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Functional Food-Safty Assessment 1

健康食品安全性評估

謝淑玲

高雄海洋科技大學


衛生署初審文件審查

文件初審

健康食品審議委員會

複審安全評估功效評估審查

衛生署評估及審核結果

（包括送驗確認-由本署藥物食品檢驗局執行）

◎文件資料之齊全性 ◎產品包裝標籤及說明書之內容◎申請廠商資料 ◎產品原料成分之一般食用安全性

未合格

申請文件

一、申請書表八、良好作業規範之證明資料。二、產品原料成分規格含量表九、產品衛生檢驗規格及其檢驗報告三、產品之安全評估報告十、一般營養成分分析報告四、產品之保健功效評估報告十一、相關研究報告文獻資料五、保健功效成分鑑定報告及其檢驗方法十二、產品包裝標籤及說明書六、保健功效安定性試驗報告十三、申請者營利事業登記證影本七、產品製程概要十四、完整樣品及審查費（25,000）

申請商

第一類傳統食用且為　通常加工食品形式

完整安全性文獻資料

免進行毒性測試提文獻資料證明

第二類非通常加工食品形式　２８日連續口服餵食試驗基因毒性試驗

第三類非傳統食用　９０日餵食試驗基因毒性試驗　致畸試驗

第四類含致癌類似物

９０日餵食試驗基因毒性試驗　致畸試驗致癌性試驗繁殖試驗

安全性評估分類：

◎免疫調節作用◎調節血脂作用◎改善骨質疏鬆

◎調整腸胃功能◎牙齒保健◎調節血糖◎護肝

◎抗疲勞功能◎延緩衰老功能

◎其他

保健功效項目：

通知未核准原因或補件

核發許可證

承辦時間：共180天，但不包括業者之補件時間。

備註：

為一般流程為補件流程

健康食品申請許可作業流程圖


目前衛生署公告的「健康食品」之保健功效的項目有13種：改善骨質疏鬆功能、

調節血脂功能、

調節腸胃功能、

牙齒保健、

調節血糖功能、

免疫調節功能、

護肝功能、

抗疲勞功能、

延緩衰老功能、

促進鐵吸收功能、

調節血壓功能、

輔助調整過敏體質、不易形成體脂肪。


安全性分類及保健功效

健康食品之安全性評估分為四個類別，主要係針對以往

長期食用之安全性作考量，考慮因素包括：

1. 食用目的 2. 食用方式

3. 製造加工方法 4. 流程

5. 最終產品形式 6. 攝食量

7. 其他足以影響長期食用安全性之因素



第一類：屬下列二種情形之一者，得免再進行毒性測試。

（一）產品之原料為傳統食用且以通常加工食品形式供食者。

（二）產品具有完整之毒理學安全性學術文獻報告及曾供食用

之紀錄，且其原料、組成成分及製造過程與所提具之學術

文獻報告完全相符者。


第二類：產品之原料為傳統食用而非以通常加工食品形式

供食者，應檢具下列項目之毒性測試資料。

（一）基因毒性試驗

（二）28天餵食毒性試驗


第三類：產品之原料非屬傳統食用者，應檢具下列項目

之毒性測試資料。



（三）致畸試驗


第四類：產品之原料非屬傳統食用且含有致癌物之類似物

者，應檢具下列項目之毒性測試資料。


（二）90天餵食毒性試驗（必須先進行28天毒性試驗）

（三）致畸試驗

（四）致癌性試驗

（五）繁殖試驗


申請健康食品常見之安全性評估分類

微生物類植物類動物類特定成分

靈芝產品 1, 2 人參 1, 2 魚油 1, 2, 3

維他命 1

冬蟲夏草 1, 2 花粉 1 雞精 1 膳食纖維 1, 2

酵母菌 1, 2 草藥茶 1, 2, 3

動物臟器 1, 2 卵磷脂 1, 2

乳酸菌 1, 2 麥草製品 1, 2 蜂王漿 1 寡醣類 1, 2

雙岐桿菌 1, 2 苜蓿製品 1, 2 蜂膠 2, 3 幾丁質 1, 2

綠藻 1 大蒜製品 1, 2 鯊魚軟骨 1, 2

螺旋藻 1 刺五加 1, 2 魚蛋白 1, 2

紅麴製品 1, 2 月見草油 2 免疫奶粉 2

