III. MATERIALES Y METODOS

3.1. Ubicación

3.1.1. Ubicación política

El trabajo se desarrolló en el laboratorio de Microbiología General, de la

Universidad Nacional Agraria de la Selva, políticamente ubicado en la ciudad de

Tingo María, Distrito de Rupa Rupa, Provincia de Leoncio Prado, Región

Huánuco.

III.2. Materiales

- 160 lombrices (“lombriccus terrestre”).

- fosfato de potasio monobásico

- 4 kg suelos

- 4 recipientes

- cámara fotográfica.

III.3. Unidades Experimentales

Lombriz de tierra: Las lombrices de tierra necesitan vivir en suelo húmedo

que contenga materia orgánica. Suelen vivir en las capas superiores, pero

en invierno se entierran más para escapar de las heladas. Cuando el clima

es muy caluroso, hacen lo mismo para evitar la deshidratación. Las

lombrices de tierra rehúyen la luz del día, pero con frecuencia salen a la

superficie durante la noche para alimentarse y expulsar sus detritus.

Durante el día sólo salen a la superficie en circunstancias excepcionales,

como cuando se inundan sus galerías en caso de lluvias torrenciales.

3.2. Variable Dependiente

Dosis Aplicada.

3.3. Variable Independiente

fosfato de potasio monobásico

3.4. Diseño Experimental

El diseño utilizado en la investigación es de tipo experimental en el que la

variable independiente es el fosfato de potasio monobásico y la variable

dependiente es la concentración de dosis aplicada para cada tratamiento.

Así mismo la unidad Experimental viene hacer las lombrices de tierra

(“Lombriccus Terrestre”).

3.5. Metodología

- Según la metodología explicada en clase se procedió a la captura de la

especie a utilizar para el proceso de intoxicación. en nuestro caso se

recolectó dichos microorganismos (“lombriccus terrestre”). En un

recipiente para luego trasladarlos al laboratorio.

Lombriz de tierra Concentración dosis Fosfato de potasio. monobásico

- Definimos el agente toxico (fosfato de potasio monobásico) a utilizar,

partimos de su DL 50 4.664 mg / kg de suelo posteriormente diluimos

en 200ml de agua donde obtuvimos la primera concentración 23.32

mg /l y posteriormente duplicamos la concentración para cada

tratamiento.

- Una vez realizado esto se separaron por tratamientos. a cada tratamiento

se agregaron 40 lombrices de un tamaño de 30 cm. Una vez colocada las

lombrices en recipientes, se procedió con la aplicación de la dosis. para

cada tratamiento respectivamente.

C1

C2

C3

C4

23.2 mg/L

46.4 mg/L

92.8 mg/L

185.6 mg/L

- Se esperó por un tiempo determinado de 24 horas para observar los

efectos tóxicos sobre estos organismos y se apuntaron los datos en el

cuadro siguiente.

C1 C2 C3 C4

T1 (24h)

T2 (48)

- Finalmente Se realizó el conteo de las lombrices muertas de cada

tratamiento con sus respectivas dosis aplicadas y así poder concluir cual es

la dosis letal y la dosis letal media.