PENUNTUN PRAKTIKUM
Ilmu Dasar Keperawatan (IDK II)
Pengenalan Alat & Bahan di Lab MikrobiologiMedia & Morfologi Bakteri dan Jamur
Cara Mengasingkan Bakteri
PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
ORIENTASI
TOPIK :
1. Alat dan Bahan pemeriksaan laboratorium mikrobiologi2. Media perbenihan bakteri
TUJUAN :
1. Mengetahui berbagai macam Alat dan Bahan pemeriksaanlaboratorium mikrobiologi
2. Mengetahui berbagai macam media perbenihan bakteri
PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
I. Alat dan Bahan Untuk Pemeriksaan di Laboratorium Mikrobiologi
1. Tabung a. Peragianb. Perbenihanc. Reaksid. Ulire. Durham
2. Cawan petri
PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
3. Labu / kolfa. Biasab. Erlenmeyer
4. Pipeta. Pasteurb. ukuran biasac. Balon
PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
5. S
arin
gan
Kum
an6.
Gel
as u
kur
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com
7. S
engk
elit
8. S
entir
bun
sen
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com
9. Untuk bakteri anaerob
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com
10. Inkubator biasa 11. Inkubator CO 2
Inkubator : digunakan mengeramkan media yang telah ditanami mikroorganisme dan untuk menyimpan bahan pemeriksaan dimana bakteri terkandung akan mati bila disimpan di dalam lemari es (misal : cairan cerebrospinal)
PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
Untuk melihat objek atau detail yang terlalu kecil oleh mata
Fungsi :- Mengidentifikasi mikroorganisme
- Mengetahui struktur dan morfologi bakteri, badan inklusi, efek sitopatogenik dan lain-lain
- Menghitung jumlah mikroorganisme
12. MIKROSKOP
PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
Media Perbenihan Bakteri
Tujuan :
1. Mengetahui cara membiakkan, mengasingkan dan menyimpan bakteri dalam laboratorium untuk waktu yang lama
2. Mempelajari sifat-sifat pertumbuhan / koloni bakteri3. Mempelajari sifat-sifat biokimia bakteri
Pembiakan dan Pertumbuhan Bakteri
Media pertumbuhan bakteri digunakan untuk :* Isolasi* Transportasi* Persemaian* Diferensiasi bakteri
PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
Berbagai Media perbenihan :
Misal :
+ zat warna untuk indikator aktivitas metabolisme bakteri
+ darah, serum, vitamin untuk bakteri dengan aktivitas tinggi(Medium Diperkaya : Agar Darah )
Perbenihan padat ( agar 1,5 – 2 %); lempeng dan tabung
Untuk menghambat pertumbuhan bakteri secara selektif digunakanMedium Selektif : Salmonella Shigella. PEA, EMB(Eosin MethyllenBlue)
Untuk membedakan beberapa jenis bakteri digunakan Medium Diferensial : ENDO, EMB
PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
Aga
r E
ndo
Agar Salmonella shigella
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com
Aga
r D
arah
Aga
r T
CB
S
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com
Aga
r M
ulle
r Hin
ton
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com
Media selektif: Agar PEA (Phenylethyl Alcohol)
Guna: medium selektif untukmenghambat pertumbuhan bakteriGram negatif
Prinsip: PEA mencegahpertumbuhan bakteri Gram negatifdengan merusak struktur lipid pd membran sel bakteri Gram negatif
Keterangan Gambar:Gambar A (agar PEA) & Gambar B (agar nutrien)+ Bakteri Gram positif- Bakteri Gram negatif
PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
Guna: mengisolasi & membedakan bbrpanggota family Enterobacteriaceae.
Prinsip:- DOC mengandung natrium deoxycholatedan sitrat yg bekerja menghambatpertumbuhan bakteri Gram-positive-Juga mengandung gula laktosa ygmembedakan bakteri enterik yang melakukan atau tidak fermentasi laktosaFermentasi laktosa tampak dari warnamerah yg ditimbulkan (berhubungan dg pH netral)
Reaksi yang tampak pd gambar:.A. Fermentasi laktosa tinggiB. Pertumbuhan bakteri Gram-positive kurangC. Tidak ada fermentasiD. Fermentasi laktosa tinggi
Media diferensial: Agar DO (Deoxycholate & Citrate)
PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
Per
beni
han
sem
isol
id
(aga
r 0,2
–0,
5 %
)
Per
beni
han
tran
spor
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com
Per
beni
han
Cai
r
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com
Persiapan / Pembuatan media
1. Timbangan Kasar Timbangan analitik
Persiapan / pembuatan media biasanya dilakukan di ruang khusus (dapur media)
PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
Otoklaf :
Digunakan untuk sterilisasi perbenihan menggunakan uap panas
(121 0C, 20’)
PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
Hot Air Sterilizer (Oven) :
Digunakan untuk sterilisasi alat-alat gelas dan lainnya yang tahan dengan pemanasan kering (dry Heat)
- 160 0C selama 60’
- 170 0C selama 40’
- 180 0C selama 20’
PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
LEMARI PENDINGIN (REFRIGERATOR)
Alat ini digunakan untuk :
- Menyimpan media steril yangsiap pasti, agar isi dan mutumedia tersebut tidak berubah
- Menyimpan untuk sementarawaktu bahan/spesimen yang belum sempat diperiksa agar tidak mengalami perubahan
- Menyimpan cakram antibiotikayang belum terpakai agar tidakmengalami perubahan
PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
MORFOLOGI KOLONI BAKTERI DAN CARA MENGASINGKAN BAKTERI
Tujuan :
1. Mengetahui jenis-jenis bakteri berdasarkanmorfologi koloninya
2. Mengetahui hal-hal yang perlu diperhatikandalam mempelajari koloni bakteri
3. Mengetahui bahwa sifat-sifat koloni dapatdipakai untuk membantu identifikasi bakteri
PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
Bakteri akan memberikan pertumbuhan koloni yang berbeda pada media perbenihan bila dilihat secara makroskopik. Perbedaan ini disebut karakteristikpertumbuhan , yang selanjutnya akan digunakan sebagaidasar penggolongan taksonomi.
