Egypt. J. Histol Vol. 31, No.2, Dec. 2008:233 - 244

(ISSN: 1110 - 0559)

Original Article Effect of Experimentally Induced Ischemic-Reperfusion on the Testis and the Possible Protective Role of L-Carnitine in the Adult Albino Rat; Histological, Histochemical and Immunohistochemical Study Nawar M. Shalaby and Omayma K. Afifi

Histology Department, Faculty of Medicine, Tanta University

Torsi testis merupakan kedaruratan bedah umum yang mempengaruhi bayi baru lahir, anak-anak dan adolescents1. Intervensi bedah biasanya diperlukan untuk membangun kembali aliran darah, namun, atrofi testis adalah hasil klinis yang umum dan merupakan problem2 urologis signifikan. Cedera testis mengikuti torsi termasuk kerusakan nonspesifik yang disebabkan oleh iskemia per se selain merusak yang disebabkan oleh reperfusi, sehingga disebut iskemik-reperfusi (I / R) injury3.

Identifikasi faktor yang mencegah cedera sel germinal selama I / R serta faktor-faktor yang meningkatkan pemulihan testis mungkin menyarankan strategi terapi baru dalam mengurangi infertilitas mengikuti torsi testis. Sejumlah zat kimia telah dicoba dalam banyak situasi eksperimental dan klinis, tetapi sampai sekarang, tidak satupun dari mereka benar-benar protektif. Zat-zat ini termasuk asam caffeic phenethyl ester, yang meningkatkan oksida nitrat

yang memainkan peran penting dalam modulasi aliran darah dalam normal dan patologis conditions45, obat anti-inflamasi nonsteroid natrium diklofenak (Voltaren) yang merupakan inhibitor prostaglandin-sintesis dan secara luas digunakan di banyak disorders1 testis. Selama bertahun-tahun terakhir banyak antioksidan digunakan untuk mengurangi timbulnya komplikasi seperti erdosteine6, resveratrol7, trapidil8 dan bawang putih extract9.

L-karnitin adalah asam amino alami disintesis dalam hati, otak dan ginjal sebagai turunan asam amino lisin dan methionin. Ini adalah asam amino yang dikenal untuk meningkatkan pertumbuhan dan pengembangan, pembakaran lemak serta meningkatkan energi dan memiliki peran penting dalam regulasi oksidasi glukosa. Ini adalah penting co-faktor untuk transportasi lemak acy1 kelompok ke dalam matriks mitokondria, di mana mereka menjalani B-oksidasi, sehingga produksi ATR Ini sangat terkonsentrasi di epididimis dan spermatozoa, di mana ia dapat berfungsi sebagai kendaraan intramitochondrial untuk kelompok asil, yang dalam bentuk asil KoA bertindak sebagai substrat untuk proses oksidasi menghasilkan energi untuk respirasi sperma dan motility10.

Hal ini efektif dalam mengobati berbagai macam penyakit termasuk penyakit saraf penuaan, disfungsi kekebalan tubuh dan komplikasi diabetes. Dampak perlindungan karnitin daerah pada cedera iskemik-reperfusi telah terbukti di berbagai jaringan seperti otak, sumsum tulang belakang, miokardium dan splanikus organs11.

Namun, beberapa studi berusaha untuk menggambarkan efek perlindungan dari pemberian sistemik agen ini pada testis I / R cedera. Penggunaan produk alami adalah salah satu strategi yang paling

sukses dalam kedokteran baru, jadi, studi ini dirancang untuk menyelidiki toksisitas testis I / R pada testis ipsilateral dan untuk menentukan apakah L-carnitine dapat meningkatkan atau mengurangi bukti histologis Cedera testis pada model tikus iskemia testis sementara.

BAHAN DAN METODE

Tikus albino Dua puluh lima orang dewasa, beratnya sekitar 200 gram masing-masing, yang digunakan dalam penelitian ini. Semua hewan yang disimpan di bawah kondisi higienis yang sama dan menerima diet seimbang dan air. Hewan-hewan itu dibagi menjadi tiga kelompok utama sebagai berikut:

Kelompok I (kontrol): Terdiri dari 15 tikus, yang dibagi menjadi 3 subkelompok, 5 hewan masing-masing (la, lb & Ic); Subkelompok la: menerima diet seimbang tanpa laparotomi. Subkelompok lb (hewan Sham dioperasikan): laparotomi itu dilakukan pada hewan-hewan tetapi korda spermatika tidak dijepit. Subkelompok Ic: masing-masing tikus menerima L-carnitine 500 mg / kg, i.p12.

