elİf gÖzde utku tÜrk tez danı şmanı prof. dr. gÜlgÜn yener · 2013-03-30 · elİf gÖzde...

EL İF GÖZDE UTKU TÜRK

Tez DanışmanıPROF. DR. GÜLGÜN YENER

İstanbul ÜniversitesiEczacılık Fakültesi

Farmasötik Teknoloji Anabilim DalıKozmetoloji Bilim Dalı

3. Kozmetik Kongresi, 15-17 Subat 2013, Antalya

Alfa Glukosil Hesperidinin Farklı Topikal Formülasyonlarının

Hazırlanması

3. Kozmetik Kimyası Üretimi ve Standardizasyonu Kongresi


ANA KONU BAŞLIKLARI

1. Alfa Glukosil Hesperidin

2. Alfa Glukosil Hesperidin ileformülasyon çalışmaları

3. Deri Penetrasyonu ve Penetrasyon Arttırıcılar

4. Hazırlanan FormülasyonlarlaYapılan Testler


ALT KONU BAŞLIKLARI

1. Alfa Glukosil Hesperidin

Hesperidin

Alfa Glukosil Hesperidin

Alfa Glukosil HesperidininFiziksel ve Kimyasal Özellikleri

Alfa Glukosil HesperidininToksistesiAlfa Glukosil Hesperidinin

İle Yapılan Çalışmalar

UV Spektrumu FTIR SpektrumuSpektrofotometrik Miktar

Tayin Yöntemi ve Validasyonu Çözünürlük Testi

Antioksidan Aktivite Tayini


ALT KONU BAŞLIKLARI

2. Alfa Glukosil Hesperidin İleFormülasyon Çalışmaları

Jeller Emülsiyonlar Emüljel

4. Hazırlanan Formülasyonlarla Yapılan Testler

StabiliteTestleri

PenetrasyonÇalışmaları

Etkinlik Testleri

Klasik Emülsiyon Sistemleri Çoklu Emülsiyon Sitemleri

3. Deri Penetrasyonu ve PenetrasyonArttırıcılar

Deri Penetrasyonu ve Penetrasyon Arttırıcılar

Seçilen Bir PenetrasyonArttırıcı İle Hazırlanan Formülasyonlar

Mikrobiyolojik Testler


BÖLÜM 1

ALFA GLUKOS İL HESPERİDİN


Ürün adıAlfa Glukosil HesperidinAlpha Glucosyl Hesperidin

Kimyasal Formülü C34H44O20

Yapısal formülü

CAS Numarası 161713-86-6

INCI Adı Glucosyl Hesperidin

REACH Kayıt Numarası 01-0000019772-64-0000

ELINCS Numarası 471-940-0



• Hesperidin, turunçgillerin kabuklarında (kabukaltındaki beyaz kısımlarında) bulunan birbioflavonoiddir.

HESPERİDİN


Hesperidinin faydaları;

�Antioksidan aktivite

�Antimikrobiyal aktivite

�Hipolipidamik aktivite

�Kılcal damar kırılganlığın düzeltilmesi

�Kılcal damar geçirgenliğin azaltılması

HESPERİDİN


• Hesperidin’in sudaki çözünürlüğünün az olması sebebiyle Alfa Glukosil Hesperidin(α-GH) Japon Hayashibara Firması tarafından geliştirilmi ştir. Hesperidin’in sahip olduğu tüm faydalı özelliklere sahiptir.


Alfa Glukosil Hesperidin Hesperidin


Sudaki çözünürlük(g/100 g su)

Maximum UV Absorpsiyonu

Sıcaklık Stabilizasyonu

Hesperidin 0.002 284 nm Test edilmedi

Alfa GlukosilHesperidin

>20 284 nm Stabil (100 derecede 90 dakika, pH 3-8)

ALFA GLUKOS İL HESPERİDİN VE HESPERİDİN’İN KARŞILA ŞTIRILMASI

Alfa Glukosil Hesperidin’insudaki çözünürlüğü görüldüğü gibi Hesperidin’den 10.000 kat daha fazladır.


ALFA GLUKOS İL HESPERİDİN’İN FİZİKSEL VE

KİMYASAL ÖZELL İKLER İGörünüş Açık sarı toz

Koku Kendine özgü

Erime Noktası > 160°C

Kaynama Noktası > 400°C

Yanıcılık Yüksek yanıcılık özelliği yok

Çözünürlük > 543.4 g/L su (oda sıcaklığında)


Akut oral toksiste LD50 > 2 g/kg vücut ağırlığı

28 gün tekrarlanan oral toksisiteRatların beslenmesinden 4 hafta sonra NOEL 15,000 ppm

90 gün tekrarlanan oral toksisite

Farelerin beslenmesinden 13 hafta sonra toksik olmayan seviye 50,000 ppm olarak rapor edilmiştir (3.1 g/kg vücut ağırlığı/gün erkek fareler için ve 3.4 g/kg vücut ağırlığı /gün dişi fareler için)

Cilt korozyonu/ irritasyonu

%91.4 oranında monoglukosil hesperidiniçeren ürünün 0.5 g miktarının tavşan cildine topikal olarak uygulanmasıyla eritem veya ödeme rastlanmamıştır. Bu yüzden “irritan değil”dir.

