UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS(Universidad del Per, DECANA DE AMRICA)FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICAESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUMICA

MATERIA : QUIMICA ANALITICA

INSTRUMENTAL DOCENTE : Norma Carlos Casas TEMA : Curva de Ringbown ALUMNOS : Elizabeth Huamn Meza Franklyn Torres Chacon

Grecia Jaime Herrera

Joel Candela Rojas

Vanessa Rayme Yez SEMESTRE : 2015- I2015

I.INTRODUCCIN

En la primera prctica aprendimos la constitucin, el manejo y el cuidado del espectrofotmetro UV visible y la importancia que tena dicho instrumento para el reconocimiento de una sustancia. Para reconocer una sustancia hallamos su curva espectral la cual despus fue comparada con la curva espectral de una sustancia patrn; otra manera es que debe de cumplir con la Ley de Lambert Beerpero debemos saber que esta ley tiene sus limitaciones y que una de estas tiene que ver con la concentracin delanalito.

En esta prctica se aprender a hallar la concentracin ptima para una mejor lectura en el espectrofotmetro UV visible y para que elanalitocumpla con la Ley de Lambert -Beer, esto lo lograremos con el uso de la Curva deRingbown.

La curva deRingbownrelaciona laabsortanciacon la concentracin delanalito. Mediremos la absorbancia de diferentes concentraciones de unanalito, hallaremos el porcentaje detransmitanciay con esto laabsortancia, luego la relacionaremos con sus concentraciones y de acuerdo a la curva reconoceremos la concentracin ptima en la cual se cumpla con la Ley de Lambert Beer.

II. MATERIALES Y EQUIPOS

Espectrofotmetro UV visible

Fiolas

Pipetas graduadas

Aseptil rojo (Azosulfamida)

III. MTODOS

El analito fue colocado junto a un patrn (agua) en el espectrofotmetro. Medimos la transmitancia conforme aumentamos la longitud de onda. El punto en el cual la transmitancia sea la ms baja posible ser nuestra absorbancia ms alta, es decir, la longitud ptima de la onda nos otorga la absorbancia ms alta posible de la sustancia problema. Si deseamos graficar la curva de Ringbown (la que nos permite formar nuestra curva de calibracin) primero debemos realizar las diluciones. Preparamos soluciones de una concentracin desde 0.1 ug/ml , 0.2 ug/ml , 1 ug/ml , 2 ug/ml , 5 ug/ml , 10 ug/ml , 15 ug/ml , 20 ug/ml , 30 ug/ml , 200 ug/ml hasta 500 ug/ml a partir de la solucin estndar de aseptil rojo (azosulfamida 5%).

Una vez que ya tuvimos nuestras diluciones preparadas, pudimos comenzar con las lecturas de la transmitancia, para esto, se aadieron en las cubetas del espectrofotmetro cada dilucin unitariamente. Las lecturas fueron del % de transmitancia; nuestra labor luego consisti en determinar la absortancia: absortancia = 100 - %T, para luego graficar nuestra curva Absortancia vs Log (C) (Curva de Ringbown). (Pino; 1983)

IV. RESULTADOSV. DISCUSIONESEn la prctica realizada se grafic la Curva de Ringbown en donde con la longitud de onda ptima (525nm) hallada en la prctica pasada se hall la transmitancia para obtener la absortividad; la muestra utilizada fue la azosulfamida, solucin adecuada para dicha prctica ya que posee grupos cromforos que son los grupos funcionales de la molcula responsables de los mximos de absorcin. (Hernndez, 2002)

//Grupos cromforos

/En la curva de Ringbow, los cruces de la parte recta (la intermedia), con las mesetas inferior y superior, determinan un valor para los lmites de deteccin mnimo y mximo, respectivamente. Este rango de valores nos ayudar para saber cules podrn ser los valores ptimos para poder trabajar en la curva de calibracin. (Skoog, 2005)

VI. CONCLUSIONES

Para poder cuantificar una sustancia a partir de su espectro es necesario que su concentracin este no muy concentrado o muy diluido porque no sern cuantificados de manera confiable. Las curvas deRingbownayudan a determinar los rangos de concentracinptimos.

