортизона ацетата – 0,05 %.

102

Содержание метилтестостерона, прегнина и кортизона ацетата в рас-

чете на среднюю массу таблетки должно быть, соответственно: 0,0045-

0,0055 г; 0,009-0,011 г и 0,022-0,028 г.

3.2. Определить количественное содержание строфантина К в

0,025 % (0,00025 г/мл) растворе для инъекций.

Методика. К 0,5 мл раствора строфантина К прибавляют 1 мл ней-

трального раствора пикрата натрия, 3 мл дистиллированной воды и 0,5 мл

2 % раствора гидроксида натрия и перемешивают. Через 10 мин определяют

оптическую плотность раствора на фотоэлектроколориметре при длине

волны 490-500 нм (сине-зеленый фильтр) в кювете с толщиной рабочего

слоя 1 см.

В качестве контрольного раствора используют смесь, состоящую из 1

мл нейтрального раствора пикрата натрия, 0,5 мл 2 % раствора гидроксида

натрия и 3,5 мл дистиллированной воды. В качестве эталонного раствора –

0,025 % раствор строфантина К. Расчет проводят по формуле:

X =(Ax×C0)/A0,

где:

С0=0,025 % (0,00025 мг/мл) – содержание строфантина К в эталонном рас-

творе.

Содержание строфантина К: 1 мл препарата должен содержать 11-14,5 ЛЕД

или 1,45-1,75 КЕД или 0,96-1,19 ГЕД.

Деловая игра по теме:

«Анализ лекарственных средств, производных циклопентанпергидро-

фенантрена».

Цель деловой игры. Освоить навыки оценки качества лекарственных

средств, производных циклопентанпергидрофенантрена.

Основные этапы деловой игры.

103

1. Изучение химической структуры, физических и химических свойств пре-

паратов, производных циклопентанпергидрофенантрена.

2. Изучение ФС «Таблетки» ГФ XIII (ОФС.1.4.1.0015.15) и требований по

контролю качества данной лекарственной формы.

3. Знакомство со сценарием деловой игры.

4. Распределение обязанностей.

5. Самостоятельный выбор в справочной литературе оптимальных методик

по контролю качества предлагаемых лекарственных форм.

6. Изучение химических и физико-химических методов идентификации

указанных лекарственных препаратов, уравнений реакций, лежащих в осно-

ве метода.

7. Изучение особенностей количественного определения лекарственных

веществ, вывод формулы для расчета содержания лекарственного вещества

в предложенной лекарственной форме, проведение предварительных анали-

тических расчетов.

8. Проведение анализа лекарственного средства и выполнение соответст-

вующих расчетов.

9. Оценка качества лекарственного средства в соответствии с НД.

10. Обсуждение полученных результатов.

Сценарий деловой игры.

В качестве объекта игрового сценария выбрана контрольно-

аналитическая лаборатория Центра контроля качества и сетрификации ле-

карственных средств г. Воронежа.

В контрольно-аналитическую лабораторию поступили из Департа-

мента здравоохранения Воронежской области следующие лекарственные

вещества:

1. Таблетки этинилэстрадиола по 0,00005 г.

104

После приема ЛС у больной Иванниковой С.К. (1956 г.р.) произошла

потеря сознания, и она была доставлена «скорой помощью» в неврологиче-

ское отделение ОКБ с диагнозом «артериальная гипертензия».

2. Таблетки метилтестостерона по 0,005 г.

После прохождения курса лечения анорексии (по 1 табл. 3 раза в

день) больная Кутырева И.П.. (1995 г.р) был госпитализирован в инфекци-

онное отделение 12 клинической больницы с диагнозом «холестатический

гепатит».

3. Таблетки кортизона по 0,05 г.

После приема ЛП у больного Шумина В.Ф. (1998 г.р.) произошло же-

лудочное кровотечение. Он был доставлен «скорой помощью» в гастроот-

деление ОКБ.

В связи со случившимся Департамент здравоохранения начинает ад-

министративное расследование. Лекарственные формы направляются в

контрольно-аналитическую лабораторию. Назначается экспертная комиссия

из двух групп специалистов КАЛ для проведения арбитражного анализа ле-

карственных форм.

Роль председателя экспертной комиссии берет на себя преподаватель,

роли руководителей рабочих групп и провизоров-аналитиков КАЛ – сту-

денты, роль представителя областного отдела здравоохранения – инженер.

Студентам выдаются для анализа остатки лекарственных форм. Сту-

денты должны провести независимо друг от друга анализ полученных ле-

карственных форм.

На отдельном участке лаборатории, играющей роль библиотеки, на-

ходится учебная литература, приказы, справочники, ГФ, методические ука-

зания, предназначенные для работы членов комиссии. Каждый студент

внутри экспертной группы получает индивидуальное задание. Суть задания

заключается в практическом выполнении качественного и количественного

105

анализа одной лекарственной формы. Распределяет задание председатель

комиссии (преподаватель). Провизоры-аналитики (студенты) проводят пол-

ный химический контроль качества предложенных лекарственных форм. На

основании проведенного анализа выдается заключение о качестве ЛФ в со-

ответствии с НД. Выполненное задание оформляется в виде протокола. По-

сле проведения всех анализов проходит совещание каждой экспертной

группы. Затем, после обсуждения полученных результатов, оформляется

акт экспертизы (образец прилагается), в котором приводятся результаты ра-

боты экспертной комиссии. Правильно проведенный анализ одной лекарст-

венной формы оценивается в 3 балла.

Затем руководители каждой рабочей группы делают доклады (3-5

мин) по результатам проведенной работы и высказывают предположение о

возможных причинах случившегося.

В конце занятия преподаватель проводит обсуждение деловой игры с

помощью контрольных вопросов.

Контрольные вопросы

1. Какие нормативные документы регламентируют качество лекарст-

венной формы «Таблетки»?

2. Дайте опрелеление ЛФ «Таблетки».

3. По каким параметрам проводится оценка качества данной ЛФ?

4. Как рассчитывается средняя масса таблетки?

5. Как проводится определение содержания ЛВ в таблетках?

6. Что включает в себя испытание однородности дозирования?

7. Каким образом определяются распадаемость и растворимость таб-

леток?

8. Какими методами проводится установление подлинности таблеток,

содержащих производные циклопентанпергидрофенантрена?

106

9. Какими методами проводится количественное определение ЛВ,

производных циклопентанпергидрофенантрена в таблетках?

10. Какие предварительные расчеты проводит провизор-аналитик и по

каким формулам?

11. Какие ЛФ относятся к группе нестабильных? В каких условиях

следует хранить эти ЛФ?

АКТ ЭКСПЕРТИЗЫ

(образец)

Наименование лекарственного средства_______________________

Серия ____________________________________________________

Организация изготовитель___________________________________

Заказчик__________________________________________________

Дата изготовления__________________________________________

Анализ выполнен _____(указывается нормативный документ)___

Наименование показа-

теля качества по НД

Требования к качеству

по НД

Результаты анализа

1

2 и т.д.

Заключение____________________________________________________

Дата анализа ___________________________________________________

Председатель экспертной комиссии (ФИО)

Член экспертной комиссии (ФИО)

107

Тема 15.

ФЕНОЛЫ И ИХ ПРОИЗВОДНЫЕ

Химические и физико-химические методы установления подлинности про-

изводных фенолов

ПРЕПАРАТЫ ПРЕДЛАГАЕМЫЕ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ: фенол, резорцин; ти-

мол; синестрол, диэтилстильбэстрол; тамоксифена цитрат, викасол, тетра-

циклин, доксициклин.


Определение подлинности лекарственных веществ, производных фенолов

Цель работы: Освоить методы определения подлинности лекарст-

венных средств, производных фенолов.


производных фенолов, предложенных для изучения, описать их внешний

вид и физико-химические свойства. Результаты оформить в виде таблицы.

Задание 2. Изучить и провести определения подлинности фенола.

1. 1,0 г субстанции растворяют в 150 мл воды (раствор А). К 10 мл

раствора А прибавляют 0,3 мл 3 % раствора железа(III) хлорида; должно

появиться фиолетовое окрашивание, исчезающее от прибавления 5 мл

2-пропанола.

2. К 10 мл раствора А прибавляют 1 мл бромной воды; должен обра-

зоваться осадок белого или бледно-желтого цвета.

Количественное определение. Около 2,0 г (точная навеска) субстан-

ции помещают в мерную колбу вместимостью 1000 мл, растворяют в 50 мл

воды, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. 25 мл по-

лученного раствора переносят в коническую колбу вместимостью 500 мл с

пришлифованной пробкой, прибавляют 50,0 мл 0,0167 М раствора бромид-

бромата и 5 мл хлороводородной кислоты концентрированной, закрывают

108

пробкой, выдерживают в течение 30 мин, периодически перемешивая, по-

сле чего оставляют на 15 мин.

Затем в колбу прибавляют 5 мл 20 % раствора калия йодида, переме-

шивают и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата до появления свет-

ло-желтой окраски. К полученному раствору прибавляют 0,5 мл раствора

крахмала, 10 мл хлороформа и продолжают титрование при энергичном пе-

ремешивании до обесцвечивания раствора.


1 мл 0,0167 М раствора бромид-бромата соответствует 1,569 мг

С6Н6О.

Задание 3. Изучить и провести определения подлинности тимола.

Подлинность

1. ИК-спектр. ИК-спектр субстанции, снятый в диске с калия броми-

дом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен

соответствовать спектру стандартного образца тимола.

2. 5 мг субстанции растворяют в 1 мл уксусной кислоты ледяной,

прибавляют 0,3 мл серной кислоты концентрированной и 0,05 мл азотной

кислоты концентрированной; в отраженном свете должно наблюдаться си-

не-зеленое окрашивание, в проходящем свете – темно-красное.

3. 0,2 г субстанции нагревают на водяной бане с 1 мл 10 % раствора

натрия гидроксида; образуется бесцветный прозрачный раствор, приобре-

109

тающий при дальнейшем нагревании желтовато-розовое окрашивание. К

подогретому раствору прибавляют 0,10 – 0,15 мл хлороформа и взбалтыва-

ют; должно появиться красно-фиолетовое окрашивание.

Количественное определение. Около 0,5 г (точная навеска) субстан-

ции растворяют в 5 мл 10 % раствора натрия гидроксида в мерной колбе

вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемеши-

вают. 10,0 мл полученного раствора переносят в колбу с притертой проб-

кой, прибавляют 0,5 г калия бромида, 40 мл хлороводородной кислоты раз-

ведённой 8,3 %, 3 капли 0,1 % раствора метилового оранжевого и при силь-

ном взбалтывании титруют 0,0167 М раствором калия бромата до исчезно-

вения розового окрашивания (к концу титрования прибавляют еще 2 капли

0,1 % раствора метилового оранжевого).


1 мл 0,0167 М раствора калия бромата соответствует 3,755 мг

С10Н14О.

Задание 4. Определение качества лекарственных средств из группы произ-

водные тетрациклинов

Тетрациклин

1. К 0,01 тетрациклина прибавляют 2 мл раствора аммиака и 2 мл

диазореактива – появляется красное окрашивание.

2. К 0,05 г препарата прибавляют 2 мл этанола и 1-2 капли 3% рас-

твора хлорида железа – появляется красно- коричневое окрашивание, не ис-

чезающее от прибавления разведенной хлороводородной кислоты.

3. К 0,01 г препарата прибавляют 0,5 мл концентрированной серной

кислоты – появляется вишнево – красное окрашивание.

4. К 0,01 г препарата прибавляют 2 мл 10% раствора щелочи и нагре-

вают на водяной бане – наблюдается красное окрашивание.

110

5. К 0,01 г препарат прибавляют 1-2 капли концентрированной хло-

роводородной кислоты – появляется оранжевое окрашивание; после нагре-

вания 1-2 мин – желто-бурое.

