LINFOCITOS Tinmunología básica

!

Sociedad de Lupus, Reumatología y Autoinmunidad en República Dominicana, Inc.

Friday, 3,June 2011

Reconocimiento Ag por Tc exhibe

restricción mediada por

MHC.Zinkernagel & Doherty, (1975) J Exp Med

141:502P.N 1996

Friday, 3,June 2011

Friday, 3,June 2011

TCRestructura

TCR unido a membranaNo hay TCR solubleTCR específico para MHC:péptidoTCR:CD3TCR alfa:betaTCR gamma:delta

Friday, 3,June 2011

TCR:CD3

ITAM = immunoreceptor tyrosine-based activation motifITIM = immunoreceptor tyrosine-based inhibition motif

Friday, 3,June 2011

Friday, 3,June 2011

Friday, 3,June 2011

Timo

Friday, 3,June 2011

Vías de migración de timocitos.

Timocitos adultos van de vénulas postcapilares (PCV) hacia corteza, zona subcapsular, corteza y luego médula.Compare con entrada y migración en timo fetal.

Friday, 3,June 2011

Timo no tiene linfáticos aferentes ni HEVs

Friday, 3,June 2011

Nidos en corteza tímica.Maduración secuencial expresada por TCR

y co-receptores CD4 y CD8

Friday, 3,June 2011

linfos T se “educan” en dos sitios:

• INTRA- TIMO

• Tolerancia central: DCs eliminan T que reconocen Ag propios abundantes

• EXTRA- TIMO

• Tolerancia periférica: T naives, mueren o sufren anergia, por falla en cruzar TCR o por falta en co-estimulación

Friday, 3,June 2011

La diversidad Ag potencial se reduce en la maduración, mecanismos de selección clonal (+) y (-).

Maduración solo de clonas restringidas por MHC, no reactivas contra lo propio

Friday, 3,June 2011

La diversidad Ag potencial se reduce en la maduración, mecanismos de selección clonal (+) y (-).

Maduración solo de clonas restringidas por MHC, no reactivas contra lo propio

Friday, 3,June 2011

La diversidad Ag potencial se reduce en la maduración, mecanismos de selección clonal (+) y (-).

Maduración solo de clonas restringidas por MHC, no reactivas contra lo propio

Friday, 3,June 2011

Linfocito T “desnudo” -doble negativo- resiste apoptosis porque NO

expresa Fas.

Si uniera FasL dispararía genes de la muerte.Posee Bcl-2, proteína

celular que protege de apoptosis

Estadio doble positivo: alto nivel de Fas y muy

bajo de Bcl-2 (vulnerable a señales de apoptosis).

Se prueba tolerancia de T para lo propio y para

restricción MHC.

Friday, 3,June 2011

Selección (+) para restricción MHC

células examinadoras

supervivencia de T cuyo TCR sí reconoce MHC propio: repertorio sujeto a restricción por moléculas MHC.

¿Acaso poseo moléculas MHC “ajenas? Restricción tiene que ver con atención: T debe enfocarse en péptidos presentados en

contexto de MHC.

Friday, 3,June 2011

selección (+)

• ¿Reconoce moléculas MHC propias expresadas en la superficie de células epiteliales de la corteza tímica?

• Default: sííí (o apoptosis)

Células epiteliales están cargadas de péptidos, de modo

que TCR tiene especificidad dual (T doble positivos)

Los péptidos son muestras de proteínas hechas por epiteliales

(Clase I) o de proteínas presentes en microambiente del

timo (Clase II)

Friday, 3,June 2011

Selección (-) para MHC:péptido propio

células examinadoras

Elimina clonas T que reaccionan en exceso con MHC propias o con minicomplejos MHC:péptido propio; repertorio de clonas T

auto-tolerantes.¿Lógica?

Control de autoinmunidad

Friday, 3,June 2011

Inducción de tolerancia central: selección

•¿Reconoce moléculas MHC y péptidos propios?

• ¡no way!

Linfos T que reconocen mueren por apoptosis.

DCs provenientes de médula ósea, residentes en médula

del timo.

TCD4:blanco fabricarían Ac vs. moléculas propias “leídas” como peligrosas (autoAg’s).

CTLs o T-CD8 atacarían y destruirían células propias.

Friday, 3,June 2011

Friday, 3,June 2011

• Linfos T con receptores que no reaccionan vs Ag propios presentados en contexto MHC por DCs del timo, pero que sí reconocen minicomplejos MHC:péptido presentados por células epiteliales del timo

• T “graduadas”: cada día, el timo de un joven prueba +/- 60 millones de linfos T doble positivos, se gradúan solo 2 a 3 millones (+/- 3%).

¿propósito final?

