Download - Úvod do biochémie
![Page 1: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/1.jpg)
Úvod do biochémie
Dagmar HEINOVÁ
![Page 2: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/2.jpg)
Začlenenie živých systémov v rámci hmotných sústav
Živé systémy (bunka, organizmus ako celok) sú špecifickou formou štruktúrne-funkčného usporiadania hmoty. Sú súčasťou hmotných sústav, ktoré existujú okolo nás i v nás. Súčasná veda pozná nasledujúce typy hmotných sústav:
![Page 3: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/3.jpg)
Hmotné sústavyelementárne častice a polia;
atómy a molekuly;
mikroskopické a makroskopické telesá;
Zem a iné planéty;
hviezdy;
vnútrogalaktické systémy;
Galaxia;
sústava galaxií;
metagalaxie;
živé sústavy.
![Page 4: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/4.jpg)
Spoločné vlastnosti hmotných sústav
Všetky typy hmotných sústav včítane živých systémov sa vyznačujú niektorými základnými a univerzálnymi vlastnosťami, ktoré ich navzájom spájajú:
- jestvujú v priestore a v čase, v ktorom na seba navzájom pôsobia;
- majú svoju štruktúru a systémovú organizovanosť;
- sú v neustálom pohybe a majú schopnosť neustálej premeny z jedného stavu na iný.
![Page 5: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/5.jpg)
Ciele a zameranie biochémie
![Page 6: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/6.jpg)
Pred 4 miliardami rokov vznikol na Zemi život, a to v podobe jednoduchých mikroorganizmov. Tieto si vyvinuli schopnosť využívať energiu z organických zlúčenín alebo zo slnečných lúčov na tvorbu (syntézu) širokej škály zložitých biomolekúl za využitia jednoduchých prvkov a zlúčenín.
Biochémia študuje ako vznikajú jedinečné vlastnosti živých organizmov z týchto neživých biomolekúl. Jej cieľom je ukázať ako neživé molekuly, ktoré tvoria
![Page 7: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/7.jpg)
organizmus navzájom interagujú za účelom udržania a zachovania života, pričom sa riadia fyzikálnymi a chemickými zákonmi, ktoré riadia neživý svet.
Hlavné charakteristiky živých sústav, ktoré ich odlišujú od neživých:
- vysoký stupeň chemickej komplexnosti a mikroskopická organizovanosť;
- prítomnosť systémov schopných využiť a transformovať energiu zo svojho
![Page 8: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/8.jpg)
prostredia;
- majú schopnosť presnej vlastnej replikácie a seba organizovania sa;
- obsahujú mechanizmy pre vnímanie a odpovedanie na zmeny v ich prostredí;
- každá zlúčenina má svoju presnú funkciu, pričom medzi nimi existujú vzájomné regulačné mechanizmy.
![Page 9: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/9.jpg)
Základy biochémie
- molekulová biológia;
- chémia;
- fyzika;
- genetika;
- evolučné štúdie.
![Page 10: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/10.jpg)
I. Molekulové základy biochémie Napriek veľkej rôznorodosti živých
organizmov (tvar, veľkosť, špecializácia funkcií) zdieľajú tieto systémy niektoré spoločné základné vlastnosti:
- základnou štruktúrne-funkčnou jednotkou je bunka;
- prítomnosť plazmatickej membrány, ktorá oddeľuje bunkový obsah od okolitého prostredia a má charakteristické zloženie: lipidovú dvojvrstvu s obsahom bielkovín s rôznou funkciou (receptory, transportné kanály, enzýmové systémy, atď.);
![Page 11: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/11.jpg)
- obsah bunky tvorí cytoplazma, ktorá je zložená z cytosolu s obsahom: rôzne
- rôznych suspendované častice (organely) so špecifickými funkciami (kompartmentácia: jadro, mitochondrie, Golgiho aparát, endoplazmatické retikulum, peroxizómy, ribozómy, lyzozómy, atď);
- enzýmy a RNA molekuly oba vo vysokých koncentráciách;
- zložky tvoriace biomakromolekuly (aminokyseliny, nukleotidy);
![Page 12: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/12.jpg)
- stovky malých organických molekúl – metabolitov;
- intermediáty biosyntetických a degradačných ciest;
- koenzýmy;
- anorganické ióny.