ALFA GLUKOS İL HESPERİDİN’İN TOKSİSTESİ



Alfa Glukosil Hesperidin İle Yapılan Çalışmalar

Alfa Glukosil Hesperidinin UV Spektrumu

Alfa Glukosil HesperidininSpektrofotometrik Miktar Tayin

Yöntemi ve Validasyonu

Alfa Glukosil HesperidininÇözünürlük Testi

Alfa Glukosil Hesperidinin FTIR Spektrumu

Alfa Glukosil HesperidininAntioksidan Aktivite Tayini


ALFA GLUKOS İL HESPERİDİNUV SPEKTRUMU


ALFA GLUKOS İL HESPERİDİNSTANDART EĞRİNİN

HAZIRLANMASI

0,138

0,266

0,389

0,526

0,640

y = 0,1265x + 0,0121

R² = 0,9994

0,000

0,100

0,200

0,300

0,400

0,500

0,600

0,700

5 10 15 20 25

Abs

orba

ns

Konsantrasyon (µg/ml)

Alfa Glukosil Hesperidin Standart Eğrisi

Alfa Glukosil Hesperidin OrtalamaAbsorbans Değerleri

Linear (Alfa Glukosil Hesperidin OrtalamaAbsorbans Değerleri)


• Metot Validasyonu;1. Doğrusallık2. Doğrusallık ve geri elde edilebilirlik3. Kesinlik

a) Gün içi kesinlikb) Günler arası kesinlik

4. Seçicilik

ALFA GLUKOS İL HESPERİDİNSPEKTROFOTOMETR İK

MİKTAR TAY İNİ VAL İDASYONU


Örnek No

1. Konsantrasyon (5 µg/ml) 2. Konsantrasyon (15 µg/ml) 3. Konsantrasyon (25 µg/ml)

ABulunan

C (µg/ml)%Geri

kazanımA

Bulunan C (µg/ml)

%Geri kazanım

ABulunan C

(µg/ml)%Geri

kazanım

1 0,132 4,763 104,98 0,388 14,96 100,27 0,644 25,16 99,36

2 0,138 5 100 0,385 14,84 101,08 0,642 25,07 99,72

3 0,130 4,68 106,83 0,380 14,64 102,46 0,640 25 100

4 0,140 5,08 98,43 0,392 15,12 99,21 0,646 25,24 99,05

5 0,135 4,77 104,82 0,384 14,80 101,35 0,638 24,92 100,32

6 0,136 4,92 101,62 0,389 15 100 0,644 25,16 99,36

Ort. 0,135 4,87 102,78 0,386 14,89 100,73 0,642 25,09 99,64

SS. 0,0037 0,156 3,27 0,0042 0,169 1,14 0,0027 0,118 0,468

ALFA GLUKOS İL HESPERİDİNSPEKTROFOTOMETR İK

MİKTAR TAY İNİ VAL İDASYONU


• Yapılan hesaplamalar sonucundaα-GHmaddesinin sudaki çözünürlüğü;

ALFA GLUKOS İL HESPERİDİNÇÖZÜNÜRLÜK TEST İ

30˚C için 36,6 g/100 g su

oda sıcaklığı için 34,93 g/100 g su


• Alfa Glukosil Hesperidin’in 650 - 4000 cm-1

dalga boyları arasında FTIRspekturumualınmıştır.

ALFA GLUKOS İL HESPERİDİNFTIR


ALFA GLUKOS İL HESPERİDİNFTIR


ALFA GLUKOS İL HESPERİDİNANTİOKSİDAN AKT İVİTE

TAY İNİOKSİDAN• Oksidanlar; karbonhidrat,

lipit,protein ve DNA başta olmak üzere biyomolekülleridoğrudan veya dolaylı olarak hasara uğratma yeteneği olan reaktif oksijen türleridir. Örnek olarak: Süperoksitanyonu (O2

-), hidrojen peroksit (H2O2) ve hidroksil radikali (OH.) verilebilir.

ANTİOKSİDAN

• Antioksidanlar; oksidanlarınhücre ve dokularda oluşturduğu bu hasarı önlemek için reaktif oksijen türlerini süpürmeye ve yok etmeye çalışırlar.


• Antioksidan aktiviteyi belirlemede birçok yöntemkullanılmaktadır.In vitro antioksidan aktivite deneyleri ikikategoride değerlendirilebilir:

1. Hidrojen atomu transfer reaksiyonlarını içeren aktivitetestleri [ORAC (oksijen radikali absorbans kapasitesi),linoleik asit oksidasyonu inhibisyonu, TRAP (total radikaltutuklama antioksidan parametresi)]

2. Elektron transfer reaksiyonu temelli aktivite testleri[FRAP (demir iyonu indirgeyici antioksidan parametresi),DPPH(difenil-1-pikrilhidrazil)].


