מיקרוביולוגיה

מטרות המעבדה הכרת שיטות לספירת חיידקים. .1

לצביעת חיידקים. ההכרת שיט .2

עקום גידול של חיידקים.מעקב אחר .3

.E.coliלימוד השפעת גורמים שונים על קצב גידול חיידקי .4

במהלך המעבדה נבצע את הדברים הבאים:

,גידול חיידקיE. coli מזןB :בשלוש טמפרטורות שונותC°37, Co55 במצע עני, בתנאי מליחות וטמפרטורת החדר ,

דקות לקריאת 20בזמן הגידול תילקחנה דוגמאות כל שונים, בתנאים אנארוביים ובנוכחות אנטיביוטיקות שונות.

הבליעה.

חיה באמצעות מיהולים וזריעה לצלחות הביצוע ספיר.

הסבר כללי

וטמפרטורת החדר. לכל קבוצה על C°37 ,Co55בטמפרטורה שונה : אמבטי טלטול שכל אחד מהם 3בחדר המעבדה ישנם

בצבע שונה. מסומנות המבחנות במדבקותמצע לגידול חיידקים. לכל קבוצה ןשבתוכ מבחנות 5 ןהשולחן ישנ

.A ,B ,C ,D ,Eבאותיות ותמסומנ המבחנות

ונות.בשלוש טמפרטורות ש E. coliלגידול חיידקי ות, מיועדA ,B ,C המבחנות

.Co55גודל בטמפ' של ת C רטורת החדר ומבחנה גודל בטמפת B מבחנה ,C°37בטמפ' של גודל ת A מבחנה

חודי לה על פי הפירוט הבא:י, כל קבוצה תבצע ניסוי י E-ו D במבחנות

במצע עני. E.coliתבדוק גידול 'קבוצה א

בריכוזי מלח גבוהים. E.coliתבדוק גידול ' קבוצה ב

רגישים ועמידים לאמפיצילין בנוכחות אמפיצילין. E.coliתשווה גידול קבוצה ג'

בנוכחות סטרפטומיצין ובנוכחות כלורמפניקול. E.coliתבדוק גידול קבוצה ד'

בתנאים של מיעוט חמצן. E.coliתבדוק גידול קבוצה ה'

עליך לבדוק מהי קבוצתך, ולנהוג בהתאם להוראות לקבוצה זו.

מהלך העבודה:

למבחנות. החיידקים זריעת

הבליעה של החיידקים בתחילת הניסוי )זמן אפס(.קריאת

.גידול החיידקים באמבט מטלטל

120או 100דקות עד זמן 20מדידת הבליעה תתבצע, כל .

דקות תתבצע הסתכלות מיקרוסקופית בתאים אאוקריוטים ופרוקריוטים. 20אחרי מדידת זמן

לספירה חיה. ותדוגמא ילקחו 80וזמן 40ת זמן וחרי מדידא

o יםמיהול תהדוגמא תעבור סדר .

o 6-10, 5-10, 4-10זריעת דוגמאות המיהול לשלוש צלחות פטרי במיהול .

o שעות לפחות לאחר הזריעה. 24ספירת המושבות תתבצע

ירה חיה.. ספ3. מיקרוסקופיה.2. עקומי גידול. 1מטלות: 3לסיכום עליך לבצע

זכור את צבע מכסי המבחנות! –קבוצה א'

Eמבחנה Dמבחנה

E.coli במצע עני E.coli במצע עני בתוספת גלוקוז

זריעת החיידקים במבחנות:

חיידקים ממבחנת החיידקים. E ,200μl-, וA ,B ,C ,Dהוסף למבחנות .1

ערבב את תכולת המבחנות בוורטקס. .2

: 0מדידת זמן

.nm600קטרופוטומטר לאורך גל כוון את הספ .3

הנמצאת במעמד המבחנות. LBאפס את הספקטרופוטומטר בעזרת המבחנה המכילה מצע .4

. רשום את הקריאות בטבלה שבמחשב. A,C,Bקרא את הבליעה במבחנות .5

.D,Eאפס שנית עם מצע דיוויס, וקרא הבליעה של החיידקים במבחנות .6

גידול החיידקים:

