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MERCURIO TOTAL EN HECES DE NUTRÍA (Lontra longicaudis) EN LOS EMBALSES PORCE II Y PORCE III DIRECTOR: PhD. Jaime Alberto Palacio Baena. PROGRAMA: Maestría en Medio Ambiente y Desarrollo PERFIL: Investigativo. AUTOR Lina María Toro Ocampo 1128270898 [email protected]

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MERCURIO TOTAL EN HECES DE NUTRÍA (Lontra longicaudis) EN LOS EMBALSES

PORCE II Y PORCE III

DIRECTOR: PhD. Jaime Alberto Palacio Baena.

PROGRAMA: Maestría en Medio Ambiente y Desarrollo

PERFIL: Investigativo.

AUTOR

Lina María Toro Ocampo

1128270898

[email protected]

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"There's no chance, no destiny, no fate, that can circumvent or hinder or control the firm resolve of a determined soul"

Ella Wheeler Wilcox

AGRADECIMIENTOS

A mi madre por su inconmensurable amor, incondicional apoyo en cada paso que doy en

mi vida y por ser sencillamente la mejor mamá. A mi padre porque siempre ha creído en

mí, me ha apoyado, por su amor y por sus consejos. A Clau y mi lagartija por su amor y

porque siempre están ahí cuando las necesito.

Agradezco a mi director Jaime Alberto Palacio Baena por acogerme en el Grupo de

investigación en Gestión y Modelación Ambiental-GAIA- de la Universidad de Antioquia,

por tener siempre una sonrisa, una enseñanza y por creer en mí; por personas como

usted es que nace el amor a la ciencia y a la investigación.

Agradezco también a Alejo, July, Maria, Aleja y José porque más que compañeros de

maestría se convirtieron en grandes amigos.

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TABLA DE CONTENIDO

LISTA DE FIGURAS .......................................................................................................... 4

RESUMEN ......................................................................................................................... 7

ABSTRACT........................................................................................................................ 8

INTRODUCCIÓN ............................................................................................................... 9

1. OBJETIVOS ............................................................................................................. 12

1.1. Objetivo general................................................................................................. 12

2. MARCO TEÓRICO ................................................................................................... 13

2.1. El Mercurio ........................................................................................................ 13

2.2. Acumulación en el ambiente .............................................................................. 15

2.3. Nutria (Lontra longicaudis) ................................................................................. 18

3. METODOLOGÍA ....................................................................................................... 20

3.1. Área de estudio.................................................................................................. 20

3.2. Recolección, transporte y almacenamiento de muestras ................................... 23

3.3. Procesamiento de las muestras ......................................................................... 24

3.4. Control de calidad de los análisis ....................................................................... 26

3.5. Análisis estadístico ............................................................................................ 28

4. RESULTADOS ......................................................................................................... 29

4.1. Recurso Trófico ................................................................................................. 29

4.2. Individualización de muestras ............................................................................ 29

4.3. Concentración de mercurio total en heces y mucosidad .................................... 31

5. DISCUSIÓN .............................................................................................................. 37

6. CONCLUSIONES ..................................................................................................... 45

7. RECOMENDACIONES ............................................................................................. 47

8. BIBLIOGRAFÍA ......................................................................................................... 48

9. ANEXOS................................................................................................................... 56

9.1. Fotografías ........................................................................................................ 56

9.2. Estandarización de la metodología .................................................................... 56

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LISTA DE FIGURAS

Figura 1. Ciclo biogeoquímico del mercurio. ................................................................... 17

Figura 2. Procedimiento de control analítico Grupo de modelación y Gestión ambiental

(GAIA) P-EA-011 ............................................................................................................. 27

Figura 3. Concentraciones de Mercurio total en heces de Lontra longicaudis. ................. 33

Figura 4. Concentraciones de Mercurio total en mucosidad de Lontra longicaudis. ......... 33

Figura 5. Medianas para Mercurio total en heces y mucosidades de Lontra longicaudis en

el embalse Porce II con un Intervalo de confianza del 95%. ............................................ 34

Figura 6. Medianas para Mercurio total en heces y mucosidades de Lontra longicaudis en

el embalse Porce III con un Intervalo de confianza del 95%. ........................................... 35

Figura 7. Medianas para Mercurio total en heces y mucosidad de Lontra longicaudis con

un Intervalo de confianza del 95%. .................................................................................. 36

Figura 8. Medianas para Mercurio total en los embalses Porce II y Porce III con un

Intervalo de confianza del 95%. ....................................................................................... 36

Figura 9. Mapa de distribución de la concentración de mercurio en heces y mucosidad de

Lontra longicaudis en los embalses Porce II y Porce III. .................................................. 44

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LISTA DE TABLAS Tabla 1. Principales características químicas del mercurio. Tomado y modificado de (Flavia et al., 2009). ......................................................................................................... 14 Tabla 2. Distribución de las especies de Nutrias alrededor del mundo. Adaptado de (Reuther, 2001) ................................................................................................................ 18 Tabla 3.Tabla de excretas invidualizadas. ....................................................................... 30 Tabla 4. Contenido de Mercurio total en heces de Lontra longicaudis procedentes del

embalse Porce II. ............................................................................................................. 31 Tabla 5. Contenido de Mercurio total en heces de Lontra longicaudis procedentes del

embalse Porce III. ............................................................................................................ 32 Tabla 6. Contenido de Mercurio total en mucosidad de Lontra longicaudis en los embalses

Porce II y Porce III. .......................................................................................................... 33 Tabla 7. Medidas de tendencia central y de dispersión del contenido de Mercurio total en heces de Lontra longicaudis. ........................................................................................... 34

Tabla 8. Estudios previos sobre concentración de mercurio en diferentes especies y tejidos de nutrias. ............................................................................................................. 37 Tabla 9. Toxicocinética del metilmercurio (MeHg+) por vía oral (Council, 2000; Patrick, 2002). .............................................................................................................................. 40

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LISTA DE FOTOS

Foto 1. Panorámica del embalse Porce II. (EPM, 2013)……………………………….…….21

Foto 2. Embalse Porce III. (EPM, 2013) ........................................................................... 22

Foto 3. Heces de Lontra longicaudis (Foto donada por Carolina zapata) ......................... 56

Foto 4. Lontra longicaudis (Foto donada por Carolina zapata) ........................................ 56

Foto 5. Mucosidad de Lontra longicaudis (Foto donada por Carolina zapata) .................. 56

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RESUMEN

El mercurio y sus derivados órganometálicos como metilmercurio son elementos

altamente tóxicos con capacidad de biomagnificación a través de las cadenas tróficas. En

las cuencas de los principales tributarios de los embalses Porce II y Porce III se ha

desarrollado históricamente minería aurífera y como resultado se presentó el

enriquecimiento de los ambientes acuáticos con mercurio. La presencia de esta sustancia

afecta la calidad del agua como hábitat y favorece su bioacumulación en la fauna

acuática. Los mamíferos acuáticos y de nivel trófico superior como la nutria que basa su

dieta en peces, es altamente vulnerable de bioacumulación de mercurio a través de sus

presas.

Se evaluó el contenido de mercurio en heces y mucosidad de la nutria Lontra longicaudis

de los embalses Porce II y Porce III. El mercurio en heces y mucosidades alcanzó un

valor medio de 0,138 (± 0,133) y 0,337 ± 0,219 (µg/g) respectivamente, en las excretas de

las nutrias del embalse Porce II. Y De 0,275 ± 0,260 (µg/g) y 0,470 ± 0,313 (µg/g) en las

heces y mucosidades en el embalse de Porce III. Mientras que se encontró una diferencia

estadísticamente significativa entre el contenido de mercurio en heces y mucosidades

(valor-P 0,046), para la concentración de mercurio entre sitios de muestreo (Porce II y

Porce III) no se encontró una diferencia estadísticamente significativa (valor-P 0,47).

Palabras claves Lontra longicaudis, mercurio, heces, mucosidad, Porce II, Porce III.

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ABSTRACT

Mercury is a highly toxic element capable of compartmentalization and biomagnification

through food chains. In the basins of the main tributaries of reservoirs Porce II and Porce II

has developed historically gold mining and as a result there is enrichment of aquatic

environments with mercury. The presence of this substance affects water quality and

suffers a bioaccumulation in the aquatic fauna. The aquatic mammals on the higher trophic

level as the otter makes it a vulnerable specie because of the mercury bioaccumulation

through their prey.

