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UHPLCカラムLCカラムカタログ

L-column2 ODS for UHPLC

製品情報UHPLCカラムへの移行アプリケーションデータLine up

L-column2 TM

LC column catalogL-column2 ODS for UHPLC

Sub-2 μm

http://www.cerij.or.jp

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UHPLCカラム　L-column2 ODS for UHPLC

＜UHPLCカラム　L-column2 ODS＞修飾基 : オクタデシル基USP category : L 1炭素含有量 : 17%使用pH範囲 : pH 2 - pH 9

カラム内径 : 1.5 mm, 2.1 mm, 3.0 mmカラム長さ : 10 mm～150 mm

基材シリカゲル規格(ave.)particle size : 2 μmSurface Area : 340 m2/gMedian Pore Diameter : 12 nm

[Analytical conditions]Column: C18Size: 2.0 mm I.D. or 2.1 mm I.D., 50 mm L.Eluent: CH3CN/H2O (50/50)Flow rate: 0.6 mL/minTemp.: 25℃; Detection: UV 254 nm; Inj.vol.: 0.5 μL

右グラフは、市販のUHPLCカラムを理論段数とカラム圧力でプロットしたものです。メーカーによって理論段数及びカラム圧力に違いがあります。「低カラム圧」「高理論段数」が、使いやすいカラムです。

L-column2 ODS, 2 μmは、「使いやすさ」にこだわったUHPLCカラムです。カラム圧力が低く、幅広い流速領域で高理論段数が得られます。

5 μm 2 μm

シリカゲル(左: 5 μm、右: 2 μm)

理論

段数

(N

apht

hale

ne)

10000

9000

8000

7000

6000

500010 20 30 40 50

カラム圧力 (MPa)

N-1(1.9)L-column2 ODS (2)

L-1(2.7)

M-1(2.2)

O-1(2)E-1(2)

D-1(2)

F-3(1.9)

C-6(1.7)高理論段数

低理論段数

低カラム圧高カラム圧

(　): カタログ記載の粒子径

UHPLC(超高速液体クロマトグラフィー: Ultra High Performance Liquid Chromatography)は、粒子径2 μm前後の微粒子充填剤を用いたカラムを使用することによって、高速化、高分離化をはかった液体クロマトグラフィーです。

L-column2 では、高い汎用性を持つ、L-column2 ODS でUHPLC用のカラムとして対応しています。


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最適線速度における理論段数、カラム圧力と各粒子径との関係は、粒子径5 μmを「1」としたとき、右表になります。

粒子径理論段数カラム圧力

1 15 μm

3 μm

2 μm 52

254

53

(6.3倍)

259

(2.8倍)

(2.5倍)

(1.7倍)

[Analytical conditions]Column: L-column2 ODSSize: 2.1 mm I.D.×50 mｍ L.Eluent: CH3CN/H2O (50/50)Temp.: 25℃; Inj.vol.:0.5 μL

理論

段相

当高

さ (N

apht

hale

ne, μ

m)

20

15

10

5

00 １２３ 4 5 6

移動相線速度 (mm/sec)

最適線速度

最適線速度域

L-column2 ODS, 2 μm内径2.1 mｍの最適流速範囲: 0.4 mL/min～内径3.0 mｍの最適流速範囲: 0.8 mL/min～※ LC、カラムの推奨する使用圧力を超えないようにご注意ください)

5 μm (1～2 mm/sec)3 μm (1.5～3 mm/sec)

2 μm (2 mm/sec～)

理論段数 : 粒子径に反比例カラム圧力 : 粒子径の二乗に反比例

カラム

圧力

(M

Pa)

40

30

20

10

00 20 40 60 80 100移動相の有機溶媒比率 (%)

5 μm3 μm2 μm

メタノール25℃ 40℃

アセトニトリル

カラム圧力

[Analytical conditions]Column: L-column2 ODS, 2 μmSize: 2.1 mm I.D.×50 mｍ L. (Cat.No.713140)Flow rate: 0.4 mL/min

