mechanismy pam Ěti
TRANSCRIPT
MECHANISMYPAMĚTI•Fyziologiesynaptickéhospojení
•Mechanismyjednoduchéhoučeníumodelovéhoorganismu(Aplysie)
•Synaptickáplasticitausavců
•Dlouhodobápotenciace– LTP
•VztahLTPapaměti
KONCEPCEPAMĚTIJAKOSCHOPNOSTIMODIFIKOVATSVÉCHOVÁNÍNAZÁKLADĚ
ZKUŠENOSTI
• Weconsiderlearningtobeanadaptivechangeinbehaviorcausedbyexperience
• Memoryreferstotheinternalstorageandrecallofpreviouslylearnedbehaviors.(Forgettingisthelossofstorageorrecall.)
• Modifikacechovánímásvůjzákladvplastickýchzměnáchvčinnostinervovýchspojů(synapticképlasticitě),kteréjsoupodklademzměnvchování.
SYNAPSE
SYNAPTICKÁSPOJENÍ
• Chemickásynapse‐ příkladnervosvalovéspojení– docházízdekvýlevuneuropřenašeče
• Elektrickásynapse– gapjunction –elektrickýsignálpřecházízjednébuňkynadruhou‐ konexinové můstky,vCNSnaneuronech,glii,hojněubezobratlých
• Synaptickáplasticita– dobředoloženánachemickýchsynapsích.
ELEKTRICKÁSYNAPSE– GAPJUNCTIONŠTĚRBINOVITÉSPOJENÍ
ELEKTRICKÁSYNAPSE– ŠTĚRBINOVITÉSPOJENÍ
• Příménízkoodporovéelektricképropojenídvoubuněk– H2O,ionty,malémolekuly
• ‐ ztohovyplývá– absencesynaptickéhozpoždění,typickéhoprochemickousynapsi.
• Méněmechanismůproplasticitu• Avšakexistujíusměrňujícígapjunctions,prokteréjevodivostvjednomsměrupodstatněvyššínežvdruhém
Glie,neurony,vývoj,dospělost
CHEMICKÁSYNAPSE
• Obecněvzatosejednáospojeníjednénervovébuňkysjinou,popř.sjinouefektorovoubuňkou(svalovou,žlázovou)
• Lidskýmozekobsahujeřádově1014 synapsí(100‐500triliónů)
• Ch.S.Sherrington – autortermínusynapse(řecké„syn“‐spoluahaptein“– obejmout,stisknout).
• Typickýneurontvořířádovětisícesynapsí.
• Axodendritické,axo‐axonální,axosomatické,atd.
• Synaptickézpoždění(cca1ms)– dobapotřebnákevtokuvápníkudozakončeníakfůzi synaptickýchvezikulů smembránou
CHEMICKÁSYNAPSE
CHEMICKÁSYNAPSE
• Akčnípotenciálnapresynaptickémneuronu‐>depolarizacenervovéhozakončení,vstupCa2+ dozakončení
• Neuropřenašeč skladovánvsynaptickýchváčcích(vesicles)
• Výlevneuropřenašeče – fůze membrányvezikulu smembránouterminály(SNARE,SNAPproteinyatd.)
• Kvantovýobsah(uvolněnýpočetkvant)‐ Kvantovávelikost(početmolekulvkvantu)
• Difúzeneuropřenašeče skrzeštěrbinu,vazbanapostsynaptickéreceptory.
• Odpověd
NERVOSVALOVÉSPOJENÍJAKOMODELOVÁCHEMICKÁSYNAPSE
• Nervosvalovéspojení,ploténka(motorendplate,neuromuscular junction)– klasickýpreparátstudovanýtéměřodpolovinyminuléhostoletí.
• Motorickýaxontvořísynapsinakosternímsvalovémvlákně.