Доксициклин

1. К 0,01 г препарата прибавляют 0,5 мл концентрированной серной

кислоты – появляется желтое окрашивание.

2. К 0,01 г препарата прибавляют 2 мл этанола и 1-2 капли 3% рас-

твора хлорида железа – появляется темно-бурое окрашивание, не исчезаю-

щее от прибавления разведенной соляной кислоты.

3. К 0,01 г препарата прибавляют 2 мл 10% раствора щелочи и нагре-

вают на водяной бане 1-2 мин – появляется желтое окрашивание.

4. К 0,01 г препарата прибавляют 1-2 мл концентрированной соляной

кислоты – появляется желтое окрашивание.

Задание 5. Определение подлинности и количественного содержания

викасола.


1. К 0,05 г порошка прибавляют 2 мл 0,1 н раствора гидроксида на-

трия и нагревают в пламени спиртовки – появляется красное окрашивание.

2. К 0,05 г порошка прибавляют 1 мл дистиллированной воды и 0,5

мл концентрированной серной кислоты – появляется белый осадок и выде-

ляется сернистый газ.


К 0,1 г порошка (т.н.) прибавляют 1 мл 1% раствора карбоната натрия

б/в и оставляют на 1-2 мин. Затем прибавляют 2-3 мл дистиллированной

воды и титруют 0,02 н раствором йода до появления синего окрашивания,

устойчивого в течении 1 мин. (индикатор - крахмал)

1 мл 0,02 н раствора йода соответствует 0,0033 г викасола.

111

Тема 16.

АРОМАТИЧЕСКИЕ КИСЛОТЫ И ИХ ПРОИЗВОДНЫЕ.

ПРОИЗВОДНЫЕ ПАРА-АМИНОФЕНОЛА


Ароматические кислоты и их соли: кислота бензойная, натрия бензоат,

кислота салициловая, натрия салицилат.

Амиды салициловой кислоты: оксафенамид, салициламид.

Сложные эфиры салициловой кислоты: кислота ацетилсалициловая, фенил-

салицилат.

Производные п-аминофенола: парацетамол.


Контроль качества экстемпоральных лекарственных форм, содержащих

ароматические кислоты и их производные.


средств, содержащих ароматические кислоты и их производные; производ-

ные n-аминофенола.


ароматических кислот и их производных, предложенных для изучения, опи-

сать их внешний вид, физические свойства и применение. Ответ оформить в

виде таблицы.



Реакция с железа ( III ) хлоридом

Характерной качественной реакцией на ароматические кислоты и их

производные является реакция с железа (III) хлоридом.

Различная растворимость препаратов в воде и цвет комплекса могут

быть использованы для дифференцирования соединений данной группы.

Так, парацетамол, натрия салицилат, натрия бензоат образуют комплекс не-

112

посредственно с железа (III) хлоридом при обычной температуре; салици-

ловая кислота – при нагревании, оксафенамид – в спиртовой среде; ацетил-

салициловая кислота – только после гидролиза; бензойная кислота – после

переведения ее в диссоциируемое соединение (натриевую соль).

При выполнении данной реакции необходимо контролировать ще-

лочность. В щелочной среде может образоваться гидроксид железа бурого

цвета, который будет маскировать окраску комплекса. Реакция не проходит

и в сильнокислой среде из-за низкой диссоциации фенольного гидроксила.

а) Реакция с железа (III) хлоридом.

Методика. К навеске препарата, указанной в таблице, растворенного в

соответствующем объеме растворителя, добавляют 2-3 капли 3 % раствора

хлорида железа (III), наблюдается характерное окрашивание (табл.18).

Таблица 18.

Условия образования и окраска комплексов препаратов с железа

(III) хлоридом

Препарат Навеска,

г Раствори-

тель Дополнительные

условия Окраска комплек-

са 1 2 3 4 5

Кислота бен-зойная

0,02 0,1М р-р NaOH 2мл

нет Розовато-жёлтый (телесный) осадок

Натрия бен-зоат

0,02 Вода 2мл

нет Розовато-жёлтый (телесный) осадок

Кислота са-лициловая

0,01 Вода 3мл

нет Сине-фиолетовое, исчезающее от прибавления не-скольких капель разведенной HCl и не исчезающее при добавлении разведенной ук-сусной кислоты

113


1 2 3 4 5 Натрия сали-цилат

0.05 Вода 5мл

+2-3 капли разве-денной

HCl.

Красно-фиолетовая

Оксафенамид 0,01

Этанол 2мл+ вода 5мл

нет Красно-фиолетовая

Кислота аце-тил-салициловая

0,25 Р-р NaOH 3мл

Кипячение 2 мин, подкисление H2SO4

разв.; к осадку при-бавляют 5 мл воды

Сине-фиолетовая

Парацетамол 0,05 Вода 3-5 мл

нет Сине-фиолетовая

б) Провести реакции подлинности на салициловую кислоту.

1. 0,01 г субстанции растворяют в 10 мл воды. Полученный раствор

даёт характерную реакцию на салицилаты. Определение проводят в соот-

ветствии с ОФС «Общие реакции на подлинность».

2. 1,0 г субстанции нагревают с 2 мл серной кислоты концентриро-

ванной и выделяющийся газ пропускают через раствор кальция гидроксида;

должно появиться помутнение раствора.

в) Провести реакции подлинности на бензоат- и салицилат-ионы.

Реакция с меди сульфатом

Реакция с меди сульфатом позволяет не только обнаружить бензоат- и

салицилат-ионы в натрии бензоате и натрия салицилате, но и отличить два

этих соединения друг от друга. Для повышения специфичности реакции

вводится органический растворитель – хлороформ. Комплекс бензоат меди

переходит в хлороформный слой и окрашивает его в голубой цвет, а ком-

плекс салицилат меди остается в водном слое. Данная модификация мето-

дики позволяет идентифицировать эти соединения в смеси.

114

Методики. 1. 0,05 г натрия бензоата растворяют в 1,5 мл воды и до-

бавляют 1-2 капли раствора меди сульфата. Появляется голубое окрашива-

ние. При добавлении 1 мл хлороформа слой органического растворителя

окрашивается в голубой цвет, а водный - обесцвечивается.

2. 0,05 г натрия салицилата растворяют в 2 мл воды и прибавляют не-

сколько капель раствора меди сульфата. Раствор окрашивается в зеленый

цвет. При добавлении хлороформа окраска водного слоя сохраняется.

г) Провести реакцию подлинности на оксафенамид.

Методика. К 0,05 г препарата прибавляют 3 мл концентрированной

кислоты хлороводородной, кипятят 3 мин и охлаждают, после чего прибав-

ляют 2 мл 0,5 % раствора резорцина и 10 мл раствора гидроксида натрия,

образуется красно-фиолетовое окрашивание (индофеноловый краситель).

д) Провести реакции подлинности на кислоту ацетилсалициловую.

1. УФ-спектр. Ультрафиолетовый спектр поглощения 0,007 % рас-

твора субстанции в хлороформе в области от 260 до 350 нм должен иметь

максимум при 278 нм.

2. УФ-спектр. Ультрафиолетовый спектр поглощения 0,001 % рас-

твора субстанции в 0,1 М растворе серной кислоты в области от 220 до 350

нм должен иметь максимумы при 228 нм и 276 нм и минимум 257 нм.

3. 0,5 г субстанции кипятят в течение 3 мин с 5 мл раствора натрия

гидроксида, охлаждают, нейтрализуют серной кислотой разведенной 16 %;

образуется белый кристаллический осадок. К осадку прибавляют 0,1 мл

раствора железа(III) хлорида; должно появиться фиолетовое окрашивание.

4. К 0,2 г субстанции прибавляют 0,5 мл серной кислоты концентри-

рованной, перемешивают, прибавляют 0,1 мл воды; должен появиться запах

уксусной кислоты. Прибавляют 0,1 мл формалина; должно появиться розо-

вое окрашивание.

115

е) Провести реакцию подлинности на парацетамол.

Методики. 1. К 0,05 г препарата прибавляют 2 мл разведенной хлоро-

водородной кислоты, кипятят в течение 1-2 мин и охлаждают, после чего

прибавляют 1-2 капли бихромата калия, появляется фиолетовое окрашива-

ние, не переходящее в красное (отличие от фенацетина).

2. К 0,1 г препарата прибавляют 2 мл разведенной серной кислоты и 1

мл этанола, нагревают, появляется запах этилацетата.

Задание 3. Провести контроль качества раствора натрия бензоата 10

%. Результаты занести в протокол.


Раствор натрия бензоата 10 % - 100 мл

Solutio Natrii benzoatis 10 % - 100ml


1. Натрий-ион. Часть раствора на графитовой палочке вносят в бес-

цветное пламя; пламя окрашивается в желтый цвет.

2. Бензоат-ион. К 2-3 каплям раствора прибавляют 1 мл воды и 1-

2 капли раствора железа (III) хлорида; образуется розовато-желтый осадок.


5 мл раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и до-

водят объем раствора водой до метки. К 4 мл полученного раствора прибав-

ляют 2 мл воды, 8-10 мл эфира, 2 капли раствора метилового оранжевого,

1 каплю раствора метиленового синего и титруют при взбалтывании 0,1 н

раствором кислоты хлороводородной до сине-фиолетового окрашивания

водного слоя. 1 мл 0,1 н раствора кислоты хлороводородной соответствует

0,0144 г бензоата натрия.

Задание 4. Провести контроль качества мази салициловой 2 или 4 %.

Результаты занести в протокол.

116


Мазь салициловая 2 % - 25,0

Unguentum salicylicum 2 % - 10,0

Кислоты салициловой 0,5 Acidi salicylici 0,5

Вазелина 24,5 Vaselini 24,5

Органолептический контроль

Мазь белого цвета без постороннего запаха.


0,05 г мази растирают с 8-10 каплями 95 % спирта и прибавляют

1-2 капли раствора железа (III) хлорида; появляется сине-фиолетовое окра-

шивание.


1,0 г мази помещают в колбу для титрования, прибавляют 8-10 мл

спирта, нагревают (при перемешивании) до расплавления основы. Затем

прибавляют 6-7 капель раствора фенолфталеина и титруют при взбалтыва-

нии 0,1 н. раствором натрия гидроксида до розового окрашивания водного

слоя. 1 мл 0,1 н. раствора натрия гидроксида соответствует 0,01381 г кисло-

ты салициловой.

Задание 5. Провести фармакопейный анализ кислоты ацетилсалици-

ловой в таблетках. Результаты анализа занести в паспорт аналитического

контроля .

Таблетки кислоты ацетилсалициловой 0,25 г или 0,5 г

Tabulettae Acidi acetylsalicylici 0,25 aut 0,5

Состав:

Кислоты ацетилсалициловой - 0,25г или 0,5 г

Вспомогательных веществ – достаточное количество

Описание

Таблетки белого цвета, слабокислого вкуса.

117


0,5 г порошка растертых таблеток кипятят в течение 3 минут с 5 мл

раствора едкого натра, затем охлаждают и подкисляют разведенной серной

кислотой; выделяется белый кристаллический осадок. Раствор сливают в

другую пробирку и добавляют к нему 2 мл спирта и 2 мл концентрирован-

ной серной кислоты: раствор имеет запах уксусно-этилового эфира.

К полученному осадку добавляют 1-2 капли раствора хлорида окис-

ного железа, появляется фиолетовое окрашивание.

0,2 г препарата помещают в фарфоровую чашку, добавляют 0,5 мл

концентрированной серной кислоты, перемешивают и добавляют 1-2 капли

воды: ощущается запах уксусной кислоты. Затем добавляют 1-2 капли фор-

малина: появляется розовое окрашивание.

Примесь свободной салициловой кислоты

Навеску порошка растертых таблеток, соответствующую 0,3 г ацетил-

салициловой кислоты, растворяют в 5 мл спирта и прибавляют 25 мл воды

(испытуемый раствор).