粒子径が小さくなると、理論段相当高さが最小になる移動相の線速度が大きくなり、その値の変化は幅広い線速度域で小さくなります。このためUHPLCでは分析の高速化がはかれます。

メタノール比率が50%付近でカラム圧力は最大になります。分析温度を上げるとカラム圧力を抑えることができます。


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分析時間の短縮(超高速分析)

UHPLCカラムへの移行

▶ パラオキシ安息香酸エステルPara-hydroxybenzonate (50 mg/L each)

分離の向上

5 μm 3 μm 2 μm100 mm L.75 mm L.100 mm L.

250 mm L. 150 mm L.150 mm L.

1 1.6倍1.3倍5 μm 3 μm 2 μm

[Analytical conditions]Column: L-column2 ODSSize: 2.1 mm I.D.Eluent: CH3CN/20 mM H3PO4 in H2O (35/65)Temp.: 40℃Detection: UV 240 nmInj.vol.: 0.5 μLSample:1. 4-Hydroxybenzoic acid2. Methyl 4-hydroxybenzoate3. Ethyl 4-hydroxybenzoate4. Isopropyl 4-hydroxybenzoate5. Propyl 4-hydroxybenzoate6. Isobutyl 4-hydroxybenzoate7. Butyl 4-hydroxybenzoate

1

2

3

45 67

Flow rate: 0.2 mL/minColumn pressure: : 4.2 MPa



Eluent: CH3CN/0.1% HCOOH in H2O, gradient

UHPLCショートカラムでのハイスループット分析から、汎用への移行もスムーズです。

2 μm, 10 mm L.Cat.No.713780

SulpirideMilnacipranTandospirone

MianserinTrazodone

DesipramineNortriptyline

Clomipramine

0 5 10 15Time (min)

3 μm, 150 mm L.Cat.No.711020

0 0.4Time (min)

70

5

CH3C

N(%

)

0 15Time (min)

95

5

CH3C

N(%

)

汎用へ移行

▶ 塩基性医薬品Basic drags

[Analytical conditions]Column: L-column2 ODSSize: 2.1 mm I.D.Detection: ESI-MS(+)

UHPLCへ移行

Flow rate: 2.0 mL/minTemp.: AmbientInj.vol.: 0.5 μL

0 8 16 24Time (min)

0 0.20.1 0.3 0.4Time (min)

0 21 3 4Time (min)

0 4 8 12Time (min)

5　μm, 150 mm L. 2 μm, 75 mm L. 2 μm, 150 mm L.Cat.No.713640 Cat.No.713020Cat.No.712020

tR(7)=10.8 minN(7)=30600Rs(6,7)=2.56

分離の向上

tR(7)=3.5 minN(7)=13900Rs(6,7)=1.69

分析時間の短縮

tR(7)=22.0 minN(7)=12800Rs(6,7)=1.60

Flow rate: 0.4 mL/minTemp.: 40℃Inj.vol.: 2 μL

CH3CN (5-95%)CH3CN (5-70%)

5 μmカラムから粒子径をより小さくしたとき、同等の分離能を得るには、以下のようなカラム長さの選択が一般的です。

5 μmカラムの分離度を「1」(ピークの裾が2％程度重なる状態)とすると、理論上、以下のようになります。

UHPLCショートカラム

10 mm L.

20 mm L.