We evaluated the mercury content in spraint and anal-jelly from the otter Lontra

longicaudis in the reservoirs Porce II and Porce II. The mercury content in spraint and

anal-jelly had a mean of 0.138 (± 0.133) (µg/g) and 0.337 ± 0.219 (µg/g), respectively, in

the reservoir Porce II. And 0.275 ± 0.260 (µg/g) and 0.470 ± 0.313 (µg/g) for spraint and

anal-jelly in the reservoir Porce III. We found a statistically significant difference between

the mercury content in spraint and anal-jelly (P-value 0.046) while for mercury

concentration between sampling sites (Porce II and Porce III) found no statistically

significant difference (P-value 0.47).

Keywords Lontra longicaudis, mercury, spraint, anal-jelly.

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INTRODUCCIÓN

La calidad del ambiente afecta considerablemente la estructura y composición de la biota

de un área determinada y las interacciones intra e interespecíficas. El uso indiscriminado

de sustancias químicas es uno de los problemas ambientales más críticos en la actualidad

y en particular, el empleo del mercurio en la minería artesanal constituye un riesgo para

los ecosistemas naturales y la biota.

Aunque las fuentes antrópicas de mercurio en el ambiente incluyen procesos industriales,

quema de combustibles fósiles, producción de cemento, incineración de productos

químicos, servicios de salud y residuos urbanos, la minería aurífera es el mayor

contaminador por mercurio a nivel mundial. Se estima que por cada gramo de oro

producido, ingresa al ambiente el promedio uno a dos gramos de mercurio. En estas

circunstancias, anualmente se vierten a la biosfera alrededor de 1000 toneladas de

mercurio. En el 2007, Colombia ocupó el tercer lugar en emisión de mercurio (50-100 ton),

luego de China e Indonesia, debido a la minería de oro artesanal. Además, nuestro país

es considerado el territorio más contaminante con mercurio per capita a nivel mundial

(Cordy et al., 2011).

En 17 poblaciones mineras del nordeste de Antioquia hay entre 15.000 y 30.000 mineros

artesanales de oro. El mercurio al ser recalcitrante o resistente a la degradación, se

acumula en los sedimentos y en los organismos y como consecuencia, representa un

riesgo para la estabilidad del ecosistema, la vida silvestre, la salud animal y humana.

Entre los metales pesados, el mercurio es uno de los de mayor preocupación a nivel

mundial por su alta toxicidad, potencial de bioacumulación y potencial como disruptor

endocrino. El proceso de bioacumulación hace que la concentración de este metal se

aumente miles de veces en los tejidos con relación a los niveles en la fase ambiental

(Cordy et al., 2011).

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En las cuencas de los principales tributarios de los embalses Porce II y Porce III se ha

desarrollado históricamente minería aurífera y como resultado se presentó el

enriquecimiento de los ambientes acuáticos con mercurio. La presencia de esta sustancia

afecta la calidad del agua como hábitat y favorece su bioacumulación en la fauna

acuática. Los mamíferos acuáticos y de nivel trófico superior como la nutria que basa su

dieta en peces, se encuentra en una posición blanco de bioacumulación de mercurio a

través de sus presas (Wren, 1986). No obstante, en el embalse Porce II se registra una

actividad pesquera importante, con la extracción de volúmenes importantes de tilapia.

En el área de influencia del proyecto hidroeléctrico Porce III se reportó durante el primer

monitoreo de fauna terrestre en la fase de construcción la presencia de una pequeña

población de nutria (Lontra longicaudis) (EPM, 2007). La nutria neotropical es una especie

tolerante a modificaciones en las condiciones ambientales y ocupa áreas intervenidas a

través de las actividades antrópicas (Larivière, 1999). No obstante, es muy probable que

sus poblaciones hayan declinado como resultado del deterioro de los ambientes naturales

por la minería, la ampliación de la frontera agrícola y la fragmentación de los bosques

riparios.

La cuantificación de la concentración de mercurio en las heces y mucosidades de

vertebrados y en particular, de especies piscívoras como la nutria neotropical constituye

un mecanismo de biomonitoreo que no compromete la integridad de los organismos y

permite estimar el riesgo potencial de la transferencia de estas sustancias a través de las

cadenas tróficas. El uso de las heces como método de medición indirecto de la cantidad

de contaminantes que afecta la población, es una herramienta valiosa para la

conservación de la nutria (Mason et al., 1986). Adicionalmente, si se tiene en cuenta que

los organismos de niveles tróficos superiores como como la nutria y finalmente el hombre

consumen alimentos contaminados, es evidente que puede presentarse un proceso de

biomagnificación (Johansen et al., 2007).

El análisis de las heces de nutria ha sido usado adicionalmente para otros estudios como:

la medición de variables fisiólogicas como hormonas esteroideas de la reproducción,

como material de ADN genómico para la identificación de individuos, para evaluar y la

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incidencia de enfermedades y para describir hábitos alimenticios (Dallas et al., 2003;

Hung et al., 2004; Kalz et al., 2006).

La nutria como la mayoría de mustélidos posee un par de sacos anales que producen una

secreción que es depositada junto con las heces, esta secreción es expulsada

adicionalmente junto con una mucosidad proveniente del intestino (Trowbridge, 1983) la

cual ha sido encontrada en estudios donde evalúan la existencia de contaminantes en las

heces y mucosidad de Lontra canadensis (Elliott et al., 2008; Kruuk et al., 1996)

Teniendo en cuenta que la nutria (Lontra longicaudis) se encuentra en la parte superior de

la cadena trófica en los ambientes acuáticos y que su dieta está basada

fundamentalmente en peces, es indiscutible la importancia de esta especie como

bioindicador de la presencia de mercurio en agua (Mason y MacDonald, 1986; Navas et

al., 1985). En consecuencia, es evidente la importancia de evaluar el estado de cuerpos

de agua con base en la cuantificación de la concentración de mercurio en heces y

mucosidad de la nutria (Lontra longicaudis) y de esta manera poder establecer el

potencial efecto de biomagnificación. Este estudio se realizo dentro de un proyecto de

investigación que desarrolla actualmente la Universidad de Antioquia con la cofinanciación

de EPM y fue financiado por el Grupo de Investigación en Gestión y Modelación

Ambiental y EPM.

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1. OBJETIVOS

1.1. Objetivo general

Establecer la presencia de mercurio en las heces y mucosidades de Lontra longicaudis de

los embalses Porce II y Porce III como un potencial indicador de los procesos de

bioacumulación y el potencial riesgo de biomagnificación.

1.2. Objetivos específicos

Determinar la concentración del mercurio total en heces y mucosidades de la

nutria neotropical (Lontra longicaudis) en los embalses Porce II y Porce III.

Establecer la concentración del mercurio total en las excretas de la nutria

neotropical (Lontra longicaudis) asociado a la procedencia de las muestras

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2. MARCO TEÓRICO

2.1. El Mercurio

El mercurio se encuentra en la naturaleza en forma de mercurio metálico (Hg0) o

elemental, mercurio inorgánico (Hg2+, Hg+) y mercurio orgánico (CH3Hg+, C2H5Hg+,

C6H5Hg+, (CH3)2Hg). El mercurio elemental es un metal blanco plateado brillante, en

estado líquido a temperatura ambiente con una alta densidad (13,521 g/mL), baja

solubilidad en agua, con una gran capacidad de acumularse en el sedimento de los

ambientes acuáticos, donde puede permanecer durante largos períodos de tiempo,

incluso si los suministros se han interrumpido (Golden et al., 2002; Santos et al., 2000). El

mercurio metálico (Hg0) tiene la propiedad de evaporarse parcialmente, formando

vapores incoloros e inodoros. Cuanto más alta sea la temperatura, más vapores

emanarán del mercurio metálico líquido (Programa de Las naciones unidas para el Medio

Ambiente, 2002).

Los compuestos inorgánicos o sales de mercurio se forman mediantes la combinación de

este metal con elementos como cloro, oxígeno y azufre. Las sales de mercurio son polvos

blancos o cristales, excepto el sulfato de mercurio, también conocido como cinabrio o

cinabarita, que es rojo y se torna negro después de la exposición a la luz. Cuando el

mercurio se combina con cadenas carbonadas, forma compuestos “organometálicos”.

