บทท 3

วสด อปกรณ และวธการวจย

ในการวจยเพอศกษาการหมนของโพรโทพลาสตและเซลลเมดเลอดแดงในสนามไฟฟากระแสสลบไดแบงวธด าเนนการออกเปน6 ขนตอนดงน

ตอนท 1 เตรยมโพรโทพลาสต Lillium longiflorum , Dendrobium sp. และ เซลลเมดเลอดแดง

ตอนท 2 ศกษาสภาพของสารละลายทเหมาะสมตอการแขวนลอยเซลลตอนท 3 เหนยวน าเซลลในสนามไฟฟาดวยขวไฟฟา 2 ขวตอนท 4 พฒนาอปกรณการทดลองแบบ 4 ขวตอนท 5 ศกษาผลของการเหนยวน าภายใตเงอนไข สภาพน าไฟฟา ความเขมสนาม

ไฟฟาตอนท 6 วเคราะหผลและประมาณคาคงททางไฟฟาทเปนไปไดของเซลลทกขนตอนจะมวสด อปกรณ และวธด าเนนการดงตอไปน

3.1 วสด3.1.1 วสดทใชเพาะเลยง Dendrobium sp. และLillium longflorum

1) Dendrobium sp. และไดจากหองปฏบตการเพาะเลยงเนอเยอ ภาควชาชววทยา คณะวทยาศาสตร ม.สงขลานครนทร

2) อาหารส าหรบใชเลยงตนกลวยไมDendrobium sp สตร VW (ภาคผนวก)3) อาหารส าหรบใชเลยงตน Lillium longflorum สตร BDS (ภาคผนวก)4) โพรโทพลาสต Ananas sp. ไดจากหองปฏบตการเพาะเลยงเนอเยอ ภาควชาชววทยา

คณะวทยาศาสตร ม.สงขลานครนทร3.1.2 วสดส าหรบแยกและแขวนลอยโพรโทพลาสต

1) เอนไซม Cellulase Onozuka – R10 (Yakult Honsha Co.ltd.)2) เอนไซม Driselase (Kyowa Hakko Koqyo Co.ltd.)3) เอนไซม Marcerozyme – R10 (Yakult Honsha Co.ltd.)4) แมนนทอล (D-mannitol ; Fluka Biochemika)

27

5) สารละลายเกลอโพแตสเซยมคลอไรด(KCl) ส าหรบปรบคาสภาพน าไฟฟาของสารละทใชแขวนลอยเซลล

6) กรดไฮโดรคลอรก(HCl) ส าหรบปรบคา pH7) สารละลายโซเดยมไฮดรอกไซด(NaOH) ส าหรบปรบ pH8) แอลกอฮอล 95 %

3.1.3 วสดส าหรบแขวนลอยเซลลเมดเลอดแดง1) ซโครส2) MOPS (3-[N-Morpholino]propane-sulfonic acid) (Sigma Chemical Co.)3) NaOH

3.1.4 เซลลเมดเลอดแดง

3.2 อปกรณ3.2.1 อปกรณส าหรบการเพาะ Dendrobium sp. และLillium longflorum.

1) ตไมโครเวฟ (Sharp)2) ต Laminar flow (รน HS – 124)3) ขวดส าหรบเพาะเลยงขนาด 4 ออนซ4) หมอนงอดไอน า (รน MAC-60)5) จานเพาะเชอ (Petri dish)ส าหรบแยกตนกลา ขนาดเสนผาศนยกลาง 8.8 cm6) เครองมอวดความเขมแสง (Lux Hitester รน 3421)7) มดผาตดเบอร 48) ปากคบปลาย (Forcep)

3.2.2 อปกรณส าหรบแยกและเตรยมโพรโทพลาสตกอนการเหนยวน าในสนามไฟฟา1) หลอดเซนตรฟวจขนาด 15 ml

