Uji Molisch adalah uji untuk membuktikan adanya

karbohidrat. Uji pereaksi molisch terdiri dari larutan 5%

-naftol dalam alkohol 5%. Karbohirat dengan asam sulfat pekat menghasilkan senyawa furfural. Senyawa

furfural dengan pereaksi -naftol menghasilkan persenyawaan berwarna (warnaungu). Reaksi yang

negatif (hijau) merupakan suatu bukti bahwa dalam

sampel yang diuji tidak mengandung karbohidrat.

Penambahan larutan H2SO4 pekat akan menghidrolisis

ikatan glikosidik (ikatan antara monosakarida satu

dengan monosakarida lainnya), menghasilkan

monosakarida selanjutnya yang didehidrasi menjadi

furfural dan turunan karbohidrat dalam uji molisch.

Sedangkan, penambahan H2SO4 melalui tepi dinding

karena larutan tersebut bersifat eksotermis sehingga

panas dari larutan tersebut dapat melubangi dasar tabung

reaksi.

Uji benedict adalah uji untuk membuktikan adanya gula

pereduksi. Dengan prinsip berdasarkan reduksi Cu2+ menjadi

Cu+ yang mengendap sebagai CU2O berwarna merah bata.

Untuk menghindari pengendapan CuCo3 pada larutan natrium

karbonat (reagen benedict), maka ditambahkan asam sitrat.

Larutan tembaga alkalis dapat direduksi oleh karbohidrat yang

mempunyai gugus aldehid atau keton bebas, sehingga sukrosa

yang tidak mengandung aldehid atau keton

bebas tidak dapat mereduksi larutan benedict (Zulfikar A,

2010). Warna biru pada larutan menunjukkan reaksi negatif

(tidak adanya gula pereduksi), sedangkan reaksi positif dengan

adanya warna hijau kebiruan, hijau, kuning, dan endapan

merah bata. Warna endapan ini bergantung kepada

konsentrasi karbohidrat yang diperiksa.

Adapun tujuan dari dilakukannya pemanasan tersebut

adalah untuk mempercepat reaksi antara logam Cu

dalam pereaksi benedict dengan sampel. Berdasarkan

literatur bahwa monosakarida (glukosa, fruktosa &

galaktosa) dan disakarida (sukrosa, laktosa, dan

maltose) dengan hasil pengamatan menunjukan kontrol

positif. Tetapi pada percobaan yang telah kami lakukan,

bahwa hanya fruktosa 1%, laktosa 1%, dan maltosa 1%

yang mengandung kontrol positif. Berarti telah terjadi

kesalahan dalam melakukan praktikum, kemungkinan

kesalahan yang terjadi terdapat pada praktikan yang

kurang teliti dalam meneteskan sampel sehingga

tercampur dengan zat lainnya.

Uji Barfoed adalah uji untuk membedakan monosakarida

dan disakarida. Prinsipnya bahwa karbohidrat dalam

larutan asam lemah akan mengalami perubahan

reaktifitas, karbohidrat dengan reaktifitas rendah akan

hilang daya reduksinya sedangkan karbohidrat dengan

reaktifitas tinggi akan tetap dipertahankan. Ion Cu(dari pereaksi barfoed) dalam suasana asam akan direduksi

lebih cepat oleh gula reduksi monosokarida dari pada

disakarida dan menghasilkan endapan Cu2O berwarna

merah bata. Jika terbentuk warna biru setelah

penambahan fosfomolibdat, maka reaksi positif.

Berdasarkan hasil pengamatan, bahwa hanya sampel sukrosa

dan maltosa yang menunjukkan kontrol negatif. Jika dilihat

berdasarkan literatur, bahwa gula pereduksi adalah glukosa

dan fruktosa, sedangkan sukrosa maupun maltosa bukan gula

pereduksi, walaupun sukrosa tersusun oleh glukosa dan

fruktosa, namun atom karbon anomerik keduanya saling

terikat, sehingga pada setiap unit monosakarida tidak lagi

terdapat gugus aldehida atau keton yang

dapat bermutarotasi menjadi rantai terbuka, hal ini

menyebabkan sukrosa tak dapat mereduksi pereaksi.

Dimana yang cepat mereduksi atau bereaksi adalah

monosakarida. Sementara yang membutuhkan waktu lama

dalam pemanasannya sampai bisa bereaksi adalah disakarida.

Jadi, fungsi pemanasan pada uji barfoed adalah dengan

adanya pemanasan yang lama akan dapat menghidrolisis,

sehingga larutan akan bereaksi (reaksi positif).

Uji selliwanof adalah dalam pengujian ini golongan

aldosa bereaksi, sedangkan ketosa mengalami

proses dehidrasi untuk membentuk 4-hidroksi

metil furfural yang kemudian mengalami

kondensasi dengan resorsinol, dan akan

mengalami kondensasi membentuk senyawa

kompleks berwarna merah orange atau uji yang

spesifik dalam mengindentifikasi gula ketoheksosa.