香菇產品 1, 2 酪梨油 1, 2


毒性試驗之方法包括下列六項：（一）基因毒性試驗（二）28天餵食毒性試驗（三）90天餵食毒性試驗（四）致畸試驗（五）致癌性試驗（六）繁殖試驗

健康食品安全性試驗


Basic experimental modelIn vitro: 是拉丁語中「在玻璃裡」的意思，意指進行或發生於試管內的實驗與實驗技術。更廣義的意思，則指活生物體之外的環境中的操作。常見的例子是人工受精。在細胞生物學等領域中，由於此類實驗的環境與生物體內可能有所不同，因此可能與實際發生於生物體內的結果也不同。

In vivo: 為拉丁文「在活體內」之意，也就是「此乃進行於活體內」的意思。在科學領域裡，in vivo常指進行於完整且存活的個體內的組織的實驗，而不是一部分組織，或死亡的個體。例如臨床試驗或動物試驗。

Ex-vivo: 意指在「生物體之外」。常用來指一類利用生物組織，並進行於活體之外的科學實驗。例如取下生物體的一部分組織，將其培養於人工環境，並以這些培養出來的組織進行實驗。


Experimental model

• Cell model• Animal model• Clinical Trial: 是一種利用安慰劑等方式，對藥物或其他醫學治療進行比較測試的過程。在臨床試驗中，研究者要先決定所要測試的裝置或藥物，再決定使用何者與其進行比較，以及須以何種病患來作測試對象。


Negative control group

Positive control group

Experimental group

Basic experimental Design

0

250

500

750

1000

contr

ol2.5

µM A

FB1

0.5 m

M D

AS+2

.5 µM

AFB

1

0.5 m

M D

ADS+

2.5 µM

AFB

1

0.025

mM

DAT

S+2.5

µM A

FB1

0.5 ug

/ml G

O+2.5

µM A

FB1

GST

act

ivity

, U a

b

aab a

a


基因毒性試驗說明：

1.基因毒性試驗可分為體內(in vivo)與體外(invitro)測試，其目的為偵測試驗物質直接或間接引發的基因傷害及程度。

2.一般基因毒性試驗有助於預測試驗物質的致癌性，且有助於致癌性試驗的結果分析。



3.試驗物質須進行三種以上的基因毒性測試，包括：

(1)微生物基因突變分析

(2)體外哺乳類細胞基因毒性分析

(3)動物體內基因毒性分析。



１、微生物基因突變分析

一般使用細菌基因突變測試法 (gene mutation in bacteria)(1) 菌株需使用下列5種菌株：1. S. typhimurium TA98 2. S. typhimurium TA100 3. S. typhimurium TA1535 4. S. typhimurium TA1537、TA97、或TA97a 5. S. typhimurium TA102、E. coli WP2 uvr A、或E. coli WP2 uvr A

(pKM101) 註：4 與 5 所列之三種菌株，分別擇一使用。


(2) 劑量範圍

1. 進行五個以上劑量組，最高劑量須足以產生明顯的毒性。

2. 毒性之產生可由初步試驗中逆突變的菌落 (revertants)數量的

減少測得。

3. 若試驗物質為高溶解度低毒性物質，最高劑量為5 mg/plate，

4. 若試驗物質具有明顯的抗菌活性，則以產生抗菌活性的劑量

作為最高劑量。

5. 若試驗物質為低溶解度物質，則以產生最少沈澱物的濃度作

為測試的最高濃度，但不超過5 mg/plate。


(3)對照組

對照組包含陰性對照組及陽性對照組(說明2)。

(4)代謝活化 (Metabolic activation)

