manual de limpieza y des in feccio n

8/22/2019 Manual de Limpieza y Des in Feccio n

1/20

Universidad de PamplonaCentro de Preparacin de Medios

Manual de Limpieza y Desinfeccin

CENTRO DE PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO

UNIVERSIDAD DE PAMPLONA

MANUAL DE LIMPIEZA Y DESINFECCION


2/20



INTRODUCCION

El objetivo de este manual es establecer una serie de procedimientos para

llevar a cabo el programa de limpieza y desinfeccin en el centro de

preparacin de medios con el fin de mantener el laboratorio libre de

contaminacin ambiental y proporcionar un rea de trabajo limpia, saludable y

segura.

El cumplimiento de estos procedimientos asegurara la reduccin de la

contaminacin del producto, mayor calidad y menos devoluciones de los

medios de cultivos elaborados.

Se realiza como un aporte para el proceso de certificacin de los laboratorios

de microbiologa

Este documento se realiza como un aporte para el proceso de certificacin de

los laboratorios de microbiologa, y menciona algunos trminos relacionados

con el proceso de limpieza y desinfeccin ,compuestos utilizados y

los procedimientos bsicos de limpieza y desinfeccin de las reas que

conforman el centro de preparacin de medios.


3/20



OBJETIVOS

GENERAL:

Describir los procedimientos de limpieza y desinfeccin que deben aplicarse

en las instalaciones del centro de preparacin de medios de cultivos para

garantizar la inocuidad de los medios elaborados

ESPECIFICOS:

Explicar los procesos de limpieza y desinfeccin de instalaciones, equipos y

materiales del centro de preparacin de medios

Disponer de un documento de consulta permanente para todos lo auxiliares

que laboran en el centro

Establecer dosificacin de detergentes y agentes desinfectantes para la

adecuada realizacin de los protocolos de limpieza y desinfeccin

INTRODUCCION


4/20



Un programa de limpieza y desinfeccin , es un conjunto de actividades que

son aplicadas a cada una de las reas de proceso para eliminar o disminuir a

un mnimo aceptable la carga microbiana presente en los equipos, personal,

planta fsica y en el ambiente donde se realiza el proceso; adems de mejorar

la atmsfera de trabajo, hacindola , mas agradable, y optimizar la calidad

sanitaria de los productos.

Es importante mantener el laboratorios y el material limpios, ya que el propio

trabajo crea un flujo microbiano.

Estos microorganismos vienen del exterior:

Con materias u objetos contaminados Con el aire, el agua Con el hombre mismo, que se comporta como reservorio natural de las

bacterias

La implementacin del programa de limpieza y desinfeccin debe responder a

las necesidades y exigencias de la empresa, por tanto es muy importante

conocer los principios de limpieza y desinfeccin para evitar la contaminacin

de los productos.

Este programa de limpieza y desinfeccin debe permitir :

Definir lo que se debe hacer y los fundamentos de los mtodos que se van

a aplicar in situ


5/20



Asignar a cada uno sus funciones y responsabilidades, as como el tiempo

necesarios para cada operacin

Asegurarse de que se ha realizado lo que se ha anotado en el registro


6/20



LIMPIEZA Y DESINFECCION

La limpieza y la desinfeccin tiene como fin asegurar una buena higiene, tanto

a nivel de los locales, los materiales, el personal y el ambiente.

La limpieza regular y peridica permite mantener una flora microbiana

ambiental reducida necesaria y suficiente para ciertas actividades.

A continuacin se mencionan algunas definiciones relacionadas con el proceso

de limpieza y desinfeccin:

Desinfeccin: Es el conjunto de operaciones que tiene como objetivo la

reduccin temporal del numero total de microorganismos

vivos y la destruccin de los patgenos y alterantes; sin

embargo , la esterilizacin busca la obtencin definitiva

de un medio completamente exento de grmenes

Desinfectante: Cualquier agente que limite la infeccin matando las

vegetativas de los microorganismos.

Detergente: Material tensoactivo diseado para remover y eliminar la

contaminacin indeseada de alguna superficie de algn

material


7/20



Eficiente: Que produce realmente un efecto satisfactorio

Esterilizacin: Es la destruccin o eliminacin de todas formas de vida.

Puede llevarse a cabo por procesos fsicos o qumicos.

Higiene: Todas las medidas necesarias para garantizar la sanidad e

inocuidad

Limpieza: Es el conjunto de operaciones que permiten eliminar la

suciedad visible o microscpica. Estas operaciones se

realizan mediante productos detergentes elegidos en

funcin del tipo de suciedad y las superficies donde se

deposita

Solucin: Combinacin de un slido o de un producto concentrado con

agua, para obtener una distribucin homognea de cada uno de

los componentes.


