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139.614.512:612.017

「ヂ フ テ リ ー 毒 素 」 ノ 透 析 ニ 就 テ

(第1編)

「ヂ フ テ リー 毒 素」ノ透 析 竝 ニ是 レガ

「フオ ル モール トキ ソ イ ド轉 化」ニ就 テ

目黒研究所(所 長目黒庸三郎博士)

饗 場 美 誠

[昭 和15年2月15日 受 稿]

第1章 緒 論

「ヂ フテ リー毒 素」ハ其 ノ毒 性極 メテ不 安定 ノモ

ノニ シテ,外 界 ノ種 々ナル要 約,例 之理 學的竝 ニ

化 學 的作 用ノ影響 ヲ被 ル コ ト甚大 ナ リ.Raux et

Yersin1) (1889)ハ 初 メ テ 「ヂ フ テ リー毒 素 」 ノ存

在 ヲ明 カニシ,且 之 ヲ分離 スル コ トニ成功 セ リ.

而 シテ當時 既 ニ熱,光,酸 及 ビ沃度 ノ作用 ニ依 リ

テ該毒 性 ハ減弱 ス レ共抗 原性 ハ,久 シク之 ヲ保 有

ス ト謂 ヘ リ.1890年Behring2)ハ 「ヂ フテ リー

毒素」 ノ毒 性 ヲ減 弱 セ シムルノ 目的 ヲ以 テ 「トリ

クロ ール ヨー ド」 及 ビ金 ノ鹽 類 ヲ使 用 セ リ.次 デ

Gamaleia3) (1892)ハ 「ヂ ア スターゼ」,「ベブ シン」

及 ビ「トリブ シン」等 ノ「ヂ フテ リー毒 素」ニ及 ボス

影響 ヲ研 究セ リ.Doerr4) (1908)ハ 酸 ノ「ヂ フテ リ

ー毒 素」ニ對 スル作 用 ヲRuss及 ビRaubischeck5)

ハ 石 鹸 ニ就 テ 又Calcaterra6) (1910), Filia7)

(1911―1912)ハ 「レチチ ン」及 ビ「ヒヨ レステ リン」

ノ該 毒素 ニ及 ボ ス作 用 ニ關 シテ發 表 セ リ.1913年

ニMarie8)ハ 「ア ドレナ リン」竝 ニ 「ヒニン鹽類 」

ノ 「ヂ フテ リー毒 素」ニ對 スル影 饗 ヲ檢討 シ,Le

Fevre de Arric9) (1919)ハ 「金 屬 コロ イ ド」殊 ニ

鐵 及 ビ 「マ ンガ ン」 ハ「コロイ ド」ガ試 驗管 内 ニ於

テ「ヂ フテ リー毒 素」ヲ破壞 ズル コ トヲ報告 セ リ.

G. Ramon10) (1923)ハ 強 力 ナル 「ヂ フテ リー毒

素」 ニ一定量 ノ「フオル マ リン」ト熱 トノ共 同作用

ヲ與 フル時 ハ毒 性 ヲ完 全 ニ無毒 ノ状態 ト爲 シ,加

之 モ免 疫元 性能 力 ヲ保 有 セル ノ事 實 ヲ動物實 驗 ニ

因 リテ證 明 シタ リ(Anatoxin).且 「ヂ フテ リー毒

素」 竝 ニ之 ヨリ誘導 セ ラ レタル「ア ナ トキ シ ン」ノ

全 免疫能 力ハ絮 状反 應(La floculation d'apres

Ramon)ニ ヨリテノ ミ測 定 シ得 ル コ トヲ主 張 セ リ

1926年P. Nelis11)ハ 「ヂ フテ リー 毒素」ヲMalli-

tanoノ 推 奬 セルCollodionmembranヨ リナル

嚢 中 ニ封納 シテ,流 水 中 ニ透析 シタル ニ,毒 素 ハ

該膜 ヲ通過 シ テ徐 々 ニ透 析 セ ラ レ,其 ノ毒性 ノ大

部分 ヲ喪失 スル モ,尚 ホ之 ヲ完 全 ニ無毒 化 セシ ム

ル ニ ハ孵卵器 内 ニ靜 置 スル ヲ要 ス ト云 フ.又 氏ハ

「ヂ フテ リー毒 素」ニ「フオル モ ール 」ヲ作 用 セ シメ

テ檢 スル ニ,0.35%ノ 「フオルモ ール」ヲ加 フル時

ハ9日 後 ニ於 テ,0.25%「 フオル モール」添 加 ニ依

ツテハ12日 後 ニ,0.1%ニ テハ1箇 月後 ニ其 ノ毒

性 全 ク消失 シ去 ル ト述 ベタ リ.Graham12) (1861)

ハ 夙 ニ「コロ イ ド系」ト「ク リスタロ イ ド系」トノ間

ニハ,擴 散率 ニ於 テ著 シキ相異 アル 事 ヲ主 張 セ リ.

即 チ 羊 皮紙 又 ハ 乾燥 セル膀 胱或ハGoldbieter's

Skinノ 如 キ動物膜 内 ニ種 々 ナル 物 質 ヲ封 納 シテ

透析 試驗 ヲ行 フテ,之 ヲ2大 別 シタ リ.即 チ1ハ

羊 皮紙 又ハ動 物膜 ヲ容易 ニ通過 スルモ ノア リ,他

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「ヂ フテ リー毒 素」ノ透析 ニ就 テ(第1編) 2435

ハ カカル膜 ヲ通 過セ ザル モ ノア リ,前 者 ニ屬 スル

モ ノハ 「コ ロイ ド系」ニ シテ後 者 ハ「ク リスタロイ

ド系」 ト定 メラル.擴 散 ノ機轉 ニ於 テ「コロ イ ド」

ト「ク リスタ ロイ ド」トヲ分離 セ シムル コ トヲ透析

ト云 フ.透 析 ニハ種 々ナル物 質 ガ使用 サル.最 モ

多 ク應用 サ ルルハ羊 皮紙,Goldbieter's Skin及

ビ 「コロヂ ウ ム嚢」 ナ リ.近 時研究 室 ニ於 テ精 製

「セル ローゼ膜」トシ テ「セ ロハ ン紙」ガ寵 用 サ レツ

ツア リト報 ゼ リ.千 谷博 士13)ハ化學 反應 ヲ利 用 ス

ル方 法 ニ依 リテ作 ラ レタル膠 質液 ハ,常 ニ種 々 ナ

ル種類 ノ不純 物 ヲ混 有 セ リ.カ カル不純 物 ヲ除去

スル 目的 ヲ以 テ透析(Dialysis, Dialyse)ナ ル方

法 ヲ用 フ.同 法 ハ膀 胱膜,魚 ノ浮袋(Fishskin)

又ハ 人工 的 ニ作 ラ レタル「コロヂ オ ン膜」等 ノ如 キ

目 ノ細 カキ壁 膜 ガ,分 子 或 ハ「イ オ ン」ハ 自由ニ通

過 セシ ムルモ,膠 質粒 子ハ 通過 セシ メザ リシ ト云

フ半透 壁 的 ノ性 質 ヲ有 スル コ トヲ利 用セル モ ノナ

リ ト稱 ス.然 ル ニ「ヂ フテ リー毒 素」ノ透析 ニ際 シ

各種透 析膜 ヲ使 用 シ,精 細 ナル量 的竝 ニ時 間的 關

係 ヲ攻 究 シ,且 該 透析毒 素 ノ無毒 化過 程及 ビ抗原

能力 ニ關 スル研究 報告 ハ余 寡聞多 ク ノ文獻 ヲ知 ラ

ズ依 テ 目黒博 士指 導 ノ下 ニ同問題 ノ檢 索 ニ從 事 セ

リ.今 茲 ニ其 ノ成 績 ヲ發 表 シテ江 湖 ノ御批 判 ヲ仰

ガ ン トス.

第2章 透 析 時 ニ於 ケ ル 量 的 竝 ニ 時 間 的

關 係 ニ 就 テ

第1節 「マル タ ンブイ ヨン」ノ透析

「ヂ フテ リー毒素」ノ透析 前 後 ニ於 ケル關係 ヲ究

明セ ン ト欲 シ,先 ヅ原基 タル「マル タ ンブイ ヨ ン」

ノ透析 ヲ施行 セ リ.