2) หลอดดดสาร (Pasteur pipette) พรอมจกยาง3) ตะแกรงกรองชนดไนลอน (Nylonmesh) ขนาดร 141 µm. เสนผาศนยกลาง 1.5 cm4) อปกรณนบเซลล (Haemacytometer slide) พรอมแผนปดสไลด5) จานหลม (Well plate) ชนด 24 หลม เสนผาศนยกลาง 1.5 cm. ลก 2 cm6) จานเพาะเชอขนาดเสนผาศนยกลาง 5 cm7) เครองเขยา (Shaker ; Bench-Top Orbito รน 012116)

28

8) เครองหมนเหวยง (Centrifuge ; IEC รน HN-SII)9) เครองกวนแบบใหความรอน (Hot plate with stirrer ; Heildph รน MR3001)10) เครองชงสารระบบดจตอลแบบทศนยม 4 ต าแหนง (Metter รน PJ 400)11) เครองวดคาสภาพน าไฟฟา (Tegracon 325 รน LF 318)12) เครองวดคา pH13) กลองจลทศน แบบประกอบ (Olympus รน CHA)

3.2.3 อปกรณส าหรบการศกษาดวยไฟฟากระแสสลบ1) กลองจลทศนแบบหวกลบ(Olympus รน LH50A) ก าลงขยายสงสด 600 เทา ส าหรบ

สงเกตการทดลอง2) สายโคแอกเชยล รน RQ-58ALV หวตอแบบ M-BNC3) เครองก าเนดสญญาณไฟฟากระแสสลบ (Function generator Stanford Research

System รน DS 345 มชวงความถระหวาง 1 Hz ถง 30 MHz ความตางศกยสงสด 10 VP-

P

4) ลวดนกเกลอลลอยด ขนาดเสนผาศนยกลาง 125 µm. คาความตานทานเชงผว 1,000โอหมตอนวฟต (บรษท California Fine Wire) พรอมดวยอปกรณส าหรบท าขวไฟฟา

5) อปกรณปรบเลอนละเอยด (Micromanipulator)6) เครองออสซลโลสโคป 2 ชองสญญาณ (Hameg รน HM 303)7) เครองออสซลโลสโคป 4 ชองสญญาณ8) โทรทศนสขนาด 27 นว (Sony รน KV-K25MZI )9) เครองเลนวดโอ (Sony รน SL V-K872)10) จอภาพขนาด 14 นว (Sony PVM-1453MD)11) กลองถายวดโอแบบ ดจตอล ( Digital Video Camera Sony)12) ไมโครโฟน13) นาฬกาจบเวลา (Casio)14) หลอดแกวคาปลาร15) Variable power supply (ภาควชาฟสกส)16) ชดอปกรณดงลวด (ภาควชาฟสกส)17) Phase Shift Unit ส าหรบแปลงสญญาณจาก เครองก าเนดสญญาณไฟฟากระแสสลบ

เปน 4 ชองสญญาณและม เฟสตางกน 90 0 (สรางขนเอง)

29

18) มวน วดโอ ส าหรบบนทกภาพขณะท าการทดลอง(Sony รน E-180DXE) ความยาว180 นาท

ภาพประกอบ 3.1 ชดอปกรณการทดลองการเหนยวน าเซลลในสนามไฟฟากระแสสลบ ประกอบดวย 1)จอภาพ 2)กลอง วดโอ 3)กลองจลทศนแบบหวกลบ 4)เซลลขณะท าการทดลองบรรจอยในจานเพาะเชอ 5)ขวไฟฟา 6)อปกรณปรบเลอนละเอยด 7)เครองเลนและบนทกภาพวดโอ 8)ออสซลโลสโคป 9)PSU 10) เครองก าเนดสญญาณไฟฟากระแสสลบ

19) TV Tuner ส าหรบน าภาพจากวดโอเขาเครองไมโครคอมพวเตอร20) กรรไกร21) กระดาษทราย22) คลอโรฟอรม