Rozdelenie organizmov podľa spôsobu získavania energie potrebnej pre ich život :
1) fototropné (gr. trophos – výživa, potrava);
![Page 13: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/13.jpg)
pre svoju existenciu zachytávajú a využívajú energiu slnečných lúčov (fotosyntéza);
2) chemotropné organizmy získavajú energiu z energeticky bohatých chemických zlúčenín prijatých potravou, ktoré oxidujú na vodu a oxid uhličitý (oxidatívna fosforylácia spojená s glykolýzou, pyruvátdehydrogenázovým systémom a Krebsovým cyklom).
![Page 14: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/14.jpg)
II. Chemické základy biochémie
- iba 30 chemických prvkov je nevyhnutných pre existenciu živých organizmov, z ktorých len 4 sú základné pre tvorbu biomolekúl:
vodík, kyslík, dusík a uhlík – tvoria až 99% atómov prítomných v bunke. Jedná sa o najľahšie prvky schopné tvoriť jednu, dve, tri až štyri väzby, pričom tieto prvky tvoria silné väzby.
- biomolekuly sú zlúčeniny uhlíka s obsahom veľkej škály funkčných skupín.
![Page 15: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/15.jpg)
- systém usporiadania uhlíkových atómov:
Kovalentne viazané uhlíkové atómy v biomolekulách môžu tvoriť lineárne reťazce ako aj cyklické štruktúry. Na tieto uhlíkové skelety sú naviazané funkčné skupiny, čím molekula získava svoje špecifické chemické vlastnosti.
Typické biomolekuly sú napr.:
- alkoholy s hydroxylovou/ými funkčnými skupinami;
- amíny s amino skupinami;
![Page 16: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/16.jpg)
- aldehydy a ketóny s karbonylovými skupinami;
- karboxylové kyseliny s karboxylovými skupinami.
- mnoho biomolekúl obsahuje dve a viac rôznych druhov funkčných skupín, z ktorých každá má svoje chemické vlastnosti a poskytuje vlastné chemické reakcie. Tým
je zabezpečená štruktúrne-funkčná biochemická špecificita príslušných látok.
![Page 17: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/17.jpg)
- bunky obsahujú univerzálnu sadu malých molekúl prítomných v ich vodnej fáze (cytosole): aminokyseliny, nukleotidy, sacharidy a ich fosforylované deriváty, karboxylové kyseliny;
- plazmatická membrána je pre uvedené molekuly nepriepustná a ich pohyb do a von z bunky zabezpečujú špecifické membránové transportéry;
- univerzalita výskytu týchto malých molekúl v rôznych bunkách pravdepodobne odráža
![Page 18: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/18.jpg)
evolúciu metabolických ciest, ktoré sa vyvinuli vo vývojovo raných bunkách.
![Page 19: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/19.jpg)
Hlavnými zložkami živých sústav (buniek) sú biomakromolekuly. Sú to polyméry s veľkou molekulovou hmotnosťou zložené zo základných monomérov:
- proteíny z aminokyselinových jednotiek;
- nukleové kyseliny z nukleotidov a
- polysacharidy z monosacharidov.
Syntéza makromolekúl je spojená s hlavnou spotrebou energie v bunke. Makromolekuly sa môžu ďalej organizovať do supramolekulových komplexov, ktoré
![Page 20: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/20.jpg)
tvoria funkčné jednotky (napr. ribozómy, oxidačno-redukčné enzýmy dýchacieho reťazca, atď.).
