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IMPORTANCIA DE LA ETAPA
PREANALITICA EN LOS TEJIDOS
Dra. Gabriela Acosta Haab Hospital Maria Curie – San Isidro Patologia
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Medicina de Precisión
• Patologia Convencional
• Patologia Personalizada
• Patologia Moderna
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DIAGNOSTICO MORFOMOLECULAR
• Diagnostico Morfológico• Diagnostico Molecular
PATOLOGIA MORFOMOLECULAR
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DIAGNOSTICO MORFOMOLECULAR
• Optimizar el manejo de los tejidos• Preservar la Morfologia• Preservar la Genomica• Preservar la Proteomica
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PATOLOGIA MAMARIA
• Diagnostico Morfológico
• Tipo tumoral
• Grado Histológico
• Embolias
• Compromiso ganglionar
• Perfil Hormonal
• Perfil Molecular
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Tejido es la fuente de información:
• Morfología
• Proteinas
• ADN
• ARN
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Pautas para preservar la información del tejido
ETAPAS : Preanalitica Analitica Interpretacion
• Estamos todos involucrados• Comienza antes de la recolección de la muestra
• Conociendo los pasos criticos
• Cuidando el tejido cuidamos el paciente
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Ciclo de las muestras en el laboratorio
Etapa preanalitica
Antes de 1 hs fijacion en
formol buffer
Fijacion entre 8 a
72 hs
Laboratorio paciente =
numero = tacos = informe
Estudio macroscopico Procesador del formol a
la parafina
Realizar el tacoCortar el tacoColorear el preparadoDiagnosticoInforme = numero de
protocolo= numero de taco
Etapa postanalitica - analitica
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Guias Internacionales:
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http://www.msal.gob.ar/images/stories/bes/graficos/000000
1339cnt-20180921-guia-inmunohistoquimica-para-tecnicos.pdf
http://www.msal.gob.ar/images/stories/bes/graficos/0000001339cnt-20180921-guia-inmunohistoquimica-para-tecnicos.pdf
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• Etapa Preanalitica:
• Isquemia Caliente
• Isquemia Fría
• Fijador
• Tiempo de Fijación
• Incorporar datos al informe AP
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Isquemia Caliente
• Tiempo entre la ligadura de las arterias y extraccionde la muestra
• Tipo de operación
• Modalidad de la intervencion
• Habilidad del cirujano
• De 30´ a 1 hr es una hipoxia a 37 ° comienza
la arteracion del ARN
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Isquemia Fría
• Tiempo que tarda la muestra en ser colocada en el
formol
• Todas las guías recomiendan que sea un tiempo
menor a 1 hora
• Si se prolonga comienza la acidosis y degradación
enzimática
• Se altera por igual el ARN, ADN y las Proteínas
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Fijador: Formol 10%
• Universalmente aceptado
• Para tejidos y coagulos citologicos
• Desnaturaliza las proteinas
• Rompe los puentes de Hidrogeno ( cross linking )
• Forma grupos hidroximetilenos
• Inactiva enzimas que degradan en tejido
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Fijador: Formol 10%
• El formol comercial contiene 7-15 % de metanol
para estabilizarlo
• Por lo tanto la fijacion es doble formol metanol
• La cantidad de aldheido varia con la temperatura
• El tipo de agua que utilizamos y el pH varian la
estabilidad del formol
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Fijador: pH
• El pH es importante porque casi todos los procesos
biológicos son pH dependientes y mínimos cambios
pueden alterarlos
• El pH 7 evita la acidificación a acido fórmico y
disminuye la cinética de fijación
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Tiempo optimo de fijacion
• Entre 6 a 72 hs
• El formol penetra 1 mm por hora
• Llega a un plateau a las 24 hs
• La relacion muestra folmol es de 1/10
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Fijador
Formol buffer
• Se puede comprar ya preparado
• ( duración de 6 a 12 meses )
• Se puede preparar
• ( duración 3 meses )
Preparación:
• Formaldehido 40% 100 ml
• Agua Destilada 900 ml
• Fosfato de Sodio monobásico 4 grs
• Fosfato de Sodio dibasico 6.5 grs
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• Envase de 10 litros
• Única uso
• Cierre hermético
• Dosificaciones precisa
• Evita derrames
• No ingresa oxigeno
• Sistema sellado
• Disminuye la exposición
Fijador Formol 10% pH7
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La mayoría de los kits comerciales para IHQ, ISH, técnicas moleculares y
test genéticos estas optimizados para tejidos fijados en formol e incluidos
en parafina
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• Encuesta desde la Sociedad Argentina de Patología
• Charlas en Hospitales y Sanatorios
• Charlas en Escuelas de Instrumentadoras
• Charlas en Jornadas y Congresos
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Que necesitamos los patólogos
• Saber el tiempo de isquemia fría :
• Horario de extracción de la muestra
• Horario en que la muestra fue puesta en el fijador
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• Tipo de fijador
• Con esto el patologo va a saber el tiempo de fijacion
• TODOS ESTOS DATOS DEBERIAMOS INCLUIRLOS EN LOS INFORME DE ANATOMIA PATOLOGICA
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• Hoy para un diagnostico integrado desde la morfología a lo molecular el primer paso es cuidar la etapa preanalítica de los tejidos
• Tenemos que educar a todos los que están involucrados en el proceso
• Trasmitir la importancia que tiene preservar el tejido