3.2.4 อปกรณส าหรบสราง Phase shift unit1) ไอซ เบอร 74102) ไอซ เบอร

30

3) ตวเกบประจ4) ตวตานทาน5) ทรานซสเตอร6) ไดโอด7) สวตช8) หลอดไฟ9) สายไฟ10) หวตอสายไฟ11) หมอแปลง12) ตวตานทานแบบปรบคาได13) แผนทองแดงส าหรบท าวงจร14) กลองพลาสตก

3.2.5 อปกรณส าหรบประมวนผล1) ไมโครคอมพวเตอร2) โปรแกรมส าเรจรป Microsoft Excel, Microsoft Word3) เครองพมพ

3.3 วธการวจย3.3.1 ขนตอนการเตรยมเซลล

1) โพรโทพลาสตของ Lillium longiflorum และ Dendrobium sp.เตรยมอาหารส าหรบเพาะเลยง Lillium longiflorum คออาหาร สตร BDS(ภาคผนวก

2) ใชเพาะเลยง Dendrobium sp. คอ อาหารสตร VW(ภาคผนวก 1) โดยเตรยมใสขวดแกวทมฝาปดขนาด 4 ounce(1 ounce = 28.41 ml) ใสอาหารขวดละ 5 ml เสรจแลวอบฆาเชอดวยหมอนงความดนทอณหภม 121 0C เปนเวลา 20 นาท น าตนพนธของ Lillium longiflorum และ Dendrobium sp. แยกตนออนลงเพาะเลยงในอาหารทเตรยมไวโดยท าในตปลอดเชอ แลวน าไปเพาะเลยงไวในหองทมความเขมแสง 2,000 lux และอณหภม 250C รอจนอายไดประมาณ 1 เดอน หรอมใบเจรญเตบโตพอจงน ามายอยเอาโพรโทพลาสตได

31

ตาราง 1 สตรเอนไซมส าหรบยอยโพรโทพลาสตจากใบกลวยไมและลลลDendrobium sp. Lillium longiflorum.

เซลลเลส 2% 1%ไดรซเลส 1% 1%มาเซเรอไซม 0.5% 0.5%

ส าหรบการการยอยโพรโทพลาสต ของ Lillium longiflorum. และ Dendrobium sp.นนยอยโดยใชเอนไซมแยกเปน 2 สตรดงตาราง 1(วธการเตรยมดตามภาคผนวก) เรมจากน าใบของLillium longiflorum หรอ Dendrobium sp. ทตองการยอยเอาโพรโทพลาสตมาตดปลายออกทงสองขางแชในสารละลายน าตาลแมนนทอลความเขมขน 0.8 M เปนเวลา 10 นาทใหโพรโทพลาสตเหยวตวเพองายตอการยอยผนงเซลลออก เสรจแลวใชมดผาตดหนตามขวางเปนชนเลกบางขนาด 0.2 mm –0.5 mm กอนน าไปแชในเอนไซม โดยใชใบไม 1 กรม ตอเอนไซม 1 มลลลตร เสรจแลวเกบไวในตทบแสง อณหภม 30 0C พรอมเขยาดวยอตรา 50 ครงตอนาท โดยลลลใชเวลา 2 – 2.5 ชวโมง สวนกลวยไมใชเวลา 3 – 3.5 ชวโมง (กนกกานต,2542) เมอครบตามเวลาทก าหนดน าไปกรองแยกเอาเฉพาะสวนทเปนโพรโทพลาสตโดยใชตะแกรงขนาด 141 µm แลวแยกขยะออกอกครงโดยใชวธ เกรเดยนท เดนซต (ภาคผนวก 2) เสรจแลวน าโพรโทพลาสตทไดแขวนลอยในสารละลายน าตาลแมนนทอล เพอใชในการทดลองหาสภาวะทเหมาะสมส าหรบการแขวนลอยเซลลและทดลองเหนยวน าเซลลตอไป

2) เซลลเมดเลอดแดง เจาะเลอดดวยเขมปลายแหลมทฆาเชอ เแลวแขวนลอยในสารละลายทมสวนผสมของ Sucrose 0.2 M, NaOH 1 mM, และ MOPS 1 mM สภาพน าไฟฟา 0.16 mS.m-

