收集檢體的 注意事項 - wun-ching.com.t ·...
TRANSCRIPT
1 收集檢體的
注意事項
王嘉莉 編著
1-1 受檢者的準備
1-2 檢體的種類
血液檢體的採集
尿液檢體的採集
糞便檢體的採集
痰液檢體的採集
精液檢體的採集
腦脊髓液檢體的採集
其他體液的採集
細菌培養檢體的採檢
2
醫學檢驗室提供檢驗生物、細菌、免疫、生化、血液、細胞、病理或其他取
自人體的檢體,其目的是提供人類疾病之診斷、預防、治療或人體之健康評估等
資訊,檢驗品質攸關臨床醫療品質,檢驗作業流程大致可分為檢驗前程序 (pre-
examination procedures)、檢驗程序 (examination procedures)及檢驗後程序 (post-
examination procedures)。檢驗前程序為採檢流程及檢體運送過程,檢驗程序為執
行儀器分析階段,檢驗後程序為執行核發報告部分,整個流程環環相扣,而檢驗
結果之不正確最常發生的問題,大都源自於檢驗前程序的作業部分,如病人辨識
與採檢過程相關的專業知識,有好的開始就是成功的一半。正確採檢才會有正確
的檢驗結果,有正確的檢驗結果,醫師才能有正確的臨床判斷,也可以確保病人
的醫療品質與安全,也因此如何預防前端作業的失誤,是正確報告的一個重要環
節。所謂分析前期(pre-analytical phase)為按時間順序,開始於醫師需求,結束於
分析檢驗程序,逐步完成包括提出檢驗申請、病人準備、原始檢體採集、檢體運
送與實驗室內之傳送。為確保各項檢驗結果之正確性,各檢驗室對於各項檢驗之
作業流程皆應有正式之標準規範。為使所有採檢及送檢單位之相關人員能依循標
準程序執行檢體採檢,以確保檢驗品質,檢驗室需制定並提供採檢手冊。
1-1 受檢者的準備
檢查前的準備與患者及檢體有關的因素都極為重要,對優良的檢驗品質而
言,最關鍵的因素就是採集適當的檢體。採集檢體之前必須先讓受檢者瞭解所需
要注意及配合之事項,例如:要量測最佳的血糖值或三酸甘油酯 (triglyceride)需
要空腹;或是要測量飯後 2 小時之血糖值時,需要在吃第一口食物開始算起;精
蟲檢查需配合禁慾時間。有些檢驗項目需配合服藥時間或生理時間抽血,例如:
藥物濃度或激素(hormone,又稱為荷爾蒙)之檢測,若未依時間點採集檢體,
導致檢驗數據的高低不符合醫師的預期,可能會讓醫師調整藥量,導致危害病人
生命安全。因此配合時間採檢非常重要,在檢驗單上需註明採檢時間,方便臨床
藥師評估療效和建議藥量。測量腎素 (renin)及醛固酮 (aldosterone)時需要嚴格控
制體位與鈉的攝取;採取肌酸激酶(creatine kinase)檢體前應避免劇烈運動,因為
大量肌肉活動會導致假性異常結果 (Nicoll et al., 2004/2006)。
Chapter 1|收集檢體的注意事項 3
1-2 檢體的種類
血液檢體的採集 (Collection of Blood Specimen)
採血應有計畫,避免次數過多,造成病患不適及血液浪費,也必須注意病患
的身分確認,以及檢體的標籤。瞭解檢體採檢的時間也十分重要,例如檢體採檢
時間是在用藥前或用藥後,若是不知道抽血的時間點,就很難提供正確的訊息給
臨床醫師做正確之判斷,血中藥物濃度(如口服 Digoxin 後 6 小時內的濃度)的
解讀分析,物質若有 24 小時變化週期(如 Cortisol),則其採取檢體的時間對於
結果的判讀就極為重要 (Nicoll et al., 2004/2006)。
在檢體採集時不可從靜脈輸注之手臂採血,因為可能會使檢體被靜脈輸注的
液體所污染。所需血量盡量一次採足,若有檢體不足時,不可將不同種類(含不
同抗凝劑)的試管內的血液相互混合(會干擾實驗結果,造成檢驗結果錯誤),
應重新採血。也不可從洗腎患者之動靜脈瘻管(AV shunt)採血。止血帶不可綁太
久,最好不要超過 2 分鐘,止血帶若使用時間過長,可能導致血液濃縮並增加與
蛋白質結合物質的濃度,如:鈣(calcium, Ca) (Nicoll et al., 2004/2006)。所有血液檢體應
避免溶血,血液檢體採檢時若細胞破裂造成檢體溶血,對下列檢驗之結果會造成
較嚴重的影響:鉀離子 (potassium, K)、鎂離子 (magnesium, Mg)、肝功能指數
