l’emocromo è l’esame specialistico ed essenziale per l’ematologo indica che: il midollo...
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L’emocromo è l’esame specialistico ed essenziale per
l’ematologo
Indica che:
• Il midollo produce un numero sufficiente di cellule mature di tutte le linee emopoietiche
• Lo sviluppo di ogni linea emopoietica è normale
EMOCROMO
• LA BUONA ESECUZIONE DEL PRELIEVO
• IL TEMPO DAL PRELIEVO• L’ANTICOAGULANTE IDONEO• QUANDO USARE Na-Citrato COME
ANTICOAGULANTE
AUTOMAZIONE IN EMATOLOGIA
I “citometri automatici” sono in grado di contare rapidamente un numero elevato di particelle e di valutarne le dimensioni
Per queste caratteristiche possono in un tempo molto breve fornire molti
parametri con qualità irraggiungibile dalle metodiche manuali
CONTATORE AUTOMATICO
CAMPIONE
Una porzione di sangue viene lisata per:
- misurare la concentrazione di emoglobina
- contare il numero di globuli bianchi
Una porzione di sangue viene diluita per:
- contare i globuli rossi
- misurare il volume dei globuli rossi
- contare le piastrine
ALYALY
LICLIC
HPXHPXNRBCNRBC IGIG
HPCHPC
AtypLympho
AtypLympho
PLT clumps
PLT clumps BLASTI
BLASTI
LUCLUC
GLOBULI ROSSI
PARAMETRI DIRETTI:• CONTEGGIO GLOBULI• DOSAGGIO Hb• MCV
PARAMETRI DERIVATI:• EMATOCRITO• MCH• MCHC
GLOBULI ROSSI
MCV = Mean Corpuscolar Volume (fl = femtolitro)
MCH = Mean Corpuscolar Hemoglobin (valore emoglobina/numero globuli rossi x 10)
MCHC = Mean Corpuscolar Hemoglobin Concentration (valore emoglobina/
valore ematocrito)
NOMENCLATURA
• ANISOCITOSI• ANISOPOCHILOCITOSI• MACROCITOSI• MICROCITOSI• IPOCROMIA• IPERCROMIA• MICROCITEMIA
CURVA DI DISTRIBUZIONE DEL VOLUME ERITROCITARIO
CITOGRAMMA ERITROCITARIO DI VOLUME E CONCENTRAZIONE DI
EMOGLOBINA
ipocromia
macrocitosi
ipercromia
microcitosi
MICROCITOSI
Globuli Rossi = 4.710.000/ulHGB = 10.6 g/dLMCV = 70.0 fL
MACROCITOSI
Globuli Rossi =2.820.000/μlHGB = 11,2 g/dLMCV = 121,4 fL
Densità (concentrazione Hb)Densità (concentrazione Hb)
VVOOLLUUMMEE
Y asse: VolumiX asse: densità celllulare
Macro
Micro
Ipo Iper
Analisi RBC: citogramma volume/concetrazione
RETICOLOCITI IN AUTOMAZIONE
PARAMETRO ESSENZIALE NELLA DIAGNOSI DELLE ANEMIE,ESPRIMONO LO STATO FUNZIONALE DELL’ERITROPOIESI
LA STRUMENTAZIONE AUTOMATICA PERMETTE UN CONTEGGIO ATTENDIBILE POTENDO ANALIZZARE UN NUMERO DI EVENTI SIGNIFICATIVO
RETICOLOCITI IN AUTOMAZIONE
METODO: COLORAZIONI (auramina O, arancio di tiazolo, oxazina, bleu di
cresile) evidenziano l’RNA dei reticolociti
PARAMETRI
% , VALORI ASSOLUTI, IRF
Analisi ReticolocitiH
igh
Ang
le (
5-15
deg
rees
)
Oxazine 750 AbsorptionGLOBULI ROSSIGLOBULI ROSSI RETICOLOCITIRETICOLOCITI
L : Retic maturi
M : Retic a maturazione intermedia
H : Retic più immaturi, com maggiore qtà di RNA
GATEDGATED
• •
2,98%
AUTOMAZIONE IN EMATOLOGIA:
- Contare correttamente le cellule normali
- Evidenziare la presenza di cellule patologiche
-Identificare le cellule patologiche
FORMULA LEUCOCITARIA
FORMULA LEUCOCITARIA IN AUTOMAZIONE
La presenza di cellule patologiche deve essere sempre confermata e valutata insieme a tutti i parametri dell’analisi dell’emocromo.
L ’identificazione del tipo di cellula patologica richiede ancor oggi l’uso di altri strumenti e/o di altre metodiche.