第1項 實 驗材料

「マ ル タ ン ブイ ヨ ン」性 状

各種 透析 膜 ノ製 法:透 析膜 ハ「コロヂ ウム嚢 」,

獸腸 膜 及 ビ「セ ロハ ン紙」ノ3種 ヲ使用 ス.50cc

入 「コ ロヂ ウ ム嚢 」製 法 ハ200cc入 直 徑5cmノ 大

試 驗 管 ヲ用 ヒ,之 ニ15ccノ 日本 藥 局 方 「コ ロ ヂ

ウ ム 」ヲ注 入 シ,200cc入 「コ ロヂ ウ ム嚢 」ハ300cc

入 「グ ラ ス ビ ー カ ー」 ニ35ccノ 「コ ロ ヂ ウ ム」 ヲ,

500cc入 嚢 ハ600cc入 「グ ラ ス ビ ー カ ー」ニ75cc

ノ「コ ロ ヂ ウ ム」ヲ注 加 シ,靜 カ ニ 廻 轉 シ シ ツ ツ約

5分 間經過 後乾 固 ヲ待 ツテ剥離 シ使 用ニ供 ス.膜

ノ厚 サハ0.0125mm乃 至0.025mmナ リ.獸 腸 膜

ハ牛 ノ小腸 ヲ市販 セ ル モ ノ ニ シ テ消毒 ノ目的 ヲ

以 テ0.5%石 炭酸水 ニ放 置 スル コ ト1時 間,次 デ

5%石 炭酸水 ニテ嚢 内外面 ヲ15分 間 洗滌 シ,再 ビ

0.5%石 炭 酸水 ニ テ清試 シ 「ヂ フテ リー毒素」ノ毒

性 ヲ害 スル濃 厚石炭 酸 ヲ除去 ス.斯 ク シテ無菌 ナ

ル コ トヲ檢 診後使 用 ス.膜 ノ厚 サハ0.035mm乃

至0.05mmナ リ.「 セ ロハ ン紙 」 ハ繼 目及 ピ漏孔

ナキモ ノ ヲ選擇 シ,50cc入 「セ ロハ ン紙 」ハ,直

徑14cmノ 圓形 ニ剪除 シ,200ccハ 直徑20cmニ

500ccハ 直徑30cmト シ,「ア ウ トク ラー ブ」ニ入

レ15封 度 ノ壓 力 ヲ以 テ30分 間消毒 スル時 ハ,膜

本來 ノ性 質 ヲ損 スル コ トナ ク 「滅 菌 セ ロハ ン紙」

透析膜 ヲ得 ベ シ.膜 ノ厚徑 ハ製 造 ノ關係上 各部共

0.025mmナ リ.

第2項 實 驗方法 及 ビ成績

前 記3種 ノ透析 膜 ニ50cc, 200cc及 ビ500cc宛

ノ「マル タ ンブ イヨ ン」ヲ封納緊 縛 シ,各3箇 宛計

27箇 ヲ作製 シ,攝 氏1.3度 ノ流水中 ニ沈 下セ シ ム.

斯 クシ テ1群 ハ7時 間後,他 群ハ12時 間後,最 後

ハ48時 間後 ニ於 テ流水 中 ヨ リ引揚 ゲ,該 性 状 ノ變

化 ヲ檢 スル ニ第1表 ノ如 シ.

65

2436 饗 場 美 誠

第1表 「マル タン ブイ ヨン」透析時 ノ量的 竝 ニ時 間的變 化表

7時 間 透 析

「コ ロ ヂ ウ ム 嚢」透 析

獸 腸 膜 透 析

「セ ロ ハ ン 紙」 透 析

12時 間 透 析

「 コ ロ ヂ ウ ム 嚢」透 析

獸 腸 膜 透 析

「セ ロ ハ ン 紙」 透 析

66

「ヂフテリー毒素」ノ透析ニ就テ(第1編) 2437

48時 間 透 析

「コ ロ ヂ ウ ム 嚢」透 析

獸 腸 膜 透 析

「セ ロ ハ ン 紙 透 析

「透析 マ ル タ ンブ イ ヨン」ノ量 的増加 率 ハ 「コ ロ

ヂ ウム嚢」透析 時最 大 ニシ テ,「 セ ロハ ン紙」透析

時之 ニ次 ギ,最 後 ニ獸腸膜 透析 ノ順次 トナル.然

ル ニ比重,「 水素 イオ ン」濃 度竝 ニビ ウ レツ ト反應

ハ全 ク之 ニ反 ス.遺 残窒素 量 及 ビ蛋 白質量 ハ 「セ

ロハ ン紙」 及 ビ獸腸 膜 ニ於 テ著明 ニ シテ,次 イデ

「コロヂ ウム嚢 透 析 ブ イ ヨン」ノ順次 トナ リ,且 透

析 容量 ノ大 ナルモ ノ程大 ナ リ.時 間 的 ニ觀察 スル

時 ハ,量 的増 加率ハ 時間 ト平行 シ,爾 他諸試 驗 ノ

成績 ハ 時間 ト共 ニ減 少 スルモ ノ ノ如 シ.

第2節 「ヂ フテ リー毒素」ノ透析

「マル タ ンブ イ ヨン」透析 時 ト同樣 ナル方法 ヲ以

テ 「ヂ フテ リー毒 素」No. 1(新 舊混 合毒 素)ノ 透

析 ヲ施行 ス.爾 餘 ハ檢 査法 トシテ絮 状反應 ニ因ル

L.f., K.f.及 ビD.L.M., D.R.M.等 ノ測 定 ヲ行 ヒ

タ リ.其 ノ成績 第2表 ノ如 シ.

第2表 「ヂ フテ リー毒素 」透析後 ノ成績

7時 間 透 析

「コ ロ チ ウ ム 嚢」透 析

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2438 饗 場 美 誠

獸 腸 膜 透 析

「セ ロ ハ ン 紙 」透 析

12時 間 透 析

「コ ロ ヂ ウ ム 嚢」透 析

獸 腸 膜 透 析

「セ ロ ハ ン 紙」透 析

48時 間 透 析

「コ ロ ヂ ウ ム 嚢」透 析

獸 陽 膜 透 析

「セ ロ ハ ン 紙」透 析

68

「ヂフテリー毒素」ノ透析 ニ就 テ(第1編) 2439

以上27種 ハ各透析 毒 素 ニハ0.4%ノ 場 合 ニ 「フ

オル マ リン」(Merck製)ヲ 加入 シテ直後40℃ 孵

竈 内 ニ靜置 シ無毒 化後300g内 外 ノ體 重 ヲ有 スル

健康海 〓 腹壁皮 下 ニ0.5cc, 1.0cc竝 ニ2.0ccト

1週 日ノ間隔 ヲ以 テ注射 シ,最 後 ノ注射後1箇 月

ニシテ採 血 シ,該 血 清 ニ就 テ目黒,末 松,甲 斐 氏 家

兎皮 内法 ヲ用 ヒテ微 量抗毒 素量 測定 ヲ施行 セ リ.

採 血後 日 々海〓 ノ體 重 ヲ秤 量 シ,約1週 日前後 ニ

於 テ體 重 ノ復舊 ヲ待 ツテ毒 素耐過 試驗 ヲ施 ス.使

用標 準毒 素性状 ハ

P.H.=8.2 B.W.=11.9A.E.

