Heft 11 1965 (Jg. 52) K u r z e Orig ina lmi t t e i lungen 8 0 7

wi th r h o d a m i n e 6 G, n i n h y d r i n (0.4% in a c e t o n e : l u t i d i n e 9:1 v/v), p h o s p h o m o l y b d i c acid - - s t a n n o u s chloride, a n d I~ vapours4) . R a d i o a c t i v i t y was d e t e r m i n e d in each spo t a n d phospho l ip ids were Muted w i t h ~ N metha l lo l ic IgC1. E l u a t e s f r om each spot were combi ned separa t ly , e v a p o r a t e d to d ry - ness in vacuo and ana lyzed for phosphorus . P h o s p h o r u s va lues were correc ted for pape r b l anks t r e a t ed s imilar ly.

The effect of h y p e r v i t a m i n o s i s A on r a t p l a s m a phospho - lipids is s h o w n in t he table . P e r c e n t a g e compos i t ion of r a t p l a s m a phospho t ip ida is ill a g r e e m e n t w i t h t h a t r epor t ed b y NEw~aa~ et al.S). T he d i s t r ibu t ion of p l a s m a phospho l ip ids is no t a f fec ted in h y p e r v i t a m i n o s i s A, b u t the i r specific act i - vi t ies show a change w h e n c o m p a r e d to cont ro l group. An decrease is no t ed in t he t u r n o v e r ra tes of p h o s p h a t i d y l e thano l - amille, leci thin, a n d s p h i n g o m y l i n where as lyso lec i th inshowed a g rea t ly increased inco rpora t ion of a~P i in h y p e r v i t a m i n o i c A ra t s as compa red to t he control group (Table). W h e t h e r these

Table. Ef/ect o[ hypervitaminosis A on rat plasma phospholipids

Substance a)

Phosphatidyl e thmmlaminc ' Lecithin . . . . . . . . Sphingomylin . . . . . . Lysolecithin . . . . . . .

Control b)

% PLPe)] sp.aet. ~)

5.86 375.5 66.52 192.5 t0.48 141.5 17.05 190.5

ExperimentaI b)

% PLP e) sp.act, a) I

6.34 i 273 65.59 t33

9.25 : 107 t6.95 1 305

a) Substances separated by silicie acid impregnated paper chromatography. - - b) All vaiues are average of two experiments done in duplicate. - - e) % total PLP. - - d) Specific activities in eounts/min/~xg P.

changes on p l a s m a phospho l ip ids are b r o u g h t a b o u t d i rec t ly by t he tox ic i ty of v i t a m i n A or resu l t due to an indi rec t a n d unspeci f ic reac t ion of v i t a m i n A is no t cer ta in .

Technica l a s s i s t ance of Mr. N. S~IVASmAVa is acknowl- edged.

Department of Radioisotopes and Biocl~emistry, V. 1 ~. Chest Institute, University o~ Delhi, Delhi-7, India

U. K . ~{ISRA

Eingegangen am t3. M~irz 1965

1) MISRA, U. K. : Naturwissensehaften S2, 188 (t 905, 2) )~ilSRA, U.K. : Ind. J. Bioehem. 1, 95 (1964). - - a)BARTLET% G.R.: J. Biol. Chem. 2~4, 466 (1959). - - a) MARINETTI, G.V., J. ERSL&~D, and J. I(ocnE~: Federation Proe. 16, 837 (t957). - - ~) NEW~IAIq, H.A.I . , C.T. LIU, and D.B. ZILVERS;aVr: J. Lipid Res. 2, 403 (1961).