Pereaksi Selliwanof terdiri dari 0,5% resorsinol dan

HCl pekat. Dilakukannya pemanasan pada bahan

uji yang telah diberi pereaksi Selliwanof adalah

untuk mempercepat laju reaksi ketika dehidrasi

dan kondensasi pembentukan senyawa

kompleks berwarna. Reaksi positif terjadi jika,

larutan berwarna merah

Dari percobaan diperoleh hasil yang sama dengan

literatur, yang menyatakan fruktosa dan sukrosa

merupakan jenis gula yang memberikan

hasil positif . karena sukrosa adalah disakarida

yang terdiri dari fruktosa dan glukosa. Sedangkan

fruktosa, menurut Harper et al (1979) yang

menyatakan bahwa fruktosa dapat bereaksi

dengan reagen Seliwanoff dan memberikan

kompleks warna merah ceri.

Uji iod dengan prinsip bahwa iod dengan pati(amilosa) dapat

membentuk suatu ikatan kompleks yang berwarna biru. Reaksi

uji iod sebagai berikut:

Karbohidrat (polisakarida) + I2 warna spesifik.

Pati terdiri atas dua jenis, yang dibedakan berdasarkan

reaksinya terhadap iodium, yaitu amilosa berwarna biru,

sedangkan amilopektin bewarna kemerahan. (Hartati 2003).

Serta, Amilosa memiliki struktrur lurus yang dominan dengan

ikatan -(1,4)-D-glukosa, sedangkan amilopektin mempunyai cabang dengan ikatan -(1,6)-D-glukosa

ada percobaan yang telah dilakukan, dilakukan percobaan tepung gum arab dengan iod, tepung agar-agar dengan iod, dan tepung inulin

dengan iod. Komposisi tepung pati (amilum) adalah karbohidrat kompleks yang tidak larut dalam air, berwujud bubuk putih, tawar dan

tidak berbau. Pati merupakan bahan utama yang dihasilkan oleh tumbuhan untuk menyimpan kelebihan glukosa (sebagai produk

fotosintesis) dalam jangka panjang. Hewan dan manusia juga menjadikan pati sebagai sumber energi yang penting. Pati tersusun dari

dua macam karbohidrat, amilosa dan amilopektin, dalam komposisi yang berbeda- beda. Amilosa memberikan sifat keras (

pera

) sedangkan amilopektin menyebabkan sifat lengket. Komposisi tepung Gum arab adalah Gum arab dihasilkan dari getah bermacam-

macam pohon Acasia sp. Sudan dan Senegal. Gum arab pada dasarnya merupakan serangkaian satuan-satuan D-galaktosa, L-arabinosa,

aam D-galakturonat dan L-ramnosa. Sedangkan komposisi dari tepung Agar-agar, agar atau agarosa adalah zat yang biasanya berupa gel

yang diolah dari rumput laut atau alga. Agar-agar sebenarnya adalah karbohidrat dengan berat molekul tinggi yang mengisi dinding sel

rumput laut. Ia tergolong kelompok pektin dan merupakan suatu polimer yang tersusun dari monomer galaktosa.

Pada uji Barfoed monosakarida dapat dibedakan dengan

disakarida yang dapat diamati dari terbentuknya endapan

merah bata pada senyawa glukosa, galaktosa, fruktosa dan

arabinosa, sedangkan pada zat uji lainnya tidak terbentuk

endapan merah bata, sehingga dianggap sebagai disakarida.

Sama halnya dengan pereaksi Benedict, pereaksi Barfoed ini

juga mereduksi ion Cu2+

menjadi ion Cu+ . Pada dasarnya, monosakarida dapat

mereduksi lebih cepat dibandingkan dengan disakarida.

Disakarida dengan konsentrasi rendah tidak memberikan hasil

positif oleh karena itu, larutan uji disakarida tidak membentuk

warna merah orange pada percobaan ini.

Pada uji ini diperoleh data bahwa hanya fruktosa yang

menghasilkan warna larutan yang spesifik yakni warna merah

orange yang mengidentifikasikan adanya kandungan ketosa

dalam karbohidrat jenis monosakarida itu. HCl yang

terkandung dalam pereaksi Seliwanoff ini mendehidrasi

fruktosa menghasilkan hidroksifurfural sehingga furfural

mengalami kondensasi setelah penambahan resorsinol

membentuk larutan yang berwarna merah orange. Hal ini

tidak dialami oleh zat uji yang lain di mana sukrosa, galaktosa,

glukosa, dan arabinosa menunjukkan hasil negatif terhadap

adanya ketosa. Akan tetapi sukrosa apabila dipanaskan terlalu

lama dapat menunjukkan hasil yang positif terhadap pereaksi

Seliwanoff. Hal ini terjadi karena adanya pemanasan berlebih

menyebabkan sukrosa terhidrolisis menghasilkan fruktosa dan

glukosa sehingga fruktosa inilah yang nantinya akan bereaksi

dengan pereaksi Seliwanoff menghasilkan larutan berwarna

merah orange.

Pada percobaan Osazon ini diperoleh data bahwa

karbohidrat dapat dibedakan dari bermacam-macam

gambar kristalnya. Hal ini dikarenakan semua

karbohidrat yang mempunyai gugus aldehida atau keton

bebas akan membentuk hidrazon atau oaszon bila

dipanaskan bersama fenilhidrazin berlebih. Maltosa,

fruktosa, dan glukosa pada reaksinya terbentuk kristal.

Berbeda dengan sukrosa, ketika direaksikan tidak

terbentuk kristal. Hal ini dikarenakan gugus aldehida

atau keton yang terikat pada monomernya sudah tidak

bebas.