ESPECTROMETRÍA DE RESONANCIA DE PLASMÓN SUPERFICIAL (SPR)

MIGUEL BARBA

1. CONCEPTOS

1. CONCEPTOS

2. PRINCIPIO• Al incidir un haz de luz p-polarizada, en

un film metálico, se produce excitación en electrones libres.

• Se genera un oscilación tipo onda en (xy) y un campo electromagnético, arriba y abajo del film.

2. PRINCIPIO• Se produce disminución de la intensidad

del haz reflejado, en ciertas λ

• Existe un ángulo de incidencia en que la disminución es máxima (ángulo de resonancia φSPR)

• El φSPR, depende del índice de refracción en las caras del film

3. FENÓMENO Y EQUIPO

4. RESPUESTA

• Respuesta RU (Unidades de Respuesta)

1000 RU= 0,1 ° (Δφ)

• Límites de detección

1x °------------- 3°

• Alta sensibilidad desde 0,1 ng/

SENSORGRAMA

5. ENSAYO Y MUESTRAS1. Acondicionar (inyección

de buffers), evita variaciones de pH y activa los ligandos

2. Inyectar analito (se espera el equilibrio)

3. Lavar compuestos no específicos (obtención de respuesta real)

4. Regeneración (inyección de soluciones), rompen enlaces analito-ligando y retornan el equipo a su estado inicial

LIMITE DE SATURACIÓN

5. ENSAYO Y MUESTRAS

DETECCIÓN DIRECTA

5. ENSAYO Y MUESTRAS

DETECCIÓN POR PATRONES

5. ENSAYO Y MUESTRAS

DETECCIÓN POR PATRONES

6. COSTO

BIACORE 3000 (USADO)

$ 69000,00

6. APLICACIONES

• Identificación de proteínas (con MS)• Análisis funcionales de proteínas• Detección de impurezas en proteínas terapeúticas• Separación de productos en reacciones enzimáticas• Cuantificación de antibióticos y productos veterinarios

en productos de consumo (miel, carne, etc.).• Detección de anticuerpos en animales de consumo• Detección de presencia de GMO• Análisis de leche

• Análisis de metales pesados a nivel de trazas (en combinación con técnicas voltamétricas o mediante la adición de compuestos sinergicos a los ligandos como apo-MT)

http://www.biosensingusa.com/flow-injection-spr-sensitive-determinations-of-heavy-metal-ions.html

BIBLIOGRAFÍA:

• Schasfoort, R. y Tudos, A. (2008). Handbook of Surface Plasmon Resonance. (1ra. Ed.) Cambridge, Reino Unido: The Royal Society of Chemistry.

• Skoog, D. et al. (2007). Principles of Instrumental Analysis. (6ta. Ed.). Belmont, USA: Thomson Higher Education.

• Ramírez, N. (2005). Biosensores, un acercamiento a la Resonancia del Plasmón Superficial. Revista CENIC Ciencias Biológicas. 36(Especial), 1-11.