Download - Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf
![Page 1: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/1.jpg)
Teknologi Fermentasi
Marlia Singgih WibowoSchool of Pharmacy
Insitut Teknologi Bandung
![Page 2: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/2.jpg)
Pendahuluan
• Istilah Fermentasi• asal kata : “fervere” berarti mendidih• Penggunaan dalam bidang mikrobiologi
![Page 3: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/3.jpg)
Proses umum fermentasi
Fermentasi
Pemisahan
Penghancuran sel
Isolasi & purifikasi
Formulasi
Raw Material
Sterilisasi
Sel mikroba
Penyiapan inokulum
By product
Pengolahan limbah
![Page 4: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/4.jpg)
Parameter yang menentukan
• Mikroorganisme• Substrat• Produk• Kondisi fermentasi• Bioreaktor• Tahap Isolasi dan purifikasi• Pengolahan limbah
![Page 5: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/5.jpg)
Mikroorganisme
•Fisiologi
•Morfologi
•Pertumbuhan
•Karakteristik pertumbuhan
•Kebutuhan lingkungan
•Pola produksi metabolit
•Stabilitas genetik
![Page 6: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/6.jpg)
Substrat
• Komposisi• Sifat fisika dan kimia• Proses sterilisasi• Konversi• Rancangan formulasi media• Limbah post-fermentation process
![Page 7: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/7.jpg)
Produk
• Intrasel, ekstrasel• Proses panen• Perhitungan hasil• Sensitivitas terhadap degradasi• By-product
![Page 8: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/8.jpg)
Kondisi fermentasi•Lingkungan fisik
•Lingkungan kimia
•DO2, pCO2
•Mass transfer
•Kadar nutrisi
•Karakteristik mixing
•Aerasi dan agitasi
![Page 9: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/9.jpg)
Bioreaktor
• Jenis bioreaktor• Komponen instrumen• Cara Sterilisasi• Parameter proses
![Page 10: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/10.jpg)
Tahap Isolasi dan purifikasi
Proses aseptik
Pemisahan, fraksinasi, isolasi
Purifikasi
![Page 11: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/11.jpg)
Pengolahan limbah
• Jenis limbah• Proses pengolahan• Parameter keamanan lingkungan
![Page 12: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/12.jpg)
Jenis Fermentasi
• Fermentasi padat (Solid Substrate Fermentation)
• Fermentasi cair /bawah permukaan (Sub-merged Fermentation)
![Page 13: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/13.jpg)
Metabolisme• Katabolisme : proses degradasi nutrien menjadi
fragmen-fragmen yang lebih kecil. Proses katabolisme menghasilkan ATP, proton motive force, menurunkan tenaga dan pengambilan nutrisi serta pembentukan rangka karbon dalam jalur metabolisme inti
• Jalur degradasi ini bisa pendek (misalnya pembentukan asetat) atau bisa pula panjang (misalnya pembentukan asam benzoat)
![Page 14: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/14.jpg)
• Amphibolisme : proses pembentukan intermediate (senyawa antara)
• Terjadi pembentukan building blocks (senyawa pembangun), misalnya asam amino, purin, pirimidin, gula-gula fosfat, asam organik, dan metabolit lain
![Page 15: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/15.jpg)
• Anabolisme : biosintesis polimer dari monomer (asam amino, nukleotida dan lipid) dari rangka karbon utama melalui pemanfaatan ATP dan NADPH
• Pertumbuhan sel dengan menggabungkan struktur makromolekul melalui proses polimerisasi monomer-monomer yang dihasilkan dari proses biosintesis, melibatkan berbagai nukleotida fosfat
• Polimer sel a.l. protein, asam nukleat, dinding sel, makanan cadangan, dll.