מטלטל בטמפרטורה המתאימה: הכנס כל מבחנה לאמבט .7

.Co37לאמבט בטמפרטורה של E-ו A ,Dמבחנות

.Co25לאמבט בטמפרטורה של Bמבחנה

. Co55לאמבט בטמפרטורה של Cמבחנה

וודא שהפעלת את הטלטול באמבטים!

דקות והפעל אותו. 20-העצר )סטופר( ל-כוון את שעון .8

.13ההוראות בעמוד בזמן הנותר הסתכל בחיידקים במיקרוסקופ על פי .9

דקות: 20מדידת זמן

עם הישמע צלצול השעון, הוצא את המבחנות מהאמבטים. .10

נגב היטב את המבחנות ממי האמבט. .11

ועם מצע דיוויס(. LB. )שימו לב לאפס עם קרא את הבליעה במבחנות הניסוי .12

רשום את הקריאות בטבלה שבמחשב. .13

לת את הטלטול! החזר כל מבחנה לאמבט המתאים. וודא שהפע .14

דקות. 20-הפעל את השעון ל .15

דקות: 40מדידת זמן

עם הישמע צלצול השעון, הוצא את המבחנות מהאמבטים. .16

נגב היטב את המבחנות ממי האמבט. .17

ועם מצע דיוויס(. LBקרא את הבליעה במבחנות הניסוי. )שימו לב לאפס עם .18

רשום את הקריאות בטבלה שבמחשב. .19

פירה חיה:לקיחת דגימה לס

".a1רשום על מבחנת אפנדורף " .20

. צהוב(/)סגול μl100הלבש טיפ לבן על הפיפטור של .21

. מבחנה זו תשמש אותך לביצוע מיהול וזריעה לצורך 1aלמבחנה והכנס את הנוזל Aממבחנה (מ"ל 0.1) μl100שאב .22

ספירה חיה.

זרוק את הטיפ. .23

ל! החזר את המבחנות לאמבטים. וודא שהפעלת את הטלטו .24

דקות. 20-הפעל את השעון ל .25

.14בזמן הנותר בצע מיהולים וזריעות על פי ההוראות בעמוד .26

דקות: 60מדידת זמן

.10-15חזור על שלבים .27

דקות: 80מדידת זמן

.10-15חזור על שלבים .28

לקיחת דגימה לספירה חיה:

".1bרשום על מבחנת אפנדורף " .29

צהוב(./ל)סגו μl100הלבש טיפ לבן על הפיפטור של .30

. מבחנה זו תשמש אותך לביצוע מיהול וזריעה לצורך 1bלמבחנה והכנס את הנוזל Aממבחנה מ"לμl100 (0.1 ,)שאב .31

ספירה חיה.

זרוק את הטיפ. .32

החזר את המבחנות לאמבטים. וודא שהפעלת את הטלטול! .33

דקות. 20-הפעל את השעון ל .34

.14עמוד בזמן הנותר בצע מיהולים וזריעות על פי ההוראות ב .35

דקות: 100מדידת זמן

.10-15חזור על שלבים .1

בזמן שנותר עד לקריאה הבאה נקה וסדר את שולחן העבודה. .2

דקות: 120מדידת זמן

.10-15חזור על שלבים .1

זכור את צבע מכסי המבחנות! –קבוצה ב'