В один цилиндр помещают 15 мл этого раствора, в другой – 15мл того

же раствора, 0,5 мл 0,01 % водного раствора салициловой кислоты, 2 мл

спирта и доводят водой до 15 мл (эталонный раствор). Затем в оба цилиндра

добавляют по 1 мл кислого 0,2 % раствора железоаммониевых квасцов. Ок-

раска испытуемого раствора не должна быть интенсивнее эталонного рас-

твора (не более 0,05 % в препарате).

Содержание свободной салициловой кислоты должно быть соответ-

ственно не более 0,00062 г или 0,00125 г, считая на средний вес одной

таблетки.


Около 0,3 г (точная навеска) порошка растертых таблеток взбалтыва-

ют с 10 мл нейтрализованного по фенолфталеину спирта в течение 10 ми-

118

нут. Затем жидкость охлаждают до 8-100С и титруют с тем же индикатором

0,1 н. раствором едкого натра до розового окрашивания.

1 мл 0,1 н. раствора едкого натра соответствует 0,01802 г С9Н8О4, ко-

торой соответственно должно быть 0,238-0,262 г или 0,475-0,525 г, считая

на средний вес одной таблетки.

Тема 17.

ЛЕКАРСТВЕННЫЕ СРЕДСТВА

ПРОИЗВОДНЫЕ АРОМАТИЧЕСКИХ АМИНОКИСЛОТ.

ДИЭТИЛАМИНОАЦЕТАНИЛИДЫ

ЛЕКАРСТВЕННЫЕ ВЕЩЕСТВА, ПРЕДЛОЖЕННЫЕ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ:

Производные парааминобензойной кислоты: анестезин, новокаин, дикаин,

новокаинамид.

Производные парааминосалициловой кислоты: натрия n-аминосалицилат

Производные фенилуксусной кислоты: диклофенак натрия (ортофен).

Диэтиламиноацетанилиды: тримекаина гидрохлорид, лидокаина гидрохло-

рид.


Определение подлинности лекарственных средств, производных параами-

нобензойной кислоты

Цель работы: Освоить способы определения подлинности лекарст-

венных средств производных парааминобензойной кислоты


изучаемых лекарственных веществ, описать их физические свойства, рас-

творимость. Ответ оформить в виде таблицы.

Задание 2. Изучить и провести реакции подлинности на лекарствен-

ные вещества группы, результаты занести в протокол.

119

2.1. Реакция образования азокрасителя (на первичную ароматическую

аминогруппу в молекулах анестезина, новокаина, новокаинамида и натрия

n-аминосалицилата)

Методика. 0,5 г препарата растворяют в 2 мл воды и прибавляют по-

следовательно 3-5 капель разведенной соляной кислоты, 3-5 капель 0,1 М

раствора нитрита натрия. К полученному раствору прибавляют 3 мл щелоч-

ного раствора β-нафтола – появляется красное окрашивание.

2.2. Реакции окисления (новокаин, анестезин).

Анестезин и новокаин легко окисляются, образуя как окрашенные,

так и бесцветные продукты. В качестве окислителей применяют растворы

калия перманганата, хлорамина, водорода пероксида.

а) Реакция обесцвечивания перманганата калия (новокаин).

М е т о д и к а. 0,05 г препарата растворяют в 2 мл воды и прибавляют

3 капли разведенной серной кислоты и 1 мл 0,1М (1/5 УЧ) раствора калия

перманганата – фиолетовая окраска моментально исчезает.

б) Реакция окисления анестезина.

М е т о д и к а. 0,02 г препарата растворяют в 2 мл воды, прибавляют

4-5 капель разведенной хлороводородной кислоты, 1 мл раствора хлорами-

на. Через 2-3 мин добавляют 1-2 мл эфира и взбалтывают, эфирный слой

окрашивается в оранжевый цвет.

2.3. Реакция образования гидроксамовых кислот – «гидроксамовая

проба» (на сложноэфирную группу в молекулах анестезина и новокаина).

Методика. 0,1 г новокаина растворяют в 2 мл воды (анестезин в 2 мл

95 % этанола), прибавляют 2 мл щелочного раствора гидроксиламина,

встряхивают 5 мин, прибавляют 2 мл разведенной кислоты хлороводород-

ной и 0,5 мл 10 % раствора железа (III) хлорида. Анестезин дает красно-

бурое окрашивание, новокаин – вишневое. Реакция образования Шиффовых

120

оснований – «лигниновая проба» (на первичную ароматическую амино-

группу в молекулах анестезина и новокаина).

М е т о д и к а. К 0,005 г препарата на газетной бумаге прибавляют

каплю разведенной кислоты хлороводородной; появляется оранжевое пят-

но. Реакция выделения нерастворимого органического основания из его со-

ли (новокаин).

М е т о д и к а. 0,1 г препарата растворяют в 1 мл воды, прибавляют

0,5 мл раствора гидроксида натрия – выделяются бесцветные маслянистые

капли основания новокаина.

2.6. Реакция на третичную аминогруппу в молекуле новокаинамида.

М е т о д и к а. 0,01 г препарата растворяют в 1-2 мл воды и прибав-

ляют 0,01 г мета-ванадата аммония, 1-2 капли концентрированной серной

кислоты и нагревают – появляется вишнево-красное окрашивание.

2.7. Реакция образования комплексных солей с железа (III) хлоридом

(натрия n-аминосалицилат, натрия диклофенак).

М е т о д и к а. К 0,05 г диклофенака натрия, растворенной в 3-5 мл

воды (0.01 г натрия n-аминосалицилата растворяют в 10 мл воды, подкис-

ленной 2-3 каплями разведенной НСI), добавляют 2-3 капли 3 % раствора

железа (III) хлорида – наблюдается выпадение желто-коричневого осадка

(диклофенак) или сине-фиолетовое окрашивание, переходящее в желтое

при добавлении 3-4 капель раствора аммиака (ПАСК-натрий).

2.8. Реакции подлинности дикаина

а) Реакция нитрования. Методика. К 0,005 г препарата прибавляют 1-2

капли концентрированной кислоты азотной и выпаривают на водяной бане;

появляется желтое окрашивание.

б) Реакция окисления. Методика. В раствор препарата вносят 1-2 кап-

ли раствора калия перманганата или калия бихромата; появляется тошно-

творный запах изонитрила.

121

2.9. Реакции подлинности натрия диклофенака.

Методики. 1. Помещают несколько крупинок препарата на часовое

стекло и смывают концентрированной серной кислотой. Кристаллы приоб-

ретают малиновое окрашивание.

2. После прокаливания навески препарата (около 0,2 г) в тигле и рас-

творения содержимого в воде натрия диклофенак дает характерную реак-

цию на ион натрия и на хлориды в фильтрате (ГФ XIII).

3. 0,02 г натрия диклофенака растворяют в 2 мл воды и прибавляют 1

мл разведенной HCI – образуется нерастворимая кислотная форма дикло-

фенака и выпадает белый осадок индолинона.

4. Реакция подлинности тримекаина (реакция конденсации с фор-

мальдегидом).

Методика. К 0,001 г препарата прибавляют 5 капель реактива Марки,

нагревают на водяной бане в течение 10 мин; появляется красное окраши-

вание. При внесении 10 капель воды появляется голубая флюоресценция.

5. Реакция на связанную кислоту хлороводородную в составе молекул

препаратов, являющихся гидрохлоридами (новокаина гидрохлорид, ново-

каинамида гидрохлорид, дикаина гидрохлорид, тримекаина гидрохлорид,

лидокаина гидрохлорид).

Методика. 0,001-0,002 г препарата растворяют в 10 каплях воды, при-

бавляют по 1 капле разведенной кислоты азотной и раствора серебра нитрата;

образуется белый творожистый осадок, растворимый в растворе аммиака.

Экспресс-анализ экстемпоральных лекарственных форм, содержащих но-

вокаин

Цель работы: Освоить приемы, используемые в экспресс-анализе

экстемпоральных лекарственных форм, содержащих новокаин.

122

Задание 1. Провести качественный и количественный анализ лекар-

ственной формы. Результаты анализа занести в паспорт аналитического

контроля.

Пропись №1

Растворы новокаина: 0,25; 0,5; 1; 2 % - 100 мл.

Solutio Novocaini: 0,25; 0,5; 1; 2 % - 100 ml


1. Новокаин. К 3-4 каплям исследуемого раствора прибавляют 1 кап-

лю разведенной хлороводородной кислоты, 1 каплю 0,1 М раствора нитрита

натрия, 0,5 мл щелочного раствора β-нафтола, появляется вишнево-красное


2. Реакция на хлорид-анион. С раствором нитрата серебра образует

белый творожистый осадок.


К 0,5-2 мл исследуемого раствора (в зависимости от концентрации

раствора – см. таблицу 19) прибавляют 2 капли раствора бромфенолового

синего и по каплям – разведенную уксусную кислоту, пока фиолетовое ок-

рашивание не перейдет в зеленовато-желтое. Титруют 0,02 н. или 0,1 н. рас-

твором нитрата серебра до фиолетового окрашивания.

1 мл 0,02 н. раствора нитрата серебра соответствует 0,005454 г ново-

каина.

1 мл 0,1 н. раствора нитрата серебра соответствует 0,02727 г новокаина.

123

Таблица 19.

Значения факторов пересчета новокаина в зависимости от его концен-

трации

№ п/п Содержание

новокаина и

объём лекарст-

венной формы

Объём иссле-

дуемого раство-

ра, взятый для

титрования

Предел рас-

хода раствора

серебра нит-

рата с расчё-

том норм от-

клонений

0,02н 0,01 н

Фактор

пересчёта

1 0,25% -100 2 0,80 -

1,00

-- 0,2730

2 0,5% - 100 2 1,68 –

1,97

-- 0,2730

3 1% - 100 2 -- 0,69 -

0,77

1,3635

4 2% - 100 2 -- 1,39–

1,54

1,3635

Значения факторов пересчета (Ф) рассчитаны ранее по формуле:

Ф = 100T

a

´.

Расчет содержания новокаина (X, %) в растворе проводят по формуле:

X =V×K×Ф, %,

где: V- объем стандартного раствора (0,02 или 0,1н. AgNO3), пошедший на

титрование, мл.;

К - поправочный коэффициент к концентрации титранта;

Ф - фактор пересчета согласно таблице 19.

124

Задание 2. Провести качественный и количественный анализ двух-

компонентных лекарственных форм. Результаты анализа занести в паспорт

аналитического контроля.


Новокаин 0,5 Novocainum 0,5

Раствор борной кислоты 2 % -100 мл Solutio Acidi borici 2 % - 100 ml






2. Реакция на борную кислоту. 2-3 капли исследуемого раствора по-

мещают в выпарительную чашку и выпаривают на водяной бане досуха. К

остатку прибавляют 2-3 капли этилового спирта, пламя спиртового раствора

окрашивается в зеленый цвет.


1. Новокаин. К 1 мл исследуемого раствора прибавляют 2 капли рас-

твора бромфенолового синего, по каплям - разведенную уксусную кислоту

(1-2 капли) до перехода фиолетового окрашивания в зеленовато-желтое и

титруют 0,02 н. раствором нитрата серебра до фиолетового окрашивания

жидкости.

1 мл 0,02 н. раствора нитрата серебра соответствует 0,005454 г ново-

каина. На титрование расходуется 0,85 - 0,98 мл 0,02 н. раствора нитрата

серебра. Фактор пересчета (Ф) для вычисления процентного содержания

новокаина в данной прописи равен 0,545.

2. Борная кислота (суммарное титрование). К 0,5 мл исследуемого

раствора прибавляют 1-1,5 мл воды, 2-3 мл глицерина, нейтрализованного

125

по фенолфталеину, и титруют 0,1 н. раствором едкого натра до розового ок-

рашивания.