B.R.=++ D.L.M.=1/350cc

L.f.=13.49A.E. D.R.M.=1/700.000cc

K.f.=4時10' Lt=0.155cc

總窒 素量=14.225mg (per 100cc)

蛋 白質量=87.640622mg (per 100cc)

小 括

「ヂ フテ リー毒 素」ノ透 析前 後 ニ於 ケル性 状 ノ變

化殊 ニ量,比 重,ビ ウ レツ ト反應竝 ニ蛋 白質量 ノ

移動 ハ,「 マル タ ンブ イヨ ン」ノ透析 時 ニ於 ケル變

化 ト大 同小異 ナ リ.然 レ共,量 的増加 率 ハ稍 々大

ニ シテP.H.ハ 透 析 前 ニ於 テハ毒 素 ノ方 大 ナル ヲ

以 テ各量 及 ビ時間 ヲ通 ジ一律 ニ大 テ リ.L.f.ハ 原

毒素 ニ比 シテ稍 々低 單位 ナ レ共,各 透析毒 素相 互

ニ於 テハ 殆 ド變 化 ナク僅 少 ノ差異 ハ實驗誤 差 ノ範

圍 ヲ出 デズ.然 ル ニK.f.ハ 著 シキ延長 ヲ示 シ,

7時 間透析 ニ於 テハ 原毒素 ニ於 ケルK.f.ノ 約2倍

トナ リ.12時 間透析 ニテハ約3倍 前後,48時 間透

析時 ニテハ約4倍 ニ垂 ン トス.而 シテ 「コ ロヂ ウ

ム嚢 」透析50cc, 200cc及 ビ500cc竝 ニ獸腸 膜,

「セ ロハ ン紙」透 析50ccノ48時 間ハ何 レモL.f.

ヲ證 明 シ得ズ.D.L.M.ノ 移 動 ヲ觀 察 スル ニ,7時

間 透析 ニ於 テハ原毒 素 ノ毒性 ニ比 シ1/2ト ナ リ,

12時 間透 析 ニ於 テハ大約1/3前 後 ニ減弱 シ,48時

間 透析 ニ於 テハ又1/3弱 トナル.家 兎皮 内 法 ヲ用

ヒテD.R.M.ヲ 檢 スル ニ7時 間透析 時 ニ於 テハ約

1/4ノ 毒性 トナ リ.12時 間透 析 ニテハ 原毒 素 ノ

6―1/10ニ 減 ジ,48時 間透 析 ニ依 リテハ9―1/20ニ

減 弱 シクル ヲ認 ム,免 疫 試驗 ノ成績 ヲ檢 スル ニ透

析 時間 ノ延長 ト共 ニ漸次 血 中抗毒 素量ハ低 單位 ニ

傾 キ且毒 素 耐過 力ハ減弱 セル モ透析 容量 トハ 「セ

ロハ ン紙」 使 用 ノ際 逆比 例 ス レ共 他種透析 膜 ノ場

合 ハ之 ニ反 ス.而 シ テ各 透析膜 ヲ比較 セシ ニ 「セ

ロハ ン紙 」透析時 最 モ優 秀 出シテ獸腸膜 及 ビ「コロ

ヂ ウム嚢」 透析 時 ノ成績 ハ略 ボ相 同 ジ.以 上 ノ結

果 ヨ リシ テ「ヂ フテ リー毒 素」ノ透析 ハ,容 量小 ナ

ル毒 素 ヲ「セ ロハ ン紙」ニ封納 シ,7時 間透 析 セル

場 合最適 ト謂 フヲ得 ベ シ.

第3章 「透 析 ヂ フテ リー フオ ル モ ール

トキ シ ン 」ノ無 毒 化 過 程 ニ 就 テ

第1節 各號毒 素 ノ透析

第1項 實 驗材料

第1 毒素:最 モ毒 素産 生力 強大 トサ レタル

「ヂ フテ リー菌 」Park Williams Bacillus No. 8

ヲ「マル タ ンブ イヨ ン」P.H.=7.8ニ 移植 シ,之 ヲ

37℃ ノ孵竈 内 ニ9日 間培 養後 無菌 的 ニ濾 過 シ更

ニ濾液 ヲChamberland濾 過器 ヲ以 テ濾 過 シ テ

得 タル「ブイ ヨ ン濾液」ヲ,諸 種 ノ實 驗材料 トス.

該 新鮮毒 素1000ccニ50ccノ 割 ニ 「トル オ ール」

(Toluol)ヲ 加ヘ,10日 間氷室 ニ貯藏後,要 ニ臨 ミ

濾 過 シテ使 用 ニ供 ス.使 用毒素 ハ1號,2號 及 ビ3

號 毒素 ノ3種 類 ニシ テ各 ノ性状 ハ第3表 ノ如 シ.

第3表 使 用 新 鮮 毒 素 ノ 性 状

69

2440 饗 場 美 誠

第2 透析 膜:透 析膜 ハ既 述第2章 第1節 第

1項 ニ記載 セル モ ノ ト同樣 ナ レ ドモ,實 驗 ノ都 合

上何 レモ200cc入 「コ ロヂ ウム嚢」,獸腸膜 竝 ニ「セ

ロハ ン紙 」フ使 用 セ リ.

第2項 實驗方法

本 編第2章 第1節 第2項 ニ記載 シア ル方 法 ト同

法 ニ依 リ,前 記1號,2號 竝 ニ3號 毒素 ヲ,200cc

宛「コ ロヂ ウム嚢 」,獸 腸 膜 及 ビ「セ ロハ ン紙」ニ 封

納 シ,攝 氏1.3度 ノ流水 中 ニ沈 下 セ シメ,最 適 時

間 即チ7時 間透 析 ヲナス.以 上9種 ノ透析毒 素 ニ

就 テ直 チニ性状 ノ各 部門 ヲ檢 セシ ニ第4表 ノ如 シ.

第3項 實 驗 成績

第4表 各 種 透 析 毒 素 ノ性 状

毒素 ノ色 調ハ原 毒素 ニ於 テハ帶褐 黄色透 明 ナ レ

共,「 コ ロヂ ウ ム」透析毒 素ハ各 號共 殆 ド無 色透 明

トナ リ.「 セ ロハ ン紙 」透析毒 素 ハ何 レモ微 黄色 透

明 ニシ テ,獸 腸膜 透析毒 素ハ最 モ濃 厚 ニシテ帶黄

色透明 ナ リ.P.H., B.R., L.f., K.f., D.L.M.竝

ニD.R.M.ハ 各號共 「コロヂ ウム嚢」透析 毒素 ニ於

テ減少 率最 モ大 ニ シテ,「 セ ロハ ン紙」透析 毒素,

獸腸膜 透析毒 素 ノ順次 トナル.

前述 諸試 驗施行 後 ノ 各種 透析毒 素 ハ 透 析 直後

150cc宛 褐 色瓶 ニ分注 シ0.4% (Bacher, Kraus

und Lowenstein14))ノ 割合 ニMerck製Form-

aldehyd solutum (35Gew.%=38Volum%)ヲ

添加 シ40℃ (Ramon15))ノ 孵 卵器 内 ニ靜置 ス.カ

ク テ追 日該 性状 ノ變化 ヲ追究 ス.今 其 ノ成績 ヲ以

下記述 セ ン トス.

第2節 透析 追 日 ノ變化

第1項 「水素 イオ ン濃度」ノ推移

「水 素 イオ ン濃 度」(P.H.)ガ 「ヂ フテ リー毒 素 」

ノ毒性 ニ影響 アル コトハ業 ニ巳 ニRaux et Yersin

(1889)ニ 依 リ證 明セ ラ レタル處 ナ リ.即 チ酒 石酸,

乳 酸等 ノ酸 ノ作 用ニ依 リテ該毒 性ハ 減弱 セ ラル ル

モ,「 アル カ リ」ニテ之 ヲ中 和 スル時 ハ,再 ビ其 ノ

毒 性 ヲ囘復 ス可 シ ト.尚 ホ 「弱 アル カ リ性 ブ イ ヨ

ン」培 養基 ニ「ヂ フテ リー菌」ヲ培 養 スル時 ハ巳 ニ

初 日ニ於 テ培 養池 ハ酸 性反應 ヲ呈 シ,數 日 ヲ經過

スル トキ再 ビ「ア ル カリ性」ニ復歸 スル ハ周 知 ノ事

實 ナ リ.若 シ培養 液 ガ酸 性 ニ トドマル限 リハ,之

ヨ リ得 タル毒素 ハ毒 力 極 メテ弱 ク,「 アル カ リ性 」

ヲ帶 ビ來 タル トキ初 メテ毒 力 ヲ増 強 ス可 シ ト論述

セ リ.更 ニWalbum16)ハ 毒素 液 ノF.H.ハ 毒 性 ニ

重 大 ノ關係 ア リ.若 シP.H.ガ5.5ヨ リモ低 ク,又

9.3ヨ リ高キ時 ニハ,該 毒 性 ハ完 全 ニ破壞 セ ラルル

モ ノナル ヲ實 證 シ,且P.H.ガ7.2乃 至7.3ノ 間

ニ アル 時 ニ毒 性 ノ減弱最 僅微 ナ リ ト云 ヘ リ.Cl.

