managua 2014 (instituto de investigación de la influenza, san petersburgo, centro nacional de...
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Managua2014
(Instituto de Investigación de la Influenza, San Petersburgo, Centro Nacional de Influenza de la OMS de
RUSIA)
La vacunación y el desarrollo de vacunas de reacción cruzada en
Rusia
L.M. Tsybalova
Tipo de vacuna Títlos de las vacunas
Empresas manufactureras
Composición de las vacunas
Vacuna contra la influenza en vivo
Ultravak Microgen (Rusia)
Contiene 15 mg de cada cepa del virus de la gripe
Para ser utilizada desde los 3 años de edad
Vacuna de virus completos
inactivadosMicrophan
Microgen (Rusia) Contiene 15 mg de cada cepa del virus de la gripe
vacunas de virus fraccionados
Ultrix
FluarixVaxigripBegrivacFluvaxinInflexal V
Fort (Rusia)
GSK-BiomedSanofi
NovartisChina
Berna Biotech(Suiza)
Contiene 15 g de la cepa del virus de la influenza y la pared virus lipoproteínas
reactogénicas
vacunas subunitarias
Grippol
Grippol plus
Sovigripp
Microgen
Empresa Farmacéutica «PETROVAX PHARMA
Microgen
Contiene 5 g de cada cepa del virus de la influenza y adyuvantes polioxidonio y
sovidon
Influvac
Agrippal
Abbott Products (anteriormente Solvay)
Novartis
Contiene 15 mg de cada cepa del virus de la gripe
Vacunas usadas en Rusia para la profilaxis de la influenza
La producción de vacunas contra la gripe en Rusia(miles de dosis)
Vacunas vivas - AzulVacunas de virus completos - RojoVacuna de subunidad - Verde
La vacunación contra la influenza en cumplimientocon el Programa Nacional de Inmunización
Orden № 125Н partir del 21/03/14 del Ministerio de Salud de Rusia
• Niños desde los 6 meses; escolares desde el 1-11 grado;• Estudiantes de las escuelas técnicas y de educación sperior (Institutos, Universidades);• Adultos con alto riesgo de infección profesional (personal de las instituciones médicas y educativas, el transporte y los servicios de la comunidad);• Mujeres embarazadas;• Adultos mayores de 60 años;• Las personas obligadas al servicio militar;• Personas con patologías crónicas (enfermedades pulmonar y cardiovasculares, trastornos metabólicos y obesidad).
25,08
18
27,46 27,9531,9 33,6
6,13
8,7
7,00 6,25
5,24,1
0
5
10
15
20
25
30
35
40
2007 2008 2009 2010 2011 2012
Национальный проект другие источники
мл
н.
чел
.
37,737,1134,2034,4626,7031,21
LA COBERTURA DE VACUNACIÓN EN LA FEDERACIÓN RUSA (MILLONES DE
HABITANTES)
Antecedentes pre-mórbidos de las personas que murieron de Influenza durante la temporada epidémica 2009-2010
Desórdenes del sistema endocrinoIncluyendo obesidadLos estados con…Incluyendo embarazo Hepatitis, pancreatitis…Patología cardiovascularEnfermedad pulmonar crónica Encefalopatía, etc.