1 และ 0.20 mS.m-1 (ปรบคาสภาพน าไฟฟาโดยใชสารละลาย KCL) pH = 5.67 (ปรบคา pH โดยใชสารละลาย HCL และ NaOH)เพอใชส าหรบทดลอง เชนเดยวกบโพรโทพลาสตของ Dendrobium sp. และLillium longflorum

3) โพรโทพลาสตของ Ananas sp.ไดรบความอนเคราะหจากหองปฏบตการ เพาะเลยงเนอเยอภาควชาชววทยา คณะวทยาศาสตร มหาวทยาลยสงขลานครนทร น าโพรโทพลาสตทไดแขวนลอยในสารละลายน าตาลแมนนทอลความเขมขน 0.5 M สภาพน าไฟฟา 0.16 mS.m-1 เพอใชในการทดลอง

32

3.3.2 การหาสภาวะทเหมาะสมของสารละลายส าหรบแขวนลอยเซลลเนองจากในการทดลองเหนยวน าเซลลในสนามไฟฟากระแสสลบนนเซลลตองแขวนลอย

ในสารละลายทมความเขมขนทเหมาะสมจงท าใหความดนภายในและภายนอกเซลลมคาเทากนหรอใกลเคยงกนเพอไมใหเซลลทแขวนลอยเกดการแตกและเหยวโดยมวธการทดลองดงตอไปน

1) โพรโทพลาสตเนองจากสภาวะทเหมาะสมในการแขวนลอยของโพรโทพลาสต Dendrobium sp.นน

ใชสารละลายแมนนทอลเขมขน 0.5 M (กนกกานต,2542) ดงนนส าหรบการทดลองกบโพรโทพลาสตLillium longiflorum. จงสมใชคาความเขมขนทใกลเคยงกนคอ 0.3 M 0.4 M 0.5 M 0.6 M และ 0.7 Mโดยน าโพรโทพลาสตของ Lillium longiflorum ทไดจากการเตรยมตามขอ 3.3.1 แขวนลอยในสารละลายน าตาลแมนนทอลทมคาความเขมขนดงกลาว ซงบรรจอยในจานหลมขนาดปรมาตร 1 ml แลวนบจ านวนของโพรโทพลาสตในแตละความเขมขนโดยใชอปกรณนบเซลล เพอค านวณคาความหนาแนนของจ านวนโพรโทพลาสตในสารละลายแตละคาโดยใชสมการตามภาคผนวก(2) หลงจากนนนบจ านวนโพรโทพลาสตทยงยงเปนปกต เมอเวลาผานไป 1 ชวโมง 2.5 ชวโมง 5 ชวโมง และ 10 ชวโมงตามล าดบ เขยนกราฟเปรยบเทยบจ านวนโพรโทพลาสตทค านวณไดเทยบกบเวลา(น ามาเปรยบเทยบกนในแตละความเขมขนทใชแขวนลอย เพอหาคาความเขมขนทเหมาะสม) พจารณาจากแนวโนมการลดลงของจ านวนโพรโทพลาสต รวมทงค านวณคารอยละของโพรโทพลาสตทเหลอทเวลา 10 ชวโมงเงอนไขทเซลลเหลอมากทสดและผดปกตนอยทสดจะเปนความเขมขนทเหมาะสมส าหรบใชแขวนลอย

2) เซลลเมดเลอดแดงแขวนลอยเซลลเมดเลอดแดงในสารละลายตามทระบในหวขอ 3.3.1 โดยม MOPS

เปนฟอสเฟตบฟเฟอร(โดยการทดลองคาความเขมขนของ MOPS และโซเดยมไฮดรอกไซด ใหคงทคอ 1 mM )ปรบคาความเขมขนของซโครสเปนท 0.1 M 0.2 M 0.3 M และ 0.4 M เพอหาความเขมขนของซโครสทเหมาะสมในท านองเดยวกบการทดลองกบโพรโทพลาสตของ Lillium longiflorum