Aunque hay un número grande de estos compuestos, el más importante es el

metilmercurio (MeHg+) (Organización panamericana de la Salud, 2011).

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Tabla 1. Principales características químicas del mercurio. Tomado y modificado de (Flavia et al., 2009).

PRINCIPALES CARACTERÍSTICAS QUÍMICAS DEL MERCURIO Símbolo Químico Hg de la palabra latina hydrargyrum

Aspecto Líquido plateado Fuente Natural Se encuentra en la naturaleza en forma de cinabrio, un sulfuro de

mercurio o en grandes bolsas de mercurio metálico Peso atómico 200,61 g/mol Estado físico Líquido a temperatura ambiente Color y Olor Plateado e inodoro Punto de Fusión -38,87 °C Punto de Ebullición 356,9 °C Densidad 13,52137 g/cm3 a 25 °C Presión de Vapor 2,77X10-6 atm a 25 °C

8,52 X10-6 atm a 40 °C

Electronegatividad

2,0

Volumen especifico del Vapor saturado de Mercurio (VSM)

30 °C

20°C

Tensión Superficial 4849 µN

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2.2. Acumulación en el ambiente

El mercurio se encuentra en la naturaleza en forma de cinabrio, un sulfuro de mercurio y

en grandes bolsas de mercurio metálico. El sulfuro de mercurio, es prácticamente

inatacable por los agentes atmosféricos (CO2, O2 y H2O) y no participa en el ciclo del

agua. En consecuencia, la incorporación del mercurio a las cadenas tróficas por esta vía

es insignificante (Doadrio, 2009). La liberación del mercurio debido a las diferentes

actividades antrópicas como la minería aurífera ha contribuido de forma significativa a los

niveles altos en el ambiente. Actualmente, los niveles de mercurio en la atmósfera son

entre 3 y 6 veces mayores frente a las concentraciones previas al proceso de

Industrialización (Dórea et al., 2005).

A nivel mundial, la minería artesanal es el principal consumidor de mercurio. En esta

actividad se utilizan alrededor de 1000 ton/año, esto es, 30% más que el mercurio usado

por las otras industrias (Swain et al., 2007). La pequeña minería es una actividad que

trasciende fronteras, atravesando más de 70 países y exponiendo directamente a un

número de mineros que oscila entre 10 y 15 millones (Telmer et al., 2008). En Colombia

se presenta la pequeña y mediana minería de oro en la zona nororiental del departamento

Antioquia, (Remedios, Segovia, Bagre, Zaragoza, Cáceres, Caucasia) (Ministerio de

Ambiente; Vivienda y Desarrollo Teritorial, 2007).

Generalmente, los residuos de mercurio son vertidos en fuentes hídricas o lugares

aledaños (PNUMA Programa mundial de modalidades de asociación sobre el mercurio,

2002) lo cual contamina el ambiente y los recursos alimenticios de los peces y sus

predadores como la nutria, generando un elevado riesgo de exposición a mercurio y

metilmercurio por el consumo de especies potencialmente contaminadas.

En los ambientes acuáticos la bioacumulación y biomagnificación del mercurio son

mayores que los sistemas terrestres. Entre los factores que contribuyen a este fenómeno

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está el hecho de que los peces almacenan la mayoría del mercurio como metilmercurio

(MeHg+) en tejido muscular, hígado y cerebro; mientras que las aves y los mamíferos

terrestres lo almacenan en la piel, plumas, uñas, pelo, elementos pobremente digeridos o

rara vez consumidos. Adicionalmente, las cadenas alimenticias acuáticas poseen más

niveles tróficos y mayor complejidad (Davis et al., 2003).

Al presentarse un mayor número de niveles tróficos, se favorece la transferencia desde

productores hasta consumidores mayores y de esta manera, aumenta la concentración de

sustancias persistentes y bioacumulables a través de la cadena alimenticia (Ruelas et al.,

2005). De acuerdo con la Organización panamericana de la Salud (2011), la mayoría de

los estudios de impactos ambientales de las inundaciones en los embalses muestran

incrementos de los niveles de mercurio en peces de estos reservorios. La creación de

embalses promueve el reciclaje de la carga de mercurio acumulado en el suelo durante

años antes de la inundación, por lo que también actúan como eficientes “incubadoras”

para la metilación del mercurio. Las poblaciones que consumen frecuentemente pescados

nativos de estos embalses pueden estar expuestas a niveles elevados de mercurio

(Gracia H et al., 2010; Olivero et al., 1995).

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Figura 1. Ciclo biogeoquímico del mercurio.

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2.3. Nutria (Lontra longicaudis)

La nutria neotropical o lobito de río es un mamífero perteneciente a la familia Mustelidae,

género Lontra que habita en diferentes ambientes acuáticos, siendo una especie

principalmente ictiófaga (Pardini, 1998). Esta especie se distribuye desde el noroccidente

de México hasta América del Sur. En la Tabla 2 se muestra la distribución de las especies

de Nutrias a nivel mundial.

Tabla 2. Distribución de las especies de Nutrias alrededor del mundo. Adaptado de (Reuther, 2001)

DISTRIBUCIÓN DE ESPECIES DE NUTRIAS A NIVEL MUNDIAL

NOMBRE CIENTÍFICO DISTRIBUCIÓN ESTATUS DE

CONSERVACIÓN

Amblony cinereus Asia Riesgo bajo

Aonix capensis África Riesgo bajo

Aonix congica África No estimado

Enhydra lutris América del Norte y Asia

Amenazada

Lontra canadensis América del Norte

Riesgo bajo

Lontra felina América del Sur Amenazada

Lontra longicaudis América del Centro y Sur

Datos insuficientes

Lontra provocax América del Sur Amenaza crítica

Lutra lutra África, Asia, Europa

Vulnerable

Lutra maculicollis África Vulnerable

Lutra perspicillata Asia Vulnerable

Lutra sumatrana Asia Datos insuficientes

Pteronura brasiliensis América del Sur Amenazada

Es un animal solitario y diurno, construye sus madrigueras cerca a la orilla de los ríos, con

una entrada bajo el agua. Estas madrigueras pueden ser túneles que la nutria emplea

emplea como refugio o nidos cubiertos con densa vegetación (Nowak, 2003; Pardini et al.,

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1999). Su alimentación está basada principalmente en peces, crustáceos y pequeños

mamíferos, aunque también puede alimentarse de algunas aves, anfibios, reptiles y

ocasionalmente de insectos y frutos (Casariego et al., 2006)

La distribución de la nutria neotropical en Colombia está restringida a las vertientes

Atlántica y Pacífica de la región Andina hasta 2.800 msnm, los valles del Cauca y

Magdalena, las cuencas del ríos San Juan, Sinú, Orinoquía y la región Amazónica,

aunque hay reportes de su presencia en varios departamentos, especialmente en los

flancos de las cordilleras Occidental, Oriental y Central desde zonas cálidas y templadas

(Rodríguez et al., 2006).

La nutria neotropical mide entre 90 y 140 centímetros y su peso oscila entre 5 y 24 kilos.

Los machos son aproximadamente un 20% más grandes que las hembras. Su pelaje es

corto y de color pardo canela a pardo grisáceo en el lomo con una o más manchas claras.

En el vientre, el cuello, el labio superior y la mandíbula la coloración varía entre blanco

plateado y amarillo claro. Las patas delanteras son cortas, con cinco dedos, garras fuertes

y membranas interdigitales. Las patas traseras son más grandes que las delanteras. La

cola es larga, cónica, cilíndrica y termina en punta lo cual la diferencia de la nutria gigante

(Fundación OMACHA).

Al estar en la parte superior de la cadena trófica, la nutria ha sido usada como especie

centinela para evaluar la presencia de sustancias químicas bioacumulables en ambientes

acuáticos. En un estudio realizado en Brasil, se intentó relacionar los niveles de mercurio

con la ingesta (Josef et al., 2008). Un segundo estudio enfatizo en los efectos del Hg

sobre la vida silvestre y en otros casos, se estableció una relación dosis-respuesta que se

puede determinar a través de los niveles de este metal pesado a nivel tisular (Wright et

al., 2002).