TAY İNİ


• Bilinen tüm aktivite tayini protokollerinin taşımasıgereken özellikler:

� biyolojik olarak bilinen bir substratı seçmeli� çeşitli oksidasyon koşullarını test etmeli� hem başlangıç, hem ikincil oksidasyon ürünlerini

ölçmeli� antioksidanları, aynı konsantrasyondaki aktif yapıtaşı

ile karşılaştırmalı� yüzde inhibisyonu veya IC50 (%50 inhibisyona neden

olan antioksidan konsantrasyonu) değerini belirlemeli


TAY İNİ


• Alfa Glukosil Hesperidinin antioksidanaktivitesini tayin etmek için DPPHMetodukullanıldı.


TAY İNİ


• Hesaplama


TAY İNİ


• Ölçülen absorbans değerleri ile yapılanhesaplamalara göre 1 grα-GH maddesi 5000TE/100 gr bulundu.


TAY İNİ


BÖLÜM 2

ALFA GLUKOS İL HESPERİDİN İLE FORMÜLASYON ÇALI ŞMALARI


α-GH İLE FORMÜLASYON ÇALI ŞMALARI

JEL FORMÜLASYONLARI


Polimerler kozmetikteşu amaçlarla formülasyonlarakatılırlar:�Kıvam arttırıcı�Film oluşturucu�Nemlendirici�Emülgatör�Tozları birleştirmek için




• α-GH ile jel formülasyonları hazırlanırkenCarbapol 940 ve Hidroksi etil selüloz (HEC)polimerleri kullanıldı.




CARBAPOL JEL FORMÜLASYONU

Ticari isim INCI İsmi CAS NumarasıHammadde

Kullanım AmacıCarbapol 940 Carbomer 9007-17-4 Jelleştirici polimer

Distile su Aqua 7732-18-5 Çözücü


4G-α-D-Glucopyranosyl

hesperidin161713-86-6 Aktif madde

Propilen Glikol Propane-1,2-diol 57-55-6Hümektan ve

viskozite kontrolüTrietanol amin Triethanolamine 102-71-6 pH ayarlayıcıMetil Paraben Methylparaben 99-76-3 Koruyucu



Kullanım AmacıHidroksi Etil Selüloz Hydroxyethylcellulose 9004-62-0 Jelleştirici polimer



4G-α-D-Glucopyranosylhesperidin

161713-86-6 Aktif madde

Propilen Glikol Propane-1,2-diol 57-55-6Hümektan ve

viskozite kontrolü

Metil Paraben Methylparaben 99-76-3 Koruyucu

HEC JEL FORMÜLASYONU


JEL HAZIRLAMA PROSES İ

• Jelleştirici polimer olarak seçilen polimer suiçerisinde bir gece bekletilerekşişirilir. Jelmekanik karıştırıcıda düşük hızda karıştırılarakeğer suda çözünmemiş kısımları varsaçözündürülerek şişmesi sağlanır. Ardındanformülasyona katılması istenen hümektan,emülsifiye edici vb maddeler jele eklenir. Jelin pHdeğerine bakılır. Eğer gerekiyorsa pHayarlayıcıile pH istenilen değere getirilir. Aktif madde veayarlanan pH değerinde etkili olan koruyucuformülasyona gerekli koşullarda katılır.




Selüloz türevi polimerlerısıtıldıklarında daha kolayşişmektedirler. Hidroksi etilselüloz (HEC), hidroksi propilmetil selüloz (HPMC) gibi selüloztürevi polimerleri ısıtabilirsiniz.

Metil parabeninmikrobiyal etkinliği,formülasyonapropilen glikolünkatılmasıylaartmaktadır.

Parabenler tek haldemax %0,4 oranında,kombine halde max%0,8 oranındakullanılabilirler.


EMÜLSİYONFORMÜLASYONLARI




EMÜLSİYON FORMÜLASYONLARI

Emülsiyon Formülasyonları

Klasik Emülsiyon Sistemleri Çoklu Emülsiyon Sistemleri

Su içinde yağ tipi (Y/S) emülsiyonlar

Yağ içinde su tipi (S/Y) emülsiyonlar


KLAS İK EMÜLS İYON SİSTEMLER İ

Y/S EMÜLSİYONTicari isim INCI İsmi CAS Numarası

Hammadde Kullanım Amacı

Likit Parafin Paraffinum Liquidum 8012-95-1 Emoliyent, çözücü

Setil AlkolCetyl Alcohol

36653-82-4Emoliyent, sürfaktan,

opaklaştırıcı,

Distile Su Aqua7732-18-5

Çözücü

Propilen Glikol Propylene Glycol 57-55-6 Hümektan, çözücü, viskozite ayarlayıcı

Sodyum Lauril Sülfat Sodium Laureth Sulfat 3088-31-1 Emülsifiye edici, sürfaktan,

