Diapositiva 1

TEHNICI DE LABORATOR FOLOSITE N STUDIUL APARATELOR ELECTROMEDICALE.ANALIZE CHIMICE. METODE DE SEPARARE.ABSOLVENT

Analiza calitativ i cantitativ

n trecut, rezultatele analizelor n medicin erau obinute n mod calitativ, de aceea, majoritatea diagnosticelor erau bazate pe simptome i/sau examinrile cu raze X, dei era cunoscut faptul c multe boli fiziologice erau nsoite de schimbri chimice n lichidele metabolice. n prezent, pentru examinarea medical general a unui bolnav sau pentru a diagnostica un ansamblu specific de simptome este nevoie de o serie de analize cantitative ale unor probe recoltate din corpul omenesc.n mod curent, peste dou miliarde de probe sunt executate anual n laboratoarele clinicilor medicale i acest numr crete mereu. Majoritatea acestor teste includ determinarea glucozei, ureei, proteinelor, sodiului, calciului, HCO 3- /H 2 CO 3 , acidului uric i pH-ului Tipuri de metode analitice Metodele analitice de pot clasifica pe tipul i starea fizic a probei, scopul analizei, mrimea probei sau dup tipul metodei analitice. Dup acest din urm criteriu, metodele analitice se mpart n metode chimice i metode instrumentale. Metodele chimice se bazeaz pe diferite operaii chimice folosind sticlria uzual de laborator format din aparate simple. n general n aceste metode se msoar masa sau volumul. Metodele instrumentale implic utilizarea unui echipament complex, bazat pe principii electronice, optice sau termice. n aceste cazuri, se msoar diferite proprieti corelate cu compoziia probei. Cele mai bune rezultate se obin prin cuplarea tehnicilor chimice cu cele instrumentale.Tipuri de metode analitice Avantajele metodelor instrumentale: determinarea este foarte rapid; pot fi utilizate probe mici; pot fi cercetare probe complexe; prezint o sensibilitate ridicat; dau un grad mare de siguran rezultatelor msurtorilor. Avantajele metodelor chimice: procedeele sunt simple i precise; metodele se bazeaz n general pe msurtori absolute; echipamentul necesar nu este scump. Din prezentarea avantajelor, nu trebuie s se trag concluzia c metodele instrumentale le-au nlocuit pe cele chimice. n practic, metodele chimice constituie parte integrant dintr-o metod instrumental. Astfel, n orice analiz exist etape ca: prelevarea probelor; dizolvarea; schimbri n starea de oxidare; ndeprtarea excesului de reactiv; ajustarea pH-ului; adugarea de ageni de complexare; precipitarea; concentrarea; ndeprtarea impuritilor. Analiza cantitativ Analiza cantitativ este bazat pe msurarea unei proprieti care este corelat direct sau indirect, cu cantitatea de constituent ce trebuie determinat dintr-o prob. n mod ideal, nici un constituent, n afar de cel cutat, nu ar trebui s contribuie la msurtoarea efectuat. Din nefericire, o astfel se selectivitate este rareori ntlnit. Practic, dup natura analizei, exist 7 tipuri de metode de analiz: gravimetrice; volumetrice; optice; electrice; de separare; termice; de rezonan. n general, sunt metode chimice, iar cele instrumentale sunt (bazate pe relaii ntre o proprietate caracteristic i compoziia probei). Pentru a proceda la o analiz cantitativ, trebuie urmate o serie de etape:

1. Obinerea unei probe semnificative prin metode statistice; 2. Prepararea probei; 3. Stabilirea procedeului analitic n funcie de: a. Metode: i. chimice; ii. fizice cu sau fr schimbri n substan; b. Condiii: i. determinate de metoda de analiz aleas; ii. determinate de substana cercetat; c. Cerine: i. rapiditate, exactitate, costuri; ii. posibilitatea de amortizare; 4. Evaluarea i interpretarea rezultatelor.

Clasificarea metodelor de separare Exemple practice - Metode de separare

Analiza aminoacizilor

Analiza aminoacizilor depinde de muli factori: - matricea probei, - concentraia de aminoacizi, - sensibilitatea cerut, - tipul analizei. In urma analizei se determin:- profil de aminoacizi liberi- profil total de aminoacizi (dup hidroliz).

ETAPEPregtirea probeiTratamentul probelor difer, depinznd de scopul analizei. - Pentru determinarea aminoacizilor liberi este necesar obinerea unui extract, purificare si derivatizare nainte de determinare. - Pentru determinarea coninutului total de aminoacizi - etapa de hidroliz. Purificarea probei - izolarea aminoacizilor de ali compui extrai (proteine, carbohidrai, grsimi) - este necesar pentru a evita probleme poteniale cum ar fi colmatarea coloanei analitice i/sau interaciunea cu ali compui extrai cum ar fi proteinele. 3. Separarea de proteine i polipeptide - deproteinizare. - chimic se realizeaz cu soluii concentrate de acizi tari, acid sulfosalicilic, percloric, trifluoracetic, picric, fosfomolibdenic, soluii concentrate saline, solveni organici (metanol, etanol, acetonitril). n aceste condiii proteinele precipita prin denaturare n timp ce aminoacizii rmn n soluie. - fizic presupune centrifugarea prin filtre membrane limitative (CUT-OFF) care permit trecerea aminoacizilor n timp ce compuii cu masa moleculara mare sunt reinui.

Bibliografie

1. A. Ciocioc, N. Vlsceanu, "Lucrri practice de chimie organic pentru licee", Ed.Scrisul Romnesc, Craiova, 1983.2. S. Mager, A. Donea, I. Hoprtean, A. Benk, "Lucrri practice de chimie organic",volumul I, Lito. "Babe-Bolyai", Cluj-Napoca, 1990.3. S. Mager, I. Hoprtean, A. Donea, A. Benk, "Lucrri practice de chimie organic",volumul II, Lito. "Babe-Bolyai", Cluj-Napoca, 1991.4. SoftShell International Ltd., "ChemWindow Version 5.0.1", Bio-Rad Laboratories,1600 Ute Avenue, 1997.5. K. Peter, C. Vollhardt, "Organic Chemistry", H. W. Freeman and Company, NewYork, 1987.6. D. J. Pietrzyk, C. W. Frank, "Analytical Chemistry", Academic Press, New York,1986.7. G. H. Dazeley, "Organic Chemistry", Cambridge University Press, 1974.8. I. N. Nesfntu, "Chimie organic cu caracter problmatizat-programat", Editura Didactic i Pedagogic, Bucureti, 1978.