Расчет содержания борной кислоты. От количества миллилитров

0,1 н. раствора едкого натра, израсходованного на титрование новокаина и

борной кислоты в сумме, вычитают количество миллилитров 0,02 н. рас-

твора нитрата серебра (израсходованного на титрование новокаина), делен-

ного на 10. Полученную разность пересчитывают на содержание борной

кислоты. 1 мл 0,1 н. раствора едкого натра соответствует 0,006184 г борной

кислоты. На титрование расходуется 1,54 - 1,67 мл 0,1 н. раствора едкого

натра. Фактор пересчета (Ф) для вычисления процентного содержания бор-

ной кислоты в данной прописи равен 1,2368.


Новокаин - 2,0 Novocainum - 2,0

Раствор натрия хлорида 0,85 % - 100 мл Solutio Nаtrii chloridi 0,85 % -

100 ml.






2. Натрий-ион. Графитовую палочку, смоченную исследуемым рас-

твором, вносят в пламя горелки. Пламя окрашивается в желтый цвет.


1. Новокаин. К 1 мл исследуемого раствора прибавляют 1 мл воды,

1,5 - 2 мл хлороформа, 6 капель смешанного индикатора (равные части рас-

творов фенолфталеина и тимолфталеина) и титруют при взбалтывании

0,1 н. раствором едкого натра до фиолетового окрашивания водного слоя.

126

1 мл 0,1 н. раствора едкого натра соответствует 0,02727 г новокаина.

На титрование расходуется 0,7 - 0,76 мл 0,1 н. раствора едкого натра. Фак-

тор пересчета (Ф) для вычисления процентного содержания новокаина в

данной прописи равен 2,727.

2. Натрия хлорид (суммарное титрование). К 1 мл расходуемого рас-

твора прибавляют 1 каплю раствора хромата калия и титруют 0,1 н. раство-

ром нитрата серебра до буровато-желтого окрашивания. Разность между

количеством миллилитров, израсходованного на второе и первое титрова-

ния, пересчитывают на хлорид натрия. 1 мл 0,1 н. раствора нитрата серебра

соответствует 0,005845 г хлорида натрия. Предел расхода 0,1 н. раствора

нитрата серебра, пересчитываемый на хлорид натрия, равен 1,33-1,57. Фак-

тор пересчета (Ф) для вычисления процентного содержания хлорида натрия

в данной прописи равен 0,584.

Тема 18.

ФЕНИЛАЛКИЛАМИНЫ И ИХ ПРОИЗВОДНЫЕ


Производные фенилалкиламинов: эфедрина гидрохлорид; эпинефрина (ад-

реналина) и норэпинефрина (норадреналина) гидрохлориды и гидротартра-

ты; изопреналина гидрохлорид (изадрин); сальбутамол, верапамил.

Производные гидроксипропаноламинов: пропранола гидрохлорид (анапри-

лин), атенолол, тимолол, флуоксетин (прозак).


Контроль качества лекарственных средств на основе

производных фенилалкиламинов


средств, производных фенилалкиламинов.

127


изучаемых лекарственных веществ, охарактеризовать их физические свой-

ства, растворимость в различных растворителях, применение, результаты

занести в протокол.

Задание 2. Изучить и провести реакции подлинности на эфедрина

гидрохлорид, адреналина и норадреналина гидрохлорид и гидротартрат, ре-

зультаты занести в протокол.

2.1. Реакции подлинности на адреналин, норадреналин и их соли

а) Реакция комплексообразования с солями тяжелых металлов.

Методика. К 1-2 каплям 0,1 % раствора препарата (0,001 г препарата

растворяют в 1 мл воды) прибавляют 1 каплю 3 % раствора железа (III) хло-

рида; появляется изумрудно-зеленое окрашивание, которое при добавлении

1-2 капель раствора гидроксида аммония постепенно переходит в вишнево-

красное.

б) Реакция окисления. Методика. К 1 мл 0,2 % раствора препарата до-

бавляют несколько кристалликов калия йодата и 1 мл 0,1 М свежеприготов-

ленного раствора натрия нитрита (раствор можно слегка подогреть). Через

3-4 мин появляется красное окрашивание. Среди образующихся продук-

тов – адренохром (норадренохром).

в) Реакция окисления (реакция образования адренохрома и норадре-

нохрома.

Реакция позволяет дифференцировать препараты друг от друга. Уста-

новлено, что образование адренохрома происходит при строго фиксирован-

ном значении рН.

Для идентификации этих соединений рекомендуется проводить окис-

ление при рН 3,6 и 6,5. Адренохром образуется при обоих значениях рН, а

норадренохром – только при рН 6,5.

128

Методика. К 1 мл 0,1 % раствора препарата добавляют 9 мл буферно-

го раствора с рН 3,56 и 1 мл 0,05 моль/л раствора йода и оставляют на 5

мин. Прибавляют 2 мл 0,1 моль/л раствора натрия тиосульфата. Раствор ок-

рашивается в красно-фиолетовый цвет (для адреналина) или остается бес-

цветным (для норадреналина). Повторяют определение с буферным раство-

ром (рН 6,5). Появляется красное окрашивание (для адреналина и норадре-

налина).

г) Реакции идентификации анионов в солях адреналина.

Определение хлорид-иона. Методика. К 1 мл раствора препарата при-

бавляют 1 каплю раствора азотной кислоты и 0,5 мл 2 % раствора нитрата

серебра – выпадает белый творожистый осадок хлорида серебра.

Определение гидротартрат-иона. Методика. К 1 мл раствора препара-

та прибавляют кристаллик хлорида калия, 0,5 мл этанола и потирают стек-

лянной палочкой о стенки пробирки – выпадает белый кристаллический

осадок, растворимый в разведенных минеральных кислотах и растворах ед-

ких щелочей (реакция на тартраты).

3.2. Определить примеси в адреналина гидротартрате методом УФ-

спектрофотометрии

Испытание на чистоту

УФ-характеристики в ряде случаев используются при испытаниях на

чистоту и при исследовании стабильности лекарственных веществ, если из-

менения в характере спектра позволяют судить об изменениях вещества.

При этом оптимальны те случаи, когда продукты разрушения поглощают в

области, отличной от поглощения исследуемого вещества.

Примером может служить определение примесей адреналона и но-

радреналона, соответственно, в адреналине и норадреналине. Полоса по-

глощения «кетонов» около 310 нм, для основных веществ – около 278 нм.

129

Методика. Примесь адреналона в адреналина гидротартрате опреде-

ляют, измеряя оптическую плотность 0,05 % раствора препарата в 0,01М

растворе кислоты хлороводородной при 310 нм в кювете с толщиной слоя 1

см. Измеренное значение А не должно превышать 0,1. Измерения проводят

относительно 0,01 М HCI.

Задание 4. Провести количественное определение адреналина гидро-

тартрата методами фотоколориметрии и неводного титрования. Результаты

занести в таблицы.

4.1. Определение содержания адреналина гидротартрата в субстан-

ции.

Методика. Около 0,15 г тонкоизмельченного и высушенного препара-

та (точная навеска) растворяют в 20 мл ледяной уксусной кислоты, слегка

нагревая до 40 °С в случае медленного растворения, и титруют 0,1н. рас-

твором хлорной кислоты до голубовато-зеленого окрашивания (индикатор -

метиловый фиолетовый).


1 мл 0,1н. раствора хлорной кислоты соответствует 0,03333 г

С9H13NО3 С4Н6О6, которого в препарате должно быть не более 101,0 %.

4.2. Определение содержания адреналина гидротартрата в 0,1 % рас-

творе для инъекций

Состав:

Адреналина гидротартрата 1,0

Натрия метабисульфита 1,0

Натрия хлорида 8,0

Динатрия эдтата 0,5

Глицерола 6,0

Хлороводородной кислоты до pH 2,5-4,0

Воды для инъекций до 1 л

130

Методика. 1,5 мл препарата разводят водой в мерной колбе до 25 мл.

К 10 мл полученного раствора прибавляют 0,2 мл железо-цитратного реак-

тива и 1 мл аминоуксусной буферной смеси, оставляют на 10 мин и изме-

ряют оптическую плотность окрашенного раствора на фотоэлектроколори-

метре ФЭК-М с зеленым светофильтром или на спектрофотометре при дли-

не волны 530 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве кон-

трольного раствора воду.

Одновременно измеряют оптическую плотность в 10 мл раствора

стандартного образца, приготовленного аналогично испытуемому раствору.

Содержание С9H13NО3 С4Н6О6 в 1 мл препарата должно быть 0,0009-

0,0011 г.

Тема 19.

ЛЕКАРСТВЕННЫЕ СРЕДСТВА, ПРОИЗВОДНЫЕ ГИДРОКСИ-

ФЕНИЛАЛИФАТИЧЕСКИХ АМИНОКИСЛОТ,

НИТРО-ФЕНИЛАЛКИЛАМИНОВ

И АМИНОДИБРОМФЕНИЛ-АЛКИЛАМИНОВ


Производные гидроксифенилалифатических аминокислот: леводопа,

метилдофа.

Производные нитрофенилалкиламинов: левомицетин.

Производные аминодибромфенилалкиламинов: бромгексин, амброксол.

АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ: Лекарственные средства изучаемой группы ши-

роко применяются в медицинской практике в составе различных лекарст-

венных форм.

Изучаемые лекарственные средства обладают разнообразными фармаколо-

гическими свойствами. Препараты группы находят применение в качестве

муколитических средств (бромгексина гидрохлорид; амброксола гидрохло-

131

рид); антибиотиков (левомицетин); противопаркинсонных средств (леводо-

па); гипотензивных средств (метилдофа).


Контроль качества лекарственных средств, содержащих леводопу, метил-

дофу, амброксол и бромгексин.

Цель работы: Освоить способы оценки качества лекарственных

средств производных гидроксифенилалифатических аминокислот и амино-

дибромфенилалкиламинов.


изучаемых лекарственных веществ, описать их физические свойства, рас-

творимость, применение. Ответ оформить в виде таблицы.

Задание 2. Провести качественный и количественный анализ лекар-

ственных средств группы, результаты оформить в виде паспорта аналитиче-

ского контроля.

2.1. Идентификация и количественное определение леводопы и ме-

тилдофы

Качественные реакции

а) Методика. 0,02 г препарата растворяют в 5 мл 0,1 М кислоты хло-

роводородной (метилдофа растворяется не сразу, а при перемешивании в

течение 3-5 мин). К полученному раствору добавляют 0,1 мл 3 % раствора

железа (III) хлорида; появляется зеленое окрашивание (реакция на феноль-

ные гидроксилы в молекулах препаратов). Полученный раствор делят на 2

части. К половине раствора добавляют избыток 5М раствора аммиака; по-

является пурпурное окрашивание. К остальному раствору добавляют избы-

ток 5 М раствора натрия гидроксида; появляется красное окрашивание.

б) Методика. 0,05 г препарата растворяют в 2 мл 1 % раствора натрия

нитрита, подкисленного 3-5 каплями разведенной кислоты хлороводород-

132

ной; появляется желто-оранжевое окрашивание, переходящее при добавле-

нии 5М раствора гидроксида натрия в темно-красное.

в) Методика. 0,01 г метилдофы субстанции или навеску таблеток, со-

держащую эквивалентное количество препарата смешивают с 3 каплями

нингидрин-сульфатной кислоты; через 5 мин появляется темно-фиолетовое

окрашива-ние, переходящее при добавлении трех капель воды в желто-

коричневое. Для приготовления нингидрин-сульфатной кислоты 0,1 г нин-

гидрина растворяют в 25 мл концентрированной кислоты серной – реактив

должен быть свежеприготовленным.


а) Количественное определение леводопы в субстанции и капсулах

методом неводного титрования. Методика. 0,6 г субстанции леводолы или

такое же количество усредненного содержимого 20 капсул растворяют в 10

мл безводной муравьиной кислоты, добавляют 80 мл ледяной уксусной ки-

слоты и титруют 0,1М раствором хлорной кислоты с индикатором кристал-

лическим фиолетовым до перехода окраски в синий цвет.

