120 Jurnal Natur Indonesia 10 (2): 120-125 NofianiJurnal Natur Indonesia 10 (2), April 2008: 120-125ISSN 1410-9379, Keputusan Akreditasi No 55/DIKTI/Kep./2005

Artikel Ulas BalikUrgensi dan Mekanisme Biosintesis

Metabolit Sekunder Mikroba Laut

Risa Nofiani

Jurusan Kimia, FMIPA, Universitas Tanjungpura, Jalan Ahmad Yani, Pontianak, 78124Tel. +62561736439, E-mail:rnofiani@yahoo.com

Diterima 27-08-2007 Disetujui 17-03-2008

ABSTRACTMarine microorganism is one of biologically active potential resources of secondary metabolites. Its potency areso promising that the knowledge of how its secondary metabolite occured need to be studied and collected. Thoseknowledges will enable further study is improving secondary metabolite production in the laboratory. In nature,secondary metabolites synthesis occur when there are effect of both biotic and abiotic factors such as sea waterand microbe symbiosis with other living materials. When this is explained in metabolic pathways, secondarymetabolite synthesis affected by available nutrient and regulated by autoinducer molecules through quorum sensingmechanism

Keywords: autoinducer, marine microorganism, quorum-sensing, secondary metabolite, symbiotic

PENDAHULUANLaut merupakan salah satu sumber kekayaan

biologi dan kimia. Salah satu sumber kekayaan biologidan kimia dapat diperoleh dari bakteri laut. Meskipunbakteri laut menyusun sebagian kecil mahluk hidup lauttetapi satu sel bakteri laut mengandung ribuan senyawakimia yang berpotensi untuk obat-obatan, suplementnutrisi, kosmetik, agrokimia, probe kimia dan enzim.Umumnya senyawa kimia potensial ini berasal darimetabolit sekunder mikroba.

Metabolit diklasifikasikan menjadi dua, yaitumetabolit primer dan metabolit sekunder. Metabolitprimer yang dibentuk dalam jumlah terbatas adalahpenting untuk pertumbuhan dan kehidupan mahlukhidup. Metabolit sekunder tidak digunakan untukpertumbuhan dan dibentuk dari metabolit primer padakondisi stress. Contoh metabolit sekunder adalahantibiotik, pigmen, toksin, efektor kompetisi ekologi dansimbiosis, feromon, inhibitor enzim, agenimmunomodulasi, reseptor antagonis dan agonis,pestisida, agen antitumor, dan promotor pertumbuhanbinatang dan tumbuhan.

Ada beberapa hipotesis tentang fungsi metabolitsekunder bagi produsen metabolit sekunder, misalnyadalam mempertahankan hidup dari bakteri, fungi,insekta, dan binatang melalui produksi antibiotik dananti kotor (antifouling) (Gudbjarnason 1999). Selain itu,metabolit sekunder berperan juga dalam memperbaikikehidupan mikroba penghasil metabolit sekunder ketika

berkompetisi dengan spesies lain (Tabarez 2005). Ada5 alasan yang memperkuat hal tersebut (Tabarez 2005).Pertama, metabolit sekunder beraksi sebagaimekanisme pertahanan alternatif sehingga organismeyang kekurangan sistem imun akan menghasilkanmetabolit sekunder yang banyak dan bermacam-macam. Kedua, metabolit sekunder memiliki strukturdan mekanisme kerja yang mantap (sophisticated) sertajalur metabolismenya komplek dan mahal secaraenergetika. Ketiga, metabolit sekunder beraksi jika adakompetisi dengan mikroba, tanaman, atau binatang.Keempat, metabolit sekunder dihasilkan olehsekelompok gen biosintesis. Kelima, produksi metabolitsekunder dengan aktivitas antibiotik biasanya diiringidengan sporulasi dan terjadi pada sel mikroba yangsensitif dengan mikroba, tumbuhan, atau binatang.Umumnya mikroba sensitif ini membutuhkanperlindungan khusus ketika nutrisinya mulai habis.