Kelompok II: Terdiri dari 5 hewan yang dilakukan laparotomi dan korda spermatika kiri dijepit selama 60 min1314.

Kelompok III: Terdiri dari 5 hewan, masing-masing menerima L-carnitine 500 mg / kg, i.p12 30 menit sebelum penghapusan penjepit dan reperfusi.

Prosedur bedah: Setelah puasa semalam, hewan yang disuntik intraperitonealy dengan 1 mg / tikus anestesi chloral hydrate. Daerah operasi dicukur, dibersihkan dengan alkohol dan garis tengah laparotomi rendah dibuat. Tali spermatika kiri yang dijepit oleh forsep tumpul atraumatic selama 60 menit, di mana daerah operasi tertutup dengan cacing lembab berpakaian untuk mencegah hipotermia. Kemudian, klem dihilangkan memungkinkan testis untuk reperfuse. Berair penisilin (EPICO, Farmakologi Perusahaan, ADALAH) dituangkan dalam bidang bedah, maka sayatan ditutup tepat oleh 3-0 sutra. Kemudian, gentamisin (Garamycin, Memphis Co untuk Pharm. & Chem. Ind, ADALAH) adalah

diterapkan secara lokal sebagai ganti luka pasca operasi selama satu minggu untuk mengurangi risiko luka infection11314.

Empat minggu setelah reperfusi semua tikus dikorbankan dan testis kiri dari setiap binatang membedah dan bagian pertengahan testis segera diperbaiki di Bouin, s solusi dan diproses untuk bagian parafin. Kepala epididimis dari setiap hewan juga dibedah untuk sperma studi kelainan.

1-histologis dan histokimia studi:

Bagian parafin ketebalan 5-7 guci dipotong dan diwarnai dengan hematoxylin dan eosin (H & E) dan Periodic Acid Schiff (PAS) 15.

Studi 2-imunohistokimia:

Lima p, m bagian parafin digunakan untuk kekebalan bernoda dengan metode Avidian-biotin peroksidase-kompleks untuk Bcl-X (protein preapoptotic) dan testosteron Ab-1 (untuk aktivitas sel Leydig). Bagian ditempatkan pada slide organosilane pretreatment, deparaffmized dan direhidrasi. Kemudian aktivitas peroksidase endogen diblok dengan menggunakan 10% H202, diikuti oleh tiga

mencuci dalam buffer fosfat, pengambilan antigen dilakukan dengan pemanasan dalam sitrat penyangga (PH6) dalam microwave (4 menit pada tekanan tinggi kemudian 4 pada tekanan rendah). Reaksi non spesifik diblokir oleh 1/100 serum kuda normal. Setelah hati blotting, sekelompok slide diinkubasi dengan antibodi primer (monoklonal tikus anti tikus Bcl-X, disampaikan dari Dako) untuk satu hour16 dan lainnya, antibodi primer (anti tikus testosteron Ab-1 disampaikan dari Dako) overnight17.

Slide dibilas dalam fosfat buffered saline (PB S) dan penyangga mandi dan antibodi sekunder bioterylated (kuda antirnouse) yang diterapkan untuk itu selama 30 menit. Setelah itu situs antibodi divisualisasikan dengan avidin-biotin peroksidase kompleks (Elite ABC reagen) selama 30 menit. Serves diaminobenzidin (DAP) digunakan sebagai chromagen. Akhirnya semua bagian yang counterstained dengan hematoxylin, dehidrasi dan dipasang. Untuk kontrol negatif, antibodi primer digantikan oleh PBS. Antibodi label tikus protein Bcl-X muncul dalam sitoplasma sebagai coklat gelap granules16'17. Sebagai hal testosteron Ab-1, sel-sel Leydig dianggap aktif jika ada coklat gelap pewarnaan granular sitoplasma.