(GOT 及 GPT)、黃疸指數 (bilirubin)、肌酸磷酸激酶 (creatine phosphokinase,
CPK)、肌酸磷酸激酶同功酶(CPK-isoenzyme)、乳酸脫氫酶(lactic dehydrogenase,
LDH)、乳酸脫氫酶同功酶 (LDH-isoenzyme)、鹼性磷酸酶 (ALP)、酸性磷酸酶
(acid-Ptase)、蛋白質電泳分析(protein electrophoresis, protein-EP)、伽馬麩胺醯轉
移酶(gamma-GT, γ-GT)。
一、血液檢體的採集方法
病人一次採血做多項檢查時,建議使用真空採血針及自動退針器(圖 1-1、
圖 1-2),以利一次採取足夠血液量,可縮短採血時間,並減少針扎機會。
4
圖 1-1 靜脈採血用具。
圖 1-2 (A)真空採血針及自動退針器; (B)靜脈採血(前臂靜脈),使用真空採血針。
多管採血時,採血試管使用順序的原則及建議順序如下:
1. 採檢試管使用順序的原則:
(1) 無菌採檢(血液培養瓶,圖 1-3)。
(2) 不含抗凝劑採血試管。
(3) 含抗凝劑採血試管,且須適時溫和上下倒轉,混合均勻。
2. 採集血液之試管建議使用順序:
(1) 血液培養瓶(厭氧瓶優先,再嗜氧瓶)(見圖 1-3)。
(2) 不加抗凝劑試管(圖 1-4A)。
(3) 藍頭試管:含 3.2%檸檬酸鈉(sodium citrate)抗凝劑(圖 1-4B)。
(4) 紅頭有膠試管:含促凝劑(圖 1-4C)。
(5) 綠頭試管:含肝素(heparin)抗凝劑(圖 1-4D)。
(6) 紫頭試管:含 EDTA 抗凝劑(圖 1-4E)。
(7) 灰頭試管:含 NaF 抗凝劑(圖 1-4H)。
6
表 1-1 | 常用採血試管的種類
名稱 內容物質 用途
紅頭試管(圖 1-4A) 無添加 (no additive) 生化、血清、藥物
紅灰迷彩頭試管 促凝劑與分離膠 生化、血清
藍頭試管(圖 1-4B) 3.2%檸檬酸鈉抗凝劑 血液凝固學檢驗,如:各項凝
血因子、凝血時間 (PT, aPTT)
深藍頭藍標試管 EDTA 抗凝劑 鋅 (Zn)、鎘 (Cd)、汞 (Hg)、砷
(As)、鉛 (Pb)等重金屬檢驗
深藍頭紅標試管
(圖 1-4F)
不含抗凝劑 鋰 (Li)、鎂 (Mg)、銅 (Cu)、鋁
(Al)等重金屬檢驗
深綠頭試管(圖 1-4D) 肝素鈉 (sodium heparin)抗
凝劑
生化、藥物、染色體分析、病
毒培養
淺 綠 頭 試 管 (plasma
separation tube, PST)
(圖 1-4G)
肝素鋰 (lithium heparin)抗
凝劑
生化、氨 (ammonia)檢驗
紫頭試管(圖 1-4E) EDTA 抗凝劑 血液學、醣化血色素、同半胱
胺酸檢驗及血庫應用
灰頭試管(圖 1-4H) Sodium fluoride (NaF) /
Potassium oxalate 抗凝劑
生化、血糖檢驗
黑頭試管(圖 1-4I) 3.8%檸檬酸鈉抗凝劑 紅血球沉澱速率 (ESR)檢驗
黃頭試管 ACD (acid citrate dextrose)
抗凝劑
用於組織型鑑別、白血病抗原
(HLA)檢驗及親子鑑定等特殊
血庫檢驗
金黃頭試管(血清分離管
(serum separation tube,
SST),圖 1-4J)
促凝劑與分離膠 生化、血清免疫、藥物
靜脈穿刺 (Venous Puncture) 1. 採血前步驟:
(1) 核對醫囑或檢驗單。
(2) 依檢驗項目備妥正確的採血試管或容器,貼上標籤。
(3) 備妥採檢相關用物,如針頭、抽血枕、止血帶、棉球、鑷子等。
Chapter 1|收集檢體的注意事項 7
(3) 採檢者洗淨雙手,戴上手套。
(4) 識別病人,包括:稱呼病人全名、核對床頭卡或手圈等。
(5) 協助病患採舒適姿勢,露出合宜之採血部位。
2. 靜脈採血步驟:
(1) 選擇適當穿刺部位,最常選擇的靜脈為肘正中靜脈、貴要靜脈及頭靜脈。
若手臂無適合穿刺之部位,亦可考慮手背及腳踝處。
(2) 在採血部位上方 6~8 公分處綁上止血帶,不可太緊或太鬆,時間不可超過
1 分鐘。請病人握緊拳頭。
(3) 以無菌棉枝沾取 75%酒精,或用 75%酒精棉球,由內往外環狀消毒,直
徑約 3吋。
(4) 使用空針、真空採血器或蝴蝶針採血,針頭斜面朝上,以 15~30 度角刺入
靜脈,抽取所需血量(見圖 1-2B)。