Jensen17)ハ 此 關係 ヲ詳細 ニ研 究 シ,縱 令「ヂ フテ

リー毒 素」 ヲ高度 ニ稀 釋 スレ共P.H.=7.4ニ 置 ク

時 ハ其 ノ毒性 ヲ最 モ不變 的 ニ長 期 間保持 シ得 ベシ

ト云 フ.如 斯 「水 素 イ オ ン濃 度 」ハ 「ヂ フテ リー毒

素 」ノ毒 性 ニ影響 スル コ ト甚 ダ大 ナ リ.今 「透析 フ

オル マ リン加 ヂ フテ リー毒 素」ノP.H.ニ 就 テ,追

日ノ推 移 ヲ「グ ラフ」ヲ以 テ示 サ ン.(P.H.測 定 ニハ

Michaelis氏 「水 素 イオ ン濃 度」測 定法 ニ依 レ リ).

70

「ヂフテリー毒素」ノ透析ニ 就テ(第1編) 2441

實驗成績

Graf I. 1號 毒 素

Graf II. 2號 毒 素

71

2442 饗 場美 誠

Graf III 3號 毒 素

透析 第1日ニ 於 ケルP.H.ハ1號 「コ ロヂ ウム

嚢」 透 析毒素=7.7,獸 腸 膜透析 毒素=8.3,「 セ ロ

ハン 紙 」透 析毒 素=8.2ト ナ リ,2號 「コロヂウム

嚢」透析毒 素=7.8,同獸 腸膜 透析 毒素=8.3,同「セ

ロハ ン紙」透析 毒素=8.2ト 減 弱 シ來リ,3號 「コロ

ヂ ウム嚢」透析毒 素=7.7,同獸 腸膜 透析毒 素=8.3

同「セ ロハ ン紙」透 析毒 素=8.0ト,各 號 毒素 共「コ

ロヂ ウム嚢」透 析毒 素ハ急 激ニ 其 ノP.H.ヲ 減弱ス

レ共 他ハ輕 度ニ減 少 ス.透析7時間 後0.4%ノ 割

ニ Merck製 「フオ ルマ リン」ヲ加ヘ,40℃ ノ孵 卵

器 内ニ靜 置 セルニ,各 號 「コロヂ ウム嚢 透析 フオ

ル マ リン加毒 素」ニ 於ナハ輕 度ニ 減 弱 シ,爾 後 追

日大約 同程度 ヲ持續スレ共,第20日 前後 ヨ リ僅 少

ナル上 昇ヲ 來 シ,第34日ニハ7.8上 下ニ 止ル.獸

腸 膜及 ビ「セ ロハ ン紙 透析フ オル マ リン加 毒素」ハ

急 激 ナル減 少 ヲ示 シ,前 者ハ7.7前 後ニ,後 者 ハ

7.5上 下ニ 至 ル.爾 後多 少 ノ昇 降 ハア レドモ大 略 同

程 度 ヲ繼續シ,第20日 頃 ヨ リ輕度 ノ昇騰 ヲ初 メ,

第34日ニ 於 テハ獸 腸 膜透析ニ ヨル1號 毒 素=8.2,

2號 毒 素=8.2, 3號 毒 素=8.1,「 セ ロハン 紙」透析

ニ依ル1號 毒 素=8.2, 2號 毒 素=8.2, 3號 毒 素=

8.0ニ 到達 ス.即 チ各種「透析 ラオル マ リン加 毒素 」

ハ「原 フオル マ リ ン加毒 素」ニ 比 シテ 「水 素 イオ ン

濃 度 」ハ常ニ 遙ニ 低 位ニア リ.

第2項 ビ ウ レツ ト反應 ノ變 化

現 今「ヂ フテ リー菌」ガ蛋 白質又 ハ「ペプ トン」ノ

如キ 高級 ナル蛋 白質分 解産物ヲ 有 スル環 境ニ 於テ

發育 スル際,溶 解 性毒 素 ヲ産 出ス可 シ ト信 ゼ ラル,

此點ニ關 シWalbum18)ハ 精細ニ 之 ヲ報告 セ リ.

又細 谷博士 ハビ ウ レツ ト反應 陰 性 ナル培地ニ 於 テ

モ,相 當 強 力ナル毒素 ヲ産 生 シ タリト 謂 ヘ リ.今

吾 ハ「透 析 フオル モー ル トキシ ン」ノビ ウ レツ ト反

應ヲ檢スルニ當リ,當 初1週 日ハ毎 日,爾 後 ハ毎

3日 目ニ反應檢 査 ヲ施行 セ リ.

實驗方 法:毒 素0.5ccヲ 小試驗 管(直徑1.2cm)

ニ採リ種 々ナル%ノ 硫酸 銅液 及ビ 苛 性加 里液 ヲ數

滴宛 種 々ナル滴數 ノ割合ニ 滴 下 セル數 本 ノ試驗 管

中最 モ紫 藍色 ヲ呈 セル モノヲ以テ反應 ヲ決 定セリ.

72

「ヂフテ リー毒素」ノ透析ニ就テ(第1編) 2443

實驗 成績:原 毒 素 ニ於 テハ1號,2號 及 ビ3

號毒 素共 ニ強 陽性 ナ レ共,透 析7時 間後 ニテハ「コ

ロ ヂ ウム嚢 透析 毒 素」 ノ ミ陽性 トナ リ.獸 腸 膜及

ビ「セ ロハ ン紙透 析」ニ於 テハ各號 共依然 トシ テ強

陽 性ナ リ.0.4%「 フ オル モール」添加 後 ニテハ「コ

ロヂ ウム嚢 透析 毒 素」ハ弱 陽性 トナ リ,「 セ ロハ ン

紙 透析毒 素」 ハ陽 性 ニシ テ,獸 腸 膜透析 毒素 ハ強

陽 性 ナ リ.追 日其 ノ變 化 ヲ追 究 セ シニ,各 號毒 素

共 「コロヂ ウム嚢],「 セ ロハ ン紙」及ビ獸腸膜 ノ各

透 析毒 素,次 デ原 毒素 ノ順序 ヲ以 テ反 應漸次 減弱

シ,「 コロヂ ウ ム嚢透 析毒 素」ハ「フオル マ リン」加

入 後16日 目 ニ至 リ無 反應 トナ リ,「 セ ロハ ン紙 透

析 毒素」ハ30日 目,獸 腸膜 及 ビ原 毒素 ハ34日 目 ニ

至 リ反應 ヲ證 明 シ得 ザル ニ至 レ リ尚 ホビウ レツ ト

反 應 ト無毒化 日數 トヲ對 比 スルニ各種 透析 毒素 ニ

於 テハ常 ニ後者 ノ前者 ニ先 行 スル ラ認 メ,原 毒 素

ニ於 テハ之 ニ反 ス(第5表).

第5表 ビ ウ レ ツ ト反 應 移 動 表

第3項 絮 状反應 發現 状況 竝 ニ速度 ニ就 テ

絮状 反應(L.f.)ト ハ佛國 ノG. Ramonガ1923

年 ニ發 見 セル「ヂ フテ リー毒素 」ト同名抗毒 素 間ニ

出現 スル試驗 管 内免 疫現 象 ナ リ.而 シテ他 ノ毒 素

抗毒素 反應 ニ比 シテ特徴 トスル點 ハ 中和點 ニ於 テ

初發絮 状反應(Floculation initiale)ヲ 發 現 シ,

實施 方 法簡易 ナル コ ト及 ビ主觀 ヲ以 テ誤謬 ヲ來 ス

コ ト無 キ點 竝 ニ反應 ノ結 果 ヨリシ テ直 ニ一方 ニ於

テハ 毒素 ノ抗元能 カ ヲ,他 方 ニ於 テハ 血清 ノ抗毒

單位 ヲ計測 スル ヨ トヲ得 ル點 ニア リ.然 レドモ又

一方有力ナル毒素ニシテ該絮状反應 ヲ現ハサザル

モノア リ(Lowenstein).且 直接價 測 定ニ際 シ,

明 カニ毒 性 ヲ證 明 セル ニモ拘 ラズ,毫 モL.f.價 ヲ

見 出シ得ザ ル毒素 ノ存 スル アルハ 又知 ラ レタル事

實 ナ リ(目 黒博士).以 上 ノ長短 所 ニ留 意 シ次 ノ實

驗 ヲ施行 セ リ.