Sperma kelainan tes:

Sperma kelainan dipelajari seperti yang dijelaskan oleh Wyrobek et al.18 sebagai berikut; kepala epididimis yang dipotong dan cincang dengan gunting kecil dan tetap dalam 2 ml isotonik garam fisiologis. Pap disiapkan dan diwarnai dengan jumlah yang sama dari 5% dan 1% negrocin eosin selama 30 menit. Tiga tetes pap siap diizinkan untuk menjatuhkan di tepi slide pra-dibersihkan dan dengan tepi slide bersih lainnya, smear itu tersebar di seluruh permukaan slide. Slide dibiarkan kering dan kode untuk pemeriksaan mikroskopis selanjutnya. Seribu sperma yang diperiksa di bawah lensa minyak imersi mikroskop cahaya untuk setiap tikus dan sperma abnormal dicatat dan difoto. Tes siswa-t digunakan untuk membandingkan perbedaan dalam persentase sperma kelainan antara kontrol subkelompok la dan kelompok lainnya. Perbandingan persentase beberapa subkelompok kelompok kontrol dilakukan dengan menggunakan Analisis Way Satu Varians (one way ANOVA).

HASIL

1-histologis dan histokimia hasil:

Pemeriksaan H & E stained bagian dari kelompok kontrol, menunjukkan bahwa testis dibentuk dari tubulus seminiferus dengan jaringan interstitial di-antara. Setiap tubulus dilapisi oleh sel-sel spermatogenik yang merupakan tahap-tahap spermatogenesis dan sel Sertoli. Sel-sel spermatogenik termasuk beberapa jenis yang berbeda yaitu, spermatogonium, spermatosit primer, spermatosit sekunder jarang terlihat dan spermatid yang merupakan tahap akhir spermatogenesis, di samping spermatozoa matang diproduksi oleh spermiogenesis. Dalam sel-sel Leydig jaringan interstitial diamati secara tunggal atau dalam rumpun tertanam dalam jaringan jaringan ikat dan kaya suplai darah kapiler. Mereka baik bulat atau poligonal dan dapat dengan mudah dideteksi oleh sitoplasma acidophilic dan inti vesikuler pusat (Gambar 1,2). Dalam PAS bagian bernoda, setiap tubulus dikelilingi oleh PAS + membran basal ve tipis dan berisi PAS ve topi akrosom (Gambar 3).

Testis hewan dari kelompok II mengungkapkan berbagai perubahan morfologi multifokal dalam jaringan baik spermatogenik dan interstitial. Kematian dan degenerasi sel-sel spermatogenik yang nyata diamati. Beberapa tubulus seminiferus dilapisi dengan beberapa lapisan sel spermatogenik

dengan penampilan ruang interselular di antara, beberapa dilapisi dengan hanya satu baris sementara yang lain benar-benar habis sel kecuali sel Sertoli dan hanya berisi materi acidophilic berbusa atau puing-puing dan jaringan nekrotik. Lamina basal tubulus banyak yang tidak teratur dan ruang-ruang interstitial sekitar tubulus ini merosot rupanya melebar (Gambar 4,5). Pengelupasan sel-sel ke lumen adalah temuan yang umum dan banyak tubulus yang diisi dengan bahan hialin acidophilic dengan dikelupas kuman sel peralihan (Gambar 6). Banyak sel spermatogenik, baik dengan inti normal atau tidak, yang terlepas dari membran basal dan bersatu bersama dalam kelompok (Gambar 7) atau membentuk sel spermatogenik berinti normal dalam tubulus dengan inti mereka menunjukkan margenation kromatin. Beberapa tubulus dalam kelompok ini menunjukkan hilangnya spermatid dan spermatozoa (Gbr.8). Tubulus fokus lainnya menunjukkan nekrosis lengkap dengan kehancuran total epitel germinal dan tubulus ini dipisahkan oleh ruang interstitial yang luas dengan crowding fokus sel Leydig dan berisi banyak pembuluh darah yang sangat tebal, melebar dan padat (Gambar 9). Ruang-ruang interstitial di daerah lain rupanya melebar dan menunjukkan akumulasi vacuolated

materi antar acidophilic dengan hypercellularity dari sel-sel Leydig interstitial di samping pembuluh limfatik melebar. Pembuluh darah intertubular yang padat dan dikelilingi oleh infiltrasi sel (Gambar 10,11).