進行含有及不含有S9混合物的測試(說明3)。

(5)測試方法

1.前置培養法 (Preincubation method)，或

2.平板混合試驗法 (Plate incorporation method)

(6)試驗結果

每盤培養皿中突變菌落的數量，須以各測試點之平均值，再以

表格方式詳細記錄。


Ames test• 艾姆斯博士（Dr. Bruce N. Ames, 1928−）發明的「艾姆斯氏偵測法」（Ames test）聞名於世。

• 利用鼠傷寒沙門氏桿菌突變株• 快速而簡易地鑑定一個化學物質是否會致癌或造成基因突變，對預防癌症及飲食安全提供了保障。


艾姆斯氏偵測法：（左）不含致突變劑的反應，逆突變生長的菌落很少。（右）含有致突變劑的反應，浸泡過化學藥劑的紙環四周長

出許多細菌菌落。


２、體外哺乳類細胞基因毒性分析

一般使用體外哺乳類細胞的染色體異常分析法 (In vitro Chromosomal aberration test with mammalian cells in culture) 或體外鼷鼠淋巴瘤tk分析法 (In vitro mouse lymphoma tk assay)。

（1）體外哺乳類細胞的染色體異常分析法 (Chromosomalaberration test with mammalian cells in culture)細胞使用哺乳類細胞株或初代哺乳類細胞。

（２）體外鼷鼠淋巴瘤tk分析法細胞使用L5178Y TK+/- 鼷鼠淋巴瘤細胞株。


（1）體外哺乳類細胞的染色體異常分析法 (Chromosomal

aberration test with mammalian cells in culture)


一般的生物細胞在進行分裂之前一定要經過一段生長的過程，先讓細胞長到足夠的大小才能夠進行分裂，也就是所謂體積管控(size control)的觀念，這個階段通常發生在細胞分裂的第一個間期(G1)，這段時間細胞一方面生長，一方面也同時接受各種生長環境的刺激，諸如生長激素或生長抑制劑的調節作用，決定細胞是否要進行分裂；一旦決定了，細胞接著進入染色體複製期(S phase)，即將所有的遺傳物質複製一份；之後，會有另外一個間期(G2)出現，作為細胞進入有絲分裂的準備期；最後細胞進行有絲分裂(M phase)產生兩個細胞，各獲得一份完整的染色體。


（2）體外鼷鼠淋巴瘤tk分析法細胞使用L5178Y TK+/- 鼷鼠淋巴瘤細胞株。

此法係利用L5178Y (tk+/-)控制其thymidine kinase的基因，經過致突變劑的處理後，容易突變為tk-/-的細胞，而tk-/-的細胞株缺乏thymidine kinase活性，無法進行salvage pathway；而可在含有嘧啶類似物的培養基中存活。

將L5178Y TK+/- 鼷鼠淋巴瘤細胞株培養於含有嘧啶類似物的培養基中，嘧啶類似物會經由salvage pathway進入DNA， thymidine kinase具有活性，而使得未突變的細胞死亡。


３、動物活體基因毒性分析

一般使用囓齒類動物造血細胞的染色體傷害分析法 (In vivo test for chromosomal damage using rodent hematopoietic cells)。(1)動物一般使用雄性鼷鼠。若雄性與雌性動物在代謝或毒性上有明顯的差異時，則須同時使用雄、雌動物進行試驗。若試驗物質為特別針對某種性別時，則應使用該性別動物進行試驗。(2)動物數量每組至少五隻動物。(3)試驗物質給予途徑以腹腔注射或強迫餵食給予。



囓齒類-鼠（雄、雌，5-6週齡），每組至少10隻

經口餵食（gavage）、飲水或食物，連續28天 for dose, toxic and NOAELControl groupHigh dose, toxic group, but not dieMiddle dose, low toxic group, biomarker change, BW gain slowLow dose group, no toxic effect