Pembentukan metabolit sekunder diatur olehnutrisi, penurunan kecepatan pertumbuhan, feedbackcontrol, inaktivasi enzim, dan induksi enzim.Keterbatasan nutrisi dan penurunan kecepatanpertumbuhan akan menghasilkan sinyal yangmempunyai efek regulasi sehingga menyebabkandiferensiasi kimia (metabolit sekunder) dan diferensiasimorfologi (morfogenesis) (Demain 1998). Signal iniadalah suatu induser dengan berat molekul rendah yangberkerja sebagai kontrol negatip sehingga pada keadaannormal (pertumbuhan cepat dan cukup nutrisi)

Metabolit sekunder mirkroba laut 121

mencegah pembentukan metabolit sekunder danmorfogenesis. Tidak seperti metabolit primer, jalurmetabolit sekunder belum banyak dimengerti. Olehkarena itu, pada artikel ulas balik ini akan dicobamembahas tentang terjadinya metabolit sekunder dialam dan faktor-faktor yang mempengaruhi mekanismebiosintesis metabolit sekunder mikroba laut.

Biosintesis metabolit sekunder mikroba lautdi alam. Hasil eksplorasi metabolit sekunder selamaini menunjukkan bahwa bakteri laut merupakan salahsatu sumber potensial metabolit sekunder. Berdasarkancara hidupnya, bakteri penghasil metabolit sekunderdapat berasal dari bakteri yang hidup bebas, bakterilaut yang terdapat pada sedimen, bakteri yangberasosiasi dengan permukaan alga, atau bakteri yangberasosiasi dengan invertebrata (Burgess et al, 1999).Berdasarkan hasil penelitian terdahulu, umumnyabakteri yang hidup dengan cara berasosiasi denganmahluk hidup laut menunjukkan potensi besar dalamsekresi metabolit sekunder dengan sifat antibakteri(Burgess et al, 1999; Amstrong et al, 2001; Yan et al,2003). Bakteri yang hidup berikatan dengan partikeltertentu menghasilkan metabolit sekunder 5-10 kalilebih tinggi dibandingkan dengan bakteri yang hidupbebas (Long 2001). Contoh bakteri penghasil metabolitsekunder laut adalah Actinopolyspora species AH1diperoleh dari sedimen laut dan menunjukkan aktivitasantimikroba (Kokare et al, 2003). Bakteri epibiotik yangdiambil dari Petrosia ficiformis berkemampuanmenghambat pertumbuhan bakteri laut lain secara invitro (Chelossi et al, 2004). Pseudoalteromonaspiscicida yang berasosiasi dengan spons Hymeniacidonperleve menghasilkan senyawa norharman (suatualkaloid betakarbolin) yang memiliki aktivitasantimikroba ( Zheng et al, 2005).

Umumnya struktur kimia produk laut seringberbeda dari metabolit sekunder daratan terutama padahalogenasi dengan bromin dan atau klorin(Gudbjarnason 1999). Perbedaan ini dipengaruhi olehlingkungan laut yang unik. Menurut Okami (1982), ada3 fakta yang membuktikan bahwa lingkungan laut unik.Pertama, air laut mengandung bermacam-macamsubstansi yang aktif secara biologi seperti vitamin, danbanyak mikroorganisme laut barkemampuan untukmenghasilkan vitamin. Kedua, air laut mengandungagen inhibitor yang aktif untuk organisme. Beberapafaktor yang menggambarkan kenyataan ini adalah air

laut mempunyai kemampuan menghambat bakteri grampositif, air laut dari alam lebih menghambat daripadaair laut buatan, air laut yang telah diberi perlakuan panasmenunjukkan pengurangan aktivitas inhibitordibandingkan dengan air laut yang segar, aktivitasinhibitor air laut tidak disebabkan oleh faga atau salinitastapi karena ada agen antibakteri dalam air laut. Ketiga,beberapa mikroorganisme yang diisolasi dari air lautmenunjukkan aktivitas antibakteri.