Beberapa tubulus seminiferus menunjukkan adanya PAS + topi ve akrosom sperma beberapa tubulus dan hilangnya membran basement. Ada juga peningkatan jelas dalam jumlah PAS + reaksi ve dalam ruang interstisial (Gambar 12). Tubulus lain yang mengungkapkan hilangnya arsitektur normal tidak menunjukkan reaksi PAS + ve kuat dalam membran basement bergelombang dan dalam tubulus atrophied jelas (Gbr. 13).

Pemeriksaan testis hewan kelompok III yang menerima L-karnitin sebelum reperfusi menunjukkan garis keturunan spermatogenik yang normal bertumpu pada membran basal biasa. Sel-sel spermatogenik mempertahankan karakteristik sitoplasma dan nuklir mereka. The tubular luminae yang buncit dengan spermatid dan spermatozoa memanjang tanpa tanda-tanda degenerasi atau pengelupasan kulit. Struktur histologis kurang lebih seperti pada kelompok kontrol kecuali untuk peningkatan relatif dalam ruang-ruang interstitial dengan vacuolation mereka (Gambar 14,15).

Mengenai reaksi PAS, bagian dari kelompok ini menunjukkan PAS + membran basal ve tipis di sebagian besar tubulus seperti dalam kelompok kontrol. Namun ada daerah fokus sedikit meningkat PAS + reaksi ve lebih dari itu kontrol dan peningkatan jelas PAS + reaksi ve di interstitium (Gambar 16)

Studi 2-imunohistokimia:

Pada kelompok kontrol + ve reaksi protein Bcl-X dalam bentuk butiran cokelat diamati pada beberapa sel spermatogenik focally didistribusikan dalam tubulus seminiferus (Gbr. 17). Namun, testis hewan dari kelompok II, mengungkapkan granular Bcl-X ternyata reaksi positif coklat imunohistokimia seluruh sitoplasma banyak sel germinal terutama di spermatogonium tubulus terlalu terpengaruh (Gambar 18A) dan juga dalam sel spermatogenik berinti dalam lumen tubulus sangat terpengaruh (Gambar 18B). Testis hewan yang menerima L-Camitine sebelum reperfusi (Grup III) menunjukkan pengurangan jelas dalam immunostaining Bcl-X dibandingkan dengan kelompok II (Gbr. 19). Seperti menganggap testosteron Ab-1, kontrol testis mengungkapkan reaksi + ve

imunohistokimia dalam bentuk butiran coklat di sitoplasma sel interstitial Leydig (Gambar 20). Pada kelompok II reaksi rupanya focally meningkat pada beberapa sel Leydig (Gbr.21). Pada kelompok III, sel-sel Leydig menunjukkan tampaknya meningkat dalam butiran coklat positif testosteron Ab-1 lebih dari pada kelompok kontrol (Gambar 22).

3-Sperma kelainan hasil:

Kelompok kontrol menunjukkan morfologi sperma normal dengan menonjol kait bentuk kepala (Gbr. 23). Mereka menunjukkan sekitar 1,8% kelainan berupa kurangnya kail.

ANOVA satu arah analisis statistik menunjukkan perbedaan yang tidak signifikan dalam cara sperma kelainan antara subkelompok yang berbeda dari hewan kontrol (p> 0,05) (Tabel 1-A).

Pada kelompok II kelainan sperma meningkat tajam dalam bentuk anomali kepala (menggelembung, bulat, kepala tanpa ekor, hook di sudut yang salah, dipisahkan kepala menyatu dengan kepala sperma lain dan kepala tidak teratur) dan kelainan ekor (melingkar ekor, ekor dengan absen manik-manik dan fusi ekor pada posisi yang berbeda) (piring 1). Membandingkan dengan subkelompok kontrol (la), kelompok II menunjukkan peningkatan yang sangat signifikan dalam frekuensi kelainan sperma. Persentase total kelainan adalah 12,6% dengan P <0,001 (Tabel 1-B). Hewan kelompok III yang diobati dengan L-karnitin sebelum pertusion dipamerkan penurunan total kelainan sperma dibandingkan dengan kelompok II menjadi 2,16% hanya dalam bentuk kepala terpisah yang dapat menyatu dengan kepala lainnya (Gambar 24). Bandingkan dengan subkelompok la, kelompok ini menunjukkan peningkatan yang tidak signifikan dalam sperma kelainan (Tabel IB & Gambar. 24).

PEMBAHASAN

Torsi testis adalah kondisi patologis umum pada manusia yang membuat testis iskemik, dan bahkan dengan perbaikan bedah sukses, infertilitas adalah outcome2 klinis umum.

