バイオ医薬品のためのセルベースアッセイシステム...
TRANSCRIPT
バイオ医薬品のためのセルベースアッセイシステム
機能的スクリーニング
QC・ロットリリース試験
中和抗体測定
US: tel | 1.866.448.4864 e | [email protected] www.discoverx.com
近年のバイオ医薬品開発の増加により、最先端のセルベースアッセイの需要が高まっています。確実、シンプルかつターゲット特異的な DiscoveRxのPathHunter®バイオアッセイは、バイオ医薬品開発のあらゆるステージをサポートします。
バイオ医薬品 有効成分がタンパク質由来(成長ホルモン、インスリン、抗体など)、生物由来の物質(細胞、ウイルス、バクテリアなど) により産生される医薬品。これらは化学合成の低分子医薬品に比べて分子が大きく、構造が複雑であり、その特性や性質は一般に製造 工程そのものに依存します。 バイオ医薬品は、Biologics、Biological Medicine、Biopharmaceuticalsなどとも呼ばれます。
バイオ医薬品開発のためのアプリケーションR&Dグループ - 細胞内結合、機能的スクリーニング、効力測定製造・バイオ分析グループ - QC・ロットリリース試験のためのバイオアッセイおよび安定性試験臨床免疫学グループ - 中和抗薬物抗体の検出用のセルベースアッセイ
複数の機能アッセイからお客様の研究目的に合わせたアッセイをご選択いただけます。
PathHunter セルベースアッセイ
EA
Ligand Ligand
Ligand
Receptor Assay Pathway Assay
Ligand-dependentDimerization
Binding-basedInternalization
Activation-basedProtein Recruitment
Activation-basedSignaling Event
EA
EA
EAEA
EA
EA
Ligand
PK
PKPK
EA
PathHunterアッセイのラインナップ
PathHunterアッセイのアプリケーション
Applications of PathHunter Assays. (A) Functional anti-ErbB3 antibodies show a dose-dependent inhibition of signal in PathHunter ErbB2-ErbB3 assay, which detects the recruitment of SH2-domain protein upon activation of the receptor. (B) Anti-ligand antibody against the GLP1 protein demon-strates a dose-dependent inhibition in the PathHunter GLP1R assay, which detects the recruitment of β-arrestin upon activation of the GPCR. (C) A receptor internalization assay with an agonist for OPRD1, a GPCR opioid receptor, which detects internalization of the GPCR to the late endosome. (D) Anti-receptor antibody against the TGF βR2 demonstrates a dose dependent inhibition in the PathHunter TGF βR1 /R2 dimerization assay, which detects the dimerization of the two receptors when bound by their ligand.
10-13 10-12 10-11 10-10 10-9 10-8 10-7 10-6 10-50
1000
2000
3000
4000
DADLE [M]
RL
U
Antibody (g/ml)
RL
U
10-10 10-8 10-6 10-4 10-20
200000
400000
600000
800000
1000000
control antibody
anti-Receptor
10-10 10-9 10-8 10-7 10-6 10-5 10-40
20000
40000
60000
80000
Anti-GLP1 Antibody
Negative Control
Antibody [g/ml]
RL
U
10-12 10-11 10-10 10-9 10-8 10-7 10-6 10-5 10-40
500
1000
1500
2000
2500
Heregulin
Anti-ErbB3 1
Anti-ErbB3 2
Anti-ErbB3 3
Anti-ErbB3 4
Agonist/Antagonist (g/mL)
Mea
nR
LU
A B C D
US: tel | 1.866.448.4864 e | [email protected] www.discoverx.com
PathHunter Applications
細胞ライセート・上清・血清中における薬物活性の測定
High tolerance of complex biological samples. PathHunter assays can detect functional biologics in various samples, such as human serum, plasma, hybridoma lysates and bacterial lysates. Above, we validated with GIPR assay with up to 8.5% bacterial lysate, the HRH1 assay with up to 10% normal human serum and were able to detect antibody-based inhibition of the CCL20 ligand in up to 80% serum without any loss of sensitivity.