Simbiosis antara mikroba dengan invertebratamenjadi suatu aturan yang digunakan mikroba dalammenghasilkan jenis metabolit sekunder apa yang akandihasilkan (Thakur et al, 2003). Umumnya jenismetabolit sekunder yang dihasilkan mikrobadimanfaatkan oleh invertebrata laut untuk melawanserangan mahluk hidup lain. Berdasarkan hal di atasdiperoleh suatu konsep baru yang menyatakan bahwasimbiosis yang menghasilkan metabolit sekunder dapatdipicu karena adanya halangan lingkungan biotik. Modelyang digunakan untuk menjelaskan konsep ini adalahsimbiosis bakteri dengan spons pada Gambar 1 (Mulleret al, 2004). Mula-mula sel inang (spons) mensintesis

Spons

Simbiosis spons-mikroba

BakteriEukariot

Bakteri Eukariot

Bakteri fouling

Tribromophenol

Okadaic acid Perforin Tachylectin

CribrostatinSorbicillactone

Acetylenic C

4

2 3

5 1

Gambar 1. Model Produksi Metabolit Sekunder melalui SimbiosisSpons dengan Mikroba (Muller et al., 2004) 1. Selinang (spons) mensintesis senyawa bioaktif untukmelengkapi perlindungan melawan seranganmikroba/eukariot; 2. Mikroba berasosiasi denganspons menghasilkan suatu metabolit sekunder yangberperan dalam sistem pertahanan spons; 3.Perlindungan dengan sistem imun; 4. Perlindungantidak langsung; 5. Simbiosis bakteri atau fungimenghasilkan metabolit sekunder.

122 Jurnal Natur Indonesia 10 (2): 120-125 Nofiani

metabolit sekunder untuk melengkapi perlindunganmelawan serangan mikroba atau eukariot (perlindunganlangsung pertama), contoh senyawa asetilenat. Selainitu, spons dapat juga menghasilkan metabolit sekunderberupa protein yang dapat menahan pertumbuhanbakteri (perlindungan dengan sistem imun), contohnyaadalah perforin (Thakur et al, 2003) dan tachylectin(Schroder et al, 2003). Secara fungsional, senyawa iniberaksi sebagai molekul pertahanan. Akibat adanyainteraksi metabolit sekunder yang dihasilkan denganbakteri yang berasosiasi dengan spons menyebabkankemungkinan bakteri terinduksi untuk menghasilkansuatu metabolit sekunder. Metabolit sekunder yangdihasilkan memiliki bermacam-macam fungsi, misalnyaberfungsi dalam sistem pertahanan sekaliguspengaktivasi jalur penting untuk pertahanan diri (aktivatormetabolit). Contoh metabolit sekunder bakteri adalahasam okadaat (okadaic acid) yang dihasilkan olehbakteri dalam spons Suberites domuncula. Asamokadaat berperan sebagai molekul pertahananmelawan serangan metazoa asing dan secara simultanmerupakan modulasi positif jalur ini untuk memperbesarrespon imun sel inang (Wiens et al, 2003). Bakteri yanghidup pada permukaan sel inang spons menghasilkanmetabolit sekunder spesifik untuk melawan bakteritertentu (perlindungan tidak langsung), contoh senyawaantifouling (Thakur et al, 2003) dan senyawatribromophenol (Clare et al, 1999). Contoh metabolitsekunder yang dihasilkan akibat adanya simbiosisantara spons dengan bakteri atau fungi, bakteri ataufungi juga terinduksi untuk menghasilkan senyawametabolit sekunder seperti cribrostatin atausorbicillactone.

Selain mikroba bersimbiosis spons, jugabersimbiosis dengan alga seperti simbiosis alga hijauEnteromorpha linza dengan bakteri Flavobacterium spp.dan Cytophaga spp. (Shiba & Taga 1980). E. linzamenghasilkan produk ekstraselular yang diserap olehFlavobacterium spp. dan Cytophaga spp. yangmenyusun biofilm pada alga. Bakteri pigmen hijauPseudoalteromonas tunicata yang juga membentukbiofilm dapat menghasilkan senyawa inhibitor spesifiktarget melawan bakteri, alga, fungi, dan larva invertebrata(Prochnow et al, 2004).