• Přenašečemjeacetylcholin,kontrasnmiter ATP,postsynapticky vázánnaacetylcholinovéreceptorynikotinovéhotypu(nAChR)
• Tentopřenosjepostsynapticky inhibovánpomocíkurare
• VýlevAchblokovánnapř.botulotoxinem(enzymatickýjed),interferujesmechanismemvýlevu
• nAchR – ionotropní receptor– tvoříkationtovýkanál
NERVOSVALOVÉSPOJENÍ
• Výlevacetylcholinu– 1váčekodpovídájednomukvantu– obsahujecca30000molekulAch
• Evokovanýploténkovýpotenciál>výlev mnohakvant
• Spontánníminiaturníploténkovýpotenciál(miniatureendplate potential ‐MEPP)– občasnýspontání výlevjednohokvanta– vyvolánasvalupodprahovoupřechodnoudepolarizaci
NERVOSVALOVÉSPOJENÍ
• Výlevacetylcholinu– 1váčekodpovídájednomukvantu– obsahujecca30000molekulAch
• Evokovanýploténkovýpotenciál>výlev mnohakvant
• Spontánníminiaturníploténkovýpotenciál(miniatureendplate potential ‐MEPP)– občasnýspontání výlevjednohokvanta– vyvolánasvalupodprahovoupřechodnoudepolarizaci
• Achuvolňovántakénekvantově(non‐quantal release)objeviteléKatzaMilediasoučasněVyskočilaIllés.JednáseokontinuálnísekreciAch,patrněpřesacetylcholinovývezikulárnítransportér.
SYNAPSE
CHEMICKÉSYNAPSEVCNS
• Nachemickésynapsinajdemeřaducílovýchstrukturnakterýchlzezesilovatsílupřenosu(synaptickáplasticita)
• Např.zesíleníodpovědireceptorůjejichfosforylací,insercínovýchreceptorůdomembrány,desensitizace receptoru,popř.zvětšenímkvantovéhoobsahupresynapticky– retrográdnímsignálem
SYNAPTICKÉSPOJENÍ
• Excitačníainhibičnísynapse
• Postsynaptickýpotenciál
• Depolarizace,hyperolarizace
• Sumacečasováaprostorová
A population field potential (“EPSP”) evoked in the dentate gyrus
Stimulus artefact
Population spike
EPSP
SYNAPTICKÁPLASTICITA
• Jepravděpodobněmechanismem,jakýmjsouuchováványinformacevpaměti.
• Mohlabybýtpodklademnejenučeníapaměti,aleidlouhodobějšíchvzorcůchování.
• Plasticitamávýznampatrněivdrogovézávislostianapř.idlouhodobéaneuropatickébolesti
• Jepřístupnáexperimentálnímuzkoumání,dáseměřitnapř.elektrofyziologicky
SYNAPTICKÁPLASTICITA
• Synaptickáplasticitajedefinovánajakoschopnostsynapsezměnitsvojisynaptickousílu(synapticstrength)vzávislostinavlastníaktivitě
• Synaptickásíla• jemírazměnypostsynaptickéhopotenciáluevokovanéhoaktivacípresynaptickéhozakončeníanáslednýmvýlevemneuropřenašeče.
• Defacto,účinnost,efektivitasynaptickéhopřenosu
• Změnadráždivostipostsynaptickémembránydanáopakovanouaktivacípresynaptickéhoapostsynaptickéhoneuronu• (tatodefiniceseblížípojetíHebba).
SYNAPTICKÁPLASTICITA
• SantiagoRamónyCajal(1852‐1934)bylvroce1894prvním,kdonavrhlpředstavu,žeučenínenízprostředkovánopřírůstkempočtuneuronů,alekezměněsilspojenímezitěmitoneurony.
• Aždodruhépoloviny20.stoletínemělivědcinástroje,jaktytozměnyměřit
HEBBŮV ZÁKON
Cellsthat fire toghether,wire together“
• Hebbův zákon
(Hebb,D.O.(1949)TheOrganizationofBehavior,JohnWiley&Sons,Inc.,N.Y)
• „WhenanaxonofcellAisnearenoughtoexciteacellBandrepeatedlyorpersistentlytakespartinfiringit,somegrowthprocessormetabolicchangetakesplaceinoneorbothcellssuchthatA'sefficiency,asoneofthecellsfiringB,isincreased.“
• Hebbovská synaptickáplasticitabylastudovánačastounižšíchživočichů,např.Aplysie (E.Kandel)‐ Velkéneurony,definovanáspojení,apod..
MARRŮVMODELFORMOVÁNÍPAMĚŤOVÝCHSTOP(1971)
"Simple memory: a theory for archicortex." Phil. Trans. Royal Soc. London, 262:23-81 (1971)
DavidCourtnayMarr (1945‐1980) – britskýneurobiologapsycholog,zabývalsepředevšímviděním.
