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I nfestation naturelle de P hlebotomus ariasi et P hlebotomus perniciosus (D iptera -P sychodidae ) par L eishmania infantum (K inetoplastida -T rypanosomatidae ) en C atalogne (E spagne ) GUILVARD E.*, GALLEGO M.**, MORENO G.*, FISA R.**, RISPAIL P.*, PRATLONG F.*, MARTINEZ-ORTEGA E.***, GALLEGO J.** & RIOUX J.A.* Summary : Natural infection of P hlebotomus ariasi and P hlebotomus perniciosus (D iptera-P sychodidae) by Leishmania infantum (K inetoplastida-T rypanosomatidae) in Catalonia (S pain). Result of two years of survey Eighteen strains of Leishmania infantum were found in 8,329 phlebotomine sandflies dissected during two surveys in the Priorat region (Catalonia, Spain). Three zymodèmes were isolated and typed by isoenzyme analysis, namely MON-1 from four Phlebotomus ariasi and one P. perniciosus, MON-29 from seven P. ariasi and five P. perniciosus and MON-77 from one P. perniciosus. A fourth zymodème (MON-105) was isolated from a laboratory bred sandfly (P. perniciosus which was permitted to feed on a leishmanial dog from which three zymodemes (MON-1), MON-77 and MON-105) had previously been cultured. KEY WORDS : Leishmania infantum, Phlebotomus ariasi, Phlebotomus perniciosus, natural infection, Spain. Au cours de la dernière décennie, le perfectionnement des techniques d’isolement des Leishmania dans les populations naturelles de Phlébotomes a permis l’iden- tification des « vrais » vecteurs, base essentielle de l’ana- lyse écologique des foyers d’infection (Rioux et coll., 1986 a et b , Guilvard et coll., 1991). En Catalogne espagnole, une première enquête réalisée en 1986 à Torroja del Priorat, province de Tarragone (alt. 340 m), avait démontré l’infestation de deux espèces du sous-genre Larroussius, Phlebotomus ariasi et P. perniciosus, par trois zymodèmes du complexe phylogénétique L. infantum : MON-1, MON-29 et MON-77. Les fréquences d’infestation étaient de 0,41 % (4/967 ♀ ) pour P. ariasi et de 0,42 % (6/1431 ♀ ) pour P. perniciosus (Rioux et coll., 1986 b). En 1987, une deuxième enquête était conduite, sur des bases identiques, à Poboleda, village de même altitude et de même climat (méditerranéen subhumide, type IV) situé à trente kilomètres au sud du précédent. Du 15 juillet au 30 août 1987, les captures, effectuées dans cette localité au piège CDC (415 nuits-pièges) en situa- tion intra et péridomiciliaire, ont totalisé 15 615 Phlé- botomes ♂ + ♀ (37,6 Ph/NP). Les quatre espèces sui- vantes ont été identifiées : P. ariasi, P. perniciosus, P. * Écopathologie parasitaire, Faculté de Médecine, 163, rue Auguste Broussonet, 34000 Montpellier, France. ** Unitat de Parasitologia, Facultat de Farmacia, Av. Diagonal, SN 08028 Barcelona, España. *** Departamento de Zoologia, Facultad de Biologia, Universidad de Murcia, 30071 Murcia, Espana. Parasite, 1996, 3, 191-192 Résumé : Deux enquêtes successives sur les vecteurs de Leishmania infantum, réalisées dans le Priorat (Catalogne, Espagne), ont permis la dissection de 8 329 Phlébotomes dont 6 775 Larroussius (2 123 Phlebotomus ariasi et 4 652 P. perniciosus). Au total dix- huit souches ont été isolées chez ce même sous-genre et rapportées, par l'analyse enzymatique, à L. infantum MON-1, MON-29, MON-77. Ces souches se répartissent entre P. ariasi (11 souches : quatre MON-1, sept MON-29) et P. perniciosus (sept souches : un MON-1, cinq MON-29, un MON-77). Par ailleurs un chien, originaire du même foyer, hébergeait un quatrième zymodème (M O N -105) mis en évidence au laboratoire par gorgement sur P. perniciosus d'élevage. MOTS CLÉS : Leishmania infantum, Phlebotomus ariasi, Phlebotomus perniciosus, infestation naturelle, Espagne. sergenti et Sergentomyia minuta. Sur ce lot, la dis- section de 5 740 Phlébotomes ♀ a conduit à l’isole- ment de neuf souches de Sauroleishmania et cinq souches de Leishmania. L’identification isoenzyma- tique (15 enzymes) de ces dernières a permis de les rapporter à L. infantum MON-1 et MON-29. Parmi les Phlebotomus, seuls les représentants du sous-genre Larroussius étaient infestés : 0,41 % pour P. ariasi (4 souches : trois MON-1 et un MON-29, pour 967 ♀ disséquées) et 0,03 % pour P. perniciosus (une souche : MON-1, pour 3221 disséquées). En définitive, dans les localités de Torroja et Poboleda, les dissections cumulées de 2 123 P. ariasi ♀ et 4 652 P. perniciosus ont permis d’isoler 18 souches de L. infantum, soit un taux moyen d’infestation de 0,26 % (tableau I). Les souches se rapportaient aux zymo- dèmes MON-1 (cinq souches), MON-29 (12 souches) et MON-77 (une souche). Les mêmes zymodèmes, MON-1 et MON-29, étaient identifiés dans les deux localités. Ils étaient hébergés aussi bien par P. ariasi (quatre MON-1, sept MON-29) que par P. perniciosus (un MON-1, cinq MON-29). Le zymodème MON-77 n’était observé qu’une fois, à Torroja, chez P. perni- ciosus 1. 1. Un quatrième zymodème, MON-105 sera isolé plus tard de P. per- niciosus d'élevage gorgés sur un chien de Torroja. L’animal était éga- lement infesté par MON-1 et MON-77 (Pratlong et coll., 1989). Ces trois zymodèmes ne se distinguent que pour une seule enzyme, la G6PD (électromorphes 100, 102 et 105). Note de recherche 191 Article available at http://www.parasite-journal.org or http://dx.doi.org/10.1051/parasite/1996032191