(5) 請病人鬆開拳頭,然後先鬆開止血帶,以無菌乾棉球壓住穿刺部位,再拔
出針頭,局部加壓止血至少 5分鐘,並告知病人手臂伸直且不可揉。
(6) 若以空針採血,將血液沿管壁徐徐注入試管,不可強壓針筒以避免溶血。
注射器或真空採血針丟棄於廢針頭收集盒內。
3. 靜脈穿刺的禁忌部位:
(1) 乳房切除同側手臂。
(2) 水腫、血腫部位。
(3) 疤痕部位。
(4) 輸血、點滴輸入、瘻管或任何導管之同側手臂。
動脈穿刺 (Arterial Puncture) 有時候需要動脈血來瞭解病人血中含氧量,進而評估肺臟功能的狀態,就
需要做動脈穿刺。動脈穿刺的建議部位包括橈動脈、肱動脈、足背動脈及股動
脈。若擬穿刺橈動脈,則需先施行艾倫試驗(Allen test),陽性者才可於橈動脈進
行穿刺。
1. 艾倫試驗(Allen test):
(1) 請受檢者手部用力握拳。
(2) 施檢者以手指同時按壓受檢者手腕橈側及尺側脈動處,使其橈動脈與尺動
脈血流同時阻斷(圖 1-5A)。
8
(3) 請受檢者鬆開拳頭,此時受檢者手掌與手指呈現蒼白。
(4) 施檢者放鬆對尺動脈之壓迫(橈動脈仍受壓迫,圖 1-5B),若受檢者手掌
於 15 秒內發紅,則是艾倫試驗陽性,反之則為陰性。
圖 1-5 艾倫試驗 (Allen test)。
2. 動脈穿刺步驟如下:
(1) 選擇適當穿刺部位,最常選擇的部
位為橈動脈。
(2) 皮膚消毒:做動脈穿刺時,穿刺部
位之消毒,須以 1%酒精性優碘由內
往外環形消毒,消毒範圍約直徑 3
吋,待 30 秒優碘完全乾燥後,再使
用 75%酒精重複消毒。
(3) 準備 3 mL 或 5 mL 空針,以空針抽
取肝素 (heparin 1:1000 units/mL),
先潤濕整支空針,排出多餘的空氣及肝素,再做動脈穿刺。
(4) 進行動脈穿刺,若於橈動脈和足背動脈,針頭以 45°~60°刺入皮膚(圖 1-
6);若於股動脈,針頭與皮膚垂直。抽取所需血量。
(5) 採血完成針頭拔出後,須以無菌紗布加壓穿刺部位,壓迫止血較長的時間
(定點加壓至少 15分鐘)。
(6) 將針筒中的氣體排除後,針直接插入橡皮塞中以防堵空氣進入,並放入裝
有冰塊水之容器中,盡快送檢。
圖 1-6 動脈穿刺。
Chapter 1|收集檢體的注意事項 9
皮膚穿刺 (Skin Puncture)
當只需取得少量周邊血液時,或嬰兒不易採檢時,可利用毛細管進行採血
(圖 1-7)。步驟如下:
1. 選擇適當穿刺部位,適合採血的部位包括指尖、耳垂及足跟側面部位(不可
穿刺足跟中央部位,以避免骨髓炎)。採血前,先輕輕按摩穿刺部位約 5~10
秒,使其充血。
2. 以 75%酒精棉球以穿刺部位為中心,由內往外環狀消毒,直徑約 3 吋,待酒
精自然風乾。
3. 以穿刺針或採血筆針做一快且深(約 2 mm)的扎刺,針頭以垂直方向刺入
(圖 1-7B)。然後以無菌乾棉球拭除第一滴血液(因可能含有體液、皮膚碎片
及殘餘酒精而影響檢驗結果)。
4. 以毛細管接取血液,讓血液自然吸入毛細管內,勿接觸傷口(圖 1-7C及 D)。
5. 採血完畢後,以無菌乾棉球壓住穿刺部位,加壓止血,直到出血停止。
圖 1-7 毛細管採血。 (A)採血用具,由左至右:傳統穿刺針 (lancet)、黏土、毛細管
(capillaries)、採血針及採血筆; (B)嬰兒足跟皮膚穿刺; (C)嬰兒足跟毛細管採血; (D)成人手指
毛細管採血。
10
二、其他注意事項
有些檢驗項目需要特別注意,如凝血功能檢查使用藍頭試管(見圖 1-4B),
主要做凝血酶原時間 (prothrombin time, PT)及活化部分凝血活酶時間 (activated
partial thromboplastin time, aPTT)檢驗。當病人由仰臥變成直立站姿時,因為水
分自血管中移到細胞間質中平均達 12%,可以明顯讓血液變得較濃稠而使得凝血
因子濃度增加,PT、aPTT 時間縮短;直立的姿勢也會使作用於血管活性的激素
釋放,影響血小板功能,因此病人在採血時應採取一致的姿勢。止血帶綁紮的時
間超過 1 分鐘以上時,水分及小分子物質會因靜水壓增加,移動到細胞間質中,
也會造成類似前述的結果。另外,採血時若過度傷害血管壁及周圍組織,也會因
為活化了凝血功能,使得 PT、aPTT 時間縮短;採血時間若拖越長,對組織傷害