30 100 200 300 400 fL
Formula leucocitaria misurata con metodo impedenziometrico
Vo
l
ume
Attività perossidasica
Intracellular Peroxidase Flow Cytometric Analysis
1
2
34
5
Tecnologia Baso
MONO + LINFO
BLASTI
NEUTR + EOSINO
BASOFILI
LINFOCITOSI
LEUCOCITI = 16,600/μlLINFOCITI =12,100/μl
LUC= 14,0%
LEUCOCITI= 7.680
LEUCOCITOSI149,000/μl
LMC
Peripheral Blood
Peripheral Blood
Basophil granulocyte
CONTEGGIO PIASTRINE
IMPORTANZA DELLA BUONA ESECUZIONE DEL PRELIEVO
QUANDO NON E’ INDICATO L ’ANTICOAGULANTE EDTA
MPV = MEAN PLATELET VOLUME
PDW = PLATELET DISTRIBUTION WIDTH
PCT = PLATELETCRIT
SONO FORTEMENTE INFLUENZATI DALLE CONDIZIONI E DAL TEMPO DI
ESECUZIONE DEL PRELIEVO
PARAMETRI PIASTRINICI
METODO ADVIA
densità
volume
PIASTRINE = 2,000/μl
Conteggi piastrinici non attendibili si ottengono quando sono presenti aggregati, oppure
piastrine giganti,oppure microciti o frammenti di eritrociti o
leucociti
PIASTRINE 78,000/μlAGGREGATI PIASTRINICI
Men Women
Caucasiann=100
Afrocarribeann=51
Africann=65
Caucasiann=100
Afrocarribeann=51
Africann=50
White cell count* 5.7(3.6-9.2) 5.2(2.8-9.5) 4.5(2.8-7.2) 6.2(3.5-10.8) 5.7(3.3-9.9) 5.0(3.2-7.8)
Neutrophil count
3.2(1.7-6.1) 2.5(1.0-5.8) 2.0(0.9-4.2) 3.6(1.7-7.5) 3.0(1.4-6.5) 2.4(1.3-4.2)
Lymphocyte count
1.7(1.0-2.9) 1.9(1.0-3.6) 1.8(1.0-3.2) 1.8(1.0-3.5) 2.0(1.2-3.4) 2.0(1.1-3.6)
Monocyte 0.34(0.18-0.62) 0.33(0.18-0.52) 0.29(0.15-0.58) 0.30(0.14-0.61) 0.31(0.16-0.59) 0.28(0.15-0.39)
Eosinophil count
0.12(0.03-0.48) 0.13(0.03-0.58) 0.12(0.02-0.79) 0.13(0.04-0.44) 0.10(0.03-0.33) 0.10(0.02-0.41)
Platelet count 218(143-332) 196(122-313) 183(115-290) 246(149-374) 236(149-371) 207(125-342)
Ethnic differences in normal blood cell values
Hematological values for normal infants and children. Amalgamation of data derived from various sources, expressed as mean ± 2SD or
95% rangeBirth Day 3 1 month 2 months 3-6 months 1 year 2-6 years 6-12 years
Red cell countx 1012/l
6.0±1.0 5.3±1.3 4.2 ±1.2 3.7± 0.6 4.7± 0.6 4.5 ±0.6 4.6± 0.6 4.6 ±0.6
Hemoglobing/l
180 ±40 180± 30 140± 25 112± 18 126 ±15 126 ±15 125 ±15 135 ±20
Packed cell volume(PCV) l/l
0.60± 0.15 0.56± 0.11 0.43 ±0.10 0.35 ±0.07 0.35 ±0.05 0.34 ±0.04 0.37 ±0.03 0.40± 0.05
Mean cell volume (MCV) fl
110 ±10 105±13 104±12 95±8 76±8 78±6 81±6 86±9
Mean cell Hb (MCH) pg
34±3 34±3 33±3 30±3 27±3 27±2 27±3 29±4
Mean cell Hb conc (MCHC) g/l
330± 30 330± 40 330± 40 320± 35 330± 30 340± 20 340± 30 340± 30
Reticulocytesx 109 /l
120-400 50-350 20-60 30-50 40-100 30-100 30-100 30-100
White cell countx 109 /l
18±8 15±8 12±7 10±5 12±6 11±5 10±5 9±4
Neutrophilsx 109 /l
4-14 3-5 3-9 1-5 1-6 1-7 1.5-8 2-8
Lympocytesx 109 /l
3-8 2-8 3-16 4-10 4-12 3.5-11 6-9 1-5
Monocytesx 109 /l
0.5-2.0 0.5-1.0 0.3-1.0 0.4-1.2 0.2-1.2 0.2-1.0 0.2-1.0 0.2-1.0
Eosinophilsx 109 /l
0.1-1.0 0.1-0.2 0.2-1.0 0.1-1.0 0.1-1.0 0.1-1.0 0.1-1.0 0.1-1.0
Plateletsx 109 /l
150-450 210-500 210-650 200-550 200-550 200-450 180-400