INTERFERON INTERFERON ß-1aß-1a

Su producción y Control de Calidad

¿Qué es la esclerosis múltiple?

Una enfermedad que afecta al sistema nervioso central y resulta en una pérdida progresiva de ciertas funciones del cuerpo y de capacidades físicas.

La esclerosis múltiple ataca el sistema nervioso central:

cerebro y la médula espinal.

Santa Lidwina de Santa Lidwina de SchiedamSchiedam

Jean Martin Charcot, 1860sJean Martin Charcot, 1860s

El comienzoEl comienzo

La mielina cubre cada fibra nerviosa y ayuda a la transmisión del impulso nervioso entre el cerebro y otras partes del cuerpo.

La destrucción de la mielina dificulta esta comunicación conduciendo a sensaciones anormales problemas de visión y debilidad.

Las células T del sistema inmune se vuelven activas contra los componentes de la mielina. Esto causa una inflamación local en regiones localizadas del cerebro y de la médula espinal.

EtiologíaEtiología

En los países industrializados, la EM es la segunda causa de discapacidad en adultos jóvenes, sólo superada por los traumatismos..

Esclerosis Múltiple. Historia en MéxicoEsclerosis Múltiple. Historia en México

Incidencia en México 12 por 100,000 Habitantes.

Primer caso reportado 1932. Luis Trucy Aubert.

Esclerosis múltipleEsclerosis múltiple

ProblemasProblemas

• Sobrediagnóstico. • Tiempo.• Más de 100 dx.diferenciales.

alfa-4 b-1 Integrin y Linfocito-Talfa-4 b-1 Integrin y Linfocito-TPenetración de la Barrera HematoencefálicaPenetración de la Barrera Hematoencefálica

Anclaje, Giro de inversión

Adhesión Firme Diapédesis

Inflamación Tisular

Emigración de células T de la corriente sanguínea al Tejido: Un proceso de pasos múltiples

1) Von Adrian, et al. N Engl J Med. 2000.2) Von Adrian, et al N Engl J Med, 2003

Diagnóstico Temprano en la EM Comparado con Otras Enfermedades Neurodegenerativas

42 a. sano Paciente con EM Paciente con EM

Vida media de la lesión activa

Los medicamentos biotecnológicos que actualmente se comercializan tratan por lo general las siguientes

enfermedades:

Ataques cardíacos Infarto cerebral

Esclerosis múltiple Leucemia

Hepatitis Artritis Reumatoide

Cáncer mamario Diabetes

Insuficiencia cardíaca Linfoma

Cáncer renal Fibrosis quística

No puede haber un sistema de salud pública exitoso que no incluya el tratamiento gratuito de estas enfermedades.

Pautas del tratamientoPautas del tratamiento

• Definido diagnóstico de EM según los criterios de Poser.

• EM con curso clínico que incluya recaídas. • EM con actividad manifiesta por la historia clínica,

exámenes físicos secuenciales o estudios seriados de resonancias magnéticas.

• Iniciar el tratamiento tan pronto como sea posible. • Tomar las medidas necesarias para la prevención del

embarazo. No debe usarse inmunomoduladores durante la lactancia y el embarazo.

Pautas del tratamientoPautas del tratamiento

• Debe proporcionarse amplia información al paciente con respecto a los riesgos y beneficios del fármaco.

• Mantener el seguimiento regular del paciente por personal calificado, vigilando el apego al tratamiento, la eficacia y los posibles efectos colaterales.

• La pérdida del beneficios y efectos colaterales severos son indicaciones de suspender la terapia con inmunomoduladores.

• El tratamiento debe mantenerse hasta que se disponga de otra alternativa que pruebe ser más efectiva.

¿Qué son los interferones?

Son proteínas, naturalmente producidas por las células de nuestro cuerpo y que actúan como moduladores del sistema inmune para la defensa contra los virus.

El organismo no sintetiza suficiente interferón beta para combatir estados muy alterados de la normalidad, es por ésto que se requiere de la ayuda de la biotecnología.