0
2
4
6
8
10
12 10.2
6.7
9.6
4.7
8.37.0
3.52.1
%
La eficacia de la vacuna Grippol-plusen pacientes con patología pulmonar crónica (n = 43)
El asma bronquial (BA)• Tasa de morbilidad: 7.5% de la población adulta• exacerbaciones relacionadas con la gripe en el 70% de los casos• Recomendaciones de la OMS: la vacunación anual contra la gripe es obligatoria para todos los pacientes BA
Enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC)• Número de registro de pacientes: 2,4 mln• exacerbación de la enfermedad causada por la influenza: 30% de los casos• resultados letales causados por ARVI y neumonía: 20% de los casos
índice investigadoAntes de la vacunación
6 meses después de la vacunación
disminución del doblez
La frecuencia de las exacerbaciones de la enfermedad subyacente 1,47±0,12 0,70±0,11* 2,1
Promedio del número de ciclos de tratamiento con antibióticos por habitante 0,7±0,1 0,4±0,1* 1,8
Frecuencia de las visitas de pacientes externos 6,22±0,49 3,13±0,48* 1,9
Valores medios para las tasas de hospitalización 1,23±0,11 0,42±0,09* 2,9
Fuente: Chebykina A.V. et al. Nuevas oportunidades para la prevención de la influenza ... / ruso Medical Journal, septiembre de 2010
4%
86%
10%
2010-2011
4%
90%
6%
vaccinatednon vaccinatedno data
2011-2012
1%
97%
3%
2012-2013
PROPORTION OF VACCINATED PERSONS AMONG SARI CASES WITH INFLUENZA ETIOLOGY,
SEASONS 2010-2013
Research Institute of Influenza
La vacunación de mujeres embarazadas• Durante las epidemias, un total de 25,5% de mujeres embarazadas son diagnosticadas con influenza y
ARI *• Complicaciones de la gripe entre las mujeres embarazadas: 804 por 10 000 pacientes con influenza• Las tasas de hospitalización entre las mujeres embarazadas infectadas durante el trimestre III de
embarazo son coherente con el nivel de hospitalización entre las personas con enfermedades crónicas de
15-44 años (5,6 - 11,0 por 10 000) *• Durante las epidemias, las tasas de hospitalización (III trimestre) mujeres embarazadas pacientes con
influenza con trastornos de sistemas cardiovasculares y pulmonares se estiman como 21,76 por 10 000,
con diabetes mellitus: 44,9 por 10 000 *
Una serie de signos clínicosGrippol Plus (n = 32)
valores absolutosPlacebo (n=29) valores
absolutos
La hiperemia en el lugar de la inyección 4 0
Aumento de la fatiga 6 12Mialgias 0 3 p<0,05
Efecto sobre la homeostasis y el embarazo ciclo de vacunación contra la gripe durante el embarazo se
correlaciona con los valores del grupo de los que recibieron placebo **
Fuentes: * L. Dodds et al., 2007, W. Swing et al., 2000, K. Neuzil et al., 1998 ** M.P.Kostinov, A.P.Cherdantsev et al., 2010
Dinámica del nivel de anticuerpos protectores después de la vacunación contra la influenza А (H1N1) pdm09 en mujeres
embarazadas
p > 0,05 differences between comparison groups
M.P.Kostinov, A.P.Cherdantsev et al., 2010 -2014
nivel básico
Después de 1 mes
Después de 3-4 meses
parto 3 meses después del parto
6 meses después del parto
Grippol plus
Agripal
Non-pregnant females
Tecnología de la creación de la vacuna Ultrix proporciona una presentación de antígenos de superficie en una forma de viro somas y la de los antígenos internos en una forma de micelas, mientras que en la mayoría de los casos, preserva su actividad antigénica.Beneficios: Formación de respuesta sistémica inmune de células B y T Formación de protección cruzada contra variantes derivadas del virus de influenza.
Ultrix - vacuna antigripal de virus fraccionados inactivados
Aplicación de la vacuna ULTRIX® 45μg en todos los grupos de edad de 6 a 60 años no estuvo acompañada por un aumento de la producción general de IgE, también, se observó disminución de IgE en general, en las personas con sensibilización latente indicando de este modo que no tiene efecto alergóneno alguno de ULTRIX®.