![Page 21: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/21.jpg)
Enzymológia
Dagmar HEINOVÁ
![Page 22: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/22.jpg)
Vlastnosti živých sústav
Základnou vlastnosťou hmoty je pohyb. Rozumieme tým predovšetkým schopnosť hmoty premieňať sa z jedného stavu na iný. Všetky životné procesy ako prejavy pohybu hmoty sú spojené s premenami (biotransformáciami) látok a energie, ktorý nazývame metabolizmus (obr. 1):
![Page 23: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/23.jpg)
TOK LÁTOK A ENERGIE V ŽIVÝCH SÚSTAVÁCH
živá sústava(metabolizmus)
teplo
exkréty
CO2 + H2O
anabolizmuskatabolizmus
H2O
živiny, O2
energia
![Page 24: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/24.jpg)
Základná charakteristika enzýmov
Chemické reakcie (biotransformácie) prebiehajú v živých sústavách v prítomnosti látok, ktoré nazývame enzýmy. Z funkčného hľadiska sa jedná o biokatalyzátory, t.j. urýchľujú chemické deje, ktoré by bez ich prítomnosti vôbec nemohli prebiehať,
![Page 25: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/25.jpg)
prípadne by prebiehali extrémne dlho alebo by vyžadovali extrémnu teplotu, tlak či pH. Enzýmom katalyzované reakcie prebiehajú 103až 1017 krát rýchlejšie než tie isté nekatalyzované reakcie. Túto vlastnosť enzýmov nazývame katalytická mohutnosť enzýmov. Vyjadruje sa podielom rýchlosti katalyzovanej reakcie kcat ku nekatalyzovanej reakcie knekat (Tab. 1):
![Page 26: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/26.jpg)
Katalytická mohutnosť enzýmovEnzým v bez E v katalyzovaná E
(s-1) (s-1)
Chymotrypsín 4.10-9 4.10-2
Lyzozým 3.10-9 5.10-1
Triozofofosfát-
Izomeráza 6.10-7 2.103
Fumaráza 2.10-8 2.103
Ureáza 3.10-10 3.104
Adenozín-
deamináza 1.10-12 1.102
Alkalická fosfatáza 1.10-15 1.102
![Page 27: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/27.jpg)
Katalytická mohutnosť niektorých enzýmov
Enzým akceleračná rýchlosť
(kcat/knekat)
Chymotrypsín 1.107
Lyzozým 2.108
Triozofosfátizomeráza 3.109
Fumaráza 1.1011
Ureáza 1.1014
Adenozíndeamináza 1.1014
Alkalická fosfatáza 1.1017
![Page 28: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/28.jpg)
Špecificita enzýmov
Okrem katalytickej mohutnosti sa enzýmy vyznačujú vlastnosťou, ktorú nazývame špecificita. Špecificita enzýmu je spojená s látkou, ktorej biochemickú premenu enzým katalyzuje. Ako výsledok tejto reakcie vzniká nová chemická látka. V biochémii používame na označenie chemicky premieňanej látky pojem substrát, vzniknutú látku nazývame produkt.
![Page 29: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/29.jpg)
Niektorý enzým môže zabezpečovať katalýzu premeny viacerých štruktúrne podobných substrátov (široká špecificita, napr. proteázy, hexokinázy), zatiaľ čo iný enzým je schopný pôsobiť iba na jedinú chemickú molekulovú štruktúru (striktná špecificita: prevažná časť enzýmov). Špecificitu enzýmu podmienenú štruktúrou substrátu nazývame substrátová špecificta.
![Page 30: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/30.jpg)
Okrem substrátovej špecificity sa enzýmy vyznačujú aj tzv. reakčnou špecificitou (špecificita enzýmovej reakcie). Špecificita enzýmovej reakcie vyjadruje skutočnosť, že pri premene substrátu na produkt nedochádza k tvorbe vedľajších nežiaducich, toxických, resp. potenciálne toxických produktov (usporiadanie premeny látok do step-by-step nasledujúcich reakcií v rámci metabolických ciest).
![Page 31: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/31.jpg)
ZÁVER
Vysoká katalytická účinnosť a špecificita enzýmov zabezpečuje pre živé bunky:
a) úsporu energie
b) zabraňuje tvorbe potenciálne toxických
vedľajších produktov jeho metabolizmu.