köpük oluşturucu

Alfa Glukosil Hesperidin4G-α-D-Glucopyranosyl

hesperidin161713-86-6

Aktif madde


Propil Paraben Propylparaben 94-13-3 Koruyucu


Ticari isim INCI İsmi CAS Numarası Hammadde Kullanım Amacı


Setil AlkolCetyl Alcohol 36653-82-4

Emoliyent, sürfaktan, opaklaştırıcı,

Balmum Cera Alba 8012-89-3 Emoliyent, film oluşturucu

Gliseril Monostearat Glyceryl Stearate 31566-31-1 Emoliyent, emülsifiye edici

Distile Su Aqua 7732-18-5 Çözücü

Propilen GlikolPropylene Glycol 57-55-6

Hümektan, çözücü, viskozite ayarlayıcı

Alfa Glukosil Hesperidin 4G-α-D-Glucopyranosylhesperidin

161713-86-6 Aktif madde



KLAS İK EMÜLS İYON SİSTEMLER İ

S/Y EMÜLSİYON


EMÜLSİYON HAZIRLAMA PROSESİ

• Yağ fazı ve su fazı ayrı beherlerde aynısıcaklık derecesine kadar ısıtılır. Y/Semülsiyonunda yağ fazı su fazının üzerinemekanik karıştırıcı ile 450-500 RPMhızdakarıştırılırken yavaş yavaş eklenir. S/Yemülsiyonunda su fazı yağ fazının üzerineeklenmektedir. Emülsiyon oluştuktan sonra,40˚C’nin altında az bir miktar suda çözünmüşolan aktif madde katılır. Karıştırma işlemi birmüddet daha devameder.


ÇOKLU EMÜLS İYON SİSTEMLER İ

Çoklu Emülsiyon Sistemlerinin Avantajları:

�Hassas maddelerin korunması�Birbiri ile geçimsizmaddelerin tek bir preparatta biraraya getirilebilmesi�Etkin maddelerin sürekli veuzatılmış salınımınınsağlanması

Çoklu Emülsiyon Sistemlerinin Dezavantajları:

�Termodinamik stabilitelerizayıftır�Salım mekanizmaları kesinolarak bilinmemektedir�Hazırlama prosesleri zordur


• Çoklu emülsiyonların formülasyonlarında yeralan maddeler;

• Yağ fazında kullanılan maddeler: likit parafin,bademyağı, susamyağı gibi sabit yağlar, mumlar,silikonlar…

• Yüzey aktif maddeler: Çoklu emülsiyonunhazırlanabilmesi için , farklı HLBdeğerlerinesahip en az iki yüzey aktif madde kullanılmalıdır.Birinci yüzey aktif madde ile primer emülsiyon,ikinci yüzey aktif madde ile de çoklu emülsiyonelde edilir.



!!!! HLB değeri çok önemlidir.

S/Y/S


Primer emülsiyonHLB 2 - 7 arasında olanyüzey aktif maddekullanılır.

Çoklu emülsiyonHLB değeri 6-16 arasında olan yüzeyaktif madde kullanılır.


• Çalışmada yüzey aktif madde olarak HLBdeğeri 5 olanCety Dimethicon Copolyol Abil EM90 ve HLB değeri 15olan polioksietilen 20 sorbitanmonooleat Polisorbat 80kullanıldı.

• Diğer maddeler: Genelde su fazına eklenen maddelerdir.Etkin maddelergenelde iç su fazına katılırlar. Böylece dahaetkili ve uzun bir salımprofili izlerler. Ayrıca iç su fazınaNaCl, MgCl2 gibi elektrolitler ilave edilir. Böylece çokluemülsiyonun stabilitesi artmış olur. Stabiliteyi arttırmak içinjel yapıcı maddelerde kullanılabilir. İç su fazınaflorasanözellikli maddeler, suda çözünen polimerik yapılı boyamaddelerinin eklenmesi ile emülsiyon yapısı ve salımözellikleri incelenebilir.



ÇokluÇoklu emülsiyontarzında ilk kozmetikticari ürün Lancasterfirmasına ait “UniqueMoisturizing”’dir


Çoklu Emülsiyonun Hazırlanmasında Etkili Olan

Parametreler1-Kullanılan karıştırıcıönemlidir. Ultra-Turrax veyaUltrasonik karıştırıcılar yerinemikrovortex tipi karıştırıcılartercih edilmelidir.2-Sıcaklık: Primer emülsiyoniçin min 70˚C, çoklu emülsiyoniçin de min 10 ˚C sıcaklıkönerilmektedir.3-Yüzey aktif maddelerin HLBdeğerleri ve kullanım miktarları

4-Karıştırma hızı ve süresi:Primer emülsiyon için karıştırmahızı yüksek ve süre kısa, çokluemülsiyon için karıştırma hızıdüşük süre ise uzun olmalıdır.5-Faz hacmi: S/Y/S tipiemülsiyonlarda primer fazhacmi%70’in altına inmemelidir.