La actividad inmunogénica de la vacuna ULTRIX® 45μg
debido al nivel de seroconversión al virus de la gripe
A (H1N1) hasta 94,0% A (H3N2) hasta el 86,% de B hasta 90,0%
debido al aumento de anticuerposA(H1N1) de 21,9
A(H3N2) до 12,6 B hasta 7,5
debido al nivel de sero-protección
A(H1N1) hasta 95,0% A(H3N2) hasta 90,0%
B hasta 78,0%
La longevidad de la inmunidad humoral (45 g de vacuna Ultrix)
Morbilidad de la Gripe y ARVI (por 1000 habitantes) en los grupos de estudio y control durante la temporada epidémica
2013-2014
Selkova E.P. et al. G.N. Instituto de Investigación Gabrichevsky de Epidemiología y Microbiología bajo Rospotrebnadzor "Estudios para evaluar la eficacia epidemiológica y la seguridad de la vacuna antigripal inactivada Ultrix® split", 2014
Comunidades cerradas
Personal médico
Población de la ciudad
Timashevsk
Vaccinated
Non-vaccinated
Duración media (días) de la influenza / casos ARVI y% de complicaciones en los pacientes inmunizados con la vacuna ULTRIX® y personas no inmunizados
Vacunados
No vacunados
Duración días
Selkova E.P. et al. G.N. Instituto de Investigación Gabrichevsky de Epidemiología y Microbiología bajo Rospotrebnadzor "Estudios para evaluar la eficacia epidemiológica y la seguridad de la vacuna antigripal inactivada Ultrix® split", 2014
Eficacia epidemiológica de la vacuna Ultrix ®
Los voluntarios (hombres y mujeres) de 18 años de edad a través de 60 años - 5 611
3.107 personas fueron vacunados con una vacuna Ultrix®, 2.504 voluntarios no fueron vacunados
• Se estableció la buena tolerabilidad y no-reacto-genicidad de la• vacuna Ultrix®• Se estableció la inocuidad de la aplicación de la vacuna Ultrix®
basada en los resultados clínicos y de laboratorio• Se demostró la actividad de larga duración del anticuerpo
específico (HI de datos de prueba) en personas inmunizadas en 6 meses después de la vacunación
• coeficiente de eficacia de la vacuna Ultrix® con relación al laboratorio: se estima 86,5% confirmado, y el índice de eficacia en 7,4
Desarrollo de vacunas de protección cruzada
(Universal)
Diagrama esquemático resumiendo el camino del desarrollo de vacunas a partir de vacunología inversa
(8) Luego se comercializa la vacuna aprobada y se usa a gran escala. En este punto, la fase IV de los estudios clínicos confirman la seguridad.
(7) Los órganos normativos, como la ACIP y órganos equivalentes de otras naciones, hacen la recomendación sobre cómo debe utilizarse la vacuna.
(6) Luego se analiza la información científica, clínica y técnica y las agencias reguladoras tales como el Departamento de Alimentos y Medicamentos (FDA por sus siglas en inglés) o la Agencia Medicinal Europea (EMA por sus siglas en inglés) la aprueban.
(5) Por último, los antígenos seleccionados se fabrican en gran escala para los ensayos clínicos, y vacunas se prueban para la seguridad y la inmunidad protectora en seres humanos utilizando correlaciones establecidas en estudios de protección o eficacia.
(4) antígenos protectores se prueban para determinar su presencia y conservación en una colección de cepas representativas de las especies (epidemiología molecular).
(3) Los antígenos seleccionados se utilizan entonces para inmunizar animales y poner a prueba si la inmunización induce una respuesta protectora.
(2) A continuación, los antígenos identificados se examinan para detectar la expresión del patógeno y para la inmunogenicidad durante la infección.
(1) En primer lugar, el análisis informático de todo el genoma identifica los genes que codifican para determinar los antígenos predichos y elimina antígenos con homologías a proteínas humanas.