1 мл 0,1 моль/л раствора HClO4 эквивалентен 0,01972 г леводопы, ко-

торой в субстанции должно быть 95,0-105,0 %. Содержание в 1 капсуле 475-

500мг.

б) Количественное определение метилдофы в таблетках по 250 мг,

покрытых оболочкой. Методика. Навеску растертых таблеток, содержащую

125 мг метилдофы (обезвоженной) растворяют при нагревании в 20 мл ле-

дяной уксусной кислоты, охлаждают, прибавляют 20 мл диоксана и 3 капли

раствора кристаллического фиолетового. Титруют раствором хлорной ки-

слоты (0,1 моль/л) до синего цвета. Параллельно титруют контрольную

пробу.

1 мл 0,1 моль/л раствора HClO4 соответствует 21,12 мг обезвоженной

метилдофы, которой в одной таблетке должно быть от 225 до 275 мг.

133

2.2. Идентификация и количественное определение бромгексина в

субстанции и таблетках

В субстанции:

1. ИК-спектр. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с

калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос погло-

щения должен соответствовать спектру стандартного образца бромгексина

гидрохлорида.

Если в спектрах обнаруживаются различия, субстанцию и стандарт-

ный образец раздельно растворяют в метаноле, упаривают досуха и вновь

снимают спектры полученных образцов.

2. 0,025 г субстанции растворяют в смеси 0,6 мл серной кислоты раз-

веденной 16 % и 50 мл воды, прибавляют 2 мл метиленхлорида, 5 мл рас-

твора хлорамина 5 %, встряхивают и оставляют до разделения слоев; в

нижнем слое должно появиться коричнево-жёлтое окрашивание.

3. 0,001 г субстанции растворяют в 3 мл 0,1 М раствора хлороводо-

родной кислоты. Полученный раствор дает характерную реакцию на амины

первичные ароматические. Определение проводят в соответствии с ОФС

«Общие реакции на подлинность».

4. 0,02 г субстанции растворяют в 1 мл метанола, прибавляют 1 мл

воды и перемешивают. Полученный раствор дает характерную реакцию на

хлориды. Определение проводят в соответствии с ОФС «Общие реакции на

подлинность».

В таблетках:

Качественные реакции

а) Реакция на первичную ароматическую аминогруппу в молекуле.

Методика. Около 0,1 г субстанции или эквивалентное количество таблеток

растворяют в 2 мл 1 % раствора натрия нитрита, подкисленного 3-5 капля-

ми разведенной кислоты хлороводородной. Через 1-2 мин к полученному

134

раствору добавляют 1 мл щелочного раствора β-нафтола; появляется оран-

жево-красное окрашивание.

б) Реакция на органически связанный бром. Методика. Около 0,025 г

субстанции растворяют в 50 мл воды, подкисленной 1 мл 1М раствора ки-

слоты серной. Добавляют 2 мл дихлорметана (или тетрахлорметана) и 5 мл

свежеприготовленного 2 % (по массе) раствора хлорамина Б. Раствор хоро-

шо перемешивают и через 10-15 мин наблюдают желто-коричневую окра-

ску нижнего слоя (органического растворителя).

в) Реакция на связанную кислоту хлороводородную (хлориды).

М е т о д и к а. 0,02 г субстанции растворяют в 1 мл этанола и добав-

ляют 1 мл воды. Полученный раствор подкисляют 2М раствором кислоты

азотной и прибавляют несколько капель раствора серебра нитрата – образу-

ется белый творожистый осадок, растворимый в растворе аммиака.


Количественное определение бромгексина в таблетках по 0,008 г.

М е т о д и к а. Около 1,0 г (точная навеска) порошка растертых таб-

леток помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл, прибавляют около

150 мл спирта 95 % , энергично встряхивают в течение 5 мин, доводят объ-

ем раствора спиртом 95 % до метки и фильтруют через сухой бумажный

фильтр «синяя лента» в сухую колбу, отбрасывая первые порции фильтрата.

10 мл фильтрата переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибав-

ляют 1 мл 0,1М раствора кислоты хлороводородной, доводят объем раство-

ра спиртом 95 % до метки и перемешивают. Измеряют оптическую плот-

ность полученного раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения

при длине волны 318 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. Параллельно изме-

ряют оптическую плотность раствора РСО бромгексина гидрохлорида. В

качестве раствора сравнения используют смесь 0,1М кислота хлороводо-

родная – спирт 95 % (1:24).

135

Приготовление раствора РСО бромгексина гидрохлорида. Около 0,04 г

(с точностью до 0,00005 г) бромгексина гидрохлорида (НД 42-10060-99 или

другого импортного, зарегистрированного в РФ) помещают в мерную колбу

вместимостью 200 мл, прибавляют 150 мл спирта 95% и встряхивают на во-

дяной бане при температуре от 60 до 70°С до полного растворения, охлаж-

дают и доводят объем раствора спиртом 95% до метки, перемешивают (рас-

твор А).

Раствор А используют свежеприготовленным. 4 мл полученного рас-

твора переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 1 мл 0,1

М раствора кислоты хлороводородной, доводят объем раствора спиртом 95

% до метки и перемешивают. Раствор используют свежеприготовленным.

Содержание C14H20Br2N2 HCl (бромгексина гидрохлорида) должно

быть от

0,0072 до 0,0088 г, считая на среднюю массу одной таблетки.

Контроль качества экстемпоральных лекарственных форм, содержащих

левомицетин

Цель работы. Освоить методы контроля качества экстемпоральных лекар-

ственных форм, содержащих левомицетин.

Задание 1. Изучить и провести реакции подлинности на левомицетин,

результаты оформить в виде таблицы .

а) Методика. К 0,02 г препарата прибавляют 2 мл раствора гидроксида

натрия и нагревают – появляется желтое окрашивание, которое усиливается

при кипячении, одновременно появляется запах аммиака.

б) Методика. К 0,05 г препарата прибавляют 2 мл концентрированной

кислоты хлороводородной и 1 гранулу цинка, нагревают в течение 2-3 мин,

после чего прибавляют 1 мл 5 % раствора натрия нитрита. К 0,5 мл полу-

136

ченного раствора прибавляют щелочной раствор β-нафтола – появляется

красно-оранжевое окрашивание.

в) Методика. 0,01 г левомицетина встряхивают с 1 мл 5 % раствора

сульфата меди и прибавляют 1 мл раствора гидроксида натрия – появляется

синий осадок, после прибавления к смеси 3 мл бутанола при перемешива-

нии, слой органического растворителя окрашивается в фиолетовый цвет.

г) Методика. Смесь подкисляют 2 мл разведенной азотной кислоты и

фильтруют. К фильтрату прибавляют 3-5 капель 2 % раствора серебра нит-

рата – образуется белый творожистый осадок.

Задание 2. Провести контроль качества субстанции с левомицетина

(ФС 42 0 2786 - 91), результаты занести в протокол.


1. УФ спектр 0,002% водного раствора в области от 220 до 400 нм

имеет максимум поглощения при 278 ± 2 нм и минимум при 237 ± 2 нм.

2. 0,1 г препарата нагревают с 5 мл раствора натра едкого на водя-

ной бане; выделяется кирпично-красный осадок и образуется аммиак, обна-

руживаемый по запаху и по посинению красной лакмусовой бумаги.

3. Раствор с осадком, полученный в предыдущем испытании, ох-

лаждают, доводят до нейтральной реакции кислотой азотной разведенной

по бумаге индикаторной универсальной и фильтруют. Фильтрат дает харак-

терную реакцию на хлориды.

Хлориды. К 2 мл раствора хлорида (2-10 мг хлорид-иона) прибавля-

ют 0,5 мл азотной кислоты разведенной 16 % и 0,5 мл серебра нитрата рас-

твора 2 %; образуется белый творожистый осадок, нерастворимый в азот-

ной кислоте разведенной 16 % и растворимый в аммиака растворе 10 %.

Для солей органических оснований испытание растворимости образовавше-

гося осадка проводят после отфильтровывания и промывания осадка водой.

137


Около 0,5 г препарата (точная навеска) помещают в коническую кол-

бу вместимостью 250 мл, прибавляют кислоты хлороводородной концен-

трированной и осторожно, небольшими порциями, 5 г пыли цинковой. За-

тем прибавляют еще 10 мл кислоты хлороводородной концентрированной,

обмывая стенки колбы, для полного растворения пыли цинковой. Далее по-

ступают как указано в статье «Нитритометрия» ГФ ХIII: Прибавляют воду

до общего объема 80 мл, 1 г калия бромида и при постоянном перемешива-

нии титруют натрия нитрита раствором 0,1 М. В начале титрования прибав-

ляют раствор натрия нитрита со скоростью 2 мл/мин, а в конце (за 0,5 мл до

эквивалентного количества) – 0,05 мл/мин.

При амперометрическом титровании на электроды накладывают раз-

ность потенциалов 0,3 0,4 В, если не указано иначе в фармакопейной ста-

тье.

Точку эквивалентности определяют электрометрическими методами

(потенциометрическое титрование, титрование «до полного прекращения

тока») или с помощью внутренних индикаторов и внешнего индикатора

(йодкрахмальная бумага).

В качестве внутренних индикаторов используют тропеолин ОО (4 ка-

пли раствора), тропеолин ОО в смеси с метиленовым синим (4 капли рас-

твора тропеолина ОО и две капли раствора метиленового синего), ней-

тральный красный (две капли в начале и две капли в конце титрования).

Титрование с тропеолином ОО проводят до перехода окраски от

красной к желтой, со смесью тропеолина ОО с метиленовым синим – от

красно-фиолетовой к голубой, с нейтральным красным – от красно-

фиолетовой к синей. Выдержку в конце титрования с нейтральным красным

увеличивают до 2 мин.

138

Титрование с йодкрахмальной бумагой ведут до тех пор, пока капля

титруемого раствора, взятая через 1 мин после прибавления натрия нитрита

раствора 0,1 М, не будет немедленно вызывать синее окрашивание на бума-

ге. В некоторых случаях выдержка может быть увеличена, о чем должно

быть указано в фармакопейной статье.

Параллельно проводят контрольный опыт

Задание 3. Провести контроль качества глазных капель с левомице-

тином, результаты занести в протокол.

Пропись:

Раствор левомицетина 0,25 % - 10,0

Натрия хлорида 0,09


Левомицетин.

а) К 0,5 мл раствора прибавляют 1-2 мл разведенной кислоты хлоро-

водородной, 0,03 г цинковой пыли, нагревают до кипения. После охлажде-

ния раствор фильтруют через воронку с небольшим ватным тампоном и к

фильтрату, промывая ватный тампон, добавляют 2 мл воды, затем 3-5 ка-

пель 0,1 М раствора натрия нитрита. 1 мл полученной реакционной смеси

приливают к 20 мл 1 % свежеприготовленного щелочного раствора β-

нафтола; появляется красно-розовое окрашивание.

б) К 0,5 мл раствора прибавляют 5 капель 10 % раствора натрия гид-

роксида; при нагревании появляется желтое окрашивание.

Натрия хлорид.

а) Графитовую палочку смачивают анализируемым раствором и вно-

сят в бесцветное пламя. Пламя окрашивается в желтый цвет.

б) К 2 мл раствора прибавляют по 3 капли воды, разведенной кислоты

азотной и серебра нитрата – образуется белый творожистый осадок.

139


Левомицетин.