Jahreszeitliehes Verhalten tier LD 50 yon Na~-Adta

Zur F rage der R ep roduz i e rba rke i t e iner L D 50 wurde ill den J a h r e n 1 9 6 t - - t 9 6 4 23maI die s u b c u t a n e L D 50 von N a = - 5 t h y l e n d i a m i n t e t r a a c e t a t (Na=-Adta) e rmi t te l t . Ins- besondere interess ier te , ob eine jahresze i t l iche Abhgl lgigkeie

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I I I - ~ t ~ _ ~ l I . __ , I 2~ Fe& Ma)'z Anp# Ms~ 2un/ I&// d<r Se, ot OIrL Nov. 3ez

Fig. 1. Subeutane LD 50 yon Na~-Ndta in Abhangigkeit yon der Jahreszeit

der W i r k s a m k e i t dieses i m O r g a n i s m u s v o r n e h m l i c h s u c h Calc ium b i n d e n d e n Chelatbi ldl lers vorl iegt , z u m a l ffir den Ca l c ium-Phospha t -S t o f fwechse l jahresze i t l iche S c h w a n k u n g e n nachgewiesen werden konntell~). Als Ve r suchs t i e r d ien te die bet gleichmM3iger E r n g h r u n g gehaItel le weige M aus aus illsti- t u t se igene r Zucht . Pro L D 50 w u r d e n du rchschn i t t l i eh e twa

30 his 36 m g n n l i c h e Tiere ve rwende t ; inj iziert wurde Na2-Sd ta ill 5 %iger L 6 s u n g v o r m i t t a g s zwischen 8 u n d 13 Uhr . Berech- nu l lg l laeh Lrrci~Fixi~i) u n d WILCOXON~).

Ergebnisse. Die L D 50 ergab sich im Durchsch l l i t t fiir alle 23 l~est immullgel l zu 363 m g / k g (Ver t rauens in te rva l l 338 his 390). Der l l iedrigste W e f t b e t r u g 221 m g / k g (2t5 bis 228), der h6chs t e 460 m g / k g (438 bis 483). Bet Z u o r d n u n g der L D 50 zur Jah resze i t l i nden sich nach Fig. I die niedr igste l l W e r t e im Fr t ih jahr , die h6chs te l l i m S o m m e r nlld im H e r b s t ; ffir J a n u a r his Mat b e t r g g t der D u r e h s c h n i t t 333 m g / k g (3t6 bis 349; [ = 10), ffir J u n i bis D e z e m b e r 402 m g / k g (380 his 427; ]= t3). E in / ih l l l i ch j a h r e s r h y t h m i s c h e s Verhal te l l wu rde ffir die Wi rk - s a m k e i t tox i scber u n d du rch hohe Gaben yon CaCOa po ten - z ier ter an t i r ach i t i s che r Dosen V i t a m i n D 2 an R a t t e u n d lWlaus erhaltel l , wgh rend an t i r ach i t i s che D-Dosel l atleill an Ra t t e l l in ihrer W i r k s a m k e i t yon der J ah re sze i t unabh&ngig warell l) . Wel ln m a n d a v o n ausgeh t , dab der Tod im t e t a n i s c h e n Anfal l n a c h Na2-Adta alleill au f H y p o c a l c g m i e be ruh t , wi i rden unse re Ergebn i s se bedeutel l , dab i m F r t i h j ah r im O r g a n i s m u s der Maus, viel le icht du rch {Jberwiegell der 14nochell a u f b a u e n d e n S e x u a l h o r m o n w i r k u n g zu dieser Jahresze i t , Calc ium erschwer t , im S o m m e r u n d H e r b s t dagegen Ieichter u n d schnel ler au s d e m Calc iumpool zu r Verf t igung gestel l t we rden kann . Ob dies so is t oder e in ande re r M e e h a n i s m u s z u g r u n d e l iegt, wird d u r e h detai l I ier tere U n t e r s u c h u n g e n abznkl~tren sein.

Pharmakologisches Institut dee Universitdt, Halle (Direklor : Pro/. Dr. K. POI-ILE) H. BEXl~M~It~R

Eingegangeu am t 1. Mgtrz t965

x) BEKE~IER, If., U. A. BEx~n: Intern. Z. Vitaminforseh. (ira Druek). - - =)LITCI~FX~I.n, J .T. , u. F. WILCOXO~: J. Pharmaeol. Exptl. Therap. 96, 99 (t949).