Friday, 3,June 2011

Friday, 3,June 2011

Friday, 3,June 2011

•TCR alfa:beta• 95% de linfos T

circulantes

• gran diversidad, reconocen minicomplejos

• T-CD8+ reconocen MHC Clase I

• T-CD4+ reconocen MHC Clase II

•TCR gamma:delta

• epitelio intestinal, útero, lengua

• poca diversidad, afinidad para ciertos invasores de sitios particulares

• no poseen CD4 ni CD8

Friday, 3,June 2011

Citometría de flujo (FACS)Friday, 3,June 2011

Co-receptores

Friday, 3,June 2011

Afinidad de unión aumenta hasta 100 veces cuando hay

co-receptor

Davis & van der Merwe, (1996) Immunol Today 17:181

Friday, 3,June 2011

n engl j med

349;21

www.nejm.org november

20, 2003

1989

P E R S P E C T I V E

Psoriatic skin

A

CLA+ T cell

E-selectin

CLACCR4

CCL17LFA-1

LFA-1

ICAM-1

ICAM-1

CCL22CLA+ T cell Antigen-

presentingcell

Immature dendritic cell

Mature dendritic cell

Dendritic cell

TNF-!

TNF-!

Interleukin-23

Interleukin-23

Interleukin-12

Interleukin-12TNF-!

Interferon-"

TNF!Antigen-

presentingcell

CD80CD86

ICAM-2

ICAM-1

HLA-D

CLA+T cell

CD2

CD3

LFA-1

LFA-1

CD4Tcr b

a

LFA-3

CD28CD28

B

Immunologic Targets in Psoriasis

Copyright © 2003 Massachusetts Medical Society. All rights reserved. Downloaded from www.nejm.org by PERSIO J. LOPEZ CONTRERAS MD on July 22, 2009 .

sinapsis inmunológica

Describe el agrupamiento de pares específicos de ligandos y receptores en la interfase entre T: APC

Ciertos estímulos, como TNF-alfa, aumentan expresión de moléculas MHC y CD80, CD86 en CDs, muy potentes APC [adalimumab, infliximab, etanercept, golimumab, certolizumab].

Friday, 3,June 2011

Moléculas accesorias de T y sus ligandos.

Algunas fortalecen interacciónT:APC o T:blanco. Otras actúan en señales de transducción, algunas en

ambas.

Friday, 3,June 2011

¿qué hace TCR?

OJO... superantígenos y Vb

Friday, 3,June 2011

activación de T

CD3, ZZ y TCR,activación de Fyn, Lck,ZAP-70

Friday, 3,June 2011

activación de T

CD3, ZZ y TCR,activación de Fyn, Lck,ZAP-70

Friday, 3,June 2011

Estimulación del complejo TCR induce fosforilación de tirosinas de ITAMs en CD3 y reclutamiento de moléculas efectoras. CD4 (unido a lck) se acerca a TCR por interacción con residuos no polimórficos en MHC. Esto produce en la fosforilación de ITAMs por lck y reclutamiento de ZAP-70 vía dominios SH2.El receptor enzimático inactivo del linfocito T en reposo se convierte en una proteína tirosin-kinasa activa (PTK).

Friday, 3,June 2011

Friday, 3,June 2011

Friday, 3,June 2011

Friday, 3,June 2011

Friday, 3,June 2011

Friday, 3,June 2011

Friday, 3,June 2011

Interacción MHC:péptido:TCR produce 3 resultados muy

diferentes:

selección positivaselección negativa

activación

Friday, 3,June 2011

en resumen...

Friday, 3,June 2011

CD28:B7aumenta producción de IL-2

y proliferación de T

presencia o ausencia de señal co-estimuladora determina si ocurre

expansión clonal o anergia

ANERGIA: estado “activo” de inactivación, incapacidad de

proliferar en respuesta a MHC:péptido

i-CTLA-4R= abatacept CD80 y CD86

Friday, 3,June 2011

Friday, 3,June 2011

anergia y tolerancia periférica

Friday, 3,June 2011

diferenciación de T

Linfocitos T naîve circulan en reposo, en fase G0 del ciclo celular.

Recirculación continua sangre-linfático cada 12 a 24 hrs, aunque residen más en tejido linfoide secundario.

TH se concentra en paracorteza de nódulos linfoides.

División 2-3 veces al día durante 4 a 5 días. RESPUESTA PRIMARIA

Friday, 3,June 2011

SUBPOBLACIONES DE TH

Th0

secreciones “clásicas”

Friday, 3,June 2011

SUBPOBLACIONES DE TH

Th0

Th1

IL-2INF-gTNF

secreciones “clásicas”

Friday, 3,June 2011

SUBPOBLACIONES DE TH

Th0

Th1

IL-2INF-gTNF

Th2IL-4IL-5IL-10

secreciones “clásicas”

Friday, 3,June 2011

SUBPOBLACIONES DE TH

Th0

Th1

IL-2INF-gTNF

Th2IL-4IL-5IL-10

secreciones “clásicas”

Th17

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SUBPOBLACIONES DE TH

Th0

Th1

IL-2INF-gTNF

Th2IL-4IL-5IL-10

secreciones “clásicas”

Th17

Friday, 3,June 2011

en resumen...