Vr.1971navrhnulautoasociativnímodelarchikortikální(hipokampální)reprezentacepaměti,kdyaktivovanéneuronyvytvářelyvzájemnáspojenínazákladězvýšenísynaptickéúčinnostianásledněpovytvořenísítěstačilaaktivacečástibuněkkobnovenífunkcecelésítě.
Modelzaložennamodifikacisynaptickýchspojenípomocízkušenosti,umožňovalvybavenípaměťovéstopyinazákladěčástečnéinformace.
Modelsestalvýchodiskempromnohohypotézofunkcihipokampu,znichžněkterébylypotvrzeny.
MECHANISMYSYNAPTICKÉPLASTICITY
Mechanismů,kterévedouksynapticképlasticitě,jemnoho.
• fosforylacereceptorů,
• zvýšeníintracelulárníhoCa2+,
• vkládáníreceptorůdosyn.štěrbiny,
• syntézanovýchbílkovin,
• zvýšenípočtusynaptickýchknoflíků,
• rašeníkolaterálníchvláken(sprouting)
• zvýšenívýlevuzpresynaptickéterminályprostřednictvímretrográdníhosignálu
STUDIUMPLASTICITYUJEDNODUCHÝCHORGANISMŮ‐ APLYSIACALIFORNICA
• Několiktisícsnadnoidentifikovatelných,poměrněvelkýchneuronů.
• Zpravidlasestudujeodpověd žaber(gill)napodrážděnísifonu(siphon),kterýmzvířenasáváafiltrujemořskouvodu.Někdyvědcistudujíizatahovánísifonu
• Sifonjeinervovánsenzorickýmneuronem(LEmechanosenzorem),kterýjesynaptickyspojenspostsynaptickýmmotorickýmneuronem(L7)inervujícím žábry
MECHANISMYJEDNODUCHÉHOUČENÍUMOŘSKÉHOZEJE
(APLYSIA)
EricKandel– Nobelovacenazalékařstvíafyziologii(r.2000)
HABITUACEZATAHOVACÍHOREFLEXUŽABERUAPLYSIE
Přiopakovanémdrážděnídošlojakkesníženíbehaviorálníchodpovědí,takkesníženíamplitudypostsynaptickéhopotenciálu.
KLASICKÉ(PAVLOVOVSKÉ)PODMIŇOVÁNÍZATAHOVACÍHOREFLEXUSIFONUU
APLYSIE
SYNAPTICKÉZMĚNYVDŮSLEDKUUČENÍUAPLYSIE
Kandelzjistil,ževdůsledkudlouhodobéhabituace(opakovanoutaktilnístimulací)nebosenzitizace(opakovanýmšokovánímdoocásku)docházíuzejekezměněpočtusynaptickýchspojení– vdůsledkutohoikezměněúčinnostisynaptickéhopřenosu
=jedenzpříkladůSYNAPTICKÉPLASTICITY
Avšakzvýšenípočtusynapsíjepouzejedenzmechanismů...
OPERANTNÍPODMIŇOVÁNÍUAPLYSIE
• Hawkins,R.D.,Clark,G.A.,&Kandel,E.R.(2006).OperantConditioningofGillWithdrawalinAplysia.TheJournalofNeuroscience,26,2443‐2448.
• PokudAplysie povolilažábrypourčitouhranici,byla„potrestána“mírnýmšokemdoocásku.
• Zvířatasenaučilaoperantnězatahovatžábry,abysevyhnulapotrestání.
• Vzhledemktomu,ženeuronyinervující struktury,kterésetohotochováníúčastní,jsoujižidentifikovány,otevřelotocestukestudiumechanismůtohototypuučení.• MichelM,GreenCL,Eskin A,LyonsLC. PKG‐mediatedMAPKsignalingisnecessaryforlong‐termoperantmemoryinAplysia.LearnMem.2011;18(2):108‐17.
ODBEZOBRATLÝCHKSAVCŮM
• Synaptickáplasticita jepozorovatelnásamozřejměiuvyššíchobratlovců,adlouhosepředpokládalo,žebymohlabýtpodklademuchovávánípaměťovýchstop.