3.3.3 การเหนยวน าเซลลในสนามไฟฟาดวยขวไฟฟา 2 ขว1) การเตรยมขวไฟฟาส าหรบใชในการเหนยวน าแบบ 2 ขว

33

ใชลวดนกเกลอลลอยด ทรงกระบอกขนาดเสนผาศนยกลาง 125 µm ความยาว 15cm สอดไวในหลอดแกวคาปลาร ทมขนาดเสนผานศนยกลาง 1 mm ดงใหตรงดวยอปกรณส าหรบดงเสนลวด ทท าขนโดย ภาควชาฟสกส คณะวทยาศาสตรมหาวทยาลยสงขลานครนทร ซงตออยกบอปกรณจายกระแสไฟฟาทปรบคาไดเพอใหเกดความรอนขนในเสนลวด หยดจายสญญาณไฟฟาใชไฟเผาหลอดแกวทปลายทงสองดาน ใหหลอมตดกบเสนลวดเพอใหขวไฟฟามความมน ดงภาพประกอบ 3.2 ก และ 3.2 ข จากนนน าขวไฟฟาทไดมาดดใหเปนรปตว L ดงภาพประกอบ 3.2 คส าหรบการทดลองหนงครงตองเตรยมขวไฟฟา 2 ขว

ก ข

คภาพประกอบ 3.2 ก) ลวดนกเกลอลลอยดหลงจากดงใหตรงสอดอยในหลอดแกวคาปลาร ข) หลงจากใชไฟเผา

ปลายทงสองดานของหลอดแกว จะหลอมจนตดกบเสนลวด เพอปองกนใหลวดไมสามารถขยบไปมา ค) ขวไฟฟาทเตรยมเสรจแลว

2) การทดลองการเหนยวน าแบบ 2 ขวเตรยมอปกรณส าหรบเหนยวน าเซลลโดยจดอปกรณดงภาพประกอบ 3.3 (กนก

กานต, 2542) ตอสายสญญาณจากอปกรณก าเนดสญญาณไฟฟา ทสามารถปรบ แอมพลจด 0 – 10 VP-P

ปรบความถได 0 –30 MHz ไปยงขวไฟฟาทตดอยกบอปกรณปรบเลอนละเอยด (Manipulator) และขวไฟฟาจมในสารละลายน าตาลแมนนทอลความเขมขน 0.6 M สภาพน าไฟฟา 0.096 mS.m-1 ทบรรจในจานหลมขนาด 5 ml ทมโพรโทพลาสตของ Liliumlongiflorum , แขวนลอยอยโดยสงเกตผานกลองจลทศนแบบหวกลบ ทตอเชอมอยกบกลองบนทกภาพวดโอ ส าหรบบนทกภาพทไดจากการทดลองไวเปน วดโอเทป และสงภาพไปยงจอภาพเพอใหสงเกตการทดลอง

34

ภาพประกอบ 3.3 ไดอะแกรมแสดงอปกรณส าหรบการทดลองเหนยวน าเซลลในสนามไฟฟากระแสสลบแบบ 2ขวไฟฟา

น าขวไฟฟาทเตรยมไวตดตงกบอปกรณปรบเลอนละเอยด ตอสายไฟไปยง สวตชทตดอยกบเครองก าเนดสญญาณไฟฟากระแสสลบ ปรบขวไฟฟาทงสองใหขนานกนและอยในระนาบเดยวกนวางหางกน 250 µm จากนนจมขวไฟฟาทงสองลงใน จานหลมขนาดเสนผาศนยกลาง 5 cm ทมโพรโทพลาสตของ Liliumlongiflorum, ขนาด 50 µm. แขวนลอยอยในสารละลายแมนนทอลความเขมขน0.6 M สภาพน าไฟฟา 0.096 mS.m-1 โดยใหมโพรโทพลาสตของลลลอยระหวางขวไฟฟาทงสองจ านวนสองเซลล เสรจแลวเปดสวตช เพอปลอยสญญาณไฟฟากระแสสลบแบบคลนไซด (Sine wave)ดงภาพประกอบ 17 จากเครองก าเนดไฟฟากระแสสลบไปยงขวไฟฟาโดยใชความตางศกย 3 VP-P

