lab 3. determinacion de la capacidad fermentativa de una levadura

7/30/2019 Lab 3. Determinacion de La Capacidad Fermentativa de Una Levadura

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Biotecnologa de los Productos Agroindustriales 2013

Quiroz Lozada, Melany del Pilar Alvarado Rivera, Jos Antonio | Ingeniera Agroindustrial

1

INFORME DE LA PRACTICA DE LABORATORIO N 3

DETERMINACION DE CAPACIDAD FERMENTATIVA

DE UNA LEVADURA

I. INTRODUCCIONLa presente practica de laboratorio nos es de mucha utilidad para

su aplicacin en el contexto de la biotecnologa, puesto que al

manejar microorganismos es necesario tener el conocimiento de

cuanto metabolito deseado va a producir en una determinada

cantidad de sustrato, es por esto que con este ensayo se hace el

respectivo calculo en caso de necesitar una reproduccin mayor,en el amplio campo de la agroindustria.

II. OBJETIVOS Calcular el rendimiento real de produccin de alcoholmediante fermentacin en base al sustrato utilizado.

Comparar dicho rendimiento real con el ideal oestequiometrico, obteniendo la eficiencia del proceso

realizado.

III. FUNDAMENTACION TEORICAGLUCOLISIS

Es una de las rutas ms importante por su frecuencia en los

seres vivos. El metabolismo de la glucosa comienza con la

gluclisis, (ciclo de Embden Meyerhof) acoplada a la ruta

de las pentosas. Durante la gluclisis una molcula de

glucosa rinde dos molculas de cido pirvico, es decir unamolcula de seis tomos de carbono se escinde en dos de

tres.

Se puede estructurar en 2 etapas:

1. Pasar de Glucosa a Fructosa-1,6-difosfato.

2. Pasar de Fructosa-1,6-difosfato a dihidroxiacetona y

gliceraldehido.

La primera fase es una fase de alteracin qumica paradejar la molcula til para la clula.


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2

Primera fase de la gluclisis

1. La glucosa se fosforila en el alcohol por la

hexoquinasa. La hexoquinasa une el fosfato del ATP mediante

un enlace fosfoster y la transforma en Glucosa-6-fosfato.La Glucosa-6-P est preparada para los procesos que

continan en la gluclisis. La fosforilacin transforma 1

molcula neutra en una molcula cargada negativamente. Hace

que ahora, la glucosa-6-P no pueda volver a salir por la

membrana debido a su carga negativa.

2. A la clula no le gusta la forma aldosa y hace la forma

cetosa (Fructosa-6-P). Es realizado por la fosfoglucosa

isomerasa.

3. Implica la adquisicin de un segundo fosfato que va a

parar al C1 y forma la fructosa-1,6-bisfosfato. Lo relaiza

la fosfofructoquinasa-1 (PFK-1). La fructosa-1,6-bisfosfato

es completamente simtrica. La PFK-1 es un enzima clave en

la gluclisis.

4. La fructosa-1,6-bisfosfato se parte por la mitad y da

dos molculas (dihidroxiacetona-fosfato (DHAP) y

gliceraldehido-3-fosfato (G3P)). La gluclisis se da a

partir del gliceraldehido-3-P. El equilibrio est

desplazado hacia la dihidroxiacetona-fosfato. Slo un 5% es

Gliceraldehido-3-P. La desaparicin continua de G3P

transforma la DHAP en G3P. Todo acaba siendo G3P.

Segunda fase de la gluclisis

A partir del G3P comienzan las transformaciones que dan

lugar a Piruvato (Pyr) (reacciones de oxidacin).

1. La primera reaccin es que el enzima Gliceraldehido-3-

Fosfatodeshidrogenasa oxida el grupo aldehdo a cido(gasta un NAD, que se reduce a NADH). Produce un enzima que

es capaz de incorporar un fosfato al cido carboxlico

correspondiente. Se forma un ster. La fosforilacin a

nivel de sustrato se consigue porque hay ATP con un fosfato

ya activado.