• Dlouhodobápotenciaceadlouhodobádeprese–LTPaLTD– horcíkandidátinaneurálnísubstrátučeníapaměti
EPSP
EPSP(intracelulárně– uvětšíchvláken,popř.pomocítechnikyterčíkovéhozámku
fEPSP(field‐EPSP)– extracelulárně,připadávúvahuustrukturspravidelnýmuspořádánímneuronůdovrstevčilamin– např.hipokampus
LTPALTD
• Dlouhodobézvýšení,resp.sníženíodpovědí,neboliamplitudyEPSPpropředchozítetanickéstimulaci
• Mádvěfáze:časnou(E‐LTP)apozdní(L‐LTP)
• Časnáfázejenezávislánaproteosyntéze,pozdnínanízávisí
EXISTUJEVÍCEMOŽNOSTÍZESÍLENÍSYNAPTICKÉÚČINNOSTI
Inzercenovýchreceptorůdopostsynaptickémembrány – většíodpovědínastejnémnožstvíneuropřenašeče
Zvýšenívýlevu prostřednictvímretrográdníhosignálu– nejasné,uvažujeseoNO,popř.extracelulárníchadhezníchmolekulách
Rašenínovýchsynaptickýchknoflíků
Ztenčeníkrčkudendritickéhotrnu– změnaelektrickýchvlastností– vyššíexcitabilita
DLOUHODOBÁPOTENCIACE‐ LTPDlouhodobézvýšenísynaptickýchodpovědípostsynaptickéhoneuronu(=amplitudyEPSP)potetanickémdrážděnípresynaptickéterminály
Velmičastoseměřívhipokampuapřilehlýchstrukturách.
A population field potential (“EPSP”) evoked in the dentate gyrus by stimulating the perforant path.
Stimulus artefact
Population spike
EPSP
DLOUHODOBÁPOTENCIACE(LTP)
BlissandLømo(1973)J.Physiol.232:331‐356‐ LTPpoprvépopsánavgyrusdentatuskrálíka
Tim Bliss Terje Lømo
Dlouhodobézvýšenísynaptickýchodpovědípostsynaptickéhoneuronu(=amplitudyEPSP)potetanickémdrážděnípresynaptickéterminály.Někdysevykládájakozesíleníkomunikacemezipresynaptickýmapostsynaptickýmneuronem,nazákladěaktivaceoboutěchtoneuronů.
LTP
DLOUHODOBÁPOTENCIACE(LTP)VS.DLOUHODOBÁDEPRESE(LTD)
DLOUHODOBÁDEPRESE‐ LTD• Opakdlouhodobépotenciace,
jdeodlouhodobésníženíúčinnostisynaptickéhopřenosunásledkemrepetitivnístimulace presynaptickýchvstupů
• JetovlastněprotějšekLTP,zfyziologickéhohlediskasezdábýtintuitivněnezbytný(„what goes up,must godown“)
• Vyskytujesenapř.vhipokampu (nízkofrekvenčnístimulace)nebovPurkyňovýchbuňkáchmozečku (silnástimulace)
DLOUHODOBÁDEPRESE‐ LTD
LTD je podmíněna zpravidla aktivací NMDA receptorů (ne vždy),ale o nižší hodnotě, a zvýšením intracelulárního vápníku, avšak na nižší hladinu, než jaká je pozorována u LTP.
Někdy se LTD mohou účastnit také metabotropní glutamátové receptory (mGluR), popř snad i kanabinoidní receptory (také spřažené s G-proteinem)
Indukce LTD zahrnuje aktivaci fosfatáz (defosforylující enzymy), které následně sníží citlivost glutamátových receptorů a tím redukují postsynaptickou odpověď na neuropřenašeč.
Může zahrnovat také internalizaci AMPA receptorů z postsynaptické membrány do intracelulárních kompartmentů.
DLOUHODOBÁDEPRESE‐ LTDNa synapsích Schafferových kolaterál (spojení hipokampálních oblastí CA3 a CA1) lze vyvolat LTP i LTD tetanickým dráždění, klíčovým faktorem pro to, který fenomén bude indukován, je frekvence dráždění (viz obrázek).
Nízkofrekvenční stimulace vede ke vzniku LTD.
LTD je odlišná od tzv. synaptické depotenciace, což je de facto návrat LTP na klidovou hladinu.
V mozečku se LTD účastní motorického učení.