ความถ 1 MHz. เพอใหโพรโทพลาสตทงสองเกาะกนและเคลอนทเขาเกาะขวไฟฟา ตามทฤษฎแรงไดอเลกโทรฟอรซส (Dielectrophoresis force)

เรมการทดลองทความถ 30 MHz แลวลดความถลงไปเรอยๆ จนถง 1 Hz สงเกตการหมนของเซลล ผานกลองจลทศนแบบหวกลบ และบนทกภาพไวดวยกลอง วดโอดจทอล เพอใชหาความถเชงมมของการหมนของโพรโทพลาสตทความถตางๆโดยสมการ ( 36 )

เวลาจานวนรอบ

=f (35)

f2π=Ω (36)เมอ f คอ ความถของการหมนของโพรโทพลาสต(หนวยเปน round.s-1 หรอ Hz)

35

ภาพประกอบ 3.4 การจดเรยงตวของโพรโทพลาสตขณะท าการทดลองเหนยวน าแบบ 2 ขวโดยขวไฟฟาวางหางกน250 µm. (โพรโทพลาสตของ Liliumlongiflorum ขนาด 50 µm แขวนลอยอยในสารละลายแมนนทอล เขมขน 0.6 M สภาพน าไฟฟา 0.160 mS.m-1 ความตางศกย 2.5 VP-P ความถ 100 kHz )

น าคาความเรวเชงมมทไดเขยนกราฟ เพอดความสมพนธระหวางความถของสนามไฟฟาทใชเหนยวน ากบ ความถเชงมมการหมนของโพรโทพลาสตส าหรบวเคราะหวาความถของสนามไฟฟามผลตอเซลลทถกเหนยว านอยางไร จากนนทดลองเพอเปรยบคาความเขมของสนามไฟฟาซงก าหนดไดโดยใหคาความตางศกยเปน 3.0 VP-P และ 3.5 VP-P เพอสงเกตผลของความเขมสนามไฟฟาตอการหมนของเซลล และสดทายทดลองโดยการเปรยบเทยบคาสภาพน าไฟฟาเปน 0.16 mS.m-1 ,0.20mS.m-1

เปลยนโพรโทพลาสตเปนของ Dendrobium sp. ทมขนาด 50 µm แลวทดลองในเงอนไขเดยวกบ Lillium longiflorum เพอเปรยบเทยบความถเชงมมของการหมนส าหรบเซลลตางชนดกน

3.3.4 การเหนยวน าเซลลในสนามไฟฟาดวยขวไฟฟา แบบ 4 ขวระนาบวงกลม1) การเตรยมขวไฟฟาส าหรบใชในการเหนยวน าแบบ 4 ขว

ตดแผนพลาสตกใสทมความหนา 2 mm. เปนรปสเหลยมจตรส ขนาด กวางดานละ 1 cm.เจาะรตรงกลางขนาดเสนผานศนยกลาง 3 mm.ใชพลาสตกตดตรงมมทง 4 ดงภาพประกอบ 17.ก และ 17.ข ตดโดยใชกาวตราชางและคลอโรฟอรมน าลวดนกเกลอลลอยด ขนาดเสนผาศนยกลาง 125 µm. ทตดปลายใหตงฉากกบแนวยาวของลวดตดบนแผนพลาสตกทเตรยมไว ภาพประกอบ 17 ค โดยใชกาวตราชาตดใหขวไฟฟาตงฉากกนพอดทง 4 สขว ระยะหางกน 750 µm. แลวจงน าไปตดกบฐานทมความสง 3 cm. ดงภาพประกอบ 3.5 โดยใชหลอดแกวคาปลารส าหรบเปนขาสขาและเปนปลอกของขวไฟฟานกเกลอลลอยด ซงยดตดอยกบขาทท าจากแผนพลาสตกส าหรบตดตงกบอปกรณปรบเลอนละเอยด

θ

ω

36

จ.