Biosintesis metabolit sekunder yangdipengaruhi oleh ketersediaan nutrisi tertentu.Metabolit primer dapat meningkatkan produksi

metabolit sekunder. Pada mikroba laut, kondisilingkungan dengan nutrisi terbatas menyebabkanpenggunaan karbon oleh mikroba laut dalammetabolisme selular t idak digunakan untukpertumbuhan sel melainkan karbon yang tersedia akandigunakan untuk produksi metabolit sekunder.Eksperimen Barry dan Wainwright (1997) membuktikanbahwa penambahan prekursor metabolit primer dapatmeningkatkan metabolit sekunder. Induksi prekursormetabolit primer yang digunakan adalah -ketoglutarat,-ketoglutarat, glukosa, dan oksaloasetat. Bakteri lautJ292/97 diinokulasi dalam berbagai media yaitu MarineBroth Difco (MB), MB yang diencerkan 10X (MB 1:9),MB 1:9 yang disuplemen dengan 0,1% -ketoglutarat,MB 1:9 yang disuplemen dengan 0,1% -ketoglutarat,MB 1:9 yang disuplemen dengan 0,1% glukosa, MB1:9 yang disuplemen dengan 0,1% oksaloasetat. Mediapertumbuhan yang disuplemen dengan prekursor siklusTCA (Tricarboxylic acid) yaitu -ketoglutarat danoksaloasetat akan menginduksi senyawa yangmemiliki aktivitas antimikroba. Pseudomonasfluorescens HV37a mensintesis antibiotik dalamkeberadaan glukosa (Gutterson et al, 1988). Selain itumedia MB yang diencerkan 10x (MB 1:9) yangdisuplemen dengan glukosa 0,1% dapat jugamenginduksi senyawa antibakteri dari Alteromonas sp.K10 dan Bacillus sp. K11.

Nitrogen juga berperan dalam produksi metabolitsekunder mikroba. Pada kondisi nitrogen terbatas,ppGpp sintetase (RelA) yang berasosiasi denganribosom dibutuhkan untuk produksi antibiotik olehStreptomyces coelicolor A3(2) (Chakraburtty & Bibb1997). Kondisi ini juga dibutuhkan untuk produksicephamycin C oleh Streptomyces clavuligerus (Jin etal, 2004). Meskipun demikian mekanisme produksiantibiotik yang digerakkan oleh ppGpp ini belum jelas.

Biosintesis metabolit sekunder seperti antibiotikdipengaruhi juga oleh ketersediaan fosfat (Martin 2004).Umumnya produksi metabolit sekunder terjadi padakondisi fosfat terbatas. Komponen yang berperan yaitusistem PhoR-PhoP. PhoR adalah protein membranstandar sensor kinase. PhoP adalah suatu proteinanggota regulator respon terikat dengan DNA. PhoPberperan juga dalam mengontrol gen fosfatase alkalin(PhoP). Jika terjadi inaktivasi regulator respon PhoPatau delesi sistem PhoR-PhoP menyebabkan terjadinyaekspresi tinggi actinohordin dan undesilprodigosin pada

Metabolit sekunder mirkroba laut 123

S. coelicolor dan S. lividans. Usulan mekanismeCascade berhubungan dengan efek negatif fosforilasiPhoP pada ekspresi AfsS ditunjukkan pada Gambar 2(Martin 2004). Ekspresi gen act (actinorhodin) dan red(undesilprodigiosin) diregulasi oleh aktivator transkripsispesifik, ActII-ORF4 dan RedD. Produksi ActII-ORF4dan RedD diinduksi oleh AfsS. Ekspresi tinggi AfsSakan menyebabkan ekpresi tinggi ActII-ORF4 dan RedDsehingga terjadi juga ekspresi tinggi Act dan Red. AfsSdiregulasi oleh sistem PhoR-PhoP. AfsS direpresi olehsistem PhoR-PhoP jika PhoP dalam keadaanterfosforilasi (PhoP~P).

Regulasi biosintesis metabolit sekunderdengan sistem quorum-sensing. Quorum-sensingadalah regulasi ekspresi gen yang tergantung padadensitas sel. Umumnya mekanisme quorum-sensingdigunakan oleh bakteri gram negatip. Bakterimenghasilkan molekul sinyal yang mampu berdifusikeluar dan ke dalam sel. Molekul ini biasanya dikenaldengan nama autoinduser. Autoinduser yang ditemukanpada bakteri gram negatip adalah asilasi homoserinlakton (AHL). Model quorum-sensing ditunjukkan olehsimbiosis bakteri laut, Photobacterium fischeri denganikan atau cumi-cumi pada Gambar 3 (Gonzalez &Marketon 2003). AHL dibentuk dari asil-ACP dan SAM