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3. METODOLOGÍA

3.1. Área de estudio

El embalse Porce II se localiza en los municipios de Gómez Plata, Yolombó y Amalfi,

(Departamento de Antioquia), entre las coordenadas 75º09’14”- 75º04’ 59” W y 6º44’57” -

6º48’45” N ( y ). El embalse está formado por dos ramales principales alargados, que se

unen en un tercero limitado por la presa. El primero, con cerca 1.3 km de longitud y

orientado de sur a norte, está constituido por el río Porce y la quebrada Guaduas. Este

ramal tiene en promedio 8.8 m de profundidad y un área total de 3.0 km2. El segundo

ramal, formado por la quebrada La Cancana y en dirección Este-Oeste, tiene

aproximadamente 5.7 km de longitud, 11.9 m de profundidad media y 1.5 km2 de área. A

partir de la confluencia de estos dos ramales, se origina el tercero o cuerpo principal en

dirección Sureste Noroeste, con longitud cercana a 7.0 km, área de 5.6 km2 y profundidad

media de 34.8 m.

La profundidad máxima del embalse (96.5 m) se encuentra en inmediaciones de la presa.

La torre de captación tiene cinco compuertas deslizantes con borde inferior en la cota

900.4 msnm. La cota de la cresta del vertedero está a 911 msnm. El embalse tiene una

capacidad útil de 96.2 millones de m3 (EPM, 2013).

El embalse Porce III se ubica en el nordeste del departamento de Antioquia,

aproximadamente a 147 km de Medellín, en jurisdicción de los municipios de Amalfi,

Anorí, Gómez Plata y Guadalupe. El área hace parte de la provincia biogeográfica Chocó-

Magdalena, al distrito Nechí y a la provincia biogeográfica Norandina, distrito Tolima. El

río Porce nace en el alto de San Miguel al sur de la ciudad de Medellín a 2.660 m.s.n.m,

atraviesa el Valle del Aburra en dirección noreste y alimenta el embalse Porce II, cuyas

descargas por generación son la principal fuente de alimentación del embalse Porce III,

aunado con el río Guadalupe. El proyecto se encuentra entre los 318 y 680 msnm.

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El río Porce se caracteriza por presentar aguas turbulentas, con reducida transparencia,

un cauce amplio con rápidos y remansos, con buena cobertura vegetal en sus márgenes,

conformada principalmente por árboles y arbustos. A partir del sitio denominado El

Mango, el río tiene un cauce encañonado con una fuerte pendiente hasta la

desembocadura al río Nechí. Durante su recorrido por el Valle de Aburrá, el río recibe

aguas residuales de origen industrial y doméstico.

La geomorfología del valle del río Porce está desarrollada en un cañón profundo en “V”

con laderas amplias, abruptas y asimétricas. Las pendientes son normalmente mayores al

50%, aunque también se presentan sectores semiplanos de pendiente suave. En la zona

de estudio los afluentes del río Porce confluyen casi en forma ortogonal a éste, después

de recorrer tramos cortos con pendientes muy fuertes, drenando áreas pequeñas sobre

terrenos quebrados y escarpados, que dan origen al carácter torrencial de estos afluentes.

Los procesos geomorfológicos predominantes son los deslizamientos superficiales que

afectan el suelo residual, el carcavamiento puntual como consecuencia de la

deforestación y los desprendimientos de roca en sitios afectados tectónicamente.

El relieve es montañoso, con pendientes fuertes, altas y escarpadas, donde factores como

la temperatura, la precipitación, los vientos, la humedad atmosférica, la altitud y la

orientación de las montañas, condicionan el comportamiento del clima a lo largo del valle

del río Porce con periodos húmedos entre abril y mayo y entre septiembre y octubre. Los

tipos de cobertura vegetal son bosques naturales intervenidos, bosques secundarios,

rastrojos, pastos enmalezados y naturales. Los bosques naturales intervenidos se

localizan en las partes altas adyacentes al área de inundación. Esta formación está

compuesta por cerca de 58 especies. Los bosques secundarios, rastrojos y malezas se

localizan a lo largo de las márgenes de los ríos Porce y Guadalupe (EPM, 2002).

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Foto 1. Panorámica del embalse Porce II. (EPM, 2013)

Foto 2. Embalse Porce III. (EPM, 2013)

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3.2. Recolección, transporte y almacenamiento de

muestras

La recolección de muestras se realizó en dos campañas de muestreo de 12 días cada una

durante los meses de octubre y diciembre de 2012. En cada uno de los sectores de

muestreo no navegables se realizaron recorridos a pie en transectos de 1 km. En el

embalse Porce III los recorridos se realizaron con la ayuda de un bote a motor a una

velocidad de 10 km/h e intentando abarcar la extensión total del perímetro del mismo (20

km). Para cada muestra se marcaron las coordenadas geográficas del punto encontrado

con un GPS. Cada sector de muestreo se recorrió dos veces por salida, con el fin lograr

un mayor número de datos y evidenciar remarcaje de sustratos.

Las muestras de heces y mucosidad se depositaron en tubos de 50 ml de polipropileno,

cónicos y de tapa rosca debidamente esterilizados y rotulados, posteriormente se

mantuvieron a 4°C para su posterior análisis en al laboratorio del Grupo de Modelación y

Gestión Ambiental –GAIA- de la Universidad de Antioquia.

Adicionalmente, una parte de cada excreta se depositó en tubos de microcentrífuga con

alcohol al 96%, con el fin de genotipificar a partir de ADN mitocondrial. Esto como parte

de un proyecto paralelo a la determinación de mercurio. La información obtenida mediante

este proceso fue usada como primer parámetro con el fin de individualizar las muestras.

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3.3. Procesamiento de las muestras

En el laboratorio GAIA se empleó el procedimiento de la EPA 245.6 (Environmental

Protection Agency, 1991). Inicialmente, la muestra se homogenizo con el fin de tomar una

submuestra representativa, se almacenó en un tubos de 50 ml de polipropileno, cónicos y

de tapa rosca. Posteriormente se mantuvo en refrigeración hasta su análisis en el

laboratorio. Luego se realizaron los siguientes procedimientos.

a) Liofilización

Mediante este proceso se eliminó el agua contenida en la muestra, por medio de un

proceso de sublimación, es decir pasar el agua de estado sólido (congelada) a gas sin

calentamiento y de esta forma, evitar pérdidas de Mercurio desde la muestra por

evaporación. De esta manera, se garantiza trabajar con peso seco de muestra. Para el

proceso de liofilización primero se congelaron las muestras a -30ºC Aprox. por 24 horas,

para luego ser llevadas al Liofilizador durante 24 horas.

b) Digestión

El proceso de digestión tiene como objetivo degradar y oxidar la materia orgánica y

convertir todas las formas de mercurio a mercurio inorgánico Hg+2 disuelto, mediante la

utilización de ácidos y agentes oxidantes. Inicialmente, se pesó aproximadamente un

gramo de muestra liofilizada en tubos de 50 ml de polipropileno, cónicos y de tapa rosca,

ulteriormente se le adicionaron 10mL H2SO4 concentrado, 4 mL HNO3 concentrado para la

digestión y finalmente con el fin de oxidar se adicionaron 20 mL de solución saturada de

KMnO4 en campana de extracción. Luego, la mezcla se puso en baño de María durante

tres horas a una temperatura entre 100 y 110 ºC.

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c) Cuantificación de Mercurio total

Para la determinación de Mercurio total se utilizó un espectrofotómetro de absorción

atómica con vapor frío, se realizaron lecturas directas de la muestras luego de la adición

de 8 mL de Cloruro estañoso (agente reductor). Con esta sustancia se buscaba convertir

los iones de mercurio Hg+2 a vapor de mercurio Hg0, que es trasladado a la celda del

espectrofotómetro donde es cuantificado utilizando la curva de calibración. Finalmente, se

calculó la concentración teniendo en cuenta el peso de la muestra para ser reportado en

µg/g.

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3.4. Control de calidad de los análisis

Con el fin de asegurar resultados confiables, se siguió el procedimiento P-EA-011

para los controles analíticos a los procesos analíticos desarrollados en el

laboratorio del Grupo de Investigación en Gestión y Modelación Ambiental-GAIA

de la Universidad de Antioquia.