![Page 16: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/16.jpg)
Tahap Utama Metabolisme
CO2
KH, Lemak, Protein
Katabolisme
Biosintesis
Tumbuh
Kerangka karbon
ADPATP
NADP
NADPH
NTP
NDP
Asam amino, asam nukleat, dll
Protein, lipid, struktur sel
![Page 17: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/17.jpg)
Regulasi metabolisme
• Seluruh kegiatan metabolisme berlangsung sangat cepat dan harus bekerja di dalam sel
• Mikroorganisme memiliki potensi genetik untuk memproduksi lebih dari 1000 enzim
• Enzim ini harus dibentuk dalam jumlah yang tepat dan dalam sistem yang terkoordinasi dengan baik agar sel bekerja secara efisien
• Mikroorganisme dapat dengan cepat mengantisipasi perubahan lingkungan sehingga dapat dengan segera memperbaiki sistem metabolismenya
• Regulasi untuk sistem yang demikian terjadi pada level sintesis enzim atau pada level kerja enzim
![Page 18: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/18.jpg)
Faktor yang mempengaruhi regulasi metabolisme
• Jenis dan jumlah enzim • Jenis dan jumlah substrat• Adanya induktor, aktivator, represor dan
inhibitor• Faktor lingkungan • Faktor genetik
![Page 19: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/19.jpg)
Pemanfaatan mikroorganisme
• Biomassa• Enzim• Metabolit primer• Metabolit sekunder• Biotransformasi• Bioinformatik
![Page 20: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/20.jpg)
Beberapa contoh metabolit sekunder mikroba dan manfaatnya
• Antibiotik : penisilin (Penicillium chrysogenum), sefalosporin (Cephalosporium acremonium),
• Imunosupresan : silosporin (Trichoderma polysoprum)
• Bidang pertanian : growth promoter Zearalonone (Gibberella zeae)
• Enzim : amilase (Aspergillus niger), lipase (Pseudomonas aeruginosa)
• Pigmen : ankaflavin (Monascus purpureus)
![Page 21: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/21.jpg)
Pertumbuhan sel mikroba
• Pertumbuhan sel : bertambahnya jumlah sel atau massa sel
• Growth (pertumbuhan) merupakan hal yang penting dalam fungsi mikroba
• Bakteri membelah diri dalam waktu 20-90 menit
• Ragi : 90-120 menit• Kapang : 4-8 jam
![Page 22: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/22.jpg)
Syarat mikroba tumbuh
• Ada sel hidup• Ada sumber energi• Ada nutrisi dan faktor pertumbuhan• Tidak ada inhibitor atau toksin• Kondisi fisiko-kimia yang mendukung
![Page 23: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/23.jpg)
Kurva pertumbuhan mikroorganisme (sistem batch)
a
b
c
d e
Waktu (t)
Biomasa
(X)
Ket : a: fase lag ; b: fase log ; c:fase stasioner ; d:fase kriptik ; e:fase kematian
µ x = dX/dt
µ =laju pertumbuhan
X=konsentrasi sel
t=waktu
![Page 24: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/24.jpg)
Sistem kultur untuk pertumbuhan dan produksi menggunakan mikroorganisme
• Sistem batch (kultur curah)• Sistem fed-batch (kultur curah umpan)• Sistem continuous (kultur sinambung)
Batch Fed-batch Continuous
![Page 25: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/25.jpg)
Medium pertumbuhan
• Substrat organik dan non-organik• Kebutuhan hidup tergantung pada proses
metabolisme, kebutuhan akan oksigen, suhu, dll
• Menentukan jenis mikroba :– Mikroba aerob, an-aerob, obligat, fakultatif– Mikroba psikrofil, termofil– dll
![Page 26: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/26.jpg)
Kebutuhan mikroorganisme
• Untuk tumbuh, mikroorganisme memerlukan nutrisi
• Medium untuk pertumbuhan mikroorganisme dapat berupa bahan alam (sifatnya kompleks) atau bahan kimia (sifatnya terukur)
![Page 27: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/27.jpg)
Elemen dalam sel mikroorganismeElemen % brt.krng Fungsi fisiologis
C 50 komponen sel organikO 20 komponen sel organik,
Akseptor e- pd respirasiN 14 utk protein, as.nukleat,
Ko-enzimH 8 komponen sel organikP 3 Fosfolipid, as.nukleatS 1 as.amino, proteinK 1 kation dan kofaktor pd
reaksi enzimatisNa 1 kation dan membran
transporCa 0,5 kation dan kofaktorMg 0,5 kation dan kofaktorCl 0,5 anion
![Page 28: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/28.jpg)
Komposisi rata-rata sel mikroba
Mikroba % C % N % Protein % KH %Lipid %As.Nukleat
%Abu
Bakteri 48 12 55 9 7 23 6
Ragi 48 57 40 38 8 8 6
Kapang 48 56 32 49 8 5 6
![Page 29: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/29.jpg)
Komponen Medium untuk mikroorganisme
• Karbon : sebagai sumber energi dan komponen utama biomasaSumber karbon dapat berasal dari : Polisakarida atau monosakarida, contoh : Karbohidrat, glukosa, molase, amilum, malt extract, dll.
• Nitrogen : sebagai sumber pembentukan komponen utama selSumber nitrogen dapat berasal dari : garam ammonium, urea, asam amino, sumber kompleks seperti CSL (Corn Steep Liquor), Yeast Extract, Pepton, dll.