Uber den Einflull von NADPH2-NAD-Transhydrogenase auf die direkte Oxydation tier Glukose;

Versuche un/er Verwendung yon Homogenaten des Ehrlieh-Asciiestumors

Die O x y d a t i o n von Gtukose t iber den P e n t o s e p h o s p h a t - ZyMus f t ihr t zu r H y d r i e r u n g yon N A D P u n d d a m i t zu e iner Bere i t s t e l lung yon Wasse r s to f f fiir zellul~re Syn the sen . 13el Vorhande l l se in e ther Pyr id i .n l luc leo t id -Transhydrogenase be- s t e h t die M6gl ichkei t e iner Ube r t r agu l lg des Wasse r s to f f e s voll N A D P H ~ au f N A D u n d d a m i t dessen V e r w e r t u n g fa r die A T P - G e w i n n u n g in der E n d o x y d a t i o n . Das Ausmal3 der d i r ek ten G l u k o s e o x y d a t i o n is t v o m V o r h a n d e n s e i n des pr im/ i ren W a s - se r s to f fakzep to rs N A D P abhgngig . Da in dell m e i s t e n F~illen nebell NADH~ auch N A D v o r g e f u n d e n wird, jedoch fa s t aus - schlieBlich n u r NADPH2, k a n n m a n e rwar ten , dab in Zellell mit. /ehlender oder wenig akliver Pyr id i l l nuc l eo t i d -T ranshyd rogenase nach Zugabe dieses F e r m e n t e s N A D P H ~ d e h y d r i e r t wird u n d d a d u r c h eine A k t i v i e r u n g der G l u k o s e v e r w e r t u n g tiber den P e n t o s e p h o s p h a ~ - Z y k l u s erfolgt. Bet Verwendu l lg y o n GIu- kose-l-14C mfil3te bet de ra r t igen Zellen nach Zugab e y o n T r a n s h y d r o g e n a s e die Menge an a n f a l l e n d e m ~4CO 2 z u n e h m e n . E ine P r i i fung der erw~thnten {Jberlegullgen erschien d a n n durchf i ih rbar , wenn n n t e r a l laeroben B e d i n g u n g e n u n d Zu sa t z yon N A D e inem Zel lhomogel la t oder d e m {3bers tand des le tz te ren n a c h hoch tou r ige r Zen t r i fug i e rung Pyr id in l luc leo t id- T r a n s h y d r o g e n a s e zugegeben wird.

Ve r suchsa l l o rdnung : 0,5 g Ehr l ich-Asc i tesze l len der Mau s w u r d e n 20 sec im I- Iomogenisa tor nach M1~RKENSCI-ILAGBR h o m o - genis ier t (0,25 m Saccharose, 0,002 m EDTA) . Zent r i fug ie ren bet 3000 g e rgab das H o m o g e n a t , bet 96000 g den ldbers tand , die beide m i t T r a n s h y d r o g e n a s e (EC J.6.1,1.) u n d Glukose- 1 -laC eine S tunde bet 30 ~ in N2-Atmosph/ i re i n k u b i e r t wnrden . Milieu : 0,05 m Tris-0,02 m P h o s p h a t , p lg 7,4, 0,002 m E D T A , 0,015 m KCI, 0,005 m MgSO4, 0,006 m ATP, 9 t?; Hexoki l lase . Die T ra l l shyd rogenase wurde n a c h KAPLAN 1) oder einer e igenen noch nnve r6 f f en t l i cb t en Methode gewonnen . P r o A n s a t z w u r d e n 20 ~xM Glukose m i t e iner C-~-Akt iv i t~ t yon 0,4 b~C (8,8 - I05 dpm) eillgesetzt. E l l d v o l n m e n 2,5 ml.

Tabelle. Direkte Glukoseoxydation im Uberstand

i 10,012 0,016

NAD*) . . - - - - 0,06 6,0 : 0,6 6,0 6,0 6,0

TrH . . . - - 0,10 0,10 ! 0,001 0,01 0,10

Gluk . . . 0,002 0,005 0,019 I 0,019 0,023 0,065

*) NAD in ~M pro Ansatz; TrH = Transhydrogenaseaktivitfi t ill VM NADPH~/m/n pro Ansatz; Gluk = Glukose-C-~-Umsatz in u~'I CO~.

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