Protozoa, Ciliates, Coccidia, Blastocystis

CBA

A: Balantidium coli trophozoites in tissue, hematoxylin and eosin stain.B, C: Balantidium coli trophozoites. These are characterized by:1.their large size (40 µm to more than 70 µm).2.the presence of cilia on the cell surface, particularly visible in (C).3.a cytostome (arrows).4.a bean shaped macronucleus which is often visible, see (B), and a smaller, less conspicuous micronucleus.

Causal Agent:Balantidium coli, a large ciliated protozoan parasite.Life Cycle:

Protozoa: Flagellates

Protozoa : Amebae

MALARIA O PALUDISMO

• Antropozoonosis

• Protozoarios apicomplexa del género Plasmodium

• Vector: mosquitos del género Anopheles

• Característica clínica:acceso palúdico (escalofrío, fiebre y sudoración)

• Gran impacto en la historia mundial

• Mas de 300 millones de personas infectadas

• Más de 1 millón de muertes por año

• Difícil su prevención, no hay una droga universalmente efectiva

• No hay una vacuna efectiva

• Incremento en los casos de malaria por P. falciparum

hepatocitoesporozoítos

hepatocitoinfectado

esquizonte

Ruptura de esquizonte

merozoítos

criptozoíto

glóbulorojo

Trofozoítoinmaduro(anillo)

Trofoz.maduro

esquizonte

Ruptura de esquizonte

merozoíto

gametocitos

gametocitos

Ciclo esquizogónico

Ciclo Exoeritrocítico

Ciclo Eritrocítico

Ciclo esporogónico

Gametocitos

Mosquito ingieregametocitos de la sangremacrogametocito

Microgametocitoexflagelado

microgametoy macrogameto

ooquineto

ooquiste

Ruptura del ooquiste, liberación de esporozoítos

Mosquito inoculaesporozoítos

Cigoto

Cuatro epecies que infectan humanos:

Plasmodium vivax80% de los casos

Plasmodium falciparum

Zonas tropicales,subtropicales y templadas

Plasmodium malariae

Plasmodium ovale Oeste de AfricaIslas del Pacífico Sur

Distribución esporádica

Plasmodium

Ciclo de vida

Asexual (esquizogónico) Sexual (esporogónico)

Hombre Anopheles

Huésped intermediario Huésped DefinitivoGametocitosGametosCigotoOoquinetoOoquisteEsporozoítos

EsporozoítosEquizonte tisular (Merozoítos)Criptozoítos/ HipnozoítosTrofozoítosEsquizonte (Merozoítos)Gametocitos

Sección del hígado mostrando una célula parenquimatosa aumentada de tamano repleta de merozoítos ( flecha).

Plasmodium vivax (malaria terciana benigna)

- Infecta GR jóvenes- Aumenta el tamaño de los GR- Granulaciones de Shüffner (8-10 h)- Anillos finos- Trofozoíto ameboide- Esquizonte maduro con 12 a 24 merozoítos

Pigmento malárico o hemozoína:

Pigmento derivado del metabolismo de la hemoglobina por el parásito

Trofozoítos jóvenes (anillos)

Trofozoítos maduros (ameboides)

Plasmodium vivax

Plasmodium vivaxEquizontes

Gametocitos

macrogametocito microgametocito

Plasmodium Ovale

- Similar a P. vivax

-GR aumentado de tamaño (oval) y bordes irregulares

- Granulaciones de Shüffner en estadíos bien tempranos

- Anillos más pequeños que P. vivax

- Trofozoíto menos ameboide que P. vivax

- Esquizonte maduro tiene un promedio de 8 merozoítos

Plasmodium OvaleTrofozoítos jóvenes (anillos)

Trofozoítos

Plasmodium Ovale

Esquizontes

Macrogametocito y microgamtocito

Gametocitos

Plasmodium malariae (malaria cuartana)

- Infecta GR viejos

- Tamaño normal de los GR

- No hay granulaciones

- Anillos gruesos con núcleo prominente

- Trofozoíto en banda

- Esquizonte maduro tiene un promedio de 6-12 merozoítos (aspecto de roseta o margarita)

Plasmodium malariaeTrofozoítos jóvenes (anillos)

Trofozoítos

Plasmodium malariaeEsquizontes

Macro y microgametocitos

Gametocitos

Plasmodium falciparum (malaria terciana maligna)

- Infecta a cualquier GR, independientemente de su edad

- GR de diferentes tamaños

- Granulaciones de Maurer

- Múltiples anillos por células

- Trofozoíto mantiene forma de anillo (formas en auricular)

- Gametocitos en forma de media luna

- Los esquizontes rara vez se observan en sangre perisférica

Plasmodium falciparumTrofozoítos

Esquizontes

macrogametocito

microgametocito

Plasmodium falciparumGametocitos

La ruptura simultánea de un gran número de globulos rojos y la liberación de desechos metabólicos del parásito a circulación, desencadenan los paroxismos de la malaria

Síntomas clínicos:

AnemiaEsplenomegaliaParoxismos clásicos: escalofríos, fiebre, sudoraciónDolor de cabeza Náuseas y vómitos Dolor muscular Heces sanguinolentas Ictericia Convulsiones Coma