![Page 32: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/32.jpg)
Štruktúra enzýmov
Väčšina enzýmov má charakter bielkoviny. Existujú aj niektoré tRNA, ktoré sa vyznačujú katalytickou aktivitou.
Bielkovinové enzýmy, ako všetky bielkoviny, majú svoju primárnu štruktúru, ktorá determinuje ich sekundárnu a terciárnu štruktúru.
Obr.: primárna štruktúra chymotrypsínu:
![Page 33: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/33.jpg)
Primárna štruktúrachymotrypsínu
![Page 34: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/34.jpg)
Z hľadiska terciárnej štruktúry má väčšina enzýmov globulárny charakter vďaka čomu sa vyznačujú hlavnou funkčnou vlastnosťou globulárnych bielkovín: schopnosťou špecificky viazať jednu alebo viac molekúl iných látok (substrátov, inhibítorov, koenzýmov, atď.):
Obr.: Schéma terciárnej štruktúry chymotrypsínu:
![Page 35: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/35.jpg)
ChymotrypsínAktívne miesto:His57-Asp102--Ser195
Chymotrypsín
![Page 36: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/36.jpg)
schopnosťou špecificky viazať jednu alebo viac molekúl iných látok (substrátov, inhibítorov, koenzýmov, atď).
Na povrchu enzýmu sa nachádza tzv. aktívne miesto (centrum) enzýmu. Je to spravidla hydrofóbna štrbina na povrchu enzýmovej molekuly, ktorá obsahuje aminokyselinové zvyšky nazývané katalytické skupiny. Katalytické skupiny priamo zabezpečujú tvorbu alebo rušenie chemických väzieb premieňaného substrátu.
Takýmito funkčnými skupinami sú najčastejšie:
![Page 37: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/37.jpg)
Voľné karboxylové skupiny kyseliny glutámovej a asparágovej;
Amidové skupiny glutamínu a asparagínu;
Guanidínová skupina arginínu;
6-aminoskupina lyzínu;
hydroxylová skupina serínu;
fenolová skupina tyrozínu;
tiolová skupina cysteínu;
imidazolové jadro histidínu;
indolové jadro tryptofánu.
![Page 38: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/38.jpg)
Okrem terciárnej štruktúry majú niektoré enzýmy aj tzv. kvartérnu štruktúru. Táto štruktúra sa vyznačuje tým, že enzýmová molekula pozostáva z viacerých navzájom spojených polypeptidových podjednotiek, pričom katalytická aktivita enzýmu spravidla sa prejavuje iba v tomto usporiadaní (dimérna štruktúra katalázy, kvartérna štruktúra laktátdehydrogenázy, atď.)
![Page 39: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/39.jpg)
Ľudská dihydrofolátreduktáza v komplexe s kyselinou listovou
Dihydrofolátreduktáza je enzým, ktorý redukuje kyselinu dihydrolistovú na kyselinu tetrahydrolistovú za použitia NADPH ako donora elektrónov (de novo syntéza purínova niektorých aminokyselín).
![Page 40: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/40.jpg)
Okrem aktívneho miesta na molekule enzýmu často rozoznávame tzv. väzbové miesto enzýmu. Je to sekvencia aminokyselín blízko aktívneho miesta, kde sa viaže substrát, avšak tu nedochádza k jeho premene na produkt. Zabezpečuje správnu orientáciu substrátu za účelom jeho väzby na aktívne centrum.
Ďalšie funkčné skupiny bielkovinovej molekuly enzýmu sú dôležité pre pôsobenie enzýmu tým, že udržujú priestorovú štruktúru enzýmu, a tým aj aktívneho miesta enzýmu.
![Page 41: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/41.jpg)
Predĺžené väzbové miesto trypsínu
![Page 42: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/42.jpg)
Väzba substrátu na aktívne miesto enzýmu
- staršia teória väzby substrátu na aktívne miesto enzýmu ju vysvetľovala analógiou princípu zámku a kľúča. Podľa tejto teórie by aktívne miesto bolo plasticky vytvárané ako presný odliatok (negatív) príslušného substrátu. (E. Fischer).