![Page 30: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/30.jpg)
Komponen Medium untuk mikroorganisme
• Mineral : P, K, Na, Mg, S, Ca, dllP sebagai salah satu unsure penting dalam pembentukan asam nukleat (dalam bentuk Fosfat), S sebagai unsure pembentukan beberapa asam amino esensial, Mg sebagai kofaktor dalam proses fosforilasi.
• Unsur-unsur lain : trace elements misalnya : vitamin, EDTA, dll
![Page 31: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/31.jpg)
Komponen Medium untuk mikroorganisme
• Air : komponen utama terbesar dalam medium
• Oksigen : kebutuhan utama mikroba aerob sebagai aksptor electron pada proses respirasi, yang umumnya diperoleh dari komponen air (H2O)
![Page 32: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/32.jpg)
Hubungan antara pertumbuhan sel, penggunaan substrat dan pembentukan produk (metabolit)
• Laju pertumbuhan • Laju pertumbuhan vs konsentrasi nutrisi• Koefisien hasil (yield coefficient)• Nilai metabolit (metabolic quotient)• Persamaan Monod• Persamaan Michaelis-Menten• Pembentukan produk (type I, II dan III)
![Page 33: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/33.jpg)
PRODUKSI ASAM SITRATSECARA FERMENTASI
![Page 34: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/34.jpg)
Pendahuluan
• Asam sitrat merupakan asam organik• Berguna dalam industri makanan, farmasi
dan tambahan dalam makanan ternak• Dapat diproduksi secara kimiawi, atau
secara fermentasi menggunakan mikroorganisme
![Page 35: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/35.jpg)
Sejarah Asam sitrat• Sebelum tahun 1800 asam sitrat diperoleh dari
tumbuhan (buah lemon)• 1893 : ditemukan diproduksi oleh jamur
berfilamen (filamentous fungi)• 1923 : produksi pertama asam sitrat
menggunakan mikroorganisme dengan cara fermentasi pada permukaan (surface culture)
• 1930 : produksi menggunakan fermentor diperoleh sebanyak 5000 ton
• 1979 : produksi menggunakan fermentor mencapai 220.000 ton dari 220 m3
![Page 36: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/36.jpg)
Kegunaan asam sitrat
• Industri makanan : flavouring agent, ekstrak jus buah, perasa permen, es krim,dll
• Industri farmasi : dapar pH, pengawet dalam sediaan farmasi, perasa asam, dll
• Industri kimia : antifoam agent, softener, campuran warna tekstil, campuran deterjen, dll
![Page 37: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/37.jpg)
Mikroba penghasil asam sitrat• Merupakan metabolit primer• Aspergillus niger• Aspergillus wentii• Penicillium luteum, P.citrinum• Mucor piriformis• Citromyces pfefferianus• Candida lipolytica• Trichoderma viridae• Corynebacterium sp.• dll
![Page 38: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/38.jpg)
Biosintesis asam sitrat dalam mikroorganisme
• Asam sitrat (2-hidroksipropana-1,2,3-asam karboksilat) adalah produk metabolisme primer dan dibentuk dalam siklus asam trikarboksilat (TCA cycle)
• Sumber karbon utama adalah glukosa• Enzim dalam jalur EMP terlibat dalam
penguraian glukosa menjadi piruvat• Ketika piruvat mengalami dekarboksilasi
membentuk asetil koA, residu asetat masuk dalam siklus TCA
![Page 39: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/39.jpg)
• Selama proses idiophase, enzim sitrat sintase meningkat 10 kali selama produksi asam sitrat, sedangkan enzim asonitase dan sitrat dehidrogenase berkurang
• Glukosa juga mengalami katabolisme melalui jalur pentosa fosfat. Enzim untuk siklus ini terdapat pada A.niger
![Page 40: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/40.jpg)
Diagram biosintesis asam sitrat
PEP
Piruvat
Asetil coA
Sitrat
IsoSitratSuksinat
Fumarat
Malatoksaloasetat
![Page 41: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/41.jpg)
Fermentasi asam sitrat• Dapat dilakukan menggunakan 2 macam
metode fermentasi : permukaan (surface process) dan bawah permukaan (submerged process)
• Pada tahap tropofase, sebagian dari glukosa digunakan untuk membentuk miselium dan respirasi
• Pada tahap idiofase, sisa glukosa diubah menjadi asam organik, termasuk asam sitrat