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In fes t a t io n n a tu r elle de P h l e b o t o m u s a r ia s i et P h l e b o t o m u s p e r n ic io s u s (D ip t e r a -P s y c h o d id a e )

p a r Le is h m a n ia in f a n t u m (K in e t o p l a s t id a -T r y p a n o s o m a t id a e ) en C a t a l o g n e (E s p a g n e )

G U IL V A R D E .* , G A L L E G O M .**, M O R E N O G .* , F IS A R .**, R ISP A IL P .* , P R A T L O N G F .* , M A R T IN E Z -O R T E G A E .*** , G A L L E G O J .* * & R IO U X J .A .*

Summary : Natural infection o f P hlebotom us aria si and P hlebotom us perniciosus (D iptera-P sych o did ae) b y Leishmania infantum (K inetoplastida-T rypanosomatidae) in Catalonia (S pain). Result o f tw o years o f survey

Eighteen strains of Leishmania infantum were found in 8 ,3 2 9 phlebotomine sandflies dissected during two surveys in the Priorat region (Catalonia, Spain). Three zymodèmes were isolated and typed by isoenzyme analysis, namely MON-1 from four Phlebotomus ariasi and one P. perniciosus, M O N -29 from seven P. ariasi and five P. perniciosus and M O N -77 from one P. perniciosus. A fourth zymodème (M ON-105) was isolated from a laboratory bred sandfly (P. perniciosus which was permitted to feed on a leishmanial dog from which three zymodemes (MON-1), M O N -77 and M ON-105) had previously been cultured.

KEY WORDS : Leishmania infantum, Phlebotomus ariasi, Phlebotomus perniciosus, natural infection, Spain.

Au cours de la dernière décennie, le perfectionnement des techniques d’isolement des L eish m a n ia dans les populations naturelles de Phlébotomes a permis l’iden­tification des « vrais » vecteurs, base essentielle de l’ana­lyse écologique des foyers d’infection (Rioux et coll., 1986a et b , Guilvard et coll., 1991).En Catalogne espagnole, une première enquête réalisée en 1986 à Torroja del Priorat, province de Tarragone (a lt. 340 m), avait dém ontré l’infestation de deux espèces du sous-genre Larroussius, P h lebotom u s a r ia s i et P. p ern iciosu s, par trois zymodèmes du com plexe phylogénétique L. in fan tu m : MON-1, MON-29 et MON-77. Les fréquences d’infestation étaient de 0,41 % (4/967 ♀ ) pour P. a r ia s i et de 0,42 % (6/1431 ♀ ) pour P. p ern ic io su s (Rioux et coll., 1986b).En 1987, une deuxième enquête était conduite, sur des bases identiques, à Poboleda, village de même altitude et de même climat (méditerranéen subhumide, type IV) situé à trente kilomètres au sud du précédent. Du15 juillet au 30 août 1987, les captures, effectuées dans cette localité au piège CDC (415 nuits-pièges) en situa­tion intra et péridomiciliaire, ont totalisé 15 615 Phlé­botom es ♂ + ♀ (37,6 Ph/NP). Les quatre espèces sui­vantes ont été identifiées : P. ariasi, P. pern iciosu s, P.