Dalam studi ini, iskemia transien yang disebabkan oleh penjepitan kabel spermatika selama 60 menit diikuti oleh repcr fusi (I / R) menunjukkan kerusakan testis yang parah serta disorganisasi dalam bentuk multifocal degenerasi sel germinal dan pengelupasan kulit dengan formasi sering kuman agregasi sel berinti . Hasil yang sama sebelumnya tercatat WILH banyak authors1 "-2".

Mekanisme cedera testis pada torsi termasuk kerusakan yang disebabkan oleh iskemia selain merusak yang disebabkan oleh reperfusi (I / R cedera). The patofisiologis mekanisme yang mendasari cedera iskemik testis dan kematian sel kuman mungkin karena penurunan aliran darah yang mengarah ke pengurangan suplai oksigen relatif terhadap kebutuhan metabolik dengan penurunan berikutnya yang disimpan energi sel dan akumulasi metabolit toksik seperti asam laktat, hypoxanihitic ami peroksida lipid. Setelah kembalinya aliran darah, fase perfusioti secara signifikan dapat memperburuk iskemik-induccd kuman cedera sel melalui pembentukan spesies nitrogen dan spesies oksigen reaktif (ROS). Tindakan berbahaya ROS terutama terdiri dari peroksidasi lipid dalam fosfolipid tertentu membran biologis dan kerusakan oxidalive protein dan DNAU-21.

The 1 / R cedera adalah peristiwa multifaktorial dan hipotesis ROS tampaknya menjadi yang paling diselidiki secara menyeluruh. Menurut teori ini, kerusakan sel cndothelial mengikuti I / R menghasilkan ekspresi permukaan sel molekul adhesi sel yang terlibat dalam polytnorph nuklir (PMN) perekrutan. Hal ini menyebabkan peningkatan yang signifikan dalam aktivasi neutrofil dan

adhesi pada endotel vena testis. Neutrofil diaktifkan generator ampuh ROS dan terkait dengan peningkatan peroksidasi lipid testis, ukuran tidak langsung dari intratesticular ROS2, 22.

Dalam penelitian ini, sel-sel spermatogenik yang sangat terpengaruh pada hewan dengan I / R testis dalam bentuk hilangnya spermatid dan spermatozoa dalam banyak tubulus. Hal ini didokumentasikan bahwa testis I / R diinduksi kuman sel degenerasi dengan penurunan ditandai dalam jumlah rata-rata lapisan sel germinal dan gangguan spermatogenesis1, 19.

The vacuolation dan peningkatan jelas dalam jumlah sel interstitial di samping peningkatan jelas dalam PAS + reaksi ve dalam interstitium yang diamati dalam penelitian ini mungkin disebabkan meningkatnya aktivitas sel menggali Ley. Dilaporkan bahwa sel menggali Ley biasanya melepaskan hormon mereka ke dalam cairan ekstraselular melimpah dari interstitium yang berdifusi ke tubulus untuk mengerahkan efek lokal mereka pada spermatogenesis dan ke dalam darah dan pembuluh limfatik untuk mengerahkan efek sistemik mereka. Pada saat yang sama, tubulus seminiferus mengerahkan efek regulasi lokal pada fungsi sel Leydig, peptida, diperkirakan dihasilkan oleh sel Sertoli, yang menghambat sel-sel Leydig. Jadi, kerusakan lokal untuk tubulus seminiferus muncul untuk mengurangi efek penghambatan dan menginduksi hipertrofi dan peningkatan aktivitas Leydig cells23. Ini peningkatan aktivitas sel-sel Leydig diharapkan oleh vacuolation interstitial jelas, pembuluh limfatik melebar dan dengan tambal sulam peningkatan reaksi immunstaining testosteron AB-1. Peningkatan aktivitas sel-sel Leydig juga didukung oleh peningkatan PAS + reaksi ve direkam dalam pekerjaan ini, sebagai reaksi PAS dari interstitium testis berkorelasi dengan metabolisme steroid, biosintesis dan sekresi, di Leydig cells24.