越大,因為凝血功能活化,消耗凝血因子及血小板,會使相關檢驗結果偏低。從
點滴輸入位置附近採血也可能因稀釋作用或肝素(heparin)影響檢驗結果。檢體量
過多或不足,會使抗凝劑比例不正確,也會影響結果(全血:抗凝劑=9:1 的
原則,抽血量達到採血管指示刻度±10%內為可接受範圍)。採血應盡量使用真
空採血管直接採取,若用空針採取再打入採血管中,因為在分裝等候的時間變
長,有可能因延遲加入抗凝劑而影響結果,容易造成血小板進一步活化,使凝血
酶原時間(PT)及部分凝血活酶時間(aPTT)縮短。
常見的檢體溶血原因
1. 在執行抽血前的消毒時,若酒精未乾,使殘留在皮膚上的酒精藉由針頭與血
液接觸可能會導致溶血。
2. 血液打入採檢試管時,直接加壓注入試管內的壓力及速度太快時,使血球互
相擠壓造成破裂。
3. 血液檢體在試管中未經離心處理,在高溫或低溫環境的時間過久。
4. 使用採血針頭太小,血液在狹小的空間進出容易擠壓破裂。
5. 抽血不足、抽血時間過久造成止血帶綁太久使血管中之血液壓力過大。
6. 檢體試管在運送過程中劇烈搖晃,造成血球增加撞擊機會。
7. 混合含抗凝劑試管之檢體應上下輕輕搖晃,若用力搖動也容易造成血球破損。
8. 特殊病患檢體,以上都可能是造成檢體溶血的因素。
Chapter 1|收集檢體的注意事項 11
造成血液凝固的原因
血液凝固可分內因和外因性原因,內因性:可能病人有特殊抗體導致。外因
性:抽血時間過長,使血液離開身體外時間過長,會漸漸凝集後形成凝固,若檢
體進入試管後未立即混合或混合不均勻,檢體未與抗凝劑充分混合而導致血液凝
固。有時血液凝固現象的發生,若未仔細觀察,肉眼很難發現,有時候檢測之儀
器管路會被細小的凝集所阻塞,但血液一旦有凝集現象產生,血小板數據會有很
大變異。
有些檢體需要冰浴送檢,針對室溫不穩定的檢查項目通常都會有特殊規定,
如降低保存溫度、加溫保存、加保存劑、加酸或特殊試管等。冰浴送檢項目大多
是在運送過程中,以降溫的方式來降低代謝率。例如:促腎上腺皮質素
(adrenocorticotropic hormone, ACTH)、同半胱胺酸 (homocysteine)、血中氨
(ammonia, NH3)及血液氣體分析(blood gas analysis)等。
尿液檢體的採集 (Collection of Urine Specimen)
尿液的採集分為:
1. 可以自行排尿:要先將前段尿液排掉,取中段尿液,若要做細菌培養則需要
做尿道口之局部消毒。
2. 麻醉或中風之病患無法自行排尿時:則需要導尿,由醫師或護理人員執行。
3. 利用針筒由恥骨上方透過腹壁穿刺近入膀胱中抽取尿液。
為了要得到正確的尿液分析結果,適當的尿液檢體採集是很重要的。在尿液
檢體採集過程中,應小心避免因污染而造成錯誤的結果。一般常規尿液分析(物
理性質、化學性質及尿沉渣檢查)可用乾淨拋棄式紙杯或塑膠杯(容量 50~100
毫升)。若尿液檢體需要運送時,則必須使用有加蓋且密封的容器(圖 1-8);細
菌培養的尿液檢體,則必須使用無菌、有蓋的容器(圖 1-9);收集 24 小時尿液
檢體,須使用 3~4 公升(3000~4000 毫升)、廣口、有蓋、乾淨、透明且有刻度
的容器收集檢體(圖 1-10)。
12
圖 1-8 尿液試管。
圖 1-9 無菌廣口盒(60 mL 或 40 mL)。
圖 1-10 24 小時收集尿液袋(3~4 公升)。
通常尿液檢體可以提供病患泌尿系統狀況與功能之評估,同時也可以作為評
估人體維持平衡及代謝過程之依據。尿液檢體的種類有隨機尿液檢體、早晨第一
次尿液檢體及 24 小時尿液檢體等。
一、隨機尿液檢體
隨機尿液檢體 (random urine specimen)是門診病人最常採集也是最方便的檢
體,一般而言適合做尿液分析,主要缺點是尿液成分的濃度差異性較大,對於較
稀的尿液檢體中具有病理意義的成分,有可能無法檢查出來。
Chapter 1|收集檢體的注意事項 13
二、早晨第一次尿液檢體
早晨第一次尿液檢體(first morning urine specimen),指早晨起床後立即採集
的第一次尿液檢體。尿液在膀胱中經過一夜睡眠約 6~8 小時,人在睡眠中水分的
攝取及活動較少,尿液較為濃縮,尿液中的成分濃度較高,較容易檢出。此類之
尿液檢體比白天尿液的酸鹼度低,滲透壓(osmolality)較高;酸鹼度低有助於保存