vacunas subunitarias
vacunas recombinantes
Proteínas de virus incluidos en la composición de las vacunas tradicionales y "universales"
NP
Proteinas de superficie del virus de la influenzaМ2е y NA
SLLTEVETPI – HLA-A 2 (0201-0210) 48% *
SSDLSSLL – HLA-A 1 19.1% *
SSDLSSLLTEV – HLA-A 1 19.1% *
DSSDLSSLLTEV – HLA-A 26 7.4% *
GELSSLLTEV – HLA-B 44 н/д
Un cons humano SLLTEVETPIRNEWGCRCNDSSDL SLLTEVETPIRNEWGCRCNDSSD
* - frecuencia en la población
Presentation of the M2e peptide by antigens HLA I class
Las vacunas recombinantes desarrolladas en el INSTITUTO DE INVESTIGACIÓN de INFLUENZA (basados en proteína M2e)
Sistemas de expresión
Bacterial (E coli) Planta (Nicotiana benthamiana)
M2e HBcM2e+HBc
M2e flagelinaM2e+ flagelina
M2e HBc TMV М2е
Variaciones: número de copias М2е tipo М2е sitio de inserción
Electronic photography of virus-like particles HBc (A) and recombinant protein 4M2hHBc (В)
А
B
Research Institute of Influenza
Longevity of M2e specific antibody(IgG) in mice
Series10
100000
200000
300000
400000
500000
600000
700000
80000042 days 162 days 192 days
G-11-1 (H5N1) G-26 A(H1N1)pdm09
Los
títul
os d
e Ig
G e
n su
ero
anti-
M2e p<0.05
p<0.01
Research Institute of Influenza
Los títulos de anticuerpos IgG contra M2e en BAL después de la inmunización de ratones con vacunas candidatas (50μg de proteína + 100 g derinatx3 recombinante). BAL de ratones se recogieron el 14 días después de la tercera inmunización.* Las diferencias entre grupos inmunizados y de control fueron significativas (p ˂ 0.01)
G-370
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
1800
1200*
50
PBS
4M2e(h)HBc
G-11-1 (H5N1) G-26 (H1N1pdm)0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
1800
1520*1600*
50 50
4M2e(k)HBc
Research Institute of Influenza
Longevity of M2e specific T-cell responses of 4M2e(k)HBc immunized mice
CD4 – IL-4
CD4 – IFNɣ
CD8 – IFNɣ
Research Institute of Influenza
Dinámica de peso corporal y la muerte de los ratones inmunizados con la vacuna candidata 4M2e (h) HВc + derinat (50 g x 3 i / m) después de la
estimulación con una dosis letal (5LD50) del virus de la gripe ABR / 8/34 o A / Aichi / 1/68
0 2 4 6 8 10 12 1450
60
70
80
90
100
110
4M2e(h)HBc control Day after challenge
Body
w
eigt
h (%
)
50
60
70
80
90
100
110
0 2 4 6 8 10 12 14
Bo
dy
w
eig
th (
%)
Day after challenge
4M2e(h)HBc control
0
20
40
60
80
100
120
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
Pe
rce
nt
su
rviv
al
(%)
Day after challenge
4M2e(h)HBc control
0
20
40
60
80
100
120
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
Pe
rce
nt
su
rviv
al
(%
)
Day after challenge
4M2e(h)HBc control HBc
APR/8/34
APR/8/34
A/Aichi/1/68
A/Aichi/1/68
Research Institute of Influenza
Dinámica de peso corporal y la muerte de los ratones inmunizados con la vacuna candidata 4M2e (k) HBc derinat (50 g x 3 i / m) después de la
estimulación con 5LD50 de virus de la gripe А / Kurgan / 05/05 (Н5N1) o A / California / 07.09
50
60
70
80
90
100
110
0 2 4 6 8 10 12 14
Bo
dy
w
eig
th
(%)
Day after challenge
4 M2e(k)НВс control
А/Kurgan/05/05
0
20
40
60
80
100
120
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
Pe
rce
nt
su
rviv
al
(%)
Day after challenge
4 M2e(k)НВс control
А/Kurgan/05/05
50
60
70
80
90
100
110
0 2 4 6 8 10 12 14
Bo
dy
w
eig
th
(%)
Day after challenge
4 M2e(k)HBc control
0
20
40
60
80
100
120
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
Pe
rce
nt s
urv
iva
l (%
)
Day after challenge4 M2e(k)НВс control
A/California/07/09
A/California/07/09