Clinic view: twice/day, clinic sign

BW, feed consume record

動物犧牲收集下列樣品血液：Hct, Hg, RBC, WBC, clotting time, prothrombin time…血清：AP, AST, ALT, γ-GT, albumin, bilirubin, creatinine, urea nitrogen, glucose…尿液：尿沈渣, 尿量, pH值, 比重, protein, glucose, ketone, bilirubin…Organ weight：liver, adrenals, kidney, gonad…Organ pathology examination：adrenals, heart, kidney, liver, spleen…

1. maxmum10ml/kg BW,


（三）90天餵食毒性試驗（需先進行28天餵食毒性試驗）

囓齒類-鼠（雄、雌，5-6週齡），每組至少10隻

經口餵食（gavage）、飲水或食物，連續90天 for dose, toxic and NOAELControl groupHigh dose, toxic group, but not dieMiddle dose, low toxic group, biomarker change, BW gain slowLow dose group, no toxic effect

1. maxmum10ml/kg BW,


（四）致畸胎試驗

實驗動物-鼠、奚鼠、兔子（雌），每組至少20隻(兔子12隻)

經口餵食（gavage）、飲水或食物，鼠、奚鼠懷孕第6-15天，兔子懷孕6-15天Control groupHigh dose, toxic group, but not dieMiddle dose, low toxic group, biomarker change, BW gain slowLow dose group, no toxic effect

Clinic view: over once/day, death ratio and clinic sign

BW (twice/wk), feed consume record

動物犧牲於分娩前一天(鼠AP第20天，兔子AP第29天)a. 懷孕成功率、胎兒死亡率、黃體數目b. 存活胎兒：BW, over viewc. 鼠或奚鼠：每一胎1/2 for 骨骼，1/2 for 內臟，All for skeleton and organ

study, if high dose group are abnormal sign.兔子：全部進行骨骼與內臟檢查

1. maxmum10 ml/kg BW,


（五）致癌性試驗

1. 初步致癌性試驗

（一）單一劑量毒性試驗

口服急性毒性試驗（單一劑量24小時內多次餵食）

囓齒類-鼠、奚鼠（雄、雌，5-6週齡），每組至少10隻（5雄性，5雌性）

經口餵食（gavage）一次（劑量大者可24 hr內多次）；觀察14天Control groupHigh dose, toxic group 1. maxmum5g/kg BW,


致癌性試驗

1. 初步致癌性試驗

（二）重複劑量毒性試驗

囓齒類二種以上-鼠、奚鼠（雄、雌，5-6週齡），每組至少10隻

經口餵食（gavage）, once/day for 3 mo., Control groupHigh dose, toxic group

Clinic view: twice/day, death ratio, toxic effect, toxic or death time, clinic sign

For MTD (maximum Tolerated dose)


致癌性試驗

2. 長期致癌性試驗

二種以上囓齒類-鼠、奚鼠（雄、雌），每組至少50隻

經口餵食（gavage），7次/wk，餵食時間：鼠24個月，奚鼠18個月，餵食結束續觀察1-3個月，實驗期間鼠最多30個月，奚鼠或倉鼠24個月。

Clinic view: twice/day, death ratio, tumor size…Food consume, weight gain

Control groupHigh dose, toxic group, but not dieMiddle dose, low toxic group, biomarker change, BW gain slowLow dose group, no toxic effect


（六）繁殖試驗

囓齒類-鼠、奚鼠（雄、雌），每組40隻（20雄性，20雌性），5-6週齡

經口餵食（gavage）。雄性：每天給予，餵食時間：60天，進行交配。雌性：交配前2週，至胎兒正常發展（懷孕第0-6天），每天給予

Clinic view: twice/day, Food consume, weight gain

Control groupHigh dose, toxic group, but not dieMiddle dose, low toxic group, biomarker change, BW gain slowLow dose group, no toxic effect

懷孕結束（懷孕第20天）：黃體數目、胚胎著床數、胚胎死亡率….

交配指數：（交配成功動物數 x 動物同居數） x 100生育力指數：（雌性動物懷孕數目 x 交配成功之雌性動物數） x 100

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