la recherche danticorps anti-erythrocytaires j. gargouri, crts – sfax
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LA RECHERCHE D’ANTICORPS LA RECHERCHE D’ANTICORPS ANTI-ERYTHROCYTAIRESANTI-ERYTHROCYTAIRES
J. Gargouri, CRTS – Sfax
INTRODUCTION
Intérêt du sang et de ses dérivés en médecine :
Sauvegarde de vie : "sang source de vie",
Amélioration de la qualité de vie,
Action pour le bien être social,
Autorisation d’actes et gestes de soins intensifs/
transplantations et greffes.
Risques multiples +++
SECURITE IMMUNO-HEMATOLOGIQUE
Objectifs :
Eviter la rencontre Ag-Ac chez le receveur,
Prévenir toute immunisation aux Ag érythrocytaires.
Moyens :
GS ABO et Rh,
Phénotypage,
RAI,
Test de compatibilité au laboratoire,
EULM,
Fiche transfusionnelle.
DEUX APPROCHES DE PREVENTION DES AC ANTI-
ERYTHROCYTAIRES
choisit la RAI avant toute transfusion.
recherche d’Ac dans le sérum du patient au moyen d’un
panel.
permet de préciser le type d’anticorps choisir les
phénotypes des CGR à distribuer.
n’évite pas l’immunisation.
1/- l’approche européenne
DEUX APPROCHES DE PREVENTION DES AC ANTI-
ERYTHROCYTAIRES
privilégie le test de compatibilité au laboratoire avant toute
distribution de CGR.
recherche d’Ac personnalisée.
la seule réponse est : poche compatible ou pas incapable
de préciser le type d’anticorps en cas d’incompatibilité.
n’évite pas l’immunisation.
* Cas de la Tunisie.
2/- l’approche anglo-saxone*
REALISATION DES RAI
4 exigences :
Un bon panel.
Un éventail de techniques.
Une bonne technique de Coombs indirect.
Le bon moment.
UN BON PANEL
permettant de mettre en évidence les Ac les plus dangereux :
choix de la composition antigénique +++
plusieurs pays ont défini les Ag qui doivent en faire partie
(circulaire 49/05).
plusieurs types de panels :
dépistage : 2-4 hématies comportant les Ag suivants : D, C, c, E, e,
K, k, Fya, Fyb, Jka, Jkb, Lea, Leb, M, N, S, s, P1, Lua, Lub.
réponse : présence ou absence d’Ac contre les Ag décrits.
UN BON PANEL
PANEL DE G.R Lot N° : 161 Négatif : 0 Exp. Le 15/11/09 Positif : +
: Panel de dépistage Faible : W ++++0+
N°
Rhésus
Kell
Duffy
Kidd
Lewis
MNS
P
Luth.
G.R D C c E e Kell k Fya Fyb Jka Jkb Lea Leb M N S s P1 Lua Lub
1 + 0 + 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0 0 + + 0 +
2 + + 0 0 + 0 0 + 0 + 0 + 0 + + + + 0 +
3 + 0 + + 0 0 + 0 + + 0 + 0 + 0 + + 0 +
4 + + + 0 + + + 0 + + + 0 0 + 0 + + + +
5 + + + + 0 0 0 + + + 0 0 0 + + + + 0 +
6 + + 0 0 + + 0 + + + + 0 0 + 0 + 0 0 +
7 0 0 + 0 + + + + 0 + 0 + 0 + 0 + + 0 +
8 0 + + 0 + 0 0 + + + 0 0 + 0 0 + + 0 +
9 0 + + 0 + 0 + + 0 + + 0 + + + 0 + 0 +
10 0 0 + 0 + 0 0 0 + 0 0 0 0 + 0 + 0 0 +
11 0 0 + 0 + 0 + + 0 + 0 + + 0 + 0 + 0 +
12 0 0 + 0 + 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + 0 +
UN BON PANEL
permettant de mettre en évidence les Ac les plus dangereux : choix de la composition antigénique +++
plusieurs pays ont défini les Ag qui doivent en faire partie (circulaire 49/05).
plusieurs types de panels : dépistage
identification : - 10 hématies ou plus.