尿液中的圓柱體(casts)及其他有形成分,高的滲透壓反映腎臟濃縮之能力。尿液
在膀胱內,細菌經一夜繁殖後也有助於診斷尿道感染。
三、24小時尿液檢體
通常採集 24 小時尿液檢體(24-hour urine specimen),是用來評估尿液中某些
特定物質時所採用的方式,可以藉由分析這些物質來評估人體循環、代謝、運動
及水合作用(hydration)等。某些尿液中的成分在一天之中會有變化,所以藉由收
集 24 小時的尿液分析,可以提供臨床醫師更正確、更有價值的診斷,例如:電
解質 (electrolyte)、激素 (hormone)、蛋白質 (protein)、尿膽素原 (urobilinogen)、兒
茶酚胺(catecholamine)、5-羥吲哚醋酸(5-hydroxyindoleacetic acid, 5-HIAA)、香草
扁桃酸(vanillylmandelic acid, VMA)及 17-羥類固醇(17-hydroxysteroid)等。
24 小時尿液收集步驟:
1. 假設自上午 8 點開始收集,在上午 8 點將膀胱中的尿液排掉丟棄。
2. 開始收集 24 小時之尿液檢體,每一次的尿液全部收集至有加保存劑的容器中
(3~4 公升之容器)(見圖 1-10),若有遺漏則應重新收集。
3. 直到第二天早上 8 點的尿液全部收集完成後,在檢驗單上記錄總尿量,並充
分混合後取 10 mL 於尿液試管中(見圖 1-8),連同檢驗單一起送至檢驗室。
四、懷孕試驗尿液檢體的採集
懷孕試驗(pregnancy test)一般使用尿液檢體,可使用隨機尿液檢體,但因早
晨第一次尿液較為濃縮,人類絨毛膜促性腺素 (human chorionic gonadotropin,
hCG)之濃度較高,病人可以將尿液檢體採集於乾淨容器後,若未能及時檢驗,
可儲存於 2~8°C 中 48 小時,尿液檢體若置於冰箱,檢體須回復至室溫後再執行
懷孕試驗,以免影響結果報告。
14
糞便檢體的採集 (Collection of Stool Specimen)
糞便的成分通常由 4~5 天前未消化的食物殘渣、飲食中的纖維素
(cellulose)、膽汁(膽鹼(choline)含有色素及膽鹽)等幾種成分所組成。糞便的顏
色,正常係由腸道內細菌與膽紅素 (bilirubin)作用所造成。腸道分泌物含有黏
液、血液中轉移而來的白血球(正常情況下很少),以及脫落的上皮細胞(如鱗
狀上皮細胞來自大腸)。大量細菌可以佔糞便固體物質的 30%,無機物質約佔
10~20%,主要是鈣、磷以及水分等。檢查糞便中的寄生蟲及蟲卵,可以診斷寄
生蟲感染;檢查糞便中的潛血,可以幫助診斷腸道出血及篩檢結腸直腸癌;檢查
糞便中是否有無脂肪及肉類纖維之存在,可以幫助診斷吸收不良症;糞便的分析
更可以幫助臨床醫師診斷腹瀉(diarrhea)、痢疾(dysentery)、乙狀結腸阻塞、潰瘍
性結腸炎及阻塞性黃疸等疾病。
為避免檢驗結果受到干擾,在糞便採集時需特別注意,糞便量大約小指大小
(約 10 克),糞便檢體不能受到水、尿液或經血的污染(原蟲的滋養體會受尿液
破壞),檢體需置於乾淨容器中,並盡快送檢,若無法立刻送檢可以放置在 4°C
冰箱中,但液體糞便檢體須在一小時內送檢,避免原蟲滋養體在低溫時運動性減
少,而造成檢出率降低。
一、糞便潛血檢查 (Occult Blood Test)
糞便檢體檢查結果要做為臨床診斷之輔助,病人對於採集的注意與配合事項
就很重要。若要檢查糞便潛血反應,採檢前三天應禁食肉類食物、鐵劑、含鐵劑
藥物及 Aspirin 類藥物,否則會造成潛血反應的偽陽性。大量維生素 C 或其他抗
氧化物可能會造成偽陰性反應,採檢前亦應禁食。盡量以便盆或坐式馬桶採檢,
解便時應盡可能解在馬桶前端(避免污水及尿液的污染);若為蹲式馬桶則盡可
能取未沾水部分之糞便。採用化學法檢驗時,檢體量取約花生米大小的糞便,不
可使用衛生紙包覆檢體,因為會影響潛血反應的檢驗結果。最好使用從檢驗室所
領取的檢體盒(圖 1-11A),並盡快連同檢驗單送至檢驗室。許多消化道潰瘍或
腸道癌症,可以在病患未有明顯症狀時,就由糞便潛血檢查先偵測出來,所以常
用來作為篩檢之用。
糞便潛血檢查的原理因方法而有不同。較為常用的是用化學法測試原理,因
不受血紅素抗原性被細菌破壞的影響,適合檢測上消化道出血;但此方法會受動
物血液及飲食或藥物的干擾,因此檢驗前應禁食上述物品。
