medición de productos de microorganismos
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Medición de Productos de Microorganismos. Microbiología de los Alimentos Jesús Ignacio Tanino Gutiérrez Sergio Díaz Almanza. A diferencia de la microbiología general y de alimentos, la microbiología industrial estudia las aplicaciones positivas de los microorganismos. - PowerPoint PPT PresentationTRANSCRIPT
Medición de Productos de Medición de Productos de MicroorganismosMicroorganismosMicrobiología de los Alimentos
Jesús Ignacio Tanino GutiérrezSergio Díaz Almanza
Microbiología IndustrialMicrobiología Industrial A diferencia de la microbiología
general y de alimentos, la microbiología industrial estudia las aplicaciones positivas de los microorganismos.◦Servicios, eliminación de residuos.◦Producción de sustancias con interés
económico (metabolitos primarios y secundarios)
◦Análisis, desarrollo de biosensores
Metabolitos primarios
Metabolitos secundarios
Aplicaciones de los Aplicaciones de los microorganismos en la Industriamicroorganismos en la Industria Bebidas alcohólicas: Saccharomyces Ácido láctico y productos lácticos:
Lactobacillus Ácido acético: Acetobacter Aminoácidos: Conybacterium Depuración de aguas residuales:
Bacterias aerobeas Biosensores(análisis de glucosa):
Aspergillus Hormonas (insulina humana):
Escherichia
ImportanciaImportanciaAfectan la calidad del
alimento Productos deseables
◦ Afectan Características organolépticas
◦ Maximizar su producción
◦ Controlar concentraciones
Productos indeseables◦ Afectan Características
organolépticas◦ Causantes de
enfermedades◦ Evitar su producción
El sabor avinagrado indica mala calidad, límites de 14% en vinos
Técnicas para la medición de los Técnicas para la medición de los productos derivados de productos derivados de microorganismosmicroorganismos Titulación Cromatografía Líquida de Alta
eficacia Espectroscopia de masas Electroforesis Cromatografía de capa fina Cromatografía de gases
TITULACIÓN
Análisis volumétrico
Conocer concentración de reactivos conocidos
Reactivo titulador de concentración conocida
Indicador
TITULACIÓNTITULACIÓN Productos
cuantificables:◦ Peróxidos◦ Acido acético◦ Acetaldehído◦ Fenoles◦ Ácido glutámico◦ Ácido Láctico◦ Aminas◦ Ácido cítrico
Rancidez alimentos altos en grasas
Sabor avinagrado Olores
desagradables Antioxidante Aminoacido esencial Sabor en
fermentación láctica
HPLCHPLC
Cromatografía líquida de alta eficacia
HPLCHPLC Productos:
◦ Indol◦ Riboflavina◦ Lisina◦ Sorbosa◦ Aflatoxinas◦ Fumonisina
Olores desagradables
Vitamina benéfica para la piel y la vista
Aminoácido esencial
Micotoxinas
ESPECTROSCOPIA DE ESPECTROSCOPIA DE MASASMASAS
Espectroscopia de masasEspectroscopia de masas Glicerol
En análisis rutinarios es utilizado el método fluorimétrico
Subproducto en la fermentación alcohólica
Indicador de adulteración
DensímetroDensímetro Gay-Lussac
◦ Etanol
Para determinar el momento de la fermentación en que se encuentra el vino
ElectroforesisElectroforesis Técnica separación moléculas dado por
su movilidad en un campo eléctrico utilizando un medio gelatinoso.
Utiliza: Identificación y cuantificación ADN, aminoácidos, proteínas, vitaminas.
Ejemplos microorganismos: Lactobacillus, Propionibacterium, Pseudomonas
Es una técnica sensible, se debe tener cuidado con la temperatura, la corrida de gel, preparación de muestras.
ElectroforesisElectroforesis
Cromatografía capa finaCromatografía capa fina Se utiliza una placa de cromatográfica
inmersa verticalmente en un solvente apolar. La placa de cromatografía consiste en una
fase estacionaria polar (sílica gel) adherida a una superficie solida con algún agente cementante.
Identificación por cambio de color de la placa de cromatografía y ascendencia por capilaridad.
Identificación y aislamiento de péptidos y aminoácidos, asi como metabolitos primarios.
Ejemplos microorganismos: Streptomyces sp. , Bacillus sp., Aspergillus niger.
Se debe tomar en cuenta que agente apolar se utilizara, por su precio y toxicidad.
Cromatografía capa finaCromatografía capa fina
Cromatografía de gasesCromatografía de gases La muestra que se va a analizar se volatiza
para después inyectarse en “la cabeza” de una columnade cromatografía.
El gas inerte dentro de la columna cumple su función de mover la muestra volatizada alrededor de la columna para ser identificada y cuantificada.
Es importante elegir el gas inerte por su pureza, costo, disponibilidad y adecuado para el detector que se utilizara.
Identificación y cuantificación de etanol, ácidos orgánicos, sistemas bioquímicos.
Ejemplos microorganismos: Pseudomonas sp., Saccharomyces sp., Zymomonas sp., y Lactobacillus sp.
Cromatografía de gasesCromatografía de gases
Cromatografía capilar Cromatografía capilar electrocinética micelarelectrocinética micelar Combina las técnicas de electroforesis capilar con
HPLC. Logran separaciones efectivas utilizando
microvolúmenes. No es necesario las altas presiones de bombeo
que requiere HPLC. Separa especies con carga y sin carga. También se forman micelas por tensoactivos
(dodecil sulfato de sodio), que atrapan a los compuestos hidrofilicos(afuera de la micela) y compuestos hidrofoboficos(dentro de la micela).
La cuantificación e identificación se determina por la velocidad de migración y los picos de limite de detección.
Cuantificación e identificación aminoácidos, vitaminas, fármacos.
Cromatografía capilar Cromatografía capilar electrocinética micelarelectrocinética micelar
BibliografíaBibliografía Gabriel Hancu et al. (2012) Simultaneous separation of ciprofloxacin, norfloxacin and ofloxacin by micellar electrokinetic chromatography
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