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ペプチド断片を分析してタンパク質の一次構造を確認するペプチドマッピングは、抗体医薬品(バイオ医薬品)の特性解析や確認試験に用いられます。ピークが数多く検出でき、かつシャープであることが重要です。移動相流速を最適化し、カラムを連結すれば、高いピークキャパシティが得られます。

Application Data 生化学

Application No.L2076

[Analytical conditions]Column: L-column2 ODS, 2 μmSize: 2.1 mm I.D.×150 mm L. (Cat.No.713020)Eluent: A: 0.1% TFA in CH3CN; B; 0.1％ TFA in H2O A/B, 2/98-45/55 (0-60 min)Temp.: 40℃; Detection: UV 215 nm; Inj.vol.: 10 μL

▶ トランスフェリンTryptic digest of Transferin

Peak capacity 322

0 20 40 6010 30 50Time (min)

150 mm L.Flow rate: 0.2 ｍL/min

Flow rate: 0.4 ｍL/min

300 mm L.(2本連結)Flow rate: 0.4 ｍL/min

Peak capacity 450

Peak capacity 700

Application Data 医薬品▶ 抗うつ剤15成分一斉分析Antidepressants (20 mg/L each)

SulpirideTrazodone

ParoxetineDesipramine

DoxepinCitalopramAmoxapineMianserin

TrimipramineAmitriptylineNortriptylineFluvoxamineImipramine

SertralineFluoxetine

▶ 抗ヒスタミン剤14成分一斉分析Antihistamines (10 mg/L each)

▶ α遮断薬、β遮断薬、9成分一斉分析α blockers and β blockers (10 mg/L each)

AtenololSotalol

PrazosinPropranolol

YohimbineMetoprololTimolol

Pindolol

Alprenolol

20 4 6 8 10 12Time (min)

2 4 6 8 10 12 14Time (min)

20 4 6 8 10 12Time (min)

ChlorpheniramineTriprolidine

CyproheptadineHydroxyzine

DiphenylpyralinePromethazineDiphenhydramin

Ketotifen

ClemastineTerfenadine

OxatomideFexofenadineHomochlorcyclizine

Ibudilast

[Analytical conditions]Column: L-column2 ODS, 2 μｍSize: 2.1 mm I.D.×100 mm L. (Cat.No.713170)Eluent: A: 0.1% HCOOH in CH3CN, B: 0.1% HCOOH in H2O A/B, 10/90-60/40-100/0 (0-10-15 min)Flow rate: 0.3 mL/minTemp.: 40℃; Detection: ESI-MS(+); Inj.vol.: 1 μLColumn pressure: 26 MPa

Application No.L2067 Application No.L2068 Application No.L2069

0 1510Time (min)

100

60

10

A Co

nc.(

%)


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デッドボリュームの影響

検出器の設定

UHPLCカラム　分析のコツ

[Analytical conditions]Column: L-column2 ODS, 2 μmSize: 2.1 mm I.D.×50 mm L. (Cat.No.713170)Eluent: CH3CN/H2O (50/50)Flow rate: 0.6 mL/minTemp.: 25℃; Detection: 254 nm; Inj. vol.: 0.5 μLSample: 1. Uracil; 2. Benzene; 3. Toluene; 4. Naphthalene

0 1 2Time (min)

1

2

34

大

0 1 2Time (min)

0 1 2Time (min)

レスポンス小

12

3 4

セル容量: 5 μL配管: 0.12 mm I.D.

セル容量: 13 μL配管: 0.17 mm I.D.

1

23 4

[Analytical conditions]Column: L-column2 ODS, 2 μmSize: 2.1 mm I.D.×50 mm L. (Cat.No.713170)Eluent: CH3CN/H2O (60/40)Flow rate: 0.4 mL/minTemp.: 25℃; Detection: 254 nm; Inj. vol.: 0.5 μLSample: 1. Uracil; 2. Benzene; 3. Toluene; 4. Naphthalene

L-column2 ODS, 2 μm の接続タイプは、ウォーターズタイプです。LC配管をウォーターズタイプに合わせ、デッドボリュームが生じないように接続します。タフコネクターを用いる場合は、高耐圧のものを使用してください。

タフコネクター

L-column2 LC配管

No.10-32UNF

1/16”O.D.