Friday, 3,June 2011

en resumen...

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en resumen...

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en resumen...

Friday, 3,June 2011

muerte celularApoptosis durante maduración y desarrollo de T favorece restricción por MHC y fenómenos de auto-tolerancia.

Apoptosis de T efectoras disminuye expansión clonal y elimina TH activadas, lo cual disminuye producción de citoquinas...

Fas:FasL fuera del timo (FAS [CD95] = TNFR, FasL = similar a TNFa)

Friday, 3,June 2011

T de memoriaDepuración de patógenos finaliza en muerte de la mayoría de células efectoras (contracción clonal).La eliminación es incompleta, remanente de memoria.

Escenario A: coloca T de memoria como células post-efectoras que sufrieron desarrollo progresivo.

Escenario B: coloca T de memoria como predispuestas a este linaje desde el inicio, sin haber sido efectoras. Esta posible vía sería similar a la conducta de células madre, por su capacidad de auto-renovación y progenie final bien diferenciada.

Friday, 3,June 2011

Does our current understanding of the molecular basis of immune tolerance predict new therapies for autoimmune disease?

Nat Clin Pract Rheumatol (2006) 2:491-499

REVIEW

494 NATURE CLINICAL PRACTICE RHEUMATOLOGY TARNER AND FATHMAN SEPTEMBER 2006 VOL 2 NO 9

www.nature.com/clinicalpractice/rheum

ionomycin; inhibitory drugs such as rapamycin; or co-incubation with CD4+CD25+ regulatory T cells.28,29 Furthermore, continued presenta-tion of the specific antigen in vivo has an impor-tant role in the maintenance of anergy in T cells and B cells. Removal of the antigen leads to rapid recovery of B-cell receptor signaling, and might result in autoimmunity due to activa tion by crossreactive immunogens.30 Naive T cells respond to continued antigen presentation by initial expansion and subsequent death of a subset of these cells, but also develop functional unresponsiveness in the remaining cells, which frequently cannot be reversed by the applica-tion of IL-2. This phenomenon might be caused by intracellular blockade of IL-2 receptor signaling by CTLA4-derived signals and a failure of cell-cycle progression.28,31

The existence of two distinct (though possibly overlapping) types of anergy have been

proposed, which differ in their mechanisms of induction, dependence on continued antigen presentation and responses to IL-2. Thorough reviews of the different types and mechanisms of anergy have been published.28,32 Despite these differences, all potential subtypes of lympho-cyte anergy share the common characteristic that they represent an active process rather than merely a passive state of unresponsiveness, as indicated by the requirement for calcineurin activity and protein synthesis.33,34

Early studies indicated a defect in signaling path-ways upstream of IL-2 gene transcription,35–39 as well as inhibition of IL-2 gene expression at the promoter level40,41 and selective upregula-tion of expression of general receptor of phospho-inositides 1.42 More recent mouse studies have identified certain E3 ubiquitin ligases as impor-tant anergy factors. These include the RING finger domain E3 ligases Cbl-c, Cbl-b, and GRAIL

DEC205

ApoptosisInitial expansion

Lysosomal processing

Specificantigen

DC

TCR

MHCclass II

Naive T cell

TREG

Figure 1 Modification of dendritic cells by targeted antigen presentation leads to induction of T-cell apoptosis and generation of regulatory T cells. Specific antigens can be targeted to immature dendritic cells in vivo by coupling them to a modified antibody molecule, which binds the dendritic cell marker DEC205. This antigen–antibody complex undergoes internalization and loading onto MHC class II molecules by the dendritic cell. These modified dendritic cells efficiently present the loaded antigen to the T-cell receptor of antigen-specific T cells in secondary lymphoid organs. Repeated antigen presentation via this experimental system initially leads to T-cell proliferation, but ultimately causes tolerization of reactive T cells through induction of apoptosis in the majority of T cells, and generation of regulatory T cells from the remainder. By contrast, upon addition of an immunogenic activation signal (such as CD40 ligand), which induces expression of co-stimulatory molecules on dendritic cells, T-cell activation occurs instead of tolerization. Abbreviations: DC, dendritic cell; DEC205, dendritic cell receptor for endocytosis (also known as lymphocyte antigen 75 or CD205); MHC, major histocompatibility complex; TCR, T-cell receptor; TREG, regulatory T cell.

ncprheum_2005_060.indd 494ncprheum_2005_060.indd 494 9/8/06 6:57:27 pm9/8/06 6:57:27 pm

Nature Publishing Group ©2006

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próxima clase: • cooperación celular en la respuesta humoral

La rendición de Breda (Diego de Velázquez)

Friday, 3,June 2011