實 驗成 績:絮 状 反應 ヲ施 行 スル ニ當 リ注意 ス

可 キ點 ハ

1. 毒 素抗 毒素混合 液 ハ帶 褐黄 色 ニテ全然 透 明

ナルコ ト.

2. 毒素 ノP.H.ハ5乃 至10ノ 間 ニ アル コ ト,

該範 圍 ヲ脱 スル時ハ毒 素ハ速 ニ崩壞 シテ反應複 雜

トナ ル.

今,1號,2號 竝 ニ3號 毒 素 ニ就 テ,透 析 前,後

及 ビ0.4%「 フオルモ ール」加 入後 ニ於 ケ ルL.f.竝

ニK.f.ヲ 表示 セバ 第6表 ノ如 シ.

73

2444 饗 場 美 誠

第6表 絮 状 反 應 ノ 變 化

L.f.ノPer cc單 位 ハ 「コ ロヂ ウ ム嚢 」,「 セ ロ ハ

ン紙」 ヲ以 テ透析 セ ル毒素 ニ於 テハ各號 毒素 共,

同程 度 ノ減 少 ヲ顯ハ セ ドモ獸 腸膜 透析 ニ依 ルモ ノ

ハ稍 々高 單位 ナ リ.K.f.ハ 何 レモ著 シキ延長 ヲ來

シ,獸 腸膜,「 セ ロハ ン紙」竝 ニ「コロヂ ウム嚢 」透

析 毒 素 ノ順位 ヲ以 テ僅 少時 間宛延 長 セ リ.0.4%

「フオル モ ール」加入後 ニ於 テハ透析 毒素 ニ依 ル絮

状 反應 ハ已 ニ發顯 セズ.原 毒素 ノ ミハ 同一抗毒素

量 ニテ絮 状物 ヲ發現 ス レドモ,K.f.ハ 第7表 ノ如

ク第1日,第2日,第3日 ハ著 明 ナル遲 延 ヲ示 顯

セ リ.第4日 ニ至 リ俄然短 縮 シ,爾 後追 日延 長 シ,

第24日 ニ於 テハ 何 レモ絮 状反應 發顯 能 力 ヲ喪失

セ リ.當 初毒力微 弱 ナ リシ第3號 毒 素 ヨ リ出發 セ

ル 「フオル モール トキ シ ン」ハ0.4%「 フオル モ ー

ル」加 入後24時 ニハ,已 ニ絮状 反應 ヲ顯 ハ スニ至

ラ ズ.

第7表. 「原 フ オ ル モ ー ル トキ シ ン」ノK.f.追 日移 動

第4項 D.L.M.ノ 減弱 度 ニ就 テ

今,最 少致 死量(D.L,M.)測 定 ニ關シ注意 セ シ

條項 ヲ述 ベ ン.

1) 海〓 ハ盡 ク同一種 類 ニシテ,飼 育箱,採 光

竝 ニ通 風状態 ニ關 シテハ可 及的 甲乙 ナキ ガ如 ク操

作 ス.2) 海 〓 ノ體重 ハ1週 中連 續秤量 ノ結 果最

モ動搖 ノ少 ナ キ250gヲ 規 準 トナ シ,240g乃 至

260gノ モ ノノ ミヲ使 用 シ,且1日 中 ニ於 テハ比

較的體重 變動 ノ少 ナ キ空腹時 ヲ選 ビ午後2時 レナ

セ リ.3) 最 少致死 量測 定ハ2段 計測 トナシ,豫

備試驗 ヲ以 ヲ 大約 ノ測定 ヲナ シ,引 續 キ毒素量 ニ

於 テ1/20ccノ 開 キ ヲ有 スル本試驗 ヲ施 行 セ リ.

尚 ホ1測 定點 ニ5頭 ヲ配 シ,3頭 以 上 ノ斃死 ヲ以

テ致死點 トナス.第8表 ニ其 ノ1例 ヲ示 サ ン.

74

「ヂフテリー毒素」ノ透析 ニ就テ(第1編) 2445

第8表 1號原毒素最少致死量測定豫備試驗表

第8表 ノ實驗 成績 ヨ リシテ致 死點 ハ1/600cc乃

至1/800ccノ 間 ニ存 シ且稍 々1/600cc側 ニ偏 ス

ル ヲ認 ム.依 テ1/610cc 1/630cc 1/650cc 1/670cc

1/690cc 1/710cc 1/730ccト 各1/20ccノ 開 キ ヲ有

スル遞 減量 ヲ以テ本 試驗 ヲ施行 セ リ.第9表 ノ如

シ.

第9表 1號 原毒素最少致死量測定本試驗表

75

2446 饗 場 美 誠

斯 ク ノ如 ク ニシ テ該毒 素 ノD.L.M.=1/650cc

ト決 定 セ リ.同 樣 ナ ル 方 法 ヲ以 テ2號 毒 素 ノ

D.L.M.=1/550cc, 3號 毒 素 ノD,L.M.=1/200cc

ナル コ トヲ測定 セ リ.各 號 毒 素 ヲ200cc宛,前 述

3種 ノ透析 膜 ニ封納 緊縛 シ,攝 氏1.3度 内外 ノ流

水 中ニ7時 間透析 セル透 析毒 素竝 ニ各號 ノ原 毒素

ニ0 .4%ノ 割 合 ニ「フオル モール」(P.H.=3.09)ヲ

加 入 シ,40℃ ノ孵 竈 内靜置 後 ノD.L.M.ノ 變 弱 ヲ

檢 査 シ タル成績 ヲ今 第10表 ニ示 ス可 シ.

76

「ヂフテ リー毒素」ノ透析ニ就テ(第1編) 2447

第10表 D.L.M.ノ 減 弱 度 表

即 チ各號毒 素 ハ透析膜 ノ種 類 ニ關 スル コ ト僅 少

ニシテ,透 析 直後 ニ於 テハ該 毒性 ノ半 ヲ喪 失 シ,

0.4%「 フ オル モ ール 」加 入後1日 ニテハ殆 ド1/1cc

トナ リ,第2日 ニ於 テハ既 ニD.L.M.ヲ 證明 シ得

ザル ニ至 ル.然 レ共 詳細 ニ觀 察 スル時 ハ試驗 動物

斃死 ノ時 間的 開係 ヨリシテ,「コ ロヂウム嚢透析 フ

オル モ ール トキ シン」ハ最 モ速 ニ減 毒 シ,「 セ ロハ

ン紙 透析 フオル モール トキ シ ン」,「獸 腸膜透 析 フ

オル モール トキ シ ン」ノ順次 ニテ「原 フオル モ ール

トキ シ ン」ハ減毒 時間稍 々遲 遠 スルモ ノ ノ如 シ.

第5項 家兎 皮 内反應 ニヨル微 量毒 素測定

ニ就 テ

「ヂ フテ リー毒 素」及 ビ「フオルモ ール トキシ ン」

ノ毒性 測定 ニ家兎 皮内反 應 ヲ應 用 セ ル ハFraser

及 ビWigham19) (1924)ヲ 以 テ 初 メ ト ス.次 デ

Claus Jensen20) (1933)竝 ニ目黒博 士,末 松博 士,

甲斐博 士21)及 ビ 古川 博士22)ハ 更 ニ該法 ヲ精密 ニ

研究 セ リ.余 モ亦 同法 ヲ藉 リテ,各 號原 毒素 ヲ對

照 トシ,之 ヨ リ誘 導 セル各種 透析 毒素 ノ微 量毒 素

測 定 ヲモナセ リ.