- novšia teória predpokladá, že aktívne miesto enzýmu je menej presným negatívom substrátu, je však ohybné
![Page 43: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/43.jpg)
(flexibilné) takže pri vzájomnej väzbe so substrátom sa jeho tvaru prispôsobí. Táto teória sa nazýva teória indukovaného prispôsobenia (Koshland, 1958).
![Page 44: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/44.jpg)
Charakterizácia enzýmov podľa štruktúry molekluly
V prípade väčšiny enzýmov je celá molekula včítane aktívneho miesta bielkovinovej povahy. Takéto enzýmy nazývame apoenzýmy (predovšetkým hydrolázy). Iné enzýmy majú vo svojej molekule pevne viazaný atóm kovu, a preto ich nazývame metaloenzýmy, napr.
![Page 45: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/45.jpg)
Zn v karboxypeptidáze.
Na katalytickom pôsobení mnohých enzýmov sa zúčastňujú tzv. kofaktory. Je to nebielkovinová zložka, ktorá obvykle preberá od substrátu niektoré atómy alebo skupiny atómov a v nasledujúcej reakcii ich odovzdáva inému substrátu alebo kofaktoru. Ak je kofaktor pevne viazaný na bielkovinovú zložku enzýmu nazývame ho prostetická skupina, napr.
![Page 46: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/46.jpg)
flavínmononukleotid (FMN) a flavínadeníndinukleotid (FAD) u oxidoreduktáz, pyridoxalfosfát u aminotransferáz).
Ak sú kofaktory viazané na bielkovinovú časť enzýmu len slabo, môžu od nej disociovať. Takéto kofaktory nazývame koenzýmy. Bielkovinová zložka (apoenzým) má v tomto prípade dve väzbové miesta: na jedno sa viaže koenzým a na druhé miesto sa viaže substrát (komplex sa
![Page 47: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/47.jpg)
nazýva holoenzým)
(napr. dehydrogenázy a koenzým nikotínamidadeníndinukleotid (NAD)).
Enzýmy, ktoré katalyzujú v bunke za sebou nasledujúce metabolické reakcie sú často usporiadane do tzv. multienzýmových komplexov. Jednotlivé zložky v týchto komplexoch sú usporiadané tak , aby priebeh reakcií bol optimálny (pyruvátdehydrogenáza).
![Page 48: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/48.jpg)
SÚHRN
apoenzým – iba bielkovinová molekula
holoenzým – bielkovinová časť molekuly spolu s nebielkovinovou zložkou (koenzým, resp. prostetická skupina
![Page 49: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/49.jpg)
![Page 50: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/50.jpg)
Princíp pôsobenia enzýmov
Princíp pôsobenia enzýmov spočíva v znižovaní voľnej energie reakcie, ktorú enzým katalyzuje (viď nasledujúci obrázok). Bez prítomnosti enzýmu má reakcia „vysokú“ energetickú bariéru pre uskutočnenie reakcie, zatiaľ čo v prítomnosti enzýmu sa táto aktivačná energia znižuje a reakcia sa tým urýchľuje:
![Page 51: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/51.jpg)
![Page 52: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/52.jpg)
Klasifikácia a nomenklatúra enzýmov
V bunkách cicavcov je prítomných okolo 8000 až 10000 rôznych enzýmov, ktoré katalyzujú rôzne reakcie. V mikrobiálnych bunkách ich je prítomných cca 3000. Vyvstala teda potreba zaviesť vhodný systém do rozdelenia a názvoslovia týchto biokatalyzátorov. Na začiatku objavovania rôznych enzýmov autori ich začali pomenovávať podľa vlastného prístupu (ureáza, pepsín, trypsín, atď.).
![Page 53: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/53.jpg)
Takéto názvy sa označujú ako triviálne. V r. 1978 došlo medzi vedcami k zhode tvorby nasledujúceho systematického spôsobu názvoslovia enzýmov:
názov substrátu + reakcia + áza.