2. El 1,3-Bisfosfoglicerato cede 1 fosfato para sintetizar

ATP. La reaccin la cataliza la fosfogliceratoquinasa. El

producto de la sntesis de ATP es el 3-fosfoglicerato.

Sufre transformaciones que dan lugar a la sntesis dePyruvato. El P3 debe pasar a la posicin 2. Se consigue


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3

mediante el enzima fosfogliceromutasa. La mutasa tiene un

fosfato activo, que se lo da a la posicin 2. En un momento

hay dos fosfatos, pero luego, se lo quita de la posicin 3.

Todas las mutasas funcionan as. Se hace para liberar el OH

en la posicin 3.

3. Se produce la deshidratacin del OH. Se transforma el

alcohol en enol, por la enolasa. Es parecido a Pyruvato,

pero con enol y un fosfato. Se llama fosfoenolpiruvato

(PEP). Es una molcula muy inestable que se transforma en

Pyruvato por la Pyruvatoquinasa y se acopla la energa que

se desprende para sintetizar ATP.

ANLISIS ESTEQUIOMTRICO DE LA GLUCLISIS

Glucosa + 2Pi + 2 ADP + 2 NAD+ 2 Pyr + 2 ATP + 2 NADH + 2 H+ + 2 H2O

La gluclisi es una va que transforma la glucosa en

Pyruvato y, a su vez, reduce2 NAD+del citosol a NADH y usa

2 ADP para formar 2 ATP.

La clula en cuanto puede, transforma otros monosacridos a

molculas que estn en la va de la gluclisis.

Figura 1. Diagrama de la glucolisis


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Limitaciones del Proceso

La determinacin de los factores que limitan la gliclisis

fermentativa del etanol son complejos debido a la

interrelacin existente y a la naturaleza de los parmetrosintervinientes durante el proceso de fermentacin. Algunos

de ellos se deben tener en cuenta en la fermentacin

alcohlica industrial. En las limitaciones que surgen

durante el proceso se pueden enumerar algunos de los ms

importantes como son:

Concentracin de etanol resultante: Una de lasprincipales limitaciones del proceso, es la

resistencia de las levaduras a las concentraciones de

etanol (alcohol) que se llegan a producir durante lafermentacin, algunos microorganismos como el

saccharomyces cerevisiae pueden llegar a soportar

hasta el 20% de concentracin en volumen. En

ingeniera bioqumica estos crecimientos se definen y

se modelan con las ecuaciones de crecimiento celular

dadas por las ecuaciones de Tessier, Moser y de la

ecuacin de Monod.

Acidez del substrato: El pH es un factor limitante enel proceso de la fermentacin ya que las levaduras seencuentran afectadas claramente por el ambiente, bien

sea alcalino o cido. Por regla general el

funcionamiento de las levaduras est en un rango que

va aproximadamente desde 3.5 a 5.5 pH. Los procesos

industriales procuran mantener los niveles ptimos de

acidez durante la fermentacin usualmente mediante el

empleo de disoluciones tampn. Los cidos de algunas

frutas (cido tartrico, mlico) limitan a veces este

proceso.

Concentracin de azcares: La concentracin excesivade hidratos de carbono en forma de monosacridos y