Selama pekerjaan ini, banyak tubulus yang terkena dampak parah dan benar-benar digantikan oleh bahan hialin dalam I / R kelompok. Tubulus seminiferus yang avaskular dan sangat aktif secara metabolik dan tergantung pada transportasi oksigen dan nutrisi dari pembuluh darah interstitial. Hal ini menempatkan mereka di perbatasan hipoksia dan rentan terhadap penurunan aliran darah sehingga, cedera iskemik menyebabkan degenerasi kuman cells20. Beberapa sel germinal morfologi normal dengan inti vesikuler yang dikelupas dalam lumen tubulus dalam pekerjaan ini. Sel-sel germinal dikelupas yang normal menunjukkan efek utama pada sel untuk sambungan sel antara Sertoli dan kuman cells20.

Pada penelitian ini beberapa sel spermatogenik focally didistribusikan dalam testis tikus kontrol mengungkapkan ve immunstaining reaksi untuk protein Bcl-X sedangkan kelompok II mengungkapkan reaksi + ve dari sebagian besar sel germinal terutama di spermatogonia. Hal itu membuktikan bahwa protein Bcl-X menunjukkan kemampuan untuk mempromosikan apoptosis yaitu preapoptotic2-5. Sementara itu, dilaporkan bahwa rasio protein pra-apoptosis dibandingkan antiapoptotic adalah

penting dalam menentukan apakah sel akan mengalami apoptosis atau not26. Jadi, peningkatan positif Bcl-X immunostaining dari spermatogonium dalam pekerjaan ini bisa dijelaskan sebagai peningkatan kerentanan terhadap apoptosis. Hal ini bertepatan dengan banyak penulis yang sebelumnya melaporkan bahwa penurunan aliran darah pada testis menginduksi kematian di antara sel germinal dengan apoptosis bukan oleh necrosis19, 27. Mereka menambahkan bahwa spermatogonium adalah tipe sel primer mengalami apoptosis setelah I / R cedera. Lysiak et al.28 telah menunjukkan bahwa neutrofil adalah sel inisiator untuk peristiwa molekuler yang menyebabkan apoptosis sel germinal. Mereka menjelaskan bahwa neutrofil perekrutan ke testis

setelah I / R pada tikus merangsang sekresi sitokin pro-inflamasi TNF-alpha, IL-lbeta dan molekul adhesi sel endotel, terutama E-selectin. Sitokin ini memicu apoptosis sel germinal dan penurunan massa sel germinal yang menyebabkan hilangnya kesuburan.

Reperfusi iskemik disebabkan peningkatan frekuensi kelainan sperma, dalam bentuk tidak teratur, bulat dan terpisah kepala di samping fusi ekor sperma di lokasi yang berbeda. Hal ini mungkin sebagai akibat dari penghancuran sel-sel germinal setelah I / R cedera dan pelepasan ROS yang dapat mempengaruhi pengembangan sel germinal sehingga menghasilkan varietas morfologis normal sperms29.

Testis hewan dari Ic subkelompok yang menerima L-karnitin sendiri dalam penelitian ini menunjukkan jaringan testis mirip dengan kontrol subkelompok la. Ketika L-karnitin telah diadministrasikan sebelum reperfusi, menghasilkan peningkatan yang jelas histologis perubahan testis, sebuah vacuolation interstisial jelas, penurunan Bcl-X immunstaining, peningkatan jelas dalam testosteron AB-1 immunstaining dan peningkatan non signifikan dalam sperma kelainan dibandingkan dengan kontrol subkelompok la. Pengelupasan ini, disorganisasi, atau degenerasi sel germinal yang umumnya dilihat dalam I / R hewan tidak diamati dalam kelompok ini. Ditemukan bahwa jaringan testis burung makan makanan karnitin dipelihara seperti yang ditunjukkan oleh penurunan raksasa berinti cells30. The interstitial vacuolation mungkin karena peningkatan kandungan steroid dan ini berkorelasi dengan tampaknya meningkat di immunoreactivity testosteron AB-1.

