Laboratorio 3: BacteriasLaboratorio 3: Bacterias

Tirtsa Porrata-DoriaTirtsa Porrata-Doria

BIOL 3052LBIOL 3052L

ObjetivosObjetivos

Entender la clasificación de las bacterias Entender la clasificación de las bacterias de acuerdo a sus características.de acuerdo a sus características.

Describir las estructuras y morfología de Describir las estructuras y morfología de las bacterias.las bacterias.

Prácticar técnicas de cultivos de Prácticar técnicas de cultivos de bacterias.bacterias.

La CélulaLa Célula

Unidad estructural y funcional básica de Unidad estructural y funcional básica de los organismos vivos.los organismos vivos.

Es la entidad más pequeña que exhibe las Es la entidad más pequeña que exhibe las característcas de vida (digestión, característcas de vida (digestión, respiración, excreción, reproducción).respiración, excreción, reproducción).

Todos los organismos se dividen en dos Todos los organismos se dividen en dos grupos, según sus células: procarióticos y grupos, según sus células: procarióticos y eucarióticos. eucarióticos.

Cont.Cont.

Célula procarióticaCélula procariótica No posee núcleo ni No posee núcleo ni

organelos definidos organelos definidos por membrana.por membrana.

DNA se encuentra DNA se encuentra en los nucleoidesen los nucleoides

Pequeña y simplePequeña y simple ProPro-antes + -antes + Karios-Karios-

núcleonúcleo

Célula eucarióticaCélula eucariótica Posee núcleo y Posee núcleo y

organelos definidos organelos definidos DNA se encuentra DNA se encuentra

en el núcleoen el núcleo Grande y complejaGrande y compleja EuEu-verdadero + -verdadero +

Karios-Karios-núcleonúcleo

TaxonomíaTaxonomía ReinosReinos

Agrupamiento Agrupamiento taxonómico de Filos o taxonómico de Filos o Divisiones Divisiones emparentados. emparentados.

Considerada la Considerada la categoría más alta categoría más alta hasta finales del s. hasta finales del s. XXXX

Sistema de Robert Sistema de Robert Whittaker (1969) Whittaker (1969)

Cont.Cont.

DominioDominio Actualmente Actualmente

considerado el nivel considerado el nivel taxonómico más taxonómico más alto (super-reinos).alto (super-reinos).

3 dominos: 3 dominos: Bacteria, Archaea, Bacteria, Archaea, EukaryaEukarya

Sistema de Woese Sistema de Woese (1990)(1990)

Reino Prokaryotae (Monera)Reino Prokaryotae (Monera)

Organismos procarióticos unicelularesOrganismos procarióticos unicelulares

Incluye bacterias y cianobacteriasIncluye bacterias y cianobacterias

Habitan agua, suelo, aire, lugares extremos Habitan agua, suelo, aire, lugares extremos (ej. Altas temperaturas) y agentes químicos (ej. Altas temperaturas) y agentes químicos dañinosdañinos

Pueden ser fotosintéticos, quimiosintéticos o Pueden ser fotosintéticos, quimiosintéticos o heterotróficosheterotróficos

CianobacteriasCianobacterias

Formando colonias o filamentosasFormando colonias o filamentosas

Llevan a cabo fotosLlevan a cabo fotosíntesisíntesis

Producen esporasProducen esporas

Ambientes de agua dulce, marinos, Ambientes de agua dulce, marinos, terrestresterrestres

Ej. Ej. Gloeocapsa sp., Anabaena sp., Gloeocapsa sp., Anabaena sp., Oscillatoria sp. Oscillatoria sp.

BacteriasBacterias La mayoría presentan pared celular La mayoría presentan pared celular

compuesta de peptidoglucano (polimero compuesta de peptidoglucano (polimero de proteínas y carbohidratos)de proteínas y carbohidratos)

Material genético encontrado en anillos- Material genético encontrado en anillos- plasmidosplasmidos

Reproducción por fisión binariaReproducción por fisión binaria

Pueden formar coloniasPueden formar colonias

Poseen varias formas: cocos, bacilos, Poseen varias formas: cocos, bacilos, espirilos, entre otrosespirilos, entre otros

Morfología bacterianaMorfología bacteriana Cocos – redondosCocos – redondos

Bacilos- bastonesBacilos- bastones

Espirilos- espiral, “zig Espirilos- espiral, “zig zag”zag”

Pueden formar cadenas Pueden formar cadenas (ej. (ej. EstreptoEstreptococos) o cocos) o ramilletes (ej. ramilletes (ej. EstafiloEstafilococos)cocos)

Crecimiento de las coloniasCrecimiento de las colonias

La morfología y tamaño de la colonia se La morfología y tamaño de la colonia se utilizan para identificar las especies de utilizan para identificar las especies de bacterias.bacterias.