第1節 家 兎皮 膚 感度測 定補 綴實驗方 法 及 ビ

成績

家兎皮内反應ニ關 スル研究ハ,先 進諸學者ニ依

リテ盡 サ レ間然 スル トコ ロ無 キガ如 シ,然 レ ドモ

尚 ホ家兎 皮膚感 度測 定 ニ就 テ稍 々滿 タザ ル トコロ

アル ヲ以テ補綴 セ ン トス.家 兎 ハ3kg内 外 ノ體

重 ヲ有 スル中間型 皮膚 感受性(Cl. Jensen23),古

川博 士24))ヲ 有 スル 雄性 ニ シテ血中 正常 抗毒素 量

0.001 A.E.以 下 ノ モ ノノ ミヲ使 用セ リ.使 用標 準

毒 素ハ調 製後2年 ヲ經過 シ,毒 性比較 的 安定 セル

T.100=(Toxin 100號 ノ意)ヲ 常 用 セ リ.該 毒 素

ハ 調 製 時D.L.M.=1/800cc現 時=1/550cc, L .f.

=11.38A.E. per cc, K.f.=2H40', Lt=0.167,

B.W.=8.0〔A.E.〕 ナ リ.當 初 該 毒 素 ヲ生 理 的 食 鹽

水 ヲ以テD.L.M.相 當數 値 ナル550倍 稀 釋 トナ シ,

再 ビ50倍,100倍,150倍,200倍,250倍,300倍,

350倍,400倍,450倍,500倍,550倍,600倍,650倍,

700倍,750倍,800倍 ト50倍 宛 ノ遞 減量 ヲ以 テ

家兎皮 膚感度 ノ豫 備試驗 ヲ行 ヒ,48時 間後 ニ於 テ

直徑8mmノ 發 赤 ヲ有 スル點 ヲ限界 トナ ス.例 之

感度鋭 敏 ナル家兎ニ シテ50倍=R.I.N., 100倍=

R.I., 150倍=R., 200倍=10r., 250倍=r., 300

倍=r., 350倍=r?., 400倍=0,r=弱 度 發赤,

R=強 度發 赤,n=R.I.内 ノ小 ナル壞 死部,i=弱 度浸 潤,

I=強 度浸潤,N=R.I.内 ノ大 ナル壞死 部 即チ300

倍 ニ於 テ該發 赤點 ヲ有 セ シ トセバ,家 兎皮 膚 感

度=1/550×1/300×1/10=1/1650.000ccト 定 ム.

77

2448 饗 場 美 誠

1/10ト アル ハ注射量0.1ccナ ル ヲ以テ1.0ccニ 對

スル比率 ヲ示 ス.今,10頭 ノ家 兎皮 膚感 度 ヲ檢 セ

シ ニ第11表 ノ如 シ.

第11表 家 兎 皮 膚 感 度 表

以上10頭 中 ニテ最 高感 度 ヲ有 スルNo. 4, No. 6

No. 7, No. 10ヲ 標 準 トシテ考按 スル ニ各 家兎 ノ皮

膚感度係數=家兎皮膚感度稀釋倍數/

標準家兎皮膚感度稀釋倍數ハ 第12

表 ニ記載 セ リ.

第12表 家 兎 皮 膚 感 度 係 數 表

果 シテ第12表 ニ表 レ タル 感度 係數 ガ實 驗 値 ト

一致 スル ヤ否 ヤ ヲ檢 セ ン ト欲 シ,101號 毒素 ヲ使

用 シ テ 同 感 度 群 別 ニ 皮 内反 應 ラ施 行 セ リ.該 毒 素

ノ 性 状 ハP.H.=8.5, D.L.M.=1/350cc, L.f.=

13.4A.E., K.f.=4H10', Lt=0.155cc, B.W.=

12A.E.第1群No. 4, No. 6, No. 7, No. 10ノ 家

兎 ニハ1/350×1/300×1/10=1/1.050.000,第2群

No. 2, No. 3, No. 5ノ 家 兎 ニハ1/1.050,000÷1/1.06=

1/990.660=1/350×1/28.5×1/10,第3群No. 1, No.

8, No. 9ノ 家 兎 ニハ1/1.050.000÷1/2=1/525.000

=1/350×1/150×1/10即 チ 第1群 ニハD.L.M.×

1/300,第2群 ニ ハD.L.M.×1/28.5,第3群 ニ ハ

D.L.M.×1/150ニ 稀 釋 毒 素 ヲ0.1cc宛 皮 内 注 射 ヲ

行 フ時,48時 間後ニ 於 テ直徑 約8mmノ 發赤 フ呈

セリ.茲 ニ於 テ算 出セル理 論 値 ト實 驗値 トハ大 約

一 致 セル ヲ認 ム.依 テ種 々ノ感度 ヲ有 スル 中間型

家兎使 用 ノ際 ハ試 驗注射 ヲ以 テ感 度測 定 ヲ行 ヒ感

度係數 ヲ算 出 シ實 驗上測 定 セルD.R.M.數 値 ニ係

數 ヲ乘 ジテ修正D.B.M.ヲ 求 メテ互 ニ比較 檢討 ス

ル コ トヲ得 ベ シ.

第2節 家兎皮内反應 ニヨル追 日微量毒素量

測定

前述 セル3種 ノ原毒 素及 ビ各透析 毒 素竝 ニ0.4%

「フオル モ ール」加入後 ニ於 ケル追 日ノD .R.M.及

ビD.R.M.修 正値 ノ1例 ヲ示 サ ン(第13表).

78

「ヂ フテ リー毒 素 」ノ透 析 ニ就 テ(第1編) 2449

第13表 D.R.M.及 ビD.R.M.修 正値追 日移 動

透 析 直 後(7時 間 透 析)

透析 直後0.4%「 フオル マリ ン」加 入後24時(原 毒 素 ヲ對照 トス)

斯 クノ如 クニ シテ2週 日ハ毎 日,爾 後 隔 日 ニ皮

内反 應 ヲ續 行 セ シ ニ39日 以内 ニテ何 レモ反應 陰

性 トナ レリ(第14表).

第14表 各種透析毒素 ノ皮内反應陰性所要日數

79

2450 饗 場 美 誠

今,第13表 及 ビ第14表 ヲ吟味 スル ニ各 毒素 ハ,

各 種透 析 ニ依 リ何 レモ著 シ ク其 ノ毒性 ヲ減弱 シ,

1號 「コロヂ ウム嚢 」透析 毒素 ハ1/6ニ,2號,3號

ハ夫 々1/10及 ビ1/5ニ 遞 減 ス.獸 腸 膜透析 毒素 竝

ニ 「セ ロハ ン紙 」透 析毒 素ハ,共 ニ1號 ,2號 及 ビ

3號 ニ於 テ1/4, 1/9及 ビ1/2.5ニ 減弱 ス.0.4%「 フ

オル モール」加 入後24時 間 ヲ經 過 スル トキハ1號

竝 ニ2號 原毒 素 ハ加入前 ノ約1/300ニ,3號 原 毒

素 ハ1/200ニ 減 毒 ス.同1號 各 種透析 毒素 ハ一律

ニ大約1/30ニ,同2號 各種 透析毒 素ハ1/10ニ,同

3號 ニ於 テ 「コ ロヂ ウム嚢」透析 毒素ハ 其 ノ1/500

ニ,獸 腸膜 及 ビ 「セ ロハ ン紙」 透析 毒素 ハ何 レモ

1/250ニ 減少 セ リ.爾 後 追 日著 シキ減毒 ヲ示 シ,

「コ ロヂ ウム嚢」 透析 毒素 ハ最 モ早期 ニシテ10日

前 後 ニ於 テ皮 内反 應陰性 トナ リ.「 セ ロハ ン紙 」透

析 毒素 ハ約20日 ニテ,獸 腸 膜透 析毒素 ハ24日 前

後 ニ,最 後 ノ原毒 素ハ37日 前後 ニ於 テ無反 應 トナ

レル ヲ認 ム可 シ.全 過程 ヲ通覽 スル ニ,常 ニ「コ ロ

ヂ ウム嚢」透析 毒 素ハ 最モ減 毒率 高 ク,「 セ ロハ ン

紙」透析 毒 素之 ニ吹 ギ,續 イテ獸 腸膜透析 毒 素,最

後 ニ原毒 素 ノ順位 ヲ繼 續 セ リ.尚 ホ各號毒 素 ニ就

テ觀 察 スル ニ,透 析前 ニ於 テD.L.M.大 ナル毒 素

ハ 小 ナル毒素 ニ比 シ テ早 期 ニ無 反應 ニ到達 スル事

實 ハ原毒 素竝 ニ透析 毒素 共 ニ軌 ヲ同 ウス.