а) 2 мл раствора помещают в пробирку, прибавляют 1 мл разведенной

кислоты хлороводородной, 0,05 г цинковой пыли, затем добавляют еще 1

мл разведенной кислоты хлороводородной, смывая со стенок пробирки ос-

татки цинковой пыли, и оставляют на 5 мин. Далее жидкость фильтруют

через небольшой ватный тампон. Пробирку и воронку с ватным тампоном

промывают 3-4 раза водой порциями по 1,5 мл, присоединяя их к основно-

му фильтрату. К фильтрату добавляют 0,05 г калия бромида, 2 капли рас-

твора тропеолина 00 и 1 каплю раствора метиленового синего, титруют

0,02М раствором натрия нитрита, добавляя его вначале по 3 капли через 1

мин, а в конце титрования (за 0,1-0,2 мл до эквивалентного количества) – по

1 капле через 1 мин до перехода красно-фиолетовой окраски в голубую. Па-

раллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,02М раствора натрия нитрита соответствует 0,006462 г лево-

мицетина.

б) 2 мл раствора помещают в пробирку, прибавляют 0,2 мл 10 % рас-

твора натрия гидроксида и тотчас же 0,1 мл 10 % раствора сульфата меди.

Смесь взбалтывают 1 мин, затем фильтруют через воронку с небольшим

ватным тампоном (тампон должен быть не очень плотным, входящим на 1

см в трубочку воронки). Пробирку и воронку с ватным тампоном промыва-

ют водой 3 раза по 1 мл, присоединяя промывные воды к основному фильт-

рату. К фильтрату прибавляют по каплям разведенную кислоту серную до

обесцвечивания (1-2 капли), 0,2 мл калия йодида и выделившийся йод от-

титровывают 0,01 н. раствором натрия тиосульфата до обесцвечивания. В

конце титрования прибавляют 1-2 капли раствора крахмала.

1 мл 0,01 М раствора натрия тиосульфата соответствует 0,006462 г

левомицетина.

140

Натрия хлорид.

К 0,5 мл раствора прибавляют 1 мл воды, 1-2 капли раствора бромфе-

нолового синего, по каплям разведенную кислоту уксусную до зеленовато-

желтого окрашивания и титруют 0,1 н. раствором серебра нитрата до фио-

летового окрашивания.

1 мл 0,1 н. раствора серебра нитрата соответствует 0,005844 г натрия

хлорида.

Тема 20.

ЛЕКАРСТВЕННЫЕ СРЕДСТВА ИЗ ГРУППЫ СУЛЬФАНИЛАМИ-

ДОВ


Стрептоцид, сульфацил-натрий, сульфадиметоксин, сульфален, фталазол,

салазопиридазин, бактрим,


Задание 1. Провести анализ глазных капель сульфацил натрия 20%. (ФСП-

42-0241156701)

Сульфацил натрия 20%


1. 1 мл препарата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл,

доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. 5 мл раствора пе-

реносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора

водой до метки. Ультрафиолетовый спектр полученного раствора в области

от 205 до 310 нм должен иметь максимум поглощения при 258±2 нм и ми-

нимум поглощения при 227±2 нм.

2. Препарат дает характерную реакцию на первичные ароматические

амины:

141

Около 50 мг лекарственного средства растворяют в 1 мл хлороводо-

родной кислоты разведенной 8,3 %, нагревают при необходимости, охлаж-

дают во льду, прибавляют 2 мл натрия нитрита раствора 1 %; полученный

раствор прибавляют к 1 мл щелочного раствора β-нафтола, содержащего 0,5

г натрия ацетата; образуется осадок от желто-оранжевого до оранжево-

красного цвета.

3. К 1 мл препарата прибавляют 1 мл сульфата меди – образуется

осадок голубовато – зеленоватого, который не изменяется при стоянии.


1. Нитритометрическое титрование.

5 мл препарат помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и до-

водят объем раствора водой до метки. 10 мл полученного раствора поме-

щают в коническую колбу для титрования вместимостью 250 мл, 5 мл ки-

слоты хлороводородной разведенной, 30 мл воды и титруют 0,1 М раство-

ром натрия нитрита (индикатор – 0,02 мл раствора нейтрального красного

0,5% в начале и в конце титрования). Параллельно в тех же условиях про-

водят контрольный опят.

1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 0,02542 г сульфа-

цил-натрия, которого в 1 мл препарата должно быть от 0,194 до 0,206.

2. Ацидиметрическое тирование.

5 мл препарата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и

доводят объем раствора водой до метки. 10 мл полученного раствора поме-

щают в коническую колба вместимостью 100 мл, прибавляют 0,02 мл рас-

твора метилового оранжевого и 0,02 мл раствора метиленового синего – и

титруют 0,1 М раствором кислоты хлороводородной до фиолетового окра-

шивания.


142

1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 0,02542 г сульфа-

цил-натрия, которого в 1 мл препарата должно быть от 0,194 до 0,206.

Деловая игра по теме:

«Контроль качества лекарственных средств из группы сульфанилами-

дов»

Цель работы. Освоить навыки оценки качества лекарственных средств ин-

дивидуального изготовления, содержащих вещества из группы сульфони-

ламидов.

Задачи деловой игры

- самостоятельно подобрать в справочной литературе и применить на прак-

тике оптимальные методы для качественного и количественного анализа

лекарственных форм индивидуального изготовления, содержащих сульфо-

ниламиды;

- теоретически обосновать выбор условий анализа;

- провести предварительные аналитические расчеты;

- показать практические умения по выполнению методик анализа предло-

женных лекарственных форм;

- уметь проанализировать возможные ошибки приготовления лекарствен-

ных форм и сделать правильное заключение об их качестве;

- провести обсуждение полученных результатов.

Основные этапы деловой игры

Изучение химической структуры, физических и химических свойств

препаратов группы сульфониламидов;

Изучение химических и физико-химических методов идентификации

указанных лекарственных препаратов, уравнений реакций, лежащих в их

основе;

143

Изучение возможных методов количественного определения лекарст-

венных препаратов. Умение писать уравнения реакций;

Изучение особенностей анализа различных лекарственных форм, со-

держащих лекарственные вещества данной группы;

Изучение требований к качеству и особенностей анализа лекарствен-

ной формы «глазные капли» (ГФ XIII);

Знакомство со сценарием деловой игры;

Распределение ролей;

Выбор в справочной литературе и НД методик по контролю качества

предложенных преподавателем лекарственных форм;

Проведение анализа лекарственного средства и выполнение соответ-

ствующих расчетов;

Обсуждение полученных результатов.

Сценарий деловой игры

В качестве объекта игрового сценария выбрана аптека № 5.

В аптеке были изготовлены и выданы:

1. Раствор сульфацил-натрия 30 % - 10 мл.

Состав: сульфацил-натрия 1,0;

натрия тиосульфата 0,015;

раствора хлороводородной кислоты 1 моль/л – 0,035 мл;

воды до 10 мл.

После закапывания в глаза данного препарата у Ступицина П.И. (2000

г.р.) наблюдалось сильное жжение и покраснение глазного яблока. Родите-

ли больного обратились в областную глазную больницу и в департамент

здравоохранения с просьбой разобраться в случившемся.

2. Порошок по прописи:

Норсульфазола 1,0

Стрептоцида 1,0

144

Эфедрина г/х 0,1

После вдувания данного препарата в полость носа (с помощью специ-

ального порошковдувателя) для лечения острого насморка у больной Ива-

новой Н.П. (1989 г.р.) возникло головокружение, тошнота, рвота. Граждан-

ка обратилась в ОКБ, где при обследовании у нее был выявлен цианоз.

В связи со случившимся районный департамент здравоохранения на-

чинает административное расследование. Назначается экспертная комиссия

из двух групп специалистов – провизоров аптек № 1 и № 2 для проведения

арбитражного анализа лекарственных форм, изготовленных в аптеке № 5.

Роль председателя комиссии берет на себя преподаватель, роли про-

визоров-аналитиков арбитражных аптек – студенты.

Студентам выдаются для анализа остатки двух лекарственных форм.

Они должны провести независимо друг от друга анализ полученных лекар-

ственных форм.

На отдельном участке лаборатории, играющей роль библиотеки нахо-

дится учебная литература, приказы, справочники, ГФ и методические ука-

зания, предназначенные для работы членов комиссии. Каждый студент

внутри экспертной группы получает индивидуальное задание. Суть задания

заключается в практическом выполнении качественного и количественного

анализа одной лекарственной формы. Распределяет задание председатель

комиссии (преподаватель). Провизоры-аналитики проводят полный хими-

ческий контроль качества предложенных лекарственных форм. На основа-

нии проведенного анализа выдается заключение о качестве ЛФ. Выполнен-

ное задание оформляется в виде протокола. После выполнения всех заданий

проходит совещание каждой экспертной группы. Затем после обсуждения

полученных результатов оформляется акт экспертизы (образец прилагает-

ся), в котором проводятся результаты работы экспертов. Оба акта эксперти-

145

зы оглашает председатель комиссии. Правильно проведенный анализ одной

лекарственной формы оценивается в 5 баллов.

После оглашения актов экспертизы преподаватель проводит обсужде-

ние полученных результатов с помощью контрольных вопросов.

АКТ ЭКСПЕРТИЗЫ

Наименование лекарственного средства ____________________________

Серия _______________________________________________

Организация изготовитель ________________________________________

Заказчик ______________________________________________________

Дата изготовления ______________________________________________

Наименование показа-

телей качества

Требования к качеству Результаты анализа

Описание


Количественное опре-

деление

Заключение:

Дата анализа:

Члены экспертной комиссии:

Председатель экспертной комиссии:

Тема 21.

ЛЕКАРСТВЕННЫЕ СРЕДСТВА, ПРОИЗВОДНЫЕ СУЛЬФОНИЛ-МОЧЕВИНЫ И БИГУАНИДИНОВ


Замещенные сульфонилмочевины: карбутамид (букарбан), глибенкламид (манинил), глипизид (минидиаб), гликвидон (глюренорм), гликлазид (пре-диан);

146

Бигуаниды: метформин


Контроль качества лекарственных средств, содержащих производные сульфонилмочевины

Цель работы. Освоить методы контроля качества лекарственных средств, содержащих производные сульфонилмочевины

Задание 1. Провести качественный и количественный анализ табле-ток глибенкламида по 0,005 г.

Таблетки глибенкламида 0,005

Подлинность. 1. УФ-спектр раствора, приготовленного для опреде-

ления однородности дозирования, в области длин волн от 260 до 350 нм

должен быть идентичен УФ-спектру раствора рабочего стандартного образ-

ца (РСО) глибенкламида.

Количественное определение.

Около 0,13 г (точная навеска) порошка растертых таблеток поме-

щают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 20 мл спирта

96 %, перемешивают в течение 10 мин при нагревании до 50°С, охлаж-

дают, доводят объем раствора тем же спиртом до метки, перемешивают и

фильтруют через бумажный фильтр, отбрасывая первые 20 мл фильтрата.

Измеряют оптическую плотность фильтрата на спектрофотометре в

максимуме поглощения при длине волны 300±2 нм в кювете с толщиной

слоя 10 мм.

В качестве раствора сравнения используют спирт 96 %.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора РСО гли-

бенкламида.

Содержание глибенкламида в одной таблетке должно быть от 0,0045

до 0,0055 г, считая на среднюю массу одной таблетки.

147

Тема 22.

ПРОИЗВОДНЫЕ БЕНЗОЛСУЛЬФОХЛОРАМИДА И АМИДА ХЛОР-

БЕНЗОЛСУЛЬФОНОВОЙ КИСЛОТЫ И БЕНЗОТИАДИАЗИНА

ЛЕКАРСТВЕННЫЕ ВЕЩЕСТВА, ПРЕДЛОЖЕННЫЕ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ:

Производные амида бензолсульфоновой кислоты: гидрохлоротиазид (дих-

лтиазид, гипотиазид), фуросемид, буметанид (буфенокс);

Производные бензолсульфохлорамида: хлорамин Б, галазон (пантоцид)


Контроль качества лекарственных средств, производных бензол-

сульфохлорамида и амида хлорбензолсульфоновой кислоты


средств, производных бензолсульфохлорамида и амида хлорбензолсульфо-

новой кислоты.