Tinción bacterianaTinción bacteriana

Se utilizan tintes para identificar Se utilizan tintes para identificar bacteriasbacterias

Ejemplo: tinción GramEjemplo: tinción Gram Las células responden al tinte de acuerdo a Las células responden al tinte de acuerdo a

la complejidad y composición de su pared la complejidad y composición de su pared celular.celular.

Hay bacterias Gram +, Gram – o Gram Hay bacterias Gram +, Gram – o Gram variable (menos común) variable (menos común)

Tinción GramTinción GramBacteria Gram +Bacteria Gram + Bacteria Gram -Bacteria Gram -

Pared celular simplePared celular simple Pared celular complejaPared celular compleja

Capa de Capa de peptidoglucano gruesapeptidoglucano gruesa

Capa de Capa de peptidoglucano finapeptidoglucano fina

No capa externa de No capa externa de lipopolisacáridoslipopolisacáridos

Capa externa de Capa externa de lipopolisacáridoslipopolisacáridos

Retienen cristal Retienen cristal violeta/iodo-color violeta/iodo-color azul/violetaazul/violeta

Retienen safranina-Retienen safranina-color color rojo/rosadorojo/rosado

Ejercicio 1: Preparar Ejercicio 1: Preparar laminilla laminilla

Preparar una laminilla con muestra del área de Preparar una laminilla con muestra del área de la bocala boca

Utilizar cristal violeta para teñir las bacteriasUtilizar cristal violeta para teñir las bacterias

Observar la preparación através del Observar la preparación através del microscopiomicroscopio

Dibujar lo observadoDibujar lo observado

Ejercicio 2: Observar Ejercicio 2: Observar laminillaslaminillas

Observar laminillas:Observar laminillas: Bacterias - tinción gramBacterias - tinción gram Bacilos gram + y gram –Bacilos gram + y gram – Cocos gram + y gram –Cocos gram + y gram –

Dibujar lo observadoDibujar lo observado

Ejercicio 3: Bacterias en el Ejercicio 3: Bacterias en el ambienteambiente

Tomar una muestra ya sea de aire, agua, suelo, Tomar una muestra ya sea de aire, agua, suelo, entre otros; utilizando la técnica a explicarse en el entre otros; utilizando la técnica a explicarse en el laboratorio.laboratorio.

Colocarla en las placas Petri conteniendo un medio Colocarla en las placas Petri conteniendo un medio de cultivo utilizando las técnicas asépticas de cultivo utilizando las técnicas asépticas correspondientes.correspondientes.

Rotular las placas: nombre, sección, clave, Rotular las placas: nombre, sección, clave, instructor.instructor.

Incubar, observar en 24 hrs y anotar/ dibujar los Incubar, observar en 24 hrs y anotar/ dibujar los resultado.resultado. Dar importancia al crecimiento de bacterias y no de Dar importancia al crecimiento de bacterias y no de

hongos.hongos.

Ejercicio 4: Controlar el Ejercicio 4: Controlar el crecimiento de las bacteriascrecimiento de las bacterias

Utilizar antibióticos, desinfectantes y/o Utilizar antibióticos, desinfectantes y/o antisépticos para determinar su eficacia antisépticos para determinar su eficacia inhibiendo el crecimiento de bacterias.inhibiendo el crecimiento de bacterias. Inocular de forma estriada la muestra de Inocular de forma estriada la muestra de

bacterias en el medio de cultivo.bacterias en el medio de cultivo. Colocar 3 discos, impregnados con 3 diferentes Colocar 3 discos, impregnados con 3 diferentes

sustancias químicas, sobre el agar ya sustancias químicas, sobre el agar ya inoculado con el microorganismo y un disco inoculado con el microorganismo y un disco como control con agua.como control con agua.

Rotular las placas.Rotular las placas. Incubar, observar en 24 hrs y anotar/dibujar los Incubar, observar en 24 hrs y anotar/dibujar los

resultados.resultados. Dar importancia al crecimiento de bacterias y no de Dar importancia al crecimiento de bacterias y no de

hongos.hongos.

Ejercicio 5: MorfologEjercicio 5: Morfología ía bacterianabacteriana

Observar a travObservar a través de un és de un estereoscopio las placas Petri estereoscopio las placas Petri conteniendo colonias bacterianas conteniendo colonias bacterianas para describir su mpara describir su morfologorfología.ía.

Anotar todos los resultadosAnotar todos los resultados

De forma organizada recopilar los De forma organizada recopilar los datos obtenidos por las placas petri datos obtenidos por las placas petri de su sección.de su sección.

Entregar informe la semana próxima Entregar informe la semana próxima (16 de febrero) utilizando los (16 de febrero) utilizando los resultados a su vez de los cultivos de resultados a su vez de los cultivos de las bacterias obtenidas.las bacterias obtenidas.