Los controles analíticos utilizados por lote de análisis fueron blanco de análisis,

duplicados del 10% de las muestras. El método requiere la elaboración de una

curva de calibración, la cual se elaboró con un mínimo de 4 puntos y un

coeficiente de determinación no menor a 0.998.

Se analizaron patrones control, los cuales corresponden a concentraciones

ubicadas en los niveles alto, medio y bajo de la curva de calibración, estos se

prepararon a partir de estándar de mercurio trazable al instituto nacional de

estándares y tecnología (NIST, por sus siglas en ingles), como se especifica en

procedimiento analítico y con el fin de verificar la curva de calibrado al igual que la

metodología analítico realizada. Se analizó una submuestra material de referencia

certificado DORM-3 del Consejo Nacional de Investigación de Canadá (NRCC, por sus

siglas en ingles), con un valor certificado de mercurio de 0.382 ±0.060 mg/kg.

La precisión se garantiza mediante al uso de cartas de control intervalo, entre

duplicados usados en cada lote (10%) esta información es acumulativa y verifica que la

dispersión de cada lote sea monitoreada de manera significativa de acuerdo a las

recomendaciones del Instituto Colombiano de Hidrologia, Meteorologia y Estudios

Ambientales (IDEAM)

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Inicio

Análisis de:

Blancos (1),

Patrones (2),

Revisión de Cartas de

control de Blancos y

Estandares

Bitácora de

resultados

Duplicados

(10%), muestras

adicionadas (2)

MRC (según

disponibilidad)

Anomalías

encontradas

Análisis de

muestras

No

Revisión de

condiciones de

análisis

Si

Problemas

solucionados?Si

No

Toma de

medidas

Verificacion de

controles

Cartas de

control

Anomalías

encontradas?

Reporte de

resultadosNo

Revisión de

condiciones de

análisis y detección

de problemas

SiFin

Repetición de

análisis

Inicio

Problemas

solucionados?Si

NoFin

Detener proceso,

Revisión general

Figura 2. Procedimiento de control analítico Grupo de modelación y Gestión ambiental (GAIA) P-EA-011

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3.5. Análisis estadístico

Con el fin de determinar si los datos tenían una distribución normal se utilizó el programa

Statgraphics Centurion XVI (StatPoint Technologies). Debido al reducido número de

datos, se aplicó la prueba no paramétrica de Kruskal-Wallis (Gómez et al., 2003) para

establecer si existían diferencias en los resultados de Hg total de acuerdo a la

procedencia de las muestras (Porce II y Porce III) y al tipo de matriz analizada (heces y

mucosidades) mediante el empleó el programa Statgraphics Centurion XVI (StatPoint

Technologies). Todas las pruebas se consideraron significativas para un nivel p < 0.05.

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4. RESULTADOS

4.1. Recurso Trófico

Mediante las estructuras como placas dérmicas, vértebras, escamas, radios duros,

odontodes, otolitos, dientes, mandíbulas y espinas dorsales encontrados en las heces de

las nutrias neotropical se identificaron las familias Cichlidae (mojarras y afines) y

Loricariidae (cuchas) como los principales recursos tróficos de la nutria , en algunas de

ellas también se identificaron las familias Characidae y Prochilodontidae .

4.2. Individualización de muestras

A partir de los resultados de la caracterización genética con la región control de ADN

mitocondrial de las heces de nutria (EPM, 2013) a 21 muestras, correspondientes al 57%

se les pudo establecer el haplotipo y este se tomó como el primer criterio para

individualizar la procedencia de la muestra, es decir, si las muestras presentan haplotipos

diferentes se asumió que provienen de nutrias distintas. Cuando se encontraron

haplotipos iguales, se tomó como criterio la fecha de muestreo, la localización y la

concentración de mercurio para individualizar la muestra. En consecuencia, si dos

muestras coincidían en el haplotipo, en la fecha de muestreo, en la localización y en el

nivel de mercurio, se asumió que provenían del mismo individuo (Tabla 3).

De acuerdo con estos criterios, se estableció que en Porce III las muestras ubicadas en

las coordenadas N6 53.861 W75 10.221 y N6 53.861 W75 10.221 probablemente

provengan del mismo ejemplar. Aunque los niveles de mercurio fueron diferentes en las

dos excretas, la diferencia podría estar relacionada con el momento y cantidad de

mercurio ingerido en el alimento. Adicionalmente, las muestras ubicadas en las

coordenadas N6 54.857 W75 09.647 y N6 56.168 W75 08.301 provienen de un solo

ejemplar. De esta forma, de las 13 muestras genotipificadas en el área de influencia de

Porce III, 11 presentaron una alta probabilidad de pertenecer a individuos diferentes.

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Los resultados de la genotipificación indican que las ocho muestras tomadas en el área de

influencia de Porce II tienen una alta probabilidad de que provengan de individuos

diferentes. En general, se puede asumir que las 21 muestras de heces y mucosidad de

los dos embalses corresponden a 19 individuos diferentes.

Tabla 3.Tabla de excretas invidualizadas.

EMBALSE HAPLOTIPO MITOCONDRIAL

FECHA DE MUESTREO

COORDENADAS CONCENTRACIÓN Hg (μg/g)

PORCE II

H2 4/12/ 2012 N6 56.590 W75 07.901 0,076

H2 10/10/ 2012 N6 48.971 W75 12.618 0,128

H1 11/10/ 2012 N6 54.857 W75 09.647 0,230

H1 16/10/ 2012 N6 56.168 W75 08.301 0,298

H1 6/12/ 2012 N6 54.836 W75 09.885 0,312

H2 6/12/ 2012 N6 56.140 W75 08.309 0,474

H1 6/12/ 2012 N6 53.861 W75 10.221 0,684

H1 11/12/ 2012 N6 53.861 W75 10.221 1,016

H4 6/12/ 2012 N6 52.513 W75 10.667 0,357

H3 6/12/ 2012 N6 55.570 W75 08.470 0,709

H1 11/12/ 2012 N6 54.371 W75 10.130 0,087

H1 7/12/ 2012 N6 52.349 W75 10.627 0,416

H1 6/12/ 2012 N6 53.129 W75 10.636 0,786

PORCE III

H3 8/12/ 2012 N6 47.421 W75 08.622 NC (0,04) H3 8/12/ 2012 N6 47.305 W75 08.454 0,068 H4 8/12/ 2012 N6 47.305 W75 08.454 0,059 H4 8/12/ 2012 N6 47.770 W75 08.689 0,429 H3 13/12/ 2012 N6 47.770 W75 08.689 0,120 H2 8/12/ 2012 N6 47.305 W75 08.454 0,139 H1 7/12/ 2012 N6 50.066 W75 10.515 0,110 H1 13/10/ 2012 N6 47.306 W75 08.491 0,497

*Mucosidad

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4.3. Concentración de mercurio total en heces y

mucosidad

En este estudio se analizó el contenido de mercurio total en ocho muestras de mucosidad

y veintinueve de heces de la nutria neotropical Lontra longicaudis recolectadas en los

embalses de Porce II y Porce III en octubre y en diciembre del 2012. En las Tabla 4 y

Tabla 6 se puede observar las medidas de tendencia central del contenido de mercurio en

heces y en mucosidad, respectivamente, en el embalse Porce II. Se encontró para haces

un rango de mercurio entre 0,040 y 0,429 (µg/g), con un valor medio ± Desviación

estándar de 0,138 (± 0,133), mientras que en mucosidad el rango fluctuó entre 0,087 y

0,497 (µg/g) y alcanzó un promedio ± Desviación estándar de 0,337 ± 0,219 (µg/g).

Los resultados del análisis descriptivo del contenido de mercurio de las muestras del

embalse Porce III se observan en la Tabla 5 para heces y en la Tabla 6 para mucosa. Las

22 muestras de heces de la nutria neotropical procedentes de este embalse, el mercurio

total varió entre 0,040 y 0,709 (µg/g) y alcanzó un valor medio ± Desviación estándar de

0,275 ± 0,260 (µg/g). En cuanto a las mucosidades colectadas en este embalse la

concentración de este metal varió entre 0,087 y 0,786 (µg/g) con un valor medio ±

Desviación estándar de 0,470 ± 0,313 (µg/g).

Tabla 4. Contenido de Mercurio total en heces de Lontra longicaudis procedentes del

embalse Porce II.