Chapter 1|收集檢體的注意事項 15
糞便潛血免疫法因不會受到食物中的過氧化酶、含動物血之食品及維生素 C
之影響,專一性高,此法也有較高的敏感度,因此適合糞便中低濃度的潛血檢
測,採集檢體的容器(圖 1-11B)中,通常含有檢體保存液,保存糞便中的紅血
球以避免遭受細菌破壞而產生偽陰性,若無法立即送檢,需保存在 4°C 冰箱中;
因為此法之原理為抗原抗體反應,所以也必須注意勿採集過多之糞便檢體量(導
致紅血球量過多),反而造成高濃度之勾狀效應(hook effect)而產生偽陰性。
圖 1-11 糞便檢體採集盒: (A)一般糞便檢體採集盒(潛血化學法); (B)糞便潛血檢體採集盒
(免疫法)。
二、腸內寄生蟲及寄生蟲卵檢查
肉眼可以看到的寄生蟲有蛔蟲(Ascaris lumbricoides)、絛蟲(tapeworm)及薑片
蟲 (Fasciolopsis buski)等。檢查寄生於人體中的寄生蟲,可以從糞便檢體中檢查
出的有原蟲(protozoa)及蠕蟲(helminths)。
腸道原蟲對人體有致病性者,包括痢疾阿米巴(Entamoeba histolytica)、梨形
鞭毛蟲 (Giardia lamblia)、貝氏球蟲 (Isospora belli)、隱孢子蟲 (Cryptosporidium
species)及大腸纖毛蟲(balantidium)等,感染阿米巴寄生蟲的病人,可以在糞便中
見到 Charcot-Leyden 結晶,外觀呈菱形狀,為嗜酸性球(eosinophils)分解後之產
物。藉由成形糞便 (formed stool)或軟便 (semiformed)或液態之糞便中,可以看到
原蟲的囊體或滋養體,檢驗人員可以依據囊體的形狀及大小或滋養體的核仁大
小、位置及形狀等來加以鑑定。
16
腸道蠕蟲對人體均有致病性,包括線蟲 (nematodes)、吸蟲 (trematodes)及絛
蟲 (tapeworm)等三大類,最常見的線蟲有蟯蟲 (Enterobius vermicularis)、蛔蟲
(Ascaris lumbricoides)、鞭蟲(Trichuris trichiura)、鉤蟲(hookworm)、糞小桿線蟲
(Strongyloides stercoralis)及菲律賓毛線蟲 (Capillaria philippinesis)等。蠕蟲感染
可以藉由糞便或肛門周圍檢體中的蟲卵、幼蟲或成蟲來加以鑑定。蟯蟲通常於晚
間從肛門爬出,在肛門周圍產卵,故須以透明膠紙(Scotch tape 或 collophane)
於清晨起床時黏拭肛門口來採集檢體;絛蟲更可以藉由糞便中的體節或蟲卵來加
以鑑定。
糞 便 寄 生蟲 檢 查 有直 接 塗 抹法
(direct smear) 及 糞 便 濃 縮 法
(concentration methed)。使用糞便濃縮法
可以提高檢出率。糞便濃縮法之採便容
器,通常使用張氏糞便濃縮集卵瓶(圖
1-12),採便量約小指大小。一般實驗室
的濃縮法是採用硫汞—碘—甲醛(merthiolate iodine formaldehyde, MIF)沉澱染色
法。染色試劑中硫汞 (merthiolate)為一種芳香殺菌劑,可殺死糞便內雜菌;碘
(iodine)則利用阿米巴細胞核嗜碘性原理,可將阿米巴細胞核染色,使細胞核特
別明顯、易於鑑別;甲醛(formalin)則為固定檢體蟲卵之用。由於使用 MIF 染色
時,在紅色背景下能襯托出蟲卵,使蟲卵更容易被發現及辨識,因此在蠕蟲與原
蟲執行檢驗時,以 MIF 為最常用且效果最好之方法。採集後須盡快將檢體送到
檢驗室,以提升檢出率。
痰液檢體的採集 (Collection of Sputum Specimen)
痰液主要是由氣管與支氣管分泌物及黏膜微血管滲出的血漿滲出液 (plasma
transudate)所組成。氣管與支氣管分泌物主要由表面上皮分泌細胞及黏膜下腺體
分泌;在正常情況下,血漿由黏膜微血管滲出(血漿滲出液)的量很少。氣管與
支氣管分泌物具黏滯性,而唾液酸(sialic acid)為造成痰液黏滯性的最重要成分。
在嚴重發炎時,氣管內液體可能幾乎全為血漿滲出液,白血球、巨噬細胞
(macrophages)及支氣管上皮細胞也會增加。
圖 1-12 寄生蟲檢查糞便濃縮法通常使用
張氏糞便濃縮集卵瓶。
Chapter 1|收集檢體的注意事項 17