8/20



LA SUCIEDAD

El objetivo de la limpieza es la eliminacin de la suciedad , se debe llevar a la

naturaleza de esta y a la manera en como se adhiere a la superficie que se

desea limpiar.

ESTADO DE LA SUCIEDAD:

Se consideran:

SUCIEDAD LIBRE: Impurezas no fijadas en una superficie, fcilmente

eliminables.

SUCIEDAD ADHERENTE: Impurezas fijadas que precisan una accin

Mecnica o qumica para desprenderlas del

soporte

SUCIEDAD INCRUSTADA: Impurezas introducidas


9/20



ETAPAS DE LA LIMPIEZA Y DESINFECCION

LIMPIEZA:

Recoger y desechar los residuos del producto, polvo o cualquier otra

suciedad presentes en el lugar a limpiar

Humedecer con suficiente agua potable el lugar o superficie que se va a

limpiar

Preparar la solucin de detergente que se va a usar

Enjabonar la superficie por limpiar, esparciendo la solucin de detergente

con esponja o cepillo

Restregar la superficie fuertemente con ayuda de un pao o cepillo,

eliminando toda la suciedad posible

Dejar la solucin de detergente aplicada por un tiempo corto para que este

acte


10/20



Enjuagar con suficiente agua asegurndose de que todo el detergente se

elimine

Observar detenidamente el lugar que se limpio para verificar que haya sido

eliminada toda suciedad

DESINFECCION:

Asegurarse de que la superficie este limpia, si no es as limpiar como se

explico anteriormente

Antes de proceder a desinfectar se debe tener lista la solucin

Desinfectante

Aplicar la solucin desinfectante sobre el lugar o superficie que se va a

desinfectar

La solucin desinfectante se deja sobre el lugar que se esta desinfectando

por un tiempo mnimo de un minuto, dependiendo de la sustancia utilizada

Durante este tiempo, se esta logrando eliminar la mayor cantidad posible

de microorganismos, de modo que la superficie a limpiar queda bien

desinfectada


11/20



LOS PRODUCTOS DE LIMPIEZA

COMPOSICIONDE LA

SUCIEDAD

FAMILIA EJEMPLOS DEPRODUCTOS

CARACTERISTICAS PRINCIPALES

AZUCARESSOLUBLES

Alcalinos Sosa potasa Solubilizante

SaponificanteOTROS

HIDRATOS DECARBONO

Alcalinos

Productos

enzimaticos

Hidrolizante

DesengrasantePROTEINAS Alcalinos Sosa potasa Solubilizante

saponificante

Productos

enzimaticos

Proteasas Hidrolizante

DesengrasanteMATERIASGRASAS

Tenso-activos Anionicos

Cationicos

No ionicos

Humectante

Emulsificante

Productos

enzimaticos

Lipasas Hidrolizante

DesengrasanteMINERALES ACIDOS Clorhidrico

Nitrico

Fosforico

Solubilizante

SECUESTRANTE EDTA

Polifosfatos

Gluconato

Secuestrante


12/20



AGENTES DESINFECTANTES

AGENTEDESINFECTA

NTE

MECANISMO DE ACCION ESPECTRO DE ACCION USOS

ALCOHOLES Los alcoholes actandestruyendo la membrana

celular y desnaturalizando lasprotenas. Su accin es rpida,incluso desde los 15 segundos,aunque no tiene efectopersistente. Sus efectosbiolgicos de dao microbianopermanecen por varias horas.

Los alcoholes poseen unarpida accin y amplio espectro

de actividad, actuando sobrebacterias gramnegativas ygrampositivas, incluyendomicobacterias, hongos y viruspero no son esporicidas.El etanol al 70% destruyealrededor del 90% de lasbacterias cutneas en dosminutos

El alcohol se utilizamuy

frecuentementepara la desinfeccino limpieza de la piel,Su aplicacin esttambin indicado enla desinfeccin dematerial no crticocomo termmetros

ALDEHDOS

FORMALDEHDO

Actan mediante la alquilacin

de los grupos qumicos de lasprotenas y cidos nucleicos delas bacterias, virus y hongos. Elformaldehdo acta sobre lasprotenas por desnaturalizacin.El glutaraldehdo acta de formasimilar en pH alcalino. Sobre lapared celular, el glutaraldehdoacta al nivel de los puentescruzados del peptidoglicano

Los aldehdos tienen un amplio

espectro de actividad contramicroorganismos y virus.

El formaldehdo es bactericida,esporicida y virucida, perotrabaja ms lentamente que elglutaraldehdo.

El formaldehdo es un productoqumico extremadamentereactivo y que interacta conprotenas, ADN y ARN in vitro.