Research Institute of Influenza
Determinación de los títulos de virus de pulmón
Research Institute of Influenza
PLAPROVA KBBE-2008-3-1-04
WP6. Desarrollo y expresión de inmunógenos de influenza en las
plantas
San Petersburgo
Instituto de Investigación de la Influenza
Centro Nacional de la Gripe de la OMS
Candidato de vacuna - virus quimérico TMV-M2e
CP TMVМ2E
SLLTEVETPIRNEWECRCNDSSDSLLTEVETPIRNEWESRSNDSSDSLLTEVETPIRNEWEARANDSSD
TMV-М2E =TMV-M2E-ser =
3‘NTRReplicase LBRB nosAct2 30K
CPUAG
amber
TMV-M2E-ala =
Ser156
Gly155
Moscow State University
1 2 3 4 5 6 7 8 9 1011121314150
20
40
60
80
100
120
M2e(human)BTM 1 Ld
M2e(human)BTM 5 Ld
контроль 1 Ld
контроль 5 Ld
0 2 4 6 8 10 12 14 16102030405060708090
100
M2e (human) BTM 5LD
Контроль 5LD
Post challenge days
% o
f su
rviv
ed m
ice
B
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10111213140
20
40
60
80
100
120
ТМV-М2е-ala 1LDcontrol 1LDТМV-М2е-ala 5LDcontrol 5LD
C0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1011121314
0
20
40
60
80
100
120
ТМV-М2е-ala 5LD
control 5LD
Post challenge days
% o
f sur
vive
d m
ice
D
Survival of BALB/c mice vaccinated with TMV-М2е-ser, after challenge with 5 LD50 and 1 LD50 A/PR/8/34 (A) and A/California/04/2009 (H1N1) 5LD/50 (B). Mice were immunized with 50 µg, i/p * 3 times
La supervivencia de los ratones BALB / c vacunados con ТМV-М2е-ala, después del desafío con 5 LD50 A / PR / 8/34 (C) y A / California / 04/09 (D). Los ratones fueron inmunizados con 50 g, i / p * 3 veces
A
as diferencias entre la supervivencia de ratones en grupos de senderos y de control de la fig. A, C, D son p significativa <0,05 Research Institute of Influenza
El desarrollo de vacunas experimentales en base a
la HA2
А В
Estructura molecular del Virus Influenza A (А - molécula trimer, В - monómero)
А В
E. Vareckova 2013
Principales sitios HA2 antigénicos:
Sitios аа Mab
I 1-38 CF2
II, IV
125-175125-175
11F4FC12/FE1
III 38-112 CB8
Monómero HA2 antes (А) y después (В) cadena de conformación dependiente del pH
Flag HA2 35-102
Flag 4M2eh, k, h, k HA2 76-130
H2
H3
Preparaciones de vacunas que contienen НА2(Instituto de Investigación de la Influenza)
Research Institute of Influenza
Títulos de IgG a la portadora (FLG), proteína recombinante (FlgHA2 (35-107) y péptidos sintéticos
después de la inmunización intranasal de ratones Balb / c con FlgHA
Research Institute of Influenza
Series10
2000
4000
6000
8000
10000
12000
14000
16000
18000
20000
pH=7.2 pH=5.0
H2N2 H1N1 H5N1 H3N2
Ти
тры
Ig
G
La unión de los anticuerpos séricos НА2 con virus de la gripe A / Singapur (H2N2), A / PR / 8/34 (H1N1), A / Aichi (H3N2), A / Kurgan (H5N1) en рН7,2 y 5,0. La inmunización intranasal de ratones Balb / c con FlgHA2 (35-107) de proteínas
Research Institute of Influenza
Flg4M_HA PBS0.00
0.50
1.00
1.50
2.00
2.50
3.00
3.50
4.00
0.50
3.57
log
10
El aislamiento del virus a partir de los pulmones en el día 6 después de la exposición 1LD / 50 del virus
de la influenza A / Aichi / 2/68 H3N2
Research Institute of Influenza
¡Gracias por su atención!
АнтигенФенотипическая частота %
кавказоиды негры ориентыА1 14,7 3,3 ---
А2 45,7 27,3 43,2
А3 23,0 14,2 1,1
А11 11,8 1,1 17,2
А23 4,6 20,4 1,1
А29(w19) 7,6 12,3 0,4
A30 (w19) 4,8 28,3 0,3
А32 8,3 3,0 0,1
А33 3,3 9,0 13,1
B7 17,3 17,0 11,4
B8 16,1 5,8 0,2
B14 6,8 8,0 0,2
B27 7,6 3,0 0,8
B35 17,6 12,1 14,1
Cw1 7,5 1,1 32,1
Cw2 9,7 22,5 0,7
Cw3 20,1 17,5 46,5 *по материалам 8 workshop
Частота некоторых антигенов HLA I класса у представителей разных рас*