Задание 1. Напишите структурные формулы, русские и латинские на-

звания лекарственных средств группы, охарактеризуйте их физические

свойства, растворимость в различных растворителях. Ответ оформить в ви-

де таблицы.

Задание 2. Определить подлинность и количественное содержание

буфенокса в субстанции, результат оформить в виде паспорта аналитиче-

ского контроля.

3.1. Провести реакции подлинности на буфенокс

а) Методика. 0,03 г препарата растворяют в 10 мл этанола 95 %; появ-

ляется фиолетовая флуоресценция.

б) Методика. 0,02 г препарата нагревают с 1 мл кислоты азотной кон-

центрированной на кипящей водяной бане в течение 2 мин; появляется ко-

ричневато-красное окрашивание.

148

в) Снять УФ - спектр поглощения 0,002 % раствор препарата в смеси

95 % этанол – 0,1М HCl (1:1) в области от 250 до 400 нм.

Спектр препарата должен иметь максимум поглощения при 267 нм

±2 нм и 343 нм ±2 нм.

3.2. Провести количественное определение буфенокса в субстанции

алкалиметрическим титрованием

Методика. Около 0,5 г препарата (точная навеска) растворяют в 20 мл

ацетона, прибавляют 10 мл воды, 0,1 мл индикатора бромтимолового сине-

го 2 и титруют 0,1М раствором натра едкого до синего окрашивания.


1 мл 0,1М раствора натра едкого соответствует 0,03644 г С7Н20N2O5S,

которого в препарате должно быть не менее 99,0 %.

Задание 3. Выполнить количественное определение фуросемида в

растворе для инъекций.

Методика. 2 мл препарата помещают в мерную колбу вместимостью

100 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. 10 мл

раствора помещают в мерную колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 25

мл раствора натра едкого 0,1М, доводят объем раствора водой до метки и

перемешивают. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на

спектрофотометре при длине волны 271 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.

Одновременно проводят определение оптической плотности раствора рабо-

чего стандартного образца (РСО) фуросемида. В качестве раствора сравне-

ния используют раствор натра едкого 0,01М.

Содержание С12Н11ClN2O5S (фуросемид) в 1 мл препарата должно

быть от 0,0090 до 0,011 г.

Примечание. Приготовление раствора РСО фуросемида. 0,08 г (точ-

ная навеска) фуросемида помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл,

прибавляют 80 мл раствора натра едкого 0,1М, доводят объем до метки и

149

перемешивают. 1 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вме-

стимостью 100 мл, прибавляют 9 мл раствора натра едкого 0,1М, доводят

объем раствора водой до метки и перемешивают.1 мл раствора РСО содер-

жит 0,000008 г фуросемида. Срок годности раствора 1 сутки.

Задание 4. Выполнить качественный анализ и количественное опре-

деление фуросемида в таблетка «Фуросемид» по 40 мг.

Подлинность.

1. Спектр поглощения раствора вещества, приготовленного для коли-

чественного определения в области от 200 до 300 нм имеет максимумы по-

глощения при 271±2нм.


Методика. 0,02 г (т.н.) препарата в пересчете на среднюю массу одной

таблетки помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем

раствора водой до метки и перемешивают. 10 мл фильтрата помещают в

мерную колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 25 мл раствора натра ед-

кого 0,1М, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Изме-

ряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре

при длине волны 271 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. Одновременно

проводят определение оптической плотности раствора рабочего стандарт-

ного образца (РСО) фуросемида. В качестве раствора сравнения используют

раствор натра едкого 0,01М.

Содержание С12Н11ClN2O5S (фуросемид) в 1 мл препарата должно

быть от

0,0090 до 0,011 г.

Примечание. Приготовление раствора РСО фуросемида. 0,08 г (точ-

ная навеска) фуросемида помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл,

прибавляют 80 мл раствора натра едкого 0,1М, доводят объем до метки и

перемешивают. 1 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вме-

150

стимостью 100 мл, прибавляют 9 мл раствора натра едкого 0,1М, доводят

объем раствора водой до метки и перемешивают.1 мл раствора РСО содер-

жит 0,000008 г фуросемида. Срок годности раствора 1 сутки.

УЧЕБНАЯ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКАЯ РАБОТА ( УИРС )

Анализ инъекционной лекарственной формы, содержащей

производные амида о-хлорбензолсульфоновой кислоты

Цель работы. Приобрести умения анализа и освоить способы расчета со-

держания действующего вещества в растворах для инъекций. Результаты

испытаний оформить в виде паспорта аналитического контроля.

Объект исследования: Раствор фуросемида 1 % для инъекций (ФС 42-3152

95).

Состав лекарственной формы и некоторые характеристики качества приве-

дены в таблице 20.

Таблица 20.

Некоторые характеристики качества раствора фуросемида 1 % для

инъекций

Состав Описание Напол-няемость (количе-ство ам-пул для провер-ки)

Допус-тимый объём, мл

Цвет-ность

рН препа-рата

Фуросемида -10,0г (ФС 42-2979-93 Р-ра натра едкого 1М-32 мл Натрия хлорида -7,5г Воды для инъекций до 1л.

Бесцвет-ная про-зрачная жидкость

По 2 мл (20 шт)

2,0-2,15 Окраска препара-та не должна быть ин-тенсив-нее эта-лона 7б

8,5-9,8

151

Задание 1. Определить цветность раствора для инъекций.

Провести испытание согласно ОФС «Определение окраски жидкости» (ГФ

XIII).

Полученные данные сравнить с данными нормативной документации

(табл.20).

Задание 2. Провести проверку наполняемости ампул (определение номи-

нального объема) согласно ОФС «Инъекционные лекарственные формы»

ГФ XIII).

Объем инъекционных растворов в сосудах должен быть больше но-

минального. Объем инъекционного раствора в сосудах вместимостью до 50

мл проверяют калиброванным шприцем, сосудов вместимостью 50 мл и бо-

лее – калиброванным цилиндром при температуре 200С.

Объем заполнения инъекционного раствора в сосудах зависит от вяз-

кости (невязкие и вязкие растворы) и номинального объема. Количество со-

судов для контроля заполнения зависит от номинального объема.

Провести измерения объема и результаты сравнить с НД (табл.20).

Задание 3. Установить рН раствора потенциометрически.

Испытание провести согласно ОФС «Определение рН» (ГФ XIII).

Сделать заключение о соответствии данного показателя требованиям НД

(табл.20.).

Задание 4. Провести испытание на механические включения в инъек-

ционных лекарственных формах.

Данное испытание проводят в соответствии с действующей Ин-

струкцией РД 42-501-98

Под механическими включениями подразумеваются посторонние не-

растворимые частицы (кроме пузырьков газа), случайно присутствующие в

лекарственных средствах.

152

Контроль на механические включения должен проводиться в услови-

ях, исключающих возможность попадания посторонних частиц в контроли-

руемые образцы.

Контроль и подсчет количества частиц может проводиться 3 метода-

ми: визуальным, счетно-фотометрическим, микроскопическим.

При визуальном методе контроля инъекционных препаратов на меха-

нические включения помещение и выполнение анализа защищают от пря-

мого попадания солнечного света. Рабочее место контролера оснащают

столом по ГОСТ 12.2.032-78 и источником освещения.

Визуальный контроль инъекционных препаратов на механические

включения проводится контролером невооруженным глазом на черном и

белом фонах. Зона контроля при просмотре освещается электрической лам-

пой накаливания или лампой дневного света соответствующей мощности в

зависимости от степени окраски растворов, так, чтобы освещенность зоны

контроля составляла не менее 2000 лк.

Расстояние от глаз контролера до объекта контроля должно быть в

пределах 25-30 см. Угол между оптической осью просмотра и направлением

лучей света соответствует примерно 90. Глаза контролера должны быть за-

щищены от попадания света непосредственно от источника освещения. Ли-

ния зрения должна быть направлена несколько книзу при вертикальном по-

ложении головы.

Количество образцов, отбираемых от каждой серии инъекционного

лекарственного средства, зависит от его агрегатного состояния (раствор или

сухое вещество), объема инъекционного лекарственного средства (малого –

10 мл и менее, и большого – более 100 мл), объема серии и метода контроля

(разрушающий или неразрушающий).

Для проведения визуального контроля инъекционных препаратов

большого и малого объема, не требующих вскрытия и растворения (нераз-

153

рушающий контроль), поверхность ампул, флаконов, бутылок, шприц-

тюбиков и других емкостей из прозрачных полимерных материалов должна

быть чистой и сухой.

Для просмотра инъекционных препаратов берут в руки ампулу за ка-

пилляры, флаконы и бутылки за горловины, шприц-тюбики – за колпачки,

вносят их в зону контроля в положении «вверх донышком» и просматрива-

ют на черном и белом фонах, переводят их в положение «вниз донышком»

и вторично просматривают на черном и белом фонах.

Емкости с инъекционными препаратами, в которых обнаружены ви-

димые механические включения, считают забракованными и укладывают в

отдельную тару с отметкой «Брак».

Проверить на наличие механических включений не менее 10 ампул.

Задание 5. Определить подлинность препарата.

Ультрафиолетовый спектр раствора препарата, приготовленного для

количественного определения, в области от 220 до 300 нм имеет максиму-

мы поглощения при 228 нм 2нм и 271 нм ±2нм и минимум при 249 нм

±2нм.

Задание 6. Выполнить испытания на содержание примесей в препарате.

Испытание на первичные ароматические амины.

Методика. 1,2 мл препарата помещают в мерную колбу вместимостью

50 мл, прибавляют 7 мл воды, 5 мл диметилформамида, перемешивают и

охлаждают в ледяной бане. Не вынимая колбы из бани, прибавляют при пе-

ремешивании 2 мл 0,1М раствора кислоты хлористоводородной и 1 мл 0,1М

раствора натрия нитрита. Через 5 мин прибавляют 1 мл 2,5 % раствора ки-

слоты сульфаниловой и непрерывно перемешивают раствор в течение 3

мин. Затем колбу вынимают из бани, прибавляют 1 мл 0,5 % раствора N-(1-

нафтил)-этилендиамин дигидрохлорида, перемешивают, доводят объем рас-

твора диметилформамидом до метки и вновь перемешивают. Выдерживают

154

в защищенном от света месте в течение 30 мин. Измеряют оптическую

плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 530

нм в кювете с толщиной слоя 1 см.

В качестве раствора сравнения используют раствор, содержащий воду

вместо раствора препарата. Оптическая плотность не должна превышать

0,2.

Тема 23.

ПРАКТИЧЕСКИЕ НАВЫКИ

Цель работы: Показать в ходе анализа приобретенные практические

навыки в определении качества лекарственных препаратов.

В соответствии с полученной лекарственной формой аптечного изго-

товления провести предварительные расчеты, провести качественный и ко-

личественный анализ предложенной лекарственной формы и оформить в

виде протокола анализа.



анализа.

Натрия гидрокарбоната 0,2

Натрия тетрабората 0,1

Воды 10 мл


1. Гидрокарбонат-ион. К 3-5 каплям препарата прибавляют 2-3 капли

кислоты хлороводородной разведенной; выделяются пузырьки диоксида

углерода.

2. Борат-ион. 1 мл препарата помещают в фарфоровую чашку и выпа-

ривают. К сухому остатку прибавляют 5-6 капель кислоты серной концен-

155

трированной, 1-2 мл 96 % этанола и поджигают. Спиртовый раствор горит

пламенем зеленой каймой.


Определение суммы натрия гидрокарбоната и натрия тетрабората.

1 мл препарата помещают в колбу для титрования, прибавляют 2-3 мл

воды 1 каплю раствора метилового оранжевого и титруют 0,1 М раствором

кислоты хлороводородной до розового окрашивания.