disacridos puede frenar la actividad bacteriana. De

la misma forma la baja concentracin puede frenar el

proceso. Las concentraciones lmite dependen del tipo

de azcar as como de la levadura responsable de la

fermentacin. Las concentraciones de azcares afectan

a los procesos de osmosis dentro de la membrana

celular.
http://es.wikipedia.org/wiki/Ingenier%C3%ADa_bioqu%C3%ADmicahttp://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Ecuaci%C3%B3n_de_Tessier&action=edit&redlink=1http://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Ecuaci%C3%B3n_de_moser&action=edit&redlink=1http://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Ecuaci%C3%B3n_de_Monod&action=edit&redlink=1http://es.wikipedia.org/wiki/PHhttp://es.wikipedia.org/wiki/Disoluci%C3%B3n_tamp%C3%B3nhttp://es.wikipedia.org/wiki/Frutahttp://es.wikipedia.org/wiki/%C3%81cido_tart%C3%A1ricohttp://es.wikipedia.org/wiki/%C3%81cido_m%C3%A1licohttp://es.wikipedia.org/wiki/Difusi%C3%B3n_simple_a_trav%C3%A9s_de_la_membrana_celularhttp://es.wikipedia.org/wiki/Difusi%C3%B3n_simple_a_trav%C3%A9s_de_la_membrana_celularhttp://es.wikipedia.org/wiki/Difusi%C3%B3n_simple_a_trav%C3%A9s_de_la_membrana_celularhttp://es.wikipedia.org/wiki/Difusi%C3%B3n_simple_a_trav%C3%A9s_de_la_membrana_celularhttp://es.wikipedia.org/wiki/%C3%81cido_m%C3%A1licohttp://es.wikipedia.org/wiki/%C3%81cido_tart%C3%A1ricohttp://es.wikipedia.org/wiki/Frutahttp://es.wikipedia.org/wiki/Disoluci%C3%B3n_tamp%C3%B3nhttp://es.wikipedia.org/wiki/PHhttp://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Ecuaci%C3%B3n_de_Monod&action=edit&redlink=1http://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Ecuaci%C3%B3n_de_moser&action=edit&redlink=1http://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Ecuaci%C3%B3n_de_Tessier&action=edit&redlink=1http://es.wikipedia.org/wiki/Ingenier%C3%ADa_bioqu%C3%ADmica


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5

Contacto con el aire: Una intervencin de oxgeno (pormnima que sea) en el proceso lo detiene por completo

(es el denominado Efecto Pasteur). Esta es la razn por

la que los recipientes fermentadores se cierren

hermticamente.

La temperatura: El proceso de fermentacin esexotrmico, y las levaduras tienen un rgimen de

funcionamiento en unos rangos de temperatura ptimos,

se debe entender adems que las levaduras son seres

mesfilos. Si se expone cualquier levadura a una

temperatura cercana o superior a 55 C por un tiempo

de 5 minutos se produce su muerte. La mayora cumple

su misin a temperaturas de 30 C.

Ritmo de crecimiento de las cepas - Durante lafermentacin las cepas crecen en nmero debido a las

condiciones favorables que se presentan en el medio,

esto hace que se incremente la concentracin de

levaduras.

CICLO DE KREBS.

El ciclo de Krebs se desarrolla en las mitocondrias. El

cido pirvico formado durante la gluclisis se convierte

en acetil CoA, el cual a travs del ciclo de krebs se

transforma en anhdrido carbnico. El paso de cido

pirvico a acetil CoA tiene lugar en la matriz mitocondrial

y es catalizado por la piruvato deshidrogenasa. El acetil

CoA ahora entra en el ciclo de Krebs unindose al cido

oxalactico para formar el cido ctrico, por medio de una

isomerasa se transforma en isoctrico, el cual por medio de

una descarboxilasa da lugar al alfa-cetoglutrico, este

paso supone la liberacin de anhdrido carbnico y NADH.
http://es.wikipedia.org/wiki/Efecto_Pasteurhttp://es.wikipedia.org/wiki/Mes%C3%B3filohttp://es.wikipedia.org/wiki/Mes%C3%B3filohttp://es.wikipedia.org/wiki/Efecto_Pasteur


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6

Figura 2. Diagrama del ciclo de Krebs

El proceso comienza con la oxidacin del piruvato,

produciendo un acetil-CoA y un CO2.

El acetil-CoA reacciona con una molcula de oxalacetato (4

carbonos) para formar citrato (6 carbonos), mediante una

reaccin de condensacin.