Estructura del IFN betaEstructura del IFN beta• IFN beta-1a e IFN beta 1-bGlucosilación Cys Cys sust por Ser

IFN beta 1-a (Células CHO)

No clucosilaciónNo met de terminal -N

IFN beta 1-b (E. Coli)

270 x 106 Actividad Específica, UI/mg 20 x 106*

*Dentro del mismo bioanálisis contra el estándar del Instituto Nacional de Salud (NIH, USA) 531 (estudio GF 8105) y Pharm Res 1998; 15:641-649)

Conceptos ActualesConceptos ActualesMOA (Modo de Acción) del Interferón- MOA (Modo de Acción) del Interferón- bb

Macrófago

Células T

Células BCélulas B Célula PlasmáticaCélula Plasmática

Tipos de interferones existentes en la naturaleza

Interferones

α β

Leucocitos Fibroblastos

γ

Linfocitos

1a 1b

NATURAL

BIOTEC

Células CHOBHK

Bacterias

Modo de acción del Interferón Modo de acción del Interferón ßß

IIFFNN

IIFFNN

Pasos principales del proceso Pasos principales del proceso de obtención del interferón betade obtención del interferón beta

Investigación bibliográfica(técnico-médica)

Vector del INF beta-1Vector del INF beta-1

IFN b1 a Expression vector8266 bp

DHFR gene

BGH polyA

SV40 polyA CMV promoter

SV40 promoter

ColE1 orig in

SV40 polyA

Neomycin

IFN

Ampicillin ORF

Pasos principales del proceso Pasos principales del proceso de desarrollo farmacéuticode desarrollo farmacéutico

Investigación bibliográfica; evaluación y validación delbiofármaco; pruebas de laboratorio y de formulación; pruebas lotes piloto; desarrollo, implementación y validación de métodos analíticos; estudios de estabilidad; estudios preclínicos; estudiosclínicos; trámite de registro; escalamiento industrial; estudios de bioequivalencia.

Diseño, desarrollo, producción y control analítico del Biófármaco

- Descripción del aislamiento, identificación y caracterización del gen; obtención del organismo recombinante (Banco Celular Maestro); caracterización de la molécula (biofármaco); desarrollo del método de producción (incluyendo la purificación); desarrollo y validación de las técnicas analíticas y desarrollo de las especificaciones; realización de pruebas de potencia in vivo y/o in vitro, estudios de estabilidad, condiciones de almacenamiento, etc.

- Toda esta información está contenida en el “Protocolo Resumido de Fabricación para Biotecnológicos” – requisito específico de COFEPRIS para productos biotecnológicos.

1RA ETAPAMODIFICACIÓN GENÉTICA

Célula deCélula demamíferomamífero

ADNADN

ProteínaProteínaIFN betaIFN beta

2DA ETAPA. Proceso fermentativo

Cél/ml

Reactor/días

5L

25L

100L

Biorreactor de escala piloto

Cultivo celular

Optimización del proceso de Optimización del proceso de BiofermentaciónBiofermentación

Celligen Plus (New Brunswick Sc .)

Companía : New Brunswick Scientific Co., Inc.Descriptión: Celligen Plus - bioreactor dedicado al cultivo celular,Modo de operación: perfusión / células ancladas ( discos de Fibra-Cell ) o células ensuspensión.Dotado de: un sistema de control de microproceso que proporciona control de agitación,

sensores para control de PH y flujo de gases, 5 bombas, controles de loop y registro de datoson line ( Biocommand ).Medidas de vasos de trabajo: 2.2, 5.0, 7.5 & 14 LSistema validado por cGMP

Sistema Fibra-Cell disco/ células ancladas

Células en suspensiónFermentador en proceso/Sistema Fibra-Cell

Gemabiotech

BiofermentaciónBiofermentación

BiofermentaciónBiofermentación

3RA ETAPA. Proceso de purificación

Método cromatográficoescalado

Clarificación Método cromatográficoEscala pequeña

Pruebas de calidad farmacopéicas que se le realizan al interferón beta.