- mêmes Ag.
- donne la spécificité de l’Ac.
- validation statistique !!!
UN BON PANELPANEL DE G.R
Lot N° : 161 Négatif : 0 Exp. Le 15/11/09 Positif : +
N°
Rhésus
Kell
Duffy
Kidd
Lewis
MNS
P
Luth.
G.R D C c E e Kell k Fya Fyb Jka Jkb Lea Leb M N S s P1 Lua Lub
1 + 0 + 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0 0 + + 0 +
2 + + 0 0 + 0 0 + 0 + 0 + 0 + + + + 0 +
3 + 0 + + 0 0 + 0 + + 0 + 0 + 0 + + 0 +
4 + + + 0 + + + 0 + + + 0 0 + 0 + + + +
5 + + + + 0 0 0 + + + 0 0 0 + + + + 0 +
6 + + 0 0 + + 0 + + + + 0 0 + 0 + 0 0 +
7 0 0 + 0 + + + + 0 + 0 + 0 + 0 + + 0 +
8 0 + + 0 + 0 0 + + + 0 0 + 0 0 + + 0 +
9 0 + + 0 + 0 + + 0 + + 0 + + + 0 + 0 +
10 0 0 + 0 + 0 0 0 + 0 0 0 0 + 0 + 0 0 +
11 0 0 + 0 + 0 + + 0 + 0 + + 0 + 0 + 0 +
12 0 0 + 0 + 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + 0 +
UN BON PANEL
permettant de mettre en évidence les Ac les plus dangereux : choix de la composition antigénique +++
plusieurs pays ont défini les Ag qui doivent en faire partie (circulaire 49/05).
plusieurs types de panels :
dépistage
identification
autres panels : "Référence", Rhésus, Public négatif, Privé.
UN BON PANEL
UN EVENTAIL DE TECHNIQUES
plusieurs techniques. compte tenu des « comportements » des différents Ac susceptibles
d’être mis en évidence : Saline 22° ou 4° → surtout Ac naturels : anti-Lewis, anti-P1, anti-
Lua, anti-M, anti-N, anti-H Technique enzymatique à 37° (papaine, broméline, ficine,…) : anti-
Rh (D,C, c, E, e), anti-K, certains anti-P1, anti-Lewis,… Coombs indirect : Ac des systèmes immunogènes. Coombs indirect BFI ou LISS Coombs sur hématies traitées par enzymes (Coombs trypsiné) Coombs trypsiné en BFI Techniques automatiques : auto-analyseur
UN EVENTAIL DE TECHNIQUES
quelle association utiliser pour la meilleure sensibilité aux Ac ?
Coombs indirect - technique enzymatique.
support de la réaction : tube, microplaque, techniques
automatiques, gel filtration.
gel filtration Coombs indirect sans perte de sensibilité.
avantages de rapidité et de coût.
intérêt médico-légal (archivage !!!).
UNE BONNE TECHNIQUE DE COOMBS INDIRECT
Concentration globulaire.
Lavage des GR.
Propreté de la verrerie.
Précision de la technique
Qualité de l’antiglobuline +++
un anti-Fya nécessite une bonne activité anti-IgG.
bon nombre d’anti-Lea nécessite une bonne activité anti-C3d.
En pratique :
- Dépistage bonne antiglobuline polyvalente valide, conforme,
soigneusement manipulée et correctement conservée.
- Identification, surtout en cas de mélange d’Ac antiglobulines
spécifiques.
LE BON MOMENT
surtout chez le polytransfusé.
en raison de la cinétique des Ac et de leur éventuelle
absorption par les hématies transfusées en cas de transfusions
répétées sur une période limitée.