VII. CUESTIONARIO

1) Caractersticas del mtodo colorimtrico-Es una tcnica muy usada para determinar la concentracin de un compuesto o de un grupo de compuestos que forman parte de una mezcla.-Al pasar luz blanca a travs de una solucin coloreada, algunas longitudes de onda se absorben con preferencia sobre las otras. Muchos compuestos no son coloreados pero pueden absorber luz en la regin visible si se someten a la accin de un reactivo apropiado. Estas reacciones son a menudo especficas y muy sensibles. La mayor ventaja consiste en que no es necesario el aislamiento del compuesto y que se pueden determinar los constituyentes de incluso mezclas complejas.-Determina la concentracin de un compuesto incgnita, midiendo la absorbancia que produce la muestra a un determinado color.Se confecciona una curva con las absorbancias que producen muestras sintticas que tienen cantidades conocidas del mismo compuesto y por comparacin se determina la concentracin.Discusiones:A la hora de representar grficamente los datos espectrofotomtricos el % deabsortanciase traza en funcin del logaritmo de la concentracin (Baeza; 2003) aunque el % detransmitanciapuede emplearse directamente como funcin de ordenada. Sin embargo, existi cierta ventaja prctica en el uso de laabsortanciaporque cuando las concentraciones son bajas se hallan asociadas enabsortanciastambin bajas y la pendiente de la curva siempre es positiva.2) Requisitos para aplicacin del mtodo espectrofotomtrico.- Disposicin del espectro correspondiente a cada una de las sustancias puras.- Comprobacin de la exactitud del espectrofotmetro.- Calibracin de las escalas de longitudes de onda y de lastransmitancias(o absorbancias).3) En 2 lneas explique linealidad para la validacin del mtodo en lagentamicina.La linealidad del mtodo se evalu teniendo 7 concentracionesstandaresde sulfato degentamicinacuyas concentraciones oscilan entre 30 y 120ug/ml. Se prepararon quince muestras, las distintas ejecuciones eran genuinos repeticiones y no slo repeticiones a la misma lectura; Este enfoque proporcionar informacin sobre la variacin en la absorbancia entre muestras de misma concentracin.Discusiones:La metodologa de validacin fue de acuerdo con la Conferencia Internacional de Armonizacin ("ICH" Tema Q 2 B Nota de orientacin sobre la validacin de los procedimientos analticos)4) De acuerdo al espectro obtenido Cuales fueron los mximos obtenidos? Cual fue la longitud de onda escogida?, Por qu?5) Indique 2 conclusiones de la investigacin--VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS Harris D. Anlisis qumico cuantitativo. Tercera edicin. Barcelona Espaa. EditorialRevertS.A; 2007. Pino F. Prez D. Anlisis de elementos traza por espectrofotometra de absorcin molecular UV visible. Sevilla Espaa. Editorial Universidad de Sevilla; 1983. OlsenE. Mtodos pticos de anlisis. Barcelona Espaa. EditorialRevertS.A; 1990. HernandezH. Lucas. Introduccin al anlisis instrumental. 1ed. Espaa. Editorial Ariel. 2002. p 413 Skoog, D. West, D. Introduccin a la qumica analtica. 8 ed. Barcelona: S.AEdionesParaninfo 2005 p. 502 Baeza, A. Qumica Analtica Instrumental I: Precisin en espectrofotometra; Documento de apoyo. 2da edicin 2003. Universidad Nacional de Colombia, establecimiento de un mtodoespectrofotomtrico. Servicios acadmicos virtuales. Disponible en http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2001184/lecciones/Cap10/01_01_01.htm.Consultadoen abril del 2015