Eמבחנה Dמבחנה

E.coli במצע המכילNaCl 3% E.coli 6%במצע המכיל NaCl

ריעת החיידקים במבחנות:ז

חיידקים ממבחנת החיידקים. E ,200μl-, וA ,B ,C ,Dהוסף למבחנות .1

ערבב את תכולת המבחנות בוורטקס. .2

: 0מדידת זמן

.nm600כוון את הספקטרופוטומטר לאורך גל .3

הנמצאת במעמד המבחנות. LBאפס את הספקטרופוטומטר בעזרת המבחנה המכילה מצע .4

מבחנות הניסוי . רשום את הקריאות בטבלה שבמחשב.קרא את הבליעה ב .5

גידול החיידקים:

הכנס כל מבחנה לאמבט מטלטל בטמפרטורה המתאימה: .6

.Co37לאמבט בטמפרטורה של E-ו A ,Dמבחנות

.Co25לאמבט בטמפרטורה של Bמבחנה

. Co55לאמבט בטמפרטורה של Cמבחנה

וודא שהפעלת את הטלטול באמבטים!

דקות והפעל אותו. 20-העצר )סטופר( ל-שעוןכוון את .7

.13בזמן הנותר הסתכל בחיידקים במיקרוסקופ על פי ההוראות בעמוד .8

דקות: 20מדידת זמן

עם הישמע צלצול השעון, הוצא את המבחנות מהאמבטים. .9

נגב היטב את המבחנות ממי האמבט. .10

קרא את הבליעה במבחנות הניסוי. .11

מחשב.רשום את הקריאות בטבלה שב .12

החזר כל מבחנה לאמבט המתאים. וודא שהפעלת את הטלטול! .13

דקות. 20-הפעל את השעון ל .14

דקות: 40מדידת זמן

עם הישמע צלצול השעון, הוצא את המבחנות מהאמבטים. .15

נגב היטב את המבחנות ממי האמבט. .16

קרא את הבליעה במבחנות הניסוי. .17

רשום את הקריאות בטבלה שבמחשב. .18

לספירה חיה: לקיחת דגימה

".a1רשום על מבחנת אפנדורף " .19

צהוב(./)סגול μl100הלבש טיפ לבן על הפיפטור של .20

. מבחנה זו תשמש אותך לביצוע מיהול וזריעה לצורך 1aלמבחנה והכנס את הנוזל Aממבחנה מ"לμl100 (0.1 )שאב .21

ספירה חיה.

זרוק את הטיפ. .22

לטול! החזר את המבחנות לאמבטים. וודא שהפעלת את הט .23

דקות. 20-הפעל את השעון ל .24

.14בזמן הנותר בצע מיהולים וזריעות על פי ההוראות בעמוד .25

דקות: 60מדידת זמן

.14 – 9חזור על שלבים .26

דקות: 80מדידת זמן

.14– 9חזור על שלבים .27

לקיחת דגימה לספירה חיה:

".1bרשום על מבחנת אפנדורף " .28

צהוב(./)סגול μl100הלבש טיפ לבן על הפיפטור של .29

. מבחנה זו תשמש אותך לביצוע מיהול וזריעה לצורך 1bלמבחנה והכנס את הנוזל Aממבחנה מ"לμl100 (0.1 )שאב .30

ספירה חיה.

זרוק את הטיפ. .31

החזר את המבחנות לאמבטים. וודא שהפעלת את הטלטול! .32

דקות. 20-הפעל את השעון ל .33

.14ות בעמוד בזמן הנותר בצע מיהולים וזריעות על פי ההורא .34

דקות: 100מדידת זמן

.14 – 9חזור על שלבים .35

בזמן שנותר עד לקריאה הבאה נקה וסדר את שולחן העבודה. .36

דקות: 120מדידת זמן

.14 – 9חזור על שלבים .37

זכור את צבע מכסי המבחנות! –קבוצה ג'

Eמבחנה Dמבחנה

E.coli במצע המכיל אמפיצילין E.coli ין במצע המכיל אמפיציליןעמידים לאמפיציל

זריעת החיידקים במבחנות:

. "E.coli"חיידקים ממבחנת החיידקים המסומנת D ,200μl-, וA ,B ,Cהוסף למבחנות .1

חיידקים ממבחנת החיידקים המסומנת "עמידים". 200μlהוסף Eלמבחנה

ערבב את תכולת המבחנות בוורטקס. .2

: 0מדידת זמן

.nm600ר לאורך גל כוון את הספקטרופוטומט .3

הנמצאת במעמד המבחנות. LBאפס את הספקטרופוטומטר בעזרת המבחנה המכילה מצע .4

קרא את הבליעה במבחנות הניסוי . רשום את הקריאות בטבלה שבמחשב. .5

גידול החיידקים:

הכנס כל מבחנה לאמבט מטלטל בטמפרטורה המתאימה: .6

.Co37רה של לאמבט מטלטל בטמפרטו E-ו A ,Dהכנס את מבחנות

.Co25לאמבט מטלטל בטמפרטורה של Bהכנס את מבחנה

.Co55לאמבט מטלטל בטמפרטורה של Cהכנס את מבחנה

דקות והפעל אותו. 20-העצר )סטופר( ל-כוון את שעון .7

.13בזמן הנותר הסתכל בחיידקים במיקרוסקופ על פי ההוראות בעמוד .8

דקות: 20מדידת זמן

הוצא את המבחנות מהאמבטים. עם הישמע צלצול השעון, .9

נגב היטב את המבחנות ממי האמבט. .10

קרא את הבליעה במבחנות הניסוי. .11

רשום את הקריאות בטבלה שבמחשב. .12

החזר את המבחנות לאמבטים . וודא שהפעלת את הטלטול! .13

דקות. 20-הפעל את השעון ל .14

דקות: 40מדידת זמן

מבטים.עם הישמע צלצול השעון, הוצא את המבחנות מהא .15

נגב היטב את המבחנות ממי האמבט. .16

קרא את הבליעה במבחנות הניסוי. .17

רשום את הקריאות בטבלה שבמחשב. .18

לקיחת דגימה לספירה חיה:

".1aרשום על מבחנת אפנדורף " .19

צהוב(./)סגול μl100הלבש טיפ לבן על הפיפטור של .20

נה זו תשמש אותך לביצוע מיהול וזריעה לצורך . מבח1aלמבחנה והכנס את הנוזל Dממבחנה מ"לμl100 (0.1 )שאב .21

ספירה חיה.

זרוק את הטיפ. .22

הוספת אנטיביוטיקה:

אמפיצילין. E μl100-ו Dהוסף למבחנות .23

החזר את המבחנות לאמבטים. וודא שהפעלת את הטלטול! .24

דקות. 20-הפעל את השעון ל .25

.14בזמן הנותר בצע מיהולים וזריעות על פי ההוראות בעמוד .26

דקות: 60דידת זמן מ

.14 – 9חזור על שלבים .27

דקות: 80מדידת זמן

.14– 9חזור על שלבים .28

לקיחת דגימה לספירה חיה:

".1bרשום על מבחנת אפנדורף " .29

צהוב(./)סגול μl100הלבש טיפ לבן על הפיפטור של .30

יצוע מיהול וזריעה לצורך . מבחנה זו תשמש אותך לב1bלמבחנה והכנס את הנוזל Dממבחנה מ"לμl100 (0.1 )שאב .31

ספירה חיה.

