![Page 1: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/1.jpg)
TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA
BIOTEHNOLOĢIJĀ
Transgēni, cilmes šūnas, nokauti un kloni
![Page 2: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/2.jpg)
1.Agrīnā embrioģenēze un cilmes šūnas
2.Vienkāršie transgēni
3.Gēnu nokauti
4.Dzīvnieku kloni
5.Pieaugušās cilmes šūnas un audu inženierija
JAUTĀJUMI
![Page 3: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/3.jpg)
Transgēnie dzīvnieki tiek iegūti, izmantojot trīs metodes:
1.Gēnu mikroinjekcija apaugļotas olšūnas pronukleusā,
2.embrionālo cilmes šūnu injekcija blastocistā,
3.apstrāde ar retrovīrusiem. http://www.ag.uiuc.edu/~vista/html_pubs/irspsm91/transfor.html
Transgēnu dzīvnieku iegūšana
![Page 4: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/4.jpg)
Transgēnu dzīvnieku iegūšana
![Page 5: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/5.jpg)
Transgēnu dzīvnieku iegūšana
Pirmo metodi plaši izmanto transgēnu peļu iegūšanai. Pēc mikroinjekcijas no peles izņem nesen apaugļotus vienšūnas embrijus. šim nolūkam izmanto mikromanipulatorus un īpaši aprīkotu mikroskopu. Ar speciālu pipeti un vakuma palīdzību embriju fiksē, un tās pronukleusā ar kapilāru adatu ievada klonējamo DNS. Pēc tam embrijus pārnes aizvietotājmātēs, kuras tos iznēsā. 1 – 4 % no injicētajiem embrijiem dod transgēnus pēcnācējus.
![Page 6: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/6.jpg)
bartleby.com/
107/5.html
Olšūnas ietver apvalki: vitelīna membrāna (zona pellucida zīdītājdzīvnie-kiem) un folikulāro šūnu slānis (corona radiata zīdītājdzīvnie-kiem).
Zigotas veidošanās
![Page 7: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/7.jpg)
Agrīnā embrioģenēze
![Page 8: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/8.jpg)
Agrīnā embrioģenēze
Oocīts > Zigota > Blastomers/Pāršūnu stadijas > Morula > Blastocists > Gastrula > Embrijs
![Page 9: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/9.jpg)
Transgēnu dzīvnieku iegūšana
![Page 10: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/10.jpg)
Otrā metode. No blastocista (dažas dienas pēc apaugļošanas) iegūst embrionālās cilmes (EC) šūnas. Tās var audzēt neierobežoti ilgi laboratorijā un tās nezaudē spēju augt un diferencēties par jebkuru dzīvnieka audu tipu, veidot veselu jaunu dzīvnieku. EC šūnas in vitro transformē ar svešajiem gēniem un ar mikroinjekciju ievada citā blastocistā. Aizstājējmātes iznēsā dzīvniekus, kurus veido divu dažādu tpu šūnas, transgēnās un parastās. Ja transgēnās EC šūnas ir veidojušas dzīvnieku spermatozoīdu vai olšūnu priekštečus – šadu dzīvnieku pēcteči visi būs transgēni.
Transgēnu dzīvnieku iegūšana
![Page 11: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/11.jpg)
Cilmes šūnas
Cilmes šūnas ir relatīvi vienkāršas šūnas, kuras spēj ātri augt, neierobežoti ilgi dalīties šūnu kultūrā un diferencēties par specializētām šūnām.
Izšķir:
embrionālās cilmes šūnas
pieaugušās (somātiskās) cilmes šūnas
![Page 12: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/12.jpg)
Cilmes šūnu diferencēšanās potenciāls:
totipotentas (zigota);
pluripotentas; (embrionālās);
multipotentas (pieaugušās).
![Page 13: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/13.jpg)
Embrionālās cilmes šūnas
Priekšrocības:
vieglāk izmantot; neierobežoti ilgi aug kultūrā; nerada imūno atbildi.
Trūkumi:
teratomas (?);ētiskas problēmas.