LTPVYKAZUJESPECIFICITU
• Běhemdrážděníurčitéhovstupudocházíkpotenciacipouzeutohotostimulovanéhovstupu,aneusousedníchvstupů (pakliženejsoutytovstupyfunkčněspřaženy,popř.stimuloványsoučasně– vizasociativitaakooperativita)
LTPVYKAZUJEASOCIATIVITU
• Associativita představujefenomén,kdyrelativněslabástimulacenajednomvstupunenídostatečnáabyvyvolalaLTP,současnésilnástimulacenajiném,funkčněasociovanémvstupuvyvoláLTPnaobouvstupech.
• Častojepozorovánanapř.nasynapsíchSchafferových kolaterálzhipokampálníoblastiCA3doCA1
LTPVYKAZUJEKOOPERATIVITU
LTP může být indukována buď silným tetanickým drážděním jednoho vstupu, nebo kooperativně slabším drážděním více vstupů současně. Pokud je stimulován slabě jen jeden vstup, nedosáhne depolarizace hodnoty potřebné k indukci LTP. Pokud je však takovouto slabší stimulací drážděno více konvergujících vstupů, může dojít k sumaci těchto efektů a následné tvorbě dlouhodobé potenciace.
Někteří autoři zastávají názor, že rozdíl mezi kooperativitou a asociativitou je pouze sémantický
ČASNÁAPOZDNÍFÁZELTP
• Časnáfáze– nezávislánaproteosyntéze
• Induction phase
• Maintenancephase
• Pozdnífáze– závisínasyntézenovýchbílkovinaremodelaci synapse.
• Induction
• Maintenance
ČASNÁAPOZDNÍFÁZELTP‐MECHANISMY•Iniciacečasnéfáze– zvýšenáaktivaceAMPAreceptorů– depolarizace–odblokováníNMDAreceptorů– vtokCa2+‐Ca‐calmodulin kinázaII– PKC– MAPkináza(MAPK)
•Udržováníčasné‐ CMKIIaPKCztrácízávislostnaCa– perzistentníaktivita>fosforylace AMPAreceptorů,inzercerezervníchAMPAreceptorů (bezprotesyntézy)
•Indukcepozdní– MAPK(ERK)vykazujeprezistentní aktivitu
•Udržovánípozdní– ERKfosforyluje řadycytosolických ajadernýchmolekul,kterénakonecvedouksyntézespecifickýchproteinů,kteréudržujílate‐LTP,předevšímPKMζJ Neurochem. 2001 Jan;76(1):1-10. The neuronal MAP kinase cascade: a biochemical signal integration system subserving synaptic plasticity and memory. Sweatt JD.
UDRŽOVACÍFÁZEPOZDNÍLTP– HOTSPOTSOUČASNÉNEUROCHEMIEPAMĚTI
• BěhemudržovacífázedocházípřeskinázyatranskripčnífaktoryksyntézePKMζ (zeta),cožjepodtypPKC,kterájeposvésyntézekonstitutivněaktivníaregulujetrafficking asyntézuAMPAreceptorů,reorganizacisynaptickýchproteinůaremodelaci synapse.
• Patrněijinékinázy,alenedávnástudieukázala,žesyntézaPKMζudržujespecifickypozdníLTP.
• Zvýšeuvedenéhovyplývá,ževindukciaudržováníčasnéLTPavindukcipozdníLTPhrajerolímnohoregulačníchkináz,alenaPKMζ sepatrněsignálsbíhá
RETROGRÁDNÍSIGNALIZACE
• Nicméně,běhempozdníLTPdocházítakékekomunikacispresynaptickýmzakončením,neboťbyloprokázáno,žesezvyšujezásobasynaptickýchváčkůvtermináleadocházíkdalšímzměnámnapresynaptickýchproteinech,mělabytedyexistovatretrográdnísignalizace(uvažujeseoNO,neboproteinechextracelulárnímatrix– vizbiologiebuňky)
Zkušenost Změna synaptické účinnnosti(přirozená plasticita)
Paměť
Tetanizace Změna účinnosti synaptického přenosu
(LTP)
Zvýšení evokované odpovědi (EPSP)
Teoretická koncepce studia vztahu “LTP-paměť”
Typy studií zabývajících se vztahem LTP - paměť:
• Vliv učení na synaptickou sílu a LTP• Vliv tetanizace (saturace LTP) na učení• Vliv manipulace (např.blokády) synaptické plasticity na učení paměť
UČENÍPŘÍMOINDUKUJELTP• WhitlockJR,Heynen AJ,ShulerMG,BearMF. Learninginduceslong‐termpotentiation
inthehippocampus. Science.2006; 313(5790):1093‐7
UČENÍPŘÍMOINDUKUJELTPII
• Whitlockaspol.ukázali,žetréninkpotkanůvúlozepasivníhovyhýbání(otésipovímevkapitoleupaměťovýchúlohách)způsobujeuněkterýchneuronůindukciLTP.