A travs de una serie de reacciones el citrato se convierte

de nuevo en oxalacetato. El ciclo consume netamente 1

acetil-CoA y produce 2 CO2. Tambin consume 2 NAD+ y 1 FAD,

produciendo 3 NADH y 3 H+ y 1 FADH+.

El resultado de un ciclo es (por cada molcula de

piruvato): 1 GTP, 3 NADH, 1 FADH2, 2CO2

Cada molcula de glucosa produce (va gluclisis) dos

molculas de piruvato, que a su vez producen dos acetil-


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7

CoA, por lo que por cada molcula de glucosa en el ciclo de

Krebs se produce: 2 GTP, 6 NADH, 2 FADH2, 4CO2.

Por cada molcula de acetil CoA se forman dos molculas de

anhdrido carbnico, una GTP, tres NADH y un FADH2, elciclo necesita la incorporacin de dos molculas de agua.

En el ciclo de krebs se encuentran acopladas las

lanzaderas, las cuales intervienen en diferentes procesos

anablicos. De esta forma a partir del ciclo de krebs

pueden formarse aminocidos, cidos grasos incluso glucosa

(gluconeognesis).

FERMENTACIN

Todas las clulas estn capacitadas para sintetizar ATP por

el proceso de la gliclisis. En muchas clulas, si el

oxgeno no est presente, el piruvato es metabolizado en un

proceso llamado fermentacin.

La fermentacin complementa a la gliclisis y hace posible

producir ATP continuamente en la ausencia del oxgeno. Por

la oxidacin del NADH producido en la gliclisis, la

fermentacin regenera el NAD+, el cual interviene otra vez

en para producir ms ATP.

C6H12O6 + 2 Pi + 2 ADP 2 CH3-CH2OH + 2 CO2 + 2 ATP +

25.5 kcal

Se puede ver que la fermentacin alcohlica es desde el

punto de vista energtico una reaccin exotrmica, se

libera una cierta cantidad de energa.

Un clculo realizado sobre la reaccin qumica muestra que

el etanol resultante es casi un 51% del peso, los

rendimientos obtenidos en la industria alcanzan el 7%.
http://es.wikipedia.org/wiki/Adenos%C3%ADn_difosfatohttp://es.wikipedia.org/wiki/Adenos%C3%ADn_trifosfatohttp://es.wikipedia.org/wiki/Reacci%C3%B3n_exot%C3%A9rmicahttp://es.wikipedia.org/wiki/Reacci%C3%B3n_exot%C3%A9rmicahttp://es.wikipedia.org/wiki/Adenos%C3%ADn_trifosfatohttp://es.wikipedia.org/wiki/Adenos%C3%ADn_difosfato


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Figura 3. Proceso de fermentacin

En la fermentacin alcohlica, el cido pirvico de la

gliclisis pierde un carbono en la forma de bixido de

carbono para formas acetaldehdo, el cual es reducido a

alcohol etlico, el NADH se convierte en NAD+ (es oxidado).

Esta es la fermentacin que ocurre normalmente en las

levaduras. Como en la fermentacin del cido lctico, la

fermentacin alcohlica permite a la gliclisis continuar y

asegurar que el NADH regresa a su estado oxidado (NAD+).

La energa neta ganada en la fermentacin es de 2molculas/glucosa de ATP. En ambas fermentaciones (lctica

y alcohlica), todo el NADH producido en la gliclisis es

consumido en la fermentacin, por lo tanto no hay

produccin neta de NADH, y ningn NADH entra a la CTE y

forma ATP.