想要取得適當的痰液,需要病人的瞭
解與配合。早晨第一口痰,因為其累積整
夜呼吸道的分泌液,是為最佳之檢體。在
咳痰前要先用清水漱口(不能用市售潄口
水或是用牙膏刷牙),再咳出深部的痰液
送檢。若病患無法自行咳出時,則須使用
氣管分泌物抽取裝置(圖 1-13)來抽取痰
液,並盡快送檢。
精液檢體的採集 (Collection of Semen Specimen)
精液分析主要評估男性之不孕症(infertility)或是否適合做人工受孕等。精液
分析包括精蟲計數(sperm count)、精子形態檢查(sperm morphology)及精子活動力
檢查 (sperm motility)等。一般採集精液檢體前,需要禁慾 3 天,但不能超過 5
天,禁慾太久會造成精液體積過多而精子之活動力降低。以手淫方式將精液採集
在乾淨廣口容器內(見圖 1-9),不可使用潤滑劑或是保險套,須記錄採集時
間,並於 1 小時之內送至檢驗室,運送檢體過程中避免極端低溫或高溫。
腦脊髓液檢體的採集
腦脊髓液(cerebrospinal fluid, CSF)的檢查分析可以提供臨床某些疾病重要的
診斷訊息,如細菌性、病毒性、結核性、黴菌性及阿米巴性腦膜炎 (meningitis)
等,以及出血性疾病如蜘蛛網膜下出血 (subarachnoid hemorrhage)、腦內出血
(intercerebral hemorrhage)及腦梗塞(cerebral infarct)等。鑑定感染性腦膜炎,特別
是細菌性腦膜炎,為腦脊髓液分析最重要的目的。
一般採集腦脊髓液(CSF)檢體須由醫師
執行,以腰椎穿刺(lumbar puncture)採集,
通常至少需採集 3 支檢體(每支 3~5
mL),以無菌試管(圖 1-14)收集。試管
上須以標籤標示出送檢項目,如微生物、
細胞計數及生化檢查等;或是臨床需要更
圖 1-13 氣管分泌物抽取裝置。
圖 1-14 無菌試管。
18
多項目檢查,如細胞學檢查,則另外增加採集試管。採集後應盡快送檢,細胞計
數及生化項目如葡萄糖之測定,易受延遲檢查之影響,因為細胞在檢體採檢後 1
小時會開始溶解,葡萄糖也很快會開始產生醣解作用(glycolysis),若未能及時送
檢,會影響檢驗報告之結果。此外,標示微生物之 CSF 檢體試管,應保存在室
溫(約 25°C)中,因為微生物生長受溫度之影響甚鉅,其餘試管則需冷藏
(2~8°C)。
其他體液的採集
其他體液檢查包含有滑膜液、胸膜液及腹膜液、心包液等。
1. 滑膜液 (synovial fluid):又稱關節液 (joint fluid),分析主要目的為診斷感染
性關節炎及關節液結晶。感染性關節炎可以白血球計數、革蘭氏染色(Gram’s
stain)或是細菌培養之報告提供臨床醫師做診斷;關節液結晶的鑑定則須以偏
光顯微鏡 (polarizing microscope)觀察,以區分尿酸鈉結晶 (monosodium urate
crystals, MSU)或是雙水焦磷酸鈣結晶(calcium pyrophosphate dihydrate crystals,
CPPD),以提供臨床醫師診斷尿酸性痛風或是假性痛風。
2. 胸膜液(pleural fluid)及腹膜液(peritoneal fluid):人體中漿液的蓄積稱為積
水(effusions),是一種病理狀況。積水採集出來通常需要區分出是屬於濾出液
(transudate)或是滲出液(exudate),可以提供臨床醫師重要的診斷依據。濾出液
主要是由全身性疾病造成壁膜微血管液體靜脈壓增加,或血漿膠體滲透壓減
少而形成,這些屬於非發炎性,且經常與充血性心臟衰竭、肝硬化及低蛋白
血症(腎病症候群)有關。積水一旦被鑑定為濾出液時,通常不需要進一步
做檢驗。滲出液是由發炎造成壁膜微血管內皮通透性增加,或淋巴管吸收減
少而形成,許多疾病如感染、腫瘤、全身性疾病、創傷或發炎等狀況,都會
形成滲出液。
3. 心包液(pericardial fluid):目前尚未建立檢驗值,但大部分狀況而言,心包
積水由壁膜的病理變化(如感染及受損)造成微血管通透性增加而形成,因
此大部分心包積水可被視為滲出液。
體液之檢體採集通常由醫師執行,係在無菌狀態下以針頭插入體腔中抽取。
在採集體液檢體時須以肝素抗凝劑分別分裝於無菌試管(見圖 1-14),視臨床檢