P PhoP

PhoP~P

AfsK

RNApolAfsR AfsS

AfsRRNApol

AfsS

AfsS PhoP

ActII-ORF4 redD

Biosintesis MetabolitSekunder

P

AfsR

AfsRPhoR PhoR~PATP

SerThr

PP

PP

ThrSer

P

P

ThrSer

AfsK

Gambar 2. Usulan Mekanisme Cascade Fosfat MengontrolBiosintesis Actinohordin dan Undecylprogiosin(Martin, 2004)

luxICDABERNAPluxR-42,5

ACCTGTAGGATCGTACAGGTluxbox

LuxR tidak aktif

LuxR aktif

=AHLLuxI

SAM

Asil-ACP

CRP +

+ (-)

Gambar3. Model Quorum-Sensing pada simbiosis P. fischeri dengan ikan atau cumi-cumi (Gonzales and Marketon, 2003).

Gambar 2. Usulan mekanisme cascade fosfat mengontrolbiosintesis actinohordin dan undecylprogiosin(Martin 2004)

Gambar 3. Model Quorum-Sensing pada Simbiosis P. fischeri dengan ikan atau cumi (Gonzales and Martin 2004)

124 Jurnal Natur Indonesia 10 (2): 120-125 Nofiani

(S-adenosilmetionin) dengan bantuan enzim AHLsintase yang dikode oleh gen LuxI. Peningkatandensitas sel menyebabkan akumulasi AHL yangselanjutnya menyebabkan LuxR aktif karena AHL akanberikatan dengan LuxR. LuxR yang aktif ini akanmengaktivasi ekspresi operon lux tetapi menghambatekspresi gen luxR.

Pseudomonas fluoresescen NCIMB 10586menghasilkan senyawa mupirocin. Ekspresi genMupirocin dari Pseudomonas fluoresescen NCIMB10586 bergantung pada sistem regulator quorum-sensing (El-Sayed et al, 2001). Gen yang mengodemupirocin adalah operon Mup. Asam amino MupR danMupI menunjukkan kemiripan dengan sistem regulatorLasR/LasI dan LuxR/LuxI. MupR penting untukmengativasi mupI dan operon mup. Selain sintesismupirocin yang mengikuti sistem regulasi quorum-sensing, produksi senyawa antibakteri dari bakteriRoseobacter 27-4 juga mengikuti regulasi quorum-sensing (Buhn et al, 2005). Hal ini disebabkan karenasenyawa ini terbentuk jika densitas sel tinggi.

Selain AHL, autoinduser yang lain adalah-butirolakton (butanolida). Contoh butanolida adalahfaktor A (2-isokapriloil-3R-hidroksimetail- -butirolakton)Streptomyces griseus. Faktor A S. griseus diproduksisebelum produksi streptomisin dan akan terhenti padasaat produksi streptomisin mencapai level maksimum(Horinouchi & Beppu 1992). Faktor A menginduksi palingsedikit 10 protein pada level transkripsi. Satudiantaranya adalah streptomisin 6-fosfotransferase,suatu enzim yang berfungsi dalam biosintesisstreptomisin dan dalam resistensinya terhadapstreptomisin.

Induksi biosintesis metabolit sekundermikroba di laboratorium. Ada beberapa hambatanyang ditemui dalam sintesis metabolit sekunder dilaboratorium. Beberapa mikroba yang hidupbersimbiosis dengan mahluk hidup di laut sulitdikulturkan di laboratoium. Beberapa mikroba penghasilmetabolit sekunder dapat juga kehilangan kapasitasmenghasilkan metabolit sekunder setelahpenyimpanan dalam waktu singkat (Tabarez 2005).Penyebab hal ini adalah tidak terpenuhinya kebutuhannutrisi atau strain penghasil metabolit sekunder tidakberada dalam keadaan stres serta bisa jugadisebabkan oleh lingkungan abiotik. Upaya yangdilakukan untuk mengatasi lingkungan abiotik adalah