En la malaria por P. falciparum la membrana se altera y los góbulos rojos se adhieren al endotelio de los capilares de los órganos internos

Patogénesis de la Malaria

Desarrollo del parásito en glóbulos rojos

Metabolismo de la Hb

Depleción de Fe

AnemiaAnoxia

Adrenal cerebral Gastrointestinal Hepático Pulmonar Renal

Shock hiperpirexia Coma Disentería Ictericia Edema Anuria

Lisis de GR infectados

debris Hb antígenos

esplenomegalia

P. falciparum

Aglutinación de GR

parasitados

CoagulaciónIntravasculardiseminada

⇓⇓⇓⇓ Circulacióncapilar

hemoglobinemia

Acs

P. falciparum P. malariae

Sindromenefróticohemoglobinuria

Destrucción de GR

normales

Cambios en lasuperficie de los GR

Enfermedad clínica

P. vivax

- Primeros síntomas. 7-10 días post-infección- Paroxismos: cada 48 h. Pueden durar de 3 semanas a 2 meses o más.- Recaídas: 50% de los pacientes. Luego de semanas,meses o años- Complicaciones severas: poco frecuentes.- Infecta sólo reticulocitos ⇒ parasitemia 2 a 5 %

P. Ovale- Similar a P. vivax- Síntomas menos severos- Recuperación espontánea

P. malariae

•Invade GR viejos ⇒ baja parasitemia

•Período de incubación 27 -40 días

•Paroxismos cada 72 h con síntomas más severos que las especies anteriores

•Proteinuria con Sínd. Nefrótico especialmente en niños

•Recuperación espontánea o recrudecimiento de los síntomas

•Infección latente y parasitemia baja por muchos años

•Invade a los GR en todos sus estadíos ⇒parasitemia >50 %

•Esquizogonia en capilares de órganos internos ⇒ obtrucción ⇒ isquemia

•período de incubación de 10-12 días

• Paroxismos cada 36-48h (al comienzo pueden no observarse)

•No se observan recidivas o recrudecimiento después del año

• Complicaciones graves y/o fatales

• La parasitemia no siempre se correlaciona con la gravedad de la infección

•Malaria cerebral relacionada con la formación de “rosetas” (GR parasitado rodeado de GR sanos)

P. falciparum

Sección de cerebro mostrando vasos sanguíneos bloqueados por parasitos P. falciparum en desarrollo ( flechas).

Diagnóstico de Malaria

Frotis o gota gruesa de sangre perisférica teñidos con GiemsaObservar al menos 200 campos de 1000x. Varios preparados seriados.Con 1 preparado negativo no se descarta el diagnóstico

Para el tratamiento es importante determinar la especie de Plasmodium

• Microscopia óptica

•Microscopia de fluorescencia

- Tinción de extendidos o gota gruesa con naranja de acridina o benzotiocarboxipurina (tiñen el ADN)

- QBC (Beckton- Dickinson)Capilares especiales con naranja de acridina y flotador de plástico.Excelente sensibilidad pero no permite la diferenciación de especies.

Bueno para el seguimiento post-tratamiento

Rapid Diagnostic Test. (RDTs)

Kits comerciales basados en la captura antigénica o medida de actividad enzimática parasitaria

Biología Molecular

- PCR MúltipleDiferencia las cuatro especies de acuerdo al tamaño del producto de amplificación

- PCR y detección con sonda específica

Preguntar al paciente:

- Si ha viajado ultimamente y adónde.

- Lugar de residencia

- Si le diagnosticaron malaria anteriormente e identificaron la especie de Plasmodium

- Si se encuentra en tratamiento

- Si recibió transfución sanguínea o tuvo contacto con agujas (drogas endovenosas)

- Si presenta periodicidad en la fiebre

- Cuándo le tomaron la muestra y si presentaba los síntomas en ese momento.

Positive IFA result with P. malariae schizont antigen

A: Agarose gel (2%) analysis of a PCR diagnostic test for species-specific detection of Plasmodium DNA. PCR was performed using nested primers of Snounou et al.1

Lane S: Molecular base pair standard (50-bp ladder). Black arrows show the size of standard bands. Lane 1: The red arrow shows the diagnostic band for P. vivax (size: 120 bp) Lane 2: The red arrow shows the diagnostic band for P. malariae (size: 144 bp) Lane 3: The red arrow shows the diagnostic band for P. falciparum (size: 205 bp) Lane 4: The red arrow shows the diagnostic band for P. ovale (size: 800 bp) Reference:

Gota gruesa:- Coloque una gota de sangre en el centro de una lamina limpia demicroscopio. Con la esquina de una segunda lamina riegue la gota hasta que adquiera el tamano de una una moneda de cinco centavos. El espesor debe ser tal que permita ver apenas la impresión del periodico a traves de la lamina. Los frotis finos se hacen de manera estándar. Permita que los preparados se sequen.

Gota gruesa

Extendido

Gota Gruesa teñida con Giemsa

Malaria en Argentina:

En zonas rurales por debajo de los 1.200m, junto a las fronteras con Bolívia y Paraguay.

No hay resistencia a la cloroquina.

Primer mapa de la Malaria en Argentina (1891)