![Page 14: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/14.jpg)
EC ŠŪNAS
![Page 15: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/15.jpg)
EC ŠŪNAS
![Page 16: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/16.jpg)
Transgēnu dzīvnieku iegūšana
![Page 17: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/17.jpg)
ES ŠŪNAS
![Page 18: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/18.jpg)
Trešā metode – ar retrovīrusu palīdzību
![Page 19: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/19.jpg)
Vienkāršie transgēni
Nejauša integrācija
Tandemu un polimeru veidošanās
Regulēšanas problēmas
Apklusināšana / delēcijas / metilēšana
![Page 20: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/20.jpg)
Vienkāršie transgēni
Transgēnu identificēšana un integrācijas vietas lokalizēšana:
fenotips
Southern analīze
PCR
FISH
![Page 21: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/21.jpg)
Vienkāršie transgēni
Pārnesto gēnu regulēšanas problēmas:
inducējami promoteri
enhanseru lokalizācija
izolatoru -MAR domēnu loma
lokusa (pozīcijas) efekts
lokalizācijas sekvences
![Page 22: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/22.jpg)
Transgēna ekspresiju kavē:
(1) cDNS, nevis hromosomālās DNS klonēšana;
(2) integrācija lielā kopiju skaitā; (3) bagātas sekvences (dzīvniekiem
neraksturīgas); (4) integrācija vāji ekspresējamā rajonā-
“pozīcijas efekts”.
![Page 23: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/23.jpg)
Vienkāršie transgēni
Pārnesto gēnu apklusināšana:
delēcijas (Southern analīze)
metilēšana
5-meC atlikums 5’-CCGG-3’ secībās, pierādīšana ar genoma un ķīmisko sekvenēšanu (DMS un tiosulfāta apstrādes jūtība)
![Page 24: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/24.jpg)
Izolatori = LCR secības (locus control regions)
Gēnu grupas tiek nodalītas no pārējās hromosomas ar specifiskām izolatoru DNS secībām.
Izolatorus veido vairāki elementi: a) sailenseri, kas bloķē integrētā transgēna tuvumā esošo enhanseru darbību;b) hromatīna atšķetinātāji, kas inducē histonu deacetilēšanu, ko pavada lokāla histonu un DNS demitelēšana;c) AT- bagāti matriksa saistības rajoni (MAR, matrix-attached regions).
![Page 25: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/25.jpg)
Pārnesto gēnu regulēšanas problēmas:
![Page 26: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/26.jpg)
TRANSGĒNIE DZĪVNIEKI
Nozīmīgākie procesi:
attīstības bioloģija; no farming uz pharming ; klonēšana;akvakultūra;
Izmantojamie organismi un produkti:
visbiežāk zivis;
govis un jaunus proteīna veidus saturošs piens; perspektīvā: dzīvnieki ar iznīcinātu prionu proteīnu gēnu.
Mērķi: ražošanas efektivitāte; funkcionāla (terapeitiska) pārtika, pārtikas drošība.
![Page 27: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/27.jpg)
Perspektīvie preparāti
Pielietojums
AAT Alfa-1-antitripsīns, iedzimts deficīts izraisa emfizēmu.
tPA Audu plazminogēna aktivators, asins sarecēšanas kontrole.
Faktors VIII Asins recēšanas faktors, hemofīlijas ārstēšana. Hemoglobīns Asins olbaltumviela asins pārliešanas preparātos. Laktoferīns Bērnu barības piedeva.
CFTR Cistiskās fibrozes transmembrānu vadītspējas regulators, CF ārstēšana.
Cilvēka C proteīns
Antikoagulants, trombu šķīdināšna.
http://www.nal.usda.gov/bic/Education_res/iastate.info/bio10.html
“FARMING” VIETĀ “PHARMING”
![Page 28: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/28.jpg)
Preparāts Dzīvnieks Peļņa/Dzīvnieks/ gadā (USD)
AAT aita 15,000 tPA kaza 75,000 Faktors VIII aita 37,000 Faktors IX aita 20,000 Hemoglobīns cūka 3,000 Laktoferīns govs 20,000 CFTR aita 75,000 Cilvēka C proteīns
cūka 1,000,000
“FARMING” VIETĀ “PHARMING”
![Page 29: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/29.jpg)
Trusis Cūka Aita Kaza GovsGrūtniecības laiks, mēneši 1 4 5 5 9
Dzimumbrieduma sasniegšanas laiks, mēneši 5 6 8 8 15
Laiks no transgēna indukcijas līdz pirmajai dabiskajai laktācijai, mēneši
7 16 18 18 33
Pēcnācēju skaits 8 10 1–2 1–2 1Piena produkcija, kg/ gadā 4–5
a 300
b 500 800 8000
Neattīrīts rekombinantais proteīns, kg/ mātīte x gads
0,02 1,50 2,50 4,00 40,00
Vidēji no 2 - 3 laktācijām gadā
Vidēji no 2 laktācijām gadā
GM DZĪVNIEKU PIENĀ SINTEZĒTIE PROTEĪNI
![Page 30: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/30.jpg)
Pelēm intraperitoneāli injicē oksitocīnu (līdz 5 IU). Pēc tam, ar precīzi regulējama vakuma pievadīšanu piena dziedzeriem, iespējams iegūt līdz 1 ml piena. Izmantojot līdzīgu metodi, no trušu mātēm laktācijas periodā iespējams iegūt līdz 100 ml piena dienā.