Esterilizacin de

objetos inanimados,como instrumentos.Desinfeccin dematerial de metal,caucho y plstico.Desinfeccin de altonivel dehemodializadores

Al 20% a 30% esastringente.

GLUTARALDEHDO

El glutaraldehido, cuando lasolucin es alcalina (pH 7,5 a8,5) se activa y posee actividadesporicida. El glutaraldehdoalcalino al 2% es bactericida,fungicida, virucida, en cortos

Su actividad biocida se debe ala alteracin del ARN, ADN ysntesis de protenas.

Desinfeccin yesterilizacin deplsticos y caucho deequipos de anestesiaDesinfecta en 45minutos a 25C,


13/20



periodos de tiempo, peronecesita 6 horas de contacto

para destruir las esporasbacterianas. Tiene una accinmoderada frente amicobacterias.

eliminando grmenespatgenos yvegetativos,incluyendo M.tuberculosis,Pseudomonasaeruginosa y VIH 1 y2.Esteriliza en 10 horas,destruyendo todas lasesporas.

Activo contra virus en10 minutos a 20C.

HALOGENADO

S

HIPOCLORITOS

El mecanismo de accin sobre

los microorganismos es pococonocido, pero se postula queactan inhibiendo las reaccionesenzimticas y desnaturalizandolas protenas

Los hipocloritos tienen un

extenso espectro de actividad,son bactericidas, virucidas,fungicidas y esporicidas, peroactividad variable frente amicobacterias, segn laconcentracin en que se use.

El hipoclorito de

sodio se presentaen solucin a unaconcentracin de5,25%. Para lasdesinfecciones, lasdiluciones en usoson entre 0,1% y1%.Limpieza de vajilla.Lavado de ropa engeneral.Cloracin del agua.

Desinfeccin dealgunos alimentos.Desinfeccin dedesechos lquidoscontaminados

COMPUESTOS YODADOS

Los compuestos yodados sonagentes oxidantes, se combinairremediablemente con residuostirosina de las protenas.Precipitan las protenas

bacterianas y cidos nucleicos.Alteran las membranas celularesal unirse a los enlaces C=C delos cidos grasos.

Acta disminuyendo losrequerimientos de oxgeno de losmicroorganismos aerobios,interfiriendo la cadena

El yodo tiene una poderosaactividad germicida, atacabacterias grampositivas ygramnegativas, micobacterias,esporas, hongos, virus, quistes

y protozoos.

La desinfeccin dela piel sana.El tratamiento deafecciones de la pielcausadas por

bacterias y hongos.La limpieza de lasheridas, en solucinacuosa.


14/20



respiratoria por bloqueo deltransporte de electrones a travs

de reacciones electrolticas conenzimas.

YODOFOROS Tienen amplio espectro deactividad contra bacterias yhongos y presentan el mismomecanismo de accin y espectrode actividad de los yodados. Elms conocido de los yodforoses la yodopovidona compuestade yodo y polivinil-pirrolidona

La yodopovidona es activacontra bacterias grampositivas,gramnegativas, hongos, virus ymicobacterias. Es efectivacontra el S. aureus MRSA yespecies de enterococo.Resistencia significativa ayodopovidona no ha sido

reportada

El lavado de lasmanos, comoantisptico.La limpieza de lapiel sana enprocedimientosquirrgicos.La limpieza de

objetos desuperficie dura.

FENOLES Son bactericidas a bajasconcentraciones, causando daoa las membranas con prdida delos constituyentescitoplasmticos, inactivandoirreversiblemente las oxidasas ydeshidrogenasas de membranay produciendo desnaturalizacinde las protenas.

Los fenoles se utilizan mscomo desinfectantes, tienenpropiedades antibacterianasfrente a estreptococos,estafilococos y Escherichia coli,y tambin propiedadesantifngicas y antivirales

En la actualidad,slo se emplea parala desinfeccin depuntos crticos en laindustria,aplicndolo asuperficies, ropablanca,instrumentos,

sanitarios y excreta

OXIDANTES Los oxidantes (peroxgenos) sonproductos que liberan oxgenonaciente. Considerados comocompuestosbactericidas tiles,su mecanismo de accinconsiste en la inactivacin deprotenas enzimticas actuandosobre los grupos -SH de lasprotenas de estructura y de lasprotenas de funcin de las

bacterias.

Su espectro de actividad essobre bacterias vegetativas,virus, micobacterias y esporas.

Su espectro deactividad es sobrebacteriasvegetativas, virus,micobacterias yesporas.

PERXIDO DEHIDRGENO

El perxido de hidrgeno tieneefectos oxidantes por producirOH y radicales libres, los cualesatacan a los componentesesenciales de los

Es activo frente a bacterias yvirus, segn la concentracin ycondiciones de utilizacin.Estudios in vitro de solucionesde perxido de hidrgeno al 3%

Antisptico tpicoen solucin al 3%.