PROCEDENCIA DE LA MUESTRA (COORDENADAS)

CONCENTRACIÓN

de Hg (µg/g)

N6 47.770 W75 08.689 0,429

N6 47.305 W75 08.454 0,059

N6 47.305 W75 08.454 0,139

N6 47.305 W75 08.454 0,068

N6 47.770 W75 08.689 0,120

N6 50.066 W75 10.515 0,110

N6 47.421 W75 08.622 0,040

MEDIA ± DE 0,138 ± 0,133 MEDIANA 0,110

*DE= DESVIACIÓN ESTÁNDAR

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Tabla 5. Contenido de Mercurio total en heces de Lontra longicaudis procedentes del

embalse Porce III.

PROCEDENCIA DE LA MUESTRA

(COORDENADAS)

CONCENTRACIÓN

de Hg (µg/g)

N6 56.575 W75 08.006 0,080

N6 56.575 W75 08.006 0,057

N6 48.918 W75 12.667 0,360

N6 56.590 W75 07.984 0,113

N6 56.590 W75 07.901 0,076

N6 48.971 W75 12.618 0,128

N6 56.582 W75 07.864 0,058

N6 56.650 W75 07.714 0,083

N6 56.140 W75 08.309 0,475

N6 55.570 W75 08.470 0,709

N6 54.836 W75 09.885 0,312

N6 53.861 W75 10.221 0,684

N6 52.513 W75 10.667 0,357

N6 55.452 W75 08.491 0,406

N6 54.857 W75 09.647 0,253

N6 56.778 W75 07.403 0,334

N6 56.590 W75 07.901 0,072

N6 53.861 W75 10.221 1,016

N6 56.676 W75 07.553 0,045

N6 56.640 W75 07.610 0,093

N6 56.632 W75 07.619 0,040 ND

N6 56.168 W75 08.301 0,298

MEDIA ± DE 0,275 ± 0,260

MEDIANA 0,191

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Tabla 6. Contenido de Mercurio total en mucosidad de Lontra longicaudis en los embalses

Porce II y Porce III.

EMBALSE PROCEDENCIA DE LA

MUESTRA (COORDENADAS)

CONCENTRACIÓN de Hg

(µg/g)

PORCE II

N6 47.306 W75 08.491 0,497

N6 47.305 W75 08.454 0,426

N6 48.199 W75 08.836 0,087

MEDIA ± DE 0,337 ± 0,219

MEDIANA 0,426

PORCE III

N6 53.129 W75 10.636 0,786

N6 52.349 W75 10.627 0,416

N6 56.778 W75 07.403 0,269

N6 56.852 W75 07.067 0,790

N6 54.371 W75 10.130 0,087

MEDIA ± DE 0,470 ± 0,313

MEDIANA 0,416

El análisis descriptivo e inferencial para el conjunto de datos de mercurio total en heces y

mucosidad sin diferenciar el sitio de muestreo, mostró que existe una diferencia

estadísticamente significativa entre estas dos matrices.

Figura 4. Concentraciones de Mercurio total en mucosidad de Lontra longicaudis.

Figura 3. Concentraciones de Mercurio total en heces de Lontra longicaudis.

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Tabla 7. Medidas de tendencia central y de dispersión del contenido de Mercurio total en

heces de Lontra longicaudis.

HECES

n=29 MUCOSA

n=8

MEDIA 0,241 0,420

DE 0,241 0,273

MÍNIMO 0,040 0,087

MÁXIMO 1,016 0,790

MEDIANA 0,120 0,421

De acuerdo con los resultados de la prueba de Kruskal-Wallis (prueba no paramétrica)

con un nivel de significancia α=0,05 (IC 95%), no se encontraron diferencias

estadísticamente significativas para la concentración de mercurio entre las heces y

mucosidades en cada embalse, obteniendo un valor P= 0,209 (Figura 5) y valor P= 0,119

(Figura 6) para el embalse Porce II y Porce III respectivamente.

Figura 5. Medianas para Mercurio total en heces y mucosidades de Lontra longicaudis en el embalse Porce II con un Intervalo de confianza del 95%.

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Figura 6. Medianas para Mercurio total en heces y mucosidades de Lontra longicaudis en el embalse Porce III con un Intervalo de confianza del 95%.

Debido a que no se obtuvieron diferencias estadísticamente significativas entre el

contenido de mercurio total entre heces y mucosidades de cada embalse, se realizó la

prueba de Kruskal-Wallis para el contenido de mercurio total entre heces y mucosidades

de ambos sitios de muestreo, registrándose un Valor P= 0,046 (Figura 7). En el estudio de

Elliot et al (2008) no se encontraron diferencias significativas en el contenido de

hidrocarburos clorados en heces y mucosidad de Lontra canadensis (Elliott et al., 2008).

Sin embargo, no se encontraron registros de niveles de mercurio en heces y mucosidad

para Lontra longicaudis.

Por otra parte, mediante el análisis no paramétrico realizado para comparar los niveles de

mercurio total entre los embalses Porce II y Porce III, se encontró que no existen

diferencias estadísticamente significativas (Valor-P = 0,472, prueba de Kruskal-Wallis)

(Figura 8 ).

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Figura 7. Medianas para Mercurio total en heces y mucosidad de Lontra longicaudis con

un Intervalo de confianza del 95%.

Figura 8. Medianas para Mercurio total en los embalses Porce II y Porce III con un Intervalo de confianza del 95%.

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5. DISCUSIÓN A pesar de que la nutria neotropical Lontra longicaudis es considerada una especie

generalista (Kruuk, 2006), en varios estudios se ha establecido que es principalmente

ictiófaga (Josef, 2005; Mayor, 2008; Mayor et al., 2010). En el estudio realizado en

convenio entre las Empresas Públicas de Medellín y la Universidad de Antioquia se

encontraron vestigios de peces en el 100% de las muestras (EPM, 2013). Teniendo e

cuenta que los peces acumulan más del 85% del mercurio en su forma metilada (Pirrone

et al., 2005; Storelli et al., 2002), la nutria al estar en la cima de la cadena trófica está

expuesta a una alta bioacumulación de este metal (Wren, 1986) y los niveles encontrados

en heces y mucosidad en este estudio indicarían una alta cantidad de mercurio tomado

por medio del sistema digestivo.

Entre las familias de peces de mayor consumo por Lontra longicaudis se encuentran los

cichlidae (mojarras y afines), characidae (sabaletas), Loricariidae (cuchas) (Empresas

Públicas de Medellín, 2013; Josef, 2005). La familia cichlidae presenta una alta

abundancia en la zona, principalmente en los embalses Porce II y Porce III.

Como se infiere en la Tabla 8 y en la publicación de (Wren, 1986) la mayoría de los

estudios determinaron el mercurio en tejidos, especialmente en hígado. Solo pocas

referencias incluyen el análisis del contenido de mercurio en heces y en ningún estudio se

encontró el uso de mucosidad como biomonitor. De 16 referencias bibliográficas incluidas

en la Tabla 10, solo en 4 se hace referencia al contenido de mercurio en heces y solo en 3

se analizó el contenido de mercurio en heces de la nutria Lontra longicaudis.

Desafortunadamente aún no se tiene información sobre la relación de mercurio en heces

y las concentraciones de mercurio en otros tejidos.

Tabla 8. Estudios previos sobre concentración de mercurio en diferentes especies y tejidos de nutrias.

ESPECIE TIPO DE [Hg] (µg/g) PAÍS AUTOR

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MUESTRA

Lutra lutra Heces 0,25—0,74 Escocia (Mason y MacDonald,

1986)

Lontra longicaudis annectens* Heces 0,02—0,17 México (Ramos et al., 2013)

Lontra longicaudis Heces 0,08—0,74 Brasil (Josef et al., 2008)

Lontra longicaudis Heces 0,07—0,25 Brasil (Waldemarin, 1999)

Lontra canadensis Hígado 3,46—12,60 Estados Unidos (Grove et al., 2008)

Lutra lutra Hígado 0,40—8,10 Francia (Lemarchand et al., 2010)

Lutra lutra Hígado 0,02—2,64 República Checa, Asuria y Hungría

(Gutleb et al., 1998)

Lutra lutra Riñón 0,04—0,870 República Checa, Asuria y Hungría

(Gutleb et al., 1998)

Lutra lutra Hígado 0,30—44,70 Escocia (Kruuk et al., 1997)

Lontra canadensis Cerebro 0,30—18,00 Canadá (Haines et al., 2010)

Lontra canadensis Pelo 4,00—20,00 Canadá (Evans et al., 1998)

Lontra canadensis Piel 0,30—10,00 Canadá (Evans et al., 1998)

Lontra canadensis Hígado 1,10—24,00 Canadá (Evans et al., 1998)

Pteronura brasiliensis Pelo 2,94—3,68 Brasil (Dias Fonseca et al.,

2005)

Pteronura brasiliensis Hígado 1,52—4,30 Brasil (Dias Fonseca et al.,

2005)

Pteronura brasiliensis Riñón 1,11—4,59 Brasil (Dias Fonseca et al.,

2005)

Lutra lutra Hígado Nd—29,54 Hungría (Lanszki et al., 2009)

*Estudio realizado con ejemplares procedentes de áreas protegidas.