* Écopathologie parasitaire, Faculté de Médecine, 163, rue Auguste Broussonet, 34000 Montpellier, France.** Unitat de Parasitologia, Facultat de Farmacia, Av. Diagonal, SN 08028 Barcelona, España.*** Departamento de Zoologia, Facultad de Biologia, Universidad de Murcia, 30071 Murcia, Espana.

Parasite, 1996, 3, 191-192

Résumé :Deux enquêtes successives sur les vecteurs de Leishmania infantum, réalisées dans le Priorat (Catalogne, Espagne), ont permis la dissection de 8 3 2 9 Phlébotomes ♀ dont 6 7 7 5 Larroussius (2 123 Phlebotomus ariasi et 4 6 5 2 P. perniciosus). Au total dix- huit souches ont été isolées chez ce même sous-genre et rapportées, par l'analyse enzymatique, à L. infantum M O N -1, M O N -29, M O N -77. Ces souches se répartissent entre P. ariasi ( 1 1 souches : quatre M O N -1, sept M O N -29) et P. perniciosus (sept souches : un M O N -1, cinq M O N -29, un M O N -77). Par ailleurs un chien, originaire du même foyer, hébergeait un quatrième zymodème (M O N -105) mis en évidence au laboratoire par gorgement sur P. perniciosus d'élevage.

MOTS CLÉS : Leishmania infantum, Phlebotomus ariasi, Phlebotomus perniciosus, infestation naturelle, Espagne.

sergenti et S ergentom yia m in u ta . Sur ce lot, la dis­section de 5 740 Phlébotomes ♀ a conduit à l’isole­ment de neuf souches de S au ro le ish m a n ia et cinq souches de L eishm an ia . L’identification isoenzyma­tique (15 enzymes) de ces dernières a permis de les rapporter à L. in fan tu m MON-1 et MON-29. Parmi les P hlebotom us, seuls les représentants du sous-genre Larroussius étaient infestés : 0,41 % pour P. a r ia s i (4 souches : trois MON-1 et un MON-29, pour 967 ♀ disséquées) et 0,03 % pour P. pern iciosu s (une souche : MON-1, pour 3221 disséquées).En définitive, dans les localités de Torroja et Poboleda, les dissections cumulées de 2 123 P. a r ia s i ♀ et 4 652 P. p ern ic io su s ♀ ont permis d’isoler 18 souches de L. in fantum , soit un taux moyen d’infestation de 0,26 % (tableau I). Les souches se rapportaient aux zymo­dèmes MON-1 (cinq souches), MON-29 (12 souches) et MON-77 (une souche). Les mêmes zymodèmes, MON-1 et MON-29, étaient identifiés dans les deux localités. Ils étaient hébergés aussi bien par P. a r ia s i (quatre MON-1, sept MON-29) que par P. p ern ic iosu s (un MON-1, cinq MON-29). Le zymodème MON-77 n ’était observé qu’une fois, à Torroja, chez P. p e rn i­ciosu s1.

1. Un quatrième zymodème, MON-105 sera isolé plus tard de P. per­niciosus d'élevage gorgés sur un chien de Torroja. L’animal était éga­lement infesté par MON-1 et MON-77 (Pratlong et coll., 1989). Ces trois zymodèmes ne se distinguent que pour une seule enzyme, la G6PD (électromorphes 100, 102 et 105).

N ote de recherche 191

Article available at http://www.parasite-journal.org or http://dx.doi.org/10.1051/parasite/1996032191

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GUILVARD E., GALLEGO M., MORENO G. E T A L

Espèces Localités

Nombre de Phlébotomes

capturés ( 9 et c )

Nombre de Phlébotomes 9

disséquées

Nombre de Phlébotomes 9

infestées(%)

Phlebotomus ariasi Torroja 2 271 1 156 (0,61)Poboleda 2 264 967 4 (0,41)

Phlebotomus pem iciosus Torroja 3 354 1 431 6 (0,42)Poboleda 11 189 3 221 1 (0,03)

Phlebotomus sergenti Torroja 10 2 0 (0)Poboleda 50 18 0 (0)

Sergentomyia minuta Torroja 101 0 0 (0)Poboleda 2 112 1 534 9* (0,59)

Total L a rro u ss iu s Torroja 5 916 2 587 11 (0 ,43 )Poboleda 13 453 4 188 7 (0 ,17 )

Total général 21 351 8 329 27 (0 ,32 )

* Sauroleishmania spp.