זרוק את הטיפ. .32

החזר את המבחנות לאמבטים. וודא שהפעלת את הטלטול! .33

דקות. 20-הפעל את השעון ל .34

.14בזמן הנותר בצע מיהולים וזריעות על פי ההוראות בעמוד .35

דקות: 100מדידת זמן

.14 – 9חזור על שלבים .36

את שולחן העבודה. בזמן שנותר עד לקריאה הבאה נקה וסדר .37

דקות: 120מדידת זמן

.14 – 9חזור על שלבים .38

זכור את צבע מכסי המבחנות! –קבוצה ד'

Eמבחנה Dמבחנה

E.coli במצע המכיל סטרפטומיצין E.coli במצע המכיל כלורמפניקול

זריעת החיידקים במבחנות:

חיידקים ממבחנת החיידקים. E ,200μl-, וA ,B ,C ,Dהוסף למבחנות .1

ערבב את תכולת המבחנות בוורטקס. .2

:0מדידת זמן

.nm600כוון את הספקטרופוטומטר לאורך גל .3

הנמצאת במעמד המבחנות. LBאפס את הספקטרופוטומטר בעזרת המבחנה המכילה מצע .4

קרא את הבליעה במבחנות הניסוי . רשום את הקריאות בטבלה שבמחשב. .5

ים:גידול החיידק

הכנס כל מבחנה לאמבט מטלטל בטמפרטורה המתאימה: .6

.Co37לאמבט מטלטל בטמפרטורה של E-ו A ,Dהכנס את מבחנות

.Co25לאמבט מטלטל בטמפרטורה של Bהכנס את מבחנה

.Co55לאמבט מטלטל בטמפרטורה של Cהכנס את מבחנה

דקות והפעל אותו. 20-העצר )סטופר( ל-כוון את שעון .7

.13הסתכל בחיידקים במיקרוסקופ על פי ההוראות בעמוד בזמן הנותר .8

דקות: 20מדידת זמן

עם הישמע צלצול השעון, הוצא את המבחנות מהאמבטים. .9

נגב היטב את המבחנות ממי האמבט. .10

קרא את הבליעה במבחנות הניסוי. .11

רשום את הקריאות בטבלה שבמחשב. .12

ול! החזר את המבחנות לאמבטים. וודא שהפעלת את הטלט .13

דקות. 20-הפעל את השעון ל .14

דקות: 40מדידת זמן

עם הישמע צלצול השעון, הוצא את המבחנות מהאמבט. .15

נגב היטב את המבחנות ממי האמבט. .16

קרא את הבליעה במבחנות הניסוי. .17

רשום את הקריאות בטבלה שבמחשב. .18

לקיחת דגימה לספירה חיה:

".1aרשום על מבחנת אפנדורף " .19

צהוב(./)סגול μl100ל הפיפטור של הלבש טיפ לבן ע .20

. מבחנה זו תשמש אותך לביצוע מיהול וזריעה לצורך 1aלמבחנה והכנס את הנוזל Dממבחנה מ"לμl100 (0.1 )שאב .21

ספירה חיה.

זרוק את הטיפ. .22

הוספת אנטיביוטיקות:

סטרפטומיצין. D μl100הוסף למבחנה .23

כלורמפניקול. E μl100הוסף למבחנה .24

חנות לאמבט. וודא שהפעלת את הטלטול! החזר את המב .25

דקות. 20-הפעל את השעון ל .26

.14בזמן הנותר בצע מיהולים וזריעות על פי ההוראות בעמוד .27

דקות: 60מדידת זמן

.14 – 9חזור על שלבים .28

דקות: 80מדידת זמן

.14- 9חזור על שלבים .29

לקיחת דגימה לספירה חיה:

".1bרשום על מבחנת אפנדורף " .30

צהוב(./)סגול μl100טיפ לבן על הפיפטור של הלבש .31

. מבחנה זו תשמש אותך לביצוע מיהול וזריעה לצורך 1bלמבחנה והכנס את הנוזל Dממבחנה מ"לμl100 (0.1 )שאב .32

ספירה חיה.