Pengaruh karnitin pada fungsi reproduksi laki-laki mapan, bagaimanapun, mekanisme molekul dengan yang caraitines mengontrol kesuburan pria belum pernah jelas identified31. Efek perlindungan dari karnitin dapat melalui pembentukan hidrogen peroksida kurang dan kurang tersedia ion bebas, mengakibatkan pelemahan dari radikal bebas dimediasi damage32. L-carnitine juga meningkatkan tingkat antioksidan lainnya seperti B6 dan pyridoxyle phosphate33 dan membatasi laktat production34. Ditemukan bahwa L-karnitin memberikan perlindungan yang signifikan dalam arteri Model oklusi splanikus I / R cedera yang mungkin dicapai melalui infiltrasi leukosit menghambat dan melestarikan fungsi endotel, sehingga mengurangi permeabilitas mikrovaskuler dan memelihara jaringan perfusion35. Peran pelindung testis L-karnitin sebelumnya dicatat dalam testis tikus terkena panas dan X-iradiasi, dan pada pria dengan idiopathic oligoasthenospermia. Dalam kondisi ini, suplemen dengan karnitin meningkatkan kualitas sperma dan / atau kuantitas dan manfaat ini mungkin karena peningkatan oksidasi asam lemak mitokondria menyebabkan peningkatan motilitas sperma dan pematangan di dalam saluran reproduksi laki-laki dan di seluruh spermatogenetic process10.

Disarankan bahwa karnitin diet memiliki sifat antioksidan yang dapat melindungi membran sperma, sehingga memperpanjang masa hidup sperma dan melindungi membran sperma terhadap ROS toksik. Sifat antioksidan carnitine juga mengurangi ketersediaan lipid untuk peroksidasi dengan mengangkut asam lemak ke dalam mitokondria untuk beta-oksidasi untuk menghasilkan adenosin trifosfat energy30. Jadi, frekuensi kelainan sperma secara signifikan menurun pada pekerjaan ini.

Sel Sertoli adalah target mungkin untuk tindakan metabolik luas karnitin. Keterlibatan karnitin dalam regulasi fungsi sel Sertoli, yang berhubungan dengan kuman nutrisi sel, adalah sangat supported36. L-karnitin administrasi menginduksi peningkatan intraseluler kolam asam amino yang berguna untuk

mempercepat metabolisme energi sel Sertoli. Secara keseluruhan, data ini menunjukkan bahwa pengaruh carnitines pada kesuburan pria bisa sebagian dimediasi oleh aktifitas di Sertoli sel level31.

Terakhir, karnitin yang terakumulasi dalam testis dan cairan tubular pada konsentrasi yang lebih tinggi daripada dalam plasma dan digunakan terlepas dari adanya penghalang darah-testis. Hal ini dapat ditularkan dari sirkulasi darah ke sel-sel Sertoli, serta sel germinal melalui beberapa perusahaan pengangkutan karnitin mungkin melalui membran basolateral sel Sertoli. Dalam jaringan reproduksi pria, konsentrasi tinggi karnitin merupakan nutrisi penting untuk pematangan sperma dan motilitas. Banyak penelitian telah menunjukkan bahwa karnitin konsentrasi berkurang dalam cairan mani patiente subur dan peningkatan motilitas sperma dan kelangsungan hidup spermatozoa diperoleh dengan pengobatan dengan karnitin dan acetylcarnitine37.

Penurunan Bcl-X immunstaining pada hewan dari kelompok ini yang menerima L-carnitine sebelum reperfusi ini disebabkan sifat antiapoptotic L-karnitin karena dapat digunakan sebagai pengobatan yang potensial untuk memblokir apoptosis dalam banyak diseases38. Sebagai hal testosteron Ab-1, itu focally meningkat pada I / R kelompok dan meningkat pada kelompok III. Ini adalah untuk pergi dengan Turner et al.39 yang menemukan bahwa torsi eksperimental secara signifikan mengurangi perfusi pembuluh darah testis dan lima menit setelah perbaikan torsi, nilai-nilai aliran testosteron plasma berarti telah kembali ke sekitar 70% dari nilai pretorsion.

Hal ini dapat disimpulkan bahwa I / R diinduksi testis

toksisitas mencatat histologis, histochemichally dan immunohistochemichally. Penggunaan preoperatif L-karnitin mengurangi efek racun yang mungkin melalui efek penghambatan pada apoptosis sel germinal dan melalui aktivitas antioksidan. Penggunaan L-carnitine dalam model hewan dapat membantu dalam melestarikan massa sel kuman dan mencegah kemandulan setelah testis I / R. Jadi, lanjut terkendali dengan baik, hati-hati dirancang dan studi skala besar diperlukan sebelum penggunaan klinis L-karnitin untuk mencegah kemandulan pada manusia setelah testis I / R.