ภาพประกอบ 3.5 ขนตอนการเตรยมขวไฟฟา ก และ ข ลกษณะและขนาดของแผนพลาสตกทใชเปนฐานและตรงขวไฟฟา ค และ ง น าลวดนกเกลอลลอยดทเตรยมไวตดลงไปบนฐานทเตรยมไว จ).ขวไฟฟาทใชในการทดลองแบบ 4 ขวการทดลองเหนยวน าในสนามไฟฟาเมอเตรยมเสรจเรยบรอย

2) การสราง PSUPSU เปนอปกรณทสรางขนเพอแปลงสญญาณไฟฟาเปน 4 ชองสญญาณทมเฟสตาง

กน 900 เพอสรางสนามไฟฟาหมนโดยรายละเอยดจะอยในบทท 4 หวขอ 4.3.2 หวขอยอย 1) การพฒนาอปกรณเพอใชก าเนดสนามไฟฟาหมน

3) การทดลองการเหนยวในสนามไฟฟากระแสสลบแบบ 4 ขว

การทดลองแบบ 4 ขวยงใชอปกรณหลกเชนเดยวกบการทดลองแบบ 2 ขวจะตางกนทม PSU เพมเขามาเพอท าหนาท าสญญาณไฟฟาใหเปนแบบ 4 ชอง สญญาณ ทมเฟสตางกน 900 (Outof phase) และลกษณะของขวไฟฟาซงเปลยนไปดงแสดงในหวขอ 3.3.4.1 โดยจดอปกรณตามภาพประกอบ 3.6 และหยอนขวไฟฟาทง 4 ลงในจานหลมขนาดเสนผาศนยกลาง 5 cm ทมเซลลเมดเลอดแดง อยตรงกงกลาง ซงทดลองในสารละลายน าตาลซโครส 0.2 M สภาพน าไฟฟา 0.096 mS.m-1 โดยเรมทดลองทคาความตางศกย 3.2 VP-P ความถ 6 MHz (เปนคาความถสงสด ท PSU ท างานไดอยางถก

37

ตอง ดรายละเอยดในหวขอ 4.3.2 การทดสอบ PSU) แลวลดความถลงไปเรอยสงเกตการหมนของเซลลเมดเลอดแดงบนทกบนทกภาพดวยกลองวดโอเพอใชค านวณคาความถเชงมมของเซลลเมดเลอดแดง ส าหรบน าไปเขยนกราฟดความสมพนธของ Ω กบ f ของสนามไฟฟา เพอใชหาคาคงท K ทเปนลกษณะและชนดของวสดทใชท าขวไฟฟา เนองเซลลเมดเลอดแดงเปนเซลลททราบคาคงททางไฟฟา

เปลยนคาความเขมสนามไฟฟาโดยใชความตางศกย 5.0 VP-P กบ 6.0 VP-P เพอสงเกตผลกระทบทเกดจากความเขมสนามไฟฟาทใชเหนยวน า แลวจงเปลยนสภาพน าไฟฟา เปน 0.16 mS.m-1

กบ 0.20 mS.m-1 เพอศกษาผลกระทบจากสภาพน าไฟฟาของสภาวะแวดลอมทแตกตางกนจากนนเปลยนตวอยางทศกษาเปนโพรโทพลาสตเพอศกษาคาคงททางไฟฟาของโพรโทพลาสตเปรยบเทยบกบการทดลองแบบ 2 ขว

ภาพประกอบ 3.6 ไดอะแกรมแสดงอปกรณการทดลองการเหนยวน าแบบ 4 ขว(โดยรวมจะเหมอนกบแบบ 2 ขวแตจะม PSU เพมเขามาเพราะเปนอปกรณทท าหนาท แยกสญญาณออกเปนสชองสญญาณเพอ

จายใหกบขวไฟฟาทงส โดย PSU นเปนอปกรณทสรางขนเอง )