זרוק את הטיפ. .33

החזר את המבחנות לאמבט . וודא שהפעלת את הטלטול! .34

דקות. 20-הפעל את השעון ל .35

.14מיהולים וזריעות על פי ההוראות בעמוד בזמן הנותר בצע .36

דקות: 100מדידת זמן

.14 – 9חזור על שלבים .37

בזמן שנותר עד לקריאה הבאה נקה וסדר את שולחן העבודה. .38

דקות: 120מדידת זמן

.14 – 9חזור על שלבים .39

זכור את צבע מכסי המבחנות! –קבוצה ה'

Dמבחנה

E.coli בתנאים של מיעוט חמצן

זריעת החיידקים במבחנות:

חיידקים. 800μlהוסף Dחיידקים ממבחנת החיידקים. למבחנה C ,200μl-, וA ,Bהוסף למבחנות .1

אטום בעזרת נייר פאראפילם, וערבב על ידי הפיכתה Dבוורטקס. את מבחנה A-Cערבב את תכולת המבחנות .2

ה מכניסת אויר.בעדינות. השאר את נייר הפאראפילם על המבחנה לצורך אטימ

: 0מדידת זמן

.nm600כוון את הספקטרופוטומטר לאורך גל .3

הנמצאת במעמד המבחנות. LBאפס את הספקטרופוטומטר בעזרת המבחנה המכילה מצע .4

קרא את הבליעה במבחנות הניסוי. רשום את הקריאות בטבלה שבמחשב. .5

גידול החיידקים:

אימה:הכנס כל מבחנה לאמבט מטלטל בטמפרטורה המת .6

.Co37לאמבט מטלטל בטמפרטורה של Aהכנס את מבחנה

.Co25לאמבט מטלטל בטמפרטורה של Bהכנס את מבחנה

.Co55לאמבט מטלטל בטמפרטורה של Cהכנס את מבחנה

וודא שהפעלת את הטלטול באמבטים!

.Co37לאינקובטור בטמפרטורה של Dהכנס את מבחנה .7

קות והפעל אותו.ד 20-העצר )סטופר( ל-כוון את שעון .8

.13בזמן הנותר הסתכל בחיידקים במיקרוסקופ על פי ההוראות בעמוד .9

דקות: 20מדידת זמן

עם הישמע צלצול השעון, הוצא את המבחנות מהאמבטים ומהאינקובטור. .10

נגב היטב את המבחנות ממי האמבט. .11

קרא את הבליעה במבחנות הניסוי. .12

רשום את הקריאות בטבלה שבמחשב. .13

לאמבטים . וודא שהפעלת את הטלטול! A-Cאת מבחנות החזר .14

לאינקובטור. Dהחזר את מבחנה

דקות. 20-הפעל את השעון ל .15

דקות: 40מדידת זמן

עם הישמע צלצול השעון, הוצא את המבחנות מהאמבטים ומהאינקובטור. .16

נגב היטב את המבחנות ממי האמבט. .17

קרא את הבליעה במבחנות הניסוי. .18

יאות בטבלה שבמחשב.רשום את הקר .19

לקיחת דגימה לספירה חיה:

".1aרשום על מבחנת אפנדורף " .20

צהוב(./)סגול μl100הלבש טיפ לבן על הפיפטור של .21

. מבחנה זו תשמש אותך לביצוע מיהול 1aלמבחנה והכנס את הנוזל של קבוצה ד' Eממבחנה מ"לlμ100 (0.1 )שאב .22

וזריעה לצורך ספירה חיה.

זרוק את הטיפ. .23

לאמבטים . וודא שהפעלת את הטלטול! A-Cחזר את מבחנות ה .24

לאינקובטור. Dהחזר את מבחנה

דקות. 20-הפעל את השעון ל .25

.14בזמן הנותר בצע מיהולים וזריעות על פי ההוראות בעמוד .26

דקות: 60מדידת זמן

.15 – 10חזור על שלבים .27

דקות: 80מדידת זמן

.15 – 10חזור על שלבים .28

ה לספירה חיה:לקיחת דגימ

".1bרשום על מבחנת אפנדורף " .29

צהוב(./)סגול μl100הלבש טיפ לבן על הפיפטור של .30

. מבחנה זו תשמש אותך לביצוע מיהול 1bלמבחנה והכנס את הנוזל של קבוצה ד' Eממבחנה מ"לlμ100 (0.1 )שאב .31

וזריעה לצורך ספירה חיה.