Ticari isim INCI İsmi CAS NumarasıHammadde Kullanım

AmacıLikit Parafin Paraffinum Liquidum 8012-95-1 Emoliyent, çözücü

Abil EM90Cetyl PEG/PPG-10/1

Dimethicone-

S/Y tipi emülsiyonlar için emülsifiye edici (HLB ~5)


MgSO4.7H2OMagnesium sulphate

heptahydrate10034-99-8 Viskozite kontrolü



Metil Paraben Methylparaben 99-76-3 KoruyucuPropil Paraben Propylparaben 94-13-3 Koruyucu


Primer Emülsiyon: S/Y

Çoklu emülsiyon için su fazı


Amacı


Tween 80 Polysorbate 80 9005-65-6Emülsifiye edici (HLB ~

15)



• Primer emülsiyonun hazırlanması için su ve yağ fazıaynı sıcaklığa (min. 80˚C) getirilir. Su fazı yağ fazınakarıştırıcı ile önce 400 RPMgibi yavaş bir hızdakarıştırılırken eklenir. Hız 1200 RPMgibi yüksek birhıza çıkartılır. Emülsiyon oluştuktan sonra 40 ˚C’ninaltında suda çözünen aktif madde katılır.

• Çoklu Emülsiyonun hazırlanması için ikinci su fazıısıtılır. Sıcaklık 50-55˚Ciken primer emülsiyon 400RPM hızla karıştırılarak eklenir. Düşük hızda yaklaşıkolarak 1-1,5 saat karıştırma işlemi devameder.

ÇOKLU EMÜLS İYON HAZIRLAMA PROSES İ



• Hazırlanan 4 değişik çoklu emülsiyonformülasyolarından bir çeşit formülasyonstabil olarak bulundu. Diğer formülasyonlardakremalaşma, faz ayrımı, faz birleşmesigözlendi.



AmacıLikit Vazelin Petrolatum 8009-03-8 Emoliyent


Span 60 Sorbitan Stearate 1338-41-6 Emülsifiye edici (HLB ~ 4,7)

Tween 80 Polysorbate 80 9005-65-6 Emülsifiye edici (HLB ~ 15)






EMÜLJEL FORMÜLASYONLARI


Amacı

Carbapol 940 Carbomer 9007-17-4 Jelleştirici polimer


Trietanol amin Triethanolamine 102-71-6 pH ayarlayıcı


O/W Emülsiyon

Jel


EMÜLJEL HAZIRLAMA PROSES İ

• Jel fazı hazırlanır. Y/Semülsiyon, emülsiyonhazırlama tekniğine göre hazırlanır. Emülsiyonoluşumundan sonra jel fazı mülsiyona eklenir.Mekanik karıştırıcı ile düşük hızdakarıştırılarak emüljel formülasyonu hazırlanır.


BÖLÜM 3

DERİ PENETRASYONU VE PENETRASYON ARTTIRICILAR


Deri dıştan içe

doğru ;

�epidermis,

�dermis

�hipodermis

olmak üzere üç

tabakadan oluşur.

DERİ PENETRASYONU


• Deriden penetrasyonda, stratumkorneumunana bariyer görevi görmektedir. Deriye topikalformülasyon uygulandığında, etkin maddeninderiden penetre olması istenir. Bu işleminsınırlayıcı aşaması, derinin ölü boynuzsutabakasından olan difüzyondur. Stratumkorneum hidrofobik bir membran (zar) gibidavranır.

DERİ PENETRASYONU


• Deri bariyerini geçmek durumunda olan etkin maddeler başlıca üç yol izlerler.

1. Stratumkorneumu delerek (Transepidermal yol)

2. Hücrelerarası geçiş

3. Yangeçit yolu

DERİ PENETRASYONU


• Etkin maddelerin deriden daha rahat ve hızlı geçebilmeleri için penetrasyon artırıcılar kullanılır.

Penetrasyon arttırıcıların çalışma mekanizmaları

PENETRASYON ARTTIRICILAR

1. Startumkorneumdakilipit tabakalarınınyapısını bozmak

2. Etkin maddelerin stratumkorneumdakiçözünürlüklerini artırmak


• PenetrasyonArttırıcılar

PENETRASYON ARTTIRICILARAlkil sülfoksitler

Azonlar

Yağ alkolleri

Yağ asitleri

Lizo ve kısa zincirli fosfolipitler

Yüzey etkin maddeler

Çalışmada,penetrasyonarttırıcı olarak biryağ asidi olan“Oleik Asit”kullanıldı.


Penetrasyon arttırıcıların sahip olması istenilen özellikler şunlardır

�Toksik olmamalıdır.�İrritasyona sebep olmamalıdır.�Alerjik olmamalıdır.�Hızlı etki etmelidir, etkisi öngörülebilir ve tekrarlanabilirolmalıdır.�Farmakolojik aktivitesi olmamalıdır.�İndirekt olarak etki etmelidir.�Ciltten uzaklaşırken cildin bariyer özelliği hızlıca ve tamolaraktekrar yerine gelmelidir.�Formülasyondakiİlaç ve yardımcı maddeler için uygun olmalıdır.�Kozmetik açıdan uygun cilt hissi ile kabul edilebilir olmalıdır.