Līdzīgus daudzumus piena iespējams iegūt arī no izolētiem piena dziedzeriem.
PEĻU SLAUKŠANA
![Page 31: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/31.jpg)
PIRMAIS TRANSGĒNAIS DZĪVNIEKS
![Page 32: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/32.jpg)
Cūkas, kas siekalās ekspresē baktēriju enzīmu fitāzi izdala vidē ap 75% mazāk fosfātu nekā parastās cūku šķirnes, tādejādi ievērojami samazinot lopkopības radīto piesārņojumu.
Golovan SP, Meidinger RG, Ajakaiye A, Cottrill M, Wiederkehr MZ, Barney DJ, Plante C, Pollard JW, Fan MZ, Hayes MA, Laursen J, Hjorth JP,Hacker RR, Phillips JP, Forsberg CW. Pigs expressing salivary phytase produce low phosphorus manure.
Nat Biotechnol 2001, 19: 741–745.
![Page 33: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/33.jpg)
Fitāts – inozitolheksafosfāts;
Viena no galvenajām fosfora uzkrāšanas formām augos, īpaši kviešos. Stiprs helatējošs savienojums, saista divalentos katjonus, piem., Ca2+.Tiek noārdīts atgremotāj dzīvnieku
kuņģī, citu dzīvnieku gremošanas traktā – nē. Baktērijas, noārdot fitātu fermu atkritumos, piesārņo notekūdeņus ar fosforu.
![Page 34: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/34.jpg)
Cūkas, kas ekspresē spinātu enzīmu desaturāzi uzkrāj vairāk nepiesātinātu taukskābju, tādejādi paaugstinot gaļas kvalitāti.
Saeki K, Matsumoto K, Kinoshita M, Suzuki I, Tasaka Y, Kano K, Taguchi Y, Mikami K, Hirabayashi M, Kashiwazaki N, Hosoi Y, Murata N, Iritani A. Functional expression of a Delta12 fatty acid desaturase gene fromspinach in transgenic pigs. Proc Natl Acad Sci USA 2004, 101: 6361–6366.
![Page 35: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/35.jpg)
Paredzams, ka kazas un govis, kas pienā ekspresēs tādus baktērijas nonāvējošus proteīnus kā cilvēka lizocīmu, laktoferīnu un lizostafīnu būs mazāk jūtīgas pret mastītu. To piens būs izturīgāks pret bojāšanos baktēriju iedarbībā un to varēs lietot cilvēki, kas slimo ar bakteriālām infekcijām. Kerr DE, Plaut K, Bramley AJ, Williamson CM, Lax AJ, Moore K, Wells KD, Wall RJ.Lysostaphin expression in mammary glands confers protection against staphylococcal infection in transgenic mice. Nat Biotechnol 2001, 19: 66–70.
Murray J, Reh W, Anderson G, Maga E. Changing the composition of milk to improve human health. In: Transgenic Animal Research, Conference IV, Tahoe City California, 2003, p 32.
![Page 36: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/36.jpg)
Transgēnas vistas
Vistas aug ātrāk nekā aitas un tās var turēt lielā skaitā salīdzinoši mazās platībās. Vistas olas baltums satur vairākus gramus proteīna. Līdz šim izmantotas divas metodes, lai iegūtu vistas, kas nes un ekspresē svešus gēnus.
1 ) Embrijus inficē ar vīrusa nesēju, kas satur terapijā izmantojama cilvēka proteīna gēnu un vistas gēna (piem., lizocīma) promotera secības, kas nodrošina proteīna uzkrāšanu olas baltumā.
2) Ar cilvēka gēnu un atbilstošiem promoteriem transformē gaiļu spermatozoīdus.