• UmnohazměřenýchneuronůvšakLTPindukovánanení,atobylopatrnědůvodem,pročsenaobjevčekalotakdlouho.
• Jetorovněžpodpůrnýmdůkazempro„distributedmemory encoding“– vizobecnýmodul
INHIBICEPKMΖ VEDEKVYMAZÁNÍJIŽUSTAVENÉPAMĚŤOVÉSTOPY
• PastalkovaE,SerranoP,Pinkhasova D,WallaceE,FentonAA,Sacktor TC.StorageofspatialinformationbythemaintenancemechanismofLTP. Science.2006;313(5790):1141‐4
SpecifickýblokátorPKMζ bylaplikovándohipokampuazablokovaljakpozdníLTP,takvybavenínaučenéinformace, avšakneovlivnínovéučení,tzn.žePKMζ nehrajepatrněrolivindukcičasnéLTP
Prokázánobylo,žesyntézaPKMζ jenezbytnouproudržovacífázipozdníLTP
ZIPMAŽEPAMĚŤOVOUSTOPU,ALENEBRÁNÍNOVÉMUUČENÍ.
PROBLEMATICKÉOTÁZKY• JeLTPindukovánatakéjinýmitypyučenínežpasivnímvyhýbáním?
• MažeinhibicePKMζ pomocípeptiduZIPtakéjinédruhypamětinežplaceavoidance,cožjekognitivníúlohavysocezávislánahipokampu?
• Jetotovymazánípamětipatrnéivjinýchstrukturáchvmozkunežjehipokampus?
• Některéurčitě,např.chuťovouaverzivkortexu,viz:ShemaR,SacktorTC,Dudai Y. Rapiderasureoflong‐termmemoryassociationsinthecortexbyaninhibitorofPKMzeta. Science; 317(5840):951‐3
• Byloprokázáno,žeuřadytypůpamětitentomechanismusfunguje
• Serrano P,Friedman EL,Kenney J,Taubenfeld SM,Zimmerman JM,Hanna J,Alberini C,Kelley AE,Maren S,RudyJW,Yin JC,Sacktor TC,Fenton AA.PKMzeta maintains spatial,instrumental,andclassically conditioned long‐termmemories.PLoS Biol.2008Dec23;6(12):2698‐706.
NEGATIVNÍDŮKAZOPKMZETA ALTP• Letosvyšlaprácepopisujícítransgennípotkanyskonstitutivnía
podmíněnoudelecíPKMζ aunichnebylopozorovánížádnézhoršenípamětianiLTP.
• NaopakaplikaceZIPtěmtopotkanůmvedlakvymazáníLTP,zdásežeZIPtedyblokujedoposudneznáméprocesy,kroměaktivitynaPKMζ
Volk LJ,Bachman JL,JohnsonR,Yu Y,Huganir RL.PKM‐ζis notrequired for hippocampalsynaptic plasticity,learning andmemory.Nature.2013;493(7432):420‐3
KlíčovákompenzacepomocíPKCι/λ
„THE STORYCONTINUES“
SHRNUTÍ• Napaměťjemožnéaužitečnénahlížetjakonazměnyvchovánívyvolanépředchozízkušenostísubjektu
• Takovétozměnyvchovánídanézkušenostíjemožnépozorovatiuevolučně„primitivních“organismů
• TytozměnychováníjsouzpůsobenyzměnamivčinnostiCNS,předevšímzměnouvsílesynapsívmozku
• Dlouhodobápotenciace(LTP)jakopříkladsynapticképlasticitybymohlaneuronálnímpodklademalespoňněkterýchtypůpaměti,jejízablokovánítutopaměťvyruší,alePKMzeta nemusíbýtonou„memorymolecule“