RESPIRACION:

La reaccin qumica global de la respiracin es la

siguiente:
http://es.wikipedia.org/wiki/Reacci%C3%B3n_qu%C3%ADmicahttp://es.wikipedia.org/wiki/Reacci%C3%B3n_qu%C3%ADmicahttp://es.wikipedia.org/wiki/Archivo:Ethanol_fermentation_es.svghttp://es.wikipedia.org/wiki/Archivo:Ethanol_fermentation_es.svg


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C6 H12 O6 + 6O2 6CO2 + 6H2O + energa (ATP)

En este punto la clula ha ganado solo 4 ATP, 2 en la

gluclisis y dos en el ciclo de Krebs, sin embargo ha

capturado electrones energticos en 10 NADH2 y 2 FADH2.Estos transportadores depositan sus electrones en el

sistema de transporte de electrones localizado en la

membrana interna de la mitocondria.

La cadena respiratoria est formada por una serie de

transportadores de electrones situados en la cara interna

de las crestas mitocondriales y que son capaces de

transferir los electrones procedentes de la oxidacin del

sustrato hasta el oxgeno molecular, que se reducir

formndose agua.

Como resultado de esta transferencia de electrones, los

transportadores se oxidan y se reducen alternativamente,

liberndose una energa que en algunos casos es suficiente

para fosforilar el ADP y formar una molcula de ATP. Se

trata de la fosforilacin oxidativa que permite ir

almacenando en enlaces ricos en energa la energa

contenida en las molculas NADH2, FADH2, NADPH2, que se

liberan en la gluclisis y en el ciclo de Krebs y que ser

ms tarde fcilmente utilizada. Toda cadena respiratoriaque comience por el NAD conduce a la formacin de 3 ATP

mientras que si comienza por el FAD produce slo 2 ATP. El

rendimiento energtico del NADP es similar al del NAD, as

como el del GTP lo es al del ATP.

IV. MATERIALES Y METODOSMATERIALES

Levadura simple Agua destilada Sacarosa

INSTRUMENTOS

Vasos de precipitacin Balones de vidrio Balanza analtica Potencimetro Refractmetro
http://es.wikipedia.org/wiki/Energ%C3%ADahttp://es.wikipedia.org/wiki/Adenos%C3%ADn_trifosfatohttp://www.monografias.com/trabajos/celula/celula.shtmlhttp://www.monografias.com/trabajos/transporte/transporte.shtmlhttp://www.monografias.com/trabajos14/falta-oxigeno/falta-oxigeno.shtmlhttp://www.monografias.com/trabajos14/problemadelagua/problemadelagua.shtmlhttp://www.monografias.com/trabajos14/problemadelagua/problemadelagua.shtmlhttp://www.monografias.com/trabajos14/falta-oxigeno/falta-oxigeno.shtmlhttp://www.monografias.com/trabajos/transporte/transporte.shtmlhttp://www.monografias.com/trabajos/celula/celula.shtmlhttp://es.wikipedia.org/wiki/Adenos%C3%ADn_trifosfatohttp://es.wikipedia.org/wiki/Energ%C3%ADa


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METODOLOGIA DE TRABAJO

Se preparo 400 g de solucin de sacarosa de 20 y 10 Bx,a las cuales se aadi el 0.5% de levadura (1.5g),

agitando vigorosamente a fin de homogenizar correctamentelas muestras.

Se separaron alcuotas de 100 g en los vasos deprecipitacin con las cuales se tomaron los datos

requeridos.

Se tomo medidas de pH y Bx iniciales, as como pesoexacto.

Luego, estos datos se fueron tomando progresivamentedurante una semana hasta obtener los Bx y pH finales.

Las soluciones de 300 g iniciales puestas en los balonesfueron utilizadas para medir cambios de peso a travs dela semana de fermentacin.

Con estos datos se hizo el clculo respectivo paraobtener la cantidad de alcohol producido por

fermentacin.

V. RESULTADOS Y DISCUSIONNo todos los datos respectivos fueron tomados pero al ser

referenciales no alteran nuestros resultados, los mismos

datos que se muestran a continuacin:

Tabla 1. Datos obtenidos con soluciones de sacarosa para

hallar produccin de alcohol mediante levadura.