PENETRASYON ARTTIRICILAR


OLEİK ASİT İLE HAZIRLANAN FORMÜLASYONLAR

Oleik Asitli Carbomer JelTicari isim INCI İsmi CAS Numarası

Hammadde Kullanım Amacı

Carbapol 940 Carbomer 9007-17-4 Jelleştirici polimer


Alfa Glukosil Hesperidin 4G-α-D-Glucopyranosyl hesperidin 161713-86-6 Aktif madde

Propilen Glikol Propane-1,2-diol 57-55-6 Hümektan ve viskozite

kontrolü

Oleik asit Oleic acid 112-80-1 Penetrasyon arttırıcı

Trietanol amin Triethanolamine 102-71-6 pH ayarlayıcı



Oleik Asitli HEC Jel



Kullanım AmacıHidroksi Etil Selüloz Hydroxyethylcellulose 9004-62-0 Jelleştirici polimer

Distile su Aqua 7732-18-5 Çözücü Alfa Glukosil Hesperidin

4G-α-D-Glucopyranosyl hesperidin 161713-86-6 Aktif madde

Propilen Glikol Propane-1,2-diol 57-55-6 Hümektan ve

viskozite kontrolü Oleik Asit Oleic acid 112-80-1 Penetrasyon arttırıcı



Oleik Asili Y/S Emülsiyon Krem



Amacı


Setil Alkol Cetyl Alcohol 36653-82-4Emoliyent, sürfaktan,

opaklaştırıcı,

Distile Su Aqua 7732-18-5 Çözücü Oleik asit Oleic acid 112-80-1 Penetrasyon arttırıcı

Propilen Glikol Propylene Glycol 57-55-6 Hümektan, çözücü, viskozite

ayarlayıcı

Sodyum Lauril Sülfat Sodium Laureth Sulfat 3088-31-1 Emülsifiye edici, sürfaktan,

köpük oluşturucu


hesperidin 161713-86-6 Aktif madde




Oleik Asili S/Y Emülsiyon Krem



Amacı


Setil Alkol Cetyl Alcohol 36653-82-4Emoliyent, sürfaktan,

opaklaştırıcı,

Balmumu Cera Alba 8012-89-3 Emoliyent, film oluşturucu

Oleik Asit Oleic acid 112-80-1 Penetrasyon arttırıcı

Gliseril Monostearat Glyceryl Stearate 31566-31-1 Emoliyent, emülsifiye edici


Propilen Glikol Propylene Glycol 57-55-6 Hümektan, çözücü,

viskozite ayarlayıcı






Oleik Asitli Çoklu Emülsiyon



AmacıDistile Su Aqua 7732-18-5 Çözücü


15) Metil Paraben Methylparaben 99-76-3 Koruyucu


AmacıLikit Parafin Paraffinum Liquidum 8012-95-1 Emoliyent, çözücü

Abil EM90Cetyl PEG/PPG-10/1

Dimethicone -

S/Y tipi emülsiyonlar için emülsifiye edici (HLB ~5)

Oleik Asit Oleic acid 112-80-1 Penetrasyon ArttırıcıDistile Su Aqua 7732-18-5 Çözücü

MgSO4.7H2OMagnesium sulphate

heptahydrate 10034-99-8 Viskozite kontrolü





Primer Emülsiyon

Çoklu Emülsiyon


Oleik Asitli Emüljel



AmacıLikit Vazelin Petrolatum 8009-03-8 Emoliyent


Span 60 Sorbitan Stearate 1338-41-6Emülsifiye edici (HLB ~

4,7)


15) Oleik Asit Oleic acid 112-80-1 Penetrasyon Arttırıcı



Metil Paraben Methylparaben 99-76-3 Koruyucu Propil Paraben Propylparaben 94-13-3 Koruyucu


AmacıCarbapol 940 Carbomer 9007-17-4 Jelleştirici polimer

Distile Su Aqua 7732-18-5 Çözücü Trietanol amin Triethanolamine 102-71-6 pH ayarlayıcı Metil Paraben Methylparaben 99-76-3 Koruyucu

Y/S Emüliyon Krem

Jel


BÖLÜM 5

HAZIRLANAN FORMÜLASYONLARLA

YAPILAN TESTLER



YAPILAN TESTLER

STABİLİTE TESTLERİ


STABİLİTE TESTLER İ

• Hazırlanan tümformülasyonlar üç ay boyunca+4˚C’de, +25 ˚C%55 nemve +40 ˚C %70nem ortamlarında stabilite testleri içinmuhafaza edildi. Yapılan stabilite testleri ile

�organoleptik özellikler (görünüş, renk, koku),

�pH değişimi

�viskozite değişimleri gözlendi.