En este estudio la concentración de mercurio en heces osciló entre 0,04-1,016 (µg/g). Al

comparar estos resultados de mercurio en las heces de la nutria Lontra longicaudis en

Porce II y Porce III con los reportados en la literatura para heces, se puede observar que

tuvo un rango mayor y que el valor máximo de 1,016 (µg/g) es más alto que los

reportados en la literatura lo cual es de destacar dado que da cuenta de que hay

ejemplares que están teniendo una mayor exposición al mercurio.

Por otro lado, al comparar el rango de valores encontrado con los reportados por (Ramos

et al., 2013) en áreas protegidas, puede evidenciarse que los valores de este estudio son

considerablemente más altos y en consecuencia, se puede afirmar que efectivamente las

nutrias que habitan los embalses Porce II y Porce III están expuestas a altos niveles de

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mercurio a través de la ingesta . Esta situación debe generar una alerta dado los efectos

negativos que tiene el mercurio sobre los organismos.

Los efectos inducidos por el mercurio dependen de la forma en que se encuentre, la

duración y la ruta de exposición (Fowler et al., 2007). En diferentes especies se ha

encontrado efectos teratogénicos como malformaciones y abortos (Hoffman et al., 1979);

neurotóxicos generando ataxia, estado de inconciencia e incluso muerte (Heinz, 1996;

Wren et al., 1987); genotóxicos desencadenando clivaje de cromosomas, micronúcleos,

aneuploidias y poliploidias (Betti et al., 1992; Das, 1982; Hurtado et al., 2007),

clastogénicos (Leonard et al., 1983); inmunotóxicos afectando la proliferación de las

células T y disminuyendo la viabilidad de los monocitos y macrófagos (Shenker et al.,

1992) y como disruptor endocrino (Leonard et al., 1983; Wolfe et al., 1998; World Health

Organization, 2008). En un estudio con Brycon henni en el embalse Porce II, con el fin de

evaluar la presencia de micronúcleos en sus eritrocitos, se encontró un efecto

clastogénico debido a la contaminación (Hurtado et al., 2007). Ahora, si se tiene en cuenta

que la nutria se alimenta básicamente de peces, puede dimensionarse los posibles

efectos adversos que se pueda estar generando y que se van a generar en esta población

de nutrias.

La Organización Mundial de la Salud define un disruptor endocrino como “una sustancia

exógena o mezcla tal que altera la función del sistema endocrino y como consecuencia

causa efectos adversos en la salud de un organismo y su progenie” (Programa de las

Naciones Unidas para el Medio Ambiente y la Organización Mundial de la Salud, 2012).

En la literatura consultada no se encontró información sobre los efectos del mercurio

como disruptor endocrino para la nutria específicamente, pero se destacan los estudios

con otras especies, especies como Eudocimus albus (ibis blanco americano), Macaca

mulatta (macaco Rhesus), Gavia immer (colimbo grande), entre otras. (Chan et al., 2003;

Jayasena et al., 2011; Khera, 1979; Wolfe et al., 1998). Entre los efectos a destacar se

encontró que interrumpe la síntesis de hormonas, afecta la fertilidad de la hembra y el

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macho (Tan et al., 2003). En casi todos los estudios donde se pretendía estudiar el

mercurio como disruptor endocrino, se comprobó que actúa como tal (Darbre, 2006; Fynn-

Aikins et al., 1998).

Tan et al, (2003) en un estudio sobre los efectos del mercurio en los sistemas endocrino,

reproductivo, tiroideo y adrenal, encontraron cinco mecanismos relacionados con la

exposición a mercurio los cuales son: (a) Acumulación en el sistema endocrino; (b)

citotoxicidad específica en tejidos endocrinos; (c) cambios en la concentración hormonal;

(d) retroalimentación positiva y negativa en la enzimas de la vía de esteroidogénesis (Tan

et al., 2009).

La cinética de los tóxicos consta de cuatro pasos generales los cuales son: Absorción,

Distribución, Metabolismo y Excreción (Doadrio, 2009). En particular la toxicocinética del

metilmercurio vía oral se presenta en la Tabla 9.

Tabla 9. Toxicocinética del metilmercurio (MeHg+) por vía oral (Council, 2000; Patrick,

2002).

ABSORCIÓN Oral

Se absorbe aproximadamente un 95% en el tracto gastrointestinal.

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DISTRIBUCIÓN Distribución general debido a su lipofilicidad. Aproximadamente 1-10% de la dosis absorbida vía oral se distribuye al torrente sanguíneo y un 90% de este en eritrocitos. Complejo MeHg-cisteína envuelta en el transporte del MeHg+ al interior de la

célula. Vida media en sangre 50 días Aproximadamente 50% de la dosis absorbida vía oral es encontrada en hígado. Aproximadamente 10% de la dosis absorbida vía oral es encontrada en cerebro. Atraviesa fácilmente las barreras hematoencefálica y placentaria.

BIOTRANSFORMACIÓN Desmetilación de MeHg+ a ión mercúrico (Hg2+) mediante mecanismos

desconocidos en macrófagos tisulares, flora intestinal e hígado del feto. Desmetilasas bacterianas descritas ampliamente. Ninguna en mamíferos caracterizada hasta ahora.

METABOLISMO

Excreción de la carga corporal de 1% diario. Principal ruta de excreción es mediante la bilis y las heces. 90% excretado en heces Una vez en el intestino debido al ciclo enterohepatico aproximadamente el 70% del metilmercurio reingresa a torrente sanguíneo y a hígado. Este proceso es el que determina su lenta eliminación dando lugar a un riego elevado de acumulación 10% excretado en orina

VIDA MEDIA DE ELIMINACIÓN (Carga corporal total) 70-80 días; depende de la especie, la dosis, el sexo y la cepa.

Por otro lado, el hecho de que el promedio de mercurio total en las muestras de heces y

mucosidades procedentes del embalse Porce II sea menor al alcanzado en las muestras

colectadas en el embalse Porce III puede deberse, en parte, a la diferencia en el número

de datos. No obstante, las nutrias en el embalse Porce II se encuentran congregadas en

unos pocos puntos y además tienen libre flujo a otros sitios en donde no se recogieron

rastros en este estudio (Carolina Zapata, comunicación personal, 2013).

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La ausencia de diferencias estadísticamente significativas en los resultados de mercurio

total en heces y mucosidades de nutria entre Porce II y Porce III (P=0,47), puede estar

asociada a niveles de contaminación del recurso trófico en estos dos embalses.

Teniendo en cuenta que según los resultados hay una evidente exposición a mercurio en

los embalses Porce II y Porce III, puede pensarse que la población de la nutria en el

embalse Porce II se haya visto afectada por la exposición a mercurio y a otras sustancias

a lo largo de los años. En estudios sobre la nutria eurasiática (Lutra lutra) se encontró que

contaminantes como el mercurio tuvieron una influencia importante en el declive de la

población de estas (Gutleb, 2000; Mason y MacDonald, 1986).

Por otro lado, al no tener una línea base de la población de Lontra longicaudis en los

embalses Porce II y Porce III se evidencia la necesidad de tener este estudio como el

estado actual de la Población y de esta manera ir monitoreando la concentración de

mercurio en heces y mucosidad de esta especie para realizar un comparación con lo que

se encontró hasta el presente.