25000
20000
15000
10000
5000
10-12 10-11 10-10 10-9 10-8 10-7 10-6 10-5
8.5%
4.25%
2.13%
0%
10-40
RLU
GIP [M]
Assay in Bacterial Lysate400000
300000
200000
100000
010-11 10-10 10-9 10-8 10-7 10-6 10-5 10-4 10-3
Histamine [M]
Assay in Human Serum8000
7000
6000
5000
4000
3000
2000
1000
0
RLU
10-8 10-7 10-6 10-5 10-4 10-3
No FBS
20% FBS
40% FBS
60% FBS
80% FBS
Anti-CCL20 mAb [g/mL] + 10nM CCL20
Anti-CCL20 in Serum
簡便なプロトコルで迅速に結果を得ることができます
Plate Cells Treat with Agonist/Molecule Read Luminescence
Addition of Detection Reagents
Add compounds
1-24 hours 2-4 hours
ワンステップのアッセイプロトコル
PathHunterアッセイによる優れたバイオアッセイパフォーマンス
Target-specific response Inter-lot reproducibilityIntra-lot reproducibility Assay Linearity
10-12 10-11 10-10 10-9 10-8 10-7 10-6 10-5 10-40
50000
100000
150000
200000
250000
Vial #1Vial #2Vial #3Vial #4Vial #5
Exendin-4[M]
RLU
10-12
10-11
10-10
10-9
10-8
10-7
10-6
10-5
0
10000
20000
30000GLP1 [M]
Exendin-4 [M]
IGF1 [g/ml]
hGH [g/ml]
Agonist Concentration
RLU
10-12
10-11
10-10
10-9
10-8
10-7
10-6
10-5
10-4
0
100000
200000
300000
400000
Lot 1Lot 2
Exendin-4[M]
Lot 3
RLU
Expected Relative Potency,%0 50 100 150 200
0
50
100
150
200Y = 1.114*X - 9.500R2=0.9986
Mea
sure
d R
elat
ive
to P
ote
ncy,
%
分析法バリデーション
US: tel | 1.866.448.4864 e | [email protected] www.discoverx.com
DiscoveRx 42501 Albrae Street, Fremont, CA 94538 © 2015 DiscoveRx Corporation. All Rights Reserved. DiscoveRx logo and DiscoveRx are registered trademarks of DiscoveRx Corporation. 20448 060415
PathHunterアッセイオプション
業界最大級のバイオ医薬品のためのセルベースアッセイコレクション
RTK Assaysc-KIT ErbB4
c-MET FGFR1
c-Ret-GFRα2 IGF1R
DDR1 INSR
DDR2 INSR (Internalization)
EphA4 PDGFRαEphA5 PDGFRβEphA7 TrkA
EphB1 TrkA-P75
EphB2 TrkB
EphB3 TrkB-P75
EphB4 TrkC
ErbB1 TrkC-P75
ErbB2-ErbB3
Assays for Multiple GPCR Families Acetylcholine CRHR1&2 MCHR1&2 Prokineticin
Adenosine Dopamine Melanocortin PRLHR
Adrenoreceptor Endothelin Melatonin Prostanoid
Anaphylotoxin Estrogen GRM Protease
Angiotensin Formylpeptide Motilin PTH receptor
Apelin Free Fatty Acid NMUR1&2 Relaxin
Bile Acid GABBR1&2 NPBWR1&2 Serotonin
Bombesin Galanin NPFFR1&2 Somatostatin
Bradykinin Ghrelin NPSR1 Succinate
Calcitonin Glucagon Neuropeptide Y Tachykinin
Calcium-Sensing Glutamate Neurotensin TAAR1
Cannabinoid Glycoprotein H Opioid TRHR
Chemerin GNRHR Orexin UTS2R
Chemokine 5HT Receptors Orphans Vasopressin
Cholecystokinin Histamine Orthologs VIP & PACAP
Class A Orphan HCA Receptors OXGR1
Class B Orphan KISS1R P2Y
Complement Leukotriene QRFPR
Corticotropin LPA & S1P PTAFR
Receptor AssaysTNF receptor
TGFβR1&2
BMP receptors
TLR receptors
IL17 receptors
Frizzled receptor
Cytokine ReceptorsGCSF Receptor
Epo Receptor
GHR
PRLR
600種類以上のGPCRアッセイ 30種類以上のRTKアッセイ
バイオ医薬品開発のためのアッセイの一部のみをご紹介しています。最新および完全なアッセイリストはDiscoveRxウェブサイトをご参照ください。 www.discoverx.com/biologicsmenu
高耐性 – さまざまな生物学的サンプルにも対応的確 – ターゲット特異的な機能応答簡便 – ワンステップで簡易なプロトコル
迅速 – 短時間のアッセイ高感度 – 低濃度(nM)から測定可能確実 – 正確・直線的・高い再現性
PathHunterアッセイの特長
本社所在地: 42501 Albrae Street, Fremont CA 94538 USAURL: http://www.discoverx.com/電話: +1-510-979-1415 (内線123 日本語可) FAX: +1-510-979-1650Eメール: [email protected]
所在地: 〒135-0016 東京都江東区東陽2-2-20東陽駅前ビルURL: http://www.cosmobio.co.jp/技術サービス部電話: 03-5632-9616 FAX: 03-5632-9614Eメール: [email protected]
各種製品およびサービス
アッセイキット 安定発現細胞株 受託サービス カスタムアッセイReady-to-useの凍結細胞 各種GPCR安定発現細胞株 DiscoveRxの経験と専門性 全ての技術に対応検出試薬 検証済みの培養試薬 多様なサービスの選択肢 R&Dチームとの連携培養試薬(培地およびプレート) HTSスクリーニング対応 200プロジェクト以上の実績