Определение натрия тетрабората (по выделившейся кислоте борной).

Оттитрованную жидкость кипятят в течение 1 мин для удаления диоксида

углерода (долго кипятить нельзя, т.к. частично может улетучиться кислота

борная). Затем жидкость охлаждают под струей холодной воды, прибавля-

ют 3 мл глицерина, нейтрализованного по фенолфталеину, 5-7 капель рас-

твора фенолфталеина и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида (0,1

моль/л) до появления устойчивой в течение 30 сек розовой окраски. При-

бавляют еще 2-3 мл глицерина если окрашивание исчезает, снова титруют

до розовой окраски.

Задание 2. Выполнить качественный и количественный анализ мно-

гокомпонентной лекарственной формы аптечного изготовления содержа-

щей соли карбоновых кислот. Результаты испытаний оформить в виде про-

токола.

Димедрола 0,001 Dimedroli 0,001

Кальция глюконата 0,01 Calcii gluconatis 0,01

Сахара 0,1 Sacchari 0,1

Подлинность лекарственных веществ

А. Димедрол. К 0,01 г лекарственной формы, помещенной на часовое

стекло, прибавляют 2-3 капли концентрированной серной кислоты. Появля-

ется желтое окрашивание, исчезающее при добавлении 2-3 капель воды.

156

Б. Кальция глюконат. К 0,05 г лекарственной формы прибавляют 1 мл

разведенной уксусной кислоты, нагревают до кипения, охлаждают и добав-

ляют 3-5 капель оксалата аммония. Образуется белый осадок, нераствори-

мый в растворе гидроксида аммония и растворимый в разведенных мине-

ральных кислотах.

В. Сахар. К 0,005 г лекарственной формы прибавляют 1-2 мл разве-

денной соляной кислоты и несколько кристаллов резорцина. При кипячении

смеси в течение 1 мин появляется красное окрашивание.


А. Димедрол. К 0,5 г лекарственной формы прибавляют 5 мл воды, 2

мл разведенной азотной кислоты, 3 мл 0,02 н. раствора нитрата серебра, 1

мл раствора железоаммонийных квасцов. Избыток нитрата серебра оттит-

ровывают 0,02 н. раствором тиоцианата аммония до розового окрашивания.

Б. Кальция глюконат. К 0,2 г лекарственной формы добавляют 10 мл

воды при нагревании. После охлаждения прибавляют 10 мл аммиачного

буферного раствора, 0,02 г индикаторной смеси кислотного хром темно-

синего и титруют 0,05 М раствором трилона Б до сине-фиолетового окра-

шивания.

В. Сахар. Определяют рефрактометрическим методом. Для этого к 0,2

г лекарственной формы добавляют 10 мл воды при нагревании; 1 каплю по-

лученного раствора лекарственной формы наносят на призму рефрактомет-

ра и определяют показатель преломления.

фактор показателя преломления раствора кальция глюконата -

0,00216;

фактор показателя преломления раствора сахарозы - 0,00143;


ственной формы. Результаты испытаний оформить в виде протокола

157

Кислоты аскорбиновой 0,1 Acidi ascorbinici 0,1

Глюкозы 0,5 Glucosi 0,5


1. Кислота аскорбиновая. 1. К 0,01 г порошка прибавляют 2-3 капли

воды, по 1-2 капли гексацианоферрата (III) калия и железа (III) хлорида.

Появляется синее окрашивание.

2. К 0,01 г порошка прибавляют 3-5 капель воды и 2-3 капли раствора

серебра нитрата. Выделяется металлическое серебро в виде серого осадка.

Глюкоза. 3. К 0,01 г порошка прибавляют 0,01 г тимола, 5-6 капель

концентрированной кислоты серной и 1-2 капли воды. Появляется фиолето-

во-красное окрашивание.


Кислота аскорбиновая. 0,05 г порошка растворяют в 1-2 мл воды и

титруют 0,1 н. раствором натрия гидроксида до розового окрашивания (ин-

дикатор — фенолфталеин).

Глюкоза. Растворяют 0,3 г порошка в 1-1,5 мл воды, объем доводят

водой до 2 мл и определяют показатели преломления раствора (n) и воды

(n0) при 200С.

фактор показателя преломления раствора кислоты аскорбиновой -

0,00160;

фактор показателя преломления раствора глюкозы безводной -

0,00142;

1,11- коэффициент пересчета на водную глюкозу при содержании 11

% влаги в препарате;


ственной формы, результаты оформить в виде протокола.

Кислоты глутаминовой Acidi glutaminici

158

Сахара по 0,2 Sacchari ana 0,2


Глутаминовая кислота. 1. 0,03 г порошка растворяют при нагревании

в 1 мл воды, прибавляют 3-5 капель 0,25 % раствора нингидрина и нагрева-

ют; появляется сине-фиолетовое окрашивание.

2. К 0,01 г порошка прибавляют 1-2 мл разведенной кислоты хлоро-

водородной, несколько кристаллов резорцина и кипятят в течение 1 мин;



0,05 г порошка растворяют при нагревании в 1-2 мл воды. К охлаж-

денному раствору прибавляют 1-2 капли бромтимолового синего и титруют

0,1 н. раствором натрия гидроксида до голубовато-зеленого окрашивания.

159

ЛИТЕРАТУРА

Основная

1. Беликов В.Г. Фармацевтическая химия : учебное пособие по фарм.

химии для студ. фарм. вузов и фак. / В.Г. Беликов. в 2 ч. : – Пятигорск: Пя-

тигорская гос. фарм. акад., 2008. – 622 c.

2. Фармацевтическая химия : учебник / под ред. Г.В. Раменской. – М.:

БИНОМ. Лаборатория знаний, 2015. – 467с.

3.Фармацевтическая химия : учебное пособие для студ. вузов, обуч.

по специальности 040500 - Фармация / Э.Н. Аксенова [и др.] ; под ред.

А.П. Арзамасцева .— 2-е изд., испр. — М. : ГЭОТАР-Медиа, 2005. – 635 с.

4. http://www.rosminzdrav.ru/ministry/61/11/materialy-po-deyatelnosti-de-

paratamenta/stranitsa-856/spisok-obschih-farmakopeynyh-statey

Дополнительная

5. Государственная фармакопея Российской Федерации XIII издания:

в 3 т. М.: Министерство здравоохранения Российской Федерации, 2015. -

Режим доступа: http://www.femb.ru/feml.

6. Лабораторные работы по фармацевтической химии : учеб. пособие /

В.Г. Беликов и др. – Пятигорск, 2003. – 341 с.

7. Руководство к лабораторным занятиям по фармацевтической хи-

мии: практикум / под ред. Г.В. Раменской. – М.: Лаборатория знаний,

2016. – 352с.

8. Сливкин А.И. Контроль качества экстемпоральных лекарственных

форм : учеб. пособие / А.И. Сливкин, Н.П. Садчикова. – Воронеж : Изд-во

Воронеж. гос. ун-та, 2003. – 260 с.

9. Сливкин А.И. Физико-химические и биологические методы оценки

каче-ства лекарственных средств : учеб. пособие / А.И. Сливкин,

В.Ф. Селеменев, Е.А. Суховерхова. – Воронеж: Изд-во Воронеж. гос. ун-та,

1999. – 366 с.

160

10. Экспресс-анализ с целью выявления фальсифицированных лекар-

ствен-ных средств: Фторхинолоны и цефалоспорины Практическое руково-

дство / А.П. Арзамасцев и др. – М.: Русский врач, 2003. – 130 с.

11. Типовые тестовые задания для итоговой государственной аттеста-

ции вы-пускников высших медицинских и фармацевтических учебных за-

ведений по специальности 040500 "Фармация" / cост. А.П. Арзамасцев и др.

– М. : ВУНМЦ, 2004. – 202 с.117

12. Типовые ситуационные задачи для итоговой государственной ат-

тестации выпускников медицинских и фармацевтических вузов по специ-

альности 040500 "Фармация" / cост. А.П. Арзамасцев и др. – М.: ГОУ

ВУНМЦ , 2004. – 139 с.

13. Сливкин А.И. Функциональный анализ органических лекарствен-

ных веществ : учебное пособие для студ., обуч. по специальности 060108

"Фармация" / А.И. Сливкин, Н.П. Садчикова ; Воронеж. гос. ун-т; под ред.

А.П. Арзамасцева .– Воронеж : Воронеж. гос. ун-т, 2007 .– 426 с. : ил., табл.

14. Международная фармакопея : Спецификации для контроля каче-

ства фармацевтических препаратов / пер. с англ. А.П. Арзамасцева; под ред.

М.Д. Машковского. – М. : Медицина, 1969. – 982 с.

15. European Pharmacopoeia : Supplement, 2001 : Publ. in accordance

with the Convention on the Elaboration of a European Pharmacopoeia (European

Treaty Se-ries No. 50. – 3rd ed. – Strasbourg: Council of Europe, 2000. – XIV.

16. European Pharmacopoeia, 1997 : Publ. in accordance with the Conven-

tion on the Elaboration of a European Pharmacopoeia (European Treaty Series

No) – 3rd ed. – Strasbourg : Council of Europe, 1996. – XVIII.

17. The United States Pharmacopoeia (электронный ресурс). Version

4.00. – United States Pharmacopoeial Convention, 2000. – 1 электрон. опт. диск

(CD-ROM).

161

ПРИЛОЖЕНИЯ

Приложение 1

Протокол

результатов анализа лекарственного вещества

(латинское и русское названия)

Структурная формула Молекулярная масса

Время начала анализа

1. Свойства лекарственного вещества.

Таблица 1

Результаты определения физических и физико-химических

свойств лекарственных веществ

Лекарствен-ное вещество (латинское и русское на-звание, сино-нимы)

Формула и хими-ческое название

Внешний вид

Цвет Запах Вкус Растворимость в различных растворителях

2. Испытания на подлинность.

Таблица 2

Результаты определения подлинности лекарственных средств

Исследуемое ле-карственное средство

Используемые реагенты

Результаты ис-пытаний

Уравнения реак-ций

3. Испытания на чистоту.

4. Количественное определение.

162

Таблица 3

Результаты количественного определения лекарственного вещества химическими методами

Масса на-вески, взятая для анализа, г (аликвота, мл)

Молярная масса эк-вивален-та, г/моль

Титр, г/мл Объём тит-ранта, мл

Найдено, % или г

ТребованияФС

Таблица 4

Результаты количественного определения

лекарственного вещества физико-химическими методами

Масса навески, взятая для анали-за,г (аликвота ,мл)

Результаты изме-рений физико-химических ха-рактепистик

Найдено,% или г Требования ФС

5. Заключение.

Время окончания анализа

Дата

Подпись студента

163

Приложение 2

Аналитический паспорт

Наименование ______________________________________________

Серия ______________________________________________________

Испытания проведены по НД __________________________________

Заключение:

Показатель каче-ства по НД

Требования к ка-честву по НД (метод анализа)

Результаты ана-лиза

Химические ре-акции. Предвари-тельные расчёты

1.Описание 2.Подлинность 3.Испытания на Чистоту Хлориды и т.д. 4.Количественное определение 5.Упаковка 6.Маркировка 7.Срок годности

Дата анализа:

Анализ провел:

164

У ч е б н о е и з д а н и е

Сливкин Алексей Иванович, Карлов Павел Михайлович,

Чистякова Анна Сергеевна, Логвинова Елизавета Евгеньевна,

Тринеева Ольга Валерьевна

ПРАКТИКУМ

ПО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ ХИМИИ

Учебное пособие

Издано в авторской редакции

Подписано в печать 03.04.2017. Формат 60×84/16 Уч.-изд. л. 8,0. Усл. печ. л. 9,5. Заказ 17

Издательский дом ВГУ

394018, г. Воронеж, пл. им. Ленина, 10

ПРАКТИКУМ ПО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ · 2020. 9. 30. ·...

Documents