• Başlangıç pHve Viskozite Değerleri


Formül adı +25˚C pH

Carbapol jel 7,38

Oleik asitli Carbapol Jel 6,48

HEC Jel 5,49

Oleik asitli HEC Jel 4,74

Y/S Emülsiyon Krem 4,95

Oleik asitli Y/SEmülsiyon Krem

4,27

S/Y Emülsiyon Krem 5,91

Oleik asitli S/YEmülsiyon Krem

5,67

Emüljel 6,80

Oleik asitli emüljel 6,75

Çoklu emülsiyon 1 5,20

Formül adı+25˚C

0,5 RPM (cp) 1 RPM (cp) 2 RPM (cp)

Carbapol jel 220000 %44150000 %59,1

76750 %61,5

Oleik asitli Carbapol Jel 180000 %36,4115000 %45,7

72250 %57,6

HEC Jel 73000 %14,6 62500 %25 50000 %40

Oleik asitli HEC Jel 91500 %18,3 76000 %30,4 59850 %47,8

Y/S Emülsiyon Krem 320000 %64,1224000 %89,7

EEE

Oleik asitli Y/S Emülsiyon Krem 215000 %43,1 111000 %44 EEE

S/Y Emülsiyon Krem 458000 %90 170000 %70 EEE

Oleik asitli S/Y Emülsiyon Krem EEE

Emüljel 1750003 %34,91040003 %41,4

60500 %48,6

Oleik asitli emüljel 47500 %9,5 31750 %12,7 21000 %16,8

Çoklu emülsiyon 1 38000 %7,7 24500 %9,9 16625 %13,2


• 3. AY pH ve Viskozite Değerleri


Formül adı +4˚C +25˚C %55 nem +40˚C %70 nemCarbapol jel 7,84 7,40 7,38Oleik asitli Carbapol Jel 6,76 6,55 6,38HEC Jel 5,82 5,49 5,15Oleik asitli HEC Jel 4,86 4,61 4,04Y/S Emülsiyon Krem 5,55 5,00 4,97Oleik asitli Y/S EmülsiyonKrem

4,86 4,69 4,12

S/Y Emülsiyon Krem 5,80 5,72 5,34Oleik asitli S/Y EmülsiyonKrem

5,78 5,64 5,02

Emüljel 6,95 6,88 6,85Oleik asitli emüljel 7,22 6,70 6,58Çoklu emülsiyon 1 5,57 5,49 6,40


• 3. AY pH ve Viskozite DeğerleriFormül adı +4˚C +25˚C %55 nem +40˚C %70 nem

0,5 RPM 1,0 RPM 2,0 RPM 0,5 RPM 1,0 RPM 2,0 RPM 0,5 RPM 1,0 RPM 2,0 RPM

Carbapol jel 195000%39,3

108000%46,1

69625%55,7

191000%38,4

115000%46,1

69000 %55,5 123000%24,9

74000%29,9

44875%36,1

Oleik asitliCarbapol Jel

170000%33,9

101000%40,8

61850%49,7

143000%33,0

96750%38,7

58000 %46,6 134000%27,2

80750%32,5

47750%38,6

HEC Jel 82000%15,8

61000%24,3

47500%38,1

62500%12,4

51500%20,5

41500 %33,1 31000 %6,1 26250%10,5

23500%18,8

Oleik asitliHEC Jel

91000%12,8

71000%28,4

55250%44,3

110000%20,2

83500%32,0

61250 %49,2 49000 %9,3 38000%15,2

32625%26,3

Y/S EmülsiyonKrem

93000%18,5

66000%26,5

48875

%39,5

84000%16,6

59750%23,6

46000 %36,6 247000%48,2

208000%81,0

EEE

Oleik asitli Y/SEmülsiyonKrem

36000 %7,2 27750%11,2

24250%19,0

86500%17,0

64250%25,7

54000 %42,0 220000%43,1

177000%69,5

EEE

S/Y EmülsiyonKrem

EEE EEE EEE EEE EEE EEE EEE EEE EEE

Oleik asitli S/YEmülsiyonKrem

EEE EEE EEE EEE EEE EEE EEE EEE EEE

Emüljel 118000%38,5

112000%45,5

66750%53,6

170000%34,2

100000%40,1

59000 %47,2 143000%28,9

88500%35,5

53500%42,9

Oleik asitliemüljel

27500 %5,6 19750 %8,0 14000%11,4

57000%11,5

36750%14,7

23000 %18,5 44000 %8,6 25750%10,4

15750%12,7

Çokluemülsiyon 1

21500 %4,4 13500 %5,5 8500 %7,0 49000 %9,9 31000%12,4

20500 %16,4 10200 %20,9 6400 %27,0 4387 %35,1




YAPILAN TESTLER

PENETRASYONÇALI ŞMALARI


FRANZ DİFÜZYON HÜCRESİ

• In vitro deriden geçiş çalışmaları için “Franz Difüzyon Hücresi” cihazı kullanıldı.


• Franz DifüzyonHücresi cihazındamembran olarak0,45 µm por çaplıselüloz asetatmembran, reseptörfaz olarak pH 7.4tampon çözeltisikullanılmıştır.