Orientējoši dati rāda, ka vistas var producēt līdz 0,1 gramam cilvēka proteīna katrā izdētajā olā
![Page 37: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/37.jpg)
TRANSGĒNI DZIVNIEKI PĀRTIKAI UN SKAISTUMAM
Aqua Bounty Technologies, Bostonas priekšpilsēta, 2003. g. oktobrī pieprasījums FDA;
In September 2010, an FDA advisory panel indicated that the fish is "highly unlikely to cause any significant effects on the environment" and that it is "as safe as food from conventional
Atlantic salmon"
Ātri augošs, lēts, “barojošs un videi draudzīgs” "AquAdvantage" lasis
![Page 38: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/38.jpg)
Sārti fluorescējošas zebru zivtiņas: ir vai nav pārtika ?
TRANSGĒNI DZIVNIEKI PĀRTIKAI UN SKAISTUMAM
![Page 39: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/39.jpg)
TRANSGĒNI DZIVNIEKI PĀRTIKAI UN SKAISTUMAM
![Page 40: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/40.jpg)
GĒNU NOKAUTI
Gēnu nokauts – organisma modifikācija, kas ar mērķētu delēciju vai inserciju palīdzību inaktivē specifisku gēnu.
Gēnu nok-ins – organisma modifikācija, kas ar mērķētu inserciju novieto funkcionējošu gēnu lokusā, kur atrodas tā paša gēna nefunkcionējoša kopija.
![Page 41: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/41.jpg)
NOKAUTI
![Page 42: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/42.jpg)
NOKAUTI
![Page 43: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/43.jpg)
NOKAUTI
![Page 44: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/44.jpg)
CRE - LOX SISTĒMA NOKAUTOS
![Page 45: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/45.jpg)
CRE - LOX SISTĒMA NOKAUTOS
![Page 46: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/46.jpg)
CRE - LOX SISTĒMA NOKAUTOS
![Page 47: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/47.jpg)
ESTROGĒNU-INDUCĒJAMI NOKAUTI
![Page 48: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/48.jpg)
TET-INDUCĒJAMI NOKAUTI
![Page 49: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/49.jpg)
ĢENĒTISKAIS FONS UN NOKAUTU FENOTIPS
![Page 50: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/50.jpg)
KLONĒŠANAOrganismu vai šūnu kopiju savairošana veģetatīvā (bezdzimuma) ceļā
Reproduktīvā klonēšanaReproduktīvās klonēšanas mērķis ir radīt dzīvnieku, kuram ir tāda pati DNS kā kādam citam dzīvniekam. To panāk pārnesot somātiskās šūnas kodolu uz olšūnu, kuras pašas kodols ir iznīcināts.
Terapeitiskā klonēšanaTerapeitiskās klonēšanas mērķis ir radīt slimas personas audu vai orgānu veselu kopiju transplantācijas nolūkam.
![Page 51: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/51.jpg)
KLONĒŠANA
Koloniju veido 108 - 109 šūnu
![Page 52: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/52.jpg)
KLONĒŠANA
![Page 53: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/53.jpg)
DZĪVNIEKU KLONĒŠANA
![Page 54: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/54.jpg)
1997. gada 27. februārī “Nature” publicē rakstu par Dolliju – Finn Dorset šķirnes aitu, kas iegūta, sapludinot 6 gadus vecas aitas tesmeņa šūnas ar bezkodola Skotu melngalvainās aitas oocītu.
DZĪVNIEKU KLONĒŠANA
![Page 55: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/55.jpg)
Dollijas klonēšanu firmas PPL Therapeutics Roslin laboratorijās vadīja skotu zinātnieks Jans Vilmuts (Ian Wilmut)
DZĪVNIEKU KLONĒŠANA
![Page 56: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/56.jpg)
Ian Wilmut un Keith Campbell ar līdzstrādniekiem Roslin Institūtā un Edinburgas biotehnoloģijas firmā PPL therapeutics izmantoja modificētu kodola pārneses metodi, iegūstot dzīvotspējīgu aitu no kodola materiāla, kas bija ņemts no 6 gadus vecas grūsnas aitas tesmeņa šūnas. Olšūnas ar nomainītiem kodoliem uzsāka dalīties un veidoja 29 daudzšūnu embrijus, kurus pārnesa 13 aizvietotājmātēs. Pēc 148 dienām piedzima viena aita, kuru Roslina institūta darbinieki nosauca par Dolliju – par godu savai iemīļotajai kantrī dziedātājai Dolly Parton.