DIASSOLUCION 10 Bx SOLUCION 20 Bx

Bx REALES pH PESO (g) Bx REALES pH PESO (g)

Da 1 (inicial) 10 5,3 300,6 19,7 5,45 300,1

Da 2 --- --- 293,3 --- --- 292,6

Da 3 --- --- --- --- --- ---

Da 4 --- --- --- --- --- ---

Da 5 --- --- 286,2 --- --- 278,4

Da 6 --- --- 285,8 --- --- 274,9

Da 7 --- --- 285,6 --- --- 273,2

Da 8 (final) 2,8 --- 285,4 7,1 --- 271,9

Los datos en lneas punteadas no se tomaron por ser fin de

semana o no hubo instrumento disponible, de los Bx solo se

requiri el inicial y final de cada solucin por lo quetenemos los datos necesarios para nuestros clculos.


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Sabemos que el rendimiento estequiometrico de la

fermentacin proviene de la reaccin qumica siguiente:

Y el de la respiracin seria:

Donde lo ideal sera que toda el azcar de la solucin se

transforme en alcohol se tiene el rendimiento ideal que

seria:

Luego:

El rendimiento real viene de la misma proporcin entre

alcohol producido y sacarosa consumida, pero como las

soluciones tuvieron ciertos grados Bx al ltimo da, se

asume que no todo el azcar fue consumida por lo que se

hallo el rendimiento real en base a los siguientes

clculos:

Y

De lo que se tiene para las soluciones:


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10 Bx -> 22.0688 g azcar consumido, 15.2 g deDixido de carbono producido

20 Bx -> 39.8148 g azcar consumido, 28.2 g deDixido de carbono producido

Tambin se tiene:

( ) ( )

( ) ( )

Luego:

10 Bx -> 23.230316 g glucosa consumida 20 Bx -> 41.910316 g glucosa consumida

Adems, de la reaccin inicial de glucosa y productos:

180 g glucosa ---- 88 g Dixido de carbono

X ---------------- A

180 g glucosa ---- 264 g Dixido de carbono

Y ---------------- B

Ahora, de la glucosa consumida y el CO2 total producido:

10 Bx ->

Donde nos interesa hallar el valor de X, que seria la

glucosa consumida en el proceso de fermentacin y no el Y

que seria de respiracin:

X = 19.3000195 g de glucosa consumida por la fermentacin.


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13

20 Bx ->

Luego, X seria:

X = 34.0245649 g de glucosa consumida por la fermentacin.

Despus de esto hallamos el rendimiento real del proceso:

10 Bx ->

Rendimiento real solucin de sacarosa de 10 Bx

R. real = 44.6986443 % 20 Bx ->

R. real = 43.6780624 %

Despus de esto se hall la eficiencia:

10 Bx ->

20 Bx ->


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Es sabido que a elevadas concentraciones de soluto,algunas levaduras experimentan una plasmlisis

celular, y otras alteraciones que disminuyen el

crecimiento microbiano lo cual sugerira la baja o

nula produccin de etanol (Casas, 1999). Para nuestrocaso solo se utilizaron concentraciones de 10 y 20

Brix las cuales son ideales para que la levadura

produzca alcohol evitando que la levadura se estrese,

lo cual lo podemos verificar con el rendimiento

obtenido para la muestra de 10Brix tuvo un

rendimiento de 44.6% y de la de 20 Brix tuvo un

rendimiento de 43.6 % el cual est cerca al

rendimiento ideal; obtenindose como eficiencia el

y el respectivamente para cadamuestra, de esto podemos decir que la levadura tuvo unbuen rendimiento en la produccin de alcohol.

La fermentacin alcohlica es un proceso muy complejo;el incremento de la concentracin de etanol a medida

que transcurre la fermentacin supone un obstculo

para el correcto crecimiento y desarrollo microbiano

por los efectos negativos que esto conlleva (Oviedo et

al, 2009).Esto se relaciona con lo dicho por (Casas,

1999) ya que a altas concentraciones de azcar la

levadura va a tener problemas ya que se incrementa la

presin osmtica el cual sera un problema al inicio,

y el otro problema sera que a mayor concentracin de

azcar la concentracin de alcohol en el medio va a

ser ms alto entonces la levadura quedara inhibida.