第6項 海 〓皮 下法(Ramon's Probe)

Ehrlich25)ニ 依 レバ 「ヂ フテ リー菌 」 ハ2種 ノ

毒 素 ヲ形 成 スル コ トヲ認 メタ リ.之 等 ハ結合 簇 ニ

於 テ共通 ニ シテ何 レモ近似 ノ性質 ヲ有 スル モ ノ ト

ス.1ツ ハ急 性 中毒作 用即 チ炎症壞 死 等 ヲ惹 起 ス

ル作 用 ヲ有 シ,他 ハ慢 性 ニ作 用 シ麻 痺 ヲ起 ス毒素

ニ シテ 「トキ ソン」(Toxon)ト 稱 スルモ ノナ リ.

前者 ヲ檢 スル ニハ現今 家兎皮 内反應 ヲ應 用 シテ其

ノ 目的 ヲ達 成 シ得 レ共,後 者 ニ對 シ テハ 不可能 ナ

リ.依 テ麻痺 毒 ノ檢査 ニハRamon氏 法 ヲ使用 セ

リ.即 チ300g内 外 ノ體 重 ヲ有 スル海〓120頭 ヲ

選 ビ,10頭 宛1群 トナ シ,1, 2, 3號 原 毒素竝 ニ

「コロヂ ウム嚢 」,獸 腸膜 及 ビ「 セ ロハ ン紙」,「透

析 フオルモ ール トキ シ ン」 ノ12種 ノ 可檢 材料 ヲ

5.0cc宛 腹 壁皮 下 ニ注射 シ,6週 間 ニ亙 リ,毎 日體

重 ノ測 定,局 所 竝 ニ全身 ノ状態 ヲ觀 察 セ リ.爾 後

第14日 ニ至 リテ,2號 原毒 素 ヨリ出 發セル 「フオ

ル モール トキシ ン」 ラ注射 セル海〓1頭 斃 死 セル

ヲ以 テ直 ニ剖檢 ニ附 セ シニ,注 射局所 ノ浮腫,壞

死,腸 以外 ノ内臟 諸器 關 及 ビ淋 巴腺 ノ充血,特 ニ

副腎 ノ赤變 竝 ニ胸腔 内浸 出液瀦 溜等 「ヂ フテ リー

毒 素 」中毒 死 ニ ヨル特 有 ノ病 變 ヲ認 メズ,小 腸 ノ

ミハ粘 膜著 シク充 血 セ リ.生 前數 日間 連續 セル下,

痢 症 ア リ,恐 クハ腸 障 碍死 ナル ベ シ.他 ハ何 レモ

4箇 月以上 耐過健 存 セ リ.依 テ12種 ノ 「フオル モ

ー ル トキ シ ン」ハ 「フ オ ル モ ー ル トキ ソイ ド 」ニ 轉

化 セ ル モ ノ ト認 定 セ リ.

第4章 總括及ビ考按

最 モ優秀 ナル「ヂ フテ リー豫防 液」ハ速 ニ且容 易

ニ調製 シ得 テ加之 モ免疫 元性 強大 ナル モ ノナ ラザ

ル可 カ ラズ.而 シテ「ヂ フテ リー毒素」中 ニハ種 々

ナル夾雜 物 ヲ含有 スル ハ勿 論 ナ リ.依 ツテ該 物質

ヲ可 及的除去 シ加之 モ免 疫元 性 ヲ保 有 セ シメテ速

ニ無毒化 セシム ル目的 ニハ透 析法 ヲ施 行 スベキ ナ

リ.

最適ナル透析時間及 ビ透析量 ヲ測定セント欲 シ

先 ヅ「マルタ ンブ イ ヨン」竝 ニ「ヂ フテ リー毒素 」ヲ

50cc, 200cc及 ビ500ccト 「コ ロヂ ウム嚢」,獸 腸

膜竝 ニ「セロハ ン紙 」ニ封納 シ,各27種 宛計54箇

ノ可檢材料 ヲ7時 間,12時 間,48時 間 ト攝氏 約1.3

度 ノ流水 中 ニ透析 シ テ比較 檢討 セル ニ,量 的増 加

率 及 ビ總窒 素量 減少度 ハ「マル タ ンブイ ヨ ン」ニ於

テハ毒素 ニ比 シテ小 ナ ルモ,比 重,P.H.竝 ニB.R.

ノ變化 度 ハ相似 タ リ.量 的及 ビ時間 的 ニ觀 察 スル

時ハ 量的増 加率 ハ「コ ロヂ ウム嚢」透析 時 最大 ニシ

80

「ヂ アテ リー 毒素」ノ透 祈 ニ就 テ(第1編) 2451

テ,次 デ「セ ロハ ン紙」透 析時,獸 腸膜透 析時 ノ順

次 トナ リ,且 透 析容 量 ノ遞減竝 ニ透析時 間 ノ延長

ト共 ニ増大 スレ共比 重,P.H.竝 ニB.R.遺 殘總 窒

素 量(蛋 白質量)及 ビD.L.M., D.R.M.ハ 之 ニ反 シ

テ減退 ス.透 析容 量50cc以 下 ニシテ且透析7時

間以 内ニ 於 ケル 成績 ハ50ccヲ7時 間透析 セル際

ト大 同小異 ナ リ.前 記27種 ノ透析毒 素 ニ就 テ「フ

オル モール トキ ソイ ド」 ヲ調 製 シ.免 疫 試驗 ヲ實

施 セ シニ 「セ ロハ ン紙」透析 毒素 ハ容量50cc,他

種透 析毒 素 ハ500ccヲ 採 リ7時 間透析 セル際最 モ

優秀 ナル免 疫 ヲ獲 得セ リ.尚 ホ各種 透析 毒素 ノ免

疫試 驗 ニ關 シテハ 第2編ニ 於 テ發表 セ ン トス.

各種 透析 毒素 ト原毒素 トノ 「フオル モ ワクチ ン

轉化」 ニ關 シ,P.H.ノ 移 動,ビ ウ レツ ト反 應 ノ變

化,絮 状 反應 ノ發現 及 ビ速 度 ノ状 況,直 接 價竝 ニ

家兎皮 内 反應 ノ減弱度,次 デ海〓 皮 下法 ヲ比較 考

究 セル ニ各種 透析 毒 素ハ透 析直後 「フオル モール」

添加 ニ ヨリP.H.ハ 著 シク減降 セリ.就 中 「コロ

ヂ ウム嚢 」透析毒 素最 モ著 明 ニシテ,「セ ロハ ン紙」

透析毒 素之 ニ次 ギ,獸 腸膜 透析毒 素ハ最 モ減 降度

小ナ リ.爾 後姑 クハ 同程 度 ヲ持續 ス レ共20日 前後

ヨ リ漸次 昇騰 シ テ,次 第 ニ原毒 素 ノP.H.ニ 近接

ス.然 ルニ 原 毒素 ハ「フオル モール」加入後 輕度 ノ

減降 ヲ示現 スル ノ ミニテ漸次 舊位 ニ復歸 シ,爾 後

久 シ ク同程度 ヲ繼 續 スルモ ノノ如 シ.P.H.ノ 低 位

ナル原毒 素 ヲ使用 スル時ハ「弱 アル カ リ性」ヨ リ弱

酸性 ニ轉 向 シ毒 素ハ速 ニ其 ノ毒性 ヲ破壞 セ ラル可

シ.依 テ「透析 フオル モ ール トキシ ン」ヲ使用 シテ

免疫 ヲ企劃 セ ン ト欲 スル時 ハ,須 ラクP,H.高 キ

原毒 素 ヲ使 用セ ザル可 カラズ.