AnálisisAnálisis

AnálisisAnálisis

Producto terminado:• Descripción del producto terminado• Descripción del producto reconstituido• Identidad por electroforesis• Identidad: actividad antiviral• Potencia • Esterilidad• Pirógenos• Inocuidad• Hermeticidad

CaracterizaciónCaracterización

Identificación y descripción de las propiedades del biofármaco, mediante la realización de pruebas analíticas basadas en las llamadas “técnicas moleculares”, por ejemplo:

- Western blot.- ELISA.- Electroforesis (peso molecular).- Isoelectroenfoque.- Mapeo peptídico.- Secuenciación de ácidos nucléicos.- PCR.- HPLC y espectrometría de masas.- Microscopía electrónica.- Cristalografía de rayos X.- Bioensayo (prueba de potencia in vivo; generalmente en modelos a escala de laboratorio).- Etc.

Comparación de productos por un laboratorio tercero autorizado.

Formulación para su comercializaciónFormulación para su comercialización

• El objetivo es establecer las condiciones óptimas para la recepción y estabilidad del producto a largo plazo.

• La información que se obtiene en los estudios de estabilidad indican si la molécula muestra o no tendencias a la degradación.

Investigación y Desarrollo Investigación y Desarrollo FarmacéuticoFarmacéutico

- Desarrollo farmacéutico: - Desarrollo y escalamiento de los procesos de producción y

control del principio activo.- Desarrollo y escalamiento de los procesos de producción y

control del producto terminado; formulación; determinación e implementación de especificaciones de calidad y técnicas de control analítico.

- Integración del dossier (por ej. la sección “CMC” “Chemistry, Manufacturing and Controls”).

- Gestión de la obtención del Registro Sanitario ante las Autoridades correspondientes.

- Estudios de mercado, promoción y lanzamiento.- Farmacovigilancia permanente.

Investigación y Desarrollo Farmacéutico

- Investigación científica básica y “proof of concept”.- Investigación clínica.- Caracterización del biofármaco.- Elaboración de prototipos del producto.- Conducción de estudios preclínicos.- Conducción de estudios clínicos controlados en

humanos, de fases I, II, III y IV, para demostrar eficacia, seguridad, fijar la dosis y posología, determinar las indicaciones, investigar posibles efectos adversos,etc..

DMT DOSIS FRECUENCIA

IFN Beta 1-b 250µg/ SC Cada tercer día

IFN Beta 1-a 30 µg / IM semanal

Acetato de Glatirámero 20 mg / SC diario

Mitoxantrona 12mg/m²/ IV, no mas de 140 mg/m²

c/ 3 meses

IFN Beta 1-a 22-44 µg/ SC 3/semana

Natalizumab 300 mg / IV C/4 semanas

Tratamientos aprobados por las autoridades regulatorias internacionales.

INF ß-1a: balance positivo

• El efecto principal del fármaco es la reducción de la frecuencia de brotes hasta de un 30 a un 60% (esto quiere decir, a modo de ejemplo, que un paciente que iba a tener 3 brotes en un año sin tratamiento, puede tener de 1 a 2 con tratamiento).

• Disminuye la gravedad de los brotes

• Retarda la acumulación de la discapacidad física

INF INF ß-1a: balance negativoß-1a: balance negativo

El INF ß-1a y 1b está contraindicado en pacientes con hipersensibilidad a los INFs, componentes de la fórmula, con una depresión grave y con historia previa de epilepsia.

Efectos adversos *

•Dolor de cabeza•Fatiga•Rash •Estado gripal•Espasmos musculares•Depresión

•Elevación de enzimas hepáticas•Reacciones adversas locales

•Reportados para el Rebif, Avonex, Betaferón, Reportados para el Rebif, Avonex, Betaferón, Neurauxa y otras marcas. Neurauxa y otras marcas.

INF INF ß-1a: atenciones especialesß-1a: atenciones especiales

• Los pacientes con angina de pecho ó arritmias deben ser monitorizados estrechamente.

• Se debe tener precaución en pacientes con insuficiencia renal ó hepática y en pacientes con mielosupresión grave.

• No existen estudios suficientes de seguridad y eficacia en mujeres embarazadas, durante la lactancia y en menores de 18 años.