查項目需求,增加分裝無菌試管之數目。但不可以草酸鹽 (oxalate)、粉末狀
Chapter 1|收集檢體的注意事項 19
EDTA 及肝素鋰為抗凝劑,尤其是滑膜液(關節液),因檢體可能會形成草酸鈣
或其他結晶,而干擾檢驗報告之結果造成誤判。
細菌培養檢體的採檢
檢體經由微生物之分離與鑑定之後,可以做為臨床醫師診斷疾病之重要依
據。檢體種類的採集,由不同專業人員負責,如腦脊髓液、胸腔液、腹膜液、深
部傷口檢體及手術檢體等,由醫師負責採集;而尿液、糞便及痰液等,由護理人
員負責採集。想要成功的分離出病原菌,除了醫檢人員的微生物專業知識之外,
醫師及護理人員檢體採集之技術與檢體之運送過程等,也都是極重要的關鍵。
做細菌培養時,應避免污染,採集檢體應執行無菌操作技術,採檢最適當之
時間以早晨起床後第一次的檢體最好,例如尿液培養及痰液培養,特別是痰液之
培養以早晨第一口痰最好,且須特別注意應在開始使用藥物之前採集檢體,才不
會影響檢驗結果。
所有檢體均須收集於適當的無菌容器內,若容器已被污染或有破損,則不可
再使用。若容器內含培養液者,不可外溢。一般體液、膿汁、或由身體深部採集
的檢體,可做厭氧培養;但糞便、尿液、喉頭拭子做厭氧菌培養則無意義。眼、
耳或各種器官等取出之檢體,須註明採取部位,並盡快送檢,且註明疾病之診斷
讓實驗室工作人員能特別注意,可以增加病原菌之分離率,以利病患之治療。
一、血液培養檢體的採集
血液培養 (blood culture)採集時間須視病人情況而定。除非急性菌血症,其
他情況均不需於半小時內抽兩次血。若懷疑為心內膜炎,則於 24 小時內抽 3 次
血液,每次間隔 1 小時為原則,其中應有 2 次在正要開始發熱時抽血,此種血液
培養頻率,已足夠診斷是否為菌血症 (bacteremia)。抽取之血量,一次抽 10 mL
血液,分別加入厭氧及嗜氧兩支血液培養瓶中(厭氧瓶先)(見圖 1-3A),每瓶
加入 5 mL 血量。若是小孩或嬰兒不容易抽出多量血者,則使用小兒專用血液培
養瓶(見圖 1-3B),每瓶 1~2 mL。
亞急性心內膜炎、傷寒熱、布氏桿菌病及其他無法控制的感染症,則採取血
液檢體的時間非常重要。急性發燒期,左右手分別靜脈抽血各 10 mL;需先抽完
血再對病患投以藥物治療。若 24 小時內再有突然高燒現象,則需再抽一次血液
20
培養,可增加病原菌培養陽性率。疑為菌血症而已做治療之病人,若無法停止治
療,應在 48 小時內送檢 3~5 次。
血液培養檢體的採集步驟:
1. 抽血前,將穿刺靜脈上的皮膚及血液培養瓶橡皮塞,依序以酒精、碘酒、酒
精,分別以三道手續加以消毒,等酒精自然風乾後,再執行培養檢體之採
集。
2. 繫上止血帶,抽取 6~10 mL 血液,將血液平分到厭氧及嗜氧血液培養瓶中;
若為疑似黴菌感染患者,則抽取 5 mL 打入黴菌專用培養瓶中;嬰兒或小孩則
抽取 1~3 mL,打入小兒專用血液培養瓶中。
3. 盡速送檢。如檢體無法立刻送檢,應置於室溫保存,不可冷藏。
二、尿液培養檢體的採檢
一般尿液檢體可依採集方式之不同,分成中段尿 (clean-catched midstream
urine)、單次導尿液(catheterized specimen)、留置導尿管(foley indwelling urine)或
膀胱穿刺尿(bladder aspirated urine)等方式採集檢體,檢驗單上應註明清楚採檢方
式。尿液培養(urine culture)一般採檢,大都是採取中段尿液。
尿液採集前應指導病人先以消毒水或中性肥皂清洗尿道口及其附近,女性以
沾有消毒水之棉棒,由前往後,輕擦會陰部做消毒,每支棉棒清潔一次即丟,連
續 3~4 次後,以乾淨之棉棒拭去消毒水,先排棄前段尿液再收集檢體。男性以乾
淨之棉棒輕擦尿道口,先排棄前段尿液,以無菌廣口容器(見圖 1-9)收集中段
尿液(約 5 mL),蓋緊蓋子盡快送檢。容器在未使用前須避免打開封蓋或接觸
容器內部。
若病人無法自己解出尿液,如神經性膀胱或尿道阻塞的病患,則使用導尿管
或膀胱穿刺來取得尿液檢體,除非必要之情況再採取導尿方式送檢(女性患者導
尿易造成尿道感染),若懷疑厭氧菌感染,必須用膀胱穿刺方式送檢。採檢方式
應在檢驗單上註明清楚,以利結果之判讀。若為幼兒,可以使用集尿袋,但以收
集一次尿液為限,不可以用儲尿。如尿液檢體無法立刻送檢,應置於 4~8°C 保
存,但以不超過 4小時為限。