• Produksi berkisar antara 40-69% dalam bentuk asam sitrat-1-hidrat (123 g per 100 g sukrosa) atau asam sitrat anhidrat (112 g per 100 g sukrosa)
![Page 42: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/42.jpg)
Medium untuk nutrisi• Sumber karbon : berbagai amilum dapat
digunakan (kentang, hidrolisat amilum, sirup glukosa, sukrosa, molase, dll)
• Penambahan trace elements (Cu, Mn, Mg, Fe, Zn, Mo) dalam skala ppm. Bila berlebih dapat berakibat toksik
• Fe merupakan faktor penentu, jumlahnya tergantung pada sumber karbon yang digunakan. Contoh : bila digunakan sukrosa murni, jumlah optimal Fe adalah 2.0 ppm, sedangkan bila hidrolisat amilum yg digunakan, jumlah optimal Fe adalah 0,2 ppm
![Page 43: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/43.jpg)
• Komponen medium lainnya : sumber nitrogen, fosfat, juga diperlukan
• pH harus diatur < 3.0, untuk menekan pembentukan asam oksalat dan asam glukonat. Selain itu dapat mengurangi kemungkinan terkontaminasi
![Page 44: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/44.jpg)
Proses produksi
• Penyiapan suspensi spora A.niger pada 25 °C, inkubasi selama 10-14 hari
• Inokulum dibuat dengan 15% gula (misalnya dari molase)
• Ditambahkan ion sianida untuk menginduksi pembentukan miselium dalam bentuk pelet dengan ukuran 0,2-0,5 mm
• Setelah 24 jam, pelet dapat digunakan untuk produksi dalam fermentor
![Page 45: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/45.jpg)
Proses dengan metode permukaan (surface process)
• Medium untuk metode ini dapat berupa substrat padat atau cair
• Substrat padat : wheat bran, amilum ubi (sweet potato)
• Setelah disterilisasi, substrat ditaburkan dalam loyang setebal 3-5 cm lalu diinkubasi pada 28 °C
• Pertumbuhan dapat dipercepat dengan penambahan enzim amilase
• Proses fermentasi berlangsung 5-8 hari
![Page 46: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/46.jpg)
• Substrat cair lebih banyak digunakan karena efisien. Spora inokulum sebanyak 2 – 5 x 107
spora/m2
• Komposisi medium : (g/L)– Sukrosa 160 – 200 – NH4NO3 1,6 – 3,2 – CaH2PO4 0,3 – 1,0– MgSO4.7 H20 0,2 – 0,5– ZnSO4 0,01 – 0,02– Ca heksasianoferat 0,4 – 2,0
![Page 47: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/47.jpg)
Kondisi fermentasi
• Suhu inkubasi 30 – 40 °C• Ventilasi penting untuk pertukaran gas
karena produksi asam sitrat akan berkurang bila CO2 di atmosfir meningkat > 10%
• pH diatur supaya asam
![Page 48: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/48.jpg)
Proses dengan metode bawah permukaan (submerged process)
• 80% produksi asam sitrat di dunia menggunakan metode ini
• Waktu fermentasi 8 hari• 3 parameter yang menentukan
keberhasilan proses : kualitas fermentor, struktur miselium, pasokan oksigen
![Page 49: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/49.jpg)
• Fermentor harus terbuat dari bahan yang tahan terhadap asam, misalnya SS (Stainless Steel)
• Bentuk miselium yang ideal adalah bentuk pelet dengan diameter kecil. Bila terjadi filamen dan tidak membentuk klamidospora, asam sitrat yang terbentuk menjadi sedikit
• Rasio jumlah Cu dan Fe mempengaruhi bentuk miselium ini
• Oksigen harus antara 20 – 25% jenuh, dengan laju aerasi 0,2 – 1 vvm
• Tidak perlu dilakukan pengadukan karena viskositasnya tidak tinggi
![Page 50: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/50.jpg)
Perolehan kembali (product recovery)
• Jika asam oksalat terbentuk sebagai produk samping (side product), maka asam oksalat harus diendapkan dengan Ca agar membentuk endapan Ca-oksalat pada suasana asam. Asam sitrat akan tetap tertinggal dalam larutan sebagai mono-kalsium sitrat
• Asam sitrat selanjutnya diendapkan pada pH 7,2 dengan suhu 70 – 90 C
![Page 51: Teknologi Fermentasi utk Farmasi.pdf](https://reader031.vdocuments.site/reader031/viewer/2022013004/563dba48550346aa9aa44317/html5/thumbnails/51.jpg)
• Pemurnian selanjutnya dengan asam sulfat, lalu diendapkan sebagai kalsium sulfat
• Penambahan kabon aktif, atau ion exchange, dan kristalisasi sebagai asam sitrat atau asam sitrat monohidrat pada 36,5 C