• Hazırlanan formülasyonların herbiri FranzDifüzyon Hücresi cihazı ile selülozmembrandan penetrasyonu in vitro olarak testedilmiştir. Bulgularşu şekildedir:



-0,2

0

0,2

0,4

0,6

0,8

1

1,2

1,4

1,6

1,8

1 2 3 4 5 6

mg/cm2

Saat

Penetrasyon Çalışmaları

Carbapol Jel Çoklu Emülsiyon Emüljel

HEC Jel Oleik Asitli Carbapol Jel Oleik Asitli Emüljel

Oleik Asitli HEC Jel Oleik Asitli Y/S Emülsiyon Krem Oleik Asitli S/Y Krem

Y/S Emülsiyon Krem S/Y Emülsiyon Krem


�Elde edilen bulgulara göre en iyi penetre olanjel formülasyonlarıdır.

� Oleik asit penetrasyonu arttırmıştır.




YAPILAN TESTLER

MİKROBİYOLOJ İK TESTLER


MİKROBİYOLOJ İK TESTLER• Yapılan her bir formülasyon için toplamaerobik

mezofilik bakteri ve toplammantar sayısına bakıldı.Hazırlanan tümformülasyonlar mikrobiyolojik açıdanuygun bulundu.

Kontrol Parametresi

Metot Spesifikasyonlar Test Sonuçları Birim

Toplam aerobikmezofilikbakteri

ISO 21149: 2006 <100 kob/g kob/g

Toplam mantarISO 16212: 2008 <10 kob/g

kob/g


MİKROBİYOLOJ İK TESTLER



YAPILAN TESTLER

ETK İNLİK TESTLERİ


ETK İNLİK TESTLER İ

• α-GH ile yapılan O/W emülsiyon krem formülasyonu yaşları 40-60 arasında değişen 20 kadın gönüllü üzerinde 6 hafta boyunca denenecektir.


• Gönüllüler üzerinde yapılacak etkinlik testleriiçin Cerrahpaşa Tıp Fakültesi KlinikAraştırmalar Etik Kurulu’ndan izin alınmıştır.




• α-GH maddesi içeren Y/Semülsiyon kremilegönüllüler üzerinde yapılan etkinlik testlerindemaddenin yaşlanma karşıtı etkisi ve göz altımorluklarına olan etkisi incelenecektir. Buetkilerin yanı sıra hazırlanan formülasyonuncilt üzerinde bazı parametrelerde değişiklikyapmaması da istenmektedir.


• Başlangıçta henüz ürünü kullanmadan, ürünü kullandıktan sonra üçüncü hafta ve ürünü kullandıktan sonra altıncı hafta gönüllülerde girişimsel olmayan aletli analiz yöntemleri ile şu testler yapılacaktır:



1. Transepidermal su kaybı(TEWL) : Tewametrekullanılır. Deri yüzeyi ile deriyüzeyinin hemen üzerinde,sabit yükseklikte oluşanbuhar basıncı farkınınsaptanması esasına dayanır.TEWL değeri g/ m2/ s olarakifade edilir.



2. Deri elastikiyeti:Kütometre kullanılır.Kütometre ile deriyüzeyine dikey birvakum uygulayarak,bu vakumsonucunda derideoluşan deformasyontest edilecektir.



3. Nem tutma kapasitesi:Korneometre kullanılır.Aletin probunda iki adetbirbirine paralel metal levhavardır. Derinin nemi bulevhalar arasında dielektrikortam oluşturur ve ölçülendeğer derinin nemiçeriğinegöre kapasitansdakideğişikli ği gösterir.



4. Derinin pH değeri: DeripH metresi kullanılır. pH’ınölçülmesinde, metal veyacamve çözeltiler arasındakielektrokimyasal interfazprosesleri kullanılır. Ölçümelektrotununpotansiyelindeki değişim,bu elektrot ve sabitpotansiyelli bir standartelektrot arasındakipotansiyel farkı belirlenerekölçülebilmektedir.



5. Deri sebumu: Sebumetrekullanılır. . Yüzey lipitlerininmiktarını değerlendirmekiçin kullanılan sebumetrede,opak bir plastikşerit yüzeylipitleriyle temas ettiğizaman, bu lipitlerlekaplanması sonucunda yarışeffaf hale geçmektedir. Buyarı şeffaflığın derecesi,spektrofotometre ileölçülerek lipit miktarı µg/cm2 olarak ifade edilir.



6. Cilt kırı şıklığıölçümü: Skinvisiometer SV 600kullanılır. Vizyometreile cilt pürüzlerisilikon replikadakiışık transmisyonu ilesaptanır.Ek olarak yağüretim oluşumubelirlenir.



7. Meksametre: Cilt rengi tayiniiçin kullanılır. Göz altımorluklarının rengindekideğişiklikleri saptamak içinkullanılacaktır.



• Etkinliktestlerinin,gönlülülerüzerinde yapılacakanket çalışması iledesteklenmesiamaçlanmaktadır.



TEŞEKKÜRLER…

Elif Gözde UTKUTÜRK Prof. Dr. Gülgün YENER

[email protected] [email protected]


elİf gÖzde utku tÜrk tez danı şmanı prof. dr. gÜlgÜn yener · 2013-03-30 · elİf gÖzde...

Documents