Segn Concepcin M (1999), la fermentacin es unproceso mediante el cual la levadura convierte

azcares en alcohol, CO2 y otros metabolitossecundarios, teniendo en cuenta que los fermentos

alcohlicos son productos biolgicos, la interrelacin

de los eventos microbiolgicos, bioqumicos y de

ingeniera, as como su conocimiento y cuidadoso

manejo son los llamados a jugar el papel esencial en

el xito del proceso fermentativo, siendo este ltimo

el causante de las principales prdidas en la

produccin.


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La fermentacin est influenciada por varios factorescomo la temperatura, pH, concentracin de azcares y

otras variables que influyen en el crecimiento de los

microorganismos (Gmez, et al 2007).

La temperatura ptima para la formacin de alcohol seestima en el rango de 32 C a 35 C (Navarro et al,

1986).

El xito de una buena fermentacin depende de laeficacia del tratamiento preliminar: concentracin del

azcar, pH y temperatura ptimos; la adicin de

sustancias nutritivas al mosto, contaminacin porotros microorganismos, empleo de un organismo

resistente a altas concentraciones de alcohol,

mantenimiento de condiciones anaerobias y la inmediata

destilacin del producto fermentado (Prescott y Cecil,

1992).

VI. CONCLUSIONES Se logr hacer la medida respectiva de grados Brix y

masa de las soluciones con las cuales se trabaj

obteniendo el rendimiento terico o estequiomtrico, a

su vez comparndolo con el rendimiento real basado

tambin en calculo, obtenindose una eficiencia de

83.083% y 81.186% entre ambos rendimientos para cada

solucin respectivamente.

Nuestro rendimiento real se diferencia un tanto con elideal por lo que se concluye que falto un mayor tiempode proceso fermentativo para que dicha eficiencia se

acerque al 100%.


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VII. BIBLIOGRAFIA Casas, E. 1999. Microorganismos responsables de

alteraciones en alimentos altamente azucarados.

Universidad Complutense de Madrid. Tesis Doctoral.

Facultad de Ciencias Biolgicas, Departamento de

Microbiologa. Madrid, Espaa.

Gmez, S. 2007. Capacidad fermentativa de cepas deSaccharomyces Cerevisiae nativas de la regin

productora de mezcal de Durango. XII Congreso Nacional

de Biotecnologa y Bioingeniera. Mxico.

Navarro, A. 1986. Produccin de etanol porfermentacin con alta concentracin levaduras. Revista

Argentina de Microbiologa 18 (1): 7-11.

Oviedo, L. et al; 2009. Levaduras autctonas concapacidad fermentativa en la produccin de etanol a

partir de pulpa de excedentes de pltano Musa (AAB

Simmonds) en el departamento de Crdoba, Colombia.

Revista Colombiana de Biotecnologa. Universidad

Nacional de Colombia. Vol. XI, Nm. 1. Colombia. pp.

40-47.

Prescott Cate, Samuel, Cecil Gordon, Dunn. 1992.Microbiologa Industrial. Aguilar Madrid. p: 110-158


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VIII. ANEXOSImgenes de la prctica realizada

Figura 1. Soluciones de sacarosa con las

que se trabaj

Figura 2. Medicin de pH

Figura 3. Pesado de soluciones

Figura 4. Medida de grados Bx


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INFORME DE LA PRACTICA DE LABORATORIO N 4

DETERMINACION DE CONTENIDO ALCOHOLICO

DE SOLUCION DE SACAROSA FERMENTADA POR

LEVADURA

I. INTRODUCCIONYa hemos estudiado la capacidad fermentativa de la levadura,

mediante clculos estequiometricos de lo que se debera

producir, no siendo este rendimiento tan alto por diversos

factores, en la presente prctica se trabaj con una de las

soluciones fermentadas mediante destilacin y densimetra de tal

forma que se halle la cantidad de alcohol producido en dicha

solucin, a su vez que podamos comparar esta cantidad con lo

calculado en la primera practica para ver que tanto se asemejan

nuestros resultados.