Príklady tvorby názvoslovia enzýmov:
laktátdehydrogenáza;
alanínaminotransferáza:
![Page 54: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/54.jpg)
Laktátdehydrogenázová reakcia
COOH COOH
| NAD+ |
H —C — OH C = O
| |
CH3 NADH CH3
+ H+
laktát pyruvát
![Page 55: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/55.jpg)
Alanínaminotransferázová reakcia COOH COOH COOH COOH
| | | |
H—C—NH2 + C=O C=O + HC—NH2
| | | |
CH3 CH2 PLP CH3 CH2
| |
Ala CH2 pyruvát CH2
| |
COOH COOH
2-oxoglutarát Glu
![Page 56: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/56.jpg)
Základné skupiny enzýmov
Podľa typu katalyzovanej reakcie rozdeľujeme enzýmy do šiestich základných skupín:
EC 1. Oxidoreduktázy (katalýza oxidoredukčných reakcií, napr. dehydrogenázy, oxidázy, oxygenázy);
EC 2. Transferázy (transfer skupín z jednej molekuly na druhú, napr. metylovú-, acylovú-, dusík-obsahujúcu skupinu, fosfor-obsahujúcu skupinu, a iné);
![Page 57: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/57.jpg)
EC 3. Hydrolázy (štiepenie kovalentných väzieb v prítomnosti molekuly vody ako druhého substrátu: esterázy, fosfatázy, gôykozidázy, proteázy);
EC 4. Lyázy (štiepenie alebo tvorba väzieb bez oxidatívneho alebo hydrolytického stupňa: karboxylázy, dekarboxylázy);
EC 5. Izomerázy (katalýza zmien v rámci jednej molekuly: epimerázy, mutázy);
EC 6. Ligázy (=syntetázy) (spájajú dve molekuly za hydrolytického štiepenia energeticky bohatej väzby).
![Page 58: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/58.jpg)
V rámci jednotlivých skupín potom ďalej rozdeľujeme enzýmy do podskupín a podpodskupín, napr. peptidové hydrolázy.
Veľká skupina enzýmov, ktorá sa vyznačuje tým, že štiepi peptidové väzby oligopeptidov a proteínov. Podľa tohto kritéria sa rozdeľuje na dve podskupiny exopeptidázy (EC 3.4.11-17) a endopeptidázy (EC 3.4.21-24).
![Page 59: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/59.jpg)
Exopeptidázy odštiepujú aminokyseliny z N-konca oligopeptidu (aminopeptidázy) alebo z C-konca oligopeptidu (karboxypeptidázy).
Endopeptidázy pôsobia na peptidové väzby vo vnútri proteínového reťazca, pričom vznikajú kratšie polypeptidové reťazce.
Príklady systematického začlenenia enzýmu:
![Page 60: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/60.jpg)
Chymotrypsín (EC 3.4.21.1): 3. Hlavná skupina: hydroláza 4. Podskupina: proteáza 21. Podpodskupina: serínová proteináza 1. Špecificita Tyr, Phe, Trp.
Trypsín (EC 3.4.21.4): 3. Hlavná skupina: hydroláza 4. Podskupina: proteáza 21. Podpodskupina: serínová proteináza 4. Špecificita: Arg, Lys.
![Page 61: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/61.jpg)
Laktátdehydrogenáza (EC 1.1.1.27):1.Hlavná skupina: oxidoreduktáza1.Podskupina: A-CH-OH donor1.Podpodskupina:NAD+ akceptor1. Pozícia: 27
Alanínaminotransferáza (EC 2.6.1.2.):
2. Hlavná skupina: transferázy6. Podskupina: prenos dusík-obsahujúcej skupiny1. Podpodskupina: prenos aminoskupiny2. Pozícia: 2
![Page 62: Úvod do biochémie](https://reader035.vdocuments.site/reader035/viewer/2022062314/5681378a550346895d9f2532/html5/thumbnails/62.jpg)
Ďakujem za pozornosť