membuat kondisi pada saat kultivasi mirip denganlingkungan aslinya misalnya dengan memodifikasimetode kultivasi konvensional. Bacillus licheniformisEI-34-6 menghasilkan metabolit sekunder jikaditumbuhkan pada sebuah bioreaktor yangmenggunakan membran semipermeabel. B.licheniformis EI-34-6 tapi tidak menghasilkan metabolitsekunder jika ditumbuhkan pada kultur cair yangdikocok (Yan et al, 2003). Perbedaan tipe membransemipermeabel tidak menunjukkan hasil yang berbedasehingga dapat disimpulkan bahwa komposisi kimiamembran tidak mempengaruhi produksi senyawaantimikroba. Bacillus sp. yang diisolasi dari algaPalmaria palmate menghasilkan senyawa antimikrobadengan spektrum yang bervariasi pada metode kulturbotol berputar (a modified roller bottle culture) yangtelah dimodifikasi dibandingkan dengan kultur cair yangdikocok atau kultur cair pada botol yang berputar (Yanet al, 2002).

Produksi senyawa antimikroba oleh bakteri lautdapat juga diinduksi oleh keberadaan bakteri darat yanghidup atau telah mati (Mearns-Spragg et al, 1998). Duabelas dari 16 bakteri epibiotik dari alga dan invertebratamenunjukan peningkatan aktivitas antimikroba terhadapS. aureus, E. coli, Pseudomonas aeruginosa setelahdipaparkan ke bakteri daratan yang hidup.

KESIMPULANMikroba laut merupakan salah satu penghasil

metabolit sekunder yang cukup menjanjikan. Beberapakendala yang dialami pada proses kultivasi dilaboratorium adalah tidak dihasilkannya metabolitsekunder. Ada beberapa upaya yang dapat dilakukan.Pertama, media yang digunakan dalam proses kultivasidivariasikan baik jenis maupun konsentrasi. Kedua,media yang digunakan ditambahkan prekursormetabolit sekunder seperti asam amino dan karbohidrat.Ketiga, proses kultivasi diusahakan mirip dengankeadaan di alam seperti pada proses kultivasi tidakdilakukan pengocokan atau modifikasi bioreaktordengan menggunakan membran semipermeabel.

UCAPAN TERIMA KASIH

Metabolit sekunder mirkroba laut 125

Penulis mengucapkan terima kasih kepada BapakSutarman Gafar, Fakultas Pertanian UniversitasTanjungpura atas kritikan dan saran pada artikel ini.

DAFTAR PUSTAKAAmstrong, E. ,Yan, L., Boud, K.G., Wright, P.C, & Burgess,

J.G. 2001. The symbiotic role of marine microbes on livingsurfaces. Hydrobiologia 461:37-40.

Barry, K.J. & Wainwright, N.R. 1997. Biosynthetic induction ofa secondary metabolites by a marine bacterum undernutritional stress: potential role of the incomplete oxidationof an organic acid. Bioll Bull 193:274-275.

Bibb, M.J. 2005. Regulation of secondary metabolism instreptomycetes. Curr Opin Microbiol 8: 208-215.

Bruhn, J.B., Nielsen, K.F., Hjelm, M., Hansen, M., Bresciani,J., Schulz, S. & Gram, L. 2005. Ecology, inhibitory activity,and morphogenesis of a marine antagonistic bacteriumbelonging to the roseobacter clade. Appl Microbiol Environ71: 7263-7270.

Burgess, J.G. Jordan, E.M. Bregu, M. Mearns-Spragg, A. &Boyd, K.G. 1999. Microbial antagonism: a neglected avenueof natural product research. J Biotechnol 70:27-32.

Chakraburtty, R. & Bibb, M.J. 1997. The ppGpp Synthetasegene (relA) of Streptomyces coelicolor A3(2) plays aconditional role in antibiotic production and morphologicaldifferentiation. J Bacteriol 179: 5854-5861.

Chelossi, E., Milanese, M., Milano, A., Pronzato, R. &Riccardi, G. 2004, Characterisation and antimicrobial activityof epibiotic bacteria from Petrosia ficiformis (porifera,demosponsiae). J Exp Mar Biol Ecol 309: 21-33.

Claire, A.S. Rittschof, D. Gerhart, D.J. Hooper, I.R. &Bonaventura, J. 1999. Anti-settlement and narcotic actionof analogues of diterpene marine natural product antifoulantfrom octocarals. Mar Biotechnol 1: 427-436.