Hal-hal yang perlu diperhatikan dalam mempelajari suatu koloni bakteri , baik pada agar lempeng dan agar tabung :
1. Ukurannya (diameternya)2. Ada atau tidaknya pigmen3. Menonjol atau rata4. Keruh atau bening, suram atau mengkilat5. Permukaan rata (Smooth) atau tidak rata (Rough)6. Pinggiran rata atau tidak7. Menjalar atau tidak8. Konsistensi (Berlendir atau tidak)
PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
1. Koloni S (Smooth) :E. coli, Salmonella, Vibrio, Shigella, Staphylococcus
2. Koloni R (Rough) : Bacillus subtilis
3. Koloni menjalar :Proteus sp.
4. Koloni beranyaman :Bacillus mycoides
5. Koloni berlendir/mukoid :Klebsiella sp.
PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
Kolonism
ooth
Kolonirough
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com
KoloniMenjalar
KoloniBeranyaman
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com
KoloniMukoid
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com
1 2 3 4 5 6 Keterangan :
1. Staphylococcus aureus
2. Staphylococcus citreus
3. Staphylococcus epidermidis
4. Serratia marcescens
5. Chromobacterium violaceum
6. Pseudomonas aeruginosa
KOLONI BERPIGMEN PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
Pseudomonas aeroginosa
Micrococcus luteusSerratia marcescens
Chromobacterium violaceum
PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
Bakteri yang dibiakkan pada agar darah lempeng, perlu diperhatikankeadaan sekeliling koloni apakah terbentuk zona hemolisis atautidak .
1. Zona berwarna hijau atau keruh, disebut hemolisis tip alfa(hemodigesti)
2. Zona jernih tidak berwarna, disebut hemolisis tip beta(hemolisis)
3. Tidak ada zona, disebut hemolisis tip gamma (non hemolisis)
PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com
MIKOLOGI
Ciri – ciri :
a. Dinding sel : glukan , manan dam khitinb. Sel eukariota ; Tidak berklorofil ; Bersifat heterotrofc. Uniseluler : Yeast /ragi / khamir
Multiseluler : mold (kapang)d. Reproduksi : seksual dan aseksuale. Perbenihan : agar Sabouraudf. Pewarnaan :
KOH 10 % ; PAS (Peridic Acid Schiff); LPCBPerak metenamin (gomori) ;
g. Pertumbuhan : Suhu (28 oC – 35 oC) ; pH (4,5 – 6,5)
PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
Morfologi koloni
1. Ragi
� Koloni bulat ≈ bakteri,
cembung, halus dan
licin
� Membentuk koloni
basah, warna putih
kekuninganBiakan candida albicans
pada agar sabouraud
PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
Biakan Aspergillus niger pada agar sabouraud
2. Kapang
� Sel memanjang dan
bercabang
� Koloni : kering,
padat seperti kapas
PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
B. CARA MENGASINGKAN BAKTERI
Untuk mempelajari koloni bakteri dan dapat mengasingkannya dari suatu biakan / bahan pemeriksaan, perlu didapatkan koloni-koloni yang terpisah.
Pemisahan koloni bakteri dapat dilakukan dengan memakai sudip gelas berbentuk L untuk menggoreskan bahan di seluruh permukaan perbenihan atau memakai sengkelit dengan membuat garis-garis sejajar (Penipisan Koch)
Tujuan :Mengetahui cara mengasingkan bakteri dari suatu bahan pemeriksaan / biakan
PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
1
2
Tujuan :Mengetahui cara mengasing-kan bakteri dari suatu bahan pemeriksaan / biakan
CARA MENGASINGKAN BAKTERI(Penipisan KOCH)
PD
F C
reated with deskP
DF
PD
F W
riter - Trial :: http://w
ww
.docudesk.com
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com