זרוק את הטיפ. .32

וודא שהפעלת את הטלטול! לאמבטים . A-Cהחזר את מבחנות .33

לאינקובטור. Dהחזר את מבחנה

דקות. 20-הפעל את השעון ל .34

.14בזמן הנותר בצע מיהולים וזריעות על פי ההוראות בעמוד .35

דקות: 100מדידת זמן

.10-15חזור על שלבים .36

בזמן שנותר עד לקריאה הבאה נקה וסדר את שולחן העבודה. .37

דקות: 120מדידת זמן

.10-15לבים חזור על ש .38

תאי לחי –השוואת גודל: חיידקים

על השולחן תמצא קיסם עם צמר גפן בקצהו. הכנס את הקיסם לפיך וגרד בו את החלק הפנימי של הלחי. בדרך .א

זו תאסוף על הקיסם תאים מרירית הלחי הניתקים בקלות.

אגורות. 10מרח את החומר שאספת על מרכזה של זכוכית נושאת, בשטח שגודלו כמטבע של .ב

.אותו אזורעל גבי חיידקים הנח בעזרת פיפטת פסטר טיפה מתרבית .ג

טפטף טיפה של צבע על טיפת החיידקים. .ד

כסה בזכוכית מכסה. .ה

ספוג בעזרת נייר את עודפי הצבע שבשולי הזכוכית המכסה. .ו

לפני תחילת העבודה עם המיקרוסקופ וודא שהעדשה הקרובה לשולחן המיקרוסקופ היא זו של .ז

לה הקטנה ביותר )העדשה הקצרה ביותר(.ההגד

הנח את הזכוכית הנושאת עם הדגימה על שולחן המיקרוסקופ כשהיא אחוזה במסגרת המתכת. הדלק את .ח

מנורת המיקרוסקופ.

מבלי שהעדשה תיגע וקרב את שולחן המיקרוסקופ אל העדשה ככל האפשר –לא מלמעלה! –הסתכל מהצד .ט

.בזכוכית

סובב באיטיות את בורג ההכוונה הגסה כך שירחיק את שולחן המיקרוסקופ כלפי מטה, התבונן דרך העינית, ו .י

עד שתבחין בדגימה בצורה מטושטשת בתוך שדה הראיה. סובב עוד את הבורג, לאט, ונסה להגיע לתמונה החדה

ביותר האפשרית. סביר שבמצב זה לא ייראו תאים בבהירות רבה, או שהם ייראו קטנים מאד.

זכוכית כך שהתא שאותו ברצונך להגדיל עוד יהיה במרכז שדה הראיה.הזז את ה .יא

(. x10החלף את העדשה הקרובה לשולחן המיקרוסקופ לעדשה המגדילה יותר ) .יב

לאחר שהחלפת הגדלה, סובב לאט את בורג ההכוונה העדינה עד שתשיג הגדלה וחדות מירבית. .יג

הפתיחה של הצמצם. נסה להסיט אותו מעט, לפתיחה לעיתים אפשר לשפר את חדות הראיה על ידי שינוי מידת .יד

צרה או רחבה יותר, ועקוב אחר התוצאות.