ビウ レツ ト反應 ハ「透析 フオル モール トキシ ン」

ガ「フオル モ ール トキ ソイ ド轉化 」後,暫 時 ニシ テ

反 應 ヲ證 明 シ得ザル ニ至 リ,「原 フオル モール トキ

シ ン」ニ於 テハ 「トキ ソイ ド轉化 」前 已 ニ無 反應 ト

ナル.然 レ共 前者 ハ後者 ニ比 シテ早 期 ニ無 反應 ト

ナル.コ レ透析 ニ依 リビ ウ レツ ト反應 ヲ現 ハ ス夾

雜物 ノ一部 ハ透析 サルル ガ タメナ ラ ン.

「透析 ヂ フテ リー毒素」ノ絮 状反 應(L .f.)ハ透 析

時 ノ毒素 量 及 ビ透析 時 間 ニ關 スル コ ト大 ニシテ容

量 ノ遞 減竝 ニ時間 ノ延長 ト共 ニ輕度 ノ低 單位 ヲ示

現 ス.絮 状速 度ハ 透析時 間 ト平行 シ テ著 シ ク延 長

シ.48時 間透析ニ 於 テハ 反應全 ク不 安定 トナル.

「ヂ フテ リー毒 素」ヲ7時 間透 析 直後 ニテハ尚 ホ絮

状 反應 ヲ著 明 ニ發 現 スレ共 抗元單 位ハ輕 度 ニ低 減

シ,絮 状速 度ハ稍 々延 長 ス.而 シテ0.4%「 フオル

モ ール」 添 加後ニ 於 テハ,已 ニ絮 状反 應 ヲ證 明 ス

ル コ トヲ得 ザ リキ.

家兎 皮 内反應 ヲ施 行 スル ニ當 リ,Cl. Jensenハ

一 毒素 ノ毒 力測定ニ 多數 ノ家 兎 ヲ使 用 シ,其 ノ平

均 價 ヲ求 メタ リ.古 川博 士ハ,多 數 ノ家兎 中 ヨ リ

中間型皮 膚 ヲ有 スル モ ノ ヲ選 定 シテ使 用 セ リ.然

レ共 一時 ニ多 數 ノ家 兎 ヲ要 スル際入手 困難 ナル コ

ト屡 々ナ リ.且 毎囘脱 毛後 ニ非 ザ レバ選 擇 不能 ナ

リ.依 テ余ハ3kg内 外 ノ體重 ヲ有 スル健康 家兎 ノ

ミヲ使用 シ,豫 メ皮膚 感度 ヲ測 定 シ,感 度係 數 ヲ

需 メ,家 兎 皮 内反應 成績 ニ感 度 係數 ヲ乘 ズ ル コ ト

ニ ヨリテ,多 數 ノ 可檢材 料 ヲ同一條 件 ノ下 ニ比較

檢討 スル コ トヲ得 タ リ.

透析 直後 其 ノ毒性 ノ半 ヲ喪失 シ「フオル モ ール」

添 加 ニ ヨ リ一 層減毒 ニ拍車 ヲ加 ヘ ラ レタル 「透析

フオル モ ール トキシ ン」ハ,追 日毒 性 ヲ減 ジ「コ ロ

ヂ ウム嚢透 析 フオル モ ール トキ シン」 ハ9日 前後

ニ於 テ無毒 化 シ,「 セ ロハ ン紙 」透 析 ニ依 ル モ ノハ

19日 前 後 ヲ要 シ,獸 腸膜 使用 ノモノハ25日 前後

ニシテ毒性 ヲ失 フ.原 毒素 ハ35日 内外 ニ シ テ無

毒化 スル ニ比較 スル トキハ所 要 日數 ノ著 シキ短 縮

ヲ認 ムル コ トヲ得 ベ シ.

第5章 結 論

1) 「ヂ フテ リー毒 素」ノ最 適量 ナル透析 及 ビ時

81

2452 饗 場 美 誠

間 トシテハ,「 セ ロハ ン紙」透析 ニ於 テ毒 素50cc,

獸 腸膜 竝 ニ「コ ロヂ ウム嚢」透析 ニ テハ500ccヲ7

時 間透析 セル場合 トス.

2) 新 鮮 ナル「透析 ヂ フテ リー キ シン」ハ 「フ

オル モ ール」添 加後,原 毒 素ニ 比 シテ著 シ キP.H.

ノ降下 ヲ來 セ ドモ,時 日 ノ經過 ト共 ニ再 ビ原毒 素

ノ ソレニ近接 ス.

3) 新 鮮 ナル 「透析 ヂ テ リー フオル モール トキ

シ ン」 ハ無毒 化後 暫時 シテ ビ ウ レツ ト反應 ヲ呈 セ

ザル ニ至ル.

4) 家兎 皮 内反 應施行 ニ 際 シ,「 ヂ フテ リー毒

素 」 ニ對 スル家兎 固有 ノ皮膚感 度 ヲ測 定 シ,感 度

係 數 ヲ求 メ,多 數 ノ可檢 材料 ヲ同一 條件 ノ下 ニ比

較 檢討 スルコ トヲ得 ベシ.

5) 「コロヂ ウム嚢」透 析毒 素ハ,最 モ速 ニ無毒

化 スレ共 嚢ハ破 損 シ易 ク,且 消毒 不完全 ナ リ.獸

腸膜ハ堅牢ニシテ使用ニ便ナ レ共,該 透析毒素ハ

無毒化 スル爲 ニハ長 時 日 ヲ要 ス.「 セ ロハ ン紙」透

析毒 素ハ無 毒化 日數 ニ於 テ「コロヂ ウム嚢 」透析 毒

素 ニ劣 ル ト雖 モ,比 較 的短 時 日ニ シテ且紙 ハ消毒

ヲ完 全 ニ行 フコ トヲ得 ル長所 ヲ有 ス.

擱 筆 ニ當 リ終 始御懇 篤 ナル御指 導 ト御校 閲

ノ勞 ヲ辱 クセ シ恩 師 目黒博 士 ニ衷 心感 謝 ノ意

ヲ表 ス.

文 獻

1) Raux et Ycrsin, Ges. Annales, 2, P. 629;

3, P. 273, 1889; 4, 1890. 2) Behring, Gesam-

melte Abhandlungen, Bonn, 1915. 3) Gama-

leia, Les poisons bacteriens, Paris, 1892. 4)

Doerr, Biochem. Zeitschr., 7, S. 128, 1908. 5)

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l'Inst. Maragliano per lo Stud. el la cura d.

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「ヂフテ リー毒素」ノ透析 ニ就テ(第1編) 2453

Aus dem Moguro-Institut (Direktor: Dr. Y. Meguro).

Uber die Dialyse des Diphtheriegiftes.

(I. Mitteilung.)

Dialyse des Diphtheriegiftes und deseen Umwandlung

zum Formoltoxoid.

Von

Yoshiaki Aiba.

Eingegangen am 15. Februar 1940.

Verf. dialysierte frische Diphtherietoxinlosung durch Dialysemembran, um das Men-

gen-und das Zeitoptimum der Dialyse festzustellen. Unmittelbar nach der Dialyse hat

Verf. zu dem Dialysierten Toxin Formalin im Verhaltnis von 0.4% zugefugt und taglich

die Anderung des P.H., die Veranderung der Biuretreaktion, das Auftreten der Flockungs-

reaktion und deren Geschwindigkeit beobachtet. Ebenso untersuchte er den Abschwa-

chungsgrad des Toxins und die Zeitdauer, in welcher das Toxin vollstandig entgiftet wird.

Daraus kam Verf. zur Erkenntnis, dass das Diphtherietoxin durch jede Dialysiermembran

hindurchgeht und dass als das Mengenoptimum der Dialyse 50cc Toxin und als das Zeit-

optimum 7 Stunden gelten und dass unter allen Dialysiermembran das Zellophanpapier

am geeignetsten ist. (Autoreferat)

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