II. OBJETIVOS Determinar mediante densimetra el contenidoalcohlico de la solucin fermentada, a su vez que se

tome como referencia la temperatura de la misma.

Determinar mediante el mismo mtodo el contenidoalcohlico del destilado de la muestra, apoyndose en

tablas hidroalcoholicas.

Comparar resultados con los de la prctica anterior.

III. MATERIALES Y METODOSMATERIALES

Solucin de sacarosa de 20Bx inicial fermentadaproveniente de la prctica anterior.

Agua destiladaINSTRUMENTOS

Equipo de destilacin simple

Baln de destilacin Matraz Erlenmeyer


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Vasos de precipitacin Picnmetros Balanza analtica Alcoholmetro

METODOLOGIA DE TRABAJO

De la solucin de sacarosa fermentada se hallmediante tablas hidroalcoholicas, la cantidad de

alcohol presente en dicho mosto mediante densidad y

temperatura, adems de tomar el dato de grados Gay

Lussac mediante el uso del alcoholmetro.

Esta solucin se pas al equipo de destilacin, dondese obtuvo alcohol, luego se enraso en una fiola a 100

ml de esta solucin se volvi a tomar dichos datos,

comparando con los valores de la tabla

hidroalcoholica.

Adems de comparar dicha cantidad con el alcoholproducido estequiometricamente de la prctica

anterior.

IV. RESULTADOS Y DISCUSIONLos datos con los que se trabaj fueron los siguientes:

Tabla 1. Datos bsicos de mosto utilizado y destilado para

determinar contenido alcohlico

Como podemos observar, lo que nos muestra el alcoholmetro es un

valor muy alto para lo que nos seala la tabla, estos valores se

hallaron mediante interpolacin utilizando como base la

temperatura y densidad de la solucin (Anexo 1).

De aqu notamos que hay una diferencia profunda entre dicho

rendimiento obtenido mediante destilacin y el obtenido

MUESTRADATOS RESULTADO

GL (Alcoholmetro) Densidad (g/ml) Temperatura (C)Contenido alcohlico

(tabla)

MOSTO FERMENTADOINICIAL

8 0.997786 23 0.141833333 %

SOLUCION DESTILADO-

AGUA--- 0.987779 26 4.94796878 %


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estequiometricamente, por lo que se asume que no toda la

sacarosa presente en el mosto fue degradada para que pase a

convertirse en alcohol.

Luego podemos inferir que la diferencia de resultados entre el

alcoholmetro y la tabla se debe a que la solucin no es una

muestra especfica de agua y alcohol si tambin presenta otras

sustancias orgnicas las cuales hacen que se obtenga resultados

errneos, lo cual hizo aumentar la densidad que no es baja, como

es la caracterstica del alcohol, de aqu que haya equilibrio

entre dicha densidad y la del azcar hacindola parecida a la

del agua, por tanto al comparar estas densidades con la tablas

nos arrojan contenidos alcohlicos diferentes a los encontradosen los clculos estequiometricos de la prctica anterior

V. CONCLUSIONES Se encontraron valores inferiores a los encontrados

por el mtodo estequiometrico.

Se pudo observar que hubo diferencia en los clculosde contenido alcohlico.


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VI. ANEXOSImgenes de la prctica realizada

Figura 1. Determinacin de grados Gay

Lussac mediante alcoholimetro

Figura 2. Destilacin de muestra


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Quiroz Lozada Melany del Pilar Alvarado Rivera Jos Antonio | Ingeniera Agroindustrial

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Figura 3. Tabla hidroalcohlica utilizada

lab 3. determinacion de la capacidad fermentativa de una levadura

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