http://www.biochem.arizona.edu/classes/bioc471/pages/Lecture20/Lecture20-text.pdf
![Page 57: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/57.jpg)
DZĪVNIEKU KLONĒŠANA
![Page 58: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/58.jpg)
OLŠŪNAS KODOLA AIZVĀKŠANA
DZĪVNIEKU KLONĒŠANA
![Page 59: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/59.jpg)
Dollija ar tēvu un bērniem
DZĪVNIEKU KLONĒŠANA
![Page 60: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/60.jpg)
1997. gada 7. augustā tika ziņots par pirmā no embrionā-liem fibroblas-tiem klonēta Holšteinas šķirnes teļa iegūšanu.Teļš vārdā “Gēns” tika klonēts firmas Animal
Breeding Systems Global laboratorijās Viskonsinā, ASV
DZĪVNIEKU KLONĒŠANA
![Page 61: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/61.jpg)
AP, 24.01.2000, No aizmugurē stāvošā buļla auss klonētie teļi, Japāna
DZĪVNIEKU KLONĒŠANA
![Page 62: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/62.jpg)
AP, 02.05.2000, Advanced Cell Technologies, Austrālija
DZĪVNIEKU KLONĒŠANA
![Page 63: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/63.jpg)
![Page 64: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/64.jpg)
KLONĒŠANAS ZOOTEHNIKA :
Dzīvnieku iegūšanas efektivitāte
![Page 65: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/65.jpg)
KLONĒŠANAS ZOOTEHNIKA :
Dzīvnieku iegūšanas efektivitāte
![Page 66: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/66.jpg)
KLONĒŠANAS ZOOTEHNIKA :
Dzīvnieku iegūšanas efektivitāte
![Page 67: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/67.jpg)
KLONĒŠANAS ZOOTEHNIKA :
Dzīvnieku iegūšanas efektivitāte
![Page 68: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/68.jpg)
TERAPEITISKĀ KLONĒŠANA, IZMANTOJOT PIEAUGUŠĀS
(SOMĀTISKĀS) CILMES ŠŪNAS UN AUDU INŽENIERIJU
![Page 69: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/69.jpg)
Pieaugušās (somātiskās) cilmes šūnas:
izplatītākais avots – kaula smadzenes (bet arī āda, zarnu epitēlijs, zobu pulpa, aknas utt.)
![Page 70: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/70.jpg)
Par pieaugušu cilmes šūnu avotu var kalpot arī citi audi un orgāni, piem., āda
Dr. J.Ancāns, LU BF; oriģināla ādas cilmes šūnu izdalīšanas metode
![Page 71: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/71.jpg)
Audu inženierijaapvieno terapeitisko klonēšanu un bioinženieriju, lai radītu bioloģiskas aizstājējstruktūras, kuras atjaunotu, saglabātu vai uzlabotu audu funkcijas.
www.innovitaresearch.org/ news/03122401.ht
![Page 72: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/72.jpg)
Audu inženierija – varianti.
In vitro
![Page 73: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/73.jpg)
Audu inženierija – varianti.
In vivo
![Page 74: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/74.jpg)
Audu inženierija - shēma
![Page 75: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/75.jpg)
Audu inženierija – piemēri
![Page 76: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/76.jpg)
Audu inženierija – piemēri
![Page 77: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/77.jpg)
![Page 78: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/78.jpg)
Audu inženierija – piemēri
![Page 79: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/79.jpg)
Audu inženierija – piemēri
![Page 80: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/80.jpg)
Audu inženierija – piemēri
![Page 81: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/81.jpg)
Experimental conversion of liver to pancreas.
Horb ME, Shen CN, Tosh D, Slack JM.Curr Biol. 2003 Jan 21;13(2):105-15.
We show that a modified form of Pdx1, carrying the VP16 transcriptional activation domain, can cause conversion of liver to pancreas, both in vivo and in vitro.
![Page 82: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/82.jpg)
![Page 83: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/83.jpg)
![Page 84: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/84.jpg)
LU Biotehnoloģijas inovāciju centrs, Kleisti
Divu ēku rekonstrukcija ar “Phare” projekta atbalstu terapeitiskās klonēšanas un audu inženierijas pētījumu vajadzībām
![Page 85: TRANSGĒNU DZĪVNIEKU IEGŪŠANA UN IZMANTOŠANA BIOTEHNOLOĢIJĀ](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062305/56814f39550346895dbcd99d/html5/thumbnails/85.jpg)
P.Stradiņa KUS – šūnu transplantācijas laboratorija, VM atbalstīts projekts