הזז את הזכוכית כך שהתא שאותו ברצונך להגדיל עוד יהיה במרכז שדה הראיה. .טו

(. בעת שהנך מסובב את מתקן x40החלף את העדשה הקרובה לשולחן המיקרוסקופ לעדשה המגדילה יותר ) .טז

כדי לוודא שהעדשה אינה נוגעת בזכוכית. – לא מלמעלה! – העדשות, הסתכל מהצד

סובב לאט את בורג ההכוונה העדינה עד שתשיג הגדלה וחדות מירבית. .יז

.תאי הלחי או תאי החיידקים? נסו להעריך פי כמה –איזה תאים גדולים יותר

פח.בסיום העבודה כבה את מנורת המיקרוסקופ וזרוק את הזכוכית הנושאת ואת הקיסם ל

ספירה חיה )מיהולים וזריעות(

על מנת לקבל לפחות במיהול אחד , יםיש לבצע סדרת מיהול ואין דרך לדעת את מספרם, מכיוון שמספר החיידקים הוא רב

(.6-10פי מיליון!!! )ים צריך למהול בודד יםחיידקמספר חיידקים שניתן לספור על גבי צלחת הפטרי. על מנת לקבל

.b-ב aדקות, החלף כל 80דקות. לזריעה של זמן 40מתייחסות לזריעה של זמן ההוראות להלן

מיהול

.2a ,3a ,4a ,5a, 6a במספרים אפנדורףמבחנות 5סמן .1

.)כחול( 1000μlהלבש טיפ כחול על הפיפטור של .2

.LB מצע 900μl 2-6הכנס לכל מבחנה ממבחנות .3

. LBצע מ 900μlדקות, הוסף 40, שהכנת בזמן 1aלמבחנה .4

את המבחנה בעזרת וורטקס. היטבערבב .5

.10שים לב! מהלת את החיידקים פי

.צהוב(/)סגול μl100ל הפיפטור של עהלבש טיפ לבן .6

.2a 'והעבר אותם למבחנה מס 1aממבחנה מס' μl100שאב .7

.ערבב היטב את המבחנה בעזרת וורטקס .8

.100החיידקים מהולים פי . לכן, 10שוב מהלת פי שים לב!

. השתמש כל פעם בטיפ לבן חדש!3a – 6aפעמים תוך העברה למבחנות 4עוד 6-8חזור על שלבים .9

!(מיליון) 1,000,000מהולים פי 6aבמבחנה החיידקים . 10פעמים פי 4שים לב! מהלת עוד

זריעת החיידקים על גבי הצלחות.

4ובמספרים , צלחות פטרי בשמך 3מן סa ,5a, 6a.

על הפיפטור של הלבש טיפ לבן μl100 צהוב(/)סגול.

שאבμl100 4 'ממבחנה מסa 4 'לצלחת מס והעבר אותםa.

.זרוק את הטיפ המשומש והרכב טיפ חדש

שאבμl100 5 'ממבחנה מסa 5 'והעבר אותם לצלחת מסa .

.זרוק את הטיפ המשומש והרכב חדש

שאבμl100 6 'ממבחנה מסa 6 'והעבר אותם לצלחת מסa .

ת הטיפ.זרוק א

סגור את הצלחות תסטרילי, מקל שונה לכל צלחת, מרח את הנוזל באופן אחיד על פני הצלח הבעזרת מקל זריע .

והצמד את שלוש הצלחות יחד בסלוטייפ.

בכל צלחת. המושבותשעות לפחות, ספור את מספר 24אחרי

עיבוד התוצאות

תוכל לעקוב כבר במעבדה אחר עקומי הגידול במהלך המעבדה הינך נדרש להכניס את התוצאות למחשב כדי ש

ך את התוצאות יקח מחברהשונים. לאחר שהכנסת את כל הנתונים, הדפס את התוצאות כדי שתוכל לצרפן לדו"ח.

הסבר את .מתאיםגרף לנתונים אלו צייר אף והכנס אותן לטבלה המתאימה במחשב. שלהם E-ו D מבחנותלגבי

.וניםהגידול בתנאים השההבדלים בין

.מ"ל בכל אחד 1-הכפל בפקטור המיהול ורשום את ריכוז החיידקים ל ספור את מספר המושבות על כל צלחת

הסבר מדוע. –מהזמנים. האם תוצאות הספירה החיה נמצאות בהתאמה לתוצאות מדידת הבליעה? אם לא