Tableau I. - Phlébotomes capturés et disséqués dans les localités de Torroja et de Poboleda (Province de Tarragone, Espagne). Piégeage par capturateur manuel et par piège CDC (Torroja : 340 nuits-pièges ; Poboleda : 415 nuits-pièges).

Ainsi, par l’abondance des Phlébotomes, la variabilité de l’infestation vectorielle et la diversité des parasites, le foyer leishmanien du Priorat constitue un excellent modèle écoépidém iologique de L. in fan tu m . Son ana­lyse approfondie2 permettrait d’éclairer certains aspects encore mal connus de ce cycle, à savoir : 1) la signi­fication écogénétique du polymorphisme enzymatique, 2) l’importance épidémiologique de la « plurivectoria- lité intrafocale », 3) le poids relatif des facteurs intrin­sèques (degré d’efficacité du cycle intravectoriel) et extrinsèques (anthropisation des milieux) dans la sta­bilité spatiale et temporelle du com plexe pathogène.

REMERCIEMENTS

T ravail réalisé dans le cadre de l’action intégrée fra n co -e sp a g n o le , M o n tp e llie r -B a rce lo n e . Contrat n° 16/216. Nous adressons nos remer­

ciements à notre collègue Robert Killick-Kendrick qui a bien voulu relire le manuscrit.

RÉFÉRENCES

G uilvard E., Rioux J.A., G allego M ., P ratlong F., M a h jo u r J . ,

M a rtin ez- O rtega E., D ereure J., Sa d d ik i A. & M artini A. Leishmania tropica au Maroc. III - Rôle vecteur de Phle­

botomus sergenti. A propos de 89 isolats. Annales de Parasitologie hum aine et comparée, 1991, 66, 96-99.

P o r tu s M ., G a l le g o J., Rioux J. A., P r a t lo n g F., M o re n o G ., F isa R ., G a l le g o M ., M u n o z C., R ie ra C., S a n c h e z F. & S e r r â t T. Enzymatic heterogeneity among strains of Leish­m ania infantum from human visceral and cutaneous Leishmaniasis in Catalonia (Spain). Revista Iberica de Para­sitologia, 1989, 49, 287-289.

P ratlong F ., P o rtu s M ., Rispa il P ., M o ren o G ., B astien P. &

Rioux J.A. Présence simultanée chez le chien de deux zymodèmes du complexe Leishmania infantum. Annales de Parasitologie h um am e et comparée, 1989, 64, 312-314.

Rioux J.A., G uilvard E., D ereure J., La n o tte G ., D enial M., P ratlong F ., S erres E. & B elm on te A. Infestation naturelle de Phlebotomus papatasi (Scopoli, 1786) par Leishmania m ajor MON-25. A propos de 28 souches isolées dans un foyer du Sud marocain. In. Leishmania. Taxonomie et Phy- logénèse. Applications écoépidémiologiques. J.A. Rioux éd. IMEEE, Montpellier, 1986 a , 471-480.

R io u x J.A., G uilvard F... G allego J., M o ren o G ., P ratlong F .,

P o rtu s M ., Rispa il P ., G allego M., B astien P . Phlebotomus ariasi Tonnoir, 1921 et Phlebotomus perniciosus News- tead, 1911, vecteurs du complexe Leishmania infantum dans un même foyer. Infestation par deux zymodèmes syntopiques. A propos d’une enquête en Catalogne (Espagne). In : Leishmania. Taxonomie et Phylogénèse. Applications écoépidémiologiques. J. A. Rioux éd., IM E E E , Montpellier, 1986b , 439-444.

2. Effectivement la comparaison statistique entre localités et entre espèces n’a pu être réalisée en raison des faibles taux d’infestation et de la grande diversité des sites de piégeages. D’autant qu’une nou­velle enquête, menée à Torroja en 1992, n’a montré aucune infes­tation chez P. ariasi (459 9 disséquées) et seulement 0 ,14% d’infes­tation chez P. pem iciosus (1/701 9 disséquées, L. infantum MON-1).

Reçu le 15 décembre 1995 Accepté le 20 mars 1996

192 N ote de rechercheParasite, 1996, 3, 191-192