El-Sayed, A.K., Hothersall, J. & Thomas, C.M. 2001. Quorum-sensing-dependent regulation of biosynthesis of thepolyketide antibiotic mupirocin in Pseudomonas fluorescensNCIMB 10586. Microbiol 147: 2127-2139.

Gonzalez, J.E & Marketon, M.M. 2003. Quorum sensing inNitrogen-Fixing Rhizobia. Microbiol Mol Biol Rev 67: 574-592.

Gudbjarnason, S. 1999. Bioactive Marine Natural Product. RitFiskideilar 16:107-110.

Gutterson, N. Ziegle, J.S., Warren, G.W. & Layton, T.J. 1988.Genetic determinants for catabolite induction of antibioticbiosynthesis in Pseudomonas fluorescens HV37a. JBacteriol 170: 380-385.

Horinouchi, S., & Beppu, T. 1992. Autoregulatory factors andcommunication in actinomycetes. Annu Rev Microbiol 46:377-398.

Kokare, C.R., Mahadik, K.R., Kadam, S.S. & Chopade, B.S.2004. Isolation, characterization and antimicrobial activityof marine halophilic Actinopolyspora species AH1 from thewest coast of India. Curr Sci 86:593-597.

Long, R.A. & Azam, F. 2001. Antagonistic Interactions amongmarine pelagic bacteria. Appl Environ Microbiol 67: 4975-4983.

Martin, J.F. 2004. Phosphate control of the biosynthesis ofantibiotics and other secondary metabolites is mediated bythe PhoR-PhoP System: an Unfinished Story. J. Bacteriol186 (16): 5197-5201.

Muller, W.E.G., Schroder, H.J. & Wiens, M. 2004. Approachesfor a sustainable exploitation of biodiversity (secondarymetabolites ans biomaterials from sponses) in traditional andmodern biomedical prospecting:part ii-the benefits. eCAM1:133-144.

Okami, Y. 1982. Potential use of marine microorganisms forantibiotics and enzyme production. Pure & Appl Chem54:1951-1962.

Prochnow, A.M., Evans, F., Saludes, D.D., Stelzer, S., Egan,S., James, S., Webb, J.S. & Kjelleberg, S. 2004. Biofilmdevelopment and cell death in the marine bacteriumPseudoalteromonas tunicate. Appl Environ Microbiol 70:3232-3238.

Schroder, H.C., Ushijima, H., Krasko, A., Gamulin, V.,Shutze, J. & Muller, I.M. 2003. Emergence anddisappearance of an immun molecule, an antimicrobial lectin,in basal metazoa: the achylectin family. J Biol Chem 278:32810-32817.

Shiba, T. & Taga, N. 1980. Heterotrophic bacteria attached toseaweeds. Journal of Experimental Marine Biology andEcology. 47:251-258.

Tabarez, M.R. 2005. Discovery of the new antimicrobialcompound 7-o-malonyl macrolactin a. Dissertation Van DerGemeinsamen Naturwissenschaftlichen Fakultat. Jerman:Universitat Carolo-Wilhelmina.

Thakur, N.L., Hensschel, U., Krasko, A., Anil, A.C. & Muller,W.E.G. 2003. Antibcterial activity of the sponse suberitesdomuncula and its primmorphs: potential basis for chemicaldefense. Aquatic Microbiol Ecol 31: 77-83.

Wiens, M., Luckas, B., Brummer, F., Ammar, M.S.A., Steffen,R. & Batel, R. 2003. Okadaic acid: a potential defensemolecule for the sponse Suberites domuncula. Mar Biol142: 213-223.

Yan, L., Boyd, K.G. & Burgess, J.G. 2002. Surface attachmentinduced production of antimicrobial compounds by marineepiphytic bacteria using modified roller bottle cultivation. MarBiotecnol 4: 356-366.

Yan, L., Boyd, K.G., Adams, D.R. & Burgess, J.G. 2003. Biofilm-specific cross species induction of antimicrobial compoundsin bacilli. Appl Environ Microbiol 69: 3719-3727.

Zheng, L., Chen, H., Han, X., Lin, W. & Yan, X. 2005. Antimicrobialscreening and active compound isolation from marinebacterium NJ6-3-1 associated with the sponse Hymeniacidonperleve. World journal of Microbiology & Biotechnology21:201-206.