15/20



microorganismos como lpidos,protenas y ADN.

Es un agente oxidante de efectofugaz por ser descompuesto porlas catalasas de los tejido

han mostrado amplio espectrode eficacia, con mayor

actividad frente a bacteriasgrampositivas

COMPUESTOS DE AMONIOCUATERNARIO(agentesactivoscatinicos)

Son sustancias que lesionan lamembrana celular debido a quedesorganizan la disposicin delas protenas y fosfolpidos, porlo que se liberan metabolitosdesde la clula, interfiriendo conel metabolismo energtico y eltransporte activo.

Activos para eliminar bacteriasgrampositivas y gramnegativas,aunque stas ltimas en menorgrado. Son bactericidas,fungicidas y virucidas, actuandosobre virus lipoflicos pero nosobre los hidrfilos. No tieneaccin sobre las micobacterias,

ni son esporicidas.

Desinfeccin desuperficies nocrticas.

Accindesodorante.Limpieza desuperficies speraso difciles.

RECOMENDACIN DE CONCENTRACIONES A EMPLEAR SEGN EL ELEMENTO

A DESINFECTAR

ELEMENTO A DESINFECTAR PARTES PORMILLN(PPM)

Agua potable 0.2

Desinfeccin de manos 50

Desinfeccin de mesas e instrumental de acero inoxidable 200

Desinfeccin de pisos, mesones en baldosn, ropa, tiles

de aseo y material plstico

500

Desinfeccin de material orgnico 5000


16/20



PREPARACION DE DESINFECTANTES

Para la preparacin de los agentes desinfectantes a las concentraciones deseadasse emplea la siguiente formula:

V1C1=V2C2

DONDE:

V1= V2*C2/ C1

V1= Volumen deseado

C1= Concentracin conocida

V2= Volumen conocido

C2= Concentracin deseada

Ejemplo: Hipoclorito comercial al 13% y se desea preparar al 6% un

volumen de 50 mililitros = 50cc de hipoclorito al 6%.

V1C1=V2C2

V1 (13%) =( 50ml) (6%)V1= (50ml) (6%)

(13)%

V1= 24 ml


17/20



Se debe agregar 24 ml. de hipoclorito de sodio a 26 ml. de agua destilada paratener 50 ml. de una solucin al 6%

FACTORES QUE AFECTAN LA EFICACIA DE LOS ANTISEPTICOS YDESINFECTANTES

CONCENTRACIN DEL AGENTE Y TIEMPO DE ACTUACINExiste una estrecha correlacin entre la concentracin del agente y el tiempo

necesario para matar una determinada fraccin de la poblacin bacteriana. Si

se modifica la concentracin se provocan cambios en el tiempo para lograr un

mismo efecto. Un ejemplo es con los fenoles: un pequeo cambio en la

concentracin provoca cambios muy acentuados en el tiempo para lograr un

mismo efecto, as, si reducimos la concentracin de fenol desde un valor dado

a la mitad, necesitamos emplear 64 veces ms tiempo para conseguir matar

una misma proporcin de bacterias. Refirindonos al tiempo, no todas las

bacterias mueren simultneamente, ni siquiera cuando se aplica un exceso del

agente.

pH

Afecta tanto la carga superficial neta de la bacteria como el grado de ionizacin

del agente. En general, las formas ionizadas de los agentes disociables pasan


18/20



mejor a travs de las membranas biolgicas y por lo tanto son ms efectivos.

Los agentes aninicos suelen ser ms efectivos a pH cidos; los agentes

catinicos muestran ms eficacia a pH alcalinos.

TEMPERATURANormalmente, al aumentar la temperatura aumenta la potencia de los

desinfectantes. Para muchos agentes el aumento en 10 C supone duplicar la

tasa de muerte.

NATURALEZA DEL MICROORGANISMO Y OTROS FACTORES

ASOCIADOS A LA POBLACIN MICROBIANA.

Segn la especie, fase de cultivo, presencia de cpsula o de esporas y nmero

de microorganismos se afecta la potencia. El bacilo tuberculoso suele resistir a

los hipocloritos mejor que otras bacterias. La presencia de cpsula o esporas

suelen conferir ms resistencia.

PRESENCIA DE MATERIALES EXTRAOSLa presencia de materia orgnica como sangre, suero o pus afecta

negativamente la potencia de los antispticos y desinfectantes de tipo

oxidantes, como los hipocloritos y de tipo desnaturalizante de protenas, hasta

el punto de hacerlos inactivos en cuanto a su poder desinfectante y/o


19/20



esterilizante.


20/20



manual de limpieza y des in feccio n

Documents