Teniendo en cuenta la presencia de mercurio y que la especie Lontra longicaudis se

encuentra en categoría vulnerable para Colombia (Rodríguez et al., 2006) y que dados los

pocos estudios sobre esta especie a nivel mundial la IUCN no tiene datos suficientes para

establecer su situación actual (Waldemarin et al.), es importante generar una alerta sobre

la necesidad de conocimiento de su situación actual y su futuro en la zona.

En cuanto a la diferencia significativa encontrada entre los dos tipos de muestras (Valor-

P= 0,046), siendo mayor la concentración de mercurio en mucosidad, con base en la

bibliografía consultada se encontró que las células epiteliales que recubren el intestino

tienen una función muy importante como barrera protectora frente a agentes agresores.

El revestimiento de la mucosidad es el primer sitio de la exposición a un agente tóxico y

las células que recubren el tracto gastrointestinal responden a estos compuestos tóxicos

mediante una rápida proliferación. Los factores que dan cuenta de la capacidad del tracto

gastrointestinal para escapar de daño incluyen su capacidad de biotransformar compuesto

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debido a que la gran área superficial permite un amplio contacto entre el compuesto tóxico

y múltiples enzimas que metabolizan la toxina.

Puesto que el epitelio del tracto gastrointestinal es la primera capa de células huésped

para ponerse en contacto con compuestos ingeridos, estas células pueden responder a

compuestos tóxicos antes de entrar en la circulación. Las células epiteliales también

pueden someterse a cambios bioquímicos que les permiten reconstituir funcionalmente

integridad de la mucosidad después de una agresión tóxica (Haschek et al., 2013).

Con base en esto, se puede pensar que el contenido de mercurio encontrado en las

mucosidades es un mínima parte de lo que permanece y se compartimentaliza en la

nutria, biomagnificándose y generando una exposición crónica.

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Figura 9. Mapa de distribución de la concentración de mercurio en heces y mucosidad de Lontra longicaudis en los embalses Porce II y Porce III.

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6. CONCLUSIONES

Con base en las concentraciones de mercurio hallados en heces y mucosidades de

Lontra longicaudis en los embalses Porce II y Porce III, puede concluirse que esta

especie está evidentemente expuesta en forma crónica a este metal como resultado

del consumo de peces contaminados.

Los resultados del estudio y particularmente la posibilidad de utilizar procedimientos

no invasivos como heces y mucosidades para la evaluación de la presencia de

mercurio en la nutria, evidencian claramente un potencial del empleo de estas

matrices como biomonitores y esta especie como indicador de contaminación por

mercurio debido a su posición en las redes tróficas acuáticas.

El área de distribución geográfica de Lontra longicaudis indica que esta especie se

encuentra en zonas afectadas por la minería aurífera artesanal, en la cual se emplea

frecuentemente mercurio. En estas circunstancias, se podría emplear esta especie

como indicador de contaminación por mercurio en un programa de monitoreo a una

escala geográfica mayor.

Según los resultados de los haplotipos usados para la individualización de muestras,

puede pensarse que la población tiene una diversidad genética baja y que por lo tanto

podría presentar una alta vulnerabilidad a la exposición crónica mercurio y a la

fragmentación debido al cambio de un cuerpo de agua lótico a uno léntico.

En estas circunstancias, podría afirmarse que la población de Lontra longicaudis del

área de influencia de los embalses Porce II y Porce III tiene un riesgo de ser diezmada

como resultado de los efectos crónicos del mercurio asociados a su capacidad de

bioacumulación, biomagnificación, a su capacidad teratogénica, mutagénica y a sus

efectos como disruptor endocrino .

La carencia de información sobre el tema en Colombia y las pocas referencias

bibliográficas disponibles en el mundo para Lontra longicaudis indican que este

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estudio es pionero en nuestro país y podría considerarse como una línea base para la

población de nutria en estos embalses y en áreas afectadas por la minería aurífera.

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7. RECOMENDACIONES Es importante utilizar la información obtenida mediante este estudio y la obtenida en el

proyecto de Monitoreo de las poblaciones de nutria (Lontra longicaudis) en el área de

influencia del embalse Porce III (EPM, 2013) con el fin de correlacionar las diferentes

variables como: sexo, ubicación dentro del embalse y contenido de mercurio con el fin de

llevar una línea en el tiempo respecto al comportamiento y las fluctuaciones que pueda

tener esta.

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8. BIBLIOGRAFÍA

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9. ANEXOS

9.1. Fotografías

Foto 3. Heces de Lontra longicaudis

(Foto donada por Carolina zapata)

Foto 4. Lontra longicaudis (Foto donada por

Carolina zapata)

Foto 5. Mucosidad de Lontra longicaudis (Foto donada por Carolina zapata)

9.2. Estandarización de la metodología

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Dado que la metodología corresponde a un ensayo normalizado en EPA 245.6

(Environmental Protection Agency, 1991), solo se verificaron los parámetros

linealidad, precisión, exactitud y límite de cuantificación:

La linealidad, se estableció mediante el análisis grafico de la relación Masa de Hg

Vs Absorbancia luego de realizar ensayos por triplicado de soluciones estándar

con diferente cantidad (conocida) del analito. Como criterio de aceptación se

definió un coeficiente de determinación (r2) mayor o igual a 0.995.

La precisión se evaluó mediante el análisis de tres patrones a los niveles alto,

medio y bajo del rango de trabajo este análisis se realizó por triplicado en tres

días diferentes. El criterio de aceptación fue porcentajes de coeficiente de

variación (%CV) menores a 30% para el rango más bajo, y menores a 10% para

el rango alto de acuerdo a los lineamientos de la Asociation Of Analitycal Chemists

(AOAC).

Nivel Valor

Nominal (ug Hg)

DIA 1 DIA 2 DIA 3 %CV

Bajo 0,025 0,03 0,03 0,03 7,33

y = 3,8933x + 0,0492

R² = 0,9983

0

0,5

1

1,5

2

2,5

3

3,5

0 0,2 0,4 0,6 0,8 1

Ab

so

rba

nc

ia

Cantidad de Hg (g)

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0,03 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02

%CV 7,95 3,68 9,16

Medio 0,20

0,21 0,17 0,20

6,39 0,20 0,21 0,20

0,20 0,20 0,20

%CV 2,80 11,88 1,13

Alto 0,40

0,40 0,40 0,40

2,59 0,40 0,39 0,40

0,37 0,40 0,40

%CV 4,52 0,61 0,87

Igualmente, se realizaron análisis de muestras (liofilizadas) por triplicado:

La exactitud se confirmó mediante el análisis de 10 réplicas del material de

referencia certificado (MRC) de la matriz tejido biológico (proteína de pez DORM-3)

proporcionado por el National Research Council Canada (NRCC). Como criterio de

aceptación se estableció un porcentaje de recuperación (%R) entre el 85 y el 110% con

respecto al valor certificado.

Hg (ug/g)

MUESTRA DIA 1 DIA 2 DIA 3 %CV

FQ-093-11 (musculo de

tortuga)

2,81 2,26 2,78

7,91 2,34 2,67 2,69

2,53 2,46 2,80

%CV 9,24 8,32 2,13

FQ-152-11 (ostras)

0,20 0,19 0,22

15,06 0,19 0,16 0,19

0,26 0,24 0,19

%CV 18,26 20,55 8,66

FQ-168-11 (heces)

0,09 0,08 0,12

25,99 0,12 0,15 0,10

0,07 0,09 0,14

%CV 27,53 35,49 16,67

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DORM-3: Fish Protein Certified Reference Material for trace

Metals

Valor de Referencia (ug Hg/g) :0,382 ± 0,06

Nº ug Hg/g %R

1 0,460 120,4

2 0,426 111,5

3 0,391 102,5

4 0,365 95,5

5 0,401 104,9

6 0,358 93,7

7 0,384 100,4

8 0,423 110,6

9 0,426 111,4

10 0,413 108,2

0,404 105,669

El límite de cuantificación (en de Hg), se estableció como diez veces la señal

ruido (s), mediante el análisis de 10 blancos y el uso de la pendiente de la curva de

calibración. (b) (LC=10*(s/b))

Nº Blanco

Absorbancia

1 -0,002221

2 0,009373

3 0,01506

4 0,015368

5 0,010321

6 0,023809

7 0,002446

8 -0,005213

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9 -0,010742

10 0,001422

s 0,011

LD 0,008

LC 0,027