約3.5 mm

N(1)=4400N(2)=16600N(3)=18600N(4)=20000

N(1)=1700N(2)=9900N(3)=12600N(4)=14800 セル・配管

最適化

セルや配管を最適化し、デッドボリュームを最小限にします。コンベンショナルセルと0.17 mmの配管では理論段数が低下しピークがテーリングしてしまいます。特に早く溶出するピークはデッドボリュームの影響を受けやすくなります。

超高速分析では、短時間に多くのピークが検出されるので、データの取り込み時間や応答速度(レスポンス)によってピーク形状が悪くなる場合があります。特に早く溶出するピーク幅とピーク高さに影響します。

0 1 2 3Time (min)

0 1 2 3Time (min)


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Line up

・　表にないサイズはご相談ください。・　接続タイプはウォーターズタイプ(ユニファイ細目ねじNo.10-32UNF, 配管外径1/16”, フェラル先の配管の長さ約3.5 mm)です。

内径1.5 mm2.1 mm

3.0 mm

粒子径2 μm Cat.No.

Cat.No.価格(円)Cat.No.価格(円)

カラム長さ

L-column2 ODS: オクタデシルシリル化シリカゲル(USP category: L 1)

150 mm71301071302076,000

100 mm71316071317066,00072333071,000

75 mm

71364064,00072360069,000

50 mm

71314062,00072349067,000

30 mm

71363060,00072365065,000

20 mm

71377053,000

10 mm

71378048,000

＜使用上の注意＞・　送液ポンプのシール部分など、ラインから生じる微細な不溶物が原因となる不具合を生じやすいため、L-column プレカラムフィルターをご使用ください。・　推奨する使用圧力は、以下を目安にしてください。

耐久性

理論

段数

(N

apht

hale

ne)の

維持

率(%

)

100

80

60

40

20

00 500 1000 1500 2000

圧力変動 (回数)

[Durability test conditions]Column: L-column2 ODS, 2 μmSize: 2.1 mm I.D. ×150 mm L. (Cat.No.713020)Eluent: CH3OH/H2O (50/50)Flow rate: 0.7 mL/minTemp.: 25℃Pre-column filter (Cat.No.653002)

圧力変動幅8～96 MPa

0.7 mL/min

0 mL/min

圧力変動1回

…

On

Off

圧力変動2回

0 1 2 3 4Time (min)

10 mm20 mm

30 mm, 50 mm75 mm, 100 mm

150 mm

10 MPa 以下20 MPa 以下40 MPa 以下60 MPa 以下80 MPa 以下

L-column プレカラムフィルター

約30 mm

※ ここでのカラム圧力はシステム圧(カラムの非装着時の圧力)を含みません。

粒子径: 2 μmカラム長さ

プレカラムフィルター交換後維持率90.4%

* * * * * * * * * * * * ** * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * *

L-column2 ODS, 2 μmは、高圧下での使用に耐えるように、超高圧充填をしています。試料注入時の圧力変動に影響することなく、長期間安定して使用できます。カラムに大きな圧力変動を与えると性能の劣化を促進します。送液のOn-Offを繰り返し、圧力変化を与えても、優れた充填技術により、高耐久性です。

Chemicals Evaluation andResearch Institute, Japan

無断転載禁止　　2016/09


　　　　東京事業所クロマト技術部　　　　　　　　　　　e-mail [email protected] 0480-37-2601 FAX 0480-37-2521

〒345-0043 埼玉県北葛飾郡杉戸町下高野1600番地

GC用カラム及びHPLC用カラムの

設計・開発、製造及び供給

ISO9001

カタログについて本カタログは2016年9月1日現在の、製品及び技術資料、アプリケーションデータを掲載しています。最新情報はWebをご覧ください。価格は、日本国内販売価格です。記載価格には消費税は含まれていません。物価の変動、外観及び仕様の変更により、予告なく変更させていただくことがございます。あらかじめ、ご了承ください。

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