SCHEMA DU BON MOMENT
LE BON MOMENT
Meilleur schéma
RAI avant toute transfusion Ac naturels, anti-publics,
immuns (grossesse +++)
Et 7 à 21 jours après la dernière d’une série +++
LIMITES DE LA RAI
Ac anti-privés
Liée à la constitution même du panel
Ne constitue pas un réel danger pour le receveur
Intérêt du test de compatibilité
Certains demandent l’association des deux tests : RAI et test de
compatibilité au laboratoire surcroît de coût sans beaucoup
d’intérêt pour la sécurité immuno-hématologique des patients.
APPLICATION PRATIQUE
RAI - Sécurité des receveurs
- Mettre en évidence la présence éventuelle d’Ac anti-
érythrocytes chez les femmes enceinte ou accouchées.
En Tunisie - RAI indiquée avant les transfusions de CGR.
- Seul le test de compatibilité est obligatoire
(circulaire 49/05).
EXPERIENCE DU CRTS DE SFAXEvolution technique
Année Nombre total
RAI RAI +
Technique
Dépistage Identification
2000 252340 40 Tube (liss + papaine) Carte en gel liss
2001 2910 32 Tube (liss + papaine) Carte en gel liss
2002 3230 39Microplaque (liss +
papaine) Carte en gel liss
2003 3689 43Microplaque (liss +
papaine)Carte en gel liss
2004 4121 27Microplaque (liss +
papaine)Carte en gel liss
2005 4283 69Carte en gel liss +
microplaque papaineCarte en gel liss
2006 4126 91Carte en gel liss +
microplaque papaineCarte en gel liss
2007 3534 55 Carte en gel liss Carte en gel liss
2008 3474 56 Carte en gel liss Carte en gel liss
Total 31890 452
Nombre total de RAI, RAI positives et techniques utilisées 2000 - 2008
D>E>K>C>Leb>Lea>Fya>S>Jka et HLA>c>M>P>e, public et k
EXPERIENCE DU CRTS DE SFAX
172 patients (102 hommes et 70 femmes).
Entre janvier 1994 et septembre
Quinze patients (8,72%) : 9 allo, soit 5,23% et 6 auto, soit 3,49%.
1/- Aplasies médullaires :
EXPERIENCE DU CRTS DE SFAX
54 patients drépanocytaires
Entre Mars 1990 et Septembre 2009
Quatorze patients immunisés (25,92%) : 8 allo, 5 auto et 1 auto et
allo.
2/- Drépanocytose :
EXPERIENCE DU CRTS DE SFAX
404 patients.
Entre Janvier 2000 et Août 2009.
Dix sept patients (4,2 %) avaient une At.I et/ou une Al.I
Quinze patients (3,72%) avaient un TCD positif lors du suivi
(13 TCD IgG et 2 TCD IgG + C’).
3/- SLP ou SMP :
EXPERIENCE DU CRTS DE SFAX
28 parmi les 34 patients répertoriés.
Entre 1994 et 2009.
Sept patients (25%) ont développé une immunisation :
6 patients (21%) 9 alloanticorps
un seul patient une autoimmunisation avec un TCD
positif type IgG.
4/- THROMBOPATHIES CONSTITUTIONNELLES/
EXPERIENCE DU CRTS DE SFAX
12 797 DDS
Entre le 1er Mars et 31 Août 2009
Allo anticorps 3 DDS féminin, soit 0,02%, (0,17% des
femmes).
Auto anticorps de type IgM (agglutinines froides) 4 cas
(0,03%).
5/- RAI CHEZ LES DONNEURS DE SANG
EXPERIENCE DU CRTS DE SFAX
6/- ALLO-IMMUNISATION ET GROSSESSE
2093 femmes enceintes.
Taux d’immunisation croissant avec le nombre de
gestations : 1,08% pour les primigestes (Ac autres que
l’anti-